CN112315951A - 一种治疗骨关节炎的药物组合物及制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗骨关节炎的丹酚酸A和壳聚糖组合物及制备方法和用途。采用外科手术方法建立兔软骨缺损模型，观察了丹酚酸A和壳聚糖组合物关节腔内注射对兔软骨缺损模型的作用。结果显示，丹酚酸A和壳聚糖组组合物能明显改善软骨缺损模型兔的大体形态，同时病理结果显示，丹酚酸A和壳聚糖组合物能快速修复软骨缺损，表明丹酚酸A和壳聚糖组合物能显著改善骨关节炎的作用。本项发明为丹酚酸A和壳聚糖组合物在制备防治骨关节炎药物中的新用途。

Description

一种治疗骨关节炎的药物组合物及制备方法和用途

技术领域

本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种治疗骨关节炎的丹酚酸A和壳聚糖组合物及制备方法和用途。

背景技术

骨性关节炎是一种慢性退行性关节疾病，其病因复杂，软骨细胞凋亡、细胞外基质降解和炎症因子的产生都可以导致关节发生软骨损伤、骨赘形成、软骨下骨改变、滑膜炎症和关节囊增生等病理改变，以中老年患者多见，并随着疾病的加重，逐渐出现夜间休息痛、关节间隙变窄、关节畸形、关节功能障碍等症状，严重影响患者的日常生活。

目前骨性关节炎的治疗主要包括西医疗法和中医疗法，西医疗法包括口服药物、关节腔治疗和手术治疗三种治疗方式。在口服药物方面，醋氨酚、阿司匹林等非甾体类抗炎药物是治疗早期骨性关节炎的传统药物，其疗效肯定，但易发生肾脏、胃肠道不良反应，且不能延缓骨性关节炎的病情发展。另外，塞来昔布和罗非昔布等COX-2抑制剂，虽可降低胃肠道的不良反应，但也存在心血管不良事件的风险。氨基葡聚糖衍生物、金属蛋白酶抑制剂、硫酸软骨素等这类药物虽利于软骨修复，抑制关节的水肿、滑膜炎和关节软骨破坏，但起效缓慢，需要长期服用。

在关节腔内注射治疗方面，主要采用糖皮质激素、玻璃酸钠注射液、几丁糖注射液、富血小板血浆等。多次接受糖皮质激素注射虽能暂时缓解疼痛症状，但其也会加速关节软骨的退变。玻璃酸钠可抑制软骨降解酶的合成，但不能阻止骨性关节炎病情进展。

关节镜或外科手术治疗方面主要有关节镜手术、人工关节置换术等。关节镜手术。如关节镜冲洗和软骨碎片清除能缓解症状，但严重关节畸形或难以控制疼痛者需要人工关节置换术。

目前，在中医领域，用于治疗骨性关节炎的药物越来越多，虽然现有的中药对骨性关节炎的改善效果显著，有报道丹参注射液对膝关节骨性关节炎患者有效(邓物鲜.丹参注射液关节腔内注射治疗骨性关节炎55例临床观察[J].中医药导报,2006,12(001):47-48,56.；佟方明,李瑞卿,李玲.丹参注射液关节冲洗并透明质酸钠治疗膝关节骨关节炎[J].黑龙江医药科学,2005(04):107-108.)，但丹参注射液成分复杂，不良反应发生率较高(朱敏文,尹桃,王丽.丹参注射液不良反应回顾性研究[J].中国医院药学杂志,2008,28(18):1625-1626.)丹酚酸A是丹参中的酚酸类活性成分之一，现代研究表明，丹酚酸A的抗氧化能力明显优于丹酚酸B(柴媛媛,王芳,李艳丽,等.两种丹酚酸的体外抗氧化活性比较研究[J].时珍国医国药,2012(11):19-21.)，丹酚酸A是丹参中主要的活性物质之一，成分明确，毒副作用少，但丹酚酸A与壳聚糖组合物在骨性关节炎中的应用均未见报道，因此，研发更多的更有效的、且经济简便的治疗药物仍然是十分必要的。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种经济简便、毒副作用少，能快速有效治疗或改善骨关节炎的丹酚酸A和壳聚糖组合物及制备方法和用途。为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种治疗骨关节炎的药物组合物，其由丹酚酸A和壳聚糖制备而成。

所述药物组合物，其由丹酚酸A和壳聚糖按1:1的质量比制备而成。

所述的一种治疗骨关节炎的药物组合物的制备方法，包括如下步骤：将10mg/mL的丹酚酸A溶于1％壳聚糖溶液中，按1：1体积混合，制成注射液。该注射液的使用方法为按0.2mL/次关节腔内注射，一周1次，连续4周。

所述的一种治疗骨关节炎的药物组合物的制备方法，还包括将丹酚酸A和壳聚糖组合物与药学上可接受的载体组成临床可以接受的制剂。

本发明还提供了丹酚酸A和壳聚糖组合物在制备治疗骨关节炎的药物中用途。

骨性关节炎属于传统医学“痹症”、“骨痹”范畴，骨关节炎属本虚标实证，肝肾亏虚是本，淤血麻痹是其标。中药丹参，味苦微辛归心肝经，活血祛瘀、消肿、凉血、安神养血等功效。本发明提供的一种治疗骨关节炎的组合物，以丹酚酸A为主，壳聚糖为基质的组方特征。其中丹酚酸A(SAA)是唇形科鼠尾草植物，为丹参(Salvia miltiorrhiza Bge)中存在的酚酸类化合物，现代研究表明，SAA具有显著的抗炎、抗氧化、保护心肌缺血、抗血栓、保护血管内皮细胞、抗肝纤维化等药理作用。壳聚糖(Chitosan，CTS)是由甲壳素N-脱乙酰基的产物，是一种理想的高分子生物材料，具体机体反应小、天然抗菌性以及具有多孔结构的特点，使其能够适合细胞的内在生长以及骨的传导。壳聚糖可承载软骨细胞生长及促进软骨修复的作用。因此，本发明突破传统中药的给药方式，提出将二者制备成组合物。

此外，兔的关节软骨更接近于人的关节软骨，且兔关节炎模型中的软骨退变情况也更接近于人的软骨退变情况。申请人采用外科手术方法建立兔软骨缺损模型，观察了丹酚酸A和壳聚糖组合物关节腔内注射对兔软骨缺损模型的作用。结果显示，丹酚酸A和壳聚糖组组合物能明显改善软骨缺损模型兔的大体形态，同时病理结果显示，丹酚酸A和壳聚糖组合物能快速修复软骨缺损，表明丹酚酸A和壳聚糖组合物能显著改善骨关节炎的作用，且其作用优于丹参注射液组。

附图说明

图1是各组膝关节大体形态比较图。

图2是各组膝关节软骨修复组织学(ICRS)评分图，注：与模型组比较，**P<0.01，与SAA+CTS组比较，^#P<0.05,^##P<0.01.。

图3是各组软骨组织病理学变化比较图。

具体实施方式

实施例1：

材料：丹酚酸A和壳聚糖组合物、丹酚酸A、壳聚糖、丹参注射液实验动物：普通级雄性新西兰白兔，体重为2.5～3.0kg，均为6～7月龄。

1.实验方法

1.1模型建立和分组给药

实验兔适应性饲养1周后，术前给予布洛芬镇痛，然后用3％戊巴比妥钠静脉麻醉后，并用1～2％异氟烷面罩维持麻醉，术区剃毛消毒，在左右侧膝关节髌骨旁内侧作一纵行切口长约3cm，依次切开皮肤、皮下组织及筋膜，关节囊纵行切开，暴露膝关节面，小心避开主要血管、神经。将髌骨及股四头肌腱翻向外侧，暴露股骨髌面。用直径为3mm的骨科手术电钻，于股骨内髁关节软骨面负重中央处钻一直径为4mm的全层软骨缺损，深度为3mm，以缺损区域渗血为标准。手术区域生理盐水冲洗干净，全层缝合。

术后，按体重随机分成5组，即模型组、壳聚糖(CTS)组、丹酚酸A(SAA)组和联合用药(SAA+CTS)组、丹参注射液组，各组分别每周于关节腔内注射生理盐水0.2mL、1％CTS0.2mL、SAA 0.2mL(10mg/mL)、CTS+SAA组合物(含0.5％CTS+5mg/mL SAA)、丹参注射液(Danshen injection)组，每组兔向关节腔内注射0.2mL 1次，每周1次，连续注射4次。术后10周时行安乐死。

1.2观察指标

1.2.1膝关节大体形态：术后10周，各组兔子安乐死后，切开膝关节，将取出的股骨内髁软骨缺损修复区域标本用生理盐水冲洗干净，仔细观察各组兔膝关节大体形态，并根据ICRS评分标准，见表1，对股骨内髁软骨缺损修复区域的色泽、轮廓、完整性以及关节内有无粘连、增生、肿胀等进行ICRS评分，包括缺损修复程度、边界区域的融合、外观等各4分，共12分，评分越高表明软骨缺损修复越好。

表1 ICRS评分标准

2.结果

2.1各组膝关节大体形态比较

术后10周，模型组膝关节软骨表面的缺损区外形修复不完全，表面不平，股骨内髁关节软骨面不完整，可见软骨下骨暴露，SAA+CTS组膝关节软骨表面缺损区外形基本完全修复，关节软骨表面较光滑，呈乳白色，关节内未见明显粘连，软骨退变程度较轻，股骨内髁关节软骨面恢复较好，而CTS组、SAA组、丹参注射液组兔的膝关节软骨面修复比模型组略好，但关节软骨略有表面不平，效果不及SAA组，见图1。ICRS评分显示，CTS、SAA、CTS+SAA组、丹参注射液组兔的ICRS评分显著高于模型组(P<0.01)，另外，CTS+SAA组ICRS评分亦显著高于SAA组、CTS组和丹参注射液组(P<0.05,P<0.01)，见图2。

2.2各组软骨组织病理学变化比较

术后第10周，模型对照组股骨内髁关节软骨损伤处表现为软骨层广泛丢失或大量纤维化，被修复的组织表面不平整，缺损处由纤维肉芽组织填充，周围组织的细胞形态与正常关节软骨细胞差别较大，软骨细胞排列很不规律，大量细胞消失，过渡层及辐射层细胞非常少，细胞分层不明显，下潮线消失。SAA+CTS组膝关节股骨内髁软骨缺损处由类软骨组织修复，呈修复状态，被修复区域表面光滑，裂隙消失，修复区域的软骨细胞与正常关节软骨细胞相似，排列比较规律，结构清晰，下潮线基本恢复。壳聚糖组和丹参注射液组关节软骨缺损处修复尚未平整，细胞形态与正常关节软骨细胞有区别，细胞数减少，部分有裂隙，排列不规则，下潮线难以观察。SAA组缺损处细胞形态逐渐接近于正常软骨细胞，下潮线逐渐恢复，但修复情况差于SAA+CTS组，见图3。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种治疗骨关节炎的药物组合物，其特征在于其由丹酚酸A和壳聚糖制备而成。

2.如权利要求1所述药物组合物，其特征在于其由丹酚酸A和壳聚糖按1:1的质量比制备而成。

3.如权利要求1所述的一种治疗骨关节炎的药物组合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：将10mg/mL的丹酚酸A溶于1％壳聚糖溶液中，按1：1体积混合，制成注射液。

4.如权利要求1所述的一种治疗骨关节炎的药物组合物的制备方法，其特征在于将丹酚酸A和壳聚糖组合物与药学上可接受的载体组成临床可以接受的制剂。

5.丹酚酸A和壳聚糖组合物在制备治疗骨关节炎的药物中用途。

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