CN112220102A - 一种含透明质酸和依克多因的电子烟液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含透明质酸和依克多因的电子烟液及其制备方法，本发明首次提出在电子烟液中添加生物活性成分透明质酸或其盐和依克多因，利用二者的协同增效作用，通过雾化形式进入口腔和呼吸道，对受损细胞进行修复，有比较明显的医疗保健功效。本发明电子烟液适用于蒸汽式电子烟，在消费者获得吸食卷烟感受的同时，还具有缓解因吸烟导致的口腔和呼吸道疾病的作用，同时具有增强免疫功能、抗炎抗肿瘤的功效。

Description

一种含透明质酸和依克多因的电子烟液及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种含有透明质酸和依克多因的电子烟液及其制备方法，属于电子烟技术领域。

背景技术

吸烟有危害，不仅仅危害人体健康，还会对社会产生不良的影响。吸烟对呼吸道危害最大，长期的吸烟会引起慢性支气管炎，烟焦油吸附到肺泡上影响肺泡的扩张会引起阻塞性肺气肿，平时患者会表现为慢性的咳嗽、咳痰伴有气促的临床症状。吸烟对牙也有不良的影响，据资料显示，吸烟者患牙周炎的比率是非吸烟者的三倍之多，而重度吸烟者可高达七倍。牙周炎是发生在牙周组织的疾病，是一种慢性炎症，可侵犯牙龈、牙周、牙周膜、牙周韧带以及牙槽骨等组织，其中口臭、牙龈出血和牙龈肿胀是牙周病比较典型的症状。在我国，成人牙周炎的发病率高达80%~90%，随着年龄的增长发病率也会增加。吸烟可以促进牙周病的发生，加重牙周病的病情。现代口腔医学研究还证明，吸烟时的尼古丁化学刺激和温度刺激等首先对口腔造成损伤，同时吸烟又使唾液中免疫球蛋白量显著降低，局部抵抗力大大下降，可引起多种口腔疾病。

为了减少吸烟对人体自身以及他人和环境造成的危害，目前已经有新型的烟草制品问市。新型烟草制品可以分为三大类：电子烟、加热不燃烧烟草制品和无烟气烟草制品，这些烟草制品有三个共同特征：不用燃烧、提供尼古丁和基本无焦油。电子烟又称蒸汽式电子烟，通过雾化器将含有尼古丁的特制烟油雾化后形成蒸汽，供用户吸食，电子烟几乎不含有焦油等有害成分，减小吸食传统卷烟带来的伤害。

专利CN111202259 A公开了一种无烟雾的电子烟液，该电子烟液由丙二醇和香精组成，配方中去除了甘油以及尼古丁，虽然没有了烟雾，但是吸烟体验会大打折扣，很难享受到尼古丁的刺激作用。专利CN111297907 A公开了一种修复肺脏组织损伤的电子烟油，配方中活性成分为支气管基底层细胞上清液，该活性成分提取制备工艺复杂，且在电子烟油中的活性维持时间未有研究。专利CN111418882 A公开了一种止咳烟油，该烟油由A和B两部分组成，需要同时分别进行雾化后吸食，对电子烟烟具具有一定的选择性，使用便利性较差。

发明内容

本发明的目的是提供一种电子烟液，该电子烟液中含有透明质酸或其盐和依克多因，可以缓解吸收过程中尼古丁对口腔、呼吸道和肺部的刺激性，减少电子烟液对身体的危害，并且该电子烟液适合于蒸汽式电子烟，使用方便。

依克多因是一种氨基酸衍生物，不仅能够平衡细胞渗透压，还能在高温、严寒、干旱、极端pH值、高压、高盐、高辐射等逆境条件下，对酶、DNA、蛋白质、核酸、细胞膜及整个细胞具有良好的保护作用。依克多因具有隔离刺激源、增强皮肤免疫力、加速细胞修复、修复紫外线损伤、拯救皮肤锁水能力和抗衰抗皱的功效，主要用在化妆品领域，此外，在干眼症、特应性皮炎、放射防护等领域也有应用。目前未见依克多因在烟草制品中的应用。

透明质酸是由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖双糖单位组成的一种直链大分子酸性粘多糖，又叫玻尿酸，它广泛存在于人、动物、微生物体内，无种属特异性，无毒，无刺激性，生物相容性好，具有很高的安全性。常用的透明质酸有透明质酸、透明质酸盐或者它们的组合。其中，分子量小于等于10 kDa的透明质酸或其盐又称为寡聚透明质酸或其盐，拥有更高的生物活性，具有透皮吸收、修复受损细胞、清除自由基、深层保湿和抗衰老的功效。透明质酸在化妆品领域有广泛的应用，其在其他领域也多有涉及，但在烟草制品领域报道的较少。

在实验研究时发现，透明质酸或其盐和依克多因两者复配对于吸烟造成的口腔、呼吸道刺激有很好的修复和保健效果，因此得出了本发明将透明质酸或其盐和依克多因加入电子烟液中的思路。

本发明提供了一种电子烟液，含有透明质酸或其盐和依克多因这两种成分。其中，透明质酸或其盐的含量为0.01~2wt%，依克多因的含量为0.1~5wt%。

优选的，透明质酸或其盐的含量为0.2~2wt%，依克多因的含量为3~5wt%。

进一步的，所述透明质酸或其盐的分子量优选小于等于10 kDa，例如1-10 kDa。该分子量具有更高的生物活性，修复能力更强。所述透明质酸的盐可以是透明质酸的钠盐、钾盐、钙盐、锌盐等，常用的为钠盐。

进一步的，所述透明质酸或其盐和依克多因为医药级原料。透明质酸或其盐和依克多因可以通过各种现有技术报道的方法制备，优选采用微生物发酵法，这样得到的产品安全性更高。

进一步的，上述电子烟液中，除了透明质酸或其盐和依克多因外，还可以包括一些电子烟液中常见的成分，例如尼古丁、香料、丙二醇、甘油、水等，这些成分可以含有一种，也可以含有多种。

进一步的，尼古丁是一种令人上瘾的物质，少量并不致癌。常有的尼古丁为尼古丁碱、尼古丁盐或者这两者的组合。本发明电子烟液中可以含有少量的尼古丁，也可以不含尼古丁，尼古丁的含量可以是0-5wt%。当含有尼古丁时，可以缓解烟瘾，提升电子烟液的口感，尼古丁的含量优选可以为1-5wt%。

进一步的，香料的作用是调整电子烟的口感和风味，其可以是天然香料，也可以是合成香料，还可以是这两种的组合，香料可以是一种，也可以是多种。可选的香料有甜橙油、柠檬油、L-薄荷脑、乙基香兰素、乙基麦芽酚、芳樟醇、甲基环戊烷酮、β-金刚烷酮、β-紫罗兰酮、乙酰基吡嗪、α-紫罗兰酮等。香料的含量可以根据口味进行调整，一般为0.001~1 wt%。

进一步的，丙二醇和甘油是电子烟液常用的成分，作为各种有效成分的载体，也能增加电子烟液的口感。所述丙二醇和甘油为食品级原料，丙二醇的含量一般为20~80wt%，甘油的含量一般为10~70wt%。

进一步的，水作为溶剂，用于溶解透明质酸或其盐，其用量可以根据透明质酸或其盐的含量而调整。在上述透明质酸或其盐的含量范围内，水的含量可选为1~10%。

在本发明某一具体实施方式中，提供了一种电子烟液，其包括以下重量百分含量的组分：尼古丁0~5%，依克多因0.1~5%，透明质酸或其盐0.01~2%，香料0.001~1%，水1~10%，丙二醇20~80%，甘油10~70%。

在本发明另一实施方式中，提供了一种电子烟液，其包括以下重量百分含量的组分：尼古丁1~5%，依克多因0.1~5%，透明质酸或其盐0.01~2%，香料0.001~1%，水1~10%，丙二醇20~80%，甘油10~70%。

本发明还提供了一种电子烟液的制备方法，该方法包括以下步骤：

（1）将丙二醇、甘油、尼古丁、依克多因和香料搅拌混合，溶解完全，得A组分；

（2）将水和透明质酸或其盐搅拌混合，溶解完全，得B组分；

（3）将B组分加入A组分中，搅拌混合均匀，得电子烟液。

进一步的，上述步骤（1）-（3）中，各原料均在室温下搅拌混合，搅拌速度均为50~200rpm。

本发明具有如下优点：

1. 本发明首次提出在电子烟液中添加生物活性成分透明质酸或其盐和依克多因，利用二者的协同增效作用，通过雾化形式进入口腔和呼吸道，对受损细胞进行修复，有比较明显的医疗保健功效。

2.本发明含透明质酸或其盐和依克多因的电子烟液适用于蒸汽式电子烟，在消费者获得吸食卷烟感受的同时，还具有缓解因吸烟导致的口腔和呼吸道疾病的作用，例如可以缓解牙周炎以及烟气刺激导致的咳嗽，同时具有增强免疫功能、抗炎抗肿瘤的功效。

3.本发明选用的透明质酸或其盐和依克多因均为纯天然发酵制备而来，经过多步骤纯化得到的高纯度医药级产品，极大地保证了消费者的安全体验。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明，下述说明仅是示例性的，并不对其内容进行限制。

下述实施例中，所用透明质酸或其盐和依克多因来自华熙生物科技股份有限公司。

实施例1

（1）在洁净的反应釜中，按照重量百分比，依次加入70%的丙二醇、20%的甘油、1%的尼古丁、3%的依克多因和0.05%的香料，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得A组分。

（2）在另一洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入5.45%的去离子水和0.5%分子量为2 kDa的透明质酸，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得B组分。

（3）将B组分加入至A组分中，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌30min，得到电子烟液。

实施例2

（1）在洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入30%的丙二醇、60%的甘油、3%的尼古丁、5%的依克多因和0.5%的香料，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得A组分。

（2）在另一洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入1.2%的去离子水和0.3%分子量为 2 kDa的透明质酸，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得B组分。

（3）将B组分加入至A组分中，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌30min，得到电子烟液。

实施例3

（1）在洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入40%的丙二醇、46%的甘油、4%的尼古丁、0.1%的依克多因和0.001%的香料，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得A组分。

（2）在另一洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入9.699%的去离子水和0.2%分子量为5 kDa的透明质酸，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得B组分。

（3）将B组分加入至A组分中，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌30min，得到电子烟液。

实施例4

（1）在洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入20%的丙二醇、70%的甘油、5%的依克多因和1%的香料，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得A组分。

（2）在另一洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入3.99%的去离子水和0.01%分子量为8 kDa的透明质酸，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得B组分。

（3）将B组分加入至A组分中，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌30min，得到电子烟液。

实施例5

（1）在洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入20%的丙二醇、65%的甘油、5%的尼古丁、5%的依克多因和1%的香料，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得A组分。

（2）在另一洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入3.99%的去离子水和0.01%分子量为8 kDa的透明质酸，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得B组分。

（3）将B组分加入至A组分中，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌30min，得到电子烟液。

实施例6

（1）在洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入80%的丙二醇、10%的甘油、5%的尼古丁、0.1%的依克多因和0.2%的香料，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得A组分。

（2）在另一洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入4.5%的去离子水和0.2%分子量为 5 kDa的透明质酸，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得B组分。

（3）将B组分加入至A组分中，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌30min，得到电子烟液。

实施例7

（1）在洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入40%的丙二醇、42%的甘油、3%的尼古丁、3%的依克多因和0.2%的香料，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得A组分。

（2）在另一洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入9.8%的去离子水和2%分子量为 2 kDa的透明质酸，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得B组分。

（3）将B组分加入至A组分中，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌30min，得到电子烟液。

对比例1

（1）在洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入43%的丙二醇、42%的甘油、3%的尼古丁和0.2%的香料，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得A组分。

（2）在另一洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入9.8%的去离子水和2%分子量为2 kDa的透明质酸，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得B组分。

（3）将B组分加入至A组分中，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌30min，得到电子烟液。

对比例2

（1）在洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入42%的丙二醇、42%的甘油、3%的尼古丁、3%的依克多因和0.2%的香料，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得A组分。

（2）将9.8%的去离子水加入至A组分中，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌30min，得到电子烟液。

对比例3

（1）在洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入44%的丙二醇、43%的甘油、3%的尼古丁和0.2%的香料，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得A组分。

（2）将9.8%的去离子水加入至A组分中，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌30min，得到电子烟液。

对比例4

（1）在洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入40%的丙二醇、42%的甘油、3%的尼古丁、3%的依克多因和0.2%的香料，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得A组分。

（2）在另一洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入9.8%的去离子水和2%黄芩水提取物，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得B组分。

（3）将B组分加入至A组分中，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌30min，得到电子烟液。

对比例5

（1）在洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入40%的丙二醇、42%的甘油、3%的尼古丁和0.2%的香料，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得A组分。

（2）在另一洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入10.8%的去离子水、2%分子量为 2 kDa的透明质酸、1.5%牛磺酸、0.5%维生素B，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得B组分。

（3）将B组分加入至A组分中，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌30min，得到电子烟液。

对比例6

（1）在洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入40%的丙二醇、42%的甘油、3%的尼古丁、3%的依克多因和0.2%的香料，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得A组分。

（2）在另一洁净反应釜中，按照重量百分比，依次加入9.8%的去离子水和2%分子量为40 kDa的透明质酸，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌溶解完全，得B组分，呈凝胶状。

（3）将B组分加入至A组分中，开启搅拌，转速为150rpm，室温下搅拌30min， B组分变为球状，未制备成电子烟液。

细胞毒性试验

电子烟烟气的捕集及测试样品制备：电子烟储液腔中分别精确装入实施例1-7和对比例1-5的电子烟液1mL，吸烟机器人按照Health Canada深度抽吸方式，每吸8口作为一支烟，烟气经滤片捕集后, 用PBS配成150μg/mL的电子烟气提取物，备用。

中性红细胞毒性检测方法：

每一组剂量分别制备6孔平行样。取处于对数生长期的CHO-K1（中国仓鼠卵巢细胞）和MRC-5（人胚肺成纤维细胞）细胞接种于96孔板中，调整细胞密度为15000个/孔，每孔100μL，置于二氧化碳培养箱中培养24 h后， 吸去培养板中的培养液，加入100μL电子烟气提取物，继续培养24h，移去培养板中培养液，向每孔中加入1%中性红溶液200μL，继续培养3h，移去中性红溶液，用PBS充分洗去残余中性红，每孔加入1%甲醛溶液200μL固定1-2min，移去甲醛溶液，每孔加入200μL酸性乙醇溶液，震荡10min后，测定A₅₄₀吸光值（OD值），计算多孔平均值即得样品多孔平均OD值。

将测定样品多孔平均OD值方法中“加入100μL电子烟气提取物”替换为“加入100μL阳性对照物SDS溶液（用细胞培养基配制200 μg/mL的SDS溶液）”，其余操作相同，测定A₅₄₀吸光值（OD值），计算多孔平均值即得阳性对照多孔平均OD值。

将测定样品多孔平均OD值方法中“加入100μL电子烟气提取物”替换为“加入100μLPBS溶液”，其余操作相同，测定A₅₄₀吸光值（OD值），计算多孔平均值即得空白多孔平均OD值。

按照以下公式计算细胞存活率。

细胞存活率=（样品多孔平均OD值-空白多孔平均OD值）/（阳性对照多孔平均OD值-空白多孔平均OD值）×100%

细胞存活率如下表1所示：

从上述结果可以看出，在相同的试验条件下（实施例7和对比例1-5），本发明的电子烟液添加了透明质酸和依克多因，细胞存活率明显高于单独添加透明质酸、单独添加依克多因或不添加透明质酸和依克多因的对比例1-3，同时也高于对比例4-5。这说明透明质酸和依克多因同时添加于电子烟液中对由尼古丁造成的细胞损伤有一定的保护和修复功能，表现出明显的增效效果。

对口腔、呼吸道刺激试验

招募60名烟民，受试者条件为：每天吸烟量5支卷烟以上或电子烟液每天使用量3ml以上，并且伴有不同程度的牙周炎和/或气管炎。

每5人为一组，试验期间受试者停止吸食卷烟，每天使用指定配套电子烟具吸食本发明实施例和对比例的产品不少于30口，连续吸食30天。

参照GB 5606.4-2005卷烟感官技术要求制定适合本发明的综合打分评定标准：

感官质量记分采用百分制，最高分数为100分。

（1）口感：

香气浓郁，无刺激性，无杂气，余味纯净舒适，得40分；

香气较浓郁，略有刺激性，微有杂气，余味较舒适，得35分；

香气淡薄，较有刺激性，略有杂气，余味尚纯净尚舒适，得30分。

（2）口腔

口臭消失，牙龈不出血，得40分；

口臭缓解，牙龈出血缓解，得35分；

对口臭无作用，牙龈出血无作用，得30分。

（3）气管

对气管无刺激，无咳嗽或咳嗽消失，得20分；

对气管无刺激，咳嗽缓解，得15分；

对气管有刺激，咳嗽无缓解，得10分。

根据上述评定标准，在30天后各受试者对各自使用的产品在口感、口腔和气管方面的表现进行评分，然后将每种产品的评分取平均值，结果如下表2所示：

通过上述实验结果可以得出，本发明实施例的各电子烟液的得分均较高，表现出较好的综合满意水平。其中，实施例2、7与对比例1、2、3、4、5的电子烟液中尼古丁含量相同，通过它们的对比可以看出，加入依克多因和透明质酸的电子烟液在保证了吸烟者感官体验的同时，也可以明显缓解或消除因吸烟导致的口臭和咳嗽症状，具有一定的保健功能，透明质酸和依克多因的组合在缓解吸烟引起的口腔和呼吸道方面的问题上具有增效作用。

Claims (10)

1.一种电子烟液，其特征是：所述电子烟液中含有透明质酸或其盐和依克多因。

2.根据权利要求1所述的电子烟液，其特征是：透明质酸或其盐的含量为0.01~2wt%，优选为0.2~2wt%；依克多因的含量为0.1~5wt%，优选为3~5wt%。

3.根据权利要求1或2所述的电子烟液，其特征是：透明质酸或其盐的分子量小于等于10 kDa。

4.根据权利要求1、2或3所述的电子烟液，其特征是：还包括尼古丁、香料和丙二醇、甘油和水中的至少一种。

5.根据权利要求4所述的电子烟液，其特征是：所述尼古丁为尼古丁碱和/或尼古丁盐；所述香料为天然香料和/或合成香料。

6.根据权利要求4所述的电子烟液，其特征是：所述香料包括甜橙油、柠檬油、L-薄荷脑、乙基香兰素、乙基麦芽酚、芳樟醇、甲基环戊烷酮、β-金刚烷酮、β-紫罗兰酮、乙酰基吡嗪和α-紫罗兰酮中的一种或多种。

7.根据权利要求4、5或6所述的电子烟液，其特征是：尼古丁的含量为0~5wt%，优选为1-5 wt%；香料的含量为0.001~1 wt%。

8.根据权利要求4所述的电子烟液，其特征是：水的含量为1~10 wt%；丙二醇的含量为20~80wt%；甘油的含量为10~70wt%。

9.根据权利要求1所述的电子烟液，其特征是：包括以下重量百分含量的组分：尼古丁0~5%，依克多因0.1~5%，透明质酸或其盐0.01~2%，香料0.001~1%，水1~10%，丙二醇20~80%，甘油10~70%。

10.一种权利要求9所述的电子烟液的制备方法，其特征是包括以下步骤：

（1）将丙二醇、甘油、尼古丁、依克多因和香料搅拌混合，溶解完全，得A组分；

（2）将水和透明质酸或其盐搅拌混合，溶解完全，得B组分；

（3）将B组分加入A组分中，搅拌混合均匀，得电子烟液。