CN112176110A - 基于捕获测序的eb病毒检测技术 - Google Patents

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CN112176110A CN202011216691.0A CN202011216691A CN112176110A CN 112176110 A CN112176110 A CN 112176110A CN 202011216691 A CN202011216691 A CN 202011216691A CN 112176110 A CN112176110 A CN 112176110A
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刘士毅
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郭浩
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Abstract

本发明涉及基于捕获测序的EB病毒检测技术。具体而言,本发明涉及一种用于基于捕获测序检测EB病毒的探针组,其特征在于所述探针组包含分别对EB病毒基因LMP1LMP2EBNA‑1EBNA‑2EBNA‑3BZLF1具有特异性的探针,优选对所述EBNA‑2具有特异性的探针包含对EB病毒基因型1的EBNA‑2以及对EB病毒基因型2的EBNA‑ 2具有特异性的探针,和/或对所述EBNA‑3具有特异性的探针包含对EB病毒基因型1的EBNA‑3以及对EB病毒基因型2的EBNA‑3具有特异性的探针。

Description

基于捕获测序的EB病毒检测技术
技术领域
本发明涉及生物技术领域,具体涉及EB病毒的检测。
背景技术
EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)为一种嗜淋巴细胞的双链DNA病毒,属于疱疹病毒γ亚科。EB病毒主要侵染鼻咽部上皮细胞和B淋巴细胞,可引起的主要疾病包括鼻咽癌、胃癌以及一些良/恶性的淋巴组织增生性疾病。EB病毒的检测对相关疾病或肿瘤的诊断、分期、治疗、预后起着较好的参考作用。目前在临床实践中,EB病毒检测主要通过:1.常规PCR扩增,主要扩增的目的片段为EBNA-1EBNA-2EXLF-1基因以及Bam HI-w区域;2. 免疫组化法,例如血清IgA、IgG抗体以及LMP-1抗体检测;3. EB病毒编码RNA的原位杂交技术(Epstein-bar virus-encoded RNA in situhybrudization,EBER-ISH),EB病毒潜伏感染是RNA转录产生EB病毒编码的RNA (EBER1、EBER2两种非翻译RNA),这些RNA产量高,具有结构位点,可用RNA原位杂交检测。
常规PCR虽然可以直接检测EB病毒DNA,但是样品质量不好,DNA片段化严重的话,导致引物无法扩增到目的片段。免疫组化法对抗体质量依赖性较大,生产质量或保存状况不佳的抗体对检测结果的影响较大。另外,对免疫组化的检测结果进行判断需要经过专业训练的人士来进行,不同人员判断的结果可能会产生较大差异。EBER-ISH是基于RNA水平上的检测手段,无法避免RNA易降解的风险。此外,这些检测技术除常规PCR外,无法做到EB病毒的分型。而且,这些方法之间相对独立,各方法之间无法组合。
因此,亟需开发出基于一种改进的EB病毒检测技术,其使用根据EB病毒基因型设计特异探针,能够对肿瘤组织样品DNA进行捕获测序,从而鉴别该肿瘤组织是否感染EB病毒以及对EB病毒进行分型。
发明内容
为解决上述传统检测方法的弊端,发明人对EB病毒检测技术进行了改进,研发出通过根据EB病毒基因型设计特异探针,对肿瘤组织样品DNA进行捕获测序,来鉴别该肿瘤组织是否感染EB病毒以及EB病毒分型的技术。另外,本发明探针组和试剂盒/微阵列可以融入其他组的检测产品,相对比较灵活。
本发明第一方面涉及一种用于基于捕获测序检测EB病毒的探针组,其特征在于所述探针组包含分别对EB病毒基因LMP1LMP2EBNA-1EBNA-2EBNA-3BZLF1具有特异性的探针,优选对所述EBNA-2具有特异性的探针包含对EB病毒基因型1的EBNA-2以及对EB病毒基因型2的EBNA-2具有特异性的探针,和/或对所述EBNA-3具有特异性的探针包含对EB病毒基因型1的EBNA-3以及对EB病毒基因型2的EBNA-3具有特异性的探针。
在一些实施方案中,所述探针组还包含参比探针,所述参比探针为对人基因具有特异性的探针,例如所述人基因选自:TP53CDH1APCPTENATM中的一种或多种。在一些实施方案中,所述对EB病毒基因LMP1具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:200-215。在一些实施方案中,所述对EB病毒基因LMP2具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:1-19和194-199,优选具有至少一个选自SEQ ID NO:1-19的核苷酸序列和至少一个选自SEQ ID NO:194-199的核苷酸序列。在一些实施方案中,所述对EB病毒基因BZLF1具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:161-173。在一些实施方案中,所述对EB病毒基因EBNA-1具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:174-193。在一些实施方案中,所述对EB病毒基因EBNA-2具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:20-39和216-233,优选具有至少一个选自SEQ ID NO:20-39的核苷酸序列和至少一个选自SEQ ID NO:216-233的核苷酸序列。在一些实施方案中,所述对EB病毒基因EBNA-3具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:40-160和234-300。
在一些实施方案中,所述对TP53具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:394-399。在一些实施方案中,所述对CDH1具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:378-393。在一些实施方案中,所述对APC具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:400-450。在一些实施方案中,所述对PTEN具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:301-313。在一些实施方案中,所述对ATM具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:314-377。
在一些实施方案中,所述探针组由分别对EB病毒基因LMP1LMP2EBNA-1EBNA-2EBNA-3BZLF1具有特异性的探针和对人基因具有特异性的探针组成。
在一些实施方案中,所述探针组中的探针为用生物素标记的探针。
本发明第二方面涉及一种用于基于捕获测序检测检测样品中的EB病毒的试剂盒或微阵列,其包含本发明第一方面中所述的探针组。
在一些实施方案中,所述样品为生物样品,优选所述样品为体液样品或组织样品,和更优选所述样品选自活组织检查样品、肿瘤组织样品、细胞培养物、经固化处理的样品(如石蜡包埋样品)、全血、血浆、血清、唾液、脑髓液、汗液、痰、肺泡灌洗液、尿液、粪便、分泌液、乳汁和腹膜液。
本发明第二方面涉及本发明第一方面中所述的探针组在制备用于基于捕获测序检测样品中的EB病毒的试剂盒或微阵列中的用途。
在一些实施方案中,所述样品为生物样品,优选所述样品为体液样品或组织样品,和更优选所述样品选自活组织检查样品、肿瘤组织样品、细胞培养物、经固化处理的样品(如石蜡包埋样品)、全血、血浆、血清、唾液、脑髓液、汗液、痰、肺泡灌洗液、尿液、粪便、分泌液、乳汁和腹膜液。
在一些实施方案中,所述试剂盒或微阵列用于EB病毒-1和EB病毒-2的分型,和/或所述试剂盒或微阵列用于推断EB病毒的感染程度。
附图说明
图1显示EBV阴性和阳性样品的Integrative Genomics Viewer(IGV)展示。
图2显示1例EBV-1型阳性样品(R19029728-20190628A-tGCbz-016-1)的IGV展示。
图3显示1例EBV-2型阳性样品(tEBVbz-35)的IGV展示。
图4为EB病毒检测流程。
图5显示根据训练集获得的EBV相对拷贝数及其截止线(图中的虚线(截止值为0.5))。
具体实施方式
参考用于说明的示例应用在下文中描述本发明的数个方面。应当理解的是,陈述许多具体细节、关系和方法来提供对本发明的充分理解。然而,在相关领域的普通技术人员将容易地认识到,可在不含一个或多个具体细节的情况下实施本发明或者可用其他方法来实施本发明。
本发明提出了一种新的可测量EB病毒(EBV)感染程度和/或对EBV进行基因分型的探针组。
本发明具有如下优点:
1)本发明的探针组利用DNA测序方法,相对于基于RNA水平的检测的EBER-ISH技术而言降低核酸降解的风险;
2)本发明的探针组可以根据1-型EB病毒和2-型EB病毒在EBNA-2和EBNA-3基因上的差异性,对EB病毒进行分型;
3)本发明的探针组可以和其他高通量测序产品(例如TMB、MSI等生物标志物)合并使用,方便快捷;
4)本发明利用人基因进行标准化,除了对EB病毒阴阳性进行检测外,还可以推断EB病毒的感染程度;
5)本发明的探针组对于EB病毒检测具有更高的灵敏度和特异性,与针对单个靶基因或少于6个靶基因的组合的探针相比,减少了由于仅检测单个靶基因或少于6个靶基因的组合所产生的假阴性,并且与使用不同于本发明探针组的探针相比,具有更高的灵敏度和特异性;和
6)相对于PCR法,本发明采用捕获测序法获得EB病毒的检测结果,避免了PCR法容易受样本质量影响的问题(如样本降解严重的话,PCR法会导致假阴性)。
除非另有说明,否则本文所用的所有科技术语具有本发明所属领域普通技术人员通常理解的含义。在细胞和分子生物学中的普通术语的定义可以参见:余龙等译的基因VIII,标准书号:ISBN:978-7-03-014597-0,科学出版社出版(2005);张瑾峰等译的细胞与分子生物学,中信出版社出版(2004),ISBN:978-7-50-860075-8;和王镜岩等编的生物化学,高等教育出版社出版(2002),ISBN:978-7-04-011088-3; Kendrew, J. 等人 (编),The Encyclopedia of Molecular Biology, Blackwell Science Ltd. 出版 (1994),ISBN 0-632-02182-9;和Meyers, R.A. (编), Molecular Biology and Biotechnology:a Comprehensive Desk Reference, VCH Publishers, Inc. 出版(1995), ISBN 1-56081-5698。虽然在实施本发明时可采用类似或等同于本文所述方法和材料的任何方法和材料,但是本文描述了具体的材料和方法。
本文所用的术语仅以描述具体的实施方案为目的而不意图限制本发明。除非上下文另有明确指示,否则本文所用的单数形式“一”、“一个”和“所述”也意图包括复数形式。此外,开放式的表述“具有”、“包括”和“包含”解释为还可以含有没有述及的结构组成部分或方法步骤,但需要注意的是,该开放式的表述也涵盖仅由所述的组分和方法步骤组成的情形(即涵盖了封闭式表述“由……组成”的情形)。
如全文所用,范围用作描述该范围内的每个数值和所有数值的简写形式。如本文所用的短语“至少一个”字面上意指可从这样的短语之后所列的序列中选择1个、2个、3个、4个……直至所有序列。例如至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:200-215指的是SEQ ID NO: 200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214和215中的1个、2个、3个、4个……直至所有序列以及它们的任意组合。
本发明所用的样品可以是生物来源、环境来源、医学来源或患者来源的一定量的材料。一方面,它可包括标本或培养物(例如细胞或组织培养物)。另一方面,它也可包括但不限于生物学样品和非生物样品(例如环境样品和工业样品等)。生物学样品可包括采自受试者的材料,其包括但不限于体液样品(例如血液、血清、血浆、唾液、尿液、组织液、精液、分泌液、脓汁和呼吸液和粘液)和组织样品(例如活组织切片等)。生物学样品可获自人受试者或其它动物。环境样品是指取自例如自然环境、生活环境、工作环境和生产环境等的样品,包括但不限于天然食物、表面物质、土壤、水。工业样品是指取自工业制品的样品,包括但不限于从加工食品和奶制品、加工设备、仪器、装置、器具、一次性用品和非一次性用品中获得的样品。这些实例不能理解为限制适用于本发明的样品类型。获自来源的样品或在预处理以改进样品特征(例如从血液制备血浆等)后的样品可直接使用。
可按照本发明进行分析和/或使用的样品包括临床来源的多核苷酸,例如DNA或RNA。
从样品中提取核酸的方法是本领域众所周知的,可用例如苯酚和氯仿进行DNA提取,或者使用市售DNA提取试剂进行提取。例如,可使用柱试剂盒(例如GENERATION (注册商标) Capture Column Kit Gentra)进行提取。
应该理解的是,核酸可通过本领域众常规的纯化方法来纯化,例如使用PrepSEQ™试剂盒(来自Applied Biosystems)和美国专利号5,234,809中的方法等等。
本文所用的术语“捕获测序”是指利用生物素标记的DNA或RNA探针,对DNA样品中的目标片段进行捕获,并进行测序的技术。所述测序可为第一代、第二代或第三代测序技术。用于基于捕获测序检测EB病毒(EBV)的探针的实例如SEQ ID NO: 1-450、例如SEQ IDNO: 1-300所示。所述探针可用生物素标记。可以使用例如通用DNA合成仪(例如由AppliedBiosystems制造的394型),经化学方法合成本发明探针中的各个核苷酸。还可采用本领域众所周知的任何其它方法来合成寡核苷酸,例如探针。
本发明的探针可以任意组合,以针对样品中的不同靶基因进行测序,例如用于检测LMP1的SEQ ID NO:200-215中的一个或多个探针可与用于检测LMP2的SEQ ID NO:1-19和194-199中的一个或多个探针、用于检测BZLF1的SEQ ID NO:161-173中的一个或多个探针、用于检测EBNA-1的SEQ ID NO:174-193中的一个或多个探针、用于检测EBNA-2的SEQ IDNO:20-39和216-233中的一个或多个探针和/或用于检测EBNA-3的SEQ ID NO:40-160和234-300中的一个或多个探针组合;用于检测LMP2的SEQ ID NO:1-19和194-199中的一个或多个探针可与用于检测LMP1的SEQ ID NO:200-215中的一个或多个探针、用于检测BZLF1的SEQ ID NO:161-173中的一个或多个探针、用于检测EBNA-1的SEQ ID NO:174-193中的一个或多个探针、用于检测EBNA-2的SEQ ID NO:20-39和216-233中的一个或多个探针和/或用于检测EBNA-3的SEQ ID NO:40-160和234-300中的一个或多个探针组合;等等。
在一些实施方案中,本发明的针对EB病毒基因型1的EBNA-2的探针(SEQ ID NO:20-39)可与针对EB病毒基因型2的EBNA-2的探针(SEQ ID NO:216-233)组合使用以对EB病毒进行基因分型。在一些实施方案中,本发明的针对EB病毒基因型1的EBNA-3的探针(SEQID NO:40-160)可与针对EB病毒基因型2的EBNA-3的探针(SEQ ID NO:234-300)组合使用以对EB病毒进行基因分型。在一些实施方案中,本发明的针对EB病毒基因型1和2的EBNA-2EBNA-3的探针一起使用,以更准确地对EB病毒进行基因分型。
试剂盒
本发明涉及一种用于基于捕获测序检测EBV的试剂盒,其含有本发明的探针组。本发明还涉及本发明的探针组在制备用于基于捕获测序检测样品中EBV的试剂盒中的用途。
试剂盒可包含实施本发明方法所用的材料或试剂(包括探针组)。试剂盒可以包括储存反应试剂(例如在合适容器中的引物、探针、酶等)和/或支持材料(例如缓冲液、实施检测的说明书等)。例如,试剂盒可以包括一个或多个含有相应反应试剂和/或支持材料的容器。这样的内容物可一起或分开递送给既定的接受者。例如,第一个容器可含有用于测定的酶,第二个容器含有引物组,而第三个容器含有探针。所述试剂盒还可含有适合容纳所述试剂或容器的隔室。作为一个实例,试剂盒可含有探针和使用说明书。试剂盒还可含有聚合酶和dTNP等。试剂盒还可含有UNG、用于质控的内标、阳性和阴性对照和/或EBV假病毒标准品等。试剂盒还可包含用于从样品制备EBV DNA的试剂。本发明试剂盒还可包含除了本发明的探针之外的其它任何探针,例如能够有效检测人EBV基因的引物组和/或探针。以上实例不能理解为限制适用于本发明的试剂盒及其内容物。
微阵列
本发明涉及一种用于基于捕获测序检测人EBV基因的微阵列,其含有本发明的探针组。本发明还涉及本发明的探针组在制备用于基于捕获测序检测样品中EBV基因的微阵列中的用途。
微阵列是指具有平坦表面的固相支持体,其具有核酸阵列,阵列中的各个成员包含固定在空间上确定的区域或位点上的寡核苷酸或多核苷酸的相同的拷贝,所述区域或位点不与阵列中的其它成员的区域或位点重叠;也就是说,所述区域或位点在空间上是离散的。此外,空间上确定的杂交位点可为“可寻址的”,因为其位置及其固定化的寡核苷酸的身份是已知或预先确定的(例如在其使用前是已知或预先确定的)。通常寡核苷酸或多核苷酸为单链,并通常由5'-端或3'-端与固相支持体共价连接。微阵列中含有非重叠区的核酸的密度通常大于100/cm2,更优选大于1000/cm2。微阵列技术公开于例如以下参考文献中:Schena编辑的Microarrays: A Practical Approach (IRL Press, Oxford, 2000);Southern, Current Opin. Chem. Biol., 2:404-410,1998,其全部内容通过引用结合到本文中。
方法
本发明还涉及使用本发明的探针组和/或本发明的试剂盒和/或微阵列检测个体或样品中的EB病毒、对个体或样品中EB病毒进行分型和/或推断个体的EB病毒的感染程度的方法,所述方法包括使用本发明的探针组对样品中的目标片段进行捕获,并进行测序。在一些实施方案中,所述目标片段为选自EB病毒基因LMP1LMP2EBNA-1EBNA-2EBNA-3BZLF1中的一种或多种的片段。在一些实施方案中,所述方法还包括使用参比探针对人基因进行捕获并测序。在一些实施方案中,所述人基因选自TP53CDH1APCPTENATM中的一种或多种。在一些实施方案中,所述方法不用于诊断目的,和/或所述样品为环境来源的样品。在一些实施方案中,所述方法包括计算LMP1、LMP2、BZLF1、EBNA-1、EBNA-2 (包括EBV-1和2型的EBNA-2)、EBNA-3(包括EBV-1和2型的EBNA-3) 6个基因的测序深度,并针对人基因的测序深度进行标准化获得6个EB基因的标准化深度;然后将这6个EB基因的标准化深度的中位值与预定的截止值进行比较,如果所述中位值大于或等于所述截止值,则该样品或个体为EBV阳性,如果所述中位值小于所述截止值,则该样品或个体为EBV阴性。在一些实施方案中,所述预定的截止值根据训练集中EBV阴阳性分布而得到截止值,例如为0.5。在一些实施方案中,6个EB基因的标准化深度的中位值可以用来判断EB病毒的感染程度,中位值越大,那么感染程度就越大。在一些实施方案中,所述对EB病毒进行分型的方法进一步包括根据EBV-1和2型的EBNA-2和EBNA-3的读出进行分型,其中如果EBV-1型的EBNA-2和/或3区段有读出且EBV-2型的EBNA-2和3区段没有读出,则判断该样品为EBV-1型阳性;如果EBV-2型的EBNA-2和/或3区段有读出且EBV-1型的EBNA-2和3区段没有读出,则判断该样品为EBV-2型阳性。
虽然上文已描述了本发明的各种实施方案,但是应理解的是,其仅以实例的方式提供,而并非限制。对公开的实施方案的许多改变可依照本文的公开内容来进行,而不会背离本发明的精神或范围。因此,本发明的广度和范围不应受到任何上述的实施方案所限制。
本文提及的所有文献都通过引用结合到本文中。本申请引用的所有出版物和专利文件都为所有目的而通过引用结合,引用程度如同单独地指出各个出版物或专利文件一样。
实施例
除非另外说明,否则本文实施例所用的材料均市购获得,用于进行实验的各种具体实验方法均为本领域常规的实验方法或者按照制造商所建议的步骤和条件,并能由本领域技术人员根据需要常规地确定。另外,为区分EBV-1/2型中的EBNA-2和EBNA-3基因,将EBV-1型中的EBNA-2称为T1-EBNA-2而EBNA-3则称为T1-EBNA-3,将EBV-2型中的EBNA-2称为T2-EBNA-2而EBNA-3称为T2-EBNA-3。
实施例1:EB病毒探针设计的特异性证明
● 使用bedtools2 (v 2.25.0下同)软件提取探针设计的区域(即本发明探针所覆盖区域)并对其整合,形成bed文件;
● 根据产生的bed文件使用bedtools软件提取EB病毒参考基因组序列(GenBank ID:NC_007605.1),形成fasta文件;
● 使用内部python脚本将fasta文件中的每一条序列进行拆分形成fastq文件,拆分方法为:以1bp为步长,100bp为窗口,在每条记录上滑动,最终生成长度为100bp的fastq文件;
● 使用bwa v0.7.12 软件将拆分得到的fastq文件比对到人类参考基因组上(GRCH37),生成比对文件(bam格式);
● 使用python脚本查看比对结果信息,以验证EB病毒与人类基因组是否存在同源区域。
● 最终结果为探针区域与人类基因组没有同源性(见表1)。
表1:EB病毒各基因与人类基因组同源情况
基因名 总读出(reads)数 与人类参考基因组同源读出数 同源比率
LMP1 800 0 0
LMP2 1326 0 0
BZLF1 734 0 0
EBNA-1 1120 0 0
T1-EBNA-2 1080 0 0
T1-EBNA-3 6885 0 0
T2-EBNA-2 960 0 0
T2-EBNA-3 3340 0 0
合计 16245 0 0
实施例2:EBV-1型和EBV-2型探针设计的特异性证明
● 使用bedtools2 (v 2.25.0下同)软件分别提取探针设计区域(即本发明探针所覆盖区域)内两种EB病毒分型对应的范围并对其整合,分别形成bed文件;
● 根据各自的bed文件使用bedtools软件提取EB病毒参考基因组序列,各自形成fasta文件;
● 使用内部python脚本将fasta文件中的每一条序列进行拆分形成fastq文件,拆分方法为:以1bp为步长,100bp为窗口,在每条记录上滑动,最终生成长度为100bp的fastq文件;
● 使用bwa v0.7.12 软件将拆分得到的fastq文件比对到EB病毒的参考基因组,分别生成比对文件(bam格式);
● 使用python脚本查看比对结果信息。
● 最终结论为1型和2型上的探针区域没有同源性(见表2和表3)。
表2:4个相关基因拆分得到的读出数目
基因名 总读出数
T1-EBNA-2(EBV-1型) 1080
T1-EBNA-3(EBV-1型) 6885
T2-EBNA-2(EBV-2型) 960
T2-EBNA-3(EBV-2型) 3340
表3:与EB病毒分型相关基因之间同源性信息
T2-EBNA-2(EBV-2型) T2-EBNVA-3(EBV-2型)
T1-EBNA-2(EBV-1型) 0 0
T1-EBNA-3(EBV-1型) 0 0
实施例3:对样品进行建库、捕获和测序
在取得组织样品后,首先利用市场上成熟的试剂盒对DNA进行抽提。对来源于组织的DNA,需要利用超声技术、DNA酶切技术或者转座酶技术进行打断,形成200个碱基长度左右的双链DNA片段。然后针对来源不同的DNA利用对应的试剂盒进行文库的构建。建库完成好后,将一个至四个样品的文库进行混合,然后用EB病毒捕获探针进行EB病毒基因组片段捕获。EB病毒捕获探针可以与其他探针混合后一起进行捕获,EB病毒探针的捕获效率不会受到影响。捕获好的文库最终通过高通量测序仪进行测序。
湿实验操作步骤:
步骤1:建库:
1. 试剂及耗材
a) KAPA Hyper Library Preparation Kit(KAPA,KK8504)
b) UDI接头(IDT公司,10005922)
c) P5/P7引物混合物
P7: AATGATACGGCGACCACCGA
P5: CAAGCAGAAGACGGCATACGA
d) Ampure XP珠粒(BECKMAN COULTER,15672100)
e) 80%乙醇(现用现配)
f) 灭菌枪头(1000/200/100/10 ul)
g) eppendorf低吸附EP管,PCR管
2. 具体实验步骤
a) 实验样品的准备:选用ReliaPrep FFPE gDNA Miniprep System (promega,目录号:A2352)试剂盒对石蜡包埋样品(formalin fixed paraffin-embedded,FFPE)进行DNA抽提。
b) 加接头:Input 200ng (已打断)DNA,用无核酸酶水补至25ul,涡旋混匀并短暂离心,进行补平和加A反应(反应体系见表4,反应操作见表5),将前一步的反应产物先离心,然后进行一下反应体系(见表6和表7)。
表4
Figure DEST_PATH_IMAGE001
表5
Figure 997708DEST_PATH_IMAGE002
表6
Figure DEST_PATH_IMAGE003
表7
Figure 226432DEST_PATH_IMAGE004
c) 纯化:从4℃冰箱取出AMpure珠粒,涡旋混匀并室温放置30分钟;将上一步反应产物全部转移到1.5ml离心管中,再加99ul涡旋均匀的AMpure珠粒,涡旋混匀,室温放置5min后静置于磁力架上;AMpure珠粒完全分离后去上清,保持样品置于磁力架上,加200ul 80%乙醇,1min后去上清,然后再重复洗涤一次;晾干至无液滴残;加22ul无核酸酶水,震荡混匀,室温放置5min后静置于磁力架上,AMpure珠粒完全分离后转移20ul上清到一支新的0.2mlPCR管。
d) PCR扩增:在0.2ml PCR管中配制以下反应体系(见表8和表9)
表8
Figure DEST_PATH_IMAGE005
表9
Figure 6170DEST_PATH_IMAGE006
e) PCR产物回收:将上一步反应产物全部转移到1.5ml离心管中,加60ul涡旋均匀的AMpure珠粒(1.2x),涡旋混匀,室温放置5min后静置于磁力架上,AMpure珠粒完全分离后去上清;保持样品置于磁力架上,加200ul 80%乙醇,30s后去上清,然后再重复洗涤一次;加31ul无核酸酶水,涡旋振荡或将200ul移液器调整到25ul,吹打15次使AMpure珠粒充分悬浮,室温放置5min后静置于磁力架上,AMpure珠粒完全分离后转移50ul上清至1.5ml离心管;标明样品名称、文库类型和建库日期;直接进入DNA文库质检程序或暂存于4℃。
步骤2:捕获:
1. 实验耗材和试剂
a) 人Cot-1 DNA(Invitrogen,15279-011)
b) 封闭寡核苷酸(IDT,1046637)
c) 探针库(SEQ ID NO: 1-450):工作液浓度为1.5Pm(IDT)
d) Xgen CNV Backbone panel(IDT,1080564/1080563)
e) Xgen杂交缓冲液(IDT,1072281)
f) Ampure XP珠粒,Dynabeads® M270链酶亲和素C1,80%乙醇(现用现配),灭菌枪头(1000/200/10 ul)
2. 具体实验步骤
a) 杂交:在一支1.5ml LoBind离心管中将4个DNA文库混合成一个pool,每个文库的DNA文库量为500ng;向每个pool中加入5ul的人Cot-1 DNA,2ul的1/2封闭寡核苷酸TS MIX;充分拨弹混匀后离心将混合物收集到管底,(然后用封口膜封住离心管口,并在封口膜5上刺5个小孔),最后用抽真空浓缩仪抽干;加入8.5ul xGen 2X杂交缓冲液、2.7ul xGen 杂交缓冲液增强剂(Hybridization Buffer Enhancer)和1.8ul无核酸酶水,吹吸混匀后离心将混合物收集到管底,然后静置10min重溶;将前一步骤中得到的13ul混合物全部转移到0.2ml PCR管中,然后95℃变性10min;加入4ul探针后涡旋大约3sec混合均匀(最后体积17ul),然后65℃孵育过夜(PCR仪的热盖温度设置为75℃);
b) 富集:按表10配置缓冲液(IDT),按100ul/pool的量取出1x 洗涤缓冲液1和全部1x严格洗涤缓冲液在65℃金属浴上孵育至少2小时备用;将Dynabeads® M270链酶亲和素C1从4℃冰箱取出,室温平衡30min;将M270涡旋均匀后按100ul/pool的量取出,静置于磁力架上,珠粒完全分离后去掉上清;按200ul/pool的量加入1x珠粒洗涤缓冲液,涡旋均匀10sec后静置于磁力架上,珠粒完全分离后去掉上清;重复上一步骤一次,然后按100ul/pool的量加入1x珠粒洗涤缓冲液,涡旋均匀后分装到0.2ml PCR管中;杂交反应持续4h后,将分装的M270静置于磁力架上,珠粒完全分离后去掉上清;将17ul杂交混合物全部转移到去掉了上清的M270中,吹吸5次然后涡旋3sec使珠粒充分悬浮,然后放回PCR仪上继续孵育45min,期间每12min涡旋大约3sec重悬一次;孵育结束后加入100ul预热的1x洗涤缓冲液Ⅰ涡旋大约3sec,然后转移到1.5ml LoBind离心管中,涡旋大约3sec后短暂离心并立即静置于磁力架上,大约20s后珠粒完全分离,立即去掉上清;加入200ul预热的1x严格洗涤缓冲液,吹吸10次后短暂离心并立即静置于68℃金属浴上孵育5min,然后静置于磁力架上,大约20s后珠粒完全分离,立即去掉上清;重复上一步骤一次;加入200ul 1x洗涤缓冲液Ⅰ,涡旋2min后短暂离心,然后静置于磁力架上,珠粒完全分离后去掉上清;加入200ul 1x洗涤缓冲液Ⅱ,涡旋1min后短暂离心,然后静置于磁力架上,珠粒完全分离后去掉上清;加入200ul 1x洗涤缓冲液Ⅲ,涡旋30s后短暂离心,然后静置于磁力架上,珠粒完全分离后去掉上清;
表10
Figure DEST_PATH_IMAGE007
c) PCR扩增:加入18ul无核酸酶水重悬珠粒,然后转移到0.2ml PCR管中,配制以下反应混合物(见表11和表12)
表11
Figure 463696DEST_PATH_IMAGE008
表12
Figure DEST_PATH_IMAGE009
d) PCR产物回收:将AMpure珠粒从4℃冰箱取出,室温平衡30min备用;加入75ul的AMpure珠粒(1.5x)充分混匀,室温放置10min后静置于磁力架上,珠粒完全分离后去上清;保持样品置于磁力架上,加入400ul 80%乙醇,30s后去上清,然后再重复洗涤一次;将样品晾干至无液滴残留,且珠粒出现第一条裂缝;加21.6ul无核酸酶水,涡旋振荡或用移液器吹打15次使珠粒充分悬浮,室温放置5min后静置于磁力架上,珠粒完全分离后转移20ul上清至1.5ml LoBind离心管;标明样品名称、文库类型和建库日期。
步骤3:上机测序:
1. 测序平台:illumina NovaSeq 6000
2. 测序长度:PE100。
实施例4:EBV阴阳性样品IGV展示
分别选取1例EBV阳性样品和1例EBV阴性样品进行IGV(Integrative GenomicsViewer)展示(这里只展示EBV基因组中捕获探针覆盖的部分区段)。
R19029728-20190628A-tGCbz-016-1为阳性样品,人基因的测序深度为227X;R19029728-20190628A-tGCbz-012-1为阴性样品,人基因的测序深度为670X。结果参见图1。从图1可以看到,阴性样品没有1条读出支持,阳性样品有许多读出支持。
实施例5:EBV-1和EBV-2样品IGV展示
分别选取1例EBV-1型阳性样品和1例EBV-2型阳性样品进行IGV展示(这里只展示EBV基因组中捕获探针覆盖的部分区段)。
R19029728-20190628A-tGCbz-016-1为EBV-1型阳性样品,人基因的测序深度为227X; tEBVbz-35为EBV-2型阳性样品,人基因的测序深度为477X。结果参见图2和3。从图2和3可以看到,EBV-1型样品在EBV-1型特异性区域有读出,而在EBV-2型特异性区域没有读出;EBV-2型样品在EBV-1型特异性区域没有读出,而在EBV-2型特异性区域有读出。
实施例6:利用数学模型评估EB病毒拷贝数
DNA样品在测序后会得到原始的测序结果,其结果为许多条位置信息不明的短序列。这些短序列会先根据EB病毒基因组的序列进行比对来确定每个短序列的位置。在确定每条短序列的EB病毒基因组位置后,需要根据序列的信息对来源于文库构建过程中产生的重复片段进行去除。然后分别统计6个重要基因的有效深度,并取中位值。同时计算该样品人基因组的有效深度,用来标准化EB病毒拷贝数。EB病毒检测结果计算流程请参见图4。
算法模型建立:
1) 测序数据预处理与质控:使用bcl2fastq v2.19.0软件将测序下机文件(bcl格式)转换为序列文件(fastq格式),然后使用fastp v0.20.0软件对序列文件进行质控(QC)和过滤,去除低质量序列,再使用bwa v0.7.12软件将高质量的干净序列比对到参考基因组(GRCh37+EBV基因组)上,生成比对文件(bam格式),使用picard v1.8.0_221对比对文件进行排序和去重(PCR duplication)处理。
2) EBV各基因深度计算:计算LMP1、LMP2、BZLF1、EBNA-1、EBNA-2(包括T1-EBNA-2和T2-EBNA-2)、EBNA-3(包括T1-EBNA-3和T2-EBNA-3)6个基因的测序深度。
各基因测序深度=各基因上的读出总数/各基因的长度
3) 人源序列的测序深度计算(5个人源基因范围的总读出数与5个基因总长度的比值):
人源序列的测序深度=人源探针区域上的读出总数/人源探针区域长度
4) EBV各基因进行深度标准化:将第一步中各基因的深度*2/人源序列的测序深度(这里乘以2是因为人为二倍体,EBV为单倍体),即用人源序列测序深度进行标准化,使得样品间有可比性
5) 取上一步中6基因标准化深度的中位值为最终的EBV相对拷贝数,根据训练集中EBV阴阳性分布(24个阳性,100个阴性样本),得到截止值为0.5,即相对拷贝数>=0.5为EBV阳性,反之为EBV阴性(结果见图5)
6) EBV-1/2分型:在上一步阳性样品中,会根据EBNA-2/3基因上的分布进行分型
a) T1-EBNA-2和3区段有读出且T2-EBNA-2和3区段没有读出,则判断该样品为EBV-1型阳性
b) T2-EBNA-2和3区段有读出且T1-EBNA-2和3区段没有读出,则判断该样品为EBV-2型阳性
c) 否则为无法判定
实施例7:算法性能验证
本算法以EBER-ISH为金标准进行算法验证,选择肿瘤含量>20%的胃癌FFPE样品,这些样品经EBER-ISH检测得出其中23例为阳性样品和53例为阴性样品。如实施例3和6所述,利用本发明的探针组及算法,对这些FFPE样品进行检测,最终检测结果为:22例阳性样品和54例阴性样品,表明本发明的探针组的检测灵敏度为95.65%(22/23),特异性为100%(53/53)。另外,对本发明的探针组及算法进行了分型检测,共检测了57例EBV阳性样品,其中根据实施例6步骤进行检测,得出其中53例为EBV-1型,3例为EBV-2型,1例无法确定,表明本发明的探针组及算法能够用于EBV阳性样品的分型,解决了目前现有技术无法对EBV样品进行分型的难题。
<110> 上海思路迪生物医学科技有限公司
<120> 基于捕获测序的EB病毒检测技术
<130> CPCH2062393N
<160> 450
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 1
cttgctctat tcacccttac ttttcttctt gcccgttctc tttcttagta tgaatccagt 60
atgcctgcct gtaattgttg cgccctacct cttttggctg gcggctattg ccgcctcgtg 120
<210> 2
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 2
atgcctgcct gtaattgttg cgccctacct cttttggctg gcggctattg ccgcctcgtg 60
tttcacggcc tcagttagta ccgttgtgac cgccaccggc ttggccctct cacttctact 120
<210> 3
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 3
tttcacggcc tcagttagta ccgttgtgac cgccaccggc ttggccctct cacttctact 60
cttggcagca gtggccagct catatgccgc tgcacaaagg aaactgctga caccggtgac 120
<210> 4
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 4
cttggcagca gtggccagct catatgccgc tgcacaaagg aaactgctga caccggtgac 60
agtgcttact gcggttgtca cttgtgagta cacacgcacc atttacaatg catgatgttc 120
<210> 5
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 5
ttttctcctc agtctttgca atttgcctaa catggaggat tgaggaccca ccttttaatt 60
ctcttctgtt tgcattgctg gccgcagctg gcggactaca aggcatttac ggttagtgtg 120
<210> 6
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 6
ttcagttctg gtgatgcttg tgctcctgat actagcgtac agaaggagat ggcgccgttt 60
gactgtttgt ggcggcatca tgtttttggc atgtgtactt gtcctcatcg tcgacgctgt 120
<210> 7
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 7
gactgtttgt ggcggcatca tgtttttggc atgtgtactt gtcctcatcg tcgacgctgt 60
tttgcagctg agtcccctcc ttggagctgt aactgtggtt tccatgacgc tgctgctact 120
<210> 8
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 8
tttgcagctg agtcccctcc ttggagctgt aactgtggtt tccatgacgc tgctgctact 60
ggctttcgtc ctctggctct cttcgccagg gggcctaggt actcttggtg cagccctttt 120
<210> 9
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 9
ggctttcgtc ctctggctct cttcgccagg gggcctaggt actcttggtg cagccctttt 60
aacattggca gcaggtaagc cacacgtgtg acattgcttg cctttttgcc acatgttttc 120
<210> 10
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 10
aacattggca gcaggtaagc cacacgtgtg acattgcttg cctttttgcc acatgttttc 60
tggacacagg actaaccatg ccatctctga ttatagctct ggcactgcta gcgtcactga 120
<210> 11
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 11
ccatgccatc tctgattata gctctggcac tgctagcgtc actgattttg ggcacactta 60
acttgactac aatgttcctt ctcatgctcc tatggacact tggtaagttt tcccttcctt 120
<210> 12
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 12
gctctaactt ggcatctctt ttacagtggt tctcctgatt tgctcttcgt gctcttcatg 60
tccactgagc aagatccttc tggcacgact gttcctatat gctctcgcac tcttgttgct 120
<210> 13
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 13
tccactgagc aagatccttc tggcacgact gttcctatat gctctcgcac tcttgttgct 60
agcctccgcg ctaatcgctg gtggcagtat tttgcaaaca aacttcaaga gtttaagcag 120
<210> 14
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 14
agcctccgcg ctaatcgctg gtggcagtat tttgcaaaca aacttcaaga gtttaagcag 60
cactgaattt atacccagtg agtatctatt tgttactcct gtttagttga agaaaacaag 120
<210> 15
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 15
gaaaacaagc tattggattg taacacacat tttacgcttt gttccttaga tttgttctgc 60
atgttattac tgattgtcgc tggcatactc ttcattcttg ctatcctgac cgaatggggc 120
<210> 16
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 16
atgttattac tgattgtcgc tggcatactc ttcattcttg ctatcctgac cgaatggggc 60
agtggaaata gaacatacgg tccagttttt atgtgcctcg gtggcctgct caccatggta 120
<210> 17
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 17
agtggaaata gaacatacgg tccagttttt atgtgcctcg gtggcctgct caccatggta 60
gccggcgctg tgtggctgac ggtgatgtct aacacgcttt tgtctgcctg gattcttaca 120
<210> 18
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 18
gccggcgctg tgtggctgac ggtgatgtct aacacgcttt tgtctgcctg gattcttaca 60
gcaggattcc tgattttcct cattggtaag tgtgacacca acaggtgttg ccttgttatg 120
<210> 19
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 19
ttttgtaggc tttgccctct ttggggtcat tagatgctgc cgctactgct gctactactg 60
ccttacactg gaaagtgagg agcgcccacc gaccccatat cgcaacactg tataaaggta 120
<210> 20
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 20
atctgccgcc atcatgccta cattctatct tgcgttacat gggggacaaa catatcatct 60
aattgttgac acggatagtc ttggaaaccc gtcactctca gtaattccct cgaatcccta 120
<210> 21
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 21
aattgttgac acggatagtc ttggaaaccc gtcactctca gtaattccct cgaatcccta 60
ccaggaacaa ctgtcagaca ctccattaat tccactaaca atctttgttg gggaaaacac 120
<210> 22
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 22
acccccacca cctcagcgca gggatgcctg gacacaagag ccatcacctc ttgataggga 60
tccgctagga tatgacgtcg ggcatggacc tctagcatct gctatgcgaa tgctttggat 120
<210> 23
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 23
tccgctagga tatgacgtcg ggcatggacc tctagcatct gctatgcgaa tgctttggat 60
ggctaattat attgtaagac aatcacgggg tgaccggggc cttattttgc cacaaggccc 120
<210> 24
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 24
ggctaattat attgtaagac aatcacgggg tgaccggggc cttattttgc cacaaggccc 60
acaaacagcc cctcaggcca ggttggtcca gccacatgtc ccccctctac gcccgacagc 120
<210> 25
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 25
acaaacagcc cctcaggcca ggttggtcca gccacatgtc ccccctctac gcccgacagc 60
acccaccatt ttgtcacctc tgtcacaacc gaggcttacc cctccacaac cactcatgat 120
<210> 26
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 26
acccaccatt ttgtcacctc tgtcacaacc gaggcttacc cctccacaac cactcatgat 60
gccaccaagg cctacccctc ctacccctct gccacctgca acactaacgg tgccaccaag 120
<210> 27
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 27
gccaccaagg cctacccctc ctacccctct gccacctgca acactaacgg tgccaccaag 60
gcctacccgt cctaccactc tgccacccac accactactc acggtactac aaaggcctac 120
<210> 28
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 28
gcctacccgt cctaccactc tgccacccac accactactc acggtactac aaaggcctac 60
cgaacttcaa cccacaccat caccaccacg catgcatctc cctgtcttgc atgtgccaga 120
<210> 29
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 29
cgaacttcaa cccacaccat caccaccacg catgcatctc cctgtcttgc atgtgccaga 60
ccaatcaatg caccctctta ctcatcaaag caccccaaat gatccagata gtccagaacc 120
<210> 30
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 30
ccaatcaatg caccctctta ctcatcaaag caccccaaat gatccagata gtccagaacc 60
acggtccccg actgtatttt ataacattcc acctatgcca ttacccccct cacaattgcc 120
<210> 31
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 31
acggtccccg actgtatttt ataacattcc acctatgcca ttacccccct cacaattgcc 60
accaccagca gcaccagcac agccacctcc aggggtcatc aacgaccaac aattacatca 120
<210> 32
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 32
accaccagca gcaccagcac agccacctcc aggggtcatc aacgaccaac aattacatca 60
tctaccctcg gggccaccat ggtggccacc catctgcgac cccccgcaac cctctaagac 120
<210> 33
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 33
caagggcaag tccagggaca agcaacgcaa gcccggtgga ccttggagac cagagccaaa 60
cacctccagt cctagcatgc ctgaactaag tccagtcctc ggtcttcatc agggacaagg 120
<210> 34
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 34
cacctccagt cctagcatgc ctgaactaag tccagtcctc ggtcttcatc agggacaagg 60
ggctggggac tcaccaactc ctggcccatc caatgccgcc cccgtttgta gaaattcaca 120
<210> 35
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 35
ggctggggac tcaccaactc ctggcccatc caatgccgcc cccgtttgta gaaattcaca 60
cacggcaacc cctaacgttt caccaataca tgaaccggag tcccataata gcccagaggc 120
<210> 36
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 36
cacggcaacc cctaacgttt caccaataca tgaaccggag tcccataata gcccagaggc 60
tcccattctc ttccccgatg attggtatcc tccatctata gaccccgcag acttagacga 120
<210> 37
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 37
tcccattctc ttccccgatg attggtatcc tccatctata gaccccgcag acttagacga 60
aagttgggat tacatttttg agacaacaga atctcctagc tcagatgaag attatgtgga 120
<210> 38
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 38
aagttgggat tacatttttg agacaacaga atctcctagc tcagatgaag attatgtgga 60
gggacccagt aaaagacctc gcccctccat ccagtaaaaa cccttgccct ctccagcaac 120
<210> 39
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 39
gggacccagt aaaagacctc gcccctccat ccagtaaaaa cccttgccct ctccagcaac 60
caatgtatcc caaataaatg ttacttcttt tgctcttaac cattgacacg cctgtcattc 120
<210> 40
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 40
ggtacaaggg gggtgcggtg ttggtgagtc acacttttgt tgcagacaaa atggacaagg 60
acaggccggg tcccccggcc ctggatgaca acatggaaga agaagtccca tctacctcgg 120
<210> 41
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 41
acaggccggg tcccccggcc ctggatgaca acatggaaga agaagtccca tctacctcgg 60
ttgtgcagga acaggtatcg gcgggagatt gggaaaatgt cctcatagag ttatcagata 120
<210> 42
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 42
ttgtgcagga acaggtatcg gcgggagatt gggaaaatgt cctcatagag ttatcagata 60
gcagctcaga aaaggaagca gaagatgccc acctggagcc ggcccagaag ggtacgaaga 120
<210> 43
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 43
gcagctcaga aaaggaagca gaagatgccc acctggagcc ggcccagaag ggtacgaaga 60
gaaagcgggt cgatcatgat gccggtgggt cagctccagc acgacccatg ctcccacccc 120
<210> 44
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 44
gaaagcgggt cgatcatgat gccggtgggt cagctccagc acgacccatg ctcccacccc 60
agccggatct ccctgggcga gaagccattc tccgcaggtt tccactagat ctaagaacac 120
<210> 45
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 45
agccggatct ccctgggcga gaagccattc tccgcaggtt tccactagat ctaagaacac 60
ttcttcaagc gattggagcc gcggctacgg tgagcatccc tatggcctaa gtgtgtgatg 120
<210> 46
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 46
tacccatcac acaacaacaa ggtaagtaat ttgttgccgt tggtttcagc gcatcgacac 60
acgagccata gaccagtttt tcggatccca gatttcaaat accgagatgt acataatgta 120
<210> 47
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 47
acgagccata gaccagtttt tcggatccca gatttcaaat accgagatgt acataatgta 60
tgccatggcc attcgacagg ccattagaga tcgtcggaga aatccagctt ctcgtagaga 120
<210> 48
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 48
tgccatggcc attcgacagg ccattagaga tcgtcggaga aatccagctt ctcgtagaga 60
tcaggccaaa tggagactgc aaaccctggc cgccggatgg cctatgggtt accaggcata 120
<210> 49
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 49
tcaggccaaa tggagactgc aaaccctggc cgccggatgg cctatgggtt accaggcata 60
cagcagctgg atgtacagct acaccgatca ccagacgact cccacattcg tacatctcca 120
<210> 50
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 50
cagcagctgg atgtacagct acaccgatca ccagacgact cccacattcg tacatctcca 60
ggcgacactt gggtgcacag gtggccgtag gtgtcacgtg accttttccg ccggcacctt 120
<210> 51
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 51
ggcgacactt gggtgcacag gtggccgtag gtgtcacgtg accttttccg ccggcacctt 60
taagctgccg cgatgtaccc ccggggatcg ccagtggttg tatgttcaga gctccgtggg 120
<210> 52
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 52
taagctgccg cgatgtaccc ccggggatcg ccagtggttg tatgttcaga gctccgtggg 60
taacattgta cagagctgta atccccgcta cagtattttc tttgactata tggctataca 120
<210> 53
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 53
taacattgta cagagctgta atccccgcta cagtattttc tttgactata tggctataca 60
caggagcctc acgaaaatct gggaggaagt tttaacacct gaccagcgtg tttcatttat 120
<210> 54
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 54
caggagcctc acgaaaatct gggaggaagt tttaacacct gaccagcgtg tttcatttat 60
ggaattccta ggatttttgc agagaacgga tttgtcctat atcaagagct ttgtcagcga 120
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<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 55
ggaattccta ggatttttgc agagaacgga tttgtcctat atcaagagct ttgtcagcga 60
tgccctgggc accactagta tccaaacacc gtggatcgat gacaatccta gcacggagac 120
<210> 56
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 56
tgccctgggc accactagta tccaaacacc gtggatcgat gacaatccta gcacggagac 60
ggcacaggct tggaatgccg gctttctccg gggtcgtgcg tatgggatag acttgcttag 120
<210> 57
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 57
ggcacaggct tggaatgccg gctttctccg gggtcgtgcg tatgggatag acttgcttag 60
aactgaaggg gaacatgtcg aaggtgctac cggtgaaacg cgagaagaaa gtgaggacac 120
<210> 58
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<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 58
aactgaaggg gaacatgtcg aaggtgctac cggtgaaacg cgagaagaaa gtgaggacac 60
ggagagcgat ggagatgatg aagatcttcc ttgtatagtg tccagaggtg gacctaaggt 120
<210> 59
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 59
ggagagcgat ggagatgatg aagatcttcc ttgtatagtg tccagaggtg gacctaaggt 60
caaacgaccc cctatattta taagacgtct gcacaggttg ctgctgatga gagcgggcaa 120
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<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 60
caaacgaccc cctatattta taagacgtct gcacaggttg ctgctgatga gagcgggcaa 60
acgaacagaa cagggcaagg aggtactgga aaaggcccgt gggagcactt atggcacacc 120
<210> 61
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 61
acgaacagaa cagggcaagg aggtactgga aaaggcccgt gggagcactt atggcacacc 60
taggccgcct gttccgaaac caagaccaga ggtcccacaa agcgacgaga cagctaccag 120
<210> 62
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 62
taggccgcct gttccgaaac caagaccaga ggtcccacaa agcgacgaga cagctaccag 60
tcacgggtcg gcgcaagtcc cagaaccccc aaccattcac ctagcagctc agggaatggc 120
<210> 63
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 63
tcacgggtcg gcgcaagtcc cagaaccccc aaccattcac ctagcagctc agggaatggc 60
atacccatta catgaacaac acggcatggc cccgtgtccg gtagcacagg ccccacctac 120
<210> 64
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 64
atacccatta catgaacaac acggcatggc cccgtgtccg gtagcacagg ccccacctac 60
gcccttgccc cctgtatctc caggggatca actcccaggt gtttttagcg acgggcgagt 120
<210> 65
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 65
gcccttgccc cctgtatctc caggggatca actcccaggt gtttttagcg acgggcgagt 60
ggcgtgtgca ccagtacccg ccccggctgg gcctattgtc cggccctggg agccatccct 120
<210> 66
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 66
ggcgtgtgca ccagtacccg ccccggctgg gcctattgtc cggccctggg agccatccct 60
gacacaggct gcggggcagg cctttgcacc cgttagacca caacacatgc cagtagaacc 120
<210> 67
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<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 67
gacacaggct gcggggcagg cctttgcacc cgttagacca caacacatgc cagtagaacc 60
cgtccctgtc ccgacagtgg cacttgagcg accagtttac cccaagccag ttcgtccggc 120
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<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 68
cgtccctgtc ccgacagtgg cacttgagcg accagtttac cccaagccag ttcgtccggc 60
acctcctaag attgctatgc agggccccgg ggaaacttct ggcattagac gcgcgcggga 120
<210> 69
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 69
acctcctaag attgctatgc agggccccgg ggaaacttct ggcattagac gcgcgcggga 60
gcgttggagg cccgcacctt ggacgccaaa tccaccccgt tctcccagtc agatgtccgt 120
<210> 70
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 70
gcgttggagg cccgcacctt ggacgccaaa tccaccccgt tctcccagtc agatgtccgt 60
gcgtgaccgt ctggctcgtt tgcgtgctga ggcacaggtc aaacaggcta gtgttgaggt 120
<210> 71
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 71
cactgacgtg gtccaacatc agctggatgc tttggggtat acactccatg gtcttaacca 60
tcccggggtt cccgtgtctc ctgccgttaa ccaatatcat ctcagccagg ctgcctttgg 120
<210> 72
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 72
tcccggggtt cccgtgtctc ctgccgttaa ccaatatcat ctcagccagg ctgcctttgg 60
gttacctatt gatgaggatg agagtggcga ggggtccgat acctccgagc cgtgtgaagc 120
<210> 73
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 73
tagaagggtg gtggtgtcag ctgttgttca catgtgtcag gatgacgagt ttccggatct 60
acaagatcct ccagatgagg cctaagcaaa ggtgtagaag tgtgtccccc tccattccac 120
<210> 74
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 74
tcgcatattt gcagaagggt cactgaaaca tcttatctta aaacagttac acctgaataa 60
tgaagaaagc gtggctcagc agagcacagc aagccgatgc cgggggggca tctggctccg 120
<210> 75
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 75
tgaagaaagc gtggctcagc agagcacagc aagccgatgc cgggggggca tctggctccg 60
aggacccacc agattatgga gatcaaggta atgtgacaca ggtgggatct gagcctattt 120
<210> 76
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 76
aggacccacc agattatgga gatcaaggta atgtgacaca ggtgggatct gagcctattt 60
cacctgagat tggccccttt gaactctctg cggccagtga ggatgatcct caatctgggc 120
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<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 77
cacctgagat tggccccttt gaactctctg cggccagtga ggatgatcct caatctgggc 60
cagtggaaga gaatttagat gccgctgcaa gagaggaaga ggaacctcat gagcaggagc 120
<210> 78
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 78
cagtggaaga gaatttagat gccgctgcaa gagaggaaga ggaacctcat gagcaggagc 60
acaatggtgg tgacgatccc ttggatgtcc atactcgcca gcctagattt gtggatgtga 120
<210> 79
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 79
acaatggtgg tgacgatccc ttggatgtcc atactcgcca gcctagattt gtggatgtga 60
acccaacgca ggctccagtg atccaactag tccacgctgt ctatgattcc atgttggtaa 120
<210> 80
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 80
gccagtctta attgattgtc attggtttca gcaatcggac ctccggcccc taggcagttt 60
attccttgag caaaacctga acatcgaaga atttatatgg atgtgcatga ccgtgcgtca 120
<210> 81
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 81
attccttgag caaaacctga acatcgaaga atttatatgg atgtgcatga ccgtgcgtca 60
cagatgtcag gccatcagaa aaaaaccatt accaattgtt aagcagaggc gttggaagct 120
<210> 82
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 82
cagatgtcag gccatcagaa aaaaaccatt accaattgtt aagcagaggc gttggaagct 60
cctgtcatct tgcagatcct ggcgtatggg ttaccgcacg cataacctca aagtaaacag 120
<210> 83
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 83
cctgtcatct tgcagatcct ggcgtatggg ttaccgcacg cataacctca aagtaaacag 60
ttttgagtca gggggggaca atgtccaccc ggtccttgtg actgctacgc taggatgtga 120
<210> 84
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 84
ttttgagtca gggggggaca atgtccaccc ggtccttgtg actgctacgc taggatgtga 60
tgagggcacg cggcatgcaa caacgtacag tgctggcatt gtacagatac cacgaatatc 120
<210> 85
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 85
tgagggcacg cggcatgcaa caacgtacag tgctggcatt gtacagatac cacgaatatc 60
agaccaaaac caaaagatcg aaacagcctt cctgatggca cgtcgtgcta ggtcactttc 120
<210> 86
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 86
agaccaaaac caaaagatcg aaacagcctt cctgatggca cgtcgtgcta ggtcactttc 60
ggcagaaaga tatactttgt tctttgattt agtatcctcc ggaaacaccc tgtatgctat 120
<210> 87
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 87
ggcagaaaga tatactttgt tctttgattt agtatcctcc ggaaacaccc tgtatgctat 60
atggattggg ctgggcacga aaaaccgagt ttcatttatt gagtttgtag gatggttatg 120
<210> 88
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 88
atggattggg ctgggcacga aaaaccgagt ttcatttatt gagtttgtag gatggttatg 60
caagaaggac cacactcata tacgcgaatg gttccgccag tgcaccggga gacccaaagc 120
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<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 89
caagaaggac cacactcata tacgcgaatg gttccgccag tgcaccggga gacccaaagc 60
agccaagcca tggttaagag cgcatcctgt cgccattcct tatgatgatc cgttaacaaa 120
<210> 90
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 90
agccaagcca tggttaagag cgcatcctgt cgccattcct tatgatgatc cgttaacaaa 60
cgaggagatt gatctggcct atgcccgcgg gcaggccatg aatattgagg ctcctagact 120
<210> 91
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 91
cgaggagatt gatctggcct atgcccgcgg gcaggccatg aatattgagg ctcctagact 60
gccagatgat cctataattg ttgaggatga cgacgaaagt gaggaaattg aagctgaaag 120
<210> 92
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 92
gccagatgat cctataattg ttgaggatga cgacgaaagt gaggaaattg aagctgaaag 60
cgacgaggag gaagacaaga gtggaatgga atctcttaaa aatataccgc aaacactgcc 120
<210> 93
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<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 93
cgacgaggag gaagacaaga gtggaatgga atctcttaaa aatataccgc aaacactgcc 60
gtacaatcca acagtatacg gcaggcccgc ggtgtttgac cgaaagtcag atgcaaaatc 120
<210> 94
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 94
gtacaatcca acagtatacg gcaggcccgc ggtgtttgac cgaaagtcag atgcaaaatc 60
aaccaaaaaa tgcagggcca tagtaactga ctttagtgta atcaaggcca ttgaagagga 120
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<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 95
aaccaaaaaa tgcagggcca tagtaactga ctttagtgta atcaaggcca ttgaagagga 60
acacagaaag aagaaggcag ccagaacaga gcagccaaga gccacgcctg aatcccaggc 120
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<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 96
acacagaaag aagaaggcag ccagaacaga gcagccaaga gccacgcctg aatcccaggc 60
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<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 97
ccccacagtg gtcctccagc gaccacccac gcagcaagag cctggccccg tcggcccact 60
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<212> DNA
<213> 人工序列
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gagtgtccag gctcggctgg agccatggca acctttgcct gggccccaag tgacagcagt 60
tctacttcac gaagaatcca tgcagggtgt ccaagtacat ggttcgatgc tagaccttct 120
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<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 99
tctacttcac gaagaatcca tgcagggtgt ccaagtacat ggttcgatgc tagaccttct 60
tgaaaaagac gatgaagtca tggagcagag ggttatggca accctactgc caccagtacc 120
<210> 100
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 100
tgaaaaagac gatgaagtca tggagcagag ggttatggca accctactgc caccagtacc 60
acaacagccc cgggctggca gaagaggccc ttgtgtcttc accggtgacc taggcataga 120
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<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 101
acaacagccc cgggctggca gaagaggccc ttgtgtcttc accggtgacc taggcataga 60
gagtgatgag cccgcttcga cagagccggt tcatgatcag ctactgcctg ccccaggacc 120
<210> 102
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 102
gagtgatgag cccgcttcga cagagccggt tcatgatcag ctactgcctg ccccaggacc 60
tgaccctctt gaaatccaac cactaacgtc ccccaccacg tctcaactta gcagttcggc 120
<210> 103
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 103
tgaccctctt gaaatccaac cactaacgtc ccccaccacg tctcaactta gcagttcggc 60
accaagctgc gcacaaactc catggccggt ggttcagcca agtcagactc cagatgaccc 120
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<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 104
accaagctgc gcacaaactc catggccggt ggttcagcca agtcagactc cagatgaccc 60
aacgaaacag tcccggccac cggaaacagc tgccccacgc cagtggccaa tgcccctgcg 120
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<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 105
aacgaaacag tcccggccac cggaaacagc tgccccacgc cagtggccaa tgcccctgcg 60
acctatccct atgcgcccct tgcggatgca gccaatccca tttaatcatc cagtgggacc 120
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<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 106
acctatccct atgcgcccct tgcggatgca gccaatccca tttaatcatc cagtgggacc 60
cactccccat cagacacctc aagtggaaat aacaccatat aagcccactt gggctcagat 120
<210> 107
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<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 107
cactccccat cagacacctc aagtggaaat aacaccatat aagcccactt gggctcagat 60
agggcacatt ccatatcagc ctacaccaac gggtcctgct accatgctgt tgcgccagtg 120
<210> 108
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 108
gctgcccact cccatgcagc tggcactaag ggctcctgct ggtcagcagg ggccgacaaa 60
gcaaattttg cgccaattgt taacgggggg cgtcaagaaa gggagaccat cacttaagtt 120
<210> 109
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 109
gcaaattttg cgccaattgt taacgggggg cgtcaagaaa gggagaccat cacttaagtt 60
acaggccgcc cttgagcgtc aagccgctgc gggctggcag ccttcaccag ggtccggcac 120
<210> 110
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 110
acaggccgcc cttgagcgtc aagccgctgc gggctggcag ccttcaccag ggtccggcac 60
cagtgacaag attgtgcagg cgcctatttt ctacccaccc gttttgcagc ccatacaggt 120
<210> 111
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 111
cagtgacaag attgtgcagg cgcctatttt ctacccaccc gttttgcagc ccatacaggt 60
tatggggcaa gggggttccc caacggccat ggccgcctca gcggtgacac aggcacccac 120
<210> 112
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 112
tatggggcaa gggggttccc caacggccat ggccgcctca gcggtgacac aggcacccac 60
ggaatatacc agggaaagga ggggagtggg gcctatgcct cccaccgata ttccgccgtc 120
<210> 113
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 113
ggaatatacc agggaaagga ggggagtggg gcctatgcct cccaccgata ttccgccgtc 60
taaacgagcg aagatcgagg cctatacaga gcccgagatg ccgcacgggg gggcctcgca 120
<210> 114
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 114
taaacgagcg aagatcgagg cctatacaga gcccgagatg ccgcacgggg gggcctcgca 60
ctctcccgtc gttatcttgg agaatgtcgg ccaggggcaa cagcagactc tggagtgcgg 120
<210> 115
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 115
ctctcccgtc gttatcttgg agaatgtcgg ccaggggcaa cagcagactc tggagtgcgg 60
aggaactgct aaacaggaaa gggacatgtt ggggctgggg gacattgcag tttcttcccc 120
<210> 116
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 116
aggaactgct aaacaggaaa gggacatgtt ggggctgggg gacattgcag tttcttcccc 60
ttcctcttct gaaacatcga acgatgagtg atttcgccca tgtaacaaga actgggatga 120
<210> 117
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 117
ttcctcttct gaaacatcga acgatgagtg atttcgccca tgtaacaaga actgggatga 60
accctggggc aacagactgc ggggaggagg ggggcagtga taagtcatga caattttaga 120
<210> 118
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 118
catggaatca tttgaaggac agggggactc tagacagtca cccgacaatg agcggggaga 60
taatgtacag actaccggcg agcatgatca ggaccctggg ccggggcctc catccagtgg 120
<210> 119
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 119
taatgtacag actaccggcg agcatgatca ggaccctggg ccggggcctc catccagtgg 60
ggcttctgag agattggtac cagaagagtc atactcaaga gatcagcaac cttgggggca 120
<210> 120
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 120
ggcttctgag agattggtac cagaagagtc atactcaaga gatcagcaac cttgggggca 60
aagcaggggt gatgaaaaca gaggctggat gcagcgcatc aggcgaaggc ggagaagacg 120
<210> 121
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 121
aagcaggggt gatgaaaaca gaggctggat gcagcgcatc aggcgaaggc ggagaagacg 60
ggctgccttg tccggccatc ttttagacac ggaagacaat gtgccgccat ggttgcctcc 120
<210> 122
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 122
ggctgccttg tccggccatc ttttagacac ggaagacaat gtgccgccat ggttgcctcc 60
acacgacatc acaccatata ccgcaaggaa tatcagggat gctgcctgcc gggctgtcaa 120
<210> 123
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 123
acacgacatc acaccatata ccgcaaggaa tatcagggat gctgcctgcc gggctgtcaa 60
ggtgagtatg cctctaactg ggttcatggg ggccatctaa ggcccacgtg tgacccatgt 120
<210> 124
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 124
atgggggcca tctaaggccc acgtgtgacc catgtttcca ttaattttag caatcgcacc 60
tgcaagcgct atcaaacctg atactcgata gtgggttaga cacacaacac atcttgtgct 120
<210> 125
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 125
tgcaagcgct atcaaacctg atactcgata gtgggttaga cacacaacac atcttgtgct 60
tcgtgatggc agccaggcag cgtcttcagg acattcgacg tggacccttg gttgcggagg 120
<210> 126
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 126
tcgtgatggc agccaggcag cgtcttcagg acattcgacg tggacccttg gttgcggagg 60
gcggtgtggg ttggcgacat tggcttctaa catctcccag ccaatcctgg cccatgggat 120
<210> 127
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 127
gcggtgtggg ttggcgacat tggcttctaa catctcccag ccaatcctgg cccatgggat 60
atcgtacagc aacactacgc acattaactc ccgtgcctaa cagggttggg gctgacagca 120
<210> 128
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 128
atcgtacagc aacactacgc acattaactc ccgtgcctaa cagggttggg gctgacagca 60
tcatgttaac tgccacattt ggatgccaaa atgcggcacg aactctaaac accttctctg 120
<210> 129
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 129
tcatgttaac tgccacattt ggatgccaaa atgcggcacg aactctaaac accttctctg 60
ccaccgtgtg gacaccaccc catgctggac caagagagca agaaagatac gctcgggaag 120
<210> 130
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 130
ccaccgtgtg gacaccaccc catgctggac caagagagca agaaagatac gctcgggaag 60
ccgaggtacg cttccttcgt ggtaaatggc agaggcggta ccgaagaatc tatgatttga 120
<210> 131
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 131
ccgaggtacg cttccttcgt ggtaaatggc agaggcggta ccgaagaatc tatgatttga 60
tagaactgtg tggctctctg caccacatct ggcaaaactt gctccagacc gaggagaacc 120
<210> 132
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 132
tagaactgtg tggctctctg caccacatct ggcaaaactt gctccagacc gaggagaacc 60
ttttagattt cgtgcgtttc atgggtgtca tgtccagctg caataatcca gctgtgaatt 120
<210> 133
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 133
ttttagattt cgtgcgtttc atgggtgtca tgtccagctg caataatcca gctgtgaatt 60
actggtttca caagacaatc ggaaacttta agccatatta cccgtggaat gcaccaccta 120
<210> 134
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 134
actggtttca caagacaatc ggaaacttta agccatatta cccgtggaat gcaccaccta 60
atgaaaatcc atatcacgcg cggagaggca taaaagaaca cgtaatccag aacgcatttc 120
<210> 135
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 135
atgaaaatcc atatcacgcg cggagaggca taaaagaaca cgtaatccag aacgcatttc 60
gaaaggcaca aatacagggt ttatcaatgt tagcaacggg aggtgaaccc agaggtgatg 120
<210> 136
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 136
gaaaggcaca aatacagggt ttatcaatgt tagcaacggg aggtgaaccc agaggtgatg 60
ctactagtga aacgagcagt gatgaggaca ccggtagaca gggttcggac gtggagctag 120
<210> 137
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 137
ctactagtga aacgagcagt gatgaggaca ccggtagaca gggttcggac gtggagctag 60
agtcctcgga cgatgagctg ccatatatcg atcccaatat ggagccggtt cagcagaggc 120
<210> 138
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 138
agtcctcgga cgatgagctg ccatatatcg atcccaatat ggagccggtt cagcagaggc 60
ccgtcatgtt tgtgagccgt gtgcctgcaa agaaaccgag gaaactgcct tggcccacgc 120
<210> 139
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 139
ccgtcatgtt tgtgagccgt gtgcctgcaa agaaaccgag gaaactgcct tggcccacgc 60
ccaagacgca cccagtgaag cgcacaaatg ttaagacctc tgatagatct gataaggcag 120
<210> 140
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 140
ccaagacgca cccagtgaag cgcacaaatg ttaagacctc tgatagatct gataaggcag 60
aagcacaaag cacccctgaa aggccgggcc cttccgaaca atcatcagtg accgtggagc 120
<210> 141
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 141
aagcacaaag cacccctgaa aggccgggcc cttccgaaca atcatcagtg accgtggagc 60
ccgcccaccc gaccccggtg gagatgccaa tggtgattct ccatcaacca cctccagtgc 120
<210> 142
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 142
ccgcccaccc gaccccggtg gagatgccaa tggtgattct ccatcaacca cctccagtgc 60
ccaaaccggt tccagtcaag cctacgccac cgccttcccg taggagaagg ggagcgtgtg 120
<210> 143
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 143
ccaaaccggt tccagtcaag cctacgccac cgccttcccg taggagaagg ggagcgtgtg 60
ttgtgtacga cgatgatgtc atagaggtga ttgatgttga aaccaccgaa gattcatcgt 120
<210> 144
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 144
ttgtgtacga cgatgatgtc atagaggtga ttgatgttga aaccaccgaa gattcatcgt 60
cagtgtcaca gccaaataag ccacatcgga aacatcaaga cggctttcaa cgttcaggcc 120
<210> 145
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 145
cagtgtcaca gccaaataag ccacatcgga aacatcaaga cggctttcaa cgttcaggcc 60
gacgtcaaaa acgagccgcg cctcccaccg tgagtccttc ggatactggg cctcctgccg 120
<210> 146
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 146
tggcgcctcc cgtcgtacgt atgtttatga gggagcgaca gctcccccag tccaccggcc 60
gtaaacctca gtgcttctgg gaaatgcggg ctggtcgtga aattacacaa atgcaacaag 120
<210> 147
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 147
gtaaacctca gtgcttctgg gaaatgcggg ctggtcgtga aattacacaa atgcaacaag 60
aaccaagttc acacctgcag tccgccactc agcctacaac gcctcgccca tcatgggccc 120
<210> 148
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 148
aaccaagttc acacctgcag tccgccactc agcctacaac gcctcgccca tcatgggccc 60
catcagtctg cgccctctcg gtgatggatg ctggtaaggc ccagcccata gaaagttcac 120
<210> 149
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 149
catcagtctg cgccctctcg gtgatggatg ctggtaaggc ccagcccata gaaagttcac 60
acttgagttc catgtcgccc acacagccga tatcgcacga agaacaaccc cggtatgagg 120
<210> 150
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 150
acttgagttc catgtcgccc acacagccga tatcgcacga agaacaaccc cggtatgagg 60
atcctgacgc tcctctggat ttaagtttac atccagacgt tgctgctcaa ccagctcccc 120
<210> 151
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 151
tccaatcatc ttcatatcca ggatatgcgg gtccctggac cccaaggtct caacatccat 60
gttataggca cccctgggca ccatggtctc aagatcctgt gcatgggcac acccagggtc 120
<210> 152
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 152
gttataggca cccctgggca ccatggtctc aagatcctgt gcatgggcac acccagggtc 60
catgggatcc cagggcacca catctcccac ctcagtggga tggatctgca ggacatggcc 120
<210> 153
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 153
catgggatcc cagggcacca catctcccac ctcagtggga tggatctgca ggacatggcc 60
aggatcaggt ctcccagttc ccacatctgc aatcggagac aggcccacca cgtcttcaac 120
<210> 154
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 154
aggatcaggt ctcccagttc ccacatctgc aatcggagac aggcccacca cgtcttcaac 60
tttcattggt gccactggtc tcatcctctg caccatcatg gtcatctccc cagccccgag 120
<210> 155
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 155
tttcattggt gccactggtc tcatcctctg caccatcatg gtcatctccc cagccccgag 60
cccccatacg ccccattcca acaagattcc cccctccccc tatgccgtta caagatagca 120
<210> 156
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 156
cccccatacg ccccattcca acaagattcc cccctccccc tatgccgtta caagatagca 60
tggccgtggg gtgtgactca tcaggtacag catgcccaag catgcccttt gccagtgatt 120
<210> 157
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 157
tggccgtggg gtgtgactca tcaggtacag catgcccaag catgcccttt gccagtgatt 60
acagtcaagg tgcatttacc ccactggaca ttaatgccac cacgccaaaa aggcctcgag 120
<210> 158
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 158
acagtcaagg tgcatttacc ccactggaca ttaatgccac cacgccaaaa aggcctcgag 60
tagaagaaag ttctcacgga cctgcccggt gttcccaagc tactgctgaa gcacaggaga 120
<210> 159
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 159
tagaagaaag ttctcacgga cctgcccggt gttcccaagc tactgctgaa gcacaggaga 60
ttctcagtga caattctgag atctccgtgt tcccaaagga cgcgaagcag actgactacg 120
<210> 160
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 160
ttctcagtga caattctgag atctccgtgt tcccaaagga cgcgaagcag actgactacg 60
atgcatccac tgaaagtgag ctagattaag gggatccaag gtgacccctg ttagctattt 120
<210> 161
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 161
acgggagtta gaaatttaag agatcctcgt gtaaaacatc tggtgtccgg gggataatgg 60
agtcaacatc caggcttggg cacatctgct tcaacaggag gcgcagcctg tcattttcag 120
<210> 162
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 162
agtcaacatc caggcttggg cacatctgct tcaacaggag gcgcagcctg tcattttcag 60
atgatttggc agcagccacc tgcggacaaa aatcaggcgt ttagatgggg catttatgtt 120
<210> 163
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 163
atgatttggc agcagccacc tgcggacaaa aatcaggcgt ttagatgggg catttatgtt 60
tgggacgcta gccgcctggg cattcgtgtt agtatatact gacctcacgg tagtgctgca 120
<210> 164
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 164
tatactgacc tcacggtagt gctgcagcag ttgcttaaac ttggcccggc attttctgga 60
agccacccga ttcttgtatc gctttatttc tagttcagaa tcgcattcct ccagctgcga 120
<210> 165
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 165
cccctcctta ccgattctgg ctgttgtggt ttccgtgtgc gtcgtgccgg ggcagccact 60
ggtgcaggct gtggaacacc aatgtctgct agctgttgtc cttggttagc cccggggcaa 120
<210> 166
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 166
ggtgcaggct gtggaacacc aatgtctgct agctgttgtc cttggttagc cccggggcaa 60
gcaaacacca ctgctgctgc tgtttgaaca gtagaattgt ctccaggttg aggtgcttct 120
<210> 167
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 167
gcaaacacca ctgctgctgc tgtttgaaca gtagaattgt ctccaggttg aggtgcttct 60
cccccggctt ggttagtctg ttgattctgg gttatgtcgg agactgggaa cagctgaggt 120
<210> 168
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 168
cccccggctt ggttagtctg ttgattctgg gttatgtcgg agactgggaa cagctgaggt 60
gctgcataag cttgataagc attctcagga gcaggctgag gggcagaaaa ccacgaccca 120
<210> 169
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 169
gctgcataag cttgataagc attctcagga gcaggctgag gggcagaaaa ccacgaccca 60
gtcggagcgg ttgaaacatg ataggcagtt agctggcctt gtggcagagg ctctggcagc 120
<210> 170
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 170
gtcggagcgg ttgaaacatg ataggcagtt agctggcctt gtggcagagg ctctggcagc 60
accggccaca gcacacaagg caaaggagct tgcgatggcc ctcccaggtc ctgatagact 120
<210> 171
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 171
accggccaca gcacacaagg caaaggagct tgcgatggcc ctcccaggtc ctgatagact 60
ctggtagctt ggtcaaaagc ttgtacaaaa ggcacctggt atgggtcagg tgtaaatttt 120
<210> 172
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 172
ctggtagctt ggtcaaaagc ttgtacaaaa ggcacctggt atgggtcagg tgtaaatttt 60
acatcttcag aagtcgagtt tgggtccatc atcttcagca aagatagcaa aggtggccgg 120
<210> 173
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 173
acatcttcag aagtcgagtt tgggtccatc atcttcagca aagatagcaa aggtggccgg 60
caaggtgcaa tgtttagtga gttacctgtc taacatctcc cctttaaagc caaggcacca 120
<210> 174
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 174
aatcatgtct gacgaggggc caggtacagg acctggaaat ggcctaggag agaagggaga 60
cacatctgga ccagaaggct ccggcggcag tggacctcaa agaagagggg gtgataacca 120
<210> 175
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 175
cacatctgga ccagaaggct ccggcggcag tggacctcaa agaagagggg gtgataacca 60
tggacgagga cggggaagag gacgaggacg aggaggcgga agaccaggag ccccgggcgg 120
<210> 176
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 176
tggacgagga cggggaagag gacgaggacg aggaggcgga agaccaggag ccccgggcgg 60
ctcaggatca gggccaagac atagagatgg tgtccggaga ccccaaaaac gtccaagttg 120
<210> 177
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 177
aggaggggca ggagcaggag gtggaggccg gggtcgagga ggcagtggag gccggggtcg 60
aggaggtagt ggaggccggg gtcgaggagg tagtggaggc cgccggggta gaggacgtga 120
<210> 178
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 178
aggaggtagt ggaggccggg gtcgaggagg tagtggaggc cgccggggta gaggacgtga 60
aagagccagg gggggaagtc gtgaaagagc cagggggaga ggtcgtggac gtggagaaaa 120
<210> 179
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 179
aagagccagg gggggaagtc gtgaaagagc cagggggaga ggtcgtggac gtggagaaaa 60
gaggcccagg agtcccagta gtcagtcatc atcatccggg tctccaccgc gcaggccccc 120
<210> 180
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 180
gaggcccagg agtcccagta gtcagtcatc atcatccggg tctccaccgc gcaggccccc 60
tccaggtaga aggccatttt tccaccctgt aggggaagcc gattattttg aataccacca 120
<210> 181
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 181
tccaggtaga aggccatttt tccaccctgt aggggaagcc gattattttg aataccacca 60
agaaggtggc ccagatggtg agcctgacgt gcccccggga gcgatagagc agggccccgc 120
<210> 182
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 182
agaaggtggc ccagatggtg agcctgacgt gcccccggga gcgatagagc agggccccgc 60
agatgaccca ggagaaggcc caagcactgg accccggggt cagggtgatg gaggcaggcg 120
<210> 183
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 183
agatgaccca ggagaaggcc caagcactgg accccggggt cagggtgatg gaggcaggcg 60
caaaaaagga gggtggtttg gaaagcatcg tggtcaagga ggttccaacc cgaaatttga 120
<210> 184
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 184
caaaaaagga gggtggtttg gaaagcatcg tggtcaagga ggttccaacc cgaaatttga 60
gaacattgca gaaggtttaa gagctctcct ggctaggagt cacgtagaaa ggactaccga 120
<210> 185
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 185
gaacattgca gaaggtttaa gagctctcct ggctaggagt cacgtagaaa ggactaccga 60
cgaaggaact tgggtcgccg gtgtgttcgt atatggaggt agtaagacct ccctttacaa 120
<210> 186
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 186
cgaaggaact tgggtcgccg gtgtgttcgt atatggaggt agtaagacct ccctttacaa 60
cctaaggcga ggaactgccc ttgctattcc acaatgtcgt cttacaccat tgagtcgtct 120
<210> 187
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 187
cctaaggcga ggaactgccc ttgctattcc acaatgtcgt cttacaccat tgagtcgtct 60
cccctttgga atggcccctg gacccggccc acaacctggc ccgctaaggg agtccattgt 120
<210> 188
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 188
cccctttgga atggcccctg gacccggccc acaacctggc ccgctaaggg agtccattgt 60
ctgttatttc atggtctttt tacaaactca tatatttgct gaggttttga aggatgcgat 120
<210> 189
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 189
ctgttatttc atggtctttt tacaaactca tatatttgct gaggttttga aggatgcgat 60
taaggacctt gttatgacaa agcccgctcc tacctgcaat atcagggtga ctgtgtgcag 120
<210> 190
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 190
taaggacctt gttatgacaa agcccgctcc tacctgcaat atcagggtga ctgtgtgcag 60
ctttgacgat ggagtagatt tgcctccctg gtttccacct atggtggaag gggctgccgc 120
<210> 191
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 191
ctttgacgat ggagtagatt tgcctccctg gtttccacct atggtggaag gggctgccgc 60
ggagggtgat gacggagatg acggagatga aggaggtgat ggagatgagg gtgaggaagg 120
<210> 192
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 192
ggagggtgat gacggagatg acggagatga aggaggtgat ggagatgagg gtgaggaagg 60
gcaggagtga tgtaacttgt taggagacgc cctcaatcgt attaaaagcc gtgtattccc 120
<210> 193
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 193
gcaggagtga tgtaacttgt taggagacgc cctcaatcgt attaaaagcc gtgtattccc 60
ccgcactaaa gaataaatcc ccagtagaca tcatgcgtgc tgttggtgta tttctggcca 120
<210> 194
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 194
cctctcgcct tgtttctcag agagcatttc aggccggttt tgcagtcgct gctgcagcta 60
tggggtccct agaaatggtg ccaatgggcg cgggtccccc tagccccggc ggggatccgg 120
<210> 195
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 195
tggggtccct agaaatggtg ccaatgggcg cgggtccccc tagccccggc ggggatccgg 60
atgggtacga tggcggaaac aactcccaat atccatctgc ttctggctct tctgggaaca 120
<210> 196
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 196
atgggtacga tggcggaaac aactcccaat atccatctgc ttctggctct tctgggaaca 60
cccccacccc accgaacgat gaggaacgtg aatctaatga agagccccca ccgccttatg 120
<210> 197
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 197
cccccacccc accgaacgat gaggaacgtg aatctaatga agagccccca ccgccttatg 60
aggacccata ttggggcaat ggcgaccgtc actcggacta tcaaccacta ggaacccaag 120
<210> 198
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 198
aggacccata ttggggcaat ggcgaccgtc actcggacta tcaaccacta ggaacccaag 60
atcaaagtct gtacttggga ttgcaacacg acgggaatga cgggctccct ccccctccct 120
<210> 199
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 199
atcaaagtct gtacttggga ttgcaacacg acgggaatga cgggctccct ccccctccct 60
actctccacg ggatgactca tctcaacaca tatacgaaga agcgggcaga ggaaggtaag 120
<210> 200
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 200
tcaggcaagc ctatgacatg gtaatgccta gaagtaaaga aaggttagtc atagtagctt 60
agctgaactg ggccgtgggg gtcgtcatca tctccaccgg aaccagaaga acccaaaagc 120
<210> 201
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 201
agctgaactg ggccgtgggg gtcgtcatca tctccaccgg aaccagaaga acccaaaagc 60
agcgtaggaa ggtgtggatc accgccgcca tggccggaat catgactatg accgccgcct 120
<210> 202
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 202
agcgtaggaa ggtgtggatc accgccgcca tggccggaat catgactatg accgccgcct 60
ccgtctgtca tcaaaggcgg gccctggtca cctcctttgt tttcaacctc ttccgtcaat 120
<210> 203
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 203
ccgtctgtca tcaaaggcgg gccctggtca cctcctttgt tttcaacctc ttccgtcaat 60
tgtggagggc ctccatcatt tccagcagag tcgctagggc tatgaggcag cgggtcatgt 120
<210> 204
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 204
aggttttgag agcagagtgg gggtccgtcg ccggctccac tcacgagcag gtggtgtctg 60
ccctcgttgg agttagagtc agattcatgg ccagaatcat cggtagcttg ttgagggtgc 120
<210> 205
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 205
ccctcgttgg agttagagtc agattcatgg ccagaatcat cggtagcttg ttgagggtgc 60
gggagggagt catcgtggtg gtgttcatca ctgtgtcgtt gtccatggta atacatccag 120
<210> 206
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 206
gggagggagt catcgtggtg gtgttcatca ctgtgtcgtt gtccatggta atacatccag 60
attaaaatcg ccagaaacag gaggagccaa aggagatcaa ccaatagagt ccaccagttt 120
<210> 207
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 207
attaaaatcg ccagaaacag gaggagccaa aggagatcaa ccaatagagt ccaccagttt 60
tgttgtagat agagagcaat aatgagcagg atgaggtcta ggaagaaggc taggaagaag 120
<210> 208
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 208
tgttgtagat agagagcaat aatgagcagg atgaggtcta ggaagaaggc taggaagaag 60
gccaaaagct gccagatggt ggcaccaagt cgccagagca tctccaataa gtagatccag 120
<210> 209
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 209
gccaaaagct gccagatggt ggcaccaagt cgccagagca tctccaataa gtagatccag 60
atacctaaga ctgcgttgaa aaaagagtgt tagggttgga aaagtggggg tgtggtaaat 120
<210> 210
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 210
gggaatgtta gatcttacca agtaagcacc cgaagatgaa cagcacaatt ccaaggaaca 60
atgcctgtcc gtgcaaattc cagagagcga tgagcaggag ggtgactggg gaaagaggag 120
<210> 211
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 211
gggtgtaata cttactcatc agtaggagta tacaaagggc tccaagtgga cagagaaggt 60
ctcttctgaa gataaagatg atcaaaatta taattataag catgagagca aaggaataga 120
<210> 212
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 212
ctcttctgaa gataaagatg atcaaaatta taattataag catgagagca aaggaataga 60
ggacaaggag ggctcctcca gtccagtcac tcataacgat gtacagccaa aacagtagcg 120
<210> 213
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 213
ggacaaggag ggctcctcca gtccagtcac tcataacgat gtacagccaa aacagtagcg 60
ccaagaggag gagaaggaga gcaaggccta gggaagagga gagggggggt cctcgagggg 120
<210> 214
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 214
ccaagaggag gagaaggaga gcaaggccta gggaagagga gagggggggt cctcgagggg 60
gccgtcgcgg gcccggtggg cccctctcaa ggtcgtgttc catcctcagg gcagtgtgtc 120
<210> 215
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 215
gccgtcgcgg gcccggtggg cccctctcaa ggtcgtgttc catcctcagg gcagtgtgtc 60
aggagcaagg cagttgagga aagaaggggg cagagcagtg tgagaggctt atgtagggcg 120
<210> 216
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 216
catataatct aattgttgac actgatatgt ctggaaaccc gtcactctcc gtaattccca 60
cgaatcctta ccaggaacaa ctatcaaata atccattaat tcaactacaa atcgttgtcg 120
<210> 217
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 217
cgaatcctta ccaggaacaa ctatcaaata atccattaat tcaactacaa atcgttgtcg 60
gggaaaacac tggggcaccc gcaccgcccc aaccaccccc cccaccccct ccacctcctc 120
<210> 218
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 218
gcagtgacgc cagtcaaggc cctctggcat cttccataag aatgctttgc atggctcaat 60
accttcttag aaacgcacgg ggccaacaag gccttcttag gccactagga ccacaaacac 120
<210> 219
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 219
accttcttag aaacgcacgg ggccaacaag gccttcttag gccactagga ccacaaacac 60
gctctcaggt caccttggaa cgtcaacctg tccacaaccc tcgccaggag gcacccatca 120
<210> 220
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 220
gctctcaggt caccttggaa cgtcaacctg tccacaaccc tcgccaggag gcacccatca 60
ttttgttaca gagtcccgcg cccccccgat tcacaccagt gcccatggta gccttaggac 120
<210> 221
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 221
ttttgttaca gagtcccgcg cccccccgat tcacaccagt gcccatggta gccttaggac 60
atactcttca acccacacca ccaccaaggc ctactcttcc tcaacccaga ataccactga 120
<210> 222
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 222
atactcttca acccacacca ccaccaaggc ctactcttcc tcaacccaga ataccactga 60
taataccacc aaggcatact aatcaaccag ccacaacacc acccacggcg ccacaaaggc 120
<210> 223
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 223
taataccacc aaggcatact aatcaaccag ccacaacacc acccacggcg ccacaaaggc 60
tcacactagg gcatcaacta agtctaccac cgcatcctcc cccgcatcag agcaccccac 120
<210> 224
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 224
tcacactagg gcatcaacta agtctaccac cgcatcctcc cccgcatcag agcaccccac 60
attgtagttc tgatagtaca ggactccctc cacctcccac atcttacagc attccttcta 120
<210> 225
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 225
attgtagttc tgatagtaca ggactccctc cacctcccac atcttacagc attccttcta 60
tgacattatc ccccgaacca ttgccgccac cagcagcacc agcacacccc cttccaggtg 120
<210> 226
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 226
tgacattatc ccccgaacca ttgccgccac cagcagcacc agcacacccc cttccaggtg 60
tcatttatga ccaacaagca cttcctccaa ctccagggcc accatggtgg ccacctgtcc 120
<210> 227
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 227
tcatttatga ccaacaagca cttcctccaa ctccagggcc accatggtgg ccacctgtcc 60
gcgaccccac gccaaccact cagactccac caacaaatac gaaacagggc ccggaccagg 120
<210> 228
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 228
gcgaccccac gccaaccact cagactccac caacaaatac gaaacagggc ccggaccagg 60
gccagggaag gggcaggtgg cggggcaggg gcagaagcaa gggcaggggc agaatgcaca 120
<210> 229
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 229
gccagggaag gggcaggtgg cggggcaggg gcagaagcaa gggcaggggc agaatgcaca 60
aacttcctga accacggaga ccagggccag acacttccag tcctagtatg cctcaattaa 120
<210> 230
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 230
ctacggccgg ccccgtctgt agagtgacac cttcagcaac ccctgacatt tcaccaatac 60
atgaaccaga gtcctctgat agtgaagaac ccccctttct cttccccagt gattggtatc 120
<210> 231
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 231
atgaaccaga gtcctctgat agtgaagaac ccccctttct cttccccagt gattggtatc 60
ctccaacgtt agaacctgca gaattagatg aaagttggga gggcattttt gaaacaacag 120
<210> 232
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 232
ctccaacgtt agaacctgca gaattagatg aaagttggga gggcattttt gaaacaacag 60
aatctcatag ctctgatgaa gagaatgtag gggggcctag taaaagacct cgcacctcca 120
<210> 233
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 233
aatctcatag ctctgatgaa gagaatgtag gggggcctag taaaagacct cgcacctcca 60
ctcagtaaaa gaccttactc tctccagtaa tcaatgtatc ccaaataaat gttaatgatt 120
<210> 234
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 234
ctcagaagag gaagcagaag atgcccacct ggagccatcc cagaggggta aaaagagaaa 60
acgggtcgat gatgatgccg gtggttcagc tccagcacaa cacgtgcccc cccctcagct 120
<210> 235
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 235
acgggtcgat gatgatgccg gtggttcagc tccagcacaa cacgtgcccc cccctcagct 60
ggatcaccct ggtcgagaag ccattctcta caggtttccg ctagatttaa gaaggtttat 120
<210> 236
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 236
ggatcaccct ggtcgagaag ccattctcta caggtttccg ctagatttaa gaaggtttat 60
tcaagcaatt ggagccgcag ctacggtgag cttccctatg gcccaggtgt gtgatgtgtg 120
<210> 237
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 237
ggccgctggt tggcctatgg gttaccaggc atacagtagc tggatgtaca gctacaccga 60
tccccaggtg actgccacga tcatacatct gcaggcgact cttgggtgcg caagtggccg 120
<210> 238
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 238
tccccaggtg actgccacga tcatacatct gcaggcgact cttgggtgcg caagtggccg 60
taggtgtcat gtgacctttt ctgccggcac ctttaggccg ccgcgatgta gtcccgggga 120
<210> 239
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 239
taggtgtcat gtgacctttt ctgccggcac ctttaggccg ccgcgatgta gtcccgggga 60
tcgccagtgg ttgtatgttc agagccgcgt gggtgacctt gtgcagagtt ctaatccatg 120
<210> 240
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 240
agtggtaaca cctgatcagc gtgttacatt tatggaattc ctgggctttt tgcaacgcac 60
ggagttggtc tacatcaaga gctttgtcag ctatgccttg ggcaccacta gtatcgaaac 120
<210> 241
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 241
tacctgtgaa acacgggaag aaagtgagga cacagagagc gatggggatg atgaagaact 60
tcctcgtgta gtgtccaggg atggaactaa gcacagacga ccccctatat ttttaagacg 120
<210> 242
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 242
tcctcgtgta gtgtccaggg atggaactaa gcacagacga ccccctatat ttttaagacg 60
cctgcacagg ttgctgttga tgagagcggg caaaggaaag gaacgggcca gggagacact 120
<210> 243
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 243
cctgcacagg ttgctgttga tgagagcggg caaaggaaag gaacgggcca gggagacact 60
ggcgaaggcc cctaggcgca cttatggcac acctaggccg ccagttcaga aaccaagacc 120
<210> 244
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 244
cccacccacc cacccattac atcagcaaca cagcatggcc ccgtgtatgg tagctcagaa 60
cccacgtgca cccttagggg accaactccc aggtgttcct aaagatggac gaggggcgtg 120
<210> 245
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 245
cccacgtgca cccttagggg accaactccc aggtgttcct aaagatggac gaggggcgtg 60
tgcaccggta cccgccctgg ccgggcctat tgtccggccc tgggagtcat ccctgttaca 120
<210> 246
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 246
tgcaccggta cccgccctgg ccgggcctat tgtccggccc tgggagtcat ccctgttaca 60
gtctccggga agggcctttg cacccgttag cccacaaccc atgccagtag aacccgtccc 120
<210> 247
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 247
gtctccggga agggcctttg cacccgttag cccacaaccc atgccagtag aacccgtccc 60
tgtccctact gtggcacttg agcgaccagt ttgtcccgca cctcctgaga ttgctatgca 120
<210> 248
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 248
tgtccctact gtggcacttg agcgaccagt ttgtcccgca cctcctgaga ttgctatgca 60
gggcccgggg gaaccttctg gcattaaacg cacacgggag cgttggaggc ccgcaccgtg 120
<210> 249
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 249
acaaaaacca ttaccgattg ataagcagag gcggtggaag ctcctgtcac cttacagaac 60
ctggcgtatg ggttaccgta cgcaaaccct caatgtaaac agttttgaga cagggggaga 120
<210> 250
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 250
ctggcgtatg ggttaccgta cgcaaaccct caatgtaaac agttttgaga cagggggaga 60
taaagtccac ccactccttg tgactgctac gctaggatgt gaagagggcc tgcggcatgc 120
<210> 251
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 251
tatacgtgaa tggttccgcc agtgcaccgg gagaccctca ccatccaagc catggatgag 60
agcgcatccc gtcgccgttc cttatgacga tccattaaca agtgaggaga ctgacctggc 120
<210> 252
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 252
agcgcatccc gtcgccgttc cttatgacga tccattaaca agtgaggaga ctgacctggc 60
ctatgcccgt ggactggcca tgagtatcga ggctgctaga ctgccagatg atccaataat 120
<210> 253
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 253
ctatgcccgt ggactggcca tgagtatcga ggctgctaga ctgccagatg atccaataat 60
tgttgaggat gacgatgaaa gtgaggaaat tgaagataaa tgtgataagg atgaagagga 120
<210> 254
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 254
tgttgaggat gacgatgaaa gtgaggaaat tgaagataaa tgtgataagg atgaagagga 60
aagtggaacg gaagatgtta caagcatacc gcaaacactg ccgcacagtc caacagtata 120
<210> 255
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 255
aagtggaacg gaagatgtta caagcatacc gcaaacactg ccgcacagtc caacagtata 60
cggcaggccc tcggtgtttt accgaaagcc agatactaaa tcaaccaaaa aatgcagggc 120
<210> 256
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 256
agccagaaca gagcaaccaa gagccaagcc tgattcccct gcccccacag tggtccttcg 60
gcgaccaccc acgcaaaagg tgactggccc tgccggttca ctgagtgtcc aggctcagct 120
<210> 257
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 257
gcgaccaccc acgcaaaagg tgactggccc tgccggttca ctgagtgtcc aggctcagct 60
ggagccatgg caacctttgt cctggccaca tgagacaaga gttatacttc acggaccacc 120
<210> 258
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 258
ggagccatgg caacctttgt cctggccaca tgagacaaga gttatacttc acggaccacc 60
cacgcagggt gaccaagcac acggttccat gctagacctt cttgaaaagg acgaccagca 120
<210> 259
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 259
cacgcagggt gaccaagcac acggttccat gctagacctt cttgaaaagg acgaccagca 60
catggagcag caggttatgg caaccctact gccaccagaa ccacaccagc cccggtctgg 120
<210> 260
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 260
gagaagagcc ccttgtgtct acaccgctga cctagacata gaaagtgatg agcccgccac 60
gtcagagccg gttcttgatc agctactgcc cgccccagga cttggacctc ttgcaattca 120
<210> 261
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 261
gtcagagccg gttcttgatc agctactgcc cgccccagga cttggacctc ttgcaattca 60
accattaacg tcccccacca cgtctcaact ccgcagttca gcaccgagcc acgcacaaac 120
<210> 262
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 262
accattaacg tcccccacca cgtctcaact ccgcagttca gcaccgagcc acgcacaaac 60
tccatggccg gttacccacc caagtcagac tccaggtggc ccaacgacac agtccctggc 120
<210> 263
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 263
tccatggccg gttacccacc caagtcagac tccaggtggc ccaacgacac agtccctggc 60
accggaaaca gaagccccgc gccagtggcc aatgccactg cgacctatcc ctctgcaccc 120
<210> 264
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 264
cttgcggatg cagccaatat catttaatcc tgcagtgaga cccactcccc atcagccacc 60
tcaggtggag cccactttct atcagtccac ttgggtgaaa ccccctcaac aataccagcc 120
<210> 265
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 265
tcaggtggag cccactttct atcagtccac ttgggtgaaa ccccctcaac aataccagcc 60
tcagatgggg cacattccat atcagccccg accaacgggt cactctacta tgctccggcc 120
<210> 266
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 266
tcaggggaca cccaccgcca tgcagaggcc tcagggtgcg cccactccca tgccgccacc 60
tcaggggaca cccaccgcca tacagaggcc tcagggtgcg cccactccca tgccgccacc 120
<210> 267
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 267
tcaggggaca cccaccgcca tacagaggcc tcagggtgcg cccactccca tgccgccacc 60
tcaggggaca cccaccgcca tgcagaggcc tcagggggcg cccactccca tgccgccacc 120
<210> 268
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 268
tcaggggaca cccaccgcca tgcagaggcc tcagggggcg cccactccca tgccgccacc 60
tcaggggaca cccaccgcca tgcagaggcc tcagggggcg cccactccca tgccgccacc 120
<210> 269
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 269
tcaggggaca cccaccgcca tgcagaggcc tcagggggcg cccactccca tgccgccacc 60
tcaggggcca cccaccgcca tgcagaggcc tcggggggcg cccactccca tgccgccacc 120
<210> 270
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 270
tcaggggcca cccaccgcca tgcagaggcc tcggggggcg cccactccca tgccgccacc 60
tcaggggcca cccaccgcca tgcagaggcc tcagggggcg cccactccca tgccgccacc 120
<210> 271
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 271
tcaggggcca cccaccgcca tgcagaggcc tcagggggcg cccactccca tgccgccacc 60
tcaggggcca cccaccgcca tgcagaggcc tcggggggcg cccactccca tgccgccacc 120
<210> 272
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 272
tcaggggcca cccaccgcca tgcagaggcc tcggggggcg cccactccca tgccgccacc 60
tcaggggcca cccaccgcca tgcagaggcc tcagggggcg cccactccca tgccgccacc 120
<210> 273
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 273
tcaggggcca cccaccgcca tgcagaggcc tcagggggcg cccactccca tgccgccacc 60
tcaggggcca cccaccgcca tgcagaggcc tcggggggcg cccactccca tgccgccacc 120
<210> 274
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 274
tcaggggcca cccaccgcca tgcagaggcc tcggggggcg cccactccca tgccgccacc 60
tcaggggcca cccaccgcca tgcagctgtc accaagggca cttaccggcc agaaggggcc 120
<210> 275
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 275
tcaggggcca cccaccgcca tgcagctgtc accaagggca cttaccggcc agaaggggcc 60
agcaaagcac attctgcgcc agttgttaac ggggggcgtc aagagtggga gaccatcact 120
<210> 276
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 276
taagtttaag gctgcccttg agcgtcaagc cgctgcgggc ttgcgacctt caccagggtc 60
tggaacgggt gccaagattg tgcaggcacc tgttttctat ccacccgtcc tacagcccat 120
<210> 277
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 277
tggaacgggt gccaagattg tgcaggcacc tgttttctat ccacccgtcc tacagcccat 60
acaagttatg tggcaagtgg gttcctcaaa ggccgtggcc gcctcaacgg tgacacaggc 120
<210> 278
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 278
acaagttatg tggcaagtgg gttcctcaaa ggccgtggcc gcctcaacgg tgacacaggc 60
acccacggaa tataccgggg aaaggaggtt aggggggcct atgtctccca ctgatattcc 120
<210> 279
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 279
acccacggaa tataccgggg aaaggaggtt aggggggcct atgtctccca ctgatattcc 60
gccgtctaaa cgggtgaaga aaaaggccta tccagagcgc aagacgccgc atggggggcc 120
<210> 280
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 280
gccgtctaaa cgggtgaaga aaaaggccta tccagagcgc aagacgccgc atggggggcc 60
ctcacactct tccaccgtta tgtgggagaa tgtcagccag ggacaacagc agactctgga 120
<210> 281
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 281
catggaatca tttgaaggag agggggactc tatacagtca cctgacaatg cgcggggaga 60
tgatgtacag aatactggtg agcatattca ggaccccggg ccggggcctt caaccggcgg 120
<210> 282
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 282
tgatgtacag aatactggtg agcatattca ggaccccggg ccggggcctt caaccggcgg 60
ggcttctgag ggattggtgc agaacgagcc ggactcaaga gatcaacagt cccgggggca 120
<210> 283
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 283
ggcttctgag ggattggtgc agaacgagcc ggactcaaga gatcaacagt cccgggggca 60
gagaaggggt gatgaaaaca gaggctggat gcagcgcatc aggcgaaggc ggagaagacg 120
<210> 284
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 284
agcacagagc acccctgaaa ggccgggccc ttccaaacaa ccatcagagc ccgtggagcc 60
cgcccacaca accccagcgg ggaggtcaac ggtgattctc cacgaaccac ctcgagagcc 120
<210> 285
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 285
cgcccacaca accccagcgg ggaggtcaac ggtgattctc cacgaaccac ctcgagagcc 60
cgaagctgtt tccttcaagc ctccgccacc accttcccgg aggagaaggg gagcgtgtgt 120
<210> 286
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 286
tgtatatgac gatgatatca tagaggtgat tgatgttgaa accaccgaag aggagacgac 60
gtcaatgcaa agacagcctc cgctcgggca acaaccgccc ccccccgtga tttctaccgg 120
<210> 287
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 287
caccgggcct cgtgtcatgg cgactccttc caccgggcct cgtgacatgg cgcctccttc 60
caccgggcct cgtgacatgg cgcctccttc caccgggcct cgtgacatgg cgcctccttc 120
<210> 288
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 288
caccgggcct cgtgacatgg cgcctccttc caccgggcct cgtgacatgg cgcctccttc 60
caccgggcct cgtgacatgg cgcctaccgt cgtacatatg tttacgaggg agcgcctgct 120
<210> 289
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 289
caccgggcct cgtgacatgg cgcctaccgt cgtacatatg tttacgaggg agcgcctgct 60
cacccagtcc accggccctg cacctcggag cttctgggaa atgcgggccg gccgtgatgc 120
<210> 290
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 290
cacccagtcc accggccctg cacctcggag cttctgggaa atgcgggccg gccgtgatgc 60
tcccaaaatt caacaagaac caagttcaca acagcagcca gccactcagt ctacaccgcc 120
<210> 291
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 291
tcccaaaatt caacaagaac caagttcaca acagcagcca gccactcagt ctacaccgcc 60
ttgccaatca tgggtcccat ctgtctatgt cctcccggca gtggatgctg gtaatgccca 120
<210> 292
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 292
ttgccaatca tgggtcccat ctgtctatgt cctcccggca gtggatgctg gtaatgccca 60
gcccctacaa atatcacact tgagctccat gtcgcccacg cagccgatat cgcatgaaga 120
<210> 293
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 293
acaaccccgg tatgaggatc ctgacactcc tctggatttg agtttacatc cagatactgc 60
aactctgccg cccacccagg atttataccc tggacgcgag gatctgcagg ccacccaggc 120
<210> 294
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 294
aactctgccg cccacccagg atttataccc tggacgcgag gatctgcagg ccacccaggc 60
tccatacccg ggatacgagg agccacggcc cccccaggct ccttttgtag gtgactatgg 120
<210> 295
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 295
tccatacccg ggatacgagg agccacggcc cccccaggct ccttttgtag gtgactatgg 60
ttttgttcaa attccctcgg ctcaatggga gccacacccc tctcagggca cataccaggg 120
<210> 296
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 296
ttttgttcaa attccctcgg ctcaatggga gccacacccc tctcagggca cataccaggg 60
ccacattgat ccccagcttc cggctgctct agatttaggg ccagagcagc cccggttccc 120
<210> 297
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 297
ccacattgat ccccagcttc cggctgctct agatttaggg ccagagcagc cccggttccc 60
acaagatcca tatgtgtatt ccgggggcca attgtcttca tgtccaggtt atgcaggtcc 120
<210> 298
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 298
acaagatcca tatgtgtatt ccgggggcca attgtcttca tgtccaggtt atgcaggtcc 60
ctggccctcg aggcctcaac atccaagata taggcacacc ttggcattgt ggcctcgaga 120
<210> 299
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 299
ctggccctcg aggcctcaac atccaagata taggcacacc ttggcattgt ggcctcgaga 60
acccaggcat gggcactctc agggcccatg gaaaccctgg tcagcacatc tcccacctca 120
<210> 300
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 300
acccaggcat gggcactctc agggcccatg gaaaccctgg tcagcacatc tcccacctca 60
gtgggatgga tctgcaggac atggccagga tcaggtctcc cagttcccac atctgcattc 120
<210> 301
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 301
atctgtcttt tggtttttct tgatagtatt aatgtaattt caaatgttag ctcatttttg 60
ttaatggtgg ctttttgttt gtttgttttg ttttaaggtt tttggattca aagcataaaa 120
<210> 302
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 302
accattacaa gatatacaat ctgtaagtat gttttcttat ttgtatgctt gcaaatatct 60
tctaaaacaa ctattaagtg aaagttatct gcttgttaga gtgaggtaga gttaaagata 120
<210> 303
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 303
cattataaag attcaggcaa tgtttgttag tattagtact tttttttctt cctaagtgca 60
aaagataact ttatatcact tttaaacttt tcttttagtt gtgctgaaag acattatgac 120
<210> 304
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 304
accgccaaat ttaattgcag aggtaggtat gaatgtactg tactatgttg tataacttaa 60
acccgataga ctgtatctta ctgtcataac aataatgagt catccagatt atcgagtgag 120
<210> 305
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 305
gaagatgaca atcatgttgc agcaattcac tgtaaagctg gaaagggacg aactggtgta 60
atgatatgtg catatttatt acatcggggc aaatttttaa aggcacaaga ggccctagat 120
<210> 306
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 306
actattccaa tgttcagtgg cggaacttgc agtaagtgct tgaaattctc atccttccat 60
gtattggaac agttttctta accatatcta gaagtttaca taaaaattta gaaagaaatt 120
<210> 307
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 307
tatattgctg atattaatca ttaaaatcgt ttttgacagt ttgacagtta aaggcatttc 60
ctgtgaaata atactggtat gtatttaacc atgcagatcc tcagtttgtg gtctgccagc 120
<210> 308
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 308
ctgtgaaata atactggtat gtatttaacc atgcagatcc tcagtttgtg gtctgccagc 60
taaaggtgaa gatatattcc tccaattcag gacccacacg acgggaagac aagttcatgt 120
<210> 309
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 309
taaaggtgaa gatatattcc tccaattcag gacccacacg acgggaagac aagttcatgt 60
actttgagtt ccctcagccg ttacctgtgt gtggtgatat caaagtagag ttcttccaca 120
<210> 310
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 310
ttaaaaaaat aaaacatcat taattaaata tgtcatttca tttctttttc ttttcttttt 60
tttttttttt aggacaaaat gtttcacttt tgggtaaata cattcttcat accaggacca 120
<210> 311
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 311
gatcttgaca aagcaaataa agacaaagcc aaccgatact tttctccaaa ttttaaggtc 60
agttaaatta aacattttgt gggggttgtt gacttgtatg tatgtgatgt gtgtttaatt 120
<210> 312
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 312
aattaatatg ttcatctgca aaatggaata aaaaatctgt taaaaatata tttcactaaa 60
tagtttaaga tgagtcatat ttgtgggttt tcattttaaa ttttctttct ctaggtgaag 120
<210> 313
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 313
tagtttaaga tgagtcatat ttgtgggttt tcattttaaa ttttctttct ctaggtgaag 60
ctgtacttca caaaaacagt agaggagccg tcaaatccag aggctagcag ttcaacttct 120
<210> 314
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 314
aattgggatg ctgtttttag gtattctatt caaatttatt ttactgtctt tatttttctc 60
tttcatattt atttctgttg tgatattact tttgtgtgta agtcttaaca tttatctttg 120
<210> 315
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 315
gaaataggag cacctaggct aaaatgtcaa gaactcttaa attatatcat ggatacagtg 60
aaagattcat ctaatggtgc tatttacgga gctgattgta gcaacatact actcaaagac 120
<210> 316
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 316
ttttaagaat tgttctctgt gtacttcagg ctctatctga aaccttcaca agatgttcat 60
agagttttag tggctagaat aattcatgct gttaccaaag gatgctgttc tcagactgac 120
<210> 317
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 317
agagttttag tggctagaat aattcatgct gttaccaaag gatgctgttc tcagactgac 60
ggattaaatt ccaaattttt ggactttttt tccaaggcta ttcagtgtgc gaggtaatct 120
<210> 318
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 318
ctttgcttta tatttggact caacataggc ttaatgattc tttaaaagaa gtcattattg 60
aattatttca actgcaaatt tatatccatc atccgaaagg agccaaaacc caagaaaaag 120
<210> 319
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 319
gattacaggt gcttatgaat caacaaaatg gagaagtatt ttatacaact tatatgatct 60
gctagtgaat gagataagtc atataggaag tagaggaaag tattcttcag gatttcgtaa 120
<210> 320
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 320
tattgccgtc aaagaaaatt tgattgaatt gatggcagat atctgtcacc aggtacagta 60
agtaggtcat gtcacattta gaaatttcct gttaattttt tttttaaact gggcattttg 120
<210> 321
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 321
aagtaataaa agatcacctt cagaagtcac agaatgattt tgatcttgtg ccttggtaaa 60
gtgttaccat tttctcattc agtgtcattt taatctcttg tatgttattt ttcagaaaac 120
<210> 322
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 322
ccaacagcga catggggaac gtacaccata tgtgttacga tgccttacgg aagttgcatt 60
gtgtcaagac aagaggtcaa acctagaaag ctcacaaaag tcagatttat taaaactctg 120
<210> 323
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 323
gtgtcaagac aagaggtcaa acctagaaag ctcacaaaag tcagatttat taaaactctg 60
gaataaaatt tggtgtatta cctttcgtgg tataagttct gagcaaatac aagctgaaaa 120
<210> 324
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 324
gaataaaatt tggtgtatta cctttcgtgg tataagttct gagcaaatac aagctgaaaa 60
ctttggctta cttggagcca taattcaggg tagtttagtt gaggttgaca gagaattctg 120
<210> 325
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 325
ctttggctta cttggagcca taattcaggg tagtttagtt gaggttgaca gagaattctg 60
gaagttattt actgggtcag cctgcagacc ttcatggtaa gttcagcatg cattatgtct 120
<210> 326
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 326
gtatagttcc aggaacggta aaaatgggaa tagagcaaaa tatgtgtgaa gtaaatagaa 60
gcttttcttt aaaggaatca ataatgaaat ggctcttatt ctatcagtta gagggtgact 120
<210> 327
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 327
atatttttat ttgtggttta ctttaagatt acaaattcag aaactcttgt ccggtgttca 60
cgtcttttgg tgggtgtcct tggctgctac tgttacatgg gtgtaatagc tgaagaggaa 120
<210> 328
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 328
cgtcttttgg tgggtgtcct tggctgctac tgttacatgg gtgtaatagc tgaagaggaa 60
gcatataagt cagaattatt ccagaaagcc aaggtaggag aatttatact aataaagttt 120
<210> 329
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 329
atactaaact ataattttaa ctggaatttg catttttcct tctattcaca atagtctcta 60
atgcaatgtg caggagaaag tatcactctg tttaaaaata agacaaatga ggaattcaga 120
<210> 330
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 330
tgagtgcttt ttatttttag gtgccattaa tcctttagct gaagaatatc tgtcaaagca 60
agatctactt ttcttagaca tgctcaagtt cttgtgtttg tgtgtaacta ctgctcagac 120
<210> 331
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 331
caatactgtg tcctttaggg cagctgatat tcggaggaaa ttgttaatgt taattgattc 60
tagcacgcta gaacctacca aatccctcca cctgcatatg gtgagttacg ttaaatgaag 120
<210> 332
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 332
ttgccaatgg aagatgttct tgaacttctg aaaccactat cgtaagaaat taaaacctta 60
tgttatgttc actttaaagt tataaaataa ctgatgtgtt ctgttaagct tataaagttg 120
<210> 333
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 333
ttaaccacag ttcttttccc gtaggctgat ccttattcaa aatgggccat tcttaatgta 60
atgggaaaag actttcctgt aaatgaagta tttacacaat ttcttgctga caatcatcac 120
<210> 334
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 334
agggtttgaa attagaaaat tatttcactt tttgtttgtt tgtttgcttg cttgttttaa 60
gattgttcca ggacacgaag ggagattctt ccaggttact gaaagcactt cctttgaagc 120
<210> 335
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 335
tatcttcttt tccttttatt ttattaaact acacaaatat tgaggatttc tataggtaag 60
tttatacatg acatatgtga aatttgttta atttaaaatt agttaacaat acttagcaag 120
<210> 336
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 336
attaaaacag tttttaagaa ctattttata aaattttact tggaaaagtt atatataacc 60
tgtattttaa atttttctat ttttagatct tgttataagg ttttgattcc acatctggtg 120
<210> 337
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 337
tgtattttaa atttttctat ttttagatct tgttataagg ttttgattcc acatctggtg 60
attagaagtc attttgatga ggtgaagtcc attgctaatc agattcaaga ggactggaaa 120
<210> 338
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 338
attagaagtc attttgatga ggtgaagtcc attgctaatc agattcaaga ggactggaaa 60
agtcttctaa cagactgctt tccaaagatt cttgtaaata ttcttcctta ttttgcctat 120
<210> 339
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 339
agtcttctaa cagactgctt tccaaagatt cttgtaaata ttcttcctta ttttgcctat 60
gagggtacca gagacagtgg gatggcacag caaagagaga ctgctaccaa ggtctatgat 120
<210> 340
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 340
gagctgtctt gacgttcaca gatataaaat attaaatata ttttaatttt gtgcccttgc 60
agattgatca cttattcatt agtaatttac cagagattgt ggtggagtta ttgatgacgt 120
<210> 341
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 341
ttttaaaacg atgactgtat tttttccctt aactctgtta gggatttgga tcctgctcct 60
aatccacctc attttccatc gcatgtgatt aaagcaacat ttgcctatat cagcaattgt 120
<210> 342
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 342
tatttcagag taattttcca gaacttactg gttgttgttg tttttttttc tccctatatt 60
aggccttctt gtatcatgga tgtgtcatta cgtagcttct ccctttgttg tgacttatta 120
<210> 343
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 343
aggccttctt gtatcatgga tgtgtcatta cgtagcttct ccctttgttg tgacttatta 60
agtcaggttt gccagacagc cgtgacttac tgtaaggatg ctctagaaaa ccatcttcat 120
<210> 344
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 344
ctatatcacg attaagcttt tagatccttt tcctgaccat gttgttttta aggatttgcg 60
tattactcag caaaaaatca aatacagtag aggacccttt tcactcttgg aggtaataaa 120
<210> 345
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 345
aaatttcagt tttatgtatg atctcttacc tatgactcta ctgaaataga atttctatat 60
gtagaggctg ttggaagctg cttgggagaa gtgggtccta tagatttctc taccatagct 120
<210> 346
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 346
atacaacata gtaaagatgc atcttatacc aaggccctta agttatttga agataaagaa 60
cttcagtgga ccttcataat gctgacctac ctgaataaca cactggtaga agattggtga 120
<210> 347
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 347
gtttttagaa gtacccagat ttgacaaaga aaaccctttt gaaggcctgg atgatataaa 60
tctgtggatt cctctaagtg aaaatcatga catttggata aagacactga cttgtgcttt 120
<210> 348
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 348
tctgtggatt cctctaagtg aaaatcatga catttggata aagacactga cttgtgcttt 60
tttggacagt ggaggcacaa aatgtgaaat tcttcaatta ttaaagccaa tgtgtgaagt 120
<210> 349
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 349
tttggacagt ggaggcacaa aatgtgaaat tcttcaatta ttaaagccaa tgtgtgaagt 60
aagaagatta attagtctga tataattcct tgtttatgac ctgtttatct aaagagtgct 120
<210> 350
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 350
ggtgaaaact gacttttgtc agactgtact tccatacttg attcatgata ttttactcca 60
agatacaaat gaatcatgga gaaatctgct ttctacacat gttcagggat ttttcaccag 120
<210> 351
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 351
ttatctagaa gttgccaagg tagctcagtc ttgtgctgct cactttacag ctttactcta 60
tgcagaaatc tatgcagata agaaaagtat ggatgatcaa gagaaaaggt aatggaattt 120
<210> 352
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 352
tcaaagtcta tagtatatgt attcaggagc ttccaaatag tatgttctca ttaaaagagg 60
tgttcttgtg acaaacagaa gtcttgcatt tgaagaagga agccagaata caactatttc 120
<210> 353
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 353
tacaatttaa aatttgctaa atttatagac cgattttttt tccttcttca atttttgttg 60
tttccatgtt ttcaggatct tctcttagaa atctacagaa gtatagggga gccagatagt 120
<210> 354
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 354
tttccatgtt ttcaggatct tctcttagaa atctacagaa gtatagggga gccagatagt 60
ttgtatggct gtggtggagg gaagatgtta caacccatta ctaggtaaat tgcatttttc 120
<210> 355
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 355
ttgtatggct gtggtggagg gaagatgtta caacccatta ctaggtaaat tgcatttttc 60
taaacaacgg tatagtaatt ctgtttatga aggagttatg tgtgtgtaaa acccaaagct 120
<210> 356
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 356
taaattgcat ttttctaaac aacggtatag taattctgtt tatgaaggag ttatgtgtgt 60
gtaaaaccca aagctatttt cacaatcttt tcttatagac tacgaacata tgaacacgaa 120
<210> 357
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 357
cgccaggcag gaatcattca ggtacatttt ttcccagatt tggtaaagcc atcactagtg 60
tagtgctgag gttatttcag tatgttggtg gatatttaca cagccagata aactctagag 120
<210> 358
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 358
tttgctgttt ttttctctgg ttttctgttg atatctttga ttacttaact taaaaacaaa 60
ataactcctg tttaggcctt gcagaatttg ggactctgcc atattctttc cgtctattta 120
<210> 359
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 359
gatgagaact ctttaacaac aaatttaaac atttatttcc ctgaaaacct cttctttatt 60
ttcagagtgt cttttctttt ttgctactag agtaaaagaa gtggaagaga tgtgtaagcg 120
<210> 360
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 360
cagccttgag tctgtgtatt cgctctatcc cacacttagc aggttgcagg ccattggaga 60
gctggaaagc attggggagc ttttctcaag gtatgtaatt cgtatgactt tgttatccta 120
<210> 361
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 361
ttggagatcc tgatggaaaa ggaaatggac aactcacaaa gagaatgtat taaggacatt 60
ctcaccaaac accttgtaga actctctata ctggccagaa ctttcaagaa cactcaggta 120
<210> 362
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 362
tttcagctcc ctgaaagggc aatatttcaa attaaacagt acaattcagt tagctgtgga 60
gtctctgagt ggcagctgga agaagcacaa gtattctggg caaaaaagga gcagagtctt 120
<210> 363
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 363
gtctctgagt ggcagctgga agaagcacaa gtattctggg caaaaaagga gcagagtctt 60
gccctgagta ttctcaagca aatgatcaag aagttggatg ccagctgtgc agcggtttgt 120
<210> 364
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 364
ttttcttgaa ggcagtagaa gttgctggaa attatgatgg agaaagtagt gatgagctaa 60
gaaatggaaa aatgaaggca tttctctcat tagcccggtt ttcagatact caataccaaa 120
<210> 365
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 365
ggcttgaaaa ttctggagtt tctgaagtca atggcatgat gaaggcaagt gttactcagc 60
ccaatattct accctgtgct tgaaaaactt agacataagc cccttgatgt caggaatcgt 120
<210> 366
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 366
tagagagacg gaatgaagat tccaacatat aaatttttgc ctcttatgta ccaattggct 60
gctagaatgg ggaccaagat gatgggaggc ctaggatttc atgaagtcct caataatgta 120
<210> 367
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 367
tttcttacag ctaatctcta gaatttcaat ggatcacccc catcacactt tgtttattat 60
actggcctta gcaaatgcaa acagagatga atttctgact aaaccagagg tagccagaag 120
<210> 368
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 368
tagcaaactt agatgccact cagtggaaga ctcagagaag tatgtttttt ttaaagaaga 60
aacgttactt tcttgctgtg ttactctctg tagagatata ttagttatag agcctaataa 120
<210> 369
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 369
gtcatttaaa gcagaatttc gcttagcagg aggtgtaaat ttaccaaaaa taatagattg 60
tgtaggttcc gatggcaagg agaggagaca gcttgttaag gtgagccttc ccttctctgg 120
<210> 370
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 370
actctgtgtt tttataataa aataaactgt acttgtttat tcatgcttaa ttattctgaa 60
gggccgtgat gacctgagac aagatgctgt catgcaacag gtcttccaga tgtgtaatac 120
<210> 371
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 371
attactgcag agaaacacgg aaactaggaa gaggaaatta actatctgta cttataaggt 60
aactatttgt acttctgtta gttcaccaaa aacatataaa agatgccatt tggttgggtg 120
<210> 372
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 372
aaaatgtgta tattagttta attgaacaca atattgaaaa ataattatat atattctcta 60
tttaaaggag gtgcaaaaaa agtcttttga agagaaatat gaagtcttca tggatgtttg 120
<210> 373
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 373
caccagagat attgtggatg gcatgggcat tacgggtgtt gaaggtgtct tcagaaggta 60
agtgatatga agtaaaggag ggaaataatt tttgatgtca aaattacatg ggctgggcat 120
<210> 374
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 374
acatatgttc tctctgttta ggtccttcta tatgatccac tctttgactg gaccatgaat 60
cctttgaaag ctttgtattt acagcagagg ccggaagatg aaactgagct tcaccctact 120
<210> 375
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 375
actgaaacct ttgtgttttt gtccttagtg atattgacca gagtttcaac aaagtagctg 60
aacgtgtctt aatgagacta caagagaaac tgaaaggagt ggaagaaggc actgtgctca 120
<210> 376
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 376
gtgttggtgg acaagtgaat ttgctcatac agcaggccat agaccccaaa aatctcagcc 60
gacttttccc aggatggaaa gcttgggtgt gatcttcagt atatgaatta ccctttcatt 120
<210> 377
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 377
gacttttccc aggatggaaa gcttgggtgt gatcttcagt atatgaatta ccctttcatt 60
cagcctttag aaattatatt ttagccttta tttttaacct gccaacatac tttaagtagg 120
<210> 378
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 378
ccggcgcctg ccctcgctcg gcgtccccgg ccagccatgg gcccttggag ccgcagcctc 60
tcggcgctgc tgctgctgct gcaggtaccc cggatcccct gacttgcgag ggacgcattc 120
<210> 379
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 379
gctacacgtt cacggtgccc cggcgccacc tggagagagg ccgcgtcctg ggcagaggtg 60
agggcgcgct gccggtgtcc ctgggcggag tagggagggg ttggaaaggg gccgagaaat 120
<210> 380
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 380
ccctgcagtg aattttgaag attgcaccgg tcgacaaagg acagcctatt tttccctcga 60
cacccgattc aaagtgggca cagatggtgt gattacagtc aaaaggcctc tacggtttca 120
<210> 381
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 381
atccgtcttg aattgtctta tcttgttcct catcttcttt ccttttaggc ctccgtttct 60
ggaatccaag cagaattgct cacatttccc aactcctctc ctggcctcag aagacagaag 120
<210> 382
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 382
agagactggg ttattcctcc catcagctgc ccagaaaatg aaaaaggccc atttcctaaa 60
aacctggttc aggtagagaa agaagttctc tgtttctctg ggagggattt ggcagagaag 120
<210> 383
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 383
gatccttctt tactaattct ttttctttca ttttgtcttc agatcaaatc caacaaagac 60
aaagaaggca aggttttcta cagcatcact ggccaaggag ctgacacacc ccctgttggt 120
<210> 384
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 384
gtctttatta ttgaaagaga aacaggatgg ctgaaggtga cagagcctct ggatagagaa 60
cgcattgcca catacactgt aagtatctct tagaagcttg ttgacaccgg ggtaacatcc 120
<210> 385
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 385
gtctaaacct tcatctcctt gaactcttcc aggaacctct gtgatggagg tcacagccac 60
agacgcggac gatgatgtga acacctacaa tgccgccatc gcttacacca tcctcagcca 120
<210> 386
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 386
agacgcggac gatgatgtga acacctacaa tgccgccatc gcttacacca tcctcagcca 60
agatcctgag ctccctgaca aaaatatgtt caccattaac aggaacacag gagtcatcag 120
<210> 387
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 387
agatcctgag ctccctgaca aaaatatgtt caccattaac aggaacacag gagtcatcag 60
tgtggtcacc actgggctgg accgagaggt caggggtcag gaggatccag agggtgtgga 120
<210> 388
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 388
gtaaatgaca catctctttg ctctgcagta caagggtcag gtgcctgaga acgaggctaa 60
cgtcgtaatc accacactga aagtgactga tgctgatgcc cccaataccc cagcgtggga 120
<210> 389
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 389
cgtcgtaatc accacactga aagtgactga tgctgatgcc cccaataccc cagcgtggga 60
ggctgtatac accatattga atgatgatgg tggacaattt gtcgtcacca caaatccagt 120
<210> 390
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 390
ggctgtatac accatattga atgatgatgg tggacaattt gtcgtcacca caaatccagt 60
gaacaacgat ggcattttga aaacagcaaa ggtttgtatg gtacctggca agatgcagaa 120
<210> 391
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 391
ctacacgtag cagtgacgaa tgtggtacct tttgaggtct ctctcaccac ctccacagcc 60
accgtcaccg tggatgtgct ggatgtgaat gaagccccca tctttgtgcc tcctgaaaag 120
<210> 392
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 392
gttgtttgct ggtcctattc taaaagccag agcttgtccc cgttcagata tcggatttgg 60
agagacactg ccaactggct ggagattaat ccggacactg gtgccatttc cactcgggct 120
<210> 393
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 393
aatgacaacg cccccatacc agaacctcga actatattct tctgtgagag gaatccaaag 60
cctcaggtca taaacatcat tgatgcagac cttcctccca atacatctcc cttcacagca 120
<210> 394
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 394
gaacaagaag tggagaatgt cagtctgagt caggcccttc tgtcttgaac atgagttttt 60
tatggcggga ggtagactga ccctttttgg acttcaggtg gctgtaggag acagaagcag 120
<210> 395
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 395
cggcattttg agtgttagac tggaaacttt ccacttgata agaggtccca agacttagta 60
cctgaagggt gaaatattct ccatccagtg gtttcttctt tggctgggga gaggagctgg 120
<210> 396
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 396
ttcttgcgga gattctcttc ctctgtgcgc cggtctctcc caggacaggc acaaacacgc 60
acctcaaagc tgttccgtcc cagtagatta ccactactca ggataggaaa agagaagcaa 120
<210> 397
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 397
atactccaca cgcaaatttc cttccactcg gataagatgc tgaggagggg ccagacctaa 60
gagcaatcag tgaggaatca gaggcctggg gaccctgggc aaccagccct gtcgtctctc 120
<210> 398
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 398
cgtccgggga cagcatcaaa tcatccattg cttgggacgg caagggggac tgtagatggg 60
tgaaaagagc agtcagagga ccaggtcctc agccccccag ccccccagcc ctccaggtcc 120
<210> 399
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 399
cctccaggtc cccagccctc caggtcccca gcccaaccct tgtccttacc agaacgttgt 60
tttcaggaag tctgaaagac aagagcagaa agtcagtccc atggaatttt cgcttcccac 120
<210> 400
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 400
tcgacaagag ctagaagata attccaatca tcttacaaaa ctggaaactg aggcatctaa 60
tatgaaggta tcaagactgt gacttttaat tgtagtttat ccatttttat tcagtattcc 120
<210> 401
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 401
agagttgcga tggaagaaca actaggtacc tgccaggata tggaaaaacg agcacaggta 60
agttacttgt ttctaagtga taaaacagcg aagagctatt aggaataaaa tgaattacag 120
<210> 402
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 402
cgtatacgac agcttttaca gtcccaagca acagaagcag aggttagtaa attgcctttc 60
ttgtttgtgg gtataaaaat aggtagttat tctgagaaaa gaaaacatgt ataatttaat 120
<210> 403
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 403
taatttttag ggttcaacta cacgaatgga ccatgaaaca gccagtgttt tgagttctag 60
tagcacacac tctgcacctc gaaggctgac aagtcatctg ggaaccaagg taacagaaga 120
<210> 404
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 404
tagcacacac tctgcacctc gaaggctgac aagtcatctg ggaaccaagg taacagaaga 60
ttacaaaccc tggtcactaa tgccatgact actttgctaa gacattcttg gccaggtgca 120
<210> 405
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 405
atgataagga tgatatgtcg cgaactttgc tagctatgtc tagctcccaa gacagctgta 60
tatccatgcg acagtctgga tgtcttcctc tcctcatcca gcttttacat ggcaatgaca 120
<210> 406
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 406
tgaaactttc atttgatgaa gagcatagac atgcaatgaa tgaactaggt aagacaaaaa 60
tgttttttaa tgacatagac aattactggt ggatttttaa atcatggtag aaattcagta 120
<210> 407
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 407
tattctgtat ttaatttaca ggctacgcta tgctctatga aaggctgcat gagagcactt 60
gtggcccaac taaaatctga aagtgaagac ttacagcagg tactatttag aatttcacct 120
<210> 408
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 408
gtggcccaac taaaatctga aagtgaagac ttacagcagg tactatttag aatttcacct 60
gtttttcttt tttctctttt tctttgaggc agggtctcac tctgtcaccc aggcttagag 120
<210> 409
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 409
aacaaaaaag caactagtat gattttatgt ataaattaat ctaaaattga ttaatttgca 60
ggttattgcg agtgttttga ggaatttgtc ttggcgagca gatgtaaata gtaaaaagac 120
<210> 410
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 410
ggcactctta cttaccggag ccagacaaac actttagcca ttattgaaag tggaggtggg 60
atattacgga atgtgtccag cttgatagct acaaatgagg accacaggta tatatagagt 120
<210> 411
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 411
taaaatctca tagtttgaca atagtcagta atgcatgtgg aactttgtgg aatctctcag 60
caagaaatcc taaagaccag gaagcattat gggacatggg ggcagttagc atgctcaaga 120
<210> 412
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 412
tcatggcaaa taggcctgcg aagtacaagg atgccaatat tatgtctcct ggctcaagct 60
tgccatctct tcatgttagg aaacaaaaag ccctagaagc agaattagat gctcagcact 120
<210> 413
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 413
aagtcatgga agaagtgtca gccattcata cctctcagga agacagaagt tctgggtcta 60
ccactgaatt acattgtgtg acagatgaga gaaatgcact tagaagaagc tctgctgccc 120
<210> 414
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 414
ccactgaatt acattgtgtg acagatgaga gaaatgcact tagaagaagc tctgctgccc 60
atacacattc aaacacttac aatttcacta agtcggaaaa ttcaaatagg acatgttcta 120
<210> 415
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 415
tgccttatgc caaattagaa tacaagagat cttcaaatga tagtttaaat agtgtcagta 60
gtagtgatgg ttatggtaaa agaggtcaaa tgaaaccctc gattgaatcc tattctgaag 120
<210> 416
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 416
atagtgcaaa tcatatggat gataatgatg gagaactaga tacaccaata aattatagtc 60
ttaaatattc agatgagcag ttgaactctg gaaggcaaag tccttcacag aatgaaagat 120
<210> 417
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 417
ttaaatattc agatgagcag ttgaactctg gaaggcaaag tccttcacag aatgaaagat 60
gggcaagacc caaacacata atagaagatg aaataaaaca aagtgagcaa agacaatcaa 120
<210> 418
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 418
gggcaagacc caaacacata atagaagatg aaataaaaca aagtgagcaa agacaatcaa 60
ggaatcaaag tacaacttat cctgtttata ctgagagcac tgatgataaa cacctcaagt 120
<210> 419
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 419
catcacagaa acagtcattt tcattctcaa agagttcatc tggacaaagc agtaaaaccg 60
aacatatgtc ttcaagcagt gagaatacgt ccacaccttc atctaatgcc aagaggcaga 120
<210> 420
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 420
gtaatcagac gacacaggaa gcagattctg ctaataccct gcaaatagca gaaataaaag 60
aaaagattgg aactaggtca gctgaagatc ctgtgagcga agttccagca gtgtcacagc 120
<210> 421
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 421
aaaagattgg aactaggtca gctgaagatc ctgtgagcga agttccagca gtgtcacagc 60
accctagaac caaatccagc agactgcagg gttctagttt atcttcagaa tcagccaggc 120
<210> 422
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 422
accctagaac caaatccagc agactgcagg gttctagttt atcttcagaa tcagccaggc 60
acaaagctgt tgaattttct tcaggagcga aatctccctc caaaagtggt gctcagacac 120
<210> 423
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 423
ctgtcagttc acttgatagt tttgagagtc gttcgattgc cagctccgtt cagagtgaac 60
catgcagtgg aatggtaagt ggcattataa gccccagtga tcttccagat agccctggac 120
<210> 424
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 424
agcgagaagt acctaaaaat aaagcaccta ctgctgaaaa gagagagagt ggacctaagc 60
aagctgcagt aaatgctgca gttcagaggg tccaggttct tccagatgct gatactttat 120
<210> 425
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 425
tacattttgc cacggaaagt actccagatg gattttcttg ttcatccagc ctgagtgctc 60
tgagcctcga tgagccattt atacagaaag atgtggaatt aagaataatg cctccagttc 120
<210> 426
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 426
tgagcctcga tgagccattt atacagaaag atgtggaatt aagaataatg cctccagttc 60
aggaaaatga caatgggaat gaaacagaat cagagcagcc taaagaatca aatgaaaacc 120
<210> 427
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 427
atgatgatat tgaaatacta gaagaatgta ttatttctgc catgccaaca aagtcatcac 60
gtaaagcaaa aaagccagcc cagactgctt caaaattacc tccacctgtg gcaaggaaac 120
<210> 428
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 428
caagtcagct gcctgtgtac aaacttctac catcacaaaa caggttgcaa ccccaaaagc 60
atgttagttt tacaccgggg gatgatatgc cacgggtgta ttgtgttgaa gggacaccta 120
<210> 429
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 429
atgttagttt tacaccgggg gatgatatgc cacgggtgta ttgtgttgaa gggacaccta 60
taaacttttc cacagctaca tctctaagtg atctaacaat cgaatcccct ccaaatgagt 120
<210> 430
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 430
taaacttttc cacagctaca tctctaagtg atctaacaat cgaatcccct ccaaatgagt 60
tagctgctgg agaaggagtt agaggagggg cacagtcagg tgaatttgaa aaacgagata 120
<210> 431
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 431
ccatacctga attggatgac aataaagcag aggaaggtga tattcttgca gaatgcatta 60
attctgctat gcccaaaggg aaaagtcaca agcctttccg tgtgaaaaag ataatggacc 120
<210> 432
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 432
taagaaaaaa tgcagactca aaaaataatt taaatgctga gagagttttc tcagacaaca 60
aagattcaaa gaaacagaat ttgaaaaata attccaaggt cttcaatgat aagctcccaa 120
<210> 433
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 433
ataatgaaga tagagtcaga ggaagttttg cttttgattc acctcatcat tacacgccta 60
ttgaaggaac tccttactgt ttttcacgaa atgattcttt gagttctcta gattttgatg 120
<210> 434
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 434
atgatgatgt tgacctttcc agggaaaagg ctgaattaag aaaggcaaaa gaaaataagg 60
aatcagaggc taaagttacc agccacacag aactaacctc caaccaacaa tcagctaata 120
<210> 435
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 435
aatcagaggc taaagttacc agccacacag aactaacctc caaccaacaa tcagctaata 60
agacacaagc tattgcaaag cagccaataa atcgaggtca gcctaaaccc atacttcaga 120
<210> 436
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 436
agacacaagc tattgcaaag cagccaataa atcgaggtca gcctaaaccc atacttcaga 60
aacaatccac ttttccccag tcatccaaag acataccaga cagaggggca gcaactgatg 120
<210> 437
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 437
aacaatccac ttttccccag tcatccaaag acataccaga cagaggggca gcaactgatg 60
aaaagttaca gaattttgct attgaaaata ctccggtttg cttttctcat aattcctctc 120
<210> 438
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 438
agactgagcc ccctgactca cagggagaac caagtaaacc tcaagcatca ggctatgctc 60
ctaaatcatt tcatgttgaa gataccccag tttgtttctc aagaaacagt tctctcagtt 120
<210> 439
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 439
gtggcatatt aggtgaagat ctgacacttg atttgaaaga tatacagaga ccagattcag 60
aacatggtct atcccctgat tcagaaaatt ttgattggaa agctattcag gaaggtgcaa 120
<210> 440
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 440
atcttacacc tgatcaagaa gaaaaaccct ttacaagtaa taaaggccca cgaattctaa 60
aaccagggga gaaaagtaca ttggaaacta aaaagataga atctgaaagt aaaggaatca 120
<210> 441
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 441
catcccaaat aggtgggtca agtaaagcac cttctagatc aggatctaga gattcgaccc 60
cttcaagacc tgcccagcaa ccattaagta gacctataca gtctcctggc cgaaactcaa 120
<210> 442
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 442
ctagaccagc ttctcccact aggtcccagg cacaaactcc agttttaagt ccttcccttc 60
ctgatatgtc tctatccaca cattcgtctg ttcaggctgg tggatggcga aaactcccac 120
<210> 443
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 443
ctaatctcag tcccactata gagtataatg atggaagacc agcaaagcgc catgatattg 60
cacggtctca ttctgaaagt ccttctagac ttccaatcaa taggtcagga acctggaaac 120
<210> 444
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 444
aaaaacatgt gaactctatt tcaggaacca aacaaagtaa agaaaaccaa gtatccgcaa 60
aaggaacatg gagaaaaata aaagaaaatg aattttctcc cacaaatagt acttctcaga 120
<210> 445
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 445
ccgtttcctc aggtgctaca aatggtgctg aatcaaagac tctaatttat caaatggcac 60
ctgctgtttc taaaacagag gatgtttggg tgagaattga ggactgtccc attaacaatc 120
<210> 446
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 446
ctgctgtttc taaaacagag gatgtttggg tgagaattga ggactgtccc attaacaatc 60
ctagatctgg aagatctccc acaggtaata ctcccccggt gattgacagt gtttcagaaa 120
<210> 447
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 447
ctagatctgg aagatctccc acaggtaata ctcccccggt gattgacagt gtttcagaaa 60
aggcaaatcc aaacattaaa gattcaaaag ataatcaggc aaaacaaaat gtgggtaatg 120
<210> 448
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 448
gcagtgttcc catgcgtacc gtgggtttgg aaaatcgcct gaactccttt attcaggtgg 60
atgcccctga ccaaaaagga actgagataa aaccaggaca aaataatcct gtccctgtat 120
<210> 449
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 449
atgcccctga ccaaaaagga actgagataa aaccaggaca aaataatcct gtccctgtat 60
cagagactaa tgaaagttct atagtggaac gtaccccatt cagttctagc agctcaagca 120
<210> 450
<211> 120
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 450
cagagactaa tgaaagttct atagtggaac gtaccccatt cagttctagc agctcaagca 60
aacacagttc acctagtggg actgttgctg ccagagtgac tccttttaat tacaacccaa 120

Claims (10)

1.一种用于基于捕获测序检测EB病毒的探针组,其特征在于所述探针组包含分别对EB病毒基因LMP1LMP2EBNA-1EBNA-2EBNA-3BZLF1具有特异性的探针,优选对所述EBNA- 2具有特异性的探针包含对EB病毒基因型1的EBNA-2以及对EB病毒基因型2的EBNA-2具有特异性的探针,和/或对所述EBNA-3具有特异性的探针包含对EB病毒基因型1的EBNA-3以及对EB病毒基因型2的EBNA-3具有特异性的探针。
2.如权利要求1所述的探针组,其特征在于所述探针组还包含参比探针,所述参比探针为对人基因具有特异性的探针,例如所述人基因选自:TP53CDH1APCPTENATM中的一种或多种。
3.如权利要求1或2所述的探针组,其特征在于:
所述对EB病毒基因LMP1具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQID NO:200-215;
所述对EB病毒基因LMP2具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQID NO: 1-19和194-199,优选具有至少一个选自SEQ ID NO:1-19的核苷酸序列和至少一个选自SEQ ID NO:194-199的核苷酸序列;
所述对EB病毒基因BZLF1具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQID NO:161-173;
所述对EB病毒基因EBNA-1具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:174-193;
所述对EB病毒基因EBNA-2具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:20-39和216-233,优选具有至少一个选自SEQ ID NO:20-39的核苷酸序列和至少一个选自SEQ ID NO:216-233的核苷酸序列;和/或
所述对EB病毒基因EBNA-3具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:40-160和234-300。
4.如权利要求2所述的探针组,其特征在于:
所述对TP53具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:394-399;
所述对CDH1具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:378-393;
所述对APC具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:400-450;
所述对PTEN具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:301-313;和/或
所述对ATM具有特异性的探针具有至少一个选自以下的核苷酸序列:SEQ ID NO:314-377。
5.如权利要求1或2所述的探针组,其特征在于所述探针组由分别对EB病毒基因LMP1LMP2EBNA-1EBNA-2EBNA-3BZLF1具有特异性的探针和对人基因具有特异性的探针组成。
6.一种用于基于捕获测序检测检测样品中的EB病毒的试剂盒或微阵列,其包含如权利要求1-5中任一项所述的探针组。
7.如权利要求6所述的试剂盒或微阵列,其中所述样品为生物样品,优选所述样品为体液样品或组织样品,和更优选所述样品选自活组织检查样品、肿瘤组织样品、细胞培养物、经固化处理的样品(如石蜡包埋样品)、全血、血浆、血清、唾液、脑髓液、汗液、痰、肺泡灌洗液、尿液、粪便、分泌液、乳汁和腹膜液。
8.如权利要求1-5中任一项所述的探针组在制备用于基于捕获测序检测样品中的EB病毒的试剂盒或微阵列中的用途。
9.如权利要求8所述的用途,其特征在于所述样品为生物样品,优选所述样品为体液样品或组织样品,和更优选所述样品选自活组织检查样品、肿瘤组织样品、细胞培养物、经固化处理的样品(如石蜡包埋样品)、全血、血浆、血清、唾液、脑髓液、汗液、痰、肺泡灌洗液、尿液、粪便、分泌液、乳汁和腹膜液。
10.如权利要求8或9所述的用途,其特征在于所述试剂盒或微阵列用于EB病毒-1和EB病毒-2的分型,和/或所述试剂盒或微阵列用于推断EB病毒的感染程度。
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