CN112263542A

CN112263542A - 地奈德纳米乳凝胶组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN112263542A
Application number: CN202011117747.7A
Authority: CN
Inventors: 马秋燕; 拉吉卜·萨卡; 吴涛; 林华庆
Original assignee: Bright Future Pharmaceutical Laboratories Ltd
Current assignee: Bright Future Pharmaceutical Laboratories Ltd
Priority date: 2020-10-19
Filing date: 2020-10-19
Publication date: 2021-01-26
Anticipated expiration: 2040-10-19
Also published as: CN112263542B

Abstract

本申请提供了一种地奈德纳米乳凝胶组合物及其制备方法，组合物包括的重量百分比组分有：0.05％～1.0％地奈德；5％～20％油相成分；0.1％～10％乳化剂；0.5％～9％助乳化剂；0.5％～10％润湿剂；0.5％～3％凝胶基质；3％～10％保湿剂；0.001％～0.1％金属离子螯合剂；0.001％～0.2％防腐剂；0.01％～0.5％抗氧化剂；89.388％～90.338％水；提供“水包油”的地奈德纳米乳剂具有良好的稳定性、粘附性和涂展性，能够提高地奈德对皮肤角质层的渗透能力和靶向作用，提高地奈德的透皮吸收，具有强大的渗透能力和适合局部给药的粘度以及较长的药物释放时间，提高了地奈德的治疗效果。

Description

地奈德纳米乳凝胶组合物及其制备方法

技术领域

本申请属于药物制剂技术领域，尤其涉及一种地奈德纳米乳凝胶组合物及其制备方法。

背景技术

皮炎是指由各种内、外部感染或非感染性因素导致的皮肤炎症性疾患的一个泛称，并非一独立疾病，其病因和临床表现复杂多样，且反复发作，临床治疗较为困难。目前大多数观点认为：皮炎泛指皮肤的炎症，如接触性致敏、皮肤感染等，国际疾病分类(ICD)-10在皮炎与湿疹的章节中，包括有接触性皮炎、特应性皮炎、神经性皮炎等20多种疾病。临床上常根据病因、发病部位或其他临床特征将某一特定的皮炎定义为某某皮炎，如接触某物质引起的称为接触性皮炎，内用药物引起的称为药物性皮炎等。

地奈德[11-β，21-二羟基-16α，17-[(1-甲基亚乙基)-二氧]孕甾-1，4-二烯-3，20-二酮]是一种合成的第六类，低效力的非氟化局部皮质类固醇，适用于对皮质类固醇治疗有效的各种皮肤病，30多年来被广泛用于局部治疗轻中度特应性皮炎，是美国皮肤科医生最常用的治疗特应性皮炎的药物。多项临床试验证明了该药物的安全性和有效性，地奈德作为局部皮质类固醇激素具有至关重要的地位。但是，长时间使用会引起多种副作用，影响真皮和表皮，由于耐受性和局部和全身不良反应的风险，地奈德药物的用量、频率和使用持续时间应最低限度地满足所需的临床疗效。

地奈德分子式为C₂₄H₃₂O₆，结构公式如下所示：

地奈德被归类为较低至轻度的皮质类固醇，与其他合成皮质类固醇一样，它具有抗炎、止痒和收缩血管的特性。

目前，地奈德的应用剂型主要为乳膏剂，由于乳膏剂的粘度较大，因此其使用受到了诸多限制。由于地奈德难溶于水，因此多数情况下都是做成混悬型制剂。其制备方法，要么选择适当溶剂溶解加入反溶剂中晶体化后形成混悬型制剂，要么直接以晶体化加入产品中形成混悬型制剂。在长期贮存过程中，其活性成分晶体会出现增大现象，甚至少数晶体大小超过《中国药典》所规定的小于180μm的限度要求。众所周知，晶体大小对于混悬型制剂的质量来说至关重要，关系着制剂的稳定性，也关系着疗效的稳定性。另外，制剂中日益增大的晶体对患者使用顺应性也有影响。

因此，现有技术中地奈德的产品溶解性差进而影响了药物的透皮吸收，导致能够达到的治疗效果较差；维持时间较短，从而大大降低了地奈德的治疗效果；同时含有地奈德的产品保存时间短，不易于长期储存，影响使用。

发明内容

本申请的目的在于提供一种地奈德纳米乳凝胶组合物及其制备方法，旨在解决现有技术中含有地奈德的产品溶解性差导致维持时间较短、治疗效果差等问题。

为实现上述申请目的，本申请采用的技术方案如下：

第一方面，本申请提供一种地奈德纳米乳凝胶组合物，包括如下重量百分比的组分：

其中，所述乳化剂选自油溶性的乳化剂和水溶性的乳化剂的混合物。

第二方面，本申请提供一种地奈德纳米乳凝胶组合物的制备方法，包括如下步骤：

按照所述的地奈德纳米乳凝胶组合物所含的组份和处方量称取各原辅料；

将所述地奈德、所述油相成分、所述油溶性的乳化剂和所述助乳化剂进行混合处理，得到油相原料；将所述水溶性的乳化剂和部分纯化水进行混合处理，得到水相原料；

在磁力搅拌作用下，将所述油相原料滴加至所述水相原料中，进行初步乳化处理得到粗乳，对所述粗乳进行均质处理，得到地奈德纳米乳；

将所述凝胶基质和部分水混合进行第一溶解处理，得到凝胶混合物，将所述防腐剂、所述润湿剂、所述保湿剂、所述金属离子螯合剂、所述抗氧化剂和部分水进行第二溶解处理，得到辅料混合物，将所述辅料混合物和所述凝胶混合物进行混合处理，并调节pH至5～6，得到第一混合物；

将所述地奈德纳米乳与所述第一混合物混合处理，并调节pH至4.5～6.5，得到所述地奈德纳米乳凝胶组合物。

本申请第一方面提供的地奈德纳米乳凝胶组合物以油相组分和油溶性乳化剂为载体，将有效成分地奈德进行包裹得到o/w(水包油)的纳米乳剂，同时再混合协同了润湿剂、保湿剂、金属离子螯合剂、防腐剂和抗氧化剂等辅料的凝胶基质，制备“水包油”的地奈德纳米乳剂，能够保证地奈德溶解效果佳，具有良好的稳定性；进一步通过混合纳米乳剂和凝胶基质，能够改善纳米乳与皮肤的粘附性和涂展性，提高地奈德对皮肤角质层的渗透能力和靶向作用，提高了局部皮肤的药物浓度，提高地奈德的透皮吸收，具有强大的渗透能力和适合局部给药的粘度，达到优异的治疗效果；同时本发明的地奈德纳米乳凝胶可延缓药物释放，可延长与皮肤的接触，增加药物作用时间，大大提高了地奈德的治疗效果。

本申请第二方面提供的地奈德纳米乳凝胶组合物的制备方法，该制备方法分别制备得到含有地奈德的油相原料以及含有水溶性乳化剂的水相原料，混合后采用均质处理得到地奈德纳米乳；再与协同了润湿剂、保湿剂、金属离子螯合剂、防腐剂和抗氧化剂等辅料的凝胶基质混合处理，从而得到药性稳定性良好、渗透能力和靶向作用强的地奈德纳米乳凝胶组合物，从而提高地奈德的治疗效果以及延长了药物的作用时间。此外，该制备工艺简单，无大型设备的要求，在制备过程中保证了药效的稳定性，提高了生产效率，降低了生产成本。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本申请实施例提供的地奈德纳米乳透射电镜形态图。

图2是本申请实施例提供的纳米乳的粒径图和电位分析图。

图3是本申请实施例提供的地奈德不同体系的体外经皮吸收评价研究图.。

图4是本申请实施例提供的地奈德不同体系的皮肤研累积滞留量研究图。

图5是本申请实施例提供的地奈德不同体系的药物累积释放量研究图。

图6是本申请实施例提供的地奈德不同体系的皮肤荧光显微镜图(200×)。

图7是本申请实施例提供的正常皮肤的地奈德纳米乳和地奈德纳米乳凝胶的HE的组织病理学染色图(200×)。

具体实施方式

为了使本申请要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本申请进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本申请，并不用于限定本申请。

本申请中，术语“和/或”，描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，A和/或B，可以表示：单独存在A，同时存在A和B，单独存在B的情况。其中A，B可以是单数或者复数。字符“/”一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。

本申请中，“至少一个”是指一个或者多个，“多个”是指两个或两个以上。“以下至少一项(个)”或其类似表达，是指的这些项中的任意组合，包括单项(个)或复数项(个)的任意组合。例如，“a,b,或c中的至少一项(个)”，或，“a,b,和c中的至少一项(个)”，均可以表示：a,b,c,a-b(即a和b),a-c,b-c,或a-b-c，其中a,b,c分别可以是单个，也可以是多个。

应理解，在本申请的各种实施例中，上述各过程的序号的大小并不意味着执行顺序的先后，部分或全部步骤可以并行执行或先后执行，各过程的执行顺序应以其功能和内在逻辑确定，而不应对本申请实施例的实施过程构成任何限定。

在本申请实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本申请。在本申请实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“所述”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义。

本申请实施例说明书中所提到的相关成分的重量不仅仅可以指代各组分的具体含量，也可以表示各组分间重量的比例关系，因此，只要是按照本申请实施例说明书相关组分的含量按比例放大或缩小均在本申请实施例说明书公开的范围之内。具体地，本申请实施例说明书中的质量可以是μg、mg、g、kg等化工领域公知的质量单位。

术语“第一“、“第二”仅用于描述目的，用来将目的如物质彼此区分开，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。例如，在不脱离本申请实施例范围的情况下，第一XX也可以被称为第二XX，类似地，第二XX也可以被称为第一XX。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。

一种地奈德纳米乳凝胶组合物，包括如下重量百分比的组分：

其中，乳化剂选自油溶性的乳化剂和水溶性的乳化剂的混合物。

具体的，地奈德为地奈德纳米乳凝胶组合物的有效药物活性成分，在本发明中，“地奈德”被定义为指选自地奈德的至少一种形式的地奈德、地奈德的单独光学活性对映体、其外消旋混合物、其活性代谢物、其药学上可接受的盐、其晶型，形式中的任何形式都可以是晶态或非晶态的。优选的，地奈德的碱形式为孕酮-1，4-二烯-3，20～二酮，11，21-二羟基-16，17-[(1-亚甲基亚甲基)双(氧)]-，(11β，16α)。

具体的，以地奈德纳米乳凝胶组合物的含量为100％，地奈德的添加量为0.05％～1.0％，其中，地奈德的含量可以根据临床需要进一步进行调整。在本发明具体实施例中，地奈德在地奈德纳米乳凝胶组合物中的添加量选自0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1.0％等。

具体的，以地奈德纳米乳凝胶组合物的含量为100％，油相成分的添加量为5％～20％；添加油相成分，以油相成分作为载体对地奈德有效活性成分进行包裹，以形成油相原料，使油相原料与水相原料形成稳定的“水包油”的状态的纳米乳，保证地奈德溶解完全且分散均匀。

优选的，油相成分选自桉树油、杏仁油、杏子油、琉璃苣油、菜籽油、椰子油、玉米油、树茶油、棉籽油、鱼油、荷荷巴豆油、猪油、亚麻籽油、煮熟的澳洲坚果油、矿物油、橄榄油、花生油、红花油、芝麻油、大豆油、棕榈油、角鲨烷、葵花籽油、三辛酯(1，1)，油酸和亚油酸中的一种或多种。

在本发明具体实施例中，油相成分在地奈德纳米乳凝胶组合物中的添加量选自5％、8％、10％、12％、15％、17％、20％等。具体可以根据上述药物活性成分的含量进行调整。

具体的，以地奈德纳米乳凝胶组合物的含量为100％，乳化剂的添加量为0.1％～10％。乳化剂能吸附在相界面上形成界面膜并使乳状液稳定，添加乳化剂能够降低界面张力，使分散体系的势能下降，稳定乳液；在界面上形成韧性或高黏度界面膜阻止碰撞而引起的液滴聚结，改善疏水材料的润湿性和溶解性。在本发明优选实施例中，为了保证地奈德形成纳米乳剂，采用一种或多种非离子型表面活性剂。

其中，乳化剂选自油溶性的乳化剂和水溶性的乳化剂的混合物，采用油溶性的乳化剂和水溶性的乳化剂分别能够得到油相原料和水相原料，使油相原料和水相原料混合形成纳米乳，制备“水包油”的地奈德纳米乳剂，能够保证地奈德溶解效果佳，具有良好的稳定性。

优选的，油溶性的乳化剂选自吐温系列、壬基酚聚乙二醇醚、Sefsol 218丙二醇单乙醚、聚-(氧-1，2-乙二基)、α-(4-壬基酚)-ω-羟基、

NP-40表面活性剂中的一种或多种。进一步优选的，吐温系列选自

20、

40、

60、

80中的至少一种。优选的，水溶性的乳化剂选自聚山梨酸酯表面活性剂、苯氧基聚乙氧基乙醇及其聚合物、

聚氧乙烯脂肪醇醚类、十二烷基硫酸钠中的一种或多种。

在本发明具体实施例中，乳化剂在地奈德纳米乳凝胶组合物中的添加量选自0.1％、0.5％、1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、8.5％、9％、9.5％、10％等。具体可以根据上述药物活性成分的含量进行调整。

具体的，以地奈德纳米乳凝胶组合物的含量为100％，助乳化剂的添加量为0.5％～9％。助乳化剂可调节乳化剂的HLB值，并形成更小的乳滴。

优选的，所述助乳化剂选自所述助乳化剂选自乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、正戊醇、异戊醇、1-己醇、2-己醇、1-辛醇、2-辛醇、杂醇油、对壬基酚、二乙二醇单乙基醚、聚乙二醇400、聚乙二醇中的一种或多种。

在本发明具体实施例中，助乳化剂在地奈德纳米乳凝胶组合物中的添加量选自0.5％、1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、8.5％、9％等。具体可以根据上述药物活性成分的含量进行调整。

优选的，地奈德纳米乳凝胶组合物中，油溶性的乳化剂和助乳化剂与油相成分的比例为(0.1～10)：(0.01～5)：(1～20)，控制三者的添加量能够促进纳米乳成型，同时保证纳米乳的颗粒粒径大小以及促进有效活性物质地奈德的药物透皮效果。在本发明优选实施例中，地奈德纳米乳凝胶组合物中，乳化剂和助乳化剂与油相成分的比例为(2～8)：(0.5～4)：(10～15)。

具体的，以地奈德纳米乳凝胶组合物的含量为100％，润湿剂的添加量选自0.5％～10％。优选的，润湿剂选自辛酸甘油三酯、癸酸甘油三酯、蓖麻油、鲸蜡硬脂20、鲸蜡硬脂30、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡硬脂醇20、鲸蜡醇、可可脂、己二酸二异丙酯中的一种或多种。

在本发明具体实施例中，润湿剂在地奈德纳米乳凝胶组合物的添加量选自0.5％、1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、8.5％、9％、9.5％、10％等。具体可以根据上述药物活性成分的含量进行调整。

具体的，以地奈德纳米乳凝胶组合物的含量为100％，凝胶基质的添加量选自0.5％～3％。选择凝胶基质，将各辅料与凝胶基质混合后，再进一步通过混合纳米乳剂和凝胶基质，能够改善纳米乳与皮肤的粘附性和涂展性，提高地奈德对皮肤角质层的渗透能力和靶向作用，提高了局部皮肤的药物浓度，提高地奈德的透皮吸收，具有强大的渗透能力和适合局部给药的粘度，达到优异的治疗效果。其中，凝胶基质是指具有较高粘度可承载活性成分的药用辅料，可采用药学领域任何可接收的材料。

优选的，凝胶基质选自卡波姆、海藻酸、海藻酸盐、西黄蓍胶、明胶、淀粉、泊洛沙姆、壳聚糖、卡拉胶、胶体二氧化硅、瓜尔豆胶、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚氧乙烯、气相法二氧化硅中的一种或多种。

在本发明优选实施例中，选择卡波姆为凝胶基质。进一步优选的，卡波姆选自卡波姆940，卡波姆980，卡波姆934，卡波姆1342，卡波姆981，卡波姆SF-1的一种或多种。

在本发明具体实施例中，凝胶基质在地奈德纳米乳凝胶组合物的添加量选自0.5％、1％、1.5％、2％、2.5％、3％。具体可以根据上述药物活性成分的含量进行调整。

具体的，以地奈德纳米乳凝胶组合物的含量为100％，保湿剂的添加量选自3％～10％。优选的，保湿剂选自甘油、单油酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸甘油酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、羊毛脂、羊毛脂醇、氢化羊毛脂、液体石蜡、亚油酸、矿物油、油酸、白凡士林、聚乙二醇、聚氧乙烯乙二醇脂肪醇醚、聚氧丙烯15-硬脂基醚、丙二醇硬脂酸酯、角鲨烷、steareth-2、steareth-100、硬脂酸、硬脂醇、尿素中的一种或多种。

在本发明具体实施例中，保湿剂在地奈德纳米乳凝胶组合物的添加量选自3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、8.5％、9％、9.5％、10％等。具体可以根据上述药物活性成分的含量进行调整。

具体的，以地奈德纳米乳凝胶组合物的含量为100％，金属离子螯合剂的添加量选自0.001％～0.1％。优选的，金属离子螯合剂选自EDTA二钠、乙二酸乙二酯三钠、乙二酸乙二酯四钠、五乙二胺二乙胺中的一种或多种。

在本发明具体实施例中，金属离子螯合剂在地奈德纳米乳凝胶组合物的添加量选自0.001％、0.005％、0.01％、0.05％、0.1％等。具体可以根据上述药物活性成分的含量进行调整。

具体的，以地奈德纳米乳凝胶组合物的含量为100％，防腐剂的添加量选自0.001％～0.2％。优选的，防腐剂选自苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸酯、丙二醇、山梨酸酯、脲衍生物中的一种或多种。

在本发明具体实施例中，防腐剂在地奈德纳米乳凝胶组合物的添加量选自0.001％、0.005％、0.01％、0.05％、0.1％、0.15％、0.2％等。具体可以根据上述药物活性成分的含量进行调整。

具体的，以地奈德纳米乳凝胶组合物的含量为100％，抗氧化剂的添加量选自0.01％～0.5％。抗氧化剂选自抗坏血酸、α-生育酚、丁基羟基茴香醚、丁基羟基甲苯、谷胱甘肽、偏亚硫酸氢钠中的一种或多种。

在本发明具体实施例中，抗氧化剂在地奈德纳米乳凝胶组合物的添加量选自0.01％、0.05％、0.1％、0.15％、0.2％、0.25％、0.3％、0.35％、0.4％、0.45％、0.5％等。具体可以根据上述药物活性成分的含量进行调整。

具体的，以地奈德纳米乳凝胶组合物的含量为100％，水的添加量选自90.198％～90.338％，具体可以根据上述药物活性成分的含量进行调整。

优选的，地奈德纳米乳凝胶组合物的pH值为4.5～6.5。由于皮肤是有一个酸碱平衡的状态，其pH值在5-5.6之间，是健康的理想皮肤。皮肤的酸碱度最低可到4.0，最高可到9.6。皮肤一般是呈弱酸性，控制地奈德纳米乳凝胶组合物的pH值能够保证使用效果较佳。

优选的，地奈德纳米乳凝胶组合物选自凝胶、洗剂和乳液中的至少一种，可根据具体需要，根据以上地奈德纳米乳凝胶组合物的配方制备成地奈德纳米乳凝胶、地奈德纳米乳凝胶洗剂或地奈德纳米乳凝胶乳液，方便使用。

本申请实施例第二方面提供一种地奈德纳米乳凝胶组合物的制备方法，包括如下步骤：

S01.按照地奈德纳米乳凝胶组合物所含的组份和处方量称取各原辅料；

S02.将地奈德、油相成分、油溶性的乳化剂和助乳化剂进行混合处理，得到油相原料；将水溶性的乳化剂和部分纯化水进行混合处理，得到水相原料；

S03.在磁力搅拌作用下，将油相原料滴加至水相原料中，进行初步乳化处理得到粗乳，对粗乳进行均质处理，得到地奈德纳米乳；

S04.将凝胶基质和部分水混合进行第一溶解处理，得到凝胶混合物，将防腐剂、润湿剂、保湿剂、金属离子螯合剂、抗氧化剂和部分水进行第二溶解处理，得到辅料混合物，将辅料混合物和凝胶混合物进行混合处理，并调节pH至5～6，得到第一混合物；

S05.将地奈德纳米乳与第一混合物混合处理，并调节pH至4.5～6.5，得到地奈德纳米乳凝胶组合物。

在上述步骤S01中，按照地奈德纳米乳凝胶组合物所含的组份和处方量称取各原辅料，具体的原料组分和各组分的添加量如上，为了节约篇幅，此处不再进行赘述。

在上述步骤S02中，将地奈德、油相成分、油溶性的乳化剂和助乳化剂进行混合处理，得到油相原料。优选的，将地奈德、油相成分、油溶性的乳化剂和助乳化剂进行超声混合处理，使地奈德完全溶解。

进一步，将水溶性的乳化剂和部分纯化水进行混合处理，得到水相原料。优选的，将水溶性的乳化剂和部分纯化水进行超声混合处理，使水溶性乳化剂完全溶解，得到澄清透明的水相原料。

在上述步骤S03中，在磁力搅拌作用下，将油相原料滴加至水相原料中，进行初步乳化处理得到粗乳，对粗乳进行均质处理，得到地奈德纳米乳。

优选的，进行初步乳化处理得到粗乳的步骤中，采用高剪切乳化机进行初步乳化处理将原料进行分散均匀，得到分散均匀的粗乳。

通过均质处理的目的是为了得到纳米尺寸的液滴。本领域技术人员可以理解，可以采用任何已知的减小液滴大小的方法来服务于本发明的目的。

优选的，对粗乳进行均质处理的步骤中，采用高速剪切机、高压均质机、往复式注射器仪器、连续流动仪器、超声波细胞粉碎仪中的至少一种进行均质处理；且均质处理的次数为1～13次。在本发明优选实施例中，用高压均质机进行均质处理的过程中，使粗乳液在3,500-21,500psi的范围内的不同压力下通过高压均质机来形成纳米乳液的小液滴。

优选的，地奈德纳米乳的粒径为1～200nm，且多分散系数为0.1～0.5。其中，制备得到的地奈德纳米乳为水包油的纳米乳，控制纳米乳的粒径可进一步控制制备得到的地奈德纳米乳凝胶的作用效果，进而提高药物的稳定性和作用效果。进一步优选的，地奈德纳米乳的粒径为20-200nm。在本发明具体实施例中，控制地奈德纳米乳的粒径为20-100nm，能够进一步保证地奈德纳米乳凝胶的作用效果。

在上述步骤S04中，将凝胶基质和部分水混合进行第一溶解处理，得到凝胶混合物。优选的，将凝胶基质和部分水混合于50～60℃的条件下进行第一溶解处理，得到凝胶混合物。

进一步，将防腐剂、润湿剂、保湿剂、金属离子螯合剂、抗氧化剂和部分水进行第二溶解处理，得到辅料混合物。优选的，将防腐剂、润湿剂、保湿剂、金属离子螯合剂、抗氧化剂和部分水于80～90℃的条件下进行第二溶解处理，得到辅料混合物。

进一步，将辅料混合物和凝胶混合物进行混合处理，并调节pH至5～6，得到第一混合物。优选的，将辅料混合物和凝胶混合物进行混合处理，并调节pH至5～6的步骤中，采用pH调节剂进行调节。进一步优选的，pH调节剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、三乙醇胺、磷酸盐缓冲液、柠檬酸、乙酸、富马酸、盐酸、苹果酸、硝酸、磷酸、丙酸、硫酸、酒石酸中的一种或几种。

在上述步骤S05中，将地奈德纳米乳与第一混合物混合处理，并调节pH至4.5～6.5，得到地奈德纳米乳凝胶组合物。

优选的，将地奈德纳米乳与第一混合物混合处理，并调节pH至4.5～6.5步骤中，采用pH调节剂进行调节。进一步优选的，pH调节剂选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、三乙醇胺、磷酸盐缓冲液、柠檬酸、乙酸、富马酸、盐酸、苹果酸、硝酸、磷酸、丙酸、硫酸、酒石酸中的一种或几种。

下面结合具体实施例进行说明。

实施例1

地奈德纳米乳凝胶组合物及其制备方法

地奈德纳米乳凝胶组合物的原料选择及添加量如下表1所示：

表1

制备方法：

按照实施例1中表1提供的地奈德纳米乳凝胶组合物所含的组份和处方量称取各原辅料；

将地奈德溶解于2,6-二丁基羟基甲苯与棕榈油，甘油三乙酸酯，油酸中得到油相成分，再将吐温20、泊洛沙姆407、二乙二醇单乙基醚溶解于纯化水中得到水相原料；

在转速500rpm的磁力搅拌作用下，将油相原料滴加至水相原料中，于12000rpm的转速下剪切8min进行初步乳化处理得到粗乳，对粗乳进行均质处理，得到液滴尺寸减小至约200nm的地奈德纳米乳；

将卡波姆和部分水混合进行第一溶解处理，得到凝胶混合物，将丙二醇，MP，PP和EDTA和部分水进行第二溶解处理，得到辅料混合物，将辅料混合物和凝胶混合物进行混合处理，并用三乙醇胺调节pH至5～6，得到第一混合物；

将地奈德纳米乳与第一混合物混合处理，并用三乙醇胺调节pH至4.5～6.5，得到地奈德纳米乳凝胶组合物。

实施例2

地奈德纳米乳凝胶组合物的原料选择及添加量如下表2所示：

表2

制备方法：

按照实施例2中表2提供的地奈德纳米乳凝胶组合物所含的组份和处方量称取各原辅料；

将地奈德溶解于桉叶油、三乙酸甘油酯、油酸、司盘80中得到油相成分，再将吐温80、泊洛沙姆407、二乙二醇单乙基醚溶解于纯化水中得到水相原料；

将卡波姆和部分水混合进行第一溶解处理，得到凝胶混合物，将甘油、丙二醇、EDTA、羟苯甲酯和羟苯丙酯和部分水进行第二溶解处理，得到辅料混合物，将辅料混合物和凝胶混合物进行混合处理，并用三乙醇胺调节pH至5～6，得到第一混合物；

实施例3

地奈德纳米乳凝胶组合物的原料选择及添加量如下表3所示：

表3

制备方法：

按照实施例3中表3提供的地奈德纳米乳凝胶组合物所含的组份和处方量称取各原辅料；

将地奈德溶解于棕榈油、Sefsol 218，辛酸/癸酸甘油三酯中得到油相成分，再将吐温80、泊洛沙姆407、Span 80和Labrasol溶解于纯化水中得到水相原料；

将卡波姆和部分水混合进行第一溶解处理，得到凝胶混合物，将丙二醇，MP，PP和EDTA和部分水进行第二溶解处理，得到辅料混合物，将辅料混合物和凝胶混合物进行混合处理，并用氢氧化钠调节pH至5～6，得到第一混合物；

将地奈德纳米乳与第一混合物混合处理，并用氢氧化钠调节pH至4.5～6.5，得到地奈德纳米乳凝胶组合物。

实施例4

地奈德纳米乳凝胶组合物的原料选择及添加量如下表4所示：

表4

制备方法：

按照实施例4中表4提供的地奈德纳米乳凝胶组合物所含的组份和处方量称取各原辅料；

将地奈德与椰子油、辛酸/癸酸甘油三酯、Cremophor RH40混合得到油相成分，再将吐温80、泊洛沙姆407、司盘80、中链甘油三酯溶解于纯化水中得到水相原料；

将卡波姆和部分水混合进行第一溶解处理，得到凝胶混合物，将甘油、羟苯甲酯、羟苯丙酯和EDTA和部分水进行第二溶解处理，得到辅料混合物，将辅料混合物和凝胶混合物进行混合处理，并用氢氧化钠调节pH至5～6，得到第一混合物；

性能测试：

将实施例2制备得到的地奈德纳米乳和地奈德纳米乳凝胶组合物分别进行以下性能测试：

(1)透射电镜形态观察

采用磷钨酸负染法，将地奈德纳米乳和地奈德纳米乳凝胶分别稀释至适当浓度，滴于300母铜网表面，滴至铺有碳膜的铜网上，5-6min后用滤纸吸去多余的液体，加入1滴2％的磷钨酸溶液染色1min,用滤纸吸去多余的液体，自然晾干后，将此铜网放在透射电子显微镜观察并拍照。

(2)粒径测定

采用Delsa Nano C激光粒度仪对地奈德纳米乳和地奈德纳米乳凝胶的粒径及电位分析，测定池内温度为25±0.5℃，分散介质为去离子水的条件下进行测定。

结果为粒径38.3±1.47nm,0.174±0.026,-20.69±0.44mv.见图2-1。

(3)体外透皮实验

取健康SD大鼠，用电推剪脱去腹部鼠毛，然后麻醉处死，取下腹部皮肤，除去皮下脂肪，观察皮肤有无破损，将皮肤浸泡在生理盐水中，4℃冰箱中保存，待用。使皮肤达到室温并安装在Franz扩散池的供体室和接受室之间，其中角质层一侧面向供体室，而真皮侧面向接受室。最初，供体室是空的，接收室中充满2％的transcutol p(是一种表面活性剂为了达到漏槽条件)。温度保持在(37±0.5)℃，于恒温水浴智能透皮试验仪中平衡30min，转速为200rpm(接收液预先超声脱气处理)。将接收池中的接受液全部倒掉，重新加入新鲜的2％transcutol p，给药池中分别加入1g地奈德纳米乳、1g地奈德纳米乳凝胶(实施例2制备得到)、地奈德凝胶(市售)和地奈德软膏(给药量相当于地奈德500μg)，封闭式给药，12h后取接收液2m L，样品过滤后待测。每30分钟更换所有接收液以稳定皮肤。发现接受液在4.5小时后显示的吸收率可忽略不计，超过此值表明皮肤已完全稳定。皮肤完全稳定后，将1mL纳米乳剂(0.05mg/mL BD)放入每个供体隔室并用石蜡膜密封以提供闭塞条件。定期抽取样品(2、4、6、8、10、12小时)，通过0.22um膜过滤器过滤,并用HPLC测定。按如下公式测定渗透量。

(4)药物滞留量的测定

透皮实验结束后，取下皮肤，移除残留药物制剂，用生理盐水冲洗3次，滤纸吸干，置于10mL离心管中，剪碎研磨皮肤，加甲醇5mL，涡旋2min。水浴震荡24h，取出后超声4次，每次30min，充分提取皮肤中的地奈德。然后8000r·min-1，离心12min，过滤进液相测定，计算各制剂皮肤滞留量。

(5)药物释放度的测定

使用透析膜(分子量截留量为8000-12000)从地奈德纳米乳、地奈德纳米乳凝胶(实施例2)、市售地奈德凝胶和市售的地奈德乳膏(相当于500μg的地奈德)中体外释放地奈德。扩散条件的选择和透析膜的放置与皮肤渗透研究中使用的相同。分别在1、2、4、6、8、10、12h和24h取样，并用相同体积的新鲜透析液代替它们。用HPlC分析通过0.22um膜滤器过滤后的药物释放。

(6)共聚焦荧光显微镜(CLSM)研究药物渗透情况

制备荧光标记的样品，地奈德不具有荧光，因此选择和地奈德性质相似的香豆素作为替代药物，研究不同制剂下药物的渗透作用。按照前期地奈德纳米乳及凝胶的制备方法制备用香豆素-6标记的纳米乳及凝胶。取健康的SD大鼠，随机分为4组，每组3只。实验前麻醉大鼠，固定于鼠板上，腹部向上，用剃须刀将大鼠的腹部绒毛剔除干净，保证皮肤的完整性。将Franz扩散池的供给池固定于大鼠的皮肤上，加入荧光标记纳米乳凝胶、纳米乳(实施例2)、香豆素凝胶和香豆素混悬液(相当于500μg的地奈德)，用封口膜密封，给药处理后6h将大鼠处死，将给药部位皮肤取下，用生理盐水冲洗干净，置于4％多聚甲醛中固定，石蜡包埋，纵向切片。将切片置于载物台上，滴加DAPI染液进行细胞核染色，用抗荧光猝灭封片剂进行封片，整个操作过程避光进行。观察香豆素-6的混悬液，香豆素-6水凝胶，香豆素-6纳米乳凝胶，香豆素-6纳米乳在皮肤中的分布，检测药物分子在皮肤中的扩散情况，根据荧光的强弱判断药物的渗透性能。

(7)药物渗透情况进一步分析

按照(6)方法制备大鼠离体皮肤，将皮肤置于Franz扩散池上，按照体外透皮实验条件，以生理盐水作为空白对照，分别以生理盐水，地奈德纳米乳和地奈德纳米乳凝胶(制备方法参考实施例2)处理皮肤12h，将皮肤取下用生理盐水冲洗干净，于4％多聚甲醛溶液中固定。将皮肤用石蜡包埋，制作纵向切片，用HE染色，显微镜观察，图像采集分析。

结果分析：

(1)透射电镜形态观察分析，电镜结果图如图1所示，由图1A和图1B可以看出，纳米乳外观圆整，大小均一。

(2)粒径测定分析，粒径测定结果如图2所示，由图2可以看出，纳米乳的粒径38.3±1.47nm；电位为0.174±0.026-20.69±0.44mv。(3)体外透皮实验分析，皮肤渗透量的结果如图3所示，由图3可以看出，皮肤渗透量的排序为地奈德纳米乳>地奈德纳米乳凝胶＞市售地奈德凝胶>市售地奈德乳膏。

(4)药物滞留量的测定分析，结果如图4所示。皮肤滞留量的排序为纳米乳＞纳米乳凝胶＞市售地奈德凝胶＞市售地奈德乳膏。

(5)药物释放度的测定分析，时间和释放量的曲线如图5所示，拟合了12小时内不同制剂的累积释放量和时间方程，研究了不同制剂的释药机理如表5。由表5可知，除了地奈德乳膏外都符合Higuchi方程，说明药物释放受药物浓度和自身扩散的影响。由图5可知，药物的释放速率为地奈德纳米乳＞市售地奈德凝胶＞地奈德纳米乳凝胶＞市售地奈德乳膏。说明本发明的地奈德纳米乳凝胶具有缓释的效果，可以延长药物的作用时间，减少给药频率，增加患者的顺应性，降低不良反应。

表5

(6)共聚焦荧光显微镜(CLSM)研究药物渗透情况分析，如图6所示，A1和A2为香豆素-6的混悬液；B1和B2为香豆素-6水凝胶；C1和C2为香豆素-6纳米乳凝胶；D1和D2为香豆素-6纳米乳根据图6可以出，荧光强弱的顺序为香豆素-6纳米乳>香豆素-6纳米乳凝胶＞香豆素-6地奈德凝胶＞香豆素-6水溶液。说明与香豆素水凝胶相比，豆素纳米乳凝胶在皮肤中有较多的滞留量和更好的渗透，这与前面药物皮肤渗透量和药物滞留量的结果是一致的。

(7)药物渗透情况进一步分析，如图7所示，7A为生理盐水，7B为纳米乳，7C为纳米乳凝胶。大鼠皮肤由表皮，真皮和皮下组织三部分组成。在显微镜下可见用生理盐水处理的皮肤结构完整，表皮各层密实排列，各层清晰可见，角质形成细胞紧密相连。相反，纳米乳液和纳米乳液凝胶处理的角质层显示出明显的形态变化。角质层变成随机排列的几个松散的扭曲层。表皮层之间的间隔增加，并且还形成了裂纹。表面活性剂和辅助表面活性剂均会提取细胞间脂质并破坏角质形成细胞与桥粒之间的连接。此外，角质层的变化可归因于水性液体向极性途径的运动，从而增加了层间体积实验结果表明，地奈德纳米乳剂和地奈德纳米乳胶的透皮给药系统具有增强渗透性的作用，并且与皮肤表皮微观结构的变化有关。

综上，本申请提供的地奈德纳米乳凝胶组合物地奈德溶解效果佳，具有良好的稳定性；纳米乳与皮肤的粘附性和涂展性良好，提高地奈德对皮肤角质层的渗透能力和靶向作用，提高了局部皮肤的药物浓度，提高地奈德的透皮吸收，具有强大的渗透能力和适合局部给药的粘度，达到优异的治疗效果；同时本发明的地奈德纳米乳凝胶可延缓药物释放，可延长与皮肤的接触，增加药物作用时间，大大提高了地奈德的治疗效果。

以上仅为本申请的较佳实施例而已，并不用以限制本申请，凡在本申请的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。

Claims

1.一种地奈德纳米乳凝胶组合物，其特征在于，包括如下重量百分比的组分：

2.根据权利要求1所述的地奈德纳米乳凝胶组合物，其特征在于，所述地奈德纳米乳凝胶组合物的pH值为4.5～6.5。

3.根据权利要求1所述的地奈德纳米乳凝胶组合物，其特征在于，所述地奈德纳米乳凝胶组合物选自凝胶、洗剂和乳液中的至少一种。

4.根据权利要求1～3任一所述的地奈德纳米乳凝胶组合物，其特征在于，所述油相成分选自桉树油、杏仁油、杏子油、琉璃苣油、菜籽油、椰子油、玉米油、树茶油、棉籽油、鱼油、荷荷巴豆油、猪油、亚麻籽油、煮熟的澳洲坚果油、矿物油、橄榄油、花生油、红花油、芝麻油、大豆油、棕榈油、角鲨烷、葵花籽油、三辛酯(1，1)，油酸和亚油酸中的一种或多种。

5.根据权利要求1～3任一所述的地奈德纳米乳凝胶组合物，其特征在于，所述油溶性的乳化剂选自吐温系列、壬基酚聚乙二醇醚、Sefsol 218丙二醇单乙醚、聚-(氧-1，2-乙二基)、α-(4-壬基酚)-ω-羟基、

NP-40表面活性剂中的一种或多种；和/或，

所述水溶性的乳化剂选自聚山梨酸酯表面活性剂、苯氧基聚乙氧基乙醇及其聚合物、

聚氧乙烯脂肪醇醚类、十二烷基硫酸钠中的一种或多种；和/或，

所述助乳化剂选自所述助乳化剂选自乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、正戊醇、异戊醇、1-己醇、2-己醇、1-辛醇、2-辛醇、杂醇油、对壬基酚、二乙二醇单乙基醚、聚乙二醇400、聚乙二醇中的一种或多种。

6.根据权利要求1～3任一所述的地奈德纳米乳凝胶组合物，其特征在于，

所述润湿剂选自辛酸甘油三酯、癸酸甘油三酯、蓖麻油、鲸蜡硬脂20、鲸蜡硬脂30、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡硬脂醇20、鲸蜡醇、可可脂、己二酸二异丙酯中的一种或多种；和/或，

所述凝胶基质选自卡波姆、海藻酸、海藻酸盐、西黄蓍胶、明胶、淀粉、泊洛沙姆、壳聚糖、卡拉胶、胶体二氧化硅、瓜尔豆胶、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚氧乙烯、气相法二氧化硅中的一种或多种；和/或，

所述保湿剂选自甘油、单油酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸甘油酯、肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、羊毛脂、羊毛脂醇、氢化羊毛脂、液体石蜡、亚油酸、矿物油、油酸、白凡士林、聚乙二醇、聚氧乙烯乙二醇脂肪醇醚、聚氧丙烯15-硬脂基醚、丙二醇硬脂酸酯、角鲨烷、steareth-2、steareth-100、硬脂酸、硬脂醇、尿素中的一种或多种；和/或，

所述金属离子螯合剂选自EDTA二钠、乙二酸乙二酯三钠、乙二酸乙二酯四钠、五乙二胺二乙胺中的一种或多种；和/或，

所述防腐剂选自苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸酯、丙二醇、山梨酸酯、脲衍生物中的一种或多种；和/或，

所述抗氧化剂选自抗坏血酸、α-生育酚、丁基羟基茴香醚、丁基羟基甲苯、谷胱甘肽、偏亚硫酸氢钠中的一种或多种。

7.一种地奈德纳米乳凝胶组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

按照权利要求1～6任一所述的地奈德纳米乳凝胶组合物所含的组份和处方量称取各原辅料；

8.根据权利要求7所述的地奈德纳米乳凝胶组合物的制备方法，其特征在于，对所述粗乳进行均质处理的步骤中，采用高速剪切机、高压均质机、往复式注射器仪器、连续流动仪器、超声波细胞粉碎仪中的至少一种进行均质处理；且所述均质处理的次数为1～13次。

9.根据权利要求7所述的地奈德纳米乳凝胶组合物的制备方法，其特征在于，所述地奈德纳米乳的粒径为1～200nm，且多分散系数为0.1～0.5。

10.根据权利要求7所述的地奈德纳米乳凝胶组合物的制备方法，其特征在于，将所述辅料混合物和所述凝胶混合物进行混合处理，并调节pH至5～6的步骤中，采用pH调节剂进行调节；和/或，

将所述地奈德纳米乳与所述第一混合物混合处理，并调节pH至4.5～6.5步骤中，采用pH调节剂进行调节。