CN112165864A - Dha富集的多不饱和脂肪酸组合物 - Google Patents

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Abstract

提供一种基于植物的脂质组合物，其包含特定比例的DHA、ALA和油酸(通常为脂肪酸酯)。所述组合物还含有低含量的EPA和棕榈酸。所述组合物可以通过常规处理方法从单一来源获得，并且具有改进的稳定性性质。

Description

DHA富集的多不饱和脂肪酸组合物
技术领域
本文中所公开的实施例涉及富集二十二碳六烯酸的新型脂质组合物。所述组合物包含具有许多健康益处的多不饱和脂肪酸的混合物。所述组合物可以提供营养益处，并且潜在地可以从可扩展并且可持续的单一来源获得。其还具有增强的氧化稳定性。
背景技术
ω-3长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)被广泛认为是用于人类和动物健康的重要化合物。这些脂肪酸可以从膳食来源获得，或在较小程度上通过亚油酸(LA，18:2ω-6)或α-亚麻酸(ALA，18:3ω-3)脂肪酸的转化获得，其全部被视为人类膳食中的必需脂肪酸。
从营养观点来看，最重要的ω-3脂肪酸可能为α-亚麻酸、二十碳五烯酸(“EPA”；20:5n-3)和二十二碳六烯酸(“DHA”；22:6n-3)。DHA为一种LC-PUFA，其对脑和眼睛的发育是重要的。摄入ω-3多不饱和脂肪酸还可以有助于预防冠状动脉疾病。医学研究清楚地指示，这些脂肪酸具有有益的健康方面，例如改善心血管和免疫功能并且减少癌症、糖尿病和高血压。临床结果已经表明，原发性心跳骤停风险降低50％可能与每周膳食摄入5.5gω-3多不饱和脂肪酸有关。因此，含有ω-3多PUFA的油出于药物和营养目的而需求很高。
通常，随着碳-碳双键的数目或不饱和程度增大，脂肪酸的氧化稳定性明显降低。遗憾地，ALA、EPA和DHA全部为倾向于容易氧化的多不饱和脂肪。EPA(具有5个碳-碳双键)比ALA明显更易于氧化；DHA(具有6个碳-碳双键)比EPA更易于氧化。因此，增加ω-3含量倾向于缩短许多产品的保质期。对于包括大量EPA或DHA的油，这些问题变得尤其严重。
US 2015/223483公开具有改进的氧化稳定性的基于芥花油的掺合物。通过添加一种或多种添加剂实现稳定性。
US 2011/0027443公开具有改进的香味概况的含有油酸、亚油酸、α-亚麻酸和LC-PUFA的特定掺合物的油脂组合物。US 2004/209953公开主要含有LC-PUFA的单甘油酸酯和二甘油酯的营养产品。US 5,130,061描述用于从原油中提取DHA的转酯化和蒸馏方法的用途。US 9,040,730描述便于减少组合物中非期望固醇的量的含有PUFA的脂质混合物的纯化。在这些情况中的每一种中，使用鱼或微生物油作为获得特定掺合物的源材料。
国际专利申请第WO 2013/185184号公开用于产生多不饱和脂肪酸的乙酯的方法。
国际专利申请第WO 2015/089587号和美国专利申请第US 2015/0166928号公开包含ω-3与ω-6脂肪酸的混合物的种植物脂质组合物。转基因芥花描述于WO 2017/218969和WO 2017/219006中。
在本说明书中对公开地先前已出版的文献的列举或论述不必视为承认所述文献为目前现有技术的一部分或为公知常识。
发明内容
根据本发明的第一方面，提供一种基于植物的脂质组合物，其包含：
(i)二十二碳六烯酸(22:6n-3)，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的约15重量％到约35重量％；
(ii)二十碳五烯酸(20:5n-3)，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的至多约5重量％；
(iii)α-亚麻酸(18:3n-3)，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的约10重量％到约20重量％；
(iv)油酸(18:1n-9)，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的约20重量％到约40重量％；和
(v)棕榈酸，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的至多约1.5重量％；
其中组分(i)到(v)各自独立地以脂肪酸、脂肪酸盐、脂肪酸酯或脂肪酸酯的盐的形式提供。
所述脂质组合物在本文中称为“本发明组合物”。
本发明涉及同时含有呈游离脂肪酸、盐、酯或酯的盐的形式的高含量二十二碳六烯酸(DHA)和α-亚麻酸(ALA)的脂质组合物。已经发现这些组合物可以从可持续来源，例如种植物来源获得。还已经发现其具有改进的储存稳定性概况，这种改进的储存稳定性概况可以通过储存期间氧化降解的减少来证明。DHA尤其被公认为对于人类和动物健康至关重要的化合物。这些组合物可以用于饲料、类药剂营养品、化妆品和其它化学组合物中。其还可以用作中间体和活性药物成分。
本发明组合物中的脂肪酸含量可以使用所属领域的技术人员已知的常规方法来测定。所述方法包括结合参考标准物的气相色谱法(GC)，例如根据实例中公开的方法。在特定方法中，在GC分析之前将脂肪酸转化为甲酯或乙酯。所述技术描述于实例中。色谱图中的峰位置可以用于识别每种特定脂肪酸，并且对每一个峰下的面积进行求积分以测定量。如本文中所使用，除非另外说明，否则通过将色谱图中所述脂肪酸的曲线下面积计算为色谱图中脂肪酸的总面积百分比来测定样本中特定脂肪酸的百分比。这个百分比基本上对应于重量百分比(w/w)。可以通过GC-MS确认脂肪酸的标识。
除非另外指定，否则在此上下文中提及二十二碳六烯酸和“DHA”是指ω3形式的二十二碳六烯酸，即在脂肪酸的甲基端起第三碳-碳键中具有不饱和(碳-碳双键)的二十二碳六烯酸。可以互换使用的速记形式包括“22:6n-3”和“22:6ω-3”。
更一般来说，术语“多不饱和脂肪酸”和“PUFA”是指包含至少两个碳-碳双键的脂肪酸。术语“长链多不饱和脂肪酸”和“LC-PUFA”是指在其碳链中包含至少20个碳原子和至少两个碳-碳双键的脂肪酸，并且因此包括VLC-PUFA。如本文中所使用，术语“极长链多不饱和脂肪酸”和“VLC-PUFA”是指在其碳链中包含至少22个碳原子和至少三个碳-碳双键的脂肪酸。通常，脂肪酸碳链中的碳原子数是指未分支碳链。如果碳链分支，那么碳原子数不包括侧基中的碳原子数。
长链多不饱和脂肪酸可以为ω3(“ω-3”)脂肪酸，即，在脂肪酸的甲基端起第三碳-碳键中具有不饱和(碳-碳双键)的脂肪酸。或者，其可以为ω6(“ω-6”)脂肪酸，即，在脂肪酸的甲基端起第六碳-碳键中具有不饱和(碳-碳双键)的脂肪酸。尽管可能存在其它不饱和模式，但ω6并且特别是ω3形式在本发明的上下文中特别相关。
本发明组合物包含至少两种不同的多不饱和脂肪酸，包括DHA和α-亚麻酸(ALA，18:3n-3)。在一个实施例中，DHA或ALA为组合物中存在的最丰富的脂肪酸(按重量计，相对于组合物的总脂肪酸含量来说)。在另一个实施例中，DHA和ALA为组合物中存在的两种最丰富的脂肪酸。
本发明组合物中的组分(i)到(v)可以各自以脂肪酸、脂肪酸盐、脂肪酸酯或脂肪酸酯的盐的形式存在。
如本文中所使用，术语“脂肪酸”是指饱和或不饱和的羧酸(或有机酸)，常常具有长脂肪族尾部。通常，脂肪酸具有长度为至少8个碳原子、更特定地说长度为至少12个碳的碳-碳键合链。大多数天然存在的脂肪酸具有偶数个碳原子，这是因为其生物合成涉及具有两个碳原子的乙酸酯。脂肪酸可以处于游离状态(非酯化)(在本文中称为“游离脂肪酸”)，或处于酯化形式，例如为烷基酯、三酸甘油酯的部分、二酰基甘油酯的部分、单酰基甘油酯的部分、酰基-CoA(硫代酯)结合或其它结合形式或其混合物。脂肪酸可以酯化为磷脂，例如磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝胺酸、磷脂酰甘油、磷脂酰环己六醇或二磷脂酰甘油形式，但优选将其酯化为烷基酯，尤其酯化为乙酯。为避免疑义，除非另外陈述，否则术语“脂肪酸”涵盖游离脂肪酸、脂肪酸酯和这些游离脂肪酸、脂肪酸酯中的任一者的盐。除非另外陈述，否则与特定脂肪酸相关联的定量值是指脂肪酸的存在量(以重量计进行计算)，与其存在形式(例如，游离酸或酯)无关。
组合物中的每种脂肪酸还可以以脂肪酸的盐的形式提供，例如碱金属盐或碱土金属盐。可以提及的特定盐包括锂盐和钙盐。所述盐具有潜在的额外药用益处或提供可处理性进步。类似地，脂肪酸酯可以以脂肪酸酯的盐的形式提供。呈游离脂肪酸、盐、酯或酯的盐的形式的脂肪酸的任何组合可以存在于本发明组合物中。借此，我们意思指，为了举例，DHA可以主要以乙酯形式存在，ALA可以主要以甲酯的钙盐形式存在，并且油酸可以主要以游离脂肪酸形式存在。
“饱和脂肪酸”沿链不含任何双键或其它官能团。术语“饱和”是指氢，其中所有的碳(除了羧酸[-COOH]基团之外)含有尽可能多的氢。换句话说，ω端附接到三个氢原子(CH3-)，并且链内的每一个碳附接到两个氢原子(-CH2-)。术语“总脂肪酸”包括所有形式的脂肪酸，不管其为饱和或不饱和的、游离酸、酯和/或盐。
当提及例如化合物的量、重量、时间、温度等的可测量值时，如本文中所使用，术语“约”是指规定量的20％、10％、5％、1％、0.5％或甚至0.1％的变化。
可以提及的本发明组合物包括含有高浓度ω-3脂肪酸的组合物，其中许多种为被认为对人类健康特别重要的所谓的“必需脂肪”。ω-3脂肪酸可以对HDL胆固醇含量具有有益作用，支持年轻人的大脑发育，并且已经被证明有益于心理健康。这些脂肪酸通常被认为是具有消炎性质的类二十烷酸的前体。可以提及的本发明特定组合物包括其中脂质组合物中ω-3多不饱和脂肪酸的总量为组合物的总脂肪酸含量的至少约30重量％，例如至少约35重量％的组合物。在一个特定实施例中，脂质组合物中ω-3多不饱和脂肪酸的总量为所述组合物的总脂肪酸含量的至少约40wt％。
ω-6脂肪酸还被认为对人体健康至关重要。特定地说，某些ω-6脂肪酸为良好健康所必需的“必需脂肪”，但身体无法合成所述ω-6脂肪酸。然而，已经证明ω-6脂肪酸为具有更强促发炎性质的类二十烷酸的前体，并且因此当产生过多这些类二十烷酸时，其可能增加发炎和发炎性疾病。因此，可能期望使脂质组合物中所述脂肪酸的量最小化。通常认为膳食中ω-6与ω-3脂肪酸的比率应为4:1或更低。然而，正常西方膳食通常含有较高比例的ω-6脂肪酸。本发明脂质组合物有利地含有相对低量的ω-6脂肪酸，同时含有相对高量的更有益的ω-3脂肪酸。在一个实施例中，组合物中ω-6多不饱和脂肪酸的总量为组合物的总脂肪酸含量的至多约8重量％。在另一个实施例中，组合物中ω-3多不饱和脂肪酸的总重量与ω-6多不饱和脂肪酸的总重量的比率为至少约6:1。在另一个实施例中，组合物中ω-3多不饱和脂肪酸的总重量与ω-6多不饱和脂肪酸的总重量的比率为至少约8:1。
ω-9脂肪酸为可以通过身体产生的单不饱和脂肪。食用富集ω-9脂肪酸而非其它类型的脂肪的食物可以具有许多有益健康效果，包括减少糖尿病患者体内的血浆三酸甘油酯和“不良”极低密度脂蛋白(VLDL)胆固醇、减少发炎和改进胰岛素敏感性。在一个实施例中，脂质组合物中ω-3和ω-9多不饱和脂肪酸的总量为所述组合物的总脂肪酸含量的至少约50重量％、至少约60重量％或至少约70重量％。在另一个实施例中，所述组合物中ω-3和ω-9多不饱和脂肪酸的总重量与ω-6多不饱和脂肪酸的总重量的比率为至少约5:1，例如至少约10:1。
含有长链多不饱和脂肪酸的脂质组合物通常是从海洋来源(例如鱼、甲壳动物)、藻类来源或种植物来源(例如，亚麻或蓝蓟)获得。首先处理起始有机物以提取其中所含的油(通常称为“原”油)。举例来说，在种植物种子的情况下，挤压种子以释出油，接着通过过滤和/或倾析将其与固体物质分离。原油常常含有含量太低而不能使用(例如作为营养产品)的多不饱和脂肪酸，因此需要富集。在原油缺乏一种或多种必需组分的情况下，通常将来自多种来源(例如，来自鱼和藻类)的原油或富集油掺合在一起以获得期望组合物。或者，可以通过处理原油以去除不合需要的组分(例如，有害地影响产品的颜色、气味或稳定性的组分，或不合需要的脂肪酸)，同时使期望脂肪酸组分的含量最大化来实现富集。
本发明组合物有利地可以从单一来源获得。单一来源的使用促进了对原油的有效并且经济的处理以及本发明脂质组合物的制造。通过短语“可以从单一来源获得”(或“从单一来源获得”)，我们意思指脂质组合物可以从单一分类学类别的一种或多种生物获得。在一个特定实施例中，脂质组合物并非衍生自不同分类学类别的多种生物。举例来说，脂质组合物可以不为由鱼与藻类的组合或鱼与种植物的组合获得的油掺合物。相反地，本发明脂质组合物(或可以通过富集技术，例如转酯化和蒸馏获得所述组合物的“原”油)可以从单一生物群体，例如单一来源的种植物物质或植被获得。为避免疑义，短语“可以从单一来源获得”并不排除使用同一物种的多种生物，即使用同一物种的多种鱼类、藻类、种植物或种植物种子作为脂质组合物或“原”油的来源。所述多种生物优选全部为相同物种，或来自相同育种系，或相同种植物品种，或相同生产种群或批次。
在本发明特定脂质组合物中，DHA的存在量为组合物的总脂肪酸含量的约20重量％到约35重量％(例如约22重量％到约33重量％)。
已经有利地发现本发明脂质组合物相对于所存在量的EPA来说含有高含量的DHA。因此，在一个实施例中，脂质组合物中二十二碳六烯酸与二十碳五烯酸的重量比为至少约20:1。在另外实施例中，脂质组合物中二十二碳六烯酸与二十碳五烯酸的重量比可以超过约25:1，例如大于约30:1，并且最特定地说大于约35:1。
有利地，组合物中EPA的量可以相对低。本发明组合物含有为组合物的总脂肪酸含量的至多约5重量％的EPA。在特定实施例中，组合物含有为组合物的总脂肪酸含量的至多约3重量％，更特定地说至多约1重量％的EPA。
本发明组合物含有量为组合物的总脂肪酸含量的约10重量％到约20重量％的α-亚麻酸(ALA)。ALA为对于适当人类或动物健康至关重要的必需脂肪。在特定实施例中，所述组合物含有量为组合物的总脂肪酸含量的约12重量％到约20重量％，更特定地说约12重量％到约18重量％的ALA。
油酸为本发明组合物的组分，其存在量为所述组合物的总脂肪酸含量的约20重量％到约40重量％。油酸为人类膳食中常见的单不饱和脂肪。低密度脂蛋白(LDL)胆固醇降低和可能性高密度脂蛋白(HDL)胆固醇增加已经与单不饱和脂肪食用相关联。在一个实施例中，油酸的存在量为所述组合物的总脂肪酸含量的约20重量％到约35重量％。在另一个实施例中，油酸的存在量为所述组合物的总脂肪酸含量的约22重量％到约33重量％。
本发明组合物含有为组合物的总脂肪酸含量的至多约1.5重量％的棕榈酸(16:0)。在特定实施例中，组合物含有为组合物的总脂肪酸含量的至多约1.0重量％、更特定地说至多约0.7重量％的棕榈酸。
本发明组合物还含有为所述组合物的总脂肪酸含量的至少约0.5重量％的二十碳四烯酸(ETA，20:4n-3)。在特定实施例中，组合物含有为组合物的总脂肪酸含量的至少约1.0重量％，更特定地说至少约1.5重量％的ETA。
除非上下文另外指示，否则本发明的给定方面、特点或实施例的偏好和选项应被视为已经与本发明的所有其它方面、特点和实施例的任何和所有偏好和选项组合地加以公开。举例来说，在先前段落中指示的特定量的DHA、EPA、ALA、油酸和棕榈酸以所有组合形式公开。
因此，可以提及的特定脂质组合物为包含以下各者的组合物：
(i)二十二碳六烯酸(22:6n-3)，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的约20重量％到约35重量％；
(ii)二十碳五烯酸(20:5n-3)，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的至多约3重量％；
(iii)α-亚麻酸(18:3n-3)，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的约12重量％到约20重量％；
(iv)油酸(18:1n-9)，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的约20重量％到约35重量％；和
(v)棕榈酸，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的至多约1.0重量％；
其中组分(i)到(v)各自独立地以脂肪酸、脂肪酸盐、脂肪酸酯或脂肪酸酯的盐的形式提供。
在本发明组合物中，组分(i)到(v)中的每一者为可以独立地以脂肪酸、脂肪酸盐、脂肪酸酯或脂肪酸酯的盐的形式存在的脂肪酸。在一个特定实施例中，这些组分各自采用相同形式，例如其可以全部呈脂肪酸形式、全部呈脂肪酸盐形式、全部呈脂肪酸酯形式或全部呈脂肪酸酯的盐的形式。在组分呈脂肪酸盐、酯或酯的盐的形式的情况下，那么所述组分可以呈相同盐、酯或酯的盐的形式。举例来说，组分(i)到(v)中的每一者可以以脂肪酸的乙酯的形式提供。
在一个特定实施例中，组分(i)到(v)以脂肪酸酯的盐的形式或最特定地说以脂肪酸酯的形式提供。合适脂肪酸酯形式为所属领域的技术人员所已知。举例来说，营养上可接受和/或药学上可接受的脂肪酸酯形式包括脂肪酸的乙酯、甲酯、磷脂、单甘油酸酯、二甘油酯和三甘油酯。取决于脂质组合物的预期用途，可能需要不同的酯形式。举例来说，三甘油酯特别适用于预期用于人类食用，尤其婴儿食用的食物中，部分原因在于这些酯形式的味道和对于热处理(其可能为所述食品所必需)的稳定性。乙酯特别适用于膳食补充剂，因为这些酯形式可以有效并且容易地制造，并且不需要转化成三酸甘油酯形式。因此，在另一个实施例中，组分(i)到(v)各自独立地以脂肪酸乙酯的形式提供或作为三酸甘油酯的部分提供。
三酸甘油酯是衍生自甘油和三种脂肪酸的酯。由于本发明涉及脂肪酸的掺合物，因此所述三酸甘油酯中的脂肪酸组分可以以对应比率混合。也就是说，尽管组合物中可以存在不同三酸甘油酯分子的混合物，但组合物中的总脂肪酸概况如权利要求书中所界定。
或者，脂肪酸组分可以以“游离”脂肪酸的形式，即脂肪酸的-COOH形式存在。然而，特定地说，在本发明组合物中，所述组合物含有相对低含量的呈这种形式的脂肪酸，因为其与令人不愉快的味道(通常为“肥皂味”)相关联，并且稳定性比呈酯化形式的脂肪酸差。通常借助于碱或物理精炼，例如根据本文其它处论述的方法从油和脂质组合物中去除游离脂肪酸。因此，在一个实施例中，脂质组合物中的总游离脂肪酸含量为组合物的总脂肪酸含量的小于5重量％((例如小于3重量％，特定地说小于2重量％)。
本发明脂质组合物中的脂肪酸通常为直链(即，非分支链)脂肪酸(例如DHA、ALA等)。可以提及的本发明组合物包括含有非常低含量的分支链脂肪酸和其酯的组合物，使得所述组合物基本上不含分支链脂肪酸和分支链脂肪酸酯。通过术语“低含量”，我们意思指组合物含有的分支链脂肪酸和脂肪酸酯的量为组合物的总脂肪酸的至多约0.1重量％。
本发明脂质组合物还可以含有来源于源材料并且在提取和富集过程期间未完全去除的其它组分(例如，除脂肪酸之外)。那些其它组分的精确标识取决于源材料而大大不同。所述其它组分的实例包括以游离固醇或固醇酯形式存在的植物固醇(即，种植物固醇和种植物固烷醇)(例如β-植固醇、β-谷固醇、Δ5-燕麦固醇、菜油固醇、Δ5-豆固醇、Δ7-豆固醇和Δ7-燕麦固醇、胆固醇、菜子固醇、海绵固醇、菜油固醇、菜油固烷醇和齿孔醇)。其它实例包括抗氧化剂，例如生育酚和生育三烯酚。因此，可以提及的本发明特定脂质组合物包括含有可检测量的一种或多种植物固醇(例如β-植固醇)的脂质组合物。所述固醇可以以脂质组合物的至少约0.01重量％，但通常不超过约1重量％存在。
本发明组合物有利地可以从种植物来源(“植物”来源)获得。通过术语“基于植物”，我们意思指至少70重量％的存在于本发明组合物中的脂质是从植物来源获得。植物来源包括种植物来源，特定地说作物，例如谷物。在至少一个实施例中，脂质获自籽油作物，例如芸薹属(Brassica)，例如西洋油菜(Brassica napus)或芥菜(Brassica juncea)。然而，为避免疑义，组合物不必单独从所述来源获得，即，一定比例(例如，至多30重量％)的本发明组合物中的脂质可以从其它来源，包括海洋(例如，鱼或甲壳动物)油、藻油和其混合物获得。在一个实例中，至少80重量％，例如至少90重量％所存在的脂质是从植物来源获得。在本发明特定组合物中，基本上所有(即，至少95％、至少99％，或约100％)脂质是从植物来源获得。
在一个实施例中，本发明组合物(和下文定义的饲料和药物组合物)并非动物(例如，海洋动物)来源。也就是说，在所述实施例中，脂质组合物不含任何源自例如鱼和甲壳动物的动物的组分。相信其中无从动物获得的组分的脂质组合物在脂质含量方面是有利的，并且在标准精炼和/或富集程序之后可以实现稳定性概况。
使用种植物作为脂质或脂肪酸来源提供数个优点。举例来说，已知油的海洋来源含有相对高含量的污染物(例如汞、PCB和鱼过敏原(例如小白蛋白))，未在种植物物质中发现所述污染物。历史性过度捕捞还耗尽了鱼和甲壳动物(例如，磷虾)的种群，使其不再具有可持续性。因此，本发明提供一种可持续来源的多不饱和脂肪酸油组合物，其含有相对低含量的不合需要的污染物。
在一个特定实施例中，本发明组合物衍生自种植物。获得油的种植物通常为油籽作物，例如椰子、棉籽、亚麻、棕榈仁、花生、油菜籽、大豆和葵花籽。因此，排他性地从种植物获得的组合物可以称为“植物”油或“植物脂质组合物”。可以获得本发明脂质组合物的合适种植物为所属领域的技术人员所已知，并且包括芸薹属物种(Brassica sp.)、陆地棉(Gossypium hirsutum)、亚麻子(Linum usitatissimum)、向日葵物种(Helianthus sp.)、红花草(Carthamus tinctorius)、大豆(Glycine max)、玉米(Zea mays)、阿拉伯芥(Arabidopsis thaliana)、高粱(Sorghum bicolor)、蜀黍(Sorghum vulgare)、燕麦(Avenasativa)、车轴草属物种(Trifolium sp.)、油棕(Elaesis guineenis)、本氏烟草(Nicotiana benthamiana)、大麦(Hordeum vulgare)、狭叶羽扇豆(Lupinusangustifolius)、水稻(Oryza sativa)、光稃稻(Oryza glaberrima)、亚麻荠(Camelinasativa)或深海两节荠(Crambe abyssinica)。就此而言可以提及的特定种植物来源为芸薹属物种。
合适来源(包括海洋、藻类和种植物来源)可以为天然存在的，或可以经转基因以增强其产生长链多不饱和脂肪酸的能力。出于这个目的进行转基因，即源自重组种植物细胞的种植物来源的实例为所属领域的技术人员所已知，并且在以下国际专利申请中公开：PCT/AU2013/000639(公布为WO 2013/185184)、PCT/AU2014/050433(公布为WO 2015/089587)和PCT/AU2015/050340(公布为WO 2015/196250)。转基因芥花描述于WO 2017/218969和WO 2017/219006中。本文中提及的所有公开的公开内容都以全文引用的方式并入。
本发明脂质组合物可以直接从天然存在的来源(例如动物、藻类和/或种植物)获得。然而，通常需要处理从天然存在的来源获得的油以使其富集。合适的富集方法在实例中例示。
本发明脂质组合物或可以混合或富集以产生那些组合物的“原”油的合适来源包括海洋物种、藻类和种植物。从海洋来源获得油的方法在所属领域中是众所周知的。
如上文所论述，由于特定污染物的含量低并且可持续性优良，因此种植物来源(例如油籽来源)特别适合。例如芸薹属物种(例如，芥花)的种植物产生可以经处理以获得油的种子。
油/脂质的提取
在所属领域中常规地实践的技术可以用于提取、处理和分析由种植物和种子产生的油。通常，将种植物种子煮熟、压榨并进行油提取以产生原油。接着所述油可以进行脱胶、精炼、漂白和/或除臭。已经发现脱胶、精炼、漂白和除臭的组合对于制备富集DHA的脂质混合物特别有效。因此，在一个实施例中，脂质组合物是从已经脱胶、精炼、漂白和/或除臭的籽油获得。然而，没有必要以此种方式处理油，并且可以在无这些方法的情况下实现适当的纯化和富集。
通常，用于挤压种子的技术在所属领域中是已知的。举例来说，可以通过用水喷射油籽来使油籽回火以将水分含量提高到例如8.5％，并且使用具有0.23mm到0.27mm的间隙设定的光滑辊进行压片。取决于种子的类型，可能在挤压之前不添加水。还可以使用挤出方法实现提取。可以使用或不使用挤出方法代替压片，并且挤出方法有时用作螺旋压榨之前或之后的附加工艺。
在一个实施例中，通过使用螺旋压榨机挤压来释出大部分籽油。接着使用热跟踪柱用溶剂(例如己烷)提取从螺旋压榨机排出的固体材料，之后从所提取的油中去除溶剂。或者，可以使通过压榨操作产生的原油通过具有开槽线排放顶部的沉淀槽，以去除在压榨操作期间被吸出油的固体。可以使澄清油通过板框式过滤器以去除任何残留的精细固体颗粒。如果需要，从提取过程回收的油可以与澄清油组合产生掺合原油。一旦从原油中去除溶剂，便将压榨与提取的部分组合并对其进行正常油处理程序。
精炼和纯化
如本文中所使用，术语“纯化”当与本发明的脂质或油结合使用时通常意谓所提取的脂质或油已经经受一个或多个处理步骤以提高脂质/油组分的纯度。举例来说，纯化步骤可以包含以下中的一者或多者：脱胶、除臭、脱色或干燥所提取的油。然而，如本文中所使用，术语“纯化”不包括转酯化过程或改变本发明的脂质或油的脂肪酸组成以便增大为总脂肪酸含量百分比的DHA含量的另一个过程换句话来表达，纯化脂质或油的脂肪酸组成基本上与未纯化脂质或油的脂肪酸组成相同。
一旦从种植物来源提取种植物油，便可以使用以下方法中的一种或多种并且特别地说使用脱胶、碱精炼、漂白和除臭的组合对其进行精炼(纯化)。合适方法为所属领域的技术人员所已知(例如，WO 2013/185184中公开的方法)。
脱胶为油精炼的早期步骤，并且其主要目的为从油中去除大部分磷脂。在70到80℃下向原油中添加通常含有磷酸的2％水引起伴有痕量金属和颜料的大部分磷脂的分离。所去除的不溶性材料主要为磷脂与三酰甘油的混合物。可以通过向粗制籽油中添加浓磷酸以将不可水合的磷脂转化为可水合形式并螯合所存在的微量金属来执行脱胶。通过离心使胶与籽油分离。
碱精炼是用于处理原油的精炼工艺中的一者，有时还称为中和。其通常在脱胶之后并且在漂白之前进行。脱胶之后，可以通过添加足量的碱溶液来处理籽油，以滴定所有游离脂肪酸和磷酸，并去除由此形成的皂。合适的碱性材料包括氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、氢氧化锂、氢氧化钙、碳酸钙和氢氧化铵。碱精炼通常在室温下进行，并且去除游离脂肪酸级分。通过离心或通过提取到用于皂的溶剂中来去除皂，并用水洗涤所中和的油。如果需要，可以用例如盐酸或硫酸的合适酸中和油中任何过量的碱。
漂白为一种精炼工艺，其中在漂白土(0.2到2.0％)存在的情况下和在氧气不存在的情况下通过用氮气或蒸汽或在真空中操作，将油在90到120℃下加热10到30分钟。漂白经设计以去除不合需要的颜料(类胡萝卜素、叶绿素等)，并且所述过程还去除氧化产物、痕量金属、硫化合物和痕量皂。
除臭为在高温(约180℃)和低压(0.1到1mm Hg)下对油和脂肪进行的处理。这种处理通常是通过以约0.1毫升/分钟/100毫升籽油的速率将蒸汽引入到籽油中来实现。在喷洒约30分钟之后，使籽油在真空下冷却。这种处理改进籽油的颜色并且去除了大部分易失性物质或有气味的化合物，包括任何剩余的游离脂肪酸、单酰基甘油和氧化产物。
冬化为一种有时用于商业生产油以用于通过在低于室温的温度下结晶来将油脂分离成固体(硬脂酸甘油酯)和液体(油精)级分的方法。其最初应用于棉籽油以产生无固体产物。其通常用于降低油的饱和脂肪酸含量。
转酯化
原油通常含有呈三酰甘油(TAG)形式的期望脂肪酸。转酯化为一种可以用于在TAG内和TAG之间更换脂肪酸或将脂肪酸转移到另一种醇以形成酯(例如乙酯或甲酯)的方法。在本发明的实施例中，使用化学手段实现转酯化，所述化学手段通常涉及作为催化剂的强酸或强碱。乙醇钠(在乙醇中)为用于通过转酯化形成脂肪酸乙酯的强碱的实例。所述方法可以在环境温度或高温(例如，高达约80℃)下进行。
蒸馏
分子蒸馏为从原油中去除大量易失性较强的组分(例如饱和脂肪酸)的有效方法。蒸馏通常在例如低于约1毫巴的减压下执行。接着可以选定温度和时间以在几小时(例如1到10小时)蒸馏时间之后在馏出物与残余物之间实现约50:50的分离。用于产生本发明脂质组合物的典型蒸馏温度在120℃到180℃范围内，特定地说在145℃到160℃范围内。
可以执行多次蒸馏，并且当馏出物与残余物之间实现约50:50的分离时，认为完成了每次蒸馏。连续蒸馏的使用降低了总产率，然而，两次蒸馏可以产生最优结果。
因此，根据本发明的第二方面，提供一种用于产生本发明脂质组合物的方法，所述方法包含：提供脂肪酸乙酯的混合物；对所述混合物进行第一分子蒸馏步骤以获得第一残余物；和对所述第一残余物进行第二分子蒸馏步骤。本发明还涉及可以通过所述蒸馏方法获得的脂质组合物。合适蒸馏条件包括本文所描述的条件。举例来说，可以用于第一分子蒸馏步骤和第二分子蒸馏步骤中的特定蒸馏温度在120℃到180℃范围内，例如在145℃与160℃之间。选定温度和时间以在通常约1小时到约10小时的蒸馏时间之后在馏出物与残余物之间实现约50:50的分离。已经意外地发现，可以在与其它来源的转酯油(特定地说，具有大量(例如，高于30重量％)海洋来源的油的转酯油)相同或略低(例如，低3℃)的温度下实现基于植物的转酯油的蒸馏，而不损失分离过程的效率。也就是说，蒸馏时间无需延长，但实际上可以缩短，同时在合理时间表内维持相同分离程度(例如，50:50重量分离)。
在一个实施例中，在第一蒸馏步骤中加热原油4到8小时，例如4到6小时。在同一个或另一个实施例中，在第二蒸馏步骤中加热原油0.5到4小时，例如1到2小时。
在本发明的第二方面的一个实施例中，例如根据上文描述的方法中的任一种，通过转酯化基于植物的脂质油获得脂肪酸乙酯的混合物。基于植物的脂质油可以从本文公开的或所属领域中原本已知的任何种植物，特别是油籽获得。
其它富集方法
本发明脂质组合物可以用作活性药物成分(API)或API的前体(或“中间体”)，其可以借助于进一步富集而由此获得。所述组合物将进一步富集一定含量的例如DHA和/或ALA的有益PUFA。
油中多不饱和脂肪酸的浓度可以通过所属领域已知的各种方法，例如冷冻结晶、使用脲进行的复合物形成、超临界流体提取和银离子错合来增加。用脲进行的复合物形成为降低油中饱和和单不饱和脂肪酸含量的简单而有效的方法。最初，油的TAG被分成其构成性脂肪酸，所述构成性脂肪酸通常呈脂肪酸酯的形式。脂肪酸组成通常未因处理而改变的这些游离脂肪酸或脂肪酸酯接着可以与脲的乙醇溶液混合以形成复合物。饱和和单不饱和脂肪酸易与脲复合并且在冷却时结晶出来，并且可以随后通过过滤而去除。因此，非脲复合的级分富集长链多不饱和脂肪酸。
产物
本发明脂质组合物为散装油。也就是说，脂质组合物已经从获得部分或全部脂质的来源物质(例如，种植物种子))中分离。
本发明脂质组合物可以用作饲料。也就是说，本发明组合物可以以口服形式提供。出于本发明的目的，“饲料”包括用于人类或动物食用的任何食物或制剂，其在摄入体内时用于滋养或增强组织或供应能量；和/或维持、恢复或支持适当的营养状态或代谢功能。饲料包括用于婴儿和/或幼儿的营养组合物，例如婴儿配方食品。在饲料的情况下，脂肪酸可以以三酸甘油酯的形式提供以进一步减少任何令人不愉快的味道并使稳定性最大化。
饲料包含本发明脂质组合物以及任选的合适载剂。术语“载剂”以其最广泛的意义使用，以涵盖可能具有或不具有营养价值的任何组分。如所属领域的技术人员将了解，载剂必须适合在饲料中使用(或以足够低的浓度使用)，使得其对食用饲料的生物体无不利的影响。
饲料组合物可以呈固体或液体形式。另外，所述组合物可以包括在所属领域中众所周知的特定用途所期望量的可食用多量养分、蛋白质、碳水化合物、维生素和/或矿物质。这些成分的量将取决于组合物打算与正常个体一起使用抑或与具有特殊需要的个体(例如患有代谢障碍等的个体)一起使用而变化。
具有营养价值的合适载剂的实例包括多量养分，例如可食用脂肪(例如椰子油、琉璃苣油、真菌油、黑油、大豆油和甘油单酯以及甘油二酯)、碳水化合物(例如葡萄糖、可食用乳糖和水解淀粉)和蛋白质(例如大豆蛋白质、电渗析乳清、电渗析脱脂牛奶、牛奶乳清或这些蛋白质的水解产物)。
可以添加到本文公开的饲料中的维生素和矿物质包括例如钙、磷、钾、钠、氯、镁、锰、铁、铜、锌、硒、碘和维生素A、E、D、C和B复合物。
本发明脂质组合物可以用于药物组合物中。所述药物组合物包含本发明脂质组合物以及任选的所属领域的技术人员已知的一种或多种药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载剂。合适的赋形剂、稀释剂或载剂包括磷酸盐缓冲盐水、水、乙醇、多元醇、润湿剂或乳液，例如水/油乳液。所述组合物可以呈液体或固体形式，包括呈溶液、悬浮液、乳液、油或粉末形式。举例来说，所述组合物可以呈锭剂、胶囊、囊封凝胶、可摄入液体(包括油或溶液)或粉末或局部软膏或乳膏的形式。药物组合物还可以以静脉内制剂形式提供。
适用于饲料和药物组合物的特定形式包括含有液体的胶囊和封装凝胶。
在使用之前，本发明脂质组合物可以与其它脂质或脂质混合物(特别是基于植物的脂肪酸酯和脂肪酸酯混合物)混合。本发明脂质组合物可以与选自由以下组成的组的一种或多种额外组分一起提供：抗氧化剂(例如生育酚((例如α-生育酚或γ-生育酚)或参双键生育酚)、稳定剂和表面活性剂。α-生育酚和γ-生育酚两者皆为各种种植物籽油，包括芥花油中的天然存在的组分。
还可能期望包括等张剂，例如糖、氯化钠等。除所述惰性稀释剂之外，所述组合物还可以包括佐剂，例如湿润剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。除本发明脂质组合物之外，悬浮液还可以包含悬浮剂，例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧化乙烯山梨糖醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂-琼脂和黄蓍或这些物质的混合物。
可以使用所属领域中熟知的技术制备例如锭剂和胶囊的固体剂型。举例来说，根据本文公开的方法产生的脂肪酸可以用常规锭剂基质(例如乳糖、蔗糖和玉米淀粉)以及粘合剂(例如阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶)、崩解剂(例如马铃薯淀粉或褐藻酸)和润滑剂(例如硬脂酸或硬脂酸镁)来制成锭剂。胶囊可以通过将这些赋形剂连同相关脂质组合物和任选的一种或多种抗氧化剂一起并入明胶胶囊中来制备。
本发明药物组合物的可能性施用途径包括例如经肠(例如，口服和直肠)和不经肠。举例来说，液体制剂可以口服或经直肠施用。另外，均质混合物可以完全分散在水中，在无菌条件下与生理学上可接受的稀释剂、防腐剂、缓冲剂或推进剂混合以形成喷雾剂或吸入剂。
本发明脂质组合物指示为药剂。根据本发明的另一个方面，提供用作药物的包括上文描述的药物组合物中的任一者的本发明组合物。
本发明脂质组合物可以提供通常与长链多不饱和脂肪酸相关联的数个益处。举例来说，如可以使用所属领域的技术人员所熟知的测试来确定，本发明脂质组合物和上文描述的药物组合物可以用于治疗或预防心血管疾病、防止心血管疾病患者死亡、降低总体血清胆固醇含量、减少高BP、增大HDL:LDL比率、减少三酸甘油酯或降低载脂蛋白-B含量。因此，还公开使用本发明的脂质组合物治疗(或预防)上述疾病和病况的方法。
如本文中所使用，术语“治疗(treatment/treat/treating)”是指与未采取措施时可能发生的情况相比，逆转、缓解、抑制如本文所描述的病症或疾病的发展，或延迟、消除或减少如本文所描述的病症或疾病的发生或发作。如本文中所使用，术语“预防(prevent/prevention/preventing)”是指降低患得或罹患给定病况的风险，或减少或抑制未患病的受试者的复发或所述病况。
特定脂肪酸的典型剂量为0.1mg到20g，每日服用1到5次(每日至多100g)，并且特定地说在每日约10mg到约1、2、5或10g范围内(一次或多次服用)。如所属领域中已知，最低约300毫克/日的脂肪酸，尤其LC-PUFA是合乎期望的。然而，应了解，任何量的脂肪酸都将对受试者有益。
当用作药物组合物时，待施用至患者的脂质组合物的剂量可以由所属领域的一般技术人员确定，并且取决于各种因素，例如患者体重、患者年龄、患者总体健康状况、患者既往病史、患者免疫状况等。
本发明组合物为可以具有改进的稳定性概况并且可以含有脂肪酸混合物的易于获得的组合物，其中相对比例的ω-3、ω-6与ω-9脂肪酸对人类健康特别有益。可以使用所属领域的技术人员已知的各种方法评估稳定性。所述方法包括Rancimat方法、丙醛形成评估(特别适用于ω-3脂肪酸)、己醛形成评估(特别适用于ω-6脂肪酸)、“过氧化值”方法(例如，使用AOCS官方方法Cd 8-53)和“对甲氧基苯胺值”方法(例如，使用AOCS官方方法Cd 18-90)。实例中显示，本发明组合物可以从起始混合物中获得，所述起始混合物与参考掺合物(在主要LC-PUFA方面具有类似组成但含有大量动物(鱼)来源的脂质)相比并不显示增强的稳定性概况。
与现有技术中已知的脂质组合物相比，本发明组合物还可以具有以下优点：其可以更有效、毒性更小、药效更长、产生的副作用更少、更容易吸收，和/或具有更佳的药物动力学概况(例如，更高的口服生物可用性和/或更低的清除率)，和/或具有其它有用的药理学、物理或化学性质。
附图说明
通过以下实例说明本发明，其中：
图1显示芥花油和参考油的丙醛释出数据(在转酯化和蒸馏之后)，其表明本文中所描述的芥花油的改进的稳定性；和
图2显示芥花油和参考油的丙醛释出数据(在RBD精炼、转酯化和蒸馏之后)，其表明本文中所描述的芥花油的改进的稳定性。
具体实施方式
通用方法
GC样本制备和GC参数
将纯脂肪酸乙酯在50:50氯仿:甲醇和0.01％BHT中稀释到0.25％(v/v)。将乙酯溶液在氯仿:甲醇中稀释到2.5mg/mL。
以用于芥花油、鲔油和3×芥花-DHA油的脂肪酸甲酯的形式制备对照检查物。用每一批次样本分析对照检查物以检查GC性能并且监测由GC系统中的活动造成的任何DHA降解。
如下制备甲酯：
将纯油在50:50氯仿:甲醇和0.01％BHT(丁基化羟基甲苯)中稀释到0.33％(v/v)。添加50μL 0.05N Meth-Prep II溶液(间三氟甲基苯基三甲基氢氧化铵的0.2N甲醇溶液)，使溶液涡旋并使其在40℃下培育30分钟。最终溶液等同于0.25％(v/v)油。
在Shimadzu GC-2010增强版上运行乙酯(样本)和甲酯(检查物)，其中火焰电离检测器(FID)和分流注射使用以下参数：
蒸镏塔：30m BPX-70，内径0.32mm，膜厚0.25pm。注射体积：0.5μL。
结果计算为面积归一化(即，识别脂肪酸峰值之后的面积％，并且从所有峰值的面积总和排除非脂肪酸峰值)。
通过比较脂肪酸乙酯色谱图与脂肪酸甲酯色谱图来确定乙酯峰值的标识。相对洗脱次序几乎一致，然而，稍后洗脱的乙酯作为群组与脂肪酸甲酯进行比较。先前已经使用参考标准和GC-MS识别脂肪酸甲酯的洗脱次序。
实例
实例1-从种子中提取DHA芥花油
公开于美国专利公开第US 2018/0016590 A1号中的各种芥花以夏季作物形式生长。收获种子，并且接着在挤压前在室温下储存。
使用Kern Kraft KK80螺旋压榨机挤压272kg种子以产生DHA油。将榨油机轴环加热器温度设定为恒温器上的最大设定温度。初始环境温度和扼流圈温度为20℃，并且将抗流器距离设定为73.92mm。进料种子并且持续收集油和粗粉，直到所有种子都被挤压才停止榨油机。
在整个压榨过程中监测螺旋钻的旋转速度、粗粉和排出的油的温度。270千克的挤压时间为4小时，此是67.5千克/小时的产出率。获得87.2千克(32％)产量的原油。在过滤以去除细粉之后，产量为77.2千克(28％)。
实例2-参考掺合油
纯鱼油含有低含量的ALA脂肪酸和显著更高含量的EPA和DHA。参考油掺合物(在本文中称为“粗制三酸甘油酯参考掺合油”或类似物)经设计以在组成上与实例1中获得的经过滤的DHA芥花油尽可能类似。此举是通过以下进行：(a)将DHA的总含量与DHA芥花油中的总含量相匹配，和(b)将DHA/(ALA+EPA)的比率相匹配。此举是通过掺合富集DHA的鱼油(鲔)、富集ALA的油(亚麻籽油)和标准芥花油来实现。所得参考掺合油还具有与DHA芥花油类似的总ω-3含量。
实例3-粗制DHA芥花油和参考掺合物的脂肪酸组成
分析经过滤的原油和参考掺合油的脂肪酸组成。结果如下所示。
Figure BDA0002786582920000211
Figure BDA0002786582920000221
实例4-油稳定性评估
使用分别在实例1和2中描述的粗制DHA芥花油和参考掺合物执行Rancimat稳定性研究。所述方法涉及在90℃下使用Metrohm 743 Rancimat标准程序测试约2.5g测试材料。
下表概述在90℃下从这些油获得的结果。一式两份地执行实验。
Figure BDA0002786582920000222
DHA芥花油显示始终比参考油更差的稳定性。
实例5-化学转酯化粗制芥花-DHA油
向装有机械搅拌器的干燥氮气冲洗Buchi CR101化学反应器中添加纯乙醇(12.5L)和在实例1中获得的粗制三酸甘油酯芥花油(“DHA芥花油”)(5.00kg)，并搅拌混合物。
向上述混合物中添加冲洗到反应器中的乙醇钠(150g)与另一份纯乙醇(2.5L)，并在环境温度下继续搅拌16小时。从混合物采集的样本的记录1H NMR谱指示反应完成。
对5.22kg粗制芥花-DHA油执行转酯化程序。向所得粗制反应混合物中添加40到60℃沸点石油精(petroleum spirit/pet.spirit，10L)和水(10L)，并通过充分混合将混合物用10％盐酸谨慎地酸化到pH7(总共需要870mL，Merck Universal指示条，pH0-14)。
使所得混合物在反应器中静置，之后形成2个相。移除石油精层，并且进一步用石油精(3×5L)萃取水层。使组合石油精层返回到反应器，并且在真空中蒸发到低体积(约10L)。将所得浓溶液从反应器中排出，用无水硫酸镁(约1kg)干燥，过滤并且在真空中浓缩，得到黄色油状物(5.13kg)。
实例6-化学转酯化粗制参考掺合油
向装有机械搅拌器的干燥氮气冲洗Buchi CR101化学反应器中添加纯乙醇(12.5L)和根据实例2获得的粗制三酸甘油酯参考掺合油(5.00kg)，并搅拌混合物。
向上述混合物中添加冲洗到反应器中的乙醇钠(150g)与另一份纯乙醇(2.5L)，并在环境温度下继续搅拌16小时。样本的记录1H NMR谱指示极少或无反应发生。向混合物中添加另一份乙醇钠(57g)，并继续搅拌。
在额外5小时之后，样本的1H NMR谱指示反应完成75％。向混合物中添加另一份乙醇钠(60mL 21％乙醇溶液)，并继续搅拌3日，此后反应完成。
由粗制参考掺合物化学转酯化进行的实例产物分离
对5.17kg粗制参考掺合油执行转酯化程序。向所得粗制反应混合物中添加石油精(15L)和水(3.3L)，并且通过充分混合将混合物用10％盐酸谨慎地酸化到pH7(总共需要910mL)。
使所得混合物在反应器中静置，之后形成2个相。移除石油精层，并且进一步用石油精(2×7.5L)萃取水层。使组合石油精层返回到反应器，并且在真空中蒸发到低体积(约10L)。将所得浓溶液从反应器中排出，用无水硫酸镁(约1kg)干燥，过滤并且在真空中浓缩，得到黄色油状物(5.39kg)。
实例7-对转酯油进行脂肪酸组成分析
分析在实例5和6中获得的转酯产物的脂肪酸组成。结果如下所示。
Figure BDA0002786582920000231
Figure BDA0002786582920000241
实例8-蒸馏转酯化芥花油
通过真空蒸馏去除易失性较强的脂肪酸乙酯(FAEE)混合物组分的标准程序
来自粗制芥花-DHA的粗制脂肪酸乙酯(FAEE)(在实例5中获得)在以下条件下经受蒸馏。通过使经转酯化的原油通过仍在真空下的Pope 2英寸(50mm)刮膜来实现蒸馏分离，所述真空配备有2×1000ml收集馏出物和残余物的收集烧瓶。对每个转酯化芥花油进行脂肪酸组成分析。
通过Edwards 3旋转泵供应真空，并通过ebro真空计VM2000测量真空。
通过Cole-Palmer Instrument Company易装载II型蠕动泵以4毫升/分钟将油进料到蒸馏器中，其中蒸馏器电动机设定为325rpm，使用水冷凝器冷凝馏出物。继续进料，直到一个或另一个容纳烧瓶充满为止。
在这些条件下蒸馏粗制芥花-DHA FAEE，其中加热带最初设定为147℃。目的是获得50:50分离的馏出物:残余物。在实验前30到45分钟期间，将加热带的温度升高到154℃，以增大蒸馏油的比例，并且接着使蒸馏器平衡。在半小时之后，将加热带的温度在半小时内向下调整到149℃。蒸馏的其余部分在149℃下进行。蒸馏总时间为350分钟。再次在标准条件和设定为149℃的加热带温度下通过蒸馏使来自上述蒸馏的一部分残余物经受易失性较强的组分去除。蒸馏总时间为95分钟。
蒸馏 进料 馏出物 残余物
第一 1395.4g 699.5g 690.5g
第二 376.3g 211.7g 160.3g
实例9-蒸馏转酯化粗制参考掺合物衍生的FAEE
来自粗制参考掺合物的粗制脂肪酸乙酯(FAEE)(实例6中获得)在与先前实例中所示相同的条件下经受蒸馏。
在这些标准条件下蒸馏粗制参考掺合物FAEE，其中加热带最初设定为152℃。目的是获得50:50分离的馏出物:残余物。在20分钟之后，将加热带的温度设定为154℃，以增大馏出物的流量。再过一小时后，将加热带温度调整到153℃，并且接着在接下来的一小时内调整到152℃。对于蒸馏的最后一小时，将加热带温度设定为153℃。蒸馏总时间为380分钟。再次在标准条件下通过蒸馏使来自上述蒸馏的残余物经受易失性较强的组分去除。目的是获得50:50分离的馏出物:残余物。蒸馏主要在设定为150到151℃的加热带条件下执行。蒸馏总时间为195分钟。
蒸馏 进料 馏出物 残余物
第一 1515.7g 729.6g 775.1g
第二 768.5g 399.7g 363.3g
实例10-对蒸馏油进行脂肪酸组成分析
分析在实例8和9中获得的双蒸馏产物的脂肪酸组成。结果如下所示。
Figure BDA0002786582920000251
实例11-油稳定性评估
顶空GC-MS稳定性试验
对上文所描述的富集产物进行顶空分析，以评估在特定条件下释出的丙醛的量。含量增加的丙醛释出表明测试材料的稳定性降低。
SPME(固相微提取)方法：
所选65μm PDMS/DVB StableFlex纤维(Supelco纤维套件57284-u)
在使用之前将纤维在Triplus RSH调节站中在250℃下调节10分钟
在提取之前将样本在40℃培育1分钟。
从顶空小瓶提取1分钟
预期为能够捕获广泛范围的易失性组分的良好通用方法。
GC方法：
Thermo Scientific TRACE 1310 GC
Thermo Scientific TR-DIOXIN 5MS柱、0.25mm内径、30m膜0.1μm
分流注射250℃Split 83，1.2毫升He/分钟
GC升温：以5℃/分钟从40℃1分钟升温到100℃，接着以50℃/分钟升温到300℃
使用具有良好协同作用的通用MS专用柱以进行顶空分析。使用缓慢的初始温度升温以最大化易失物分离，之后升温到最高温度以维持柱性能。采用分流注射以避免要求对入口进行低温冷却并增强柱分辨率。
标准物分离受到一些峰值重叠阻碍，但仍然可以在定量中得到满足。对于3个标准校准结果(0.1、0.01和0.01％)，采用分子态离子m/z 56以检测丙醛。使用m/z 58处的基峰来检测己醛。
MS方法：
Thermo Scientific DFS高分辨率GC-MS
低分辨率(1000)、全扫描35-350Da，每次扫描0.5秒
标准物：将丙醛和己醛标准物稀释液制成所供应的DHA芥花乙酯。接着将这些标准物混合物以540μl到20ml顶空小瓶的体积添加。
采用全扫描，从而允许监测所有逐渐形成的产物而非特定分子。
顶空稳定性结果：
下表概述从实例8中获得的双蒸馏芥花油和实例9中获得的双蒸馏参考油从T＝0到4日获得的结果。在此时段期间，在灯箱和荧光管照明下，将测试样本保持在环境温度下。分析m/z 58分子态离子，并且质谱图清楚地显示在RT下1.37分钟时出现丙醛。丙醛产生在下表中量化，并且数据显示于图1中。与参考物相比，DHA芥花油释出显著较低量的丙醛，表明芥花油的改进的稳定性。
时间点(日) 0 2 4
DHA芥花油(丙醛ppm) 32.000 38.000 185.000
参考油(丙醛ppm) 83.000 294.000 829.000
与参考油相比，DHA芥花油显示优良的氧化稳定性。
实例12–精炼DHA芥花油
对实例1中获得的芥花油的一部分在进行进一步富集之前进行精炼。精炼过程涉及脱胶、碱精炼、漂白和除臭。
酸脱胶
脱胶为从油中去除不可水合的磷脂和可水合的磷脂。将实例1中获得的经干燥原油加热到53±2℃，并且添加0.2％50％柠檬酸溶液。在混合约30分钟之后，添加2.0％经加热(53±2℃)软化水并混合约30分钟。在保持期间将油加热到67±3℃，并且接着离心。
酸预处理/精炼
精炼为在用苛性碱皂化后去除游离脂肪酸以使其可以溶于水并且随后通过离心去除。使用酸预处理步骤来继续磷脂水合。将脱胶油加热到65±5℃并添加0.1％的85％磷酸，并混合总共30分钟。在酸添加和保持时间之后，添加20Be'(Baumé；14.4％，w/w)氢氧化钠以中和游离脂肪酸加0.05％(w/w)过量。接着将苛性碱和油再混合15分钟。在15分钟的保持期间将油加热到62±2℃，并且接着将油离心。
苯磺酰基二氧化硅处理
执行苯磺酰基二氧化硅处理以进一步去除皂，达到与漂白相容的含量。苯磺酰基预处理与漂白步骤组合。将精炼油加热到68±5℃，并用0.3％Trisyl 300处理。将油/苯磺酰基混合约15分钟，并且接着继续漂白。
漂白
将精炼油用吸附性粘土处理，以去除过氧化物、磷脂、有色体和痕量皂。使用酸预处理步骤来继续磷脂水合。将苯磺酰基预处理的油与0.2％(w/w)50％柠檬酸溶液混合。在混合15分钟之后，添加2％(w/w)Tonsil Supreme 126 FF漂白粘土。接着将混合物在真空下加热到90±2℃，并保持约30分钟。将油冷却到60±2℃，用氮气打破真空，添加1.0kg助滤剂并过滤。压力容器：500L Cherry-Burrell压力容器，蒸气或冷却水套，全316不锈钢构造，具有用于混合的叶轮和挡板，制造厂系列号E-227-94。压滤机：使用24”聚丙烯Sperry压滤机，容量4.8立方英尺的过滤器，纸和布支撑件。
除臭
将经漂白的油在高温和低压下用蒸气喷洒以去除有气味的组分、香味组分和额外游离脂肪酸。颜色还通过在高温下的热漂白而掉色。将一半经漂白油在180±2℃下用1％喷射蒸气除臭60分钟，并监测脂肪酸组成(FAC)。除臭器容器(OD4)：400L Copersmithing真空额定容器，蒸气或冷却水套，全316不锈钢构造。在180℃下保持60分钟，观察到DHA含量略微降低。接着，在180℃下进行另一次试验，保持30分钟。将产物在氮气下封装于20L塑料HDPE桶中，并储存在4℃冷却器中。
实例13-精炼原始参考掺合油
对实例2中描述的参考掺合物的一部分在进行进一步富集之前进行精炼。在精炼过程中，参考掺合物在与先前实例中所示相同的条件下经受精炼。
实例14-RBD DHA芥花油和RBD参考掺合物的脂肪酸组成
分析RBD DHA芥花油(实例12)和RBD参考掺合油(实例13)的脂肪酸组成。结果如下所示。
Figure BDA0002786582920000291
结合实例(和附图)提及“RBD”意谓相关产物是直接或间接地从实例12(对于芥花油)和实例13(对于参考共混物)的“精炼”产物中获得。
实例15-化学转酯化RBD芥花-DHA油
向装有机械搅拌器的干燥氮气冲洗Buchi CR101化学反应器中添加纯乙醇(12.5L)和在实例12中获得的精炼(“RBD”)三酸甘油酯菜籽DHA油(5.00kg)，并搅拌混合物。
向上述混合物中添加冲洗到反应器中的乙醇钠(150g)与另一份纯乙醇(2.5L)，并在环境温度下继续搅拌16小时。从混合物采集的样本的记录1H NMR谱指示反应完成。
对约5kgRBD芥花-DHA油执行转酯化程序。向所得粗制反应混合物中添加40到60℃沸点石油精(10L)和水(10L)，并通过充分混合将混合物用10％盐酸谨慎地酸化到pH 7(总共需要870mL，Merck Universal指示条，pH0-14)。
使所得混合物在反应器中静置，之后形成2个相。移除石油精层，并且进一步用石油精(3×5L)萃取水层。使组合石油精层返回到反应器，并且在真空中蒸发到低体积(约10L)。将所得浓溶液从反应器中排出，用无水硫酸镁(约1kg)干燥，过滤并且在真空中浓缩，得到浅淡黄色油(产率：99％)。
实例16-化学转酯化RBD参考掺合油
向装有机械搅拌器的干燥氮气冲洗Buchi CR101化学反应器中添加纯乙醇(12.5L)和在实例13中获得的RBD三酸甘油酯参考掺合油(约5kg)，并搅拌混合物。
向上述混合物中添加冲洗到反应器中的乙醇钠(150g)与另一份纯乙醇(2.5L)，并在环境温度下继续搅拌16小时。样本的记录1H NMR谱指示极少或无反应发生。向混合物中添加另一份乙醇钠(57g)，并继续搅拌。
在额外5小时之后，样本的1H NMR谱指示反应完成75％。向混合物中添加另一份乙醇钠(60mL 21％乙醇溶液)，并继续搅拌3日，此后反应完成。
由RBD参考掺合物化学转酯化进行的实例产物分离
对约5kg RBD参考掺合油执行转酯化程序。向所得粗制反应混合物中添加石油精(15L)和水(3.3L)，并且通过充分混合将混合物用10％盐酸谨慎地酸化到pH 7(总共需要910mL)。
使所得混合物在反应器中静置，之后形成2个相。移除石油精层，并且进一步用石油精(2×7.5L)萃取水层。使组合石油精层返回到反应器，并且在真空中蒸发到低体积(约10L)。将所得浓溶液从反应器中排出，用无水硫酸镁(约1kg)干燥，过滤并且在真空中浓缩，得到浅淡黄色油(产率：99％)。
实例17-蒸馏转酯化RBD芥花油
通过真空蒸馏去除易失性较强的脂肪酸乙酯(FAEE)混合物组分的标准程序
来自RBD芥花-DHA的脂肪酸乙酯(FAEE)(在实例15中获得)在以下条件下经受蒸馏。通过使经转酯化的油通过仍在真空下的Pope 2英寸(50mm)刮膜来实现蒸馏分离，所述真空配备有2×1000ml收集馏出物和残余物的收集烧瓶。对每个转酯化RBD芥花油进行脂肪酸组成进行分析。
通过Edwards 3旋转泵供应真空，并通过ebro真空计VM2000测量真空。
通过Cole-Palmer Instrument Company易装载II型蠕动泵以4毫升/分钟将油进料到蒸馏器中，其中蒸馏器电动机设定为325rpm，使用水冷凝器冷凝馏出物。继续进料，直到一个或另一个容纳烧瓶充满为止。
在这些条件下蒸馏RBD芥花-DHA FAEE，其中加热带最初设定为152℃，以获得50:50分离的馏出物:残余物。再次在标准条件和设定为152℃的加热带温度下通过蒸馏使来自此蒸馏的一部分残余物经受易失性较强的组分去除。蒸馏总时间为约90分钟。
蒸馏 进料 馏出物 残余物
第一 1596.6 729.9 855.9
第二 851.3 503.5 343.1
实例18-蒸馏转酯化RBD参考掺合物衍生的FAEE
来自RBD参考掺合物的脂肪酸乙酯(FAEE)(实例16中获得)在与先前实例中所示相同的条件下经受蒸馏。
在这些标准条件下蒸馏RBD参考掺合物FAEE，其中加热带最初设定为152℃，以获得50:50分离的馏出物:残余物。再次在标准条件下通过蒸馏使来自此蒸馏的残余物经受易失性较强的组分去除。目的是获得50:50分离的馏出物:残余物。蒸馏主要在设定为152℃的加热带条件下执行。蒸馏总时间为约200分钟。
蒸馏 进料 馏出物 残余物
第一 1195.1 674.7 504.6
第二 496.4 297.2 197.4
实例19-对富集RBD油进行脂肪酸组成分析
分析实例17和18中获得的产物的脂肪酸组成。结果如下所示。
Figure BDA0002786582920000311
Figure BDA0002786582920000321
实例20-油稳定性评估
根据实例11中描述的方法对实例17和18中所描述的富集产物进行顶空分析。
下表概述从实例17中获得的RBD芥花油和实例18中获得的RBD参考油从T＝0到3日获得的结果。在此时段期间，在灯箱和荧光管照明下，将测试样本保持在环境温度下。分析m/z 58分子态离子，并且质谱图清楚地显示在室温下1.37分钟时出现丙醛。丙醛产生在下表中量化，并且数据显示于图2中。与参考物相比，DHA芥花油释出显著较低量的丙醛，表明芥花油的改进的稳定性。
时间点(日) 0 3
DHA芥花油(ppm丙醛) 17.000 73.000
参考油(ppm丙醛) 31.000 267.000
与参考油相比，DHA芥花油显示优良的氧化稳定性。

Claims (15)

1.一种基于植物的脂质组合物，其包含：
(i)二十二碳六烯酸(22:6n-3)，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的约15重量％到约35重量％；
(ii)二十碳五烯酸(20:5n-3)，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的至多约5重量％；
(iii)α-亚麻酸(18:3n-3)，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的约10重量％到约20重量％；
(iv)油酸(18:1n-9)，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的约20重量％到约40重量％；和
(v)棕榈酸，其量为所述组合物的总脂肪酸含量的至多约1.5重量％；
其中组分(i)到(v)各自独立地以脂肪酸、脂肪酸盐、脂肪酸酯或脂肪酸酯的盐的形式提供。
2.根据权利要求1所述的脂质组合物，其中二十二碳六烯酸(22:6n-3)的存在量为所述组合物的总脂肪酸含量的约20重量％到约35重量％(特定地说，约22重量％到约33重量％)。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的脂质组合物，其中所述二十碳五烯酸的存在量为所述组合物的总脂肪酸含量的至多约3重量％(特定地说，至多约1重量％)。
4.根据前述权利要求中任一项所述的脂质组合物，其中所述α-亚麻酸的存在量为所述组合物的总脂肪酸含量的约12重量％到约20重量％(特定地说，约12重量％到约18重量％)。
5.根据前述权利要求中任一项所述的脂质组合物，其中所述油酸的存在量为所述组合物的总脂肪酸含量的约20重量％到约35重量％(特定地说，约22重量％到约33重量％)。
6.根据权利要求5所述的脂质组合物，其中所述棕榈酸(16:0)的存在量为所述组合物的总脂肪酸含量的至多约1.0重量％(特定地说，至多约0.7重量％)。
7.根据前述权利要求中任一项所述的脂质组合物，其中组分(i)到(v)各自独立地以脂肪酸酯或脂肪酸酯的盐的形式提供。
8.根据权利要求7所述的脂质组合物，其中组分(i)到(v)各自独立地以脂肪酸乙酯或三酸甘油酯的部分的形式提供。
9.根据前述权利要求中任一项所述的脂质组合物，其中所述脂质组合物衍生自单一来源。
10.根据前述权利要求中任一项所述的脂质组合物，其中所述脂质组合物衍生自种植物。
11.根据权利要求10所述的脂质组合物，其中所述种植物为油籽，特定地说芸薹属物种(Brassica sp.)、陆地棉(Gossypium hirsutum)、亚麻(Linum usitatissimum)、向日葵属物种(Helianthus sp.)、红花(Carthamus tinctorius)、大豆(Glycine max)、玉米(Zeamays)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)、高粱(Sorghum bicolor)、蜀黍(Sorghumvulgare)、燕麦(Avena sativa)、车轴草属物种(Trifolium sp.)、油棕(Elaesisguineenis)、本氏烟草(Nicotiana benthamiana)、大麦(Hordeum vulgare)、狭叶羽扇豆(Lupinus angustifolius)、水稻(Oryza sativa)、光稃稻(Oryza glaberrima)、亚麻荠(Camelina sativa)或深海两节荠(Crambe abyssinica)。
12.根据前述权利要求中任一项所述的脂质组合物，其中所述组合物以锭剂、胶囊、封装凝胶、可摄入液体或粉末或局部软膏或乳膏的形式提供。
13.根据前述权利要求中任一项所述的脂质组合物，其进一步包含一种或多种选自由以下组成的组的额外组分：抗氧化剂、稳定剂和表面活性剂。
14.根据前述权利要求中任一项所述的脂质组合物，其用于治疗或预防心血管疾病、防止心血管疾病患者死亡、降低总体血清胆固醇含量、减少高BP、增大HDL:LDL比率、减少三酸甘油酯或降低载脂蛋白-B含量。
15.一种用于产生根据权利要求1至11中任一项所述的脂质组合物的方法，所述方法包含提供脂肪酸乙酯的混合物；使所述混合物经受第一分子蒸馏步骤以获得第一残余物；和使所述第一残余物经受第二分子蒸馏步骤。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102557836B1 (ko) * 2020-11-18 2023-07-24 주식회사 엘에스엔지니어링 도코사헥사엔산 또는 에이코사펜타엔산의 고순도 정제 장치 및 정제 방법

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050244564A1 (en) * 2004-04-29 2005-11-03 Daniel Perlman Oxidative stabilization of omega-3 fatty acids in low linoleic acid-containing peanut butter
US20110305811A1 (en) * 2008-03-03 2011-12-15 Daniel Perlman Stabilization of omega-3 fatty acids in milk
CN104726473A (zh) * 2013-12-18 2015-06-24 联邦科学技术研究组织 包含二十二碳六烯酸的提取的植物脂质
WO2018033899A1 (en) * 2016-08-17 2018-02-22 Enzymotec Ltd. Oil blends and processes for their preparation

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4526902A (en) * 1983-10-24 1985-07-02 Century Laboratories, Inc. Combined fatty acid composition for treatment or prophylaxis of thrombo-embolic conditions
IT1205043B (it) 1987-05-28 1989-03-10 Innova Di Ridolfi Flora & C S Procedimento per l'estrazione di esteri di acidi grassi poliinsaturi da olii di pesce e composizioni farmaceutiche e dietetiche contenenti detti esteri
JP2000104092A (ja) * 1998-09-29 2000-04-11 Nof Corp 血清脂質改善油脂組成物
AU2015203218A1 (en) * 2001-07-27 2015-07-09 Aker Biomarine Antarctic As Natural marine source phospholipids comprising flavonoids polyunsaturated fatty acids and their applications
US20120214771A1 (en) * 2001-07-27 2012-08-23 Fontini Sampalis Compositions for treatment of cardiometabolic disorders
US20040209953A1 (en) 2002-12-06 2004-10-21 Wai Lee Theresa Siu-Ling Glyceride compositions and methods of making and using same
US20080026125A1 (en) 2003-07-09 2008-01-31 J-Oil Mills, Inc. Antioxidant Fat or Oil Composition Containing Long-Chain Highly Unsaturated Fatty Acid
US8202541B2 (en) * 2006-02-07 2012-06-19 U.S. Nutraceuticals, LLC Dietary supplement composition for blood lipid health
US20140017308A1 (en) * 2010-09-08 2014-01-16 Pronova Biopharma Norge As Compositions comprising a fatty acid oil mixture, a free fatty acid, and a statin
EP2673063A1 (en) * 2011-02-11 2013-12-18 E.I. Du Pont De Nemours And Company Purification of triglyceride oil from microbial sources using short path distillation
SG11201408362SA (en) 2012-06-15 2015-01-29 Commw Scient Ind Res Org Production of long chain polyunsaturated fatty acids in plant cells
US20150223483A1 (en) 2012-09-11 2015-08-13 Dow Agrosciences Llc Omega-9 canola oil blended with dha
WO2015196250A1 (en) 2014-06-27 2015-12-30 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation Lipid comprising docosapentaenoic acid
EP4338586A2 (en) 2016-06-16 2024-03-20 Nuseed Nutritional Australia Pty Ltd Elite event canola ns-b50027-4
SG11201811219UA (en) 2016-06-16 2019-01-30 Nuseed Pty Ltd Inbred transgenic canola line ns-b50027-4 and seeds thereof

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050244564A1 (en) * 2004-04-29 2005-11-03 Daniel Perlman Oxidative stabilization of omega-3 fatty acids in low linoleic acid-containing peanut butter
US20110305811A1 (en) * 2008-03-03 2011-12-15 Daniel Perlman Stabilization of omega-3 fatty acids in milk
CN104726473A (zh) * 2013-12-18 2015-06-24 联邦科学技术研究组织 包含二十二碳六烯酸的提取的植物脂质
WO2018033899A1 (en) * 2016-08-17 2018-02-22 Enzymotec Ltd. Oil blends and processes for their preparation

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11872201B2 (en) 2018-06-21 2024-01-16 Nuseed Nutritional Us Inc. DHA enriched polyunsaturated fatty acid compositions

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