CN112263521A - 芍药提取物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种芍药提取物及其制备方法和应用。所述芍药提取物的制备方法,包括如下步骤:取芍药根,以甲醇水溶液进行提取,所得提取液浓缩,制备第一提取物;于所述第一提取物中加入乙酸乙酯进行萃取,收集乙酸乙酯相,浓缩至干,制备第二提取物;将所述第二提取物复溶后进行凝胶洗脱,检测并收集含有标志物的洗脱液;所述标志物为五没食子酰葡萄糖。该制备方法制备得到的芍药提取物中五没食子酰葡萄糖含量高,且提取率高,工艺简单。
Description
技术领域
本发明涉及植物提取技术领域,特别是涉及一种芍药提取物及其制备方法和应用。
背景技术
芍药(学名:Paeonia lactiflora Pall.),别名别离草、花中丞相,属毛茛目,毛茛科芍药属多年生草本。芍药具有较为广泛的食用价值和药用价值,根据分析,芍药根含有芍药甙和安息香酸,用途因种而异,中医认为它具有镇痉、镇痛、通经作用,对妇女的腹痛、胃痉挛、眩晕、痛风、利尿等病症有效。
抗氧化是抗氧化自由基的简称,人体因为与外界的持续接触,包括呼吸(氧化反应)、外界污染、放射线照射等因素不断的在人体体内产生自由基。科学研究表明,癌症、衰老或其它疾病大都与过量自由基的产生有关联。研究抗氧化可以有效克服其所带来的危害。已证实具有抗氧化功效的物质可如维生素C、维生素E、胡萝卜素类、植物活性硒、花青素、茶多酚、辅酶Q10、葡萄籽提取物等。
目前的研究认为,芍药抗氧化功能的实现主要有赖于其中的五没食子酰葡萄糖。但是,传统的从芍药中制备五没食子酰葡萄糖的方法大多面临纯化困难的问题,需要经过多次大孔吸附树脂的富集才能够实现纯化,工艺流程较为复杂,且提取率低。
发明内容
基于此,有必要提供一种芍药提取物的制备方法。该制备方法制备得到的芍药提取物中五没食子酰葡萄糖含量高,且提取率高,工艺简单。
具体技术方案如下:
一种芍药提取物的制备方法,包括如下步骤:
取芍药根,粉碎,制备芍药根粉;所述芍药根粉的粒径不大于850μm;
以体积浓度为45~55%的甲醇水溶液对所述芍药根粉进行提取,所得提取液浓缩,制备第一提取物;所述提取的方式为加热至30~75℃回流提取30~150min;
于所述第一提取物中加入乙酸乙酯进行萃取,收集乙酸乙酯相,浓缩至干,制备第二提取物;
将所述第二提取物复溶后,以甲醇为洗脱液进行凝胶洗脱,检测并收集含有标志物的洗脱液;所述标志物为五没食子酰葡萄糖。
在其中一个实施例中,所述甲醇水溶液中甲醇的体积浓度为48~52%。
在其中一个实施例中,所述提取的方式为加热至60~75℃回流提取50~70min。
在其中一个实施例中,所述甲醇水溶液的用量为每克芍药根加入10~125mL。
在其中一个实施例中,所述凝胶洗脱采用的凝胶柱为Sephadex LH20凝胶柱。
在其中一个实施例中,所述检测是指以层析法检测所述标志物;所述层析法采用的展开剂为体积比为(15~18):(5~8):(0.5~1):1的氯仿、甲醇、甲酸和水。
在其中一个实施例中,所述提取液先进行减压过滤,再进行所述浓缩;所述减压过滤是指以孔径10~25μm的滤纸进行减压过滤。
本发明还提供一种芍药提取物,采用如上所述的芍药提取物的制备方法制备得到。
本发明还提供所述的芍药提取物在制备化妆品中的应用。
在其中一个实施例中,所述化妆品为具有抗衰老或抗氧化功效的化妆品。
与现有技术相比较,本发明具有如下有益效果:
以在保证芍药提取物中五没食子酰葡萄糖高含量的同时,提高其提取率、简化其提取方法为目的,本发明经过创新性的实验研究发现,以甲醇水溶液对芍药根进行提取,所得提取物以乙酸乙酯进行萃取处理,即可替代现有的多次大孔树脂吸附工艺,实现五没食子酰葡萄糖的有效分离和富集,较大地简化了芍药提取物的制备工艺。
同时,在此基础之上结合芍药根粉的粒径控制、合理调控甲醇水溶液的浓度、提取工艺以及合适的凝胶洗脱液,能够综合提高芍药提取物中五没食子酰葡萄糖含量,且实现较高的提取率。此外,该制备方法耗时短、成本低,可实现工厂化大规模生产。
另外,经过试验验证,本发明制备得到的芍药提取物具有较佳的抗氧化功能,在应用于抗衰老化妆品中时,能够防止皮肤粗糙老化,减少皮肤皱纹出现,保持皮肤光鲜有弹性。
附图说明
图1为一实施例的五没食子酰葡萄糖的标准曲线图。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明的芍药提取物及其制备方法和应用作进一步详细的说明。本发明可以以许多不同的形式来实现,并不限于本文所描述的实施方式。相反地,提供这些实施方式的目的是使对本发明公开内容理解更加透彻全面。
除非另有定义,本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的,不是旨在于限制本发明。
本发明提供一种芍药提取物的制备方法,包括如下步骤:
取芍药根,粉碎,制备芍药根粉;所述芍药根粉的粒径不大于850μm;
以体积浓度为45~55%的甲醇水溶液对所述芍药根粉进行提取,所得提取液浓缩,制备第一提取物;所述提取的方式为加热至30~75℃回流提取30~150min;
于所述第一提取物中加入乙酸乙酯进行萃取,收集乙酸乙酯相,浓缩至干,制备第二提取物;
将所述第二提取物复溶后,以甲醇为洗脱液进行凝胶洗脱,检测并收集含有标志物的洗脱液;所述标志物为五没食子酰葡萄糖。
可以理解地,“凝胶洗脱”是指以凝胶柱进行洗脱。“所得提取液浓缩”是指浓缩去除大部分或全部的甲醇。
可以理解地,“回流提取”是指在该温度范围内可以出现“回流”现象的提取方法,必要时,可以采用辅助手段,比如,在加热温度较低的情况下,可以适当地进行减压回流提取。
在其中一个具体的示例中,甲醇水溶液中甲醇的体积浓度为45~55%。进一步地,甲醇水溶液中甲醇的体积浓度包括但不限于如下比例:45%、48%、49%、50%、51%、52%、55%。
在其中一个具体的示例中,甲醇水溶液的用量为每克芍药根加入10~125mL。作为优选地,甲醇水溶液的用量为每克芍药根加入40~60mL,进一步地,甲醇水溶液的用量包括但不限于每克芍药根加入如下体积:40mL、45mL、48mL、49mL、50mL、51mL、52mL、55mL、60mL。
在其中一个具体的示例中,以甲醇水溶液进行提取的过程中,提取的方式为加热至30~75℃回流提取30~150min。
作为优选地,提取的温度为60~75℃。进一步地,提取的温度包括但不限于如下温度:60℃、65℃、68℃、69℃、70℃、71℃、72℃、75℃。
作为优选地,提取的时间为50~70min。进一步地,提取的温度包括但不限于如下温度:50min、55min、58min、59min、60min、61min、62min、65min、70min。
在其中一个具体的示例中,凝胶洗脱是指以甲醇为洗脱液进行洗脱。
在其中一个具体的示例中,凝胶洗脱采用的凝胶柱为Sephadex LH20凝胶柱。
在其中一个具体的示例中,检测是指以层析法检测所述标志物;层析法采用的展开剂为体积比为(15~18):(5~8):(0.5~1):1的氯仿、甲醇、甲酸和水。进一步地,层析法采用的展开剂为体积比为(16~17):(6~7):(0.7~0.8):1的氯仿、甲醇、甲酸和水。
在其中一个具体的示例中,以甲醇水溶液进行提取后,所得提取液先进行减压过滤,再进行浓缩;减压过滤是指以孔径10~25μm的滤纸进行减压过滤(或抽滤)。
另外,在其中一个具体的示例中,收集含有标志物的洗脱液后,对洗脱液进行冻干,制备有效成分的冻干粉。
本发明还提供一种芍药提取物,采用上述的芍药提取物的制备方法制备得到。
本发明还提供所述的芍药提取物在制备化妆品中的应用。进一步地,该化妆品为具有抗衰老或抗氧化功效的化妆品。
以下为具体的实施例,如无特别说明,实施例采用的原料均为市售产品。
实施例1
本实施例提供一种芍药提取物的制备方法,步骤如下:
(1)取芍药根,粉碎,过200目筛,得到芍药根粉;
(2)取步骤(1)得到的芍药根粉5g,加入250mL甲醇水溶液(体积浓度为50%),在温度为70℃条件下冷凝回流提取60min;所得提取液混匀、冷却,4500r/min离心20min,以孔径15μm的滤纸进行减压过滤;所得滤液浓缩蒸发甲醇,剩余液用乙酸乙酯萃取,收集乙酸乙酯层,如此反复萃取直至乙酸乙酯层无色;所得乙酸乙酯相浓缩至干,得到残余物;
(3)将步骤(2)的残余物以甲醇复溶,复溶液经0.45μm滤膜过滤,然后用SephadexLH20凝胶柱进行洗脱,每次上样约2mL,以甲醇进行洗脱,直至凝胶柱无色;期间用硅胶板检测(层析法)并收集含有五没食子酰葡萄糖的所有洗脱液,层析液为氯仿:甲醇:甲酸:水=65:25:3:4;合并洗脱液后,再以0.45μm滤膜过滤;
(4)将步骤(3)过滤后的洗脱液用真空冷冻干燥机冻干,得到芍药提取物。
实施例2
本实施例提供一种芍药提取物的制备方法,其步骤同实施例1,主要区别在于:步骤(2)中,甲醇水溶液中甲醇的体积浓度不同,为45%。
具体步骤如下:
(1)取芍药根,粉碎,过200目筛,得到芍药根粉;
(2)取步骤(1)得到的芍药根粉5g,加入250mL甲醇水溶液(体积浓度为45%),在温度为70℃条件下冷凝回流提取60min;所得提取液混匀、冷却,4500r/min离心20min,以孔径15μm的滤纸进行减压过滤;所得滤液浓缩蒸发甲醇,剩余液用乙酸乙酯萃取,收集乙酸乙酯层,如此反复萃取直至乙酸乙酯层无色;所得乙酸乙酯相浓缩至干,得到残余物;
(3)将步骤(2)的残余物以甲醇复溶,复溶液经0.45μm滤膜过滤,然后用SephadexLH20凝胶柱进行洗脱,每次上样约2mL,以甲醇进行洗脱,直至凝胶柱无色;期间用硅胶板检测(层析法)并收集含有五没食子酰葡萄糖的所有洗脱液,层析液为氯仿:甲醇:甲酸:水=65:25:3:4;合并洗脱液后,再以0.45μm滤膜过滤;
(4)将步骤(3)过滤后的洗脱液用真空冷冻干燥机冻干,得到芍药提取物。
实施例3
本实施例提供一种芍药提取物的制备方法,其步骤同实施例1,主要区别在于:步骤(2)中,甲醇水溶液中甲醇的体积浓度不同,为55%。
具体步骤如下:
(1)取芍药根,粉碎,过200目筛,得到芍药根粉;
(2)取步骤(1)得到的芍药根粉5g,加入250mL甲醇水溶液(体积浓度为55%),在温度为70℃条件下冷凝回流提取60min;所得提取液混匀、冷却,4500r/min离心20min,以孔径15μm的滤纸进行减压过滤;所得滤液浓缩蒸发甲醇,剩余液用乙酸乙酯萃取,收集乙酸乙酯层,如此反复萃取直至乙酸乙酯层无色;所得乙酸乙酯相浓缩至干,得到残余物;
(3)将步骤(2)的残余物以甲醇复溶,复溶液经0.45μm滤膜过滤,然后用SephadexLH20凝胶柱进行洗脱,每次上样约2mL,以甲醇进行洗脱,直至凝胶柱无色;期间用硅胶板检测(层析法)并收集含有五没食子酰葡萄糖的所有洗脱液,层析液为氯仿:甲醇:甲酸:水=65:25:3:4;合并洗脱液后,再以0.45μm滤膜过滤;
(4)将步骤(3)过滤后的洗脱液用真空冷冻干燥机冻干,得到芍药提取物。
实施例4
本实施例提供一种芍药提取物的制备方法,其步骤同实施例1,主要区别在于:步骤(2)中,回流提取的温度不同,为40℃。
具体步骤如下:
(1)取芍药根,粉碎,过200目筛,得到芍药根粉;
(2)取步骤(1)得到的芍药根粉5g,加入250mL甲醇水溶液(体积浓度为50%),在温度为40℃条件下冷凝回流提取60min(可适当减压处理以形成“回流”现象);所得提取液混匀、冷却,4500r/min离心20min,以孔径15μm的滤纸进行减压过滤;所得滤液浓缩蒸发甲醇,剩余液用乙酸乙酯萃取,收集乙酸乙酯层,如此反复萃取直至乙酸乙酯层无色;所得乙酸乙酯相浓缩至干,得到残余物;
(3)将步骤(2)的残余物以甲醇复溶,复溶液经0.45μm滤膜过滤,然后用SephadexLH20凝胶柱进行洗脱,每次上样约2mL,以甲醇进行洗脱,直至凝胶柱无色;期间用硅胶板检测(层析法)并收集含有五没食子酰葡萄糖的所有洗脱液,层析液为氯仿:甲醇:甲酸:水=65:25:3:4;合并洗脱液后,再以0.45μm滤膜过滤;
(4)将步骤(3)过滤后的洗脱液用真空冷冻干燥机冻干,得到芍药提取物。
对比例1
本对比例提供一种芍药提取物的制备方法,其步骤同实施例1,主要区别在于:步骤(3)中,以乙醇进行洗脱。
具体步骤如下:
(1)取芍药根,粉碎,过200目筛,得到芍药根粉;
(2)取步骤(1)得到的芍药根粉5g,加入250mL甲醇水溶液(体积浓度为50%),在温度为70℃条件下冷凝回流提取60min;所得提取液混匀、冷却,4500r/min离心20min,以孔径15μm的滤纸进行减压过滤;所得滤液浓缩蒸发甲醇,剩余液用乙酸乙酯萃取,收集乙酸乙酯层,如此反复萃取直至乙酸乙酯层无色;所得乙酸乙酯相浓缩至干,得到残余物;
(3)将步骤(2)的残余物以甲醇复溶,复溶液经0.45μm滤膜过滤,然后用SephadexLH20凝胶柱进行洗脱,每次上样约2mL,以乙醇进行洗脱,直至凝胶柱无色;期间用硅胶板检测(层析法)并收集含有五没食子酰葡萄糖的所有洗脱液,层析液为氯仿:甲醇:甲酸:水=65:25:3:4;合并洗脱液后,再以0.45μm滤膜过滤;
(4)将步骤(3)过滤后的洗脱液用真空冷冻干燥机冻干,得到芍药提取物。
对比例2
本对比例提供一种芍药提取物的制备方法,其步骤同实施例1,主要区别在于:步骤(2)中,以乙醇水溶液(体积浓度为40%)进行回流提取。
具体步骤如下:
(1)取芍药根,粉碎,过200目筛,得到芍药根粉;
(2)取步骤(1)得到的芍药根粉5g,加入250mL乙醇水溶液(体积浓度为40%),在温度为70℃条件下冷凝回流提取60min;所得提取液混匀、冷却,4500r/min离心20min,以孔径15μm的滤纸进行减压过滤;所得滤液浓缩蒸发甲醇,剩余液用乙酸乙酯萃取,收集乙酸乙酯层,如此反复萃取直至乙酸乙酯层无色;所得乙酸乙酯相浓缩至干,得到残余物;
(3)将步骤(2)的残余物以甲醇复溶,复溶液经0.45μm滤膜过滤,然后用SephadexLH20凝胶柱进行洗脱,每次上样约2mL,以甲醇进行洗脱,直至凝胶柱无色;期间用硅胶板检测(层析法)并收集含有五没食子酰葡萄糖的所有洗脱液,层析液为氯仿:甲醇:甲酸:水=65:25:3:4;合并洗脱液后,再以0.45μm滤膜过滤;
(4)将步骤(3)过滤后的洗脱液用真空冷冻干燥机冻干,得到芍药提取物。
对比例3
本实施例提供一种芍药提取物的制备方法,其步骤同实施例1,主要区别在于:步骤(2)中,剩余液用乙酸甲酯萃取。
具体步骤如下:
(1)取芍药根,粉碎,过200目筛,得到芍药根粉;
(2)取步骤(1)得到的芍药根粉5g,加入250mL甲醇水溶液(体积浓度为50%),在温度为70℃条件下冷凝回流提取60min;所得提取液混匀、冷却,4500r/min离心20min,以孔径15μm的滤纸进行减压过滤;所得滤液浓缩蒸发甲醇,剩余液用乙酸甲酯萃取,收集乙酸甲酯层,如此反复萃取直至乙酸甲酯层无色;所得乙酸甲酯相浓缩至干,得到残余物;
(3)将步骤(2)的残余物以甲醇复溶,复溶液经0.45μm滤膜过滤,然后用SephadexLH20凝胶柱进行洗脱,每次上样约2mL,以甲醇进行洗脱,直至凝胶柱无色;期间用硅胶板检测(层析法)并收集含有五没食子酰葡萄糖的所有洗脱液,层析液为氯仿:甲醇:甲酸:水=65:25:3:4;合并洗脱液后,再以0.45μm滤膜过滤;
(4)将步骤(3)过滤后的洗脱液用真空冷冻干燥机冻干,得到芍药提取物。
对实施例和对比例制备得到的芍药提取物进行检测。
1、五没食子酰葡萄糖含量检测
采用高效液相色谱法测定实施例1的芍药提取物(样品)的有效成分。
供试品制备:以甲醇溶解样品,并稀释成浓度为400ng/μL。
色谱条件:色谱柱:Agilent XDB C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%的磷酸溶液(体积浓度),按20:80的体积洗脱:流速:1.0mL/min;进样量:10uL;柱温:25℃;测定波长:275nm。
标准曲线绘制:取五没食子酰葡萄糖标准品,用甲醇配制1mg/mL的五没食子酰葡萄糖储备液;然后用甲醇分别将储备液准确稀释为200ng/μL、400ng/μL、600ng/μL、800ng/μL、1000ng/μL的待测液,按照以上色谱条件注入高效液相色谱仪,记录色谱图。以五没食子酰葡萄糖浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,结果见图1。
测定:将供试品按照以上色谱条件注入高效液相色谱仪,记录色谱图,结合图1标准曲线可以计算得出样品中五没食子酰葡萄糖的含量。各实施例、对比例的计算结果如下表1所示。
表1
2、功效检测
2.1 DPPH·清除实验测试抗氧化
DPPH·又称1,1-二苯基-2-三硝基苯肼,是一种稳定的氮中心的自由基,它的稳定性主要来自共振稳定作用的3个苯环的空间障碍,使夹在中间的氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。它的无水乙醇溶液呈紫色,在517nm波长处有最大吸收,吸光度与浓度呈线性关系。向其中加入自由基清除剂时,可以结合或替代DPPH·,使自由基数量减少,吸光度变小,溶液颜色变浅,借此可评价自由基清除剂清除自由基的能力。
配制0.2mmol/L的DPPH·甲醇(或无水乙醇)溶液;配制200mg/mL浓度的待测样品的甲醇溶液(实施例1~5、对比例1~2的芍药提取物);以VC作为阳性对照样品。
分别吸取2mL样品溶液和2mLDPPH·溶液于具塞试管中,混匀,避光反应30min,测定517nm波长下的吸光值A1;分别吸取2mL样品溶液和2mL甲醇于具塞试管中,混匀,避光反应30min,测定517nm波长下的吸光值A2;分别吸取2mLDPPH·溶液和2mL甲醇于具塞试管中,混匀,避光反应30min,测定517nm波长下的吸光值A0;每个样品做3个平行样。
结果如下表2所示:
表2
样品 | DPPH清除率/% |
实施例1 | 85.37% |
实施例2 | 83.55% |
实施例3 | 84.32% |
实施例4 | 82.16% |
对比例1 | 84.32% |
对比例2 | 80.46% |
对比例3 | 83.79% |
阳性对照样品 | 95% |
2.2铁氰化钾法测定还原能力
抗氧化剂通过自身的还原作用,给出电子而清除自由基,还原能力越强,抗氧化性越强。样品能使铁氰化钾的三价铁还原成二价铁(亚铁氰化钾),二价铁进一步再和三价铁的反应下生成在700nm出有最大吸光度的普鲁士蓝,因此测定700nm处的高低可以间接反映抗氧化剂的还原能力的大小,吸光度越大,还原能力越强。
分别配制以下试剂(质量浓度):①1%铁氰化钾溶液;②0.2mol/L磷酸缓冲液(pH=6.6);③0.1%氯化铁溶液;④10%三氯乙酸溶液。
取2mL样品溶液(200mg/mL浓度的待测样品的甲醇溶液),加入5mL的0.2mol/LpH=6.6的磷酸缓冲溶液,再加入5mL的1%铁氰化钾溶液,50℃条件下保温20min。急速冷却,加入5mL的10%三氯乙酸,混匀。3000r/min离心10min,取上清液2.5mL,加入2.5mL蒸馏水和0.5mL的0.1%氯化铁溶液,反应10min测定700nm波长条件下的吸光值,以蒸馏水代替样品溶为空白对照,分别测定阳性对照VC,每个样品做三次平行。结果如下表3所示:
表3
样品 | 吸光值 |
实施例1 | 0.5657 |
实施例2 | 0.5343 |
实施例3 | 0.542 |
实施例4 | 0.5346 |
对比例1 | 0.5316 |
对比例2 | 0.5623 |
对比例3 | 0.6322 |
阳性对照样品 | 1.1312 |
2.3 ABTS+清除能力测定
ABTS法测定抗氧化能力的原理是,ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的ABTS+,在抗氧化物存在时ABTS+的产生会被抑制,在734nm测定ABTS的吸光度即可测定并计算出样品的总抗氧化能力。
分别配置以下试剂:①2.45mmol/L过硫酸钾溶液;②10mmol/L的PBS磷酸盐缓冲液(pH=7.4);③7mmol/L的ABTS储备液(用已制备的溶剂①配制)。
取ABTS储备液,用无水乙醇获10mmol/L的PBS(pH=7.4)稀释60~70倍,使其在734nm处的吸光值为0.7±0.02,得到ABTS工作液;吸取6mLABTS工作液加入60μL样品溶液(200mg/mL浓度的待测样品的甲醇溶液),振荡10s,30℃条件下静置6min,测定734nm下的吸光值A样品;吸取6mL无水乙醇或PBS缓冲液加入60μL样品溶液,振荡10s,30℃条件下静置6min,测定734nm下的吸光值A样品空白;吸取6mLABTS工作液加入60μL无水乙醇或PBS缓冲液,振荡10s,30℃条件下静置6min,测定734nm下的吸光值A试剂空白。以VC作为样品的阳性对照,每个样品做三次平行。
结果如下表4所示:
表4
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合,为使描述简洁,未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述,然而,只要这些技术特征的组合不存在矛盾,都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种芍药提取物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
取芍药根,粉碎,制备芍药根粉;所述芍药根粉的粒径不大于850μm;
以体积浓度为45~55%的甲醇水溶液对所述芍药根粉进行提取,所得提取液浓缩,制备第一提取物;所述提取的方式为加热至30~75℃回流提取30~150min;
于所述第一提取物中加入乙酸乙酯进行萃取,收集乙酸乙酯相,浓缩至干,制备第二提取物;
将所述第二提取物复溶后,以甲醇为洗脱液进行凝胶洗脱,检测并收集含有标志物的洗脱液;所述标志物为五没食子酰葡萄糖。
2.根据权利要求1所述的芍药提取物的制备方法,其特征在于,所述甲醇水溶液中甲醇的体积浓度为48~52%。
3.根据权利要求1所述的芍药提取物的制备方法,其特征在于,所述提取的方式为加热至60~75℃回流提取50~70min。
4.根据权利要求1所述的芍药提取物的制备方法,其特征在于,所述甲醇水溶液的用量为每克芍药根加入10~125mL。
5.根据权利要求1所述的芍药提取物的制备方法,其特征在于,所述凝胶洗脱采用的凝胶柱为Sephadex LH20凝胶柱。
6.根据权利要求1~5任一项所述的芍药提取物的制备方法,其特征在于,所述检测是指以层析法检测所述标志物;所述层析法采用的展开剂为体积比为(15~18):(5~8):(0.5~1):1的氯仿、甲醇、甲酸和水。
7.根据权利要求1~5任一项所述的芍药提取物的制备方法,其特征在于,所述提取液先进行减压过滤,再进行所述浓缩;所述减压过滤是指以孔径10~25μm的滤纸进行减压过滤。
8.一种芍药提取物,其特征在于,采用权利要求1~7任一项所述的芍药提取物的制备方法制备得到。
9.权利要求8所述的芍药提取物在制备化妆品中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述化妆品为具有抗衰老或抗氧化功效的化妆品。
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CN114376952A (zh) * | 2021-12-31 | 2022-04-22 | 浙江大学 | 一种芍药花提取物及其制备方法和应用 |
Citations (1)
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CN101525357A (zh) * | 2008-03-07 | 2009-09-09 | 首都医科大学 | 一种从中药中分离制备五没食子酰基葡萄糖的方法 |
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