CN112220740A - 一种鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶及其制备方法和应用，属于生物医药领域。该微凝胶包括含有多羟基结构的高分子材料、含有多酚羟基结构的天然植物提取物和生理盐水。通过将高分子材料和天然植物提取物分别溶于生理盐水中然后再混合制备得到。本发明利用高分子材料的多羟基结构特性，协同天然植物提取物多酚羟基结构特性，在生理盐水中通过氢键自组装的方式形成微凝胶，在鼻腔原位迅速成膜，具有良好的保湿、抗菌和消炎的作用，且微凝胶成分简单，无毒副作用，可生物降解，生物相容性好，治疗效果好，成本低廉，制备过程只需简单的物理混合，操作简单，设备要求低，在鼻炎领域有很好的应用前景。

Description

一种鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶及其制备方法和应用。

背景技术

鼻炎是一种非常普遍的鼻黏膜慢性炎症反应性疾病，全球有超过10亿鼻炎患者，中国已超4亿。90％鼻咽癌患者因鼻炎致癌，每年死亡20万人以上，鼻炎的预防和治疗均迫在眉睫。我国是鼻咽癌高发国之一，全世界80％的鼻咽癌发生在我国。由于环境污染，鼻炎患者的人群仍在增大。流行病学研究表明，有20-30％的成年人和40％的儿童患有鼻炎。鼻炎特点主要在于持续性炎症和微生物感染，尽管不是严重的疾病，但它具有许多并发症，涉及鼻气道高反应性，神经系统的紊乱和神经肽的释放，其特征是出现某些症状，包括发痒，打喷嚏，流鼻涕，鼻充血和嗅觉方面的日常变化。频繁发作的变应性鼻炎症状会严重影响患者的生活质量和工作，给个人和社会造成巨大的负担。故针对该病得治疗研究具有重要的临床价值。

临床治疗该病的常用药物多种多样，涵盖了激素类、抗组胺药、肥大细胞稳定剂、减轻充血剂和各类中药等。虽然这些药物有一定的疗效，但多数为单方制剂，疗效单一，易发生耐药性，且剂型多为固体口服制剂(片剂、胶囊等)和液体滴鼻剂，前者全身(尤其是中枢)副作用大，从而导致治疗效果不佳；后者在鼻腔滞留时间太短，可通过鼻腔的黏膜纤毛迅速将其清除，重复给药对患者而言非常不便，临床使用顺应性不尽如人意。此外，这种治疗方法周期长，有些药物价格昂贵。因此，寻找抗过敏源、抗菌、抗病毒效果好，功效长，使用简便，价格适中的药剂依旧是鼻炎临床预防和治疗的需要。为了延长药剂在鼻腔中的滞留时间，并达到物理隔绝的作用，使用黏附性强的天然材料是一种很有前途的方法。

中国发明专利CN106265664B公开了一种复方卢帕他定的生物黏附性鼻用凝胶剂，该凝胶是由如下原料药制成：卢帕他定及其盐、盐酸赛洛唑啉/萘甲唑啉/盐酸伪麻黄碱、呋喃西林、高分子凝胶材料、生物粘附剂、缓冲盐、保湿剂、灭菌注射用水，上述组合物经常规工艺方法混合后制成凝胶剂。使用该组合物制成的凝胶剂对某些患者见效快，对其他患者则没有明显的疗效，也即产品的受用有限，并且该组合使用到几种抗过敏药物，易产生耐药性。

中国发明专利CN108158978A公开了一种高分子水性凝胶，该凝胶是由如下原料药制成：卡波姆、甘油、聚山梨酯、纯化水，采用Na0H溶液调节pH，上述组合物经化学工艺方法混合后制成凝胶。该水性凝胶制备工艺相对复杂，仅起到一个物理阻隔吸附的作用，且并没有显示明显的消炎效果，且黏附性太强可能导致鼻腔有异物感，用户体验感有待加强。因此，临床亟待一种疗效全面、使用方便、用药次数少、用户体验感佳的新型预防和治疗鼻炎的产品。

发明内容

本发明的目的在于提供一种鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶及其制备方法和应用。该微凝胶具有保湿、抗菌、消炎功能，可在鼻腔内迅速成膜，进行物理隔绝，微凝胶在鼻腔内滞留时间长，减少使用频率，且毒副作用小，生物相容性优异，可持续使用。

为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案:

提供一种鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶，包括含有多羟基结构的高分子材料、含有多酚羟基结构的天然植物提取物和生理盐水。

按上述方案，所述高分子材料和天然植物提取物均为国家药品监督管理局批准的可被生物降解且生物相容性优异的生物医用材料。

按上述方案，按质量百分比计，所述高分子材料占所述生理盐水的0.01-1％，所述天然植物提取物占所述生理盐水的0.10-2％。

按上述方案，所述高分子材料和所述天然植物提取物的质量比为0.10-1：1。

按上述方案，所述高分子材料为天然高分子材料或天然高分子改性材料。

按上述方案，所述高分子材料为羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、透明质酸、壳聚糖中的至少一种。

按上述方案，所述高分子材料为壳聚糖时，所述微凝胶还包括柠檬酸。柠檬酸主要起到促溶作用，促进壳聚糖在生理盐水中的溶解。

按上述方案，所述天然植物提取物为表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素、茶多酚中的至少一种。

按上述方案，所述天然植物提取物从天然茶叶中提取得到。

一种上述鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶的制备方法，具体步骤如下：

(1)将含有多羟基结构的高分子材料溶解于生理盐水中形成溶液；

(2)将含有多酚羟基结构的天然植物提取物溶解于生理盐水中形成溶液；

(3)分别将高分子材料溶液与天然植物提取物溶液均匀混合，即得鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶。

一种上述鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶在作为鼻炎预防或治疗的药物中的应用。

本发明具有以下优点和有益效果：

1.本发明提供一种抗菌消炎微凝胶，利用高分子材料的多羟基结构特性，协同天然植物提取物多酚羟基结构特性，在生理盐水中通过氢键自组装的方式形成微凝胶，在鼻腔原位迅速成膜，微凝胶在鼻腔中的滞留时间长，微凝胶的保湿性能以及对鼻腔的黏附性好；同时天然植物提取物具有显著的抗菌效果，所得微凝胶具有良好的保湿、抗菌和消炎的作用，可实现对鼻炎的预防或治疗。

2.本发明提供的微凝胶成分简单，浓度低，无毒副作用，可生物降解，生物相容性好，治疗效果明显，治愈率高，治疗时间短，且成本低廉，制备过程只需简单的物理混合，操作简单，设备要求低，在鼻炎领域有很好的应用前景。

附图说明

图1为实施例1制备得到的微凝胶的扫描电子显微镜图。

图2为实施例1制备得到的微凝胶和生理盐水的抗菌效果对比图，其中左边为生理盐水抗菌效果图，右边为微凝胶抗菌效果图。

图3为实施例1制备得到的微凝胶的细胞毒性测试效果图。

图4为实施例1制备得到的微凝胶进行鼻炎小鼠治疗14天后的行为学研究图。

图5为实施例1制备得到的微凝胶进行鼻炎小鼠治疗14天后的体内消炎效果图，其中：A为正常小鼠鼻黏膜病理切片图，B为鼻炎小鼠鼻黏膜病理切片图，C为治疗14天后小鼠鼻黏膜病理切片图。

具体实施方式

通过以下详细说明结合附图可以进一步理解本发明的特点和优点。所提供的实施例仅是对本发明方法的说明，而不以任何方式限制本发明揭示的其余内容。

实施例1

提供一种鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶的制备方法，具体步骤如下：

(1)将羧甲基纤维素钠溶解于生理盐水中形成0.05wt％溶液。

(2)将茶多酚溶解于生理盐水中形成0.50wt％溶液。

(3)分别将羧甲基纤维素钠溶液与茶多酚溶液均匀混合形成微凝胶。

图1为本实施例制备得到的微凝胶的扫描电子显微镜图。通过将制备得到的微凝胶滴到玻片上，待10min自然干燥后进行观测，结果如图1所示，微凝胶呈膜状，说明此微凝胶具有一定的物理隔绝作用，可以有效阻止病原微生物对鼻腔的进步损坏，适宜实际应用。

图2为微凝胶的抗菌效果图。测试方法为：在LB琼脂板上均匀涂附100μL大肠杆菌MG1655菌液(10⁶CFU/mL)，分别用3片3mm直径的纸片分别在生理盐水和微凝胶中润湿后均匀放置在涂附菌液后的LB琼脂板上，在37℃培养箱孵育一天后观察抗菌效果。结果如图2所示，用微凝胶孵育后的琼脂板上出现了明显的抑菌环，该微凝胶具有显著的抗菌特性。

图3为测试该微凝胶对小鼠成纤维细胞的细胞毒性效果图，具体方法为：小鼠成纤维细胞以6000个细胞/孔的密度接种在96孔板中，用100μL培养基培养24h。然后，将100μL用培养基配制的微凝胶梯度溶液分别加入到各孔中。所有细胞在避光条件下37℃培养24h。随后在每个孔中加入20μL 5mg/mL的MTT(MTT溶解在PBS缓冲液中)。共培养4h后，吸出培养基，加入150μL二甲亚砜。酶标仪测量每个孔中570nm处的吸光值，计算细胞存活率，进而得到微凝胶对小鼠成纤维细胞的毒性。结果如图3所示，小鼠成纤维细胞存活率在各浓度下均大于95％左右，微凝胶溶液具有较小的细胞毒性，生物安全性良好。

图4为测试微凝胶对于鼻炎小鼠行为的影响和治疗效果图，具体方法为：在6～8周小白鼠(BALB/c)鼻腔滴注致敏溶液建模完成后，在小鼠鼻腔分别滴注5μL微凝胶溶液对小鼠进行14天的治疗，对小鼠进行3min的挠鼻频率记录，并做数据分析。结果如图4所示，相比各组，该微凝胶显著地减少小鼠由抗原攻击引起的挠鼻次数，鼻炎症状得到缓解。

在对小鼠滴鼻给药14天后，取小鼠鼻黏膜进行病理分析。结果如图5所示，用微凝胶治疗后，鼻炎小鼠炎性细胞含量显著降低，该微凝胶有显著地抗炎特性。

实施例2

提供一种鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶的制备方法，具体步骤如下：

(1)将壳聚糖溶解于含4wt％柠檬酸的生理盐水中形成0.05wt％溶液。

(2)将茶多酚溶解于生理盐水中形成0.50wt％溶液。

(3)分别将壳聚糖溶液与茶多酚溶液均匀混合形成微凝胶。

通过将制备得到的微凝胶滴到玻片上，待10min自然干燥后进行观测，微凝胶形成膜状物。

将本实施例中制得的微凝胶对小鼠成纤维细胞进行急性毒性的实验。具体方法为：小鼠成纤维细胞以6000个细胞/孔的密度接种在96孔板中，用100μL培养基培养24h。然后，将100μL用培养基配制的微凝胶梯度溶液分别加入到各孔中。所有细胞在避光条件下37℃培养24h。随后在每个孔中加入20μL 5mg/mL的MTT(MTT溶解在PBS缓冲液中)。共培养4h后，吸出培养基，加入150μL二甲亚砜。酶标仪测量每个孔中570nm处的吸光值，计算细胞存活率，进而得到微凝胶对小鼠成纤维细胞的毒性。结果发现，小鼠成纤维细胞存活率均大于90％，该微凝胶溶液具有较小的细胞毒性，生物安全性较高。

实施例3

提供一种鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶的制备方法，具体步骤如下：

(1)将羟丙甲基纤维素溶解于生理盐水中形成0.50wt％溶液。

(2)将表没食子儿茶素没食子酸酯溶解于生理盐水中形成0.50wt％溶液。

(3)分别将羟丙甲基纤维素溶液与羟丙甲基纤维素溶液均匀混合形成微凝胶。

通过将制备得到的微凝胶滴到玻片上，待10min自然干燥后进行观测，观察到了膜状物的存在。

测试该微凝胶对于鼻炎小鼠行为的影响和治疗效果。具体方法为：在6～8周小白鼠(BALB/c)鼻腔滴注致敏溶液建模完成后，在小鼠鼻腔分别滴注5μL微凝胶溶液对小鼠进行14天的治疗，对小鼠进行3min的挠鼻频率记录，并做数据分析，结果症状得到缓解。

在对小鼠滴鼻给药14天后，取小鼠鼻黏膜进行病理分析。结果显示，用微凝胶治疗后，鼻炎小鼠炎性细胞含量显著降低，该微凝胶并未达到很好的治疗效果，所以此配方适宜实际应用。

Claims (10)

1.一种鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶，其特征在于，包括含有多羟基结构的高分子材料、含有多酚羟基结构的天然植物提取物和生理盐水。

2.根据权利要求1所述的微凝胶，其特征在于，按质量百分比计，所述高分子材料占所述生理盐水的0.01-1％，所述天然植物提取物占所述生理盐水的0.10-2％。

3.根据权利要求1所述的微凝胶，其特征在于，所述高分子材料和所述天然植物提取物的质量比为0.10-1：1。

4.根据权利要求1所述的微凝胶，其特征在于，所述高分子材料为天然高分子材料或天然高分子改性材料。

5.根据权利要求1所述的微凝胶，其特征在于，所述高分子材料为羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、透明质酸、壳聚糖中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的微凝胶，其特征在于，所述高分子材料为壳聚糖时，所述微凝胶还包括柠檬酸。

7.根据权利要求1所述的微凝胶，其特征在于，所述天然植物提取物为表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶素、茶多酚中的至少一种。

8.根据权利要求1所述的微凝胶，其特征在于，所述天然植物提取物从天然茶叶中提取得到。

9.一种权利要求1所述的鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)将含有多羟基结构的高分子材料溶解于生理盐水中形成溶液；

(2)将含有多酚羟基结构的天然植物提取物溶解于生理盐水中形成溶液；

(3)分别将高分子材料溶液与天然植物提取物溶液均匀混合，即得鼻炎预防或治疗用抗菌消炎微凝胶。

10.一种权利要求1-8任一项所述的微凝胶在作为鼻炎预防或治疗的药物中的应用。

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