CN112198250A - 一种糯米赭曲霉毒素的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种糯米赭曲霉毒素的检测方法，第一步将糯米浸入水中20~28h后，打磨沥干得糯米粉，第二步取糯米粉样品置于锥形瓶中，加入三氯甲烷和磷酸溶液摇晃后用滤纸过滤得滤液，第三步取滤液置于分液漏斗中，加入碳酸氢钠溶液摇晃后静置分层得一次三氯甲烷层，第四步将一次三氯甲烷层置于分液漏斗中，加入碳酸氢钠溶液摇晃静置分层后倒去一次三氯甲烷层得碳酸氢钠溶液层，第五步将碳酸氢钠溶液层倒入分液漏斗中盐酸调节pH，加入三氯甲烷摇晃得三次三氯甲烷层，第六步将三次三氯甲烷层蒸发皿中通风吹干，加入三氯甲烷溶解蒸发皿中的残渣后浓缩至干燥赭曲霉毒素粉末。本发明可以检测出食品中是否含有赭曲霉毒素，操作简单便捷。
Description
技术领域
本发明涉及糯米检测技术领域，特别是一种糯米赭曲霉毒素的检测方法。
背景技术
在日常生活中，糯米制成糯米粉后，用来做包子、面包等点心，尤其北方人们甚得喜欢；但糯米粉的质量直接关乎着人们的健康问题，比如糯米上有农药残留，农药残留的糯米粉对人们健康影响较小；如果糯米放置久了会产生霉菌，比如黄曲霉、黑曲霉、碳黑曲霉、赭曲霉、纯绿青霉等。黄曲霉的有些菌系能产生黄曲霉毒素，黄曲霉毒素是一组化学结构类似的化合物，不仅能引起禽畜中毒致死，亦有致癌作用。某些黑曲霉、碳黑曲霉、赭曲霉、纯绿青霉会产生赭曲霉毒素。
赭曲霉毒素是一组结构类似的真菌毒素，主要危害人和动物的肾脏，赭曲霉毒素毒性最大，与人类健康最直接、产毒量最高，对农作物的污染最重，分布也最广，赭曲霉毒素能致癌、致畸、破坏免疫系统，对肝、肾脏造成损害，还可以导致神经中毒，赭曲霉毒素仅次于黄曲霉毒素，随着人们对食品健康和安全的高度重视，对赭曲霉毒素的研究也应更加重视，避免人们误食糯米粉而受到伤害。
发明内容
本发明需要解决的技术问题是提供一种赭曲霉毒素的检测方法，使用这种方法可以简便快速的检测出食品中是否含有赭曲霉毒素，操作简单便捷。
为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：一种糯米赭曲霉毒素的检测方法，具体步骤如下：
第一步：制糯米粉，将糯米浸入水中若干小时，打磨沥干得糯米粉；
第二步：萃取毒素，取糯米粉样品置于锥形瓶中，加入试剂后摇晃若干分钟后过滤得滤液；
第三步：一级分层，取滤液置于分液漏斗中，加入碳酸氢钠溶液摇晃若干分钟后静置分层得一级分层液；
第四步：二级分层，将一级分层液置于分液漏斗中，加入碳酸氢钠溶液摇晃若干分钟后静置分层得二级分层液；
第五步：三级分层，将二级分层液置于分液漏斗中，用盐酸调节pH，加入三氯甲烷摇晃、静置分层后，将三氯甲烷层置于盛有水的分液漏斗中，再加入三氯甲烷摇晃、静置分层得三级分层液；
第六步：毒素粉末，将三级分层液置于蒸发皿中通风吹干，加入三氯甲烷溶解蒸发皿中的残渣后转入浓缩瓶中浓缩至干燥赭曲霉毒素粉末。
作为本发明进一步的方案，所述第一步中糯米浸入水中20~28h。
作为本发明进一步的方案，所述第二步中试剂为三氯甲烷和磷酸溶液，摇晃25~35min后用定性滤纸过滤得滤液。
作为本发明进一步的方案，所述三氯甲烷为80~120ml，所述磷酸溶液浓度为0.1~0.2mol/L，所述磷酸溶液为8~12ml，摇晃30min。。
作为本发明进一步的方案，所述第三步中碳酸氢钠溶液的溶度为0.1~0.2mol/L，所述碳酸氢钠溶液为40~60ml，所述一级分层液为一次三氯甲烷层。
作为本发明进一步的方案，所述第四步中加入50ml0.1mol/L的碳酸氢钠溶液，静置分层后倒去一次三氯甲烷层，所述二级分层液为碳酸氢钠溶液层。
作为本发明进一步的方案，所述第五步中用2mol/L的盐酸调节pH范围为2~3，加入三氯甲烷摇晃3~5min，所述三级分层液为三次三氯甲烷层。
作为本发明进一步的方案，所述第六步中蒸发皿置于60~80℃蒸汽浴上通风挥干，所述浓缩瓶置于60~80℃蒸汽浴上并用氮气吹气至干燥得赭曲霉毒素粉末。
作为本发明进一步的方案，所述将赭曲霉毒素粉末溶于苯-冰乙酸溶液中摇匀，在薄层色谱板上点样。
作为本发明进一步的方案，所述薄层色谱板在365nm波长紫外光灯下观察。
本发明具有的优点和积极效果是：由于本发明采用如上技术方案，利用薄层色谱扫描仪在365nm波长紫外光灯下观察薄层色谱板上点样的颜色，即可辨别糯米上是否含有赭曲霉毒素，本发明操作简单便捷。
附图说明
图1是本发明一种糯米赭曲霉毒素的检测方法的流程图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
1材料
1.1原材料
糯米粉
1.2试剂
纯水（购自山东众合水处理设备有限公司），三氯甲烷（购自大连科瑞气体有限公司），碳酸氢钠（购自常州兰陵制药有限公司），氮气（购自江苏宏博气体装备科技有限公司），苯（购自河南省利得源化工有限公司），冰乙酸（购自济南坤鸿生物科技有限公司），薄层色谱板（购自青岛基亿达硅胶试剂有限公司）。
1.3仪器
锥形瓶、分液漏斗、蒸发皿、浓缩瓶、滤纸、pH试纸（购自常州迈恩化工有限公司），薄层色谱扫描仪（购自杭州俊升科学器材有限公司）。
2、方法
如图1所示，本发明一种糯米赭曲霉毒素的检测方法，具体步骤如下：
第一步：将糯米浸入水中水中20~28h后，打磨沥干得糯米粉；
第二步：取糯米粉样品置于锥形瓶中，加入100ml的三氯甲烷和0.1mol/L的磷酸12ml后摇晃30min后过滤得滤液；
第三步：取滤液置于分液漏斗中，加入0.2mol/L碳酸氢钠溶液60ml摇晃5min后静置分层得一次三氯甲烷层；
第四步：将一次三氯甲烷层置于分液漏斗中，加入0.2mol/L碳酸氢钠溶液60ml摇晃5min后，静置分层后倒去一次三氯甲烷层，得到碳酸氢钠溶液层；
第五步：将碳酸氢钠溶液层置于分液漏斗中，用2mol/L盐酸调节pH，将pH调节到2~3，加入三氯甲烷摇晃3~5min、静置分层后进行分液，得到二次三氯甲烷层，将二次三氯甲烷层置于盛有水的分液漏斗中，再次加入三氯甲烷摇晃、静置分层得三次三氯甲烷层；
第六步：将三次三氯甲烷层置于60~80℃蒸汽浴上通风挥干，加入三氯甲烷溶解蒸发皿中的残渣后转入浓缩瓶中，将浓缩瓶置于60~80℃蒸汽浴上并用氮气吹气至干燥得赭曲霉毒素粉末。
将赭曲霉毒素粉末溶于苯-冰乙酸溶液中摇匀，然后将混合液在薄层色谱板上点样，最后将薄层色谱板放进薄层色谱扫描仪内，将薄层色谱扫描仪调至365nm波长紫外光灯下观察，若薄层色谱板上点样颜色为观察到黄绿色荧光，即为糯米含有赭曲霉毒素。
虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是本领域熟练技术人员应当理解，这些仅是举例说明，可以对本实施方式作出多种变更或修改，而不背离本发明的原理和实质，本发明的保护范围仅由所附权利要求书限定。
Claims (10)
1.一种糯米赭曲霉毒素的检测方法，其特征在于：具体步骤如下：
第一步：制糯米粉，将糯米浸入水中若干小时，打磨沥干得糯米粉；
第二步：萃取毒素，取糯米粉样品置于锥形瓶中，加入试剂后摇晃若干分钟后过滤得滤液；
第三步：一级分层，取滤液置于分液漏斗中，加入碳酸氢钠溶液摇晃若干分钟后静置分层得一级分层液；
第四步：二级分层，将一级分层液置于分液漏斗中，加入碳酸氢钠溶液摇晃若干分钟后静置分层得二级分层液；
第五步：三级分层，将二级分层液置于分液漏斗中，用盐酸调节pH，加入三氯甲烷摇晃、静置分层后，将三氯甲烷层置于盛有水的分液漏斗中，再加入三氯甲烷摇晃、静置分层得三级分层液；
第六步：毒素粉末，将三级分层液置于蒸发皿中通风吹干，加入三氯甲烷溶解蒸发皿中的残渣后转入浓缩瓶中浓缩至干燥赭曲霉毒素粉末。
2.根据权利要求1所述的一种糯米赭曲霉毒素的检测方法，其特征是：所述第一步中糯米浸入水中20~28h。
3.根据权利要求1所述的一种糯米赭曲霉毒素的检测方法，其特征是：所述第二步中试剂为三氯甲烷和磷酸溶液，摇晃25~35min后用定性滤纸过滤得滤液。
4.根据权利要求3所述的一种糯米赭曲霉毒素的检测方法，其特征是：所述三氯甲烷为80~120ml，所述磷酸溶液浓度为0.1~0.2mol/L，所述磷酸溶液为8~12ml，摇晃30min。
5.根据权利要求1所述的一种糯米赭曲霉毒素的检测方法，其特征是：所述第三步中碳酸氢钠溶液的溶度为0.1~0.2mol/L，所述碳酸氢钠溶液为40~60ml，所述一级分层液为一次三氯甲烷层。
6.根据权利要求1所述的一种糯米赭曲霉毒素的检测方法，其特征是：所述第四步中加入50ml0.1mol/L的碳酸氢钠溶液，静置分层后倒去一次三氯甲烷层，所述二级分层液为碳酸氢钠溶液层。
7.根据权利要求1所述的一种糯米赭曲霉毒素的检测方法，其特征是：所述第五步中用2mol/L的盐酸调节pH范围为2~3，加入三氯甲烷摇晃3~5min，所述三级分层液为三次三氯甲烷层。
8.根据权利要求1所述的一种糯米赭曲霉毒素的检测方法，其特征是：所述第六步中蒸发皿置于60~80℃蒸汽浴上通风挥干，所述浓缩瓶置于60~80℃蒸汽浴上并用氮气吹气至干燥得赭曲霉毒素粉末。
9.根据权利要求8所述的一种糯米赭曲霉毒素的检测方法，其特征是：所述将赭曲霉毒素粉末溶于苯-冰乙酸溶液中摇匀，在薄层色谱板上点样。
10.根据权利要求9所述的一种糯米赭曲霉毒素的检测方法，其特征是：所述薄层色谱板在365nm波长紫外光灯下观察。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20210108 |