CN112154156A

CN112154156A - 抗cd38抗体的皮下给药

Info

Publication number: CN112154156A
Application number: CN201980032101.8A
Authority: CN
Inventors: E·费迪克; M·汉利; A·帕卢姆伯
Original assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2018-03-28
Filing date: 2019-03-27
Publication date: 2020-12-29
Also published as: RU2020135062A; WO2019186273A4; AU2019244478A1; JP2021519295A; KR20210002499A; MX2020010144A; TW202003566A; JP2024045121A; BR112020019710A2; US20210047427A1; CO2020013252A2; CA3095086A1; EP3774915A1; WO2019186273A1; RU2020135062A3

Abstract

公开了皮下施用分离的抗CD38抗体的方法。所述方法为自身免疫性疾病和癌症，包括血液疾病提供了有效的治疗。还公开了所述抗CD38抗体的单位剂型。

Description

抗CD38抗体的皮下给药

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年3月28日提交的美国临时申请号62/649,489的权益，所述临时申请特此以引用的方式整体并入。

技术领域

公开了用于经由皮下(SC)施用来施用分离的抗CD38抗体的方法和组合物。

发明背景

CD38(也称为环状ADP核糖水解酶)是具有长的C-末端细胞外结构域和短的N-末端细胞质结构域的II型跨膜糖蛋白。CD38是包含CD157和海兔属(Aplysia)ADPR环化酶的一组相关膜结合酶或可溶酶的成员。这个家族的酶具有将NAD转化成环状ADP核糖或烟碱酸-腺嘌呤二核苷酸磷酸的独特能力。CD38参与Ca²⁺动员并且参与通过许多信号传导分子的酪氨酸磷酸化的信号转导，所述信号传导分子包括磷脂酶Cγ、ZAP-70、syk以及c-cbl。基于这些观察结果，CD38是淋巴样细胞正常发育期间的成熟和活化中的重要信号传导分子。在造血细胞中，一组功能效应已被归因于CD38介导的信号传导，所述功能效应包括淋巴细胞增殖、细胞因子释放、B细胞和骨髓细胞发育和存活的调控，以及树突状细胞(DC)成熟的诱导。

CD38在不成熟的造血细胞中表达，在成熟造血细胞中下调，并且以高水平再表达于活化的淋巴细胞和浆细胞中。例如，在活化的B细胞、浆细胞、活化的CD4+ T细胞、活化的CD8+ T细胞、NK细胞、NKT细胞、成熟DC以及活化的单核细胞中观察到高CD38表达(参见例如，美国专利号8,362,211)。

针对CD38的自身抗体的存在一直与许多疾病，包括糖尿病、慢性自身免疫性甲状腺炎和格雷夫斯病(Graves’disease)相关(参见Antonelli等人(2001)Clin.Exp.Immunol.126:426-431；Mallone等人(2001)Diabetes 50:752和Antonelli等人(2004)J.Endocrinol.Invest.27:695-707)。

已在多种疾病中，包括自身免疫性疾病和癌症中记录了CD38的表达增加。此类疾病包括系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)、炎症性肠病(IBD)和溃疡性结肠炎(UC)。与对照相比，在患有RA的患者中，关节组织中浆细胞增加。在患有SLE的患者中，疾病活动性更强的患者的外周血中成浆细胞增加。当前的基于CD20的B细胞耗减疗法(如利妥昔单抗)可有效耗减CD20+ B细胞，但由于它们不表达CD20，因此不能直接切有效地耗减浆细胞或成浆细胞。与这一理念一致，患有RA或SLE且浆细胞或成浆细胞水平高的患者不太可能从基于CD20的疗法中获得实质性的临床益处。因此，靶向在浆细胞和成浆细胞以及NK细胞和活化的T细胞上高表达的CD38的治疗剂可为RA和SLE以及以CD-38表达为特征的其它疾病提供有效的治疗。

特别地，已经记录了在多种造血起源的疾病以及由此来源的细胞系中CD38表达的增加，并且已被描述为血液癌症中的阴性预后标志物。此类疾病包括但不限于多发性骨髓瘤(MM)、慢性成淋巴细胞性白血病、B细胞慢性淋巴细胞性白血病(B-CLL)(包括B细胞急性淋巴细胞性白血病)、B和T急性淋巴细胞性白血病(ALL)、急性成淋巴细胞性白血病、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、套细胞淋巴瘤、早幼淋巴细胞性/粒细胞性白血病、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、滤泡性淋巴瘤、NK细胞白血病、浆细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤(NHL)、伯基特淋巴瘤(BL)、T细胞淋巴瘤(TCL)、毛细胞白血病(HCL)和霍奇金淋巴瘤(HL)。此外，CD38表达是患有诸如B-CLL(Dürig等人(2002)Leukemia 16:30-35；和Morabito等人(2001)Leukemia Res.25:927-932)和急性骨髓性白血病(Keyhani等人(1999)Leukemia Res.24:153-159)的疾患的患者的预后指标。因此，CD38提供治疗造血系统疾病的有用靶标。

若干抗CD38抗体处于用于治疗CD38相关癌症的临床试验中。然而，现有技术的针对CD38的治疗性抗体全部结合至红细胞(RBC)和血小板，从而由于与RBC的非生产性结合的沉陷而导致更高的所需剂量。尽管CD38在RBC上的表达水平比骨髓瘤细胞上低大约1000倍(deWeers等人(2011)J.Immunol.186(3):1840-1848)，但对于患有活动性疾病的MM(多发性骨髓瘤)患者血液中的每种骨髓瘤细胞，存在大约36,000个RBC(Witzig等人(1993)Cancer72(1):108-113)。因此，RBC上表达的CD38分子比肿瘤细胞上多36倍。因此，当前使用抗CD38抗体的治疗需要静脉内施用，这是由于超出RBC结合的功效所需的高剂量。例如，达雷木单抗(抗CD38 IgG1 mAb；FDA批准且可从Janssen Oncology商购的

)需要非常高的剂量(≥16mg/kg)和强化方案(每周一次8x，每周两次8x，然后每月一次)以获得最佳的抗肿瘤活性(Xu等人(2017)Clin.Pharmacol.Ther.101(6):721-724)。

因此，使用结合至RBC的抗CD38抗体的治疗目前集中于静脉内施用，因为达到治疗功效需要大量抗体，因为此类大体积不适合皮下施用。例如，达雷木单抗以小体积施用，因为目标饱和度需要≥16mg/kg((例如，每70kg患者大约1120mg)。已知的最高皮下制剂浓度是200mg/ml(

也称为培化赛妥珠单抗)。使用200mg/ml的已知最高皮下制剂浓度，达雷木单抗将具有5.6-11.2mL的最小预计注射体积，这对于皮下施用而言是非常大的体积。鉴于这种大的体积和浓度限制，达雷木单抗必须与透明质酸酶一起以15ml体积皮下施用，以帮助分散和吸收。

另一种抗CD-38抗体伊沙妥昔单抗(可从Sanofi Genzyme商购，并且目前处于3期临床试验中)在3期试验中以10mg/kg和20mg/kg施用，其对应于每70kg患者700-1400mg。再次，使用200mg/mL的已知最高皮下制剂浓度，伊沙妥昔单抗将具有3.5-14mL的预计注射体积。

除了目前临床上现有技术的抗CD38抗体需要更高的剂量和体积外，它们对RBC和血小板的靶向还可引起严重的副作用，例如溶血性贫血(其中RBC被破坏比它们可被替代的速度更快的一种疾患)。在开放标签单组研究中，以每2周3mg/kg(Q2W；n＝23)，对于2个周期10mg/kg Q2W、然后Q4W(n＝25)，10mg/kg Q2W(n＝24)和每周20mg/kg共4个剂量(1个周期)，然后Q2W(n＝25)向总计97名患者静脉内施用伊沙妥昔单抗。最常见的严重(3/4级)不良事件是贫血，其影响了24％的患者(参见http://www.onclive.com/conference-coverage/asco-2016/isatuximab-monotherapy-effective-for-heavily-pretreated-myeloma,the2016ASCO年度会议以及Richter等人(2016)J.Clin.Oncol.34(增刊):摘要8005)。除严重贫血外，血小板减少症和嗜中性粒细胞减少症也是常见的严重不良事件(分别22.9％、18.4％和18.4％；Dimopoulos等人(2018)Blood 132(增刊1):ASH摘要155/口头报告)。同样，低血细胞计数(WBC、RBC和血小板)、贫血和血小板减少症是达雷木单抗的众所周知的严重不良反应。在一项达雷木单抗研究中，所有患者中有45％经历贫血(其中19％为3级)，并且48％患者经历血小板减少症(其中10％为3级，并且其中8％为4级)(例如，参见Darzalex(达雷木单抗)处方信息。Horsham,Pennsylvania:Janssen Biotech,Inc.2018；以及评论文章Costello(2017)Ther.Adv.Hematol.8(1):28–37)。此外，治疗性单克隆抗体的静脉内施用可导致严重输注相关反应(IRR)。常见的IRR包括但不限于鼻塞、咳嗽、过敏性鼻炎、喉咙刺激、呼吸困难、寒战、恶心、缺氧、高血压等(Usmani等人(2016)Blood 128(1):37-44)。使用达雷木单抗，48％的患者在第一剂量治疗时经历IRR(Usmani等人(2016)Blood 128(1):37-44)，其中3％是严重的(Darzalex(达雷木单抗)处方信息。Horsham,Pennsylvania:JanssenBiotech,Inc 2018)。类似地，在接受伊沙妥昔单抗治疗的患者中有40.4％的患者报告了IRR，其中4.6％报告为严重(Dimopoulos等人(2018)Blood 132:(增刊1)ASH摘要155/口头报告)。因此，必须仔细监测用伊沙妥昔单抗或达雷木单抗治疗的患者的这些威胁生命的和其它的严重副作用。

AB79是完全人免疫球蛋白IgG1单克隆抗体，其以高亲和力(Kd＝6.1x10^-10M)特异性地结合至CD38。AB79经由抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和补体依赖性细胞毒性(CDC)通过细胞耗减抑制表达CD38的肿瘤细胞的生长。AB79还降低从健康受试者和系统性红斑狼疮(SLE)患者分离的血液中浆细胞和成浆细胞的水平(PCT申请号PCT/US2017/042128)。在健康食蟹猴中，每种细胞类型的耗减效率与CD38表达水平和AB79剂量水平呈正相关(PCT申请号PCT/US2017/042128)。此外，AB79在类风湿性关节炎的猴模型中显示出抗炎性和疾病改善活性(美国专利号US 8,362,211)。

鉴于临床上许多CD38抗体都结合RBC并且因此不适合皮下施用并具有危险的副作用，因此本领域仍然需要更安全、更方便且更有效地治疗其中指示与CD38结合的疾病(如自身免疫性疾病和血液学形式的癌症)的皮下抗体制剂。

发明内容

本文提供了用于治疗其中指示与CD38结合的疾病(例如自身免疫性疾病和血液癌症)的方法，所述方法包括皮下施用分离的抗CD38抗体。

在一方面，本发明提供了一种用于治疗受试者的其中指示与CD38结合的疾病的方法，所述方法包括以下步骤：向患有其中指示与CD38结合的疾病的受试者皮下施用治疗有效量的足以治疗所述疾病的分离的人抗CD38抗体，其中所述抗CD38抗体包含可变重(VH)链区，所述可变重链区包含具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的CDR3或那些序列的具有至多三个氨基酸变化的变体；和可变轻(VL)链区，所述可变轻链区包含具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的CDR3或那些序列的具有至多三个氨基酸变化的变体，并且其中以45至1,800毫克的剂量施用所述抗CD38抗体。

在另一方面，本发明提供了一种用于治疗受试者的其中指示与CD38结合的疾病的方法，所述方法包括以下步骤：向患有其中指示与CD38结合的疾病的受试者皮下施用治疗有效量的足以治疗所述疾病的分离的人抗CD38抗体，其中所述抗CD38抗体包含VH链区，所述VH链区包含具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的CDR3或那些序列的具有至多三个氨基酸取代的变体；和VL链区，所述VL链区包含具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的CDR3或那些序列的具有至多三个氨基酸取代的变体，其中以45至1,800毫克的剂量施用所述抗CD38抗体。

在另一方面，本发明提供了一种用于治疗受试者的其中指示与CD38结合的疾病的方法，所述方法包括以下步骤：向患有其中指示与CD38结合的疾病的受试者皮下施用治疗有效量的足以治疗所述疾病的分离的人抗CD38抗体，其中所述抗CD38抗体包含VH链区，所述VH链区包含具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的CDR3；和VL链区，所述VL链区包含具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的CDR3，其中以45至1,800毫克的剂量施用所述抗CD38抗体。

在一方面，如本文所述的抗CD38抗体不会引起溶血性贫血或血小板减少症。

在一方面，施用所述抗CD38抗体治疗使得3级或4级的选自由以下组成的组的一种或多种治疗相关不良事件(TRAE)或治疗突发不良事件(TEAE)的发生率低于60％、低于50％、低于40％、低于30％、低于25％、低于20％、低于15％、低于10％、低于5％、低于4％、低于3％、低于2％或低于1％：贫血、溶血性贫血、血小板减少症、疲劳、输注相关反应(IRR)、白细胞减少症和淋巴细胞减少症。TEAE是不管原因如何在最后一个剂量的药物后至多约30天观察到或诊断出的不良事件。TEAE可具有与疾病或与抗CD38抗体无关的治疗相关的任何潜在原因，或者它可与抗CD38抗体特异性相关。适当地，施用所述抗CD38抗体可使得3级或4级的选自由以下组成的组的一种或多种治疗突发不良事件(TEAE)的发生率低于30％：贫血、溶血性贫血、血小板减少症、疲劳、输注相关反应(IRR)、白细胞减少症和淋巴细胞减少症。

在一方面，施用所述抗CD38抗体治疗使得3级或4级的选自由以下组成的组的一种或多种治疗相关不良事件(TRAE)的发生率低于60％、低于50％、低于40％、低于30％、低于25％、低于20％、低于15％、低于10％、低于5％、低于4％、低于3％、低于2％或低于1％：贫血、溶血性贫血、血小板减少症、疲劳、输注相关反应(IRR)、白细胞减少症和淋巴细胞减少症。TRAE是治疗医师认为治疗中使用的药物与不良事件之间存在可能的因果关系的不良事件。因此认为TRAE与抗CD38抗体特异性相关。适当地，施用所述抗CD38抗体可使得3级或4级的选自由以下组成的组的一种或多种TRAE的发生率低于30％：贫血、溶血性贫血、血小板减少症、疲劳、输注相关反应(IRR)、白细胞减少症和淋巴细胞减少症。

在一方面，施用所述抗CD38抗体治疗导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的RBC耗减。

在一方面，施用所述抗CD38抗体治疗导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的血小板耗减。

在一方面，所述疾病是自身免疫性疾病或癌症。

在一方面，所述自身免疫性疾病选自由以下组成的组：系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)、炎症性肠病(IBD)、溃疡性结肠炎(UC)、系统性轻链淀粉样变性和移植物抗宿主病。

在一方面，所述血液癌症选自由以下组成的组：多发性骨髓瘤、慢性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、浆细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、B细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤。

在一方面，所述血液癌症是多发性骨髓瘤。

在另一方面，所述自身免疫性疾病是系统性轻链淀粉样变性。

在一方面，所述VH链区包含与SEQ ID NO:9具有至少80％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:10具有至少80％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链区可包含与SEQ ID NO:9具有至少85％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:10具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链区可包含与SEQ ID NO:9具有至少90％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ IDNO:10具有至少90％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链区可包含与SEQ ID NO:9具有至少95％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:10具有至少95％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链区可包含与SEQ ID NO:9具有至少97％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:10具有至少97％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链区可包含与SEQ ID NO:9具有至少99％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:10具有至少99％序列同一性的氨基酸序列。

适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:9具有至少80％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:10具有至少80％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQID NO:9具有至少85％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:10具有至少85％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:9具有至少90％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:10具有至少90％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQID NO:9具有至少95％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:10具有至少95％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:9具有至少97％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:10具有至少97％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQID NO:9具有至少99％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:10具有至少99％序列同一性。

在一方面，所述VH链区具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列或其具有至多三个氨基酸取代的变体，并且所述VL链区具有SEQ ID NO:10的氨基酸序列或其具有至多三个氨基酸取代的变体。

在一方面，所述VH链区具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列，并且所述VL链区具有SEQID NO:10的氨基酸序列。

在一方面，所述VH链区包含与SEQ ID NO:11具有至少80％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:12具有至少80％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链可包含与SEQ ID NO:11具有至少85％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:12具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链可包含与SEQ ID NO:11具有至少90％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:12具有至少90％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链可包含与SEQ ID NO:11具有至少95％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:12具有至少95％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链可包含与SEQ ID NO:11具有至少97％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:12具有至少97％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链可包含与SEQ ID NO:11具有至少99％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:12具有至少99％序列同一性的氨基酸序列。

适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:11具有至少80％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:12具有至少80％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQID NO:11具有至少85％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:12具有至少85％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:11具有至少90％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:12具有至少90％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQID NO:11具有至少95％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:12具有至少95％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:11具有至少97％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:12具有至少97％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQID NO:11具有至少99％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:12具有至少99％序列同一性。

在一方面，所述抗CD38抗体包含SEQ ID NO:11的重链氨基酸序列或其具有至多三个氨基酸取代的变体和SEQ ID NO:12的轻链氨基酸序列或其具有至多三个氨基酸取代的变体。

在一方面，所述抗CD38抗体包含SEQ ID NO:11的重链氨基酸序列和SEQ ID NO:12的轻链氨基酸序列。

在一方面，所述治疗有效量是45至1,800毫克的剂量。适当地，所述治疗有效量可以是45至1,200毫克的剂量。适当地，所述治疗有效量可以是45至600毫克的剂量。适当地，所述治疗有效量可以是45至135毫克的剂量。适当地，所述治疗有效量可以是135至1,800毫克的剂量。适当地，所述治疗有效量可以是135至1,200毫克的剂量。适当地，所述治疗有效量可以是135至600毫克的剂量。适当地，所述治疗有效量可以是600至1,800毫克的剂量。适当地，所述治疗有效量可以是600至1,200毫克的剂量。适当地，所述治疗有效量可以是1,200至1,800毫克的剂量。

在一方面，以药学上可接受的组合物的形式施用所述人抗CD38抗体。

在另一方面，本发明提供了一种用于治疗受试者的血液癌症的方法，所述方法包括以下步骤：向患有血液癌症的受试者皮下施用治疗有效量的足以治疗所述血液癌症的分离的人抗CD38抗体，其中所述抗CD38抗体包含VH链区，所述VH链区包含具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的CDR3或那些序列的具有至多三个氨基酸变化的变体；和VL链区，所述VL链区包含具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ IDNO:8的氨基酸序列的CDR3或那些序列的具有至多三个氨基酸变化的变体，并且其中以45至1,800毫克的剂量施用所述抗体。

在另一方面，本发明提供了一种用于治疗受试者的血液癌症的方法，所述方法包括以下步骤：向患有血液癌症的受试者皮下施用治疗有效量的足以治疗所述血液癌症的分离的人抗CD38抗体，其中所述抗CD38抗体包含VH链区，所述VH链区包含具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的CDR3或那些序列的具有至多三个氨基酸取代的变体；和VL链区，所述VL链区包含具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ IDNO:8的氨基酸序列的CDR3或那些序列的具有至多三个氨基酸变化的变体，其中以45至1,800毫克的剂量施用所述抗CD38抗体。

在另一方面，本发明提供了一种用于治疗受试者的血液癌症的方法，所述方法包括以下步骤：向患有血液癌症的受试者皮下施用治疗有效量的足以治疗所述血液癌症的分离的人抗CD38抗体，其中所述抗CD38抗体包含VH链区，所述VH链区包含具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的CDR3；和VL链区，所述VL链区包含具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ IDNO:7的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的CDR3，其中以45至1,800毫克的剂量施用所述抗CD38抗体。

在一方面，所述抗CD38抗体不会引起溶血性贫血或血小板减少症。

在一方面，施用所述抗CD38抗体使得3级或4级的选自由以下组成的组的一种或多种治疗相关不良事件(TRAE)或TEAE的发生率低于60％、低于50％、低于40％、低于30％、低于25％、低于20％、低于15％、低于10％、低于5％、低于4％、低于3％、低于3％或低于1％：贫血(包括溶血性贫血)、血小板减少症、疲劳、输注相关反应(IRR)、白细胞减少症和淋巴细胞减少症。适当地，施用所述抗CD38抗体可使得3级或4级的选自由以下组成的组的一种或多种治疗相关不良事件或TEAE的发生率低于30％：贫血、溶血性贫血、血小板减少症、疲劳、输注相关反应(IRR)、白细胞减少症和淋巴细胞减少症。

在一方面，施用所述抗CD38抗体导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的RBC耗减。

在一方面，施用所述抗CD38抗体导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的血小板耗减。

在一方面，所述血液癌症是多发性骨髓瘤。

在一方面，所述VH链区具有SEQ ID NO:11的氨基酸序列或其具有至多三个氨基酸取代的变体，并且所述VL链区具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列或其具有至多三个氨基酸取代的变体。

在一方面，以药学上可接受的组合物的形式施用所述人抗CD38抗体。适当地，所述药学上可接受的组合物可适合于皮下施用。

在另一方面，本发明提供了一种包含分离的抗体的单位剂型，所述分离的抗体包含与SEQ ID NO:9具有至少80％同一性的重链可变区氨基酸序列和与SEQ ID NO:10具有至少80％序列同一性的轻链可变区氨基酸序列，其中所述分离的抗体结合至CD38，其中所述单位剂型被配制用于以45至1,800毫克的剂量皮下施用所述抗体。适当地，所述VH链区可包含与SEQ ID NO:9具有至少85％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ IDNO:10具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链区可包含与SEQ ID NO:9具有至少90％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:10具有至少90％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链区可包含与SEQ ID NO:9具有至少95％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:10具有至少95％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链区可包含与SEQ ID NO:9具有至少97％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:10具有至少97％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链区可包含与SEQ ID NO:9具有至少99％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:10具有至少99％序列同一性的氨基酸序列。

适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:9具有至少85％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:10具有至少85％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQID NO:9具有至少85％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:10具有至少85％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:9具有至少90％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:10具有至少90％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQID NO:9具有至少95％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:10具有至少95％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:9具有至少97％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:10具有至少97％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQID NO:9具有至少99％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:10具有至少99％序列同一性。

适当地，本发明可提供一种包含分离的抗体的单位剂型，所述分离的抗体包含SEQID NO:9的重链可变区氨基酸序列或其具有至多三个氨基酸取代的变体和SEQ ID NO:10的轻链可变区氨基酸序列或其具有至多三个氨基酸取代的变体，其中所述分离的抗体结合至CD38，其中所述单位剂型被配制用于以45至1,800毫克的剂量皮下施用所述抗体。

在另一方面，本发明提供了一种包含分离的抗体的单位剂型，所述分离的抗体包含SEQ ID NO:9的重链可变区氨基酸序列和SEQ ID NO:10的轻链可变区氨基酸序列，其中所述分离的抗体结合至CD38并且不与人红细胞显著结合，其中所述单位剂型被配制用于以45至1,800毫克的剂量皮下施用所述抗体。

在一方面，所述重链包含与SEQ ID NO:11具有至少80％序列同一性的氨基酸序列，并且所述轻链包含与SEQ ID NO:12具有至少80％同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链可包含与SEQ ID NO:11具有至少85％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:12具有至少85％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链可包含与SEQ IDNO:11具有至少90％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:12具有至少90％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链可包含与SEQ ID NO:11具有至少95％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:12具有至少95％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链可包含与SEQ ID NO:11具有至少97％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:12具有至少97％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链可包含与SEQ ID NO:11具有至少99％序列同一性的氨基酸序列，并且所述VL链区包含与SEQ ID NO:12具有至少99％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:11具有至少80％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ IDNO:12具有至少80％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:11具有至少85％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:12具有至少85％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:11具有至少90％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQID NO:12具有至少90％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:11具有至少95％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:12具有至少95％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:11具有至少97％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:12具有至少97％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的剩余部分可与SEQ ID NO:11具有至少99％序列同一性，并且所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分与SEQ ID NO:12具有至少99％序列同一性。

适当地，所述重链可包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列或其具有至多三个氨基酸取代的变体，并且所述轻链可包含具有至多三个氨基酸取代的SEQ ID NO:12的氨基酸序列。

在一方面，所述重链可包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列，并且所述轻链可包含SEQID NO:12的氨基酸序列。

在一方面，所述单位剂型被配制用于在选自由以下组成的组的血液癌症的治疗中皮下施用所述抗体：多发性骨髓瘤、慢性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、浆细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、B细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤。

在一方面，所述血液癌症是多发性骨髓瘤。

在一方面，所述抗CD38抗体导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的RBC耗减。

在一方面，所述抗CD38抗体导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的血小板耗减。

在一方面，提供了一种用于疗法中的人抗CD38抗体，其中所述抗体在施用后不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减。适当地，所述人抗CD38抗体可皮下施用。适当地，可以45至1,800毫克的剂量施用所述抗体。

在一方面，提供了一种用于疗法中的人抗CD38抗体，其中所述抗体在施用后不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减，并且所述人抗CD38抗体以45至1,800毫克的剂量皮下施用。适当地，在施用后不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减的人抗CD38抗体可以是如本文所定义的抗CD38抗体。

在一方面，提供了一种包含分离的抗体的单位剂型，所述分离的抗体在施用后不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减，其中所述分离的抗体结合至CD38并且不结合至人红细胞，并且所述单位剂型被配制用于以45至1,800毫克的剂量皮下施用所述抗体。

在一方面，提供了一种用于疗法中的如本文所定义的人抗CD38抗体，其中所述人抗CD38抗体被配制用于皮下施用。适当地，皮下施用所述人抗CD38抗体。

在一方面，提供了一种用于治疗其中指示与CD38结合的疾病的如本文所定义的人抗CD38抗体，其中所述人抗CD38抗体被配制用于皮下施用。适当地，皮下施用所述人抗CD38抗体。

在许多方面，如本文所述的施用的抗CD38抗体的剂量是每周一次剂量。

适当地，可以45至1,800毫克抗体范围内的剂量施用所述人抗CD38抗体。适当地，所述人抗CD38抗体可被配制用于皮下施用。适当地，所述人抗CD38抗体可被配制用于皮下施用，并以45至1,800毫克抗体范围内的剂量施用。

在一方面，提供了一种用于治疗癌症的如本文所定义的人抗CD38抗体。适当地，所述癌症可以是血液癌症。

在一方面，提供了一种用于治疗血液癌症的如本文所定义的人抗CD38抗体，其中所述人抗CD38抗体被配制用于皮下施用。适当地，所述人抗CD38抗体可皮下施用。

在一方面，提供了一种用于治疗血液癌症的如本文所定义的人抗CD38抗体，其中所述人抗CD38抗体被配制用于皮下施用，并且以45至1,800毫克抗体范围内的剂量施用所述人抗CD38抗体。适当地，所述人抗CD38抗体可皮下施用。

适当地，所述血液癌症可以是多发性骨髓瘤、慢性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、浆细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、B细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤。适当地，所述血液癌症可以是多发性骨髓瘤。

在一方面，提供了一种用于治疗自身免疫性疾病的如本文所定义的人抗CD38抗体。

在一方面，提供了一种用于治疗自身免疫性疾病的如本文所定义的人抗CD38抗体，其中所述人抗CD38抗体被配制用于皮下施用。适当地，所述人抗CD38抗体可皮下施用。

适当地，所述自身免疫性疾病可以是系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)、炎症性肠病(IBD)、溃疡性结肠炎、系统性轻链淀粉样变性或移植物抗宿主病。

在一方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含如本文所定义的分离的人抗CD38抗体。

在一方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含根据本发明的单位剂型。

在一方面，提供了一种用于疗法中的根据本发明的药物组合物。

在一方面，提供了一种用于治疗其中指示与CD38结合的疾病的根据本发明的药物组合物。

在一方面，提供了一种用于治疗自身免疫性疾病的根据本发明的药物组合物。适当地，所述自身免疫性疾病可以是系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)、炎症性肠病(IBD)、溃疡性结肠炎(UC)、系统性轻链淀粉样变性或移植物抗宿主病。适当地，所述自身免疫性疾病可以是系统性红斑狼疮(SLE)。适当地，所述自身免疫性疾病可以是类风湿性关节炎(RA)。适当地，所述自身免疫性疾病可以是炎症性肠病(IBD)。适当地，所述自身免疫性疾病可以是溃疡性结肠炎(UC)。适当地，所述自身免疫性疾病可以是移植物抗宿主病。

在另一方面，提供了一种用于治疗癌症的根据本发明的药物组合物。适当地，所述癌症可以是血液癌症。适当地，所述血液癌症可以是多发性骨髓瘤、慢性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、浆细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、B细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤。适当地，所述血液癌症可以是多发性骨髓瘤。适当地，所述血液癌症可以是慢性成淋巴细胞性白血病。适当地，所述血液癌症可以是慢性淋巴细胞性白血病。适当地，所述血液癌症可以是浆细胞白血病。适当地，所述血液癌症可以是急性骨髓性白血病。适当地，所述血液癌症可以是慢性骨髓性白血病。适当地，所述血液癌症可以是B细胞淋巴瘤。适当地，所述血液癌症可以是伯基特淋巴瘤。

在一方面，提供了如本文所定义的分离的人抗CD38抗体用于制造用于治疗疾病的药物的用途。

在另一方面，提供了根据本发明的单位剂型用于制造用于治疗疾病的药物的用途。

适当地，所述疾病可以是指示与CD38结合的疾病。

适当地，所述疾病可以是自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)、炎症性肠病(IBD)、溃疡性结肠炎(UC)、系统性轻链淀粉样变性或移植物抗宿主病。

适当地，所述疾病可以是癌症。适当地，所述癌症可以是血液癌症，如多发性骨髓瘤、慢性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、浆细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、B细胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤。

适当地，所述药物可被配制用于皮下施用。

适当地，所述药物可被配制为提供45至1,800毫克抗体的剂量。

适当地，所述药物可被配制用于皮下施用并且以45至1,800毫克抗体的剂量施用。

参照以下描述和附图，这些实施方案和其它实施方案、特征以及潜在的优点将变得明显。

附图说明

通过参考下文描述的附图，可更好地理解本发明的目标和特征，其中

图1示出PD研究中用于流式细胞术分析的抗体表。

图2示出SC剂量组的PK数据。用经过验证的定性电化学发光(ECL)测定检测抗药物抗体(ADA)。当其达到约1000(约log(7))的特定阈值滴度时，发病率随时间推移增加并影响PK。

图3示出食蟹猴(cyno)PK数据和AB79的模型。图A和B示出与8例猴研究的原始PK数据，图A第一给药后的前7天，和图B整个观察期。剂量用颜色编码，并且省略了SC数据(图2)。图C描绘最终的PK模型结构，包括用蓝色框标记的靶标介导的药物处置(TMDD)。V_C表示观察到AB79浓度的中央区室的体积(用Conc标记)。V_P表示外周室的体积。R_总计表示抗体结合和未结合的受体CD38的区室。K_SYN和K_DEG表示受体的产生和降解速率常数，并且K_INT表示内化速率常数(复合消除速率常数)。K_SS是稳态常数，定义为K_SS＝(K_OFF+K_INT)/K_ON，其中K_OFF是解离速率常数，并且K_ON是结合速率常数。图D-F示出没有TMDD分量的线性2室模型预测(中值，95％预测间隔)以及最低3个剂量的观察数据(研究8)的叠加图。注意图D、E与F之间的不同时间尺度。

图4示出研究7中给药后两天AB79治疗对RBC的影响，以及给药后第一天的总淋巴细胞计数。

图5示出13周毒理学研究中的ADA效应。评价参考最终群体PK模型(图1，表4)。呈现了以下按剂量和施用途径分层的拟合优度(GOF)图(Keizer等人(2013)CPTPharmacometrics Syst.Pharmacol.2:e50)：(1)条件性加权残值(CWRES)对时间；(2)观察到的浓度对群体模型预测；(3)CWRES对群体模型预测；以及(4)观察到的浓度对个体模型预测。

图6示出按剂量和施用途径(IV-红色，SC-蓝色)分层的最终群体PK模型的GOF图。

图7示出人和猴NK细胞、B细胞和T细胞表面上CD38表达的比较。将流式细胞术测量值标准化，并且信号以等效可溶性荧光(MOEF)分子报告。人和猴血液淋巴细胞结合相似水平的AB79。通过流式细胞术评价猴NK细胞(CD3-，CD159a+)、B细胞(CD3-，CD20+)和T细胞(CD3+)以及人NK细胞(CD3-，CD16/CD56+)、B细胞(CD3-，CD19+)和T细胞(CD3+)上CD38表达水平的直接比较。使用利用Rainbow珠粒(Spherotech；Lake Forest,IL)生成的标准曲线，将每个细胞群体的AB79染色的中值荧光强度(MFI)转换为单位MOEF。所示的数据来自每种物种的3个个体，并且示出每种细胞类型的MOEF±SD。血液淋巴细胞之间的CD38表达存在差异，其中NK细胞>B细胞>T细胞上的AB79结合(MOEF)水平更高。在来自猴的血细胞中，AB79结合的模式相似，但是AB79结合/CD38表达的水平较低。

图8示出安慰剂处理的动物的T细胞、B细胞和NK细胞计数数据的个体间和个体内变异性。

图9示出按研究(上排)或性别(下排)分层的给药前NK细胞、B细胞和T细胞计数(细胞/μL)。

图10示出AB79依赖性NK细胞、B细胞和T细胞耗减。所呈现的图集中于在用第一剂量的AB79治疗后的前7天内发生的变化。因此，有可能汇集来自使用每周一次或每隔一周一次的给药时间表的单剂量和多剂量研究的数据。图A-C分别示出个体最小细胞计数(即最大PD效应)、第一给药后7天的个体细胞计数以及NK细胞的平均每剂量细胞耗减分布图和PK-PD模型结构。图E-F示出关于B细胞的相同信息，并且图G-I示出关于T细胞的相同信息。

图11示出AB79的模拟的人PK和NK细胞、B细胞和T细胞耗减分布。基于比例缩放的猴PK和PK-PD模型，模拟了5个单次IV和SC剂量PK和细胞耗减分布(0.0003至1mg/kg)。左图示出IV施用后的数据，并且右图示出SC施用后的数据。图的第一行显示PK分布。水平虚线指示0.05μg/mL的定量下限(LLOQ)。最低剂量的PK完全被噪声叠加，并且只有在0.03mg/kg的剂量下PK才达到LLOQ以上的水平。

图12示出在健康志愿者中的AB79单次上升剂量研究的计划(毒性研究)。74位受试者中的总共6个I.V.群组和4个S.C.群组随机分配并接受单剂量的AB79。在每个群组后，在剂量递增之前检查详尽盲法安全性、PK和PD数据。终止标准包括耗减靶细胞以避免对健康志愿者的潜在免疫抑制。在给药后对每个受试者进行92天的随访。

图13示出按施用途径(IV–红色；SC–蓝色)分层的PK-PD模型的GOF图。A)NK细胞。B)B细胞。C)T细胞。

图14示出AB79通过抗体依赖性细胞毒性(ADCC)和补体依赖性细胞毒性(CDC)介导细胞耗减。人B谱系细胞系中的CD38受体数量和对ADCC和CDC的敏感性的比较。CD38表达增加的细胞系对ADCC更敏感。在不表达CD38的人成淋巴细胞细胞系(MV-4-11)或用CD157(与CD38密切相关的分子)转染的中国仓鼠卵巢细胞系中，未观察到ADCC(数据未示出)。EC₅₀，50％有效浓度；nd，未进行；SD，标准偏差。

图15示出AB79介导猴淋巴细胞的耗减。如使用流式细胞术用Flow-Count^TM荧光球(Beckman-Coulter)所定量，在单次IV剂量的AB79后，AB79剂量依赖性地耗减雌性食蟹猴(n＝4只/剂量组)中的血液NK细胞>B细胞>T细胞。在预处理(第-1周)、第1天：给药前、给药后15分钟、30分钟、1小时、4小时、8小时、24小时、48小时、96小时和168小时、第10天、第15天、第22天、第29天、第36天、第43天、第50天和第57天收集样品。为清楚起见，仅示出2周的数据。在每个时间点计算平均细胞数值，并用于计算基线计数的％。

图16示出，通过AB79治疗减轻人破伤风类毒素(TTd)回忆应答。将CB17/SCID小鼠用抗asialo GM1处理以消除NK细胞，然后给予25x10⁶个人外周血淋巴细胞。在7-10天后，收集血清样品以评价人Ig，Ig水平是随机分配的基础。向小鼠给与TTd以诱导回忆应答，并每周用所示抗体处理两次持续10天。最后一次处理后3天，收集血清并分析抗TTd抗体。AB79剂量依赖性地抑制TTd回忆应答。AB79与Rituxan(Rtx)(同种型(Iso)、Rtx和AB79(全部10mg/kg)使回忆应答降低至相似的程度。

图17示出AB79不诱导细胞因子诱导。与IgG1同种型对照PHA(阳性对照)在所有受试者中均增加细胞因子水平相比，AB79(可溶性)在24小时孵育后从4个不同受试者收集的PBMC中并未增加IL-6水平，从而表明细胞具有制造IL-6的能力。在刺激48小时的PBMC情况下以及测试IL-2、IL-4、IL-10、GM-CSF、IFNγ和TNFα时，观察到相似的结果(数据未示出)。

图18A示出图18B的干结合、湿结合和可溶性实验的设置(改编自Stebbings等人(2007)J.Immunol.179:3325-3331)。

图18B示出AB79不具有激动剂活性。当将AB79添加至溶液中的孔中时，其高度浓缩，并且使液体蒸发(干结合)对比使AB79结合至溶液中的孔(湿结合)或直接添加至PBMC(可溶性)。在24小时后在所测试的任何条件下，AB79均不刺激IL-6或IL-2、IL-4、IL-8、IL-10、GM-CSF、IFNγ或TNFα。IL-8由PBMC组成型产生，并且不会通过任何处理改变(数据未示出)。

图19示出AB79与食蟹猴CD45+淋巴细胞的结合的评价。AB79与未溶解的食蟹猴全血中CD45+淋巴细胞的结合。对CD45+淋巴细胞进行门控，然后评价AB79(黑色直方图)的结合或同种型对照(红色直方图)结合。如红色虚线右侧的细胞部分所示，在淋巴细胞的亚群上检测到AB79结合。几乎未观察到同种型对照与淋巴细胞的结合。

图20示出平均观察到的Cmax和给药前谷值(ng/ml)水平(周期1和周期2)。图20A示出Ab79 Cmax(ng/ml)，并且图20B示出Ab79浓度(ng/ml)。

图21示出皮下施用的Ab79以剂量依赖性方式降低了血液中成浆细胞的水平。

图22示出皮下施用的Ab79以剂量依赖性方式降低了骨髓抽吸物中成浆细胞的水平。

图23示出皮下施用的Ab79以剂量依赖性方式降低了骨髓抽吸物中浆细胞的水平。

图24示出单次SC施用AB79后健康受试者的外周血中NK细胞的水平。SC，皮下。

图25示出在单次注射安慰剂对照、0.1、0.3或0.6mg kg^-1的AB79SC后，来自健康受试者的外周血中成浆细胞、单核细胞、B细胞、T细胞和NK细胞的水平。——绝对单核细胞(细胞/μL)，……NK细胞(细胞/μL)，--总T细胞(细胞/μL)，----B细胞(细胞/μL)，——成浆细胞(细胞/μL)。居中的曲线表示中值。NK，自然杀伤(细胞)；SC，皮下。

图26示出AB79和达雷木单抗与人RBC的结合(个体供体中值荧光)。来自四名健康志愿者的外周血与生物素-链霉抗生物素蛋白-BV421 AB79(0、0.1、10、100μg/ml)或生物素-链霉抗生物素蛋白-BV421达雷木单抗(0、0.1、1、10、100μg/ml)一起在室温下在存在或不存在未标记的AB79(500μg/ml)或未标记的达雷木单抗(500μg/ml)的情况下在温和振荡器上孵育3小时。图例：

AB79-生物素-strep-BV421；

冷AB79和AB79-生物素-strep-BV421；

达雷木单抗-生物素-strep-BV421；

冷达雷木单抗和达雷木单抗-生物素-strep-BV421。

具体实施方式

本发明涉及通过皮下施用抗CD38抗体来治疗CD-38相关疾病的方法。

在患有活动性疾病的患者的脉管系统中，在RBC上表达的CD38分子比在骨髓瘤细胞上多大约36倍。因此，例如，在未结合的抗体能够进入骨髓并使骨髓瘤细胞上表达的CD38饱和之前，可能需要使CD38的脱靶表达饱和。这能够解释本领域中的强烈结合至RBC和血小板的其它抗CD38抗体(如达雷木单抗和伊沙妥昔单抗)需要高剂量全身施用来达到功效的原因。

AB79、达雷木单抗、伊沙妥昔单抗和MOR202是主要通过抗体依赖性细胞毒性(ADCC)杀死肿瘤的IgG1。这种机制需要效应细胞(如NK细胞)结合靶细胞上的抗体，并形成裂解突触来以集中方式分泌细胞毒性剂。这些效应细胞在血液中的频率比RBC和血小板的频率低几个数量级。例如，血液中RBC与NK细胞的比例是20,000:1。因此，达雷木单抗、伊沙妥昔单抗和MOR202的效应子活性从肿瘤转向，因为效应细胞主要被与RBC和血小板结合的那些抗CD-38抗体结合，从而阻止与肿瘤形成裂解突触，从而导致ADCC的低效率。

用结合至RBC和血小板的抗CD38抗体治疗患者可导致危及生命的副作用。例如，在一项研究中，用MOR202治疗复发性或难治性多发性骨髓瘤导致若干严重的治疗相关不良事件或TEAE(参见，例如，Raab等人(2015)Blood 126:3035)。任何等级的最常见的TEAE是贫血(15名患者，34％)、疲劳(14名患者，32％)、输注相关反应(IRR)和白细胞减少症(13名患者，各自30％)、淋巴细胞减少症和恶心(11名患者，各自25％)。28名患者报告≥3级TEAE(64％)；最常见的包括淋巴细胞减少症(8名患者，18％)、白细胞减少症(5名患者，11％)和高血压(4名患者，9％)。IRR主要在第一次输注期间出现；除一名患者(3级)外全部为1-2级。普遍报告感染(26名患者，59％)，但在大多数情况下不认为是治疗相关的。MOR202仅在临床上经由IV输注使用。

靶向CD38的其它Morphosys抗体是已知的(参见，例如，WO 2006/125640，其公开了四种人抗体：MOR03077、MOR03079、MOR03080和MOR03100，以及两种鼠类抗体：OKT10和IB4)。由于多种原因，这些现有技术的抗体不如根据本发明使用的抗体(例如AB79)。MOR03080结合至人CD38和食蟹猕猴CD38，但对人CD38的亲和力低(Biacore K_D＝27.5nm)。OKT10结合至人CD38和食蟹猕猴CD38，但对人CD38的亲和力低/中等(Biacore K_D＝8.28nm)。MOR03079以高亲和力(Biacore K_D＝2.4nm)结合至人CD38，但不结合至食蟹猴CD38。MOR03100和MOR03077以中等或低亲和力结合至人CD38(Biacore K_D分别＝10nm和56nm)。相比之下，根据本发明使用的抗体(例如AB79)结合至人和食蟹猴CD38，对人CD38的亲和力高(BiacoreK_D＝5.4nm)。此外，现有技术抗体具有较差的ADCC以及CDC活性。

更有效的ADCC的优点是能够以小体积注射形式递送抗CD38治疗剂。如果以100mg/mL的浓度配制根据本发明使用的抗体(例如AB79)，则对80kg骨髓瘤患者的有效剂量可作为<1.0mL的单次s.c.注射施用。相比之下，以可比较的形式递送至此患者体内的达雷木单抗或伊沙妥昔单抗的有效剂量(即，100mg/mL)将需要分别施用12.8mL或8-16mL。

抗CD38方法和单位剂量在本文中提供皮下施用治疗有效剂量的抗CD38抗体，从而提供出人意料的益处并防止施用高剂量全身性抗CD38抗体疗法的副作用、不便和费用。

本发明提供了向有需要的患者皮下施用治疗有效量的分离的抗CD38抗体以治疗其中指示与CD38结合的疾病(包括血液癌症)的方法和单位剂型。在一些实施方案中，用于皮下施用的抗体包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:9(或与其具有至少80％、85％、90％、95％、97％或99％序列同一性的序列)；和轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:10(或与其具有至少80％、85％、90％、95％、97％或99％序列同一性的序列)。当通过皮下施用进行施用时，本文提供的抗CD38抗体能够在治疗上有效。

本发明的抗CD38抗体的另一个优点是，与临床中的一些其它抗CD38抗体不同，本发明的抗CD38抗体(例如，AB79)能够结合至食蟹猴(cyno)CD38，从而为给药、毒性、功效等的临床前评价提供有用的动物模型。

本发明的抗CD38抗体的另一个优点是它们可用于筛选竞争结合至同一表位处的CD-38的其它抗体，并且可用于本发明的方法和单位剂量中。

除非在本文中另外定义，否则结合本发明使用的科学和技术术语应该具有本领域技术人员通常所理解的含义。术语的含义和范围应是清楚的。然而，如果存在任何隐含歧义，则本文中所提供的定义优先于任何字典或外来定义。另外，除非上下文另有要求，否则单数术语应包括复数并且复数术语应包括单数。除非另有说明，否则术语“或”包括“和/或”。此外，术语“包括(including)”、“包括(includes)”或“包括(included)”的使用不是限制性的。除非另外特定陈述，否则诸如“要素”和“组分”的术语涵盖构成一个单元的要素和组分以及构成一个以上子单元的要素和组分。

一般来说，结合本文中描述的细胞和组织培养、分子生物学、免疫学、微生物学、遗传学以及蛋白质和核酸化学和杂交使用的命名法以及其技术是本领域熟知并且常用的那些。除非另外指示，否则本发明的方法和技术通常根据本领域中熟知以及如本说明书整篇引用和论述的各种一般性和更特定参考文献中所述的常规方法来执行。酶促反应和纯化技术是根据制造商的说明书如本领域中通常所实现或如本文所述来进行。结合本文所述的分析化学、合成有机化学以及医学和药物化学使用的命名法以及它们的实验室程序和技术是本领域中熟知且常用的。标准技术用于化学合成、化学分析、药物制备、配制、递送以及患者的治疗。

所有标题和章节名称仅出于清楚和参考目的而使用，并且不应被视为以任何方式进行限制。例如，本领域技术人员将认识到根据本文描述的本发明的精神和范围适当地将来自不同标题和章节的本公开的各个方面进行组合的有用性。

为了更容易地理解本发明，下文定义了选定术语。

术语“人CD38”和“人CD38抗原”是指如本文所定义的SEQ ID NO:1的氨基酸序列或其功能性部分，如表位(表1)。通常，CD38具有短的胞质内尾部、跨膜结构域和细胞外结构域。术语“食蟹猴CD38”和“食蟹猴CD38抗原”是指SEQ ID NO:2的氨基酸序列，其与人CD38的氨基酸序列(表1)92％相同。CD38的同义词包括环状ADP核糖水解酶；环状ADP核糖-水解酶1；ADP核糖基环化酶；ADP-核糖基环化酶1；cADPr水解酶1；CD38-rs1；I-19；NIM-R5抗原；2'-磷酸-环状-ADP-核糖转移酶；2'-磷酸-ADP-核糖基环化酶；2'-磷酸-环状-ADP-核糖转移酶；2'-磷酸-ADP-核糖基环化酶；T10。

表1.人和食蟹猴CD38的氨基酸序列

术语“治疗有效量”和“治疗有效剂量”是指足以减轻或改善病症或其一种或多种症状的严重程度和/或持续时间；预防病症的进展；引起病症消退；预防与病症相关的一种或多种症状的复发、发展、发作或进展；或以达到所需治疗结果所需的剂量和时间段，增强或改善另一种疗法(例如，预防剂或治疗剂)的预防性或治疗性作用的疗法的量。治疗有效量可根据诸如个体的疾病状态、年龄、性别和体重以及药物在个体中引发所需应答的能力的因素而变化。治疗有效量的抗体是其中所述抗体或抗体部分的任何毒性或有害作用被治疗有益作用超过的量。用于肿瘤疗法的抗体的“治疗有效量”可通过其稳定疾病进展的能力来测量。化合物抑制癌症的能力可在预测在人肿瘤中的功效的动物模型系统中进行评价。

术语“患者”和“受试者”包括人和其它动物，特别是哺乳动物。因此，本文公开的组合物、剂量和方法适用于人和兽医疗法。在一个实施方案中，患者是哺乳动物，例如人。

术语“指示与CD38结合的疾病”是指其中结合配偶体(例如，本发明的抗CD38抗体)与CD38的结合提供预防性或治愈性作用(包括改善疾病的一种或多种症状)的疾病。此类结合可导致CD38的其它因子或结合配偶体的阻断、CD38的中和、ADCC、CDC、补体活化或某种其它预防或治疗疾病的机制。CD38的因子和结合配偶体包括针对CD38的自身抗体，所述自身抗体被本发明的抗CD38抗体阻断。这种结合可被指示为细胞或细胞亚群(例如，MM细胞)表达CD38的结果，通过其向受试者提供CD38的结合配偶体导致那些细胞(例如，经由溶血或细胞凋亡)的除去，例如裂解。相对于正常细胞或相对于其它细胞类型，在非疾病状态或疾病状态期间，CD38的这种表达可以是例如正常、过表达、表达不适当或是CD38活化的结果。

术语“血液癌症”是指血液形成组织的恶性赘生物，并且涵盖白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤。与异常CD38表达相关的疾患的非限制性实例包括但不限于多发性骨髓瘤(Jackson等人(1988)Clin.Exp.Immunol.72:351-356)；B细胞慢性淋巴细胞性白血病(B-CLL)(Dürig等人(2002)Leukemia 16:30-35；Morabito等人(2001)Leukemia Res.25:927-932；Marinov等人(1993)Neoplasma 40(6):355-358；和Jelinek等人(2001)Br.J.Haematol.115:854-861)；急性成淋巴细胞性白血病(Keyhani等人(1999)LeukemiaRes.24:153-159；和Marinov等人(1993)Neoplasma 40(6):355-358)；慢性骨髓性白血病(Marinov等人(1993)Neoplasma 40(6):355-358)；急性骨髓性白血病(Keyhani等人(1999)Leukemia Res.24:153-159)；慢性淋巴细胞性白血病(CLL)；慢性髓细胞性白血病或慢性骨髓性白血病(CML)；急性髓细胞性白血病或急性骨髓性白血病(AML)；急性淋巴细胞性白血病(ALL)；毛细胞白血病(HCL)；骨髓增生异常综合症(MDS)；以及这些白血病和其它血液疾病的所有亚型和阶段(例如，CML急变期(BP)、慢性期(CP)或加速期(AP))，这些都通过本领域技术人员众所周知的形态学、组织化学和免疫学技术进行定义。

术语“赘生物”和“赘生性疾患”是指与以正常控制的丧失为特征的细胞的增殖相关的疾患，所述正常控制的丧失导致一种或多种症状，包括不受调控的生长、分化不足、去分化、局部组织侵袭和转移。

术语“分离的抗体”是指基本上不含具有不同抗原特异性的其它抗体的抗体。例如，特异地结合至CD38的分离的抗体基本上不含特异地结合不同于CD38的抗原的抗体。然而，特异地结合至人CD38或食蟹猴CD38的表位、同种型或变体的分离的抗体可具有对其它相关抗原，例如来自其它物种(如CD38物种同系物)的相关抗原的交叉反应性。此外，分离的抗体可基本上不含其它细胞材料和/或化学品。

术语“红细胞”、“RBC”和“红细胞”是指骨髓来源的含血红蛋白的血细胞，所述血细胞将氧气运送至细胞和组织，并将二氧化碳运送回呼吸器官。RBC也称为红细胞(redcell)、红细胞(red blood corpuscle)、红细胞(haematid)和红系细胞。

关于特定抗体、蛋白质或肽与抗原、表位或其它化学种类的相互作用的术语“特异性结合”、“特异性地结合至”和“对……具有特异性”是指测量上不同于非特异性相互作用的结合。特异性结合可例如通过测定与对照分子结合相比的分子结合来测量，对照分子通常是不具有结合活性的类似结构的分子。例如，可通过与类似于靶标的对照分子竞争来测定特异性结合。本发明的抗CD38抗体特异性地结合CD38配体。术语“特异性结合”、“特异性地结合至”和“对……具有特异性”也表示相互作用取决于化学种类上特定结构(例如，抗原决定簇或表位)的存在；例如，抗体识别并结合至特定蛋白质结构，而不是一般的蛋白质。如果抗体对表位“A”具有特异性，则在含有标记的“A”和抗体的反应中，含有表位A(或游离、未标记的A)的分子的存在将减少与抗体结合的标记的A的量。特定抗原或表位的特异性结合可例如通过具有针对抗原或表位的KD为至少约10^-4M、至少约10^-5M、至少约10^-6M、至少约10^- ⁷M、至少约10^-8M、至少约10^-9M、至少约10^-10M、至少约10^-11M、至少约10^-12M或更大来展现，其中KD是指特定抗体-抗原相互作用的解离速率。通常，特异地结合抗原的抗体对于对照分子的KD为相对于所述抗原或表位的20、50、100、500、1000、5,000、10,000或更高倍数。此外，对特定抗原或抗原表位的特异性结合可例如由对于抗原或抗原表位的KA或Ka为对于对照物的至少20、50、100、500、1000、5,000、10,000或更高倍数的抗体展现，其中KA或Ka是指特定抗体-抗原相互作用的缔合速率。

术语“在一段时间内”是指任何时间段，例如，分钟、小时、天、月或年。例如，在一段时间内可指至少10分钟、至少15分钟、至少30分钟、至少60分钟、至少75分钟、至少90分钟、至少105分钟、至少120分钟、至少3小时、至少4小时、至少5小时、至少6小时、至少7小时、至少8小时、至少9小时、至少10小时、至少12小时、至少14小时、至少16小时、至少18小时、至少20小时、至少22小时、至少一天、至少两天、至少三天、至少4天、至少5天、至少6天、至少一周、至少一个月、至少一年或其间的任何时间间隔。换言之，来自组合物的抗体可在至少10分钟、至少15分钟、至少30分钟、至少60分钟、至少75分钟、至少90分钟、至少105分钟、至少120分钟、至少3小时、至少4小时、至少5小时、至少6小时、至少7小时、至少8小时、至少9小时、至少10小时、至少12小时、至少14小时、至少16小时、至少18小时、至少20小时、至少22小时、至少一天、至少两天、至少三天、至少4天、至少5天、至少6天、至少一周、至少一个月、至少一年或其间的任何时间间隔内被向其施用的个体吸收。

“基本上”包含组分的组合物是指所述组合物含有超过约80重量％的所述组分。适当地，所述组合物可包含超过约90重量％的所述组分。适当地，所述组合物可包含超过约95重量％的所述组分。适当地，所述组合物可包含超过约97重量％的所述组分。适当地，所述组合物可包含超过约98重量％的所述组分。适当地，所述组合物可包含超过约99重量％的所述组分。

术语“约”是指在数量、程度、体积、时间等方面接近的程度，其尺寸仅有至多达10％的最小变化。

术语“药学上可接受的载体”是指适合于向哺乳动物施用本发明的化合物的药学上可接受的材料、组合物或媒介物。所述载体包括液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或封装材料，其涉及将主题化合物从身体的一个器官或一部分携带或运输至身体的另一器官或另一部分。各载体在可与制剂的其它成分相容并且对患者无害的意义上必须是“可接受的”。在一个实施方案中，所述药学上可接受的载体适合于静脉内施用。在另一个实施方案中，所述药学上可接受的载体适合于局部注射。在另一个实施方案中，所述药学上可接受的载体适合于皮下施用。在另一个实施方案中，所述药学上可接受的载体适合于皮下注射。

术语“药物组合物”是指适合于施用至受试者和治疗疾病的制剂。当将本发明的抗CD38抗体作为药物施用于哺乳动物(例如人)时，它们可“按原样”施用或作为含有抗CD38抗体与药学上可接受的载体和/或其它赋形剂组合的药物组合物来施用。药物组合物可呈单位剂型的形式，用于以特定浓度、特定量或特定体积施用特定剂量的抗CD38抗体。提供了包含抗CD38抗体的药物组合物，单独或与预防剂、治疗剂和/或药学上可接受的载体组合。适当地，所述药物组合物可包含根据本发明的单位剂型，单独或与预防剂、治疗剂和/或药学上可接受的载体组合。适当地，所述药物组合物可包含如本文所述的人抗CD38抗体，单独或与预防剂、治疗剂和/或药学上可接受的载体组合。

传统抗体结构单元通常包含四聚体。每个四聚体通常由两对相同的多肽链组成，每一对具有一个“轻”链(通常具有约25kDa的分子量)和一个“重”链(通常具有约50-70kDa的分子量)。人轻链被分类为κ轻链和λ轻链。重链被分类为μ、δ、γ、α或ε，并且将所述抗体的同种型分别定义为IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。IgG具有若干亚类，包括但不限于IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。IgM具有亚类，包括但不限于IgM1和IgM2。因此，“同种型”是指由其恒定区的化学和抗原特性所定义的免疫球蛋白的任何亚类。已知的人免疫球蛋白同种型是IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1、IgA2、IgM1、IgM2、IgD和IgE。治疗性抗体也可包含同种型和/或亚类的杂合体。

每个可变重(VH)和可变轻(VL)区(长度约100至110个氨基酸)由按以下顺序从氨基末端至羧基末端排列的三个称为“互补决定区”(CDR)的高变区和四个框架区(FR)(长度约15-30个氨基酸)组成：FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4。“可变”是指CDR在抗体间的序列差异很大，并且由此确定独特的抗原结合位点。

高变区通常涵盖来自轻链可变区中的约氨基酸残基24-34(LCDR1；“L”表示轻链)、50-56(LCDR2)以及89-97(LCDR3)和重链可变区中的大致约31-35B(HCDR1；“H”表示重链)、50-65(HCDR2)以及95-102(HCDR3)的氨基酸残基(Kabat等人(1991)Sequences OfProteins Of Immunological Interest,第5版Public Health Service,NationalInstitutes of Health,Bethesda,MD)和/或形成轻链可变区中的高变环的那些残基(例如，残基26-32(LCDR1)、50-52(LCDR2)以及91-96(LCDR3))和形成重链可变区中的高变环的那些残基26-32(HCDR1)、53-55(HCDR2)以及96-101(HCDR3)(Chothia和Lesk(1987)J.Mol.Biol.196:901-917。

Kabat编号系统总体上在提及可变结构域(大约轻链可变区的1-107个残基和重链可变区的1-113个残基)中的残基时使用(例如，Kabat等人(1991)Sequences Of ProteinsOf Immunological Interest,第5版.Public Health Service,National Institutes ofHealth,Bethesda,MD)，其中EU编号系统用于Fc区。

术语“免疫球蛋白(Ig)结构域”是指具有明显不同的三级结构的免疫球蛋白区。除可变结构域外，每个重链和轻链还具有恒定结构域：恒定重(CH)结构域；恒定轻(CL)结构域和铰链结构域。在IgG抗体的情形中，每个IgG同种型均具有三个CH区。每个HC和LC的羧基-末端部分限定主要负责效应子功能的恒定区。因此，IgG的情形中的“CH”结构域如下：“CH1”是指根据如Kabat中的EU指数的位置118-220。“CH2”是指根据如Kabat中的EU指数的位置237-340，并且“CH3”是指根据如Kabat中的EU指数的位置341-447。

另一类型的重链的Ig结构域是铰链区。术语“铰链区”是指包含在抗体的第一恒定结构域与第二恒定结构域之间的氨基酸的柔性多肽。在结构上，IgG CH1结构域在EU位置220处结束，并且IgG CH2结构域在残基EU位置237处开始。因此，对于IgG来说，本文定义抗体铰链包括位置221(IgG1中的D221)至236(IgG1中的G236)，其中编号是根据如Kabat中的EU指数。在一些实施方案中，例如，在Fc区的情形中，包括低级铰链，所述“低级铰链”通常是指位置226或230。

术语“Fc区”是指多肽，所述多肽包含抗体的恒定区，排除第一恒定区免疫球蛋白结构域，并且在一些情况下下，排除铰链的部分。因此，Fc是指IgA、IgD和IgG的最后两个恒定区免疫球蛋白结构域，IgE和IgM的最后三个恒定区免疫球蛋白结构域，以及这些结构域的柔性铰链N-末端。对于IgA和IgM，Fc可包括J链。对于IgG来说，Fc结构域包含免疫球蛋白结构域Cγ2和Cγ3(Cγ2和Cγ3)以及在Cγ1(Cγ1)与Cγ2(Cγ2)之间的低级铰链区。虽然Fc区的边界可能变化，但通常所界定的人IgG重链Fc区包括其羧基末端的残基C226或P230，其中编号是根据如Kabat中的EU指数。在一些实施方案中，如以下更全面所述，对Fc区进行氨基酸修饰例如来改变与一个或多个FcγR受体或FcRn受体的结合。

CD38抗体

因此，本发明提供了特异性地结合人和灵长类CD38蛋白的分离的抗CD38抗体，所述抗体可用于皮下施用方法和单位剂型中。尤其可用于本发明中的是结合至人和灵长类CD38蛋白的抗体，所述灵长类尤其是用于临床测试中的灵长类，如食蟹猴(食蟹猴(Macacafascicularis)、食蟹猴(Crab eating macaque)，本文中也称为“cyno”)。

在一些实施方案中，本发明的抗CD38抗体在许多氨基酸残基处与CD38相互作用，包括基于人序列编号的K121、F135、Q139、D141、M142、E239、W241、S274、C275、K276、F284、V288、K289、N290、P291、E292、D293和S294。适当地，本发明的抗CD38抗体可在许多氨基酸残基处与CD38相互作用，包括基于人序列编号，SEQ ID NO:1的K121、F135、Q139、D141、M142、E239、W241、S274、C275、K276、F284、V288、K289、N290、P291、E292、D293和S294。适当地，本发明的抗CD38抗体在许多氨基酸残基处与CD38相互作用，包括SEQ ID NO:2的K121、F135、Q139、D141、M142、E239、W241、F274、C275、K276、F284、V288、K289、N290、P291、E292、D293和S294。应注意，这些残基在人和食蟹猴两者中是相同的，除了在食蟹猴中S274实际上是F274这些残基可表示特异性抗原结合肽占据区域内的免疫显性表位和/或残基。

在一些实施方案中，根据本发明使用的抗CD38抗体包含重链，所述重链包含以下CDR氨基酸序列：GFTFDDYG(SEQ ID NO:3；HCDR1 AB79)、ISWNGGKT(SEQ ID NO:4；HCDR2AB79)和ARGSLFHDSSGFYFGH(SEQ ID NO:5；HCDR3 AB79)，或那些序列的具有至多三个氨基酸变化的变体。在一些实施方案中，根据本发明使用的抗体包含轻链，所述轻链包含以下CDR氨基酸序列：SSNIGDNY(SEQ ID NO:6；LCDR1 AB79)、RDS(SEQ ID NO:7；LCDR2 AB79)和QSYDSSLSGS(SEQ ID NO:8；LCDR3 AB79)，或那些序列的具有至多三个氨基酸变化的变体。在一些实施方案中，根据本发明使用的抗体包含重链，所述重链包含以下CDR氨基酸序列：GFTFDDYG(SEQ ID NO:3；HCDR1 AB79)、ISWNGGKT(SEQ ID NO:4；HCDR2 AB79)和ARGSLFHDSSGFYFGH(SEQ ID NO:5；HCDR3 AB79)，或那些序列的具有至多三个氨基酸变化的变体；和轻链，所述轻链包含以下CDR氨基酸序列：SSNIGDNY(SEQ ID NO:6；LCDR1 AB79)、RDS(SEQ ID NO:7；LCDR2 AB79)和QSYDSSLSGS(SEQ ID NO:8；LCDR3 AB79)，或那些序列的具有至多三个氨基酸变化的变体。在一些实施方案中，所述抗CD38抗体包含重链，所述重链包含以下CDR氨基酸序列：GFTFDDYG(SEQ ID NO:3；HCDR1 AB79)、ISWNGGKT(SEQ ID NO:4；HCDR2 AB79)和ARGSLFHDSSGFYFGH(SEQ ID NO:5；HCDR3 AB79)。在一些实施方案中，所述抗体包含轻链，所述轻链包含以下CDR氨基酸序列：SSNIGDNY(SEQ ID NO:6；LCDR1 AB79)、RDS(SEQ ID NO:7；LCDR2 AB79)和QSYDSSLSGS(SEQ ID NO:8；LCDR3 AB79)。在一些实施方案中，所述抗体包含重链，所述重链包含以下CDR氨基酸序列：GFTFDDYG(SEQ ID NO:3；HCDR1AB79)、ISWNGGKT(SEQ ID NO:4；HCDR2 AB79)和ARGSLFHDSSGFYFGH(SEQ ID NO:5；HCDR3AB79)；和轻链，所述轻链包含以下CDR氨基酸序列：SSNIGDNY(SEQ ID NO:6；LCDR1 AB79)、RDS(SEQ ID NO:7；LCDR2 AB79)和QSYDSSLSGS(SEQ ID NO:8；LCDR3 AB79)。在一些实施方案中，所述抗体包含重链，所述重链包含与SEQ ID NO:9具有至少80％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的其余部分可与SEQ ID NO:9具有至少80％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的其余部分可与SEQ ID NO:9具有至少85％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ IDNO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的其余部分可与SEQ IDNO:9具有至少90％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的其余部分可与SEQ ID NO:9具有至少95％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的其余部分可与SEQ ID NO:9具有至少97％序列同一性。适当地，所述VH链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述序列的其余部分可与SEQ ID NO:9具有至少99％序列同一性。

在一些实施方案中，所述抗体包含重链，所述重链包含SEQ ID NO:9的可变重(VH)链氨基酸序列。

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFDDYGMSWVRQAPGKGLEWVSDISWNGGKTHYVDSVKGQFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGSLFHDSSGFYFGHWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLA(SEQ IDNO:9)。

在一些实施方案中，所述抗体包含轻链，所述轻链包含与SEQ ID NO:10具有至少80％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分可与SEQ ID NO:10具有至少80％序列同一性。适当地，所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分可与SEQ ID NO:10具有至少85％序列同一性。适当地，所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分可与SEQ ID NO:10具有至少90％序列同一性。适当地，所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分可与SEQ ID NO:10具有至少95％序列同一性。适当地，所述VL链可包含如SEQ IDNO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分可与SEQID NO:10具有至少97％序列同一性。适当地，所述VL链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述VL序列的其余部分可与SEQ ID NO:10具有至少99％序列同一性。

在一些实施方案中，所述抗体包含轻链，所述轻链包含SEQ ID NO:10的可变轻(VL)链氨基酸序列。

QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGDNYVSWYQQLPGTAPKLLIYRDSQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCQSYDSSLSGSVFGGGTKLTVLGQPKANPTVTLFPPSSEEL(SEQ ID NO:10)。

在一些实施方案中，所述抗体包含重链，所述重链包含如本文所述的SEQ ID NO:9的VH链氨基酸序列或其变体；和轻链，所述轻链包含如本文所述的SEQ ID NO:10的VL链氨基酸序列或其变体。

如本领域技术人员将理解的，可变重链和轻链可与人IgG恒定结构域序列(通常IgG1、IgG2或IgG4)连接。

在一些实施方案中，所述抗体包含重链(HC)，所述重链包含与SEQ ID NO:11具有至少80％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述重链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述重链的其余部分可与SEQ ID NO:11具有至少80％序列同一性。适当地，所述重链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述重链的其余部分可与SEQ ID NO:11具有至少85％序列同一性。适当地，所述重链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述重链的其余部分可与SEQ ID NO:11具有至少90％序列同一性。适当地，所述重链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述重链的其余部分可与SEQ ID NO:11具有至少95％序列同一性。适当地，所述重链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述重链的其余部分可与SEQ ID NO:11具有至少97％序列同一性。适当地，所述重链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQID NO:5所定义的CDR序列，并且所述重链的其余部分可与SEQ ID NO:11具有至少99％序列同一性。

在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:11的重链(HC)氨基酸序列。

EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFDDYGMSWVRQAPGKGLEWVSDISWNGGKTHYVDSVKGQFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGSLFHDSSGFYFGHWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:11)。

在一些实施方案中，所述抗体包含轻链(LC)，所述轻链包含与SEQ ID NO:12具有至少80％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述轻链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述轻链的其余部分可与SEQ ID NO:12具有至少80％序列同一性。适当地，所述轻链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述轻链的其余部分可与SEQ ID NO:12具有至少85％序列同一性。适当地，所述轻链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述轻链的其余部分可与SEQ ID NO:12具有至少90％序列同一性。适当地，所述轻链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述轻链的其余部分可与SEQ ID NO:12具有至少95％序列同一性。适当地，所述轻链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述轻链的其余部分可与SEQ ID NO:12具有至少97％序列同一性。适当地，所述轻链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQID NO:8所定义的CDR序列，并且所述轻链的其余部分可与SEQ ID NO:12具有至少99％序列同一性。

在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:12的轻链(LC)氨基酸序列。

QSVLTQPPSASGTPGQRVTISCSGSSSNIGDNYVSWYQQLPGTAPKLLIYRDSQRPSGVPDRFSGSKSGTSASLAISGLRSEDEADYYCQSYDSSLSGSVFGGGTKLTVLGQPKANPTVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADGSPVKAGVETTKPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS(SEQID NO:12)。

在一些实施方案中，所述抗体包含如本文所述的SEQ ID NO:11的HC氨基酸序列或其变体和如本文所述的SEQ ID NO:12的LC氨基酸序列或其变体。

本发明涵盖结合至人和食蟹猴CD38两者并且与至少80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的以下氨基酸残基相互作用的抗体：基于人编号，SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2的K121、F135、Q139、D141、M142、E239、W241、S274、C275、K276、F284、V288、K289、N290、P291、E292、D293和S294。适当地，所述抗体可与至少90％的这些氨基酸残基相互作用。适当地，所述抗体可与至少95％的这些氨基酸残基相互作用。适当地，所述抗体可与至少97％的这些氨基酸残基相互作用。适当地，所述抗体可与至少98％的这些氨基酸残基相互作用。适当地，所述抗体可与至少99％的这些氨基酸残基相互作用。适当地，所述抗体可与以下氨基酸中的至少14个(例如，至少15个或至少16个)相互作用：基于人编号，SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2的K121、F135、Q139、D141、M142、E239、W241、S274、C275、K276、F284、V288、K289、N290、P291、E292、D293和S294。

在一些实施方案中，所述抗体是全长抗体。本文中的“全长抗体”是指构成抗体的天然生物形式的结构，所述结构包括可变区和恒定区，包括如本文所概述的一种或多种修饰。

或者，所述抗体可以是各种结构，分别包括但不限于抗体片段、单克隆抗体、双特异性抗体、微型抗体、结构域抗体、合成抗体(本文中有时称为“抗体模拟物”)、嵌合抗体、人源化抗体、抗体融合物(本文中有时称为“抗体缀合物”)以及各自的片段。特异性抗体片段包括但不限于，(i)由VL、VH、CL和CH1结构域组成的Fab片段，(ii)由VH和CH1结构域组成的Fd片段，(iii)由单个抗体的VL和VH结构域组成的Fv片段，(iv)由单个可变区组成的dAb片段(Ward等人(1989)Nature 341:544-546)，(v)分离的CDR区，(vi)F(ab')2片段，其为包含两个连接的Fab片段的二价片段，(vii)单链Fv分子(scFv)，其中VH结构域和VL结构域通过肽接头连接，所述肽接头使两个结构域缔合以形成抗原结合位点(Bird等人(1988)Science242:423-426；Huston等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:5879-5883)，(viii)双特异性单链Fv(WO 03/11161)以及(ix)“双功能抗体”或“三功能抗体”，它们是通过基因融合构建的多价或多特异性片段(Tomlinson等人(2000)Methods Enzymol.326:461-479；WO94/13804；Holliger等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA90:6444-6448)。

适当地，所述抗体可以是Fab片段。适当地，所述抗体可以是Fv片段。适当地，所述抗体可以是Fd片段。适当地，所述抗体结构可以是分离的CDR区。适当地，所述抗体可以是F(ab’)2片段。适当地，所述抗体可以是scFv片段。

在一些实施方案中，所述抗体在施用后1天、2天、4天、8天、10天、15天、20天、25天和/或30天不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减。

术语“显著水平的细胞耗减”可涉及对受试者具有不利后果的水平的细胞耗减。

在一些实施方案中，所述抗体在施用后1天不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减。

在一些实施方案中，所述抗体在施用后2天不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减。

在一些实施方案中，所述抗体在施用后4天不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减。

在一些实施方案中，所述抗体在施用后8天不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减。

在一些实施方案中，所述抗体在施用后10天不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减。

在一些实施方案中，所述抗体在施用后15天不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减。

在一些实施方案中，所述抗体在施用后20天不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减。

在一些实施方案中，所述抗体在施用后25天不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减。

在一些实施方案中，所述抗体在施用后30天不会引起显著水平的红细胞耗减和/或血小板耗减。

适当地，在治疗后，根据本发明使用的抗体可导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的RBC耗减。适当地，在治疗后，根据本发明使用的抗体可导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的血小板耗减。

抗体修饰

本发明进一步提供了变体抗CD38抗体。也就是说，可对本发明的抗体做出许多修饰，包括但不限于CDR中的氨基酸修饰(亲和力成熟)、Fc区中的氨基酸修饰、糖化变体、其它类型的共价修饰等。

术语“变体”是指与亲本多肽不同的多肽。氨基酸变体可包括氨基酸的取代、插入和缺失。一般来说，变体可包括许多修饰，只要蛋白质的功能仍存在即可，如本文所述。也就是说，在例如利用AB79的CDR产生的氨基酸变体的情况下，所述抗体应当仍然特异地结合至人和食蟹猴CD38。术语“变体Fc区”是指与野生型或亲本Fc序列因至少一个氨基酸修饰而不同的Fc序列。Fc变体可指Fc多肽本身、包含Fc变异多肽的组合物、或氨基酸序列。如果例如利用Fc区产生氨基酸变体，则变体抗体应保持抗体的特定应用或适应症所需的功能。例如，可利用1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸取代，例如1-10、1-5、1-4、1-3和1-2个取代。如通常概述的那样，可在一个或多个位置进行适合的修饰，例如在美国专利申请序列号11/841,654；12/341,769；美国专利公布号2004013210；20050054832；20060024298；20060121032；20060235208；20070148170；和美国专利号6,737,056；7,670,600；和6,086,875中，所述专利全部明确地以引用的方式整体并入，特别是对于增加与Fc受体的结合的特定氨基酸取代。

适当地，变体维持亲本序列的功能，即，变体是功能性变体。适当地，包含变体序列的抗体维持亲本抗体的功能，即，包含变体序列的抗体能够结合人CD38。适当地，用变体治疗可导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的RBC耗减。适当地，用变体治疗可导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的血小板耗减。

可根据相似性(即，具有相似化学性质/功能的氨基酸残基)来考虑变体，优选地，根据序列同一性来表达变体。

序列比较可肉眼进行，或更通常地，借助于容易获得的序列比较程序进行。这些公开且可商购的计算机程序可计算两个或多个序列之间的序列同一性。

例如，可能需要在野生型或工程化蛋白质的Fc区中具有1至5个修饰，以及在Fv区中具有1至5个修饰。变体多肽序列将优选与亲本序列(例如，AB79的可变区、恒定区和/或重链和轻链序列)具有至少约80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性。适当地，变体可与亲本序列具有至少80％序列同一性。适当地，变体可与亲本序列具有至少85％序列同一性。适当地，变体可与亲本序列具有至少90％序列同一性。适当地，变体可与亲本序列具有至少92％序列同一性。适当地，变体可与亲本序列具有至少95％序列同一性。适当地，变体可与亲本序列具有至少97％序列同一性。适当地，变体可与亲本序列具有至少98％序列同一性。适当地，变体可与亲本序列具有至少99％序列同一性。

在一个实施方案中，在整个序列中确定序列同一性。在一个实施方案中，在与本文所述的序列比较的整个候选序列中确定序列同一性。

术语“氨基酸取代”是指亲本多肽序列中特定位置的氨基酸被另一种氨基酸置换。例如，取代S100A是指位置100的丝氨酸被丙氨酸置换的变体多肽。适当地，氨基酸取代可以是保守氨基酸取代。适当地，变体可包含一个或多个，例如两个或三个保守氨基酸取代。具有相似生物化学性质的氨基酸可被定义为可经由保守取代被取代的氨基酸。

除非本文通过参考具体的单个氨基酸另外明确指出，否则可使用如下所述的保守取代来取代氨基酸。脂族极性不带电荷的氨基酸可以是半胱氨酸、丝氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺或谷氨酰胺残基。脂族极性带电荷的氨基酸可以是天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸或精氨酸残基。芳香族氨基酸可以是组氨酸、苯丙氨酸、色氨酸或酪氨酸残基。可例如根据下表2进行保守取代。第二列中相同区块中的氨基酸并且优选第三列中同一行中的氨基酸可彼此进行取代：

表2.保守性取代

术语“氨基酸插入”是指在亲本多肽序列中的特定位置添加氨基酸。

术语“氨基酸缺失”是指亲本多肽序列中特定位置的氨基酸的除去。

术语“亲本抗体”和“前体抗体”是指未经修饰的抗体，所述抗体随后进行修饰以产生变体。在一个实施方案中，本文的亲本抗体是AB79。在一个实施方案中，本文的亲本抗体包含具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的VH链和具有SEQ ID NO:10的氨基酸序列的VL链。在一个实施方案中，本文的亲本抗体包含SEQ ID NO:11的重链氨基酸序列和SEQ ID NO:12的轻链氨基酸序列。亲本抗体可指多肽本身、包含亲本抗体的组合物或编码所述多肽的氨基酸序列。因此，术语“亲本Fc多肽”是指经修饰以产生变体的Fc多肽。

术语“野生型”、“WT”和“天然”是指在自然界中发现的氨基酸序列或核苷酸序列，包括等位基因变异。WT蛋白质、多肽、抗体、免疫球蛋白、IgG等具有未被有意修饰的氨基酸序列或核苷酸序列。

在一些实施方案中，在抗CD38抗体的一个或多个CDR中进行一个或多个氨基酸修饰。一般来说，任何单个CDR中仅取代1、2或3个氨基酸，并且一般来说一组CDR内进行不超过4、5、6、7、8、9或10个改变。然而应理解，任何CDR中没有取代、有1、2或3个取代的任何组合可独立地且任选地与任何其它取代相组合。

在一些情况下，将CDR中的氨基酸修饰称为“亲和力成熟”。“亲和力成熟”抗体是一个或多个CDR中具有一个或多个改变，从而导致抗体对抗原的亲和力相较于不具有那些改变的亲本抗体得到改进的抗体。在一些情况下，可能希望降低抗体对其抗原的亲和力。

与“亲本”抗体相比，可进行亲和力成熟以使抗体对抗原的结合亲和力增加至少约10％至50％、100％、150％或更多或1-5倍。优选的亲和力成熟抗体对靶抗原具有纳摩尔级或甚至皮摩尔级亲和力。亲和力成熟的抗体通过已知程序产生(例如，Marks等人(1992)Biotechnol.10:779-783；Barbas等人(1994)Proc.Nat.Acad.Sci.USA 91:3809-3813；Shier等人(1995)Gene 169:147-155；Yelton等人(1995)J.Immunol.155:1994-2004；Jackson等人(1995)J.Immunol.154(7):3310-9；以及Hawkins等人(1992)J.Mol.Biol.226:889-896)。

或者，可例如在本发明抗体的一个或多个CDR中进行“沉默的”氨基酸修饰，例如不显著改变抗体对抗原的亲和力的修饰。所进行的这些修饰可以是处于许多原因，包括使表达最佳化(如可对编码本发明抗体的核酸所做的修饰)。

因此，变体CDR和抗体包括在本发明的CDR和抗体的定义之内；即，本发明的抗体可在SEQ ID NO:3至8所示的一个或多个CDR中包含氨基酸修饰。此外，如下文所概述，氨基酸修饰也可独立地并且任选地在CDR以外的任何区(包括框架区和恒定区)中进行。

在一些实施方案中，描述了对人CD38(SEQ ID NO:1)和食蟹猴CD38(SEQ ID NO:2)具有特异性的AB79的变体抗体。所述抗体由六个CDR组成，其中此抗体的每个CDR可与SEQID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和/或SEQ ID NO:8相差0、1或2个氨基酸取代。

除上文概述的修饰外，还可进行其它修饰。例如，可通过并入连接VH和VL结构域的二硫桥来稳定分子(Reiter等人(1996)Nature Biotech.14:1239-1245)。此外，存在可如以下概述所进行的抗体的各种共价修饰。

抗体的共价修饰包括在本发明的范围内，并且通常、但不总是在翻译后进行。例如，通过使抗体的特定氨基酸残基与能够同选定侧链或N末端或C末端残基反应的有机衍生剂反应，来将几种类型的抗体共价修饰引入分子中。

在一些实施方案中，本发明的抗CD38抗体特异地结合CD38中的一个或多个残基或区，而且不与和CD38同源的其它蛋白质如BST-1(骨髓基质细胞抗原-1)和/或Mo5(也称为CD157)交叉反应。

通常，没有交叉反应性意思是在适合的测定条件下使用足够量的分子通过ELISA和/或FACS分子评估时，分子之间存在小于约5％的相对竞争性抑制作用。

抑制CD38活性和副作用减少

所公开的抗体可阻断配体-受体相互作用或抑制受体组分相互作用。本发明的抗CD38抗体可以是“阻断”或“中和”抗体。术语“中和抗体”是指与CD38结合导致抑制CD38的生物活性的抗体，所述CD38的生物活性例如是其与配体相互作用的能力、酶活性、信号传导能力以及特别地其引起活化的淋巴细胞的能力。对CD38的生物活性的抑制可通过本领域中已知的几种标准体外或体内测定中的一个或多个评估。

术语“抑制结合”和“阻断结合”(例如，当提及抑制/阻断CD38抗体与CD38的结合时)涵盖部分和完全抑制/阻断。抑制/阻断CD38抗体与CD38的结合可降低或改变没有抑制或阻断时CD38抗体与CD38结合时所发生的细胞信号传导的正常水平或类型。抑制和阻断也旨在包括CD38抗体与CD38的结合亲和力在与抗CD38抗体接触时相较于配体未与抗CD38抗体接触时的任何可测量的降低，例如CD38抗体与CD38的结合受阻断至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、99％或100％。适当地，对CD38抗体与CD38的结合的阻断可以是至少约70％。适当地，对CD38抗体与CD38的结合的阻断可以是至少约80％。适当地，对CD38抗体与CD38的结合的阻断可以是至少约90％。

所公开的抗CD38抗体也可抑制细胞生长。术语“抑制生长”是指与抗CD38抗体接触时的细胞生长相较于未与抗CD38抗体接触的相同细胞的生长的任何可测量的降低，例如，细胞培养物的生长受抑制至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、99％或100％。适当地，对生长的抑制可以是至少约70％。适当地，对生长的抑制可以是至少约80％。适当地，对生长的抑制可以是至少约90％。

在一些实施方案中，所公开的抗CD38抗体能够耗减活化的淋巴细胞和浆细胞。在本文中，术语“耗减”是指与未治疗的受试者相比，受试者中活化的淋巴细胞和/或浆细胞的血清水平地可测量的降低。一般来说，观察到至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、99％或100％的耗减。适当地，耗减可以是至少50％。适当地，耗减可以是至少60％。适当地，耗减可以是至少70％。适当地，耗减可以是至少80％。适当地，耗减可以是至少90％。适当地，耗减可以是100％。如以下实施例中所示，本发明的抗体展现的一个特定优点是给药后这些细胞的可恢复性；也就是说，如对于一些治疗所已知(例如利用抗CD20抗体的治疗)，细胞耗减可持续长时间段，从而引起不想要的副作用。如本文中所示，对活化的淋巴细胞和/或浆细胞的作用是可恢复的。

与现有技术的抗CD38抗体相比，本发明的抗CD38抗体可减少副作用。在一些实施方案中，根据本发明使用的抗体(例如AB79)不会诱导TEAE。在一些实施方案中，根据本发明使用的抗体(例如AB79)与其它抗CD38抗体(如MOR202)相比可降低患者群体中TEAE的发生率。TEAE通常由1级、2级、3级、4级和5级来表示，其中1级是最不严重的，并且5级是最严重的TEAE。基于FDA和肿瘤药物不良事件通用术语标准(CTCAE)标准的其它指南(参见例如https://evs.nci.nih.gov/ftp1/CTCAE/CTCAE_4.03_2010-06-14_QuickReference_5x7.pdf；以及https://ctep.cancer.gov/protocoldevelopment/electronic_applications/ctc.htm；and Nilsson and Koke(2001)Drug Inform.J.35:1289-1299)，以下是通常确定此类等级的方式。1级是轻度：无症状或轻度症状；仅临床或诊断性观察结果；不指示干预。2级是中度：指示进行最小程度的局部或无创干预；限制年龄适当的工具性日常生活活动(“ADL”)。3级是严重或有医学意义，但不立即危及生命：指示住院或住院时间延长；失能；限制自我护理ADL。4级是危及生命的后果：指示紧急干预。5级是与AE相关的死亡。

在一些实施方案中，根据本发明使用的抗体(例如AB79)与其它抗CD38抗体(如MOR202)相比可降低患者群体中TEAE的等级。在一些实施方案中，根据本发明使用的抗体(例如AB79)与其它抗CD38抗体相比可使TEAE的等级从5级降低至4级。在一些实施方案中，根据本发明使用的抗体(例如AB79)与其它抗CD38抗体相比可使TEAE的等级从4级降低至3级。在一些实施方案中，根据本发明使用的抗体(例如AB79)与其它抗CD38抗体相比可使TEAE的等级从3级降低至2级。在一些实施方案中，根据本发明使用的抗体(例如AB79)与其它抗CD38抗体相比可使TEAE的等级从2级降低至1级。

在一些实施方案中，根据本发明使用的抗体(例如AB79)可降低选自由以下组成的组的一种或多种TEAE的等级：贫血(包括溶血性贫血)、血小板减少症、疲劳、输注相关反应(IRR)、白细胞减少症、淋巴细胞减少症和恶心。在一些实施方案中，根据本发明使用的抗体(例如AB79)可降低选自由以下组成的组的一种或多种TEAE的发生率：贫血(包括溶血性贫血)、血小板减少症、疲劳、输注相关反应(IRR)、白细胞减少症、淋巴细胞减少症和恶心。

在一些实施方案中，所述抗CD38抗体导致少于50％、少于40％、少于30％、少于20％、少于10％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的RBC耗减。在一些实施方案中，所述AB79抗体导致少于50％、少于40％、少于30％、少于20％、少于10％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的RBC耗减。在一些实施方案中，所述AB79抗体导致少于10％的RBC耗减。

在一些实施方案中，所述抗CD38抗体导致少于50％、少于40％、少于30％、少于20％、少于10％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的血小板耗减。在一些实施方案中，所述AB79抗体导致少于50％、少于40％、少于30％、少于20％、少于10％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的血小板耗减。在一些实施方案中，所述AB79抗体导致少于10％的血小板耗减。

在一些实施方案中，诊断测试用于确定贫血(包括溶血性贫血)的存在和/或等级。用于贫血(包括溶血性贫血)的诊断测试包括测量血红蛋白水平。一般来说，血红蛋白水平解释如下：(i)非常轻微/无贫血：≥12.0g/dL，(ii)轻度：10-12g/dL，(iii)中度：8-10g/dL，(iv)重度：6-8g/dL，以及(v)非常严重：≤6g/dL。贫血(包括溶血性贫血)的其它诊断测试包括测量触珠蛋白水平。一般来说，触珠蛋白水平≤25mg/dL指示存在贫血，包括溶血性贫血。其它诊断测试包括直接抗球蛋白测试(DAT)(也称为直接Coombs测试)，其用于确定RBC是否已在体内被免疫球蛋白、补体或两者包被。

在一些实施方案中，诊断测试用于确定血小板减少症的存在和/或等级。一般来说，血小板减少症的诊断测试包括测量每微升(μL)血液中的血小板数量。通常，每μL血液中存在150×10³-450×10³血小板。一般来说，当每μL血液中存在<150×10³血小板时，诊断为血小板减少症。如果每μL血液中存在70-150×10³，通常诊断为轻度血小板减少症。如果每μL存在20-70×10³，通常诊断为中度血小板减少症。如果每μL血液中存在<20×10³，通常诊断为重度血小板减少症。

疾病适应症

本发明的抗体、方法和剂量单位可用于多种应用中，包括治疗或改善CD38相关疾病。

CD38在不成熟的造血细胞中表达，在成熟细胞中下调，并且以高水平再表达于活化的淋巴细胞和浆细胞中。例如，在活化的B细胞、浆细胞、活化的CD4+ T细胞、活化的CD8+T细胞、NK细胞、NKT细胞、成熟树突状细胞(DC)以及活化的单核细胞中可见高CD38表达。某些疾患与表达CD38的细胞相关，并且某些疾患与细胞表面上CD38的过表达、高密度表达或上调的表达相关。细胞群体是否表达CD38可通过本领域中已知的方法测定，例如给定群体中由特异性地结合CD38的抗体标记的细胞百分比的流式细胞术测定、或免疫组织化学测定，如以下对于诊断应用一般性描述的。例如，在约10％-30％的细胞中检测到CD38表达的细胞群体可被视为对CD38具有弱阳性；并且在高于约30％的细胞中检测到CD38表达的细胞群体可被视为对CD38具有明确阳性(如Jackson等人(1988)Clin.Exp.Immunol.72:351-356)，但是可使用其它标准来确定细胞群体是否表达CD38。细胞表面上的表达密度可使用本领域中已知的方法测定，如(例如)已使用特异性地结合CD38的抗体进行荧光标记的细胞的平均荧光强度的流式细胞术测量。

本发明的治疗性抗CD38抗体结合至CD38阳性细胞，从而经由包括CDC和ADCC途径的多种作用机制导致这些细胞的耗减。

本领域中已知，某些疾患与表达CD38的细胞相关，并且某些疾患与细胞表面上CD38的过表达、高密度表达或上调的表达相关。细胞群体是否表达CD38可通过本领域中已知的方法测定，例如给定群体中由特异性地结合CD38的抗体标记的细胞百分比的流式细胞术测定、或免疫组织化学测定，如以下对于诊断应用一般性描述的。例如，在约10％-30％的细胞中检测到CD38表达的细胞群体可被视为对CD38具有弱阳性；并且在高于约30％的细胞中检测到CD38表达的细胞群体可被视为对CD38具有明确阳性(如Jackson等人(1988)Clin.Exp.Immunol.72:351-356)，但是可使用其它标准来确定细胞群体是否表达CD38。细胞表面上的表达密度可使用本领域中已知的方法测定，如(例如)已使用特异性地结合CD38的抗体进行荧光标记的细胞的平均荧光强度的流式细胞术测量。

在一方面，本发明提供了治疗与表达CD38的细胞的增殖相关的疾患的方法，所述方法包括向患者施用药学有效量的所公开的抗体。在一些实施方案中，疾患是癌症，并且在特定实施方案中，癌症是血液系统癌症。在一些实施方案中，疾患是多发性骨髓瘤、慢性成淋巴母细性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、浆细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、B细胞白血病或伯基特淋巴瘤。在一些实施方案中，疾患是多发性骨髓瘤。

在本发明的一些实施方案中，血液癌症选自以下的组：慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、急性髓细胞性白血病和急性淋巴细胞性白血病。在本发明的一些实施方案中，血液癌症是慢性淋巴细胞性白血病。在本发明的一些实施方案中，血液癌症是慢性髓细胞性白血病。在本发明的一些实施方案中，血液癌症是急性髓细胞性白血病。在本发明的一些实施方案中，血液癌症是急性淋巴细胞性白血病。

在一些实施方案中，疾患是多发性骨髓瘤。

CLL是西方世界成人中最常见的白血病。CLL涉及牵涉淋巴结和其它淋巴组织的趋于成熟的淋巴细胞的克隆扩增，并且伴随骨髓的渐进性浸润和外周血液中的存在。B细胞形式(B-CLL)代表几乎所有情况。

慢性淋巴细胞性白血病的B细胞形式(B-CLL)

B-CLL是以无反应性(anergic)单克隆B谱系细胞的渐进性增加为特征的不可治疾病，所述细胞以持久的方式积聚在骨髓和外周血液中许多年。CD38的表达被视为B-CLL的独立较差预后因子(Hamblin等人(2002)Blood 99:1023-9)。

B-CLL的特征在于两种亚型，缓慢型和侵袭性。所述临床表型与免疫球蛋白重链可变区(IgVH)基因中体细胞突变的存在或不存在有关。如本文中所用，缓慢型B-CLL是指具有突变的IgVH基因和/或呈现与缓慢型B-CLL相关的一种或多种临床表型的受试者的病症。如本文中所用，短语侵袭性B-CLL是指具有未突变的IgVH基因和/或呈现与侵袭性B-CLL相关的一种或多种临床表型的受试者的病症。

当今的B-CLL标准疗法是缓和性的并且主要利用细胞抑制剂苯丁酸氮芥或氟达拉滨来进行。发生复发时，常常启动使用氟达拉滨、环磷酰胺与利妥昔单抗(针对CD20的单克隆抗体)或阿伦单抗(针对CD52的单克隆抗体)组合的组合疗法。在一项研究中，35名患有复发性或难治性侵袭性B细胞NHL患者进行了高剂量化学疗法(HCT)，然后从第40天开始每周一次利妥昔单抗375mg/m²持续4个剂量，并且从第180天开始重复另外四个剂量。利妥昔单抗输注耐受性良好，只有一例3/4级输注相关毒性。在此试验中注意到的出人意料的不良事件是超过一半的患者的延迟性嗜中性粒细胞减少症(19/35名患者中有46次3级或4级嗜中性粒细胞减少症；Kosmas等人(2002)Leukemia 16:2004–2015，其可在线访问https://www.nature.com/articles/2402639)。在另一项研究中，六名患者每隔一天通过静脉内输注接受阿仑单抗，一周三次，共12周。每天逐渐递增剂量(3、10、然后30mg)直至患者耐受。主要TEAE是血液学不良事件中的贫血、嗜中性粒细胞减少症(各自6/6名患者)和血小板减少症(5/6名患者)(Ishizawa等人(2017)Jpn.J.Clin.Oncol.47(1):54-60)。因此，对于血液学不良事件减少的B-CLL的治疗存在迫切的未满足的医疗需求。在一些实施方案中，提供了使用所公开的抗CD38抗体治疗B-CLL的方法，并且如以下所概述，这可使用任选地地且独立地包括任何上述药物的组合疗法来进行。

多发性骨髓瘤(MM)

多发性骨髓瘤(MM)是B细胞谱系的以骨髓中浆细胞的赘生性增殖为特征的恶性病症。健康志愿者中的药理学发现支持MM的进一步研究(Fedyk等人(2018)Blood 132:3249，以引用的方式整体并入本文)。骨髓瘤细胞的增殖引起各种效应，包括骨骼中的溶解性病灶(lytic lesion)(孔洞)、红细胞数量减少、异常蛋白质的产生(伴随对肾脏、神经和其它器官的损害)、免疫系统功能降低以及血钙水平升高(高钙血症)。当前的治疗选择包括化学疗法，优选在可能的情况下与自体干细胞移植(ASCT)相关。这些治疗方案展现中等应答率。然而，整个存活期中仅观测到边际变化并且中值存活期为大约3年。因此，对多发性骨髓瘤的治疗存在迫切的未满足的医疗需求。在一些实施方案中，提供了使用所公开的抗体治疗多发性骨髓瘤的方法。

未明意义的单克隆丙种球蛋白病(MGUS)和郁积型多发性骨髓瘤(SMM)

未明意义的单克隆丙种球蛋白病(MGUS)和郁积型多发性骨髓瘤(SMM)是以骨髓中单克隆浆细胞增殖和不存在终末器官损伤(end-organ damage)为特征的无症状、恶性前(pre-malignant)病症。

郁积型多发性骨髓瘤(SMM)是浆细胞的无症状增生性病症，具有进展至有症状或活动性多发性骨髓瘤的高风险(Kyle等人(2007)N.Engl.J.Med.356(25):2582-2590)。2003年采用定义SMM的国际共识标准，并且要求患者具有>30g/L的M-蛋白质水平和/或>10％的骨髓克隆性浆细胞(Internat.Myeloma Working Group(2003)Br.J.Haematol.121:749-757)。患者必须没有器官或相关组织损伤，如骨病变或症状。近来研究已鉴定了SMM的两个亚群；i)进展型疾病的患者和ii)非进展型疾病的患者(Internat.Myeloma Working Group(2003)Br.J.Haematol.121:749-757)。

SMM在不存在终末器官损伤时类似于未明意义的单克隆丙种球蛋白病(MGUS)(Kyle等人(2007)N.Engl.J.Med.356(25):2582-2590)。然而，在临床上，SMM在20年很有可能进展至活动性多发性骨髓瘤或淀粉样变病(SMM的78％可能性相对于MGUS的21％)(Kyle等人(2007)N.Engl.J.Med.356(25):2582-2590)。

定义MGUS的国际共识标准要求患者具有<30g/L的M-蛋白质水平、<10％的骨髓浆细胞和不存在器官或相关组织损伤，包括骨病变或症状(Internat.Myeloma WorkingGroup(2003)Br.J.Haematol.121:749-757)。

系统性轻链淀粉样变性

淀粉样变性是指蛋白质错误折叠疾病家族，其中不同类型的蛋白质聚集为细胞外不溶性原纤维。这些是复杂的多系统疾病。系统性淀粉样变性的常见类型是系统性轻链(AL)淀粉样变性。(Gertz等人(2004)Am.Soc.Hematol.2004:257-82)。如同多发性骨髓瘤，AL淀粉样变性是浆细胞赘生物。AL淀粉样变性是由骨髓中的少量克隆性浆细胞群体引起的老年人的罕见、进行性和致死性疾病，所述克隆性浆细胞群体可产生过量的单克隆免疫球蛋白游离轻链。一旦进入循环，这些病理性轻链就会错误折叠，聚集并沉积为内脏器官中的纤维状物质。淀粉样原纤维沉积物是由克隆性浆细胞分泌的相同的游离轻链蛋白。(Cohen和Comenzo(2010)Am.J.Hematol.2010:287-94；Merlini和Bellotti(2003)New EnglandJ.Med.349(6):583-96；Murray等人(2010)Blood(ASH年度会议摘要)116(21):摘要1909)。这种淀粉样蛋白原纤维沉积导致最终器官损伤和最终死亡。抑制克隆性浆细胞的疗法可通过除去产生循环有毒轻链的工厂来改善AL淀粉样变性病，其然后可改善器官功能和存活。没有治疗获得监管批准用于系统性AL淀粉样变性。所使用的剂是用于治疗多发性骨髓瘤的那些。因此，对患有AL淀粉样变性病的患者的治疗存在迫切的未满足的医疗需求，并且靶向浆细胞上的CD38是相关的治疗策略。

其它CD38相关疾患

本发明的抗体、方法和剂量单位可用于多种应用中，包括治疗或改善CD38相关疾病，如与炎症和免疫疾病相关的疾病和疾患，特别是与活化的淋巴细胞相关的疾病。本发明的抗CD38抗体结合至CD3阳性细胞，从而经由包括CDC和ADCC途径的多种作用机制导致诸如活化的淋巴细胞的这些细胞的耗减。

因此，展现CD38的表达增加或表达CD38的细胞的数目增加的任何自身免疫性疾病可使用本发明的抗体治疗。这些包括但不限于同种异体性胰岛移植物排斥(allogenicislet graft rejection)、斑秃、强直性脊柱炎、抗磷脂综合征、自身免疫性爱迪生病、抗中性粒细胞细胞质自身抗体(ANCA)、肾上腺自身免疫性疾病、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、自身免疫性心肌炎、自身免疫性嗜中性粒细胞减少症、自身免疫性卵巢炎和睾丸炎、自身免疫性血小板减少症、自身免疫性荨麻疹、白塞氏病(Behcet’s disease)、大疱性类天疱疮、心肌症、卡斯特氏综合征(Castleman’s syndrome)、乳糜泻-皮炎、慢性疲劳免疫功能障碍综合征、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病、Churg-Strauss综合征、瘢痕性类天疱疮、CREST综合征、冷凝集素病、克罗恩氏病、皮肌炎、盘状狼疮、原发性混合型冷球蛋白血症、因子VIII缺陷、纤维肌痛-纤维肌炎、肾小球性肾炎、格雷夫斯病、格林-巴利综合征、古德帕斯丘综合症、移植物抗宿主病(GVHD)、桥本氏甲状腺炎、A型血友病、特发性肺纤维化、特发性血小板减少性紫癫(ITP)、IgA神经病变、IgM多发性神经病变、免疫介导的血小板减少症、幼年型关节炎、川崎氏病(Kawasaki’s disease)、扁平苔藓(lichen plantus)、红斑狼疮、梅尼尔氏病(Meniere’s disease)、混合性结缔组织疾病、多发性硬化症、1型糖尿病、重症肌无力、寻常天疱疮、恶性贫血、结节性多发性动脉炎、多软骨炎(polychrondritis)、多腺体综合征(polyglandular syndromes)、风湿性多肌痛(polymyalgia rheumatica)、多发性肌炎和皮肌炎、原发性丙种球蛋白缺乏症、原发性胆汁性肝硬化、银屑病、银屑病性关节炎、雷诺氏现象(Reynauld’s phenomenon)、赖特氏综合征(Reiter’s syndrome)、类风湿性关节炎、类肉瘤病(sarcoidosis)、硬皮病、修格兰氏综合征(Sjorgen’s syndrome)、实体器官移植排斥、僵人综合征、系统性红斑狼疮、高安氏动脉炎、颞动脉炎/巨细胞动脉炎、血栓性血小板减少性紫癜、溃疡性结肠炎、葡萄膜炎、诸如疱疹样皮炎血管炎的血管炎病(vasculitides)、白癜风以及韦格纳氏肉芽肿病。

在一些实施方案中的特定用途是使用本发明的抗体用于许多疾病的诊断和/或治疗，所述疾病包括但不限于自身免疫性疾病，包括但不限于系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)、炎症性肠病(IBD)、溃疡性结肠炎、系统性轻链淀粉样变性和移植物抗宿主病。在一方面，所述疾病是系统性红斑狼疮(SLE)。在一方面，所述疾病是类风湿性关节炎(RA)。在一方面，所述疾病是炎症性肠病(IBD)。在一方面，所述疾病是溃疡性结肠炎。在一方面，所述疾病是移植物抗宿主病。在一方面，所述疾病是系统性轻链淀粉样变性。

因此，例如，可治疗具有高浆细胞含量的患者，如展现高浆细胞水平的SLE患者，以及显示对基于CD20的疗法无反应的RA患者。

用于体内施用的抗体组合物

根据本发明使用的抗体的制剂通过将具有所需纯度的抗体与任选的药学上可接受的载体、赋形剂或稳定剂(Remington's Pharmaceutical Sciences第16版(1980)Osol,A.编辑)一起混合成冻干制剂或水性溶液的形式来制备以供储存。

本文中的制剂也可含有所治疗的特定适应症所需要的多于一种活性化合物，优选是具有互补活性并且不会对彼此有不利影响的化合物。例如，可能希望提供具有其它特异性的抗体。或者或此外，组合物可包含细胞毒性剂、细胞因子、生长抑制剂和/或小分子拮抗剂。此类分子以对于预期目的有效的量适当地组合存在。

皮下施用

可以治疗有效的足够剂量施用本文所述的抗CD38抗体(如AB79)，从而允许皮下施用。皮下施用是微创的施用方式，并且被认为是最通用的且因此是可用于短期和长期疗法的合乎需要的施用方式。在一些实施方案中，皮下施用可通过注射进行。在一些实施方案中，当需要多次注射或装置时，可旋转注射或装置的部位。

因此，皮下制剂对患者来说更容易自我施用，尤其是因为所述制剂可能必须在患者的整个生命中定期服用(例如，早在儿童一岁就开始服用)。此外，皮下递送的简易性和速度允许增加患者的依从性，并在需要时更快地获得药物。因此，本文提供的抗CD38抗体的皮下制剂提供优于现有技术的实质性益处并解决了某些未满足的需求。

在一些实施方案中，根据已知的方法经由皮下途径将本发明的抗体施用至受试者。在一些实施方案中，本发明的抗体可通过皮下注射施用。在具体实施方案中，将皮下制剂皮下皮下注射到患者的同一部位(例如，施用至上臂、大腿的前表面、腹部的下部或上背部)以重复或连续注射。在其它实施方案中，将皮下制剂皮下注射到患者的不同或旋转部位。可采用制剂的单次或多次施用。

在一些实施方案中，本文所述的皮下单位剂型可用于治疗癌症。在一些实施方案中，本文所述的皮下单位剂型可用于治疗血液癌症。在一些实施方案中，本文所述的皮下单位剂型可用于治疗多发性骨髓瘤。

在一些实施方案中，与现有技术的抗体相比，本发明的抗体具有提高的生物利用度。在一些实施方案中，与结合至人RBC的现有技术抗体相比，本发明抗体的生物利用度提高了10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％或更多。在一些实施方案中，与结合至人RBC的现有技术抗体相比，本发明抗体的生物利用度是110％、120％、130％、140％、150％、160％、170％、180％、190％、200％、250％或300％或更高。适当地，生物利用度可提高50％。适当地，生物利用度可提高60％。适当地，生物利用度可提高70％。适当地，生物利用度可提高80％。适当地，生物利用度可提高90％。

在一些实施方案中，生物利用度的提高允许皮下施用。

在一些实施方案中，本发明的抗体导致NK细胞、B细胞和/或T细胞的耗减。在一些实施方案中，与B细胞或T细胞的耗减相比，本发明的抗体允许增加的NK细胞耗减。在一些实施方案中，本发明的抗体允许与B细胞相比增加的NK细胞耗减，以及与T细胞相比增加的NK细胞耗减。在一些实施方案中，本发明的抗体允许与B细胞相比增加的NK细胞耗减，以及与T细胞相比增加的B细胞耗减。在一些实施方案中，本发明的抗体允许与B细胞相比增加的NK细胞耗减，以及与T细胞相比增加的B细胞耗减。适当地，与CD38^-细胞相比，本发明的抗体可允许增加的CD38⁺细胞耗减。

在某些实施方案中，与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本文所述的抗CD38抗体的生物利用度介于至少50％与至少80％之间。在某些实施方案中，与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本文所述的抗CD38抗体的生物利用度介于至少60％与至少80％之间。在某些实施方案中，与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本文所述的抗CD38抗体的生物利用度介于至少50％与70％之间。在某些实施方案中，与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本文所述的抗CD38抗体的生物利用度介于至少55％与65％之间。在某些实施方案中，与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本文所述的抗CD38抗体的生物利用度介于至少55％与70％之间。

在某些实施方案中，与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本文所述的抗CD38抗体的生物利用度是至少40％、至少45％、至少50％、至少51％、至少52％、至少53％、至少54％、至少55％、至少56％、至少57％、至少58％、至少59％、至少60％、至少61％、至少62％、至少63％、至少64％、至少65％、至少66％、至少67％、至少68％、至少69％、至少70％、至少71％、至少72％、至少73％、至少74％、至少75％、至少76％、至少77％、至少78％、至少79％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％或至少85％。适当地，与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，生物利用度可以是至少50％。适当地，与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，生物利用度可以是至少60％。适当地，与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，生物利用度可以是至少70％。适当地，与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，生物利用度可以是至少80％。适当地，与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，生物利用度可以是至少90％。

在一些实施方案中，本公开提供了一种方法，其中与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本发明抗体的生物利用度是50％-80％。

在一些实施方案中，本公开提供了一种方法，其中与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本发明抗体的生物利用度是至少50％。

在一些实施方案中，本公开提供了一种方法，其中与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本发明抗体的生物利用度是至少55％。

在一些实施方案中，本公开提供了一种方法，其中与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本发明抗体的生物利用度是至少60％。

在一些实施方案中，本公开提供了一种方法，其中与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本发明抗体的生物利用度是至少65％。

在一些实施方案中，本公开提供了一种方法，其中与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本发明抗体的生物利用度是至少70％。

在一些实施方案中，本公开提供了一种方法，其中与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本发明抗体的生物利用度是至少75％。

在一些实施方案中，本公开提供了一种方法，其中与针对相同剂量标准化的静脉内施用相比，皮下施用后本发明抗体的生物利用度是至少80％。

在一些实施方案中，本公开提供了包含如本文所述的抗CD38抗体的单位剂型，其中所述抗CD38抗体导致少于10％的RBC耗减。

在一些实施方案中，本公开提供了包含如本文所述的抗CD38抗体的单位剂型，其中所述抗CD38抗体导致少于10％的血小板耗减。

在某些实施方案中，本文所述的抗CD38抗体以单次弹丸式注射皮下施用。在某些实施方案中，本文所述的抗CD38抗体每月一次皮下施用。在某些实施方案中，本文所述的抗CD38抗体每两周一次皮下施用。在某些实施方案中，本文所述的抗CD38抗体每周一次皮下施用。在某些实施方案中，本文所述的抗CD38抗体每周两次皮下施用。在某些实施方案中，本文所述的抗CD38抗体每天一次皮下施用。在某些实施方案中，本文所述的抗CD38抗体每12小时皮下施用。在某些实施方案中，本文所述的抗CD38抗体每8小时皮下施用。在某些实施方案中，本文所述的抗CD38抗体每六小时皮下施用。在某些实施方案中，本文所述的抗CD38抗体每四小时皮下施用。在某些实施方案中，本文所述的抗CD38抗体每两小时皮下施用。在某些实施方案中，本文所述的抗CD38抗体每小时皮下施用。

在一些实施方案中，以约45mg至约1,800mg的剂量施用皮下单位剂型。在一些实施方案中，皮下单位剂型包含足以施用约135mg至约1,800mg的剂量的量。在一些实施方案中，皮下单位剂型包含足以施用约600mg至约1,800mg的剂量的量。在一些实施方案中，皮下单位剂型包含足以施用约1,200mg至约1,800mg的剂量的量。在一些实施方案中，皮下单位剂型包含足以施用约45mg至约1,200mg的剂量的量。在一些实施方案中，皮下单位剂型包含足以施用约135mg至约1,200mg的剂量的量。在一些实施方案中，皮下单位剂型包含足以施用约600mg至约1,200mg的剂量的量。在一些实施方案中，皮下单位剂型包含足以施用约45mg至约135mg的剂量的量。在一些实施方案中，皮下单位剂型包含足以施用约45mg至约600mg的剂量的量。在一些实施方案中，皮下单位剂型包含足以施用约135mg至约600mg的剂量的量。在一些实施方案中，剂量以mg/千克体重表示。在一些实施方案中，剂量是每日剂量。

单位剂量形式

在一些实施方案中，将治疗性抗CD38抗体配制为单位剂型的一部分。在一些实施方案中，所述抗CD38抗体包含重链，所述重链包含以下CDR氨基酸序列：GFTFDDYG(SEQ IDNO:3；HCDR1 AB79)、ISWNGGKT(SEQ ID NO:4；HCDR2 AB79)和ARGSLFHDSSGFYFGH(SEQ IDNO:5；HCDR3 AB79)，或那些序列的具有至多三个氨基酸变化的变体。在一些实施方案中，所述抗体包含轻链，所述轻链包含以下CDR氨基酸序列：SSNIGDNY(SEQ ID NO:6；LCDR1AB79)、RDS(SEQ ID NO:7；LCDR2 AB79)和QSYDSSLSGS(SEQ ID NO:8；LCDR3AB79)，或那些序列的具有至多三个氨基酸变化的变体。在一些实施方案中，所述抗体包含重链，所述重链包含以下CDR氨基酸序列：GFTFDDYG(SEQ ID NO:3；HCDR1 AB79)、ISWNGGKT(SEQ ID NO:4；HCDR2 AB79)和ARGSLFHDSSGFYFGH(SEQ ID NO:5；HCDR3 AB79)，或那些序列的具有至多三个氨基酸变化的变体；和轻链，所述轻链包含以下CDR氨基酸序列：SSNIGDNY(SEQ ID NO:6；LCDR1 AB79)、RDS(SEQ ID NO:7；LCDR2 AB79)和QSYDSSLSGS(SEQ ID NO:8；LCDR3 AB79)，或那些序列的具有至多三个氨基酸变化的变体。在一些实施方案中，所述抗体包含重链，所述重链包含以下CDR氨基酸序列：GFTFDDYG(SEQ ID NO:3；HCDR1 AB79)、ISWNGGKT(SEQ IDNO:4；HCDR2 AB79)和ARGSLFHDSSGFYFGH(SEQ ID NO:5；HCDR3 AB79)。在一些实施方案中，所述抗体包含轻链，所述轻链包含以下CDR氨基酸序列：SSNIGDNY(SEQ ID NO:6；LCDR1AB79)、RDS(SEQ ID NO:7；LCDR2 AB79)和QSYDSSLSGS(SEQ ID NO:8；LCDR3 AB79)。在一些实施方案中，所述抗体包含重链，所述重链包含以下CDR氨基酸序列：GFTFDDYG(SEQ ID NO:3；HCDR1 AB79)、ISWNGGKT(SEQ ID NO:4；HCDR2 AB79)和ARGSLFHDSSGFYFGH(SEQ ID NO:5；HCDR3 AB79)；和轻链，所述轻链包含以下CDR氨基酸序列：SSNIGDNY(SEQ ID NO:6；LCDR1AB79)、RDS(SEQ ID NO:7；LCDR2 AB79)和QSYDSSLSGS(SEQ ID NO:8；LCDR3 AB79)。在一些实施方案中，所述抗体包含重链，所述重链包含与SEQ ID NO:9具有至少80％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述重链可包含以下CDR氨基酸序列：GFTFDDYG(SEQ ID NO:3；HCDR1 AB79)、ISWNGGKT(SEQ ID NO:4；HCDR2 AB79)和ARGSLFHDSSGFYFGH(SEQ ID NO:5；HCDR3 AB79)，并且所述重链的其余部分可与SEQ ID NO 9具有至少80％序列同一性。在一些实施方案中，所述抗体包含重链，所述重链包含SEQ ID NO:9的可变重(VH)链氨基酸序列。

在一些实施方案中，所述抗体包含轻链，所述轻链包含与SEQ ID NO:10具有至少80％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述轻链可包含以下CDR序列：SSNIGDNY(SEQ IDNO:6；LCDR1 AB79)、RDS(SEQ ID NO:7；LCDR2 AB79)和QSYDSSLSGS(SEQ ID NO:8；LCDR3AB79)，并且所述轻链的其余部分可与SEQ ID NO:10具有至少80％序列同一性。在一些实施方案中，所述抗体包含轻链，所述轻链包含SEQ ID NO:10的可变轻(VL)链氨基酸序列。

在一些实施方案中，所述抗体包含重链(HC)，所述重链具有与SEQ ID NO:11具有至少80％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述重链可包含如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5所定义的CDR序列，并且所述重链的其余部分可与SEQ ID NO:11具有至少80％序列同一性。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:11的重链(HC)氨基酸序列。

在一些实施方案中，所述抗体包含轻链(LC)，所述轻链具有与SEQ ID NO:12具有至少80％序列同一性的氨基酸序列。适当地，所述轻链可包含如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所定义的CDR序列，并且所述轻链的其余部分可与SEQ ID NO:12具有至少80％序列同一性。在一些实施方案中，所述抗体包含SEQ ID NO:12的轻链(LC)氨基酸序列。

在一些实施方案中，包含抗CD38抗体的制剂是单位剂型。在一些实施方案中，所述单位剂型包含足以施用约45mg至约1,800mg的剂量的量。在一些实施方案中，所述单位剂型包含足以施用约135mg至约1,800mg的剂量的量。在一些实施方案中，所述单位剂型包含足以施用约600mg至约1,800mg的剂量的量。在一些实施方案中，所述单位剂型包含足以施用约1,200mg至约1,800mg的剂量的量。在一些实施方案中，所述单位剂型包含足以施用约45mg至约1,200mg的剂量的量。在一些实施方案中，所述单位剂型包含足以施用约135mg至约1,200mg的剂量的量。在一些实施方案中，所述单位剂型包含足以施用约600mg至约1,200mg的剂量的量。在一些实施方案中，所述单位剂型包含足以施用约45mg至约135mg的剂量的量。在一些实施方案中，所述单位剂型包含足以施用约45mg至约600mg的剂量的量。在一些实施方案中，所述单位剂型包含足以施用约135mg至约600mg的剂量的量。在一些实施方案中，剂量以mg/千克体重表示。在一些实施方案中，剂量是每日剂量。

在一些实施方案中，本文提供的抗CD38抗体单位剂型还可包含一种或多种药学上可接受的赋形剂、载体和/或稀释剂。在一些实施方案中，以药物组合物的形式提供抗CD38抗体，所述药物组合物包含根据本发明的单位剂型。适当地，所述药物组合物还可包含一种或多种药学上可接受的赋形剂、载体和/或稀释剂。

调整剂量方案以提供最佳的所需应答(例如治疗应答)。例如，可施用单次推注，随着时间推移可施用若干分次剂量或如由治疗情况的紧急状态指示，剂量可按比例减少或增加。可以剂量单位形式配制组合物，以易于施用和剂量均匀。在一些实施方案中，如本文所用的剂量单位形式可指适合作为用于待治疗的受试者的单一剂量的物理上离散单位；各单位含有经计算在与所需药物载体缔合的情况下可产生所需治疗作用的预定量的活性化合物。

本发明的剂量单位形式的规格受支配于并且直接依赖于(a)活性化合物的独特特征和要实现的特定治疗作用，和(b)混配这种种活性化合物以用于治疗个体的技术领域中固有的限制因素。

本发明中使用的抗CD38抗体的有效剂量和剂量方案取决于要治疗的疾病或疾患的类型和严重程度并可由本领域技术人员确定。

在一个实施方案中，通过皮下施用以约45至约1,800mg的每周一次剂量来施用抗CD38抗体。适当地，每周一次剂量可以是约135至约1,800mg。适当地，每周一次剂量可以是约600至约1,800mg。适当地，每周一次剂量可以是约1,200至约1,800mg。适当地，每周一次剂量可以是约45至约1,200mg。适当地，每周一次剂量可以是约135至约1,200mg。适当地，每周一次剂量可以是约600至约1,200mg。适当地，每周一次剂量可以是约45至约135mg。适当地，每周一次剂量可以是约45至约600mg。适当地，每周一次剂量可以是约135至约600mg。

这种施用可重复例如1至14次，如3至5次。治疗有效量的本发明中使用的抗CD38抗体的示例性非限制性范围是约45至约1,800mg。适当地，剂量可以是约135至约1,800mg。适当地，剂量可以是约600至约1,800mg。适当地，剂量可以是约1,200至约1,800mg。适当地，剂量可以是约45至约1,200mg。适当地，剂量可以是约135至约1,200mg。适当地，剂量可以是约600至约1,200mg。适当地，剂量可以是约45至约135mg。适当地，剂量可以是约45至约600mg。适当地，剂量可以是约135至约600mg。

作为非限制性实例，根据本发明的治疗可以每天约45至约1,800mg，如45、60、80、100、120、140、160、180、200、220、240、260、280、300、320、340、360、380、400、420、440、460、480、500、520、540、560、580、600、620、640、660、680、700、720、740、760、780、800、820、840、860、880、900、920、940、960、980、1000、1020、1040、1060、1080、1100、1120、1140、1160、1180、1200、1220、1240、1260、1280、1300、1320、1340、1360、1380、1400、1420、1440、1460、1480、1500、1520、1540、1560、1580、1600、1620、1640、1660、1680、1700、1720、1740、1760、1780或1800mg的量作为抗体的每日剂量，于治疗起始后第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40天中的至少一者，或者第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20周中的至少一者或其任何组合来提供，使用每24、18、12、8、6、4、2或1小时的单次或分次剂量或其任何组合。适当地，每日剂量可以是约45mg。适当地，每日剂量可以是约100mg。适当地，每日剂量可以是约135mg。适当地，每日剂量可以是约150mg。适当地，每日剂量可以是约200mg。适当地，每日剂量可以是约300mg。适当地，每日剂量可以是约400mg。适当地，每日剂量可以是约500mg。适当地，每日剂量可以是约600mg。适当地，每日剂量可以是约700mg。适当地，每日剂量可以是约800mg。适当地，每日剂量可以是约900mg。适当地，每日剂量可以是约1000mg。适当地，每日剂量可以是约1100mg。适当地，每日剂量可以是约1200mg。适当地，每日剂量可以是约1300mg。适当地，每日剂量可以是约1400mg。适当地，每日剂量可以是约1500mg。适当地，每日剂量可以是约1600mg。适当地，每日剂量可以是约1700mg。适当地，每日剂量可以是约1800mg。

在一个实施方案中，以约45至约1,800mg的每周一次剂量施用抗CD38抗体。适当地，每周一次剂量可以是约135至约1,800mg。适当地，每周一次剂量可以是约600至约1,800mg。适当地，每周一次剂量可以是约1,200至约1,800mg。适当地，每周一次剂量可以是约45至约1,200mg。适当地，每周一次剂量可以是约135至约1,200mg。适当地，每周一次剂量可以是约600至约1,200mg。适当地，每周一次剂量可以是约45至约135mg。适当地，每周一次剂量可以是约45至约600mg。适当地，每周一次剂量可以是约135至约600mg。这种施用可重复例如1至14次，如3至5次。所述施用可通过连续输注1至24小时，如1至12小时的时间段来进行。这种方案可按需要重复一次或多次，例如6个月或12个月后。可通过测量本发明化合物在施用后在血液中的量来确定或调节剂量，所述测量是例如通过取出生物样品且使用靶向抗CD38抗体的抗原结合区的抗独特型(anti-idiotypic)抗体来进行。

在一个实施方案中，以100mg/ml的浓度配制治疗性抗体。在一些实施方案中，将1.75mL、2.0mL、2.25mL或2.5mL的体积注射在大腿、腹部或手臂中。在一些实施方案中，将1.75mL、2.0mL、2.25mL或2.5mL的体积注射在大腿或腹部中。在一些实施方案中，将2.25mL的体积注射在大腿或腹部中。在一些实施方案中，在4、6、8或10小时的时间段内施用剂量。在一些实施方案中，在8小时的时间段内施用剂量。在一些实施方案中，施用2、4、6或8个剂量。在一些实施方案中，每2小时施用剂量。

在另一个实施方案中，抗CD38抗体每周一次施用，持续2至12周。适当地，所述抗体可每周一次施用，如持续3至10周。适当地，所述抗体可每周一次施用，如持续4至8周。适当地，所述抗体可每周一次施用，如持续5至7周。

在一个实施方案中，以随时间变化的频率皮下施用抗CD38抗体。适当地，可每周一次持续8周、然后每2周一次持续16周、然后在28天的治疗周期中此后每4周一次施用抗体，直到观察到不可接受的毒性或由于其它原因所致的受试者退出。

在一个实施方案中，抗CD38抗体通过维持疗法施用，如(例如)一周一次，持续6个月或更长时间。

在一个实施方案中，通过包括一次抗CD38抗体输注、接着与放射性同位素缀合的抗CD38抗体的输注的方案施用抗CD38抗体。所述方案可重复，例如7至9天后。

在一个实施方案中，本公开提供了包含如本文所述的抗CD38抗体的单位剂型，其中所述抗CD38抗体导致少于10％的RBC耗减。

在一个实施方案中，本公开提供了包含如本文所述的抗CD38抗体的单位剂型，其中所述抗CD38抗体导致少于10％的血小板耗减。

在一些实施方案中，根据本发明使用的抗CD38抗体与一种或多种另外的治疗剂，例如化学治疗剂组合使用。DNA破坏化学治疗剂的非限制性实例包括拓扑异构酶I抑制剂制剂(例如，伊立替康、拓扑替康、喜树碱及其类似物或代谢产物以及阿霉素)；拓扑异构酶II抑制剂(例如，依托泊苷、替尼泊苷和道诺霉素)；烷化剂(例如，美法仑、苯丁酸氮芥、白消安、噻替派、异环磷酰胺、卡莫司汀、洛莫司汀、司莫司汀、链脲菌素、达卡巴嗪、甲氨喋呤、丝裂霉素C以及环磷酰胺)；DNA嵌入剂(例如，顺铂、奥沙利铂和卡铂)；DNA嵌入剂和自由基产生剂，如博莱霉素；以及核苷模拟物(例如，5-氟尿嘧啶、卡培他滨、吉西他滨、氟达拉滨、阿糖胞苷、巯基嘌呤、硫鸟嘌呤、喷司他丁以及羟基脲)。

干扰细胞复制的化学治疗剂包括：紫杉醇、多西他赛和相关类似物；长春新碱、长春花碱和相关类似物；沙利度胺、来那度胺和相关类似物(例如，CC-5013和CC-4047)；蛋白质酪氨酸激酶抑制剂(例如，甲磺酸伊马替尼和吉非替尼)；蛋白酶体抑制剂(例如，硼替佐米)；NF-κB抑制剂制剂，包括IκB激酶抑制剂制剂；结合至癌症中过表达、不当表达或活化的蛋白质并且因而下调细胞复制的抗体(例如，曲妥珠单抗、利妥昔单抗、赛妥昔单抗和贝伐单抗)；以及已知于癌症中上调、过表达、不当表达或活化的蛋白质或酶的其它抑制剂，其抑制下调细胞复制。

在一些实施方案中，本发明的抗体可在

(硼替佐米)之前、同时或之后使用。

治疗方式

在本发明的方法中，使用疗法来针对疾病或疾患提供阳性治疗应答。术语“阳性治疗应答”是指疾病或疾患的改善和/或与疾病或疾患相关的症状的改善。例如，阳性治疗应答将指疾病的以下改善中的一者或多者：(1)赘生性细胞的数目减少；(2)赘生性细胞死亡的增加；(3)赘生性细胞存活的抑制；(5)肿瘤生长的抑制(也就是说，在一定程度上减慢，优选停止)；(6)患者存活率增加；以及(7)从与疾病或疾患相关的一种或多种症状得到一定缓解。

任何给定疾病或疾患的阳性治疗应答可通过对所述疾病或疾患具有特异性的标准化应答标准测定。可使用筛选技术如磁共振成像(MRI)扫描、x射线成像、计算机断层(CT)扫描、骨扫描成像、内视镜检法以及肿瘤活检采样，包括骨髓抽吸(BMA)和循环中肿瘤细胞的计数针对肿瘤形态(即，总体肿瘤负荷、肿瘤大小等)的变化来评估肿瘤应答。

除了这些阳性治疗应答之外，正经受疗法的受试者可经历与疾病相关的症状的改善的有益作用。对于B细胞肿瘤，受试者可经历所谓的B症状，例如盗汗、发热、重量减轻和/或荨麻疹的减少。对于恶性前疾患，利用抗CD38治疗性抗体的疗法可阻断相关恶性疾患的发展和/或延长其发展(例如患有未明意义的单克隆丙种球蛋白病(MGUS)的受试者中多发性骨髓瘤的发展)前的时间。

疾病的改善可表征为完全应答。术语“完全应答”是指不存在临床上可检测的疾病，并且在骨髓瘤情况下任何先前异常的射线照相研究、骨髓以及脑脊髓液(CSF)或异常单克隆蛋白正常化。

这种应答可在根据本发明的方法治疗之后持续至少4至8周或至少6至8周。或者，疾病的改善可归类为部分应答。术语“部分应答”可指所有可测量的肿瘤负荷(即，受试者中存在的恶性细胞的数量，或所测量的肿瘤块的体积或异常单克隆蛋白的量)在不存在新病灶下减少至少约50％，其可持续4至8周或6至8周。

根据本发明的治疗包括“治疗有效量”的所用药物。

术语“治疗有效量”和“治疗有效剂量”是指足以减轻或改善病症或其一种或多种症状的严重程度和/或持续时间；预防病症的进展；引起病症消退；预防与病症相关的一种或多种症状的复发、发展、发作或进展；或以达到所需治疗结果所需的剂量和时间段，增强或改善另一种疗法(例如，预防剂或治疗剂)的预防性或治疗性作用的疗法的量。治疗有效量可根据诸如个体的疾病状态、年龄、性别和体重以及药物在个体中引发所需应答的能力的因素而变化。治疗有效量还是其中抗体或抗体部分的任何毒性或有害作用被治疗有益作用超过的量。用于肿瘤疗法的抗体的“治疗有效量”可通过其稳定疾病进展的能力来测量。化合物抑制癌症的能力可在预测在人肿瘤中的功效的动物模型系统中进行评价。

或者，可通过熟练从业人员已知的体外测定通过检查化合物抑制细胞生长或诱导细胞凋亡的能力，评价组合物的这种性质。治疗有效量的治疗性化合物可减小肿瘤大小或以其它方式改善受试者中的症状。本领域技术人员将能够基于如受试者的体型、受试者症状的严重程度和所选的特定组合物或施用途径等因素来确定此类量。

抗CD38抗体药盒

在本发明的另一方面，提供了用于治疗与血液癌症有关的疾病或疾患的药盒。在一个实施方案中，所述药盒包含一定剂量的本文所述的抗CD38抗体，如AB79。在一些实施方案中，本文提供的药盒可含有一个或多个剂量的如本文所提供的液体或冻干制剂。当药盒包含本文所述的抗CD38抗体(如AB79)的冻干制剂时，通常，所述药盒还将含有用于重构液体制剂的合适液体，例如无菌水或药学上可接受的缓冲液。在一些实施方案中，所述药盒可包含预包装在注射器中的本文所述的抗CD38抗体制剂，以用于由医疗保健专业人员进行皮下施用或用于家庭使用。

在某些实施方案中，所述药盒将用于单次施用或一定剂量的本文所述的抗CD38抗体，如AB79。在其它实施方案中，所述药盒可含有用于皮下施用的多个剂量的本文所述的抗CD38抗体，如AB79。在一个实施方案中，所述药盒可包含预包装在注射器中的本文所述的抗CD38抗体制剂，以用于由医疗保健专业人员进行皮下施用或用于家庭使用。

制品

在其它实施方案中，提供了一种含有可用于治疗上述病症的材料的制品。所述制品包括容器和标签。适合的容器包括例如瓶、小瓶、注射器和试管。所述容器可由多种材料，诸如玻璃或塑料形成。容器容纳对治疗疾患有效的组合物并且可具有无菌入口(sterileaccess port)(例如，容器可为具有可经皮下注射用注射针刺破的塞子的静脉输液袋或小瓶)。组合物中的活性剂是所述抗体。容器上或与容器相关的标签指示组合物用于治疗所选的疾患。所述制品还可包括第二容器，所述第二容器包括药学上可接受的缓冲剂如磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液或右旋糖溶液。所述制品还可包括从商业和使用者观点来说所期望的其它材料，包括其它缓冲剂、稀释剂、过滤器、针、注射器以及带有使用说明书的包装插页。

实施例

实施例1：食蟹猴中抗CD38抗体的基于模型的表征

抗CD38抗体AB79结合食蟹猴(cyno)CD38，从而使其与达雷木单抗(Darzalex^TM)(一种最近被批准用于治疗多发性骨髓瘤的细胞溶解性CD38单克隆抗体)区别开。这项独特的功能支持将食蟹猴用于临床前研究，以表征AB79药代动力学(PK)、药效学(PD)和安全性。为此，开发了测定来测量药物浓度、免疫原性并定量食蟹猴血液中的T细胞、B细胞和NK淋巴细胞。在8项药理和毒理学临床前研究中评估了这些参数。在所测试的细胞群体中，CD38在NK细胞上的表达最高；因此，假定对NK细胞的药物作用最接近对所考虑的靶细胞、成浆细胞、浆细胞和其它活化的淋巴细胞的作用。

汇集了来自健康猴中的8项研究的数据，使用0.03–100mg/kg的剂量范围和描述药物动力学的数学模型，并开发了每种细胞类型的暴露-效应关系。NK细胞耗减被鉴定为AB79最敏感的药效学作用。用转换模型(耗减率EC50＝34.8μg/mL)描述了这种耗减，并且以0.3mg/kg的IV剂量实现了完全耗减。还观察到使用直接应答模型(EC50＝9.43μg/mL)对T细胞计数的中间影响，以及使用4通过室模型(消耗率EC50＝19.3μg/mL)对B细胞计数的中间影响。这些分析证实了以下观察结果：AB79以不同的速率清除了每个测量到的淋巴细胞亚群，并且需要不同的时间间隔来耗减血液区室。

描述PK和PD数据的数学模型是获得有关药物暴露与效应之间关系的机械和定量见解的有用工具(Friberg等人(2002)J.Clin.Oncol.20:4713-4721；Mager等人(2003)DrugMetab.Dispos.31:510-518；Han和Zhou(2011)Ther.Deliv.2:359-368)。可利用IgG抗体的典型PK特征(包括分布和消除)、猴与人之间的生理和遗传相似性来解释AB79的药理学(Glassman和Balthasar(2014)Cancer Biol.Med.11:20-33；Kamath(2016)DrugDiscov.Today Technol.21-22:75-83)。此外，这些模型已成功应用于预测健康人受试者的PK浓度和PD效应(Han和Zhou(2011)Ther.Deliv.2:359-368)。

材料和方法

猴研究的总结按时间次序显示在表3中。主要进行单剂量研究2、7和8，以评价静脉内(IV)和皮下(SC)施用的AB79的PK和PD。进行了重复剂量研究以评价安全性、PK和PD，包括在GLP条件下进行的两项4周的研究(研究1和3)和三项13周的研究(研究4、5和6)。在13周的研究5中，发生了给药错误。最低剂量组的动物一次接受了0.01mg/kg而不是预期的0.1mg/kg(第二次剂量)，然后继续接受0.1mg/kg。将这些数据添加至具有实际施用的给药量的正确信息的数据集中。研究6重复了研究5的低剂量0.1mg/kg QW组。所有动物研究均根据美国国立卫生研究院通过和颁布的实验室动物的护理和使用指南进行。

表3.按时间次序的AB79猴研究

IV：静脉30分钟输注(研究1-4)或弹丸式(研究5-8)，SC：皮下注射(研究7的第4组和研究8的3组)，PK：密集PK采样，PD：用于流式细胞仪分析的密集采样全血，产生T细胞、B细胞和NK细胞的细胞计数数据。plc-安慰剂，“4周”或“13周”描述治疗期的持续时间，tox：毒理学研究，q2wk：每隔一周给药时间表。

生物分析

使用由Charles River Laboratories(Reno,NV)开发和执行的经过验证的方法分析PK。简言之，使用间接酶联免疫吸附测定(ELISA)测量猴血清中AB79的浓度。96孔微量滴定格式用针对AB79的抗独特型抗体包被。将空白、标准品和含有各种浓度的AB79的质量控制(QC)样品添加至板上，并在室温(RT)下孵育55-65分钟。在洗涤微量滴定板后，添加过氧化物酶缀合的affinipure小鼠抗人IgG(过氧化物酶AffiniPure小鼠抗人IgG，Fcγ片段特异性；Jackson ImmunoResearch)，并在板上再孵育55-65分钟。再次洗涤板，并将四甲基联苯胺(TMB)添加至孔中以产生生色团，并通过添加终止溶液(2N硫酸)来终止显色。使用

190酶标仪(Molecular Devices)测量450nm处的吸光度，并使用4参数逻辑加权(1/y²)标准校准曲线来计算AB79浓度。在研究1(表3)中，血清中AB79的定量下限(LLOQ)是0.061μg/mL，并且在所有其它研究中是0.05μg/mL。

抗AB79抗体的测定(免疫原性)

使用由Charles River Laboratories(Reno，NV)验证并执行的定性电化学发光(ECL)方法分析猴血清的抗药物抗体(ADA)筛选。简言之，将未稀释的血清样品与300mM乙酸一起孵育。将酸解离的样品在生物素化的AB79、用SULFO-TAG标记的AB79(Meso ScaleDiagnostics，在Charles River Laboratories标记)和1.5M Trizma碱的混合物中孵育，以中和酸并形成免疫复合物。然后将此复合物添加至链霉抗生物素蛋白包被的MSD板(MesoScale Diagnostics)中并使其结合。在洗涤后，通过向板中添加MSD读取缓冲液T(MesoScale Diagnostics)并随后经由Ru(bpy)3的电化学反应激发SULFO-TAG^TM以产生发光(光)来检测复合物，使用MSD Sector 6000(Meso Scale Diagnostics)读取所述发光。发光的量与个体样品血清中存在的猴抗AB79抗体的水平相关。

血细胞的表征

为了评价和比较人与猴之间的AB79结合水平，将来自各自的血液样品收集到肝素钠试管中。将血液的等分试样(100μL)与适当体积的抗体混合(图1)，并在黑暗中于室温下孵育15–20分钟。在孵育后，添加1mL的BD FACS裂解液(1X；BD Biosciences；San Jose,CA)裂解红细胞，并将细胞在室温下在黑暗中孵育10分钟，然后离心，倾析并重悬于1mL具有牛血清白蛋白(BD Biosciences)的染色缓冲液中。再次离心细胞，倾析并250μL的Flow Fix(不含钙和镁的杜尔贝科氏-PBS(Life Technologies，Carlsbad，CA)中的1％多聚甲醛)，并使用FACSCanto^TM II流式细胞仪(BD Biosciences)通过流式细胞术分析测量荧光。对猴NK细胞(CD3-，CD159a+)、B细胞(CD3-，CD20+)和T细胞(CD3+)以及人NK细胞(CD3-，CD16/CD56+)、B细胞(CD3-，CD19+)和T细胞(CD3+)进行了测量。使用Rainbow珠粒(Spherotech；LakeForest,IL)生成的标准曲线，将每个细胞群体的AB79染色的平均荧光强度转换为等效可溶性荧光(MOEF)分子的单位。

在表3概述的研究中，使用由Charles River Laboratories(Reno,NV)开发和执行的经过验证的方法对细胞进行染色和分析。在AB79处理之前和之后多次，将猴血液样品收集到肝素钠试管中，并使用FACSCanto^TM II流式细胞仪(BD Biosciences)通过流式细胞术分析测量特定淋巴细胞群体。将商业抗体和CD38抗体(Ab19；美国专利号8,362,211)滴定至最佳浓度以进行染色。鉴定了猴CD38+/-、T细胞(CD3+)、B细胞(CD3-/CD20+)和自然杀伤(NK)细胞(CD3-/CD20-/CD16+)群体，并使用CD45TruCount^TM管(BD Biosciences)定量了淋巴细胞。将每种血液样品的大约100μL等分试样置于96孔板的适当孔中，并以指定的体积添加抗体，混合并在黑暗中在室温下孵育至少30分钟。在孵育后，将红细胞溶解，将样品混合，并且在黑暗中在室温下再孵育10分钟。将板离心，并倾析上清液。然后将细胞团块重悬于1,800μL的染色缓冲液中，将样品混合，离心并倾析上清液。将细胞团块重悬于500μL的含胎牛血清的染色缓冲液中，并将大约300μL细胞悬液转移至96孔v底板进行分析。将NK细胞百分比以及总T细胞和B细胞的百分比应用于通过TruCount^TM管(BD Biosciences；San Jose,CA)获得的细胞计数值，并用于确定每个细胞群体的绝对细胞计数。在研究1-4中，在基线时用标记的抗CD38抗体AB79或Ab19评估CD38+NK细胞、B细胞和T细胞亚群(图1)。尽管TSF-19结合至不同的表位，但结果非常相似，并且因此未单独列出。立即对加工的样品进行分析。

PK模型开发

在PK模型开发期间，研究了一室、两室和三室模型结构。如通过拟合优度(GOF)图和目标函数值(OFV)的降低所判断，两室模型明显优于一室模型。基于诊断图的目视检查，没有必要引入第三室来充分描述数据。使用对数转换F＝exp(PAR)/(1+exp(PAR))对生物利用度(F)进行建模，其中PAR表示模型参数，以确保估计值介于0与1之间。使用靶标介导的药物处置(TMDD)过程的准稳态(QSS)近似模型对低浓度下的非线性PK进行建模(Gibiansky和Gibiansky(2009)Expert Opin.Drug Metab.Toxicol.5:803-812)。

图3C中提供所述模型的示意图。对于QSS近似，假定与所有其它过程相比，游离药物C、靶标R和药物靶标复合物RC的稳态浓度非常快速地确立。这意味着结合过程与解离和内化过程相平衡，并且以下等式以适当的单位成立：K_ON*C*R＝(K_OFF+K_INT)*RC，其中K_ON表示结合速率常数，并且K_OFF表示解离速率常数，并且K_INT表示内化速率常数。

研究了所有参数的受试者间变异性(BSV)，并使用以下类型的指数模型进行建模：PAR_i＝TVPAR*e^ETAPAR _i，其中PAR_i是个体，并且TVPAR是典型参数估计值，并且ETAPAR_i是个体偏差i的估计值。假设ETAPAR_i值遵循平均值为零的正态分布。用组合的相加和比例误差模型描述了残值(Beal和Sheiner(1992)NONMEM User Guides,in University ofCalifornia CA)。

对以下参数进行了研究，以鉴定对AB79 PK的潜在协变量影响：体重、性别、剂量、施用途径和研究。

PK-PD模型开发

对于三种细胞类型中的每一种，分别进行PK-PD模型开发。注意，对于模型开发，未使用接近药物施用(给药后<8小时)的测量值，因为它们受到可能由于在短时间内采集了多个血液样品所致的非特异性药物非依赖性作用的影响(图4)。PK模型和参数估计值是固定的。测试了各种形式的转换、通过室和直接应答模型(Friberg等人(2002)J.Clin.Oncol.20:4713-4721；Mager等人(2003)Drug Metab.Dispos.31:510-518)。在转换模型中，以有或无Hill因子的Emax型模型的形式，将药物作用引入细胞消除率。用符号表示，Emax模型是以下形式的药物浓度c的函数f：f(c)＝EMAX*c^H/(c^H+C50^H),EMAX表示最大作用，C50表示实现最大作用的一半时的药物浓度，并且H是Hill因子。在通过室模型(TCM)中，引入了药物作用并在不同位置进行了测试：增殖速率、循环细胞和第三通过室。还测试了这些作用的组合以及数据是否支持从循环至增殖速率的反馈机制的存在。此外，测试了有和无Hill因子的Emax型直接应答模型，以描述药物浓度-效应曲线。

引入随机效应参数以估计关于基线细胞计数、细胞生产率(KIN)、通过室模型(MTT)中的通过时间、C50和EMAX的受试者间变异性。数据集中提供了个体平均基线细胞水平(BL列)。在模型中将其用作典型值。添加了随机效应参数，以基于个体的所有测量值调整个体基线估计值。PD残值用比例误差模型描述。

为了在建模(PK和PK-PD)OFV过程期间进行模型验证，使用标准误差、GOF图以及个体预测对比数据图来评估所述模型并将它们与替代模型进行比较。

使用了以下软件包：NONMEM(版本7.2)、KIWI(版本1.6)、Berkeley Madonna(版本8.3.14)、PSN(版本4)和R(版本3.3.0)。

数据集准备

收集了来自8项猴研究的数据集，以单一格式进行重组，并合并为三个独立的NONMEM可读PK-PD数据集。所述三个数据集中的每一个都含有猴的个体特征(研究，ID，组，体重，性别)、给药信息、PK和NK细胞、B细胞或T细胞数据。对于对照组的动物，假定隐含无血清AB79水平，则仅将细胞计数而不将PK数据添加至数据集。关于抗药物免疫原性状态(ADA)的时间分辨信息，即含有定量测量结果和0/1标志变量ADAF的TITER(如果ADA影响AB79的浓度，则ADAF＝1；如果ADA不影响AB79的浓度，则ADAF＝0)被添加在每一观察结果的单独列中。在不同的研究中，ADA滴度采用不同的方法规范进行测量，并且因此在研究之间，所述值在定量上不能直接比较。为了在所有研究中以一致的方式利用ADA信息，分别对每只动物应用以下程序：在比初始测量水平晚7天的时间点增加的ADA滴度被视为ADA阳性，并在数据集中标记(ADAF＝1)。如果在一个时间点将样品标记为ADA阳性，则在此动物中，无论测量的滴度如何，在所述时间点之后采集的所有样品也都标记为ADA阳性。在模型开发过程中，未将ADA阳性观察结果用于参数估计。注意，ADA采样时间点影响的PK浓度的PD测量值也标记为ADAF＝1。

对于细胞计数数据，将每种细胞类型(NK细胞、B细胞和T细胞)的个体基线值计算为给定动物的所有可用给药前测量值的平均值。在大多数研究中，这是单次测量值。然后，将每只动物的基线值添加为第一次给药事件(TIME＝0)时的观察结果，并作为BL列中的常数添加至相应动物的每次观察结果。基于此基线值，计算每个观察到的细胞计数的基线百分比，并将其添加到数据集中。

猴PK参数的缩放

最终的PK和PK-PD模型被用作首次人临床试验的模拟PK和PK-PD分布的起点。来自治疗性单克隆抗体的数据的比较分析表明，可对猴研究中得出的PK参数进行缩放来以可接受的准确性预测人PK分布(Han和Zhou(2011)Ther.Deliv.2:359-368)。所述出版物指出，使用0.85的固定指数，可以可靠地预测单克隆抗体的人清除率。因此，此关系适用于衡量人清除率参数(CL，Q)，而使用体重(BW)之间的直接关系衡量体积参数(VC，VP)：

结果

AB79的药代动力学

从健康猴中除安慰剂组以外的所有8项研究汇集PK数据集(表3)。所述集合总计含有来自140只动物的数据，其中58只为雄性，并且82只为雌性。所研究动物的体重在2.1至4.7kg的范围内，并且剂量在0.03至100mg/kg体重(mg/kg)的范围内。在研究7的一个组和研究8的三个组中，SC施用了0.03、0.1、0.3和1mg/kg的剂量(总计15只动物)。汇集的数据集含有大于LLOQ的2,199个可测量的PK观察结果(图3A，3B)。与AB79浓度平行地评估了ADA。发现229个PK观察结果受ADA影响(图5)。第一给药后对PK进行了最密集地采样，并且甚至在长期毒理学研究中，大多数动物在第98天之前就终止。只有研究4包括恢复组，并且只能收集来自4只动物的PK数据，2只来自80mg/kg组并且来自30mg/kg和3mg/kg组各一只(图3B)。

最初，对于每项猴研究，都使用标准非区室技术(NCA)进行PK分析。基于单剂量研究(IV弹丸式注射或30分钟IV输注)，计算出末期(Vz)的分布体积在64至116mL/kg的范围内，清除率在6.04至14.7mL/kg/天的范围内，并且终末消除半衰期(T1/2)在4.75天至11.2天的范围内。发现浓度时间曲线下面积(AUC)和最大浓度(Cmax)值在较大范围内随剂量成比例增加。只有最低剂量组(<1mg/kg，图3D-3F)的PK分布图提供可能由靶标介导的机制(TMDD)引起的浓度低于0.5μg/mL时非线性增加的清除率的证据(Kamath(2016)DrugDiscov.Today Technol.21-22:75-83)。基于除两个最低剂量组(剂量>0.3mg/kg)以外的所有猴研究的数据，构建了线性2室模型。当模拟最低剂量组的PK并将其与测量到的浓度重叠时，很明显线性模型过度预测浓度(图3D-3F)。

单剂量SC施用后的可用PK数据揭示，与相同剂量的IV组相比，SC组的Cmax低70％-80％，并且AUC相当。未观察到雄性与雌性猴之间PK参数的差异。这些初始分析的结果被用作模型开发的起点。

PK模型开发

模型开发从单个IV剂量数据开始，然后利用更复杂的数据逐步扩展初始模型。与其它治疗性抗体类似，PK大致遵循线性2室模型(Kamath(2016)Drug Discov.TodayTechnol.21-22:75-83)。用准稳态(QSS)近似对描述低浓度下加速清除的非线性消除分量(TMDD)进行建模(Gibiansky和Gibiansky(2009)Expert Opin.Drug Metab.Toxicol.5:803-812)。假定药物-靶标缔合过程比药物的解离、分布和消除以及靶标和药物-靶标复合物消除的过程快得多产生简化的TMDD模型(图3，表4)。低浓度下的数据量相对较小，使得无法在软件程序的单个估算运行中估计所有参数。因此，首先通过集中于低单剂量研究7和8的数据来估计TMDD模型的参数。然后在整个数据集的最终估计期间将所得的TMDD参数估计值保持固定(表4)。

表4.群体PK建模结果、参数估计值和标准误差百分比(％SEM)

^$K_SYN是受体CD38的合成速率。由于不可获得实际浓度测量值或有关CD38体内合成或降解速率的信息，因此将“u”用作CD38的某些未知量的单位。

*TMDD参数的估计值和标准误差是从单独的运行中获得的，所述运行集中于低剂量组的数据，然后被固定用于其它PK参数的最终估计。NE：未估计。

当添加SC组的数据时，获得吸收参数K_A和F的估计值。所有SC数据均来自研究7和8的四个较低单剂量组。这些较低的剂量(≤1mg/kg)涵盖了临床相关范围，但可能限制较高剂量的参数估计值的通用性。

PK参数的受试者间变异性(BSV)用指数模型描述。吸收速率(K_A)、清除率(CL)和外周分布体积(V_P)的估计BSV为约40％，并且中心分布体积(V_C)为约20％(表4)。协变量分析鉴定了施用途径对V_C的影响。如果IV施用，则V_C的典型值是0.141L，并且如果SC施用，则是0.043L(小约70％)。其它重要的协变量效应尚未鉴定。由于在低浓度下数据量有限，因此仅针对内化速率K_INT(BSV：49％)估计了受试者间变异性和TMDD参数的个体预测值。基于剩余误差、OFV、标准误差、GOF图和个体曲线拟合的模型评价证实了最终模型充分描述了健康猴中AB79的PK(表4，图6)。

药效学

通过流式细胞术分析比较了在人和猴血液NK细胞、T细胞和B细胞上AB79结合的水平。如图7所示，基于AB79等效荧光(MOEF)分子，猴淋巴细胞的CD38表达水平与其人对应物相比略低，但在细胞类型之间具有相似的关系，例如CD38表达在NK细胞上>B细胞>T细胞。这些数据支持将这种非人类灵长类物种用作相关模型，以帮助预测AB79在人中的PD活性的潜力。

为了深入定量分析药物暴露(PK)与细胞耗减程度和持续时间(PD)之间的关系，从所有8项猴研究的PK浓度、NK细胞、B细胞和T细胞计数编译了数据集，包括安慰剂处理的动物(在适用的情况下)(表3)。数据集的初始表征表明，在基线时，T细胞的中值为3,732个细胞/μL(四分位数间距(IQR)：2,881–5,176)，并且是最丰富的淋巴细胞亚型，相比之下B细胞为1,279个细胞/μL(IQR：860.8–1,890)，并且NK细胞为685个细胞/μL(IQR：482.8–970.1)。在研究1-4中评估了这些细胞群体上的基线CD38表达(表3，n＝67)。86.7％(SD11.3)的NK细胞表达CD38，变异性较小。相比之下，58.7％(SD 27.0)的B细胞和34.5％(SD 24.5)的T细胞表达CD38，变异性较大。

来自安慰剂处理的动物的数据表明，每种细胞类型的平均数量在个体动物之间随时间推移而变化，从一个个体内部的变异性来看，将预期超过一个(图8)。例如，个体安慰剂曲线的B细胞计数的平均变异系数是27％，但个体平均B细胞水平在436.6至4,389的范围内。此外，来自雄性和雌性动物以及来自不同研究的动物的平均基线淋巴细胞数量之间也存在差异，从而增加了变异性(图9)。基于这些结果，相对于其个体基线值(百分比)，而不是每个时间点的绝对细胞数量计算每次处理后细胞计数。例如，值33％表示在样品中，细胞计数是基线细胞计数的1/3。这提供了可在整个数据集中进行比较的标准化值。

AB79结合细胞的耗减迅速开始表明初始血液浓度驱动淋巴细胞计数的降低(图10)。在0.3mg/kg AB79的IV剂量下，对NK细胞的中值最大作用是93.9％的耗减(即，基线细胞计数的6.1％剩余)。在0.1mg/kg下，峰值耗减是71％(基线的29％剩余)。在剂量>0.3mg/kg下，NK细胞在血液区室中几乎被完全耗减(最低点(范围)：基线的1.06％(0.17，6.23)；图10A)。在0.3mg/kg的单给药后，NK细胞需要大约7天来恢复至基线的50％的平均值，尽管恢复动力学在个体之间存在很大差异(图10B，10C)。与这些结果一致，还在研究7中的一组动物中测试了NK功能(n＝3/组；表3)。这一实验表明，在用0.1mg/kg AB79处理的动物中，处理后48小时的剂量依赖性降低，血液NK活性变化最小(100:1效应物:靶标比率下的裂解％±SD；44.5％±23.6％对比41.4％±25.8％)，并且在用1.0mg/kg处理的动物中，NK活性几乎完全丧失(100:1效应物:靶标比率下的裂解％±SD；37.4％±10.3％对比6.8％±12.5％)。NK细胞功能显示在第57天恢复，测量了下一个时间点(100:1效应物:靶标比率下的裂解％±SD；16.0％±11.9％)。

与NK细胞相比，B细胞和T细胞的耗减程度较小，这与其较低的CD38表达水平一致(图7)。例如，在0.3mg/kg IV AB79下，B细胞的中值最大耗减水平为基线的45％，并且T细胞的耗减至基线的43％(图10D，10G)。在此剂量水平下，并非在所有动物中实现了B细胞计数与基线相比的50％降低。仅在≥30mg/kg的最高剂量下，B细胞几乎完全耗减(图10D)。T细胞的耗减程度与B细胞相似，但恢复更快(图10G-I)。

在两项研究7和8中，比较了IV和SC给药(图10C、10F、10I)。在施用途径之间，细胞耗减没有明显差异。在较低剂量下(研究8)，仅在NK细胞群体中观察到低于基线值50％的持续(>24小时)细胞耗减，而在T细胞和B细胞中未观察到；尽管所有细胞在早期时间点都显示出特异性细胞耗减。不论施用途径如何，剂量组之间NK细胞耗减的起始时间似乎相似，并且耗减的持续时间是剂量依赖性的。到第57天观察到所有测试组的细胞恢复。

PK-PD模型

开发了单独的PK-PD模型来描述AB79暴露对NK细胞、B细胞和T细胞的影响。在PK-PD建模期间，将PK参数保持固定为最终PK模型的估计值，并尝试了多种PD模型(有关详细信息，参见材料和方法)。用转换模型充分描述了外周血中的NK细胞群体，并且经由PK浓度与Emax型模型将耗减药物作用与耗减速率联系起来。在此模型中，EMAX表示额外NK细胞耗减的最大速率，并且C50表示额外NK细胞耗减的速率为半数最大时的浓度。NK细胞的结构PK-PD模型具有以下形式：

在所述公式中，NK表示实际的NK细胞计数，K_IN表示产生速率，并且K_OUT表示不存在药物时的消除速率。注意，对于给定的基线测量值，BL K_OUT由等式K_OUT＝K_IN/BL定义。c表示中央区室中的AB79浓度。当一次估计所有参数时，软件程序不能产生稳定的结果。KIN、EMAX和C50的个体估计值高度相关。此外，由于不同剂量的最大作用之间的区别有限(参见前一章节)和较大个体间变异性，因此不能预期所有参数的准确估计值。在一系列估计中，将三个参数KIN、EMAX和C50中的一个或两个固定为不同的值，并对其它参数进行估计。在10,000的固定KIN和322的EMAX情况下，实现稳定的运行和合理的拟合度。典型C50估计值是29.0μg/mL(表5)。此外，通过选择较高值和较低值的不同组合来测试所选KIN和EMAX值的灵敏度。受试者间变异性较大，NK产生率K_IN为113％并且C50为149％，这与基线和所处理动物之间的较大个体差异一致。基于剩余误差、OFV、标准误差、GOF图和个体曲线拟合对模型进行了评价(表5，图4)。

表5.PD建模结果、参数估计和标准误差(百分比)(％SEM)

*对于每只动物，典型基线值是所有给药前测量值的平均值；NE：未估计

通过区室模型优于直接应答或转换模型来描述AB79诱导的B细胞耗减。事实证明，四个通过区室是足够的，并且用关于耗减速率的Emax型模型描述了药物作用。与NK细胞耗减模型相似，EMAX表示最大速率，并且C50表示速率为半数最大时的浓度。因此，B细胞的结构PK-PD模型由以下五个等式给出：

对于i＝2,3,4

TR_i(i＝1-4)表示四个通过区室。K_TR、K_PROL和K_CIRC由以下等式定义：K_TR＝K_PROL＝K_CIRC＝4/MTT，其中MTT是平均通过时间(Friberg等人(2002)J.Clin.Oncol.20:4713-4721)。B表示血液中的B细胞计数，并且c表示中央区室中的AB79浓度。

固定的EMAX为2.37，典型C50为19.5μg/mL，并且典型平均通过时间(MTT)为8.48天(表5)。相对于最大AB79浓度的最大作用延迟被良好地捕获。所述模型表明AB79主要影响循环B细胞。不需要额外的作用，并且也不需要对祖细胞的反馈回路来描述可用的猴B细胞数据。关于MTT的受试者间变异性为135％并且基线B细胞水平(BASE)的变异性为24.1％表明动物之间存在较大个体差异。

用直接应答模型充分描述了药物诱导的T细胞耗减，伴随快速恢复：T(c)＝BL_T*(1-EMAX*c/(c+C50))，其中T表示实际T细胞计数，BL_T表示基线时的T细胞计数，并且c表示中央区室中的AB79浓度。典型C50估计为11.86μg/mL，并且典型EMAX估计为0.47，从而表明在这种情况下，只有大约一半的T细胞可被AB79耗减(表5)。然而注意，关于EMAX的受试者间变异性接近70％。在此模型中，与NK细胞和B细胞耗减模型不同，C50表示T细胞耗减为半数最大时的浓度。

至于NK细胞，基于剩余误差、OFV、标准误差、GOF图和个体曲线拟合对B细胞和T细胞的最终PK-PD模型的模型评价证实了它们充分描述了可用的猴数据(表5，图4)。

人PK和细胞耗减的模拟

猴PK和PK-PD模型用作基于模型的人PK和细胞计数数据模拟的起点，以支持设计并在健康志愿者中证明用于首次人(FIH)临床试验的选定剂量的合理性。为此，假定包括来自猴数据的TMDD在内的模型结构也描述人PK和随后的淋巴细胞耗减的主要特征。为了获得对人PK参数的预测值，使用单克隆抗体的直接方法缩放了以下猴PK参数的估计值：中央和外周分布体积(V_C，V_P)、清除率(CL)和区室间清除率(Q)(Han和Zhou(2011)Ther.Deliv.2:359-368)。AB79是完全人单克隆抗体，并且因此，预期与猴中所观察到的相比，人中的免疫原性更低。因此，为了进行建模和模拟，从数据集中排除了ADA阳性样品。

使用缩放模型，模拟暴露，并按照FIH研究的计划，经由2小时输注(IV)或经由皮下注射(SC)0.0003至1.0mg/kg的单剂量的NK细胞、B细胞和T细胞耗减分布图(图11)。根据模拟，在0.0003mg/kg的IV给药后，将不预期任何可观察到的药物诱导的对淋巴细胞计数的影响，以及甚至不高于LLOQ的不可测量的PK浓度。由于变异性且由于剂量组的大小限制，假定对NK细胞计数的最小可检测的药物作用将是降低至少10％。在0.01mg/kg IV和0.03mg/kgSC的剂量下，预计NK细胞将被耗减至少于基线的剩余90％。

在0.3mg/kg的IV剂量下，预计输注结束后3小时内NK细胞耗减至基线的剩余17％，并在在11天后恢复至超过50％(图11)。在相同剂量下，所述模型预测B细胞在2.5天后最大耗减至基线的67％，并且T细胞立即耗减至基线的86％。对于0.3mg/kg的相同剂量的皮下施用，所述模型预测它导致更少和稍后的最大耗减(相对于基线的最低点：NK细胞37％，B细胞74％，T细胞94％)。

这些体外和体内临床前研究表明，猴是研究AB79的药理学的合适动物模型。来自不同剂量和给药方案的八项猴研究的NK细胞、B细胞和T淋巴细胞的大量采样PK和细胞计数数据为全面和定量了解AB79剂量、暴露和细胞耗减之间的关系提供了丰富的数据来源。所生成的群体PK和PK-PD模型充分描述了观察到的数据，并为预测暴露和淋巴细胞耗减提供了强大的工具，不仅用于猴子未来研究，而且用于人受试者中的临床试验。

已进行了健康志愿者中首次人(FIH)单次上升剂量试验(www.clinicaltrials.gov：NCT02219256)(图12)。AB79的预期药理学作用是活化的淋巴细胞的耗减。然而，淋巴细胞的大量且持久耗减(增强的药理学作用)可导致免疫系统受损，这对患者或健康研究参与者而言是不可耐受的。因此，对于FIH试验选择0.0003mg/kg的安全I.V.起始剂量。

猴数据表明，确定NK细胞耗减是最敏感的生物学效应。PK-NK模拟结果有助于确定0.01mg/kg IV的最小剂量水平，在所述剂量水平下最敏感的药理学作用(NK细胞耗减)将预期在人体中可检测到。FIH试验的最新数据揭示，AB79的剂量依赖性和细胞类型特异性耗减效应的总体模式与基于模型的预测(准备中的手稿)一致。AB79似乎比预期的效率甚至更高。例如，在0.03mg/kg的IV剂量下，人受试者中的NK细胞被耗减至剩余基线的少于10％。在此剂量下，猴中的中值最低点(最低耗减点)是20.0％(图10)。

三种溶细胞性抗CD38单克隆抗体(达雷木单抗、伊沙妥昔单抗和MOR202)处于多发性骨髓瘤的临床开发中(van de Donk等人(2016)Immunol.Rev.270:95-112)。达雷木单抗(Darzalex^TM，作为静脉内输注给与)最近在美国被批准用于多发性骨髓瘤，并且在欧洲被批准用于非霍奇金淋巴瘤。与AB79不同，达雷木单抗不会与猴CD38交叉反应。因此，不可能将我们的结果与食蟹猴中AB79与达雷木单抗进行比较。此外，多发性骨髓瘤患者具有高水平的CD38阳性恶性细胞，对于这种癌症适应症可能需要更高的有效抗体浓度(de Weers等人(2011)J.Immunol.186:1840-1848)。

然而，值得注意的是，达雷木单抗被批准以16mg/kg的每周IV剂量用于多发性骨髓瘤中，即使AB79在大约1mg/kg下实现了外周NK细胞的完全耗减并且在大约3mg/kg下实现了B细胞的完全耗减(图10)。

尽管有来自8项猴研究的丰富数据库，但仍认识到许多局限性。即使在0.03mg/kg的最低研究剂量下，AB79也有效地耗减NK细胞。在如此低的剂量下，PK迅速下降至低于生物分析测定的定量限，这阻止了在较低剂量下分辨暴露-效应关系。此外，在临床前开发过程中，认识到最大药物浓度后不久发生最大细胞耗减，但是耗减早期阶段的分辨率在技术上受到总体样品数量的限制，并且可能由于重复采血而受到非特异性细胞耗减的限制(抽血效应)。观察到抽血效应作为瞬时全血细胞减少症，其特征在于耗减不结合AB79且不依赖剂量的细胞类型，从而表明这是由于多次抽血导致血容量损失，而不是AB79的任何特异性作用(图13)。因此，准确估计模型参数(尤其是针对NK细胞耗减)的能力受到限制，并且KIN和EMAX的典型值需要固定来获得稳定且足够的估计结果。

不能测量AB79对组织浆细胞或成浆细胞的影响。然而，像浆细胞和成浆细胞一样，NK细胞在其表面上具有高水平的CD38，并且特定淋巴细胞亚群的细胞耗减效率至少部分地取决于CD38的表达水平。因此，AB79对成浆细胞和浆细胞的溶细胞作用可与对NK细胞的作用相当。目前，有关猴中AB79处理的长期作用的信息有限。在13周毒理学研究中，只有一小部分动物在恢复组中进行了较长时间段的调查，并且所有剂量组中的大多数动物都发展ADA。此外，不同淋巴细胞亚群的基线值和耗减分布在个体之间是高度可变的。因此，AB79的长期作用不能在猴中进行研究，并且将必须在人中进行研究。

借助新兴的人数据，详细比较人和猴的PK和PD数据将是令人感兴趣的。基于人数据的PK模型的构建以及与猴模型的比较将有助于完善AB79的TMDD模型。在患者研究中产生的数据将提供有关如何在RA和SLE患者与多发性骨髓瘤患者和健康受试者之间比较AB79介导的B谱系细胞的耗减的见解。除CD38表达水平外，对可能影响细胞耗减效率的受试者或疾病相关因素的研究也是重要的，并且可带来治疗的个性化。此外，在体外和体内对AB79与达雷木单抗和/或其它CD38抗体的全面面对面比较将揭示有关抗CD38抗体的药理学及其最佳应用的有价值的信息。

丰富的药理数据以及PK和PK-PD模型能够表征食蟹猴的暴露-效应关系。对NK细胞、B细胞和T细胞的基于模型的分析支持并定量了以下发现：每个血液淋巴细胞亚群均以不同的速率被抗体耗减，并且需要不同的时间跨度来充满血液区室。所述模型被证明是用于模拟临床试验准备中不同给药方案下的PK和PD数据的优异手段。

实施例2：AB79耗减CD38+细胞

CD38是在人成纤维细胞、浆细胞、NK细胞和活化的T细胞和B细胞上表达的cADPR水解酶，但基于AB79结合在成熟血小板或红细胞上不表达。在患有类风湿性关节炎(RA)和系统性红斑狼疮(SLE)的患者中，浆细胞以及活化的B细胞和T细胞可能是疾病的重要促成因素。与靶向CD20且不直接耗减CD20^低/阴性的成浆细胞的其它B细胞选择性疗法不同，CD38在成浆细胞和浆细胞上以高水平表达，从而使这些细胞成为AB79的直接靶标。人血细胞和细胞系的体外研究表明，AB79与CD38的结合不会导致PBMC细胞因子活化，从而证明AB79不是激动剂，如下文所论述。相反，AB79通过ADCC和CDC介导人B谱系细胞系的细胞耗减，并且在大多数情况下，CD38表达增加的细胞系更易于细胞裂解(图14)。这与健康食蟹猴中的发现一致，在这些猴中，耗减效率与CD38表达水平和AB79剂量水平相关。与表达较少CD38的CD20+B细胞和CD3+ T细胞相比，表达高水平CD38的NK细胞耗减至更大程度(图15)。在体内，AB79在小鼠过继转移模型中有效抑制了对抗原的人B细胞回忆应答(图16)。这些数据一起支持了AB79在自身免疫性疾病中的进一步研究。

在多种条件下用AB79处理人PBMC，并测量了炎性细胞因子释放。食蟹猴用于显示细胞类型特异性耗减与AB79剂量的关系，因为AB79与猴CD38交叉反应，所述猴CD38与人蛋白质具有91％蛋白质同一性。第二动物模型(小鼠过继转移的人PBMC)用于确定AB79是否能够靶向产生人抗体的细胞。

AB79结合CD38并介导ADCC和CDC

受体数量使用小鼠抗人CD38抗体(克隆HIT2)用FIKIT(DAKO，目录号K0078)进行确定，并通过将染色样品的平均荧光强度(MFI)转换为由与限定数量的抗体分子结合的5个珠粒群体的MFI生成的校准曲线来计算。通过从抗CD38抗体MFI中减去同种型对照(小鼠IgG1)MFI来计算绝对受体#。

通过将细胞系以10,000个细胞/孔接种并添加AB79、对照IgG或培养基来评价CDC。通常执行5点剂量-反应曲线(0.001-10mg/ml)。将兔补体(2-15ul；#CL 3441CedarLaneLaboratories)添加至除对照孔外的每个孔。使用CytoTox-Glo试剂(Promega，G7571/G7573)来通过发光检测细胞毒性。测试的组：单独细胞；细胞+补体；细胞+IgG对照+补体；细胞+AB79+补体。％CDC等式：％CDC＝100-((RLU(测试)/RLU(单独补体))X 100)。

通过用50ml AB79、对照IgG、Triton X-100(1％；Sigma Chemical)或单独培养基和50ml人效应(E)PBMC以介于1:25至1:50T:E细胞的比例接种5000个靶细胞/孔(T，细胞系)来测试ADCC。通常执行9点抗体剂量-反应曲线(0.000001–100nM)。实验裂解＝PBMC+细胞系+抗体。自发裂解＝PBMC+细胞系无抗体。最大裂解＝细胞系+Triton X-100。使用CytoTox-Glo^TM细胞毒性发光测定法(Promega)评估细胞毒性。

AB79没有激动剂活性

将AB79处理在人PBMC中诱导细胞因子产生的能力与阴性IgG1同种型对照和阳性对照、PHA、抗CD3(克隆OKT3)或抗CD52(Campath)抗体进行了比较。

与IgG1同种型对照相比，在孵育24小时后，从4名不同受试者收集的PBMC中，可溶性AB79不会使IL-6水平(平均值±SD)增加。PHA使所有受试者的细胞因子水平增加，从而表明所述细胞具有制造IL-6的能力。在刺激48小时的PBMC情况下以及测试IL-2、IL-4、IL-10、GM-CSF、IFNγ和TNFα时，观察到相似的结果(数据未示出)(图18)。

将抗体呈递给细胞的方法可能有助于抗体的结果：配体接合和细胞应答(Stebbings等人(2007)J.Immunol.179:3325-3331)。Stebbings等人表明，与允许结合至溶液中的孔(湿结合)或直接添加至PBMC(可溶性)的抗体相比，当抗体高度浓缩并粘附至孔表面时(如将抗体添加至溶液中的孔并允许液体蒸发(干结合)时)，发生对激动性抗体的最大细胞应答(细胞因子释放)(图18A)。使用这些方法中的任一种，AB79均不会刺激细胞因子产生(图18B)。

在24小时后测试的任何条件下，AB79(100mg/ml)均不刺激IL-2、-4、-6、-8、-10、GM-CSF、IFNγ或TNFα。AB79不会诱导IL-10或GM-CSF，但两者均由抗CD3诱导(未示出，除抗CD3以外的所有值均低于LLOQ)。IL-8由PBMC组成型产生，并且不会通过任何处理改变(数据未示出)(表6)。

表6.AB79和细胞因子刺激

根据制造商的说明书(Bio-Plex Pro^TM人细胞因子标准8-Plex)，使用多重细胞因子测定来测量IL-2、-4、-6、-8、-10、GM-CSF、IFNγ和TNFα浓度。缩写：LLOQ定量下限；nd，未进行；PHA，植物凝集素；PBMC，外周血单核细胞。

AB79耗减CD38+细胞

AB79以高亲和力结合CD38，并介导CDC和ADCC。AB79不是激动剂，并且不诱导从人PBMC释放细胞因子。AB79结合来自人和食蟹猴两者的CD38。基于AB79染色的中值荧光强度，两种物种的淋巴细胞具有相似的CD38表达的细胞特异性模式，其中NK细胞>B细胞>T细胞。用AB79处理以可逆、细胞特异性和剂量依赖性方式耗减猴淋巴细胞。AB79在小鼠过继转移模型中有效阻断了人抗体回忆应答。

在通过SC注射用AB79处理的群组中，在≥0.1mg kg^-1的剂量下，观察到NK细胞(图24)和成浆细胞(图25)的剂量依赖性降低，而所有接受0.6mg kg^-1注射的受试者中成浆细胞减少≥90％。在0.6mg kg^-1下发生NK细胞减少75％(数据未示出)，其中C_max为23.0ng mL^-1(表7)。在注射后8小时内，成浆细胞和NK细胞的水平从基线降低，并且表现出48小时的t_max。恢复至基线水平的持续时间是可变的；对于0.1、0.3和0.6mg kg^-1剂量恢复至基线(即在基线水平的-20％以内)分别需要平均4天、78天和50天(数据未示出)。对于总淋巴细胞、B细胞和T细胞、细胞毒性T细胞、辅助T细胞、单核细胞(图25)和粒细胞、红细胞和血小板，观察到最小减少或没有减少(数据未示出)。

表7.在向健康受试者单次SC注射0.6mg kg-1的AB79后，AB79的总结PK参数

^an＝5。值表示平均值(％CV)，除了t_max，其中呈现中值(min，max)。AUC_最后，从时间0至最后可定量浓度的时间的血清浓度-时间曲线下面积；Cmax，最大观察到的血清浓度；CV，方差系数；IV，静脉内；NA，不适用；PK，药代动力学；SC，皮下；tmax，达到最大血清浓度的时间。

AB79和达雷木单抗红细胞结合总结

比较了AB79和达雷木单抗的RBC结合分布。如图26所示，在所测试的4个供体中的3个中，药物产品之间的RBC结合量值(即MFI)似乎存在差异；然而，这种差异可归因于每种抗体上的差异生物素水平，其中达雷木单抗具有比AB79高1.6至2.0倍的生物素。控制抗体的荧光标记的潜在差异的替代分析是比较每种抗体的浓度对比结合分布，并且有用的度量标准是发生最大结合(即，抗原的最大特异性结合(Bmax))的浓度。在4个供体中的3个供体中两种抗体的Bmax相同(例如，对于供体1为1μg/mL)。总的来说，这些数据表明，两种抗体都以相似的亲和力结合，在当前的测定分辨率限制内，即10倍。总之，在此测定中，AB79和达雷木单抗都结合至RBC，亲和力在彼此的10倍以内；在这种测定系统中，不存在这些抗体对RBC的结合亲和力的10倍或更大差异。

实施例3：用于研究在患有复发性/难治性(r/r)多发性骨髓瘤(MM)的人患者中，作为单一剂皮下施用的AB79的安全性、耐受性、功效、药代动力学和免疫原性的1/2a期研究

此研究的目的是评估研究的1期中的安全性、耐受性、药代动力学(PK)、免疫原性、剂量限制性毒性(DLT)和最大耐受剂量(MTD)/推荐的2期剂量(RP2D)，并且提供对患有复发性和/或难治性多发性骨髓瘤(RRMM)的受试者中AB79单一疗法的临床活性的初步评价。所述研究包括患有RRMM的患者，所述患者先前至少用蛋白酶体抑制剂(PI)、免疫调节药物(IMid)、烷化剂和类固醇治疗过。患者应患有难治性疾病或对至少1种PI和至少1种IMiD不耐受，并且如果那些疗法中的一种包括PI和IMiD的组合，则他们应接受3种或更多种先前疗法，或者接受至少2种先前疗法。在1b期剂量递增部分，允许但不要求先前暴露于抗CD38剂。在所述研究的2a期扩展部分，患者还必须患有在治疗期间的任何时间对至少1种抗CD38单克隆疗法而言难治性的疾病。所述研究是在美国进行的多中心试验，包括大约42名参与者。

1期

1期的研究群体包括大约24名年龄在18岁或以上的成年人。患者特征在表8中示出。

表8.患者特征

将1期的参与者分配至6个剂量递增AB79治疗组中的1个：群组1：45mg；群组2：135mg；群组3：300mg；群组4：600mg；群组5：1200mg；和群组6：1800mg(表9)。通过皮下注射递送AB79，每周一次持续8周，然后每2周一次持续16周，然后在之后的28天治疗周期中每4周一次，直到疾病进展(PD)、不可接受的毒性或由于其它原因所致的退出。参与者可在每个给药日施用AB79前1至3小时接受用药，如下：例如地塞米松(20mg)；对乙酰氨基酚(650至1000mg)；苯海拉明(25至50mg)；和孟鲁司特(10mg)。

表9：1期群组

参与这项研究的总体时间是36个月(3年)。在1期，由于除PD以外的任何其它原因停止治疗的参与者从最后剂量的研究药物起每4周持续进行无进展存活(PFS)随访，直至12个月或直至PD、死亡、失访、撤回同意或研究终止。在最后剂量的研究药物后30天或直到开始随后替代抗癌疗法(以先发生者为准)对参与进行随访，以进行随访评估。

1期的主要结果量度

长达一年的主要结果量度包括以下：

·报告一项或多项治疗突发不良事件(TEAE)的参与者数量

·具有剂量限制性毒性(DLT)的参与者数量数：DLT定义为任何以下事件：4级实验室异常，明显由于外在原因引起的那些事件除外；大于或等于(≥)3级的非血液TEAE，3级恶心/呕吐、持续时间少于72小时的疲劳、在7天内消退至小于或等于(≤)1级或基线的丙氨酸转氨酶(ALT)或天冬氨酸转氨酶(AST)升高、对症状治疗有反应的注射反应(IR)除外；美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准(NCI CTCAE)的血液TEAE≥4级，≥3级溶血除外，3级低血小板或更高计数且具有临床意义的出血；并且从治疗相关毒性中的不完全恢复导致在第2周期开始之前的下一个计划注射大于(>)2周延迟将被视为DLT。

·具有3级或更高TEAE的参与者数量：根据NCI CTCAE 4.03版评估AE等级。1级定为轻度；2级定为中度；3级定为重度或有医学意义、但不立即危及生命；4级定为危及生命的后果；并且5级定为与AE有关的死亡。

·具有严重TEAE的参与者数量

·具有导致治疗中断的TEAE的参与者数量

·具有导致剂量改变的TEAE的参与者数量

次要结果量度：

次要结果量度包括以下：

·Cmax：AB79的最大观察到的血清浓度[时间范围：周期1和2：给药前第1天以及给药后的多个时间点(达168小时)。]

·Tmax：达到AB79的最大观察到的血清浓度(Cmax)的时间[时间范围：周期1和2：剂量钱第1天和给药后的多个时间点(达168小时)。]

·AUC：从时间0到AB79的最后可定量浓度时间的血清浓度-时间曲线下面积[时间范围：周期1和2：给药前第1天和给药后的多个时间点(达168小时)。]

·1期：ORR[时间范围：达1年]：ORR被定义为研究期间达到肿瘤减少50％或更好的PR的参与者的百分比。PR被定义为血清M-蛋白减少≥50％以及24小时尿液M-蛋白减少≥90％或减少至<200mg/24小时。

·具有最小应答(MR)的参与者的百分比[时间范围：达1年]：MR被定义为血清M蛋白减少≥25％但≤49％以及24小时尿液M-蛋白减少50％至89％。

·具有阳性抗药物抗体(ADA)的参与者的百分比[时间范围：达1年]。

结果：

截至2019年3月5日，已有19名患者入选4个给药组(45mg、135mg、300mg和600mg)，并接受了至少1个周期的AB79。截至2019年3月5日，仍对9名患者进行治疗监测，9名患者由于疾病进展而中断了AB79，并且1名患者撤回同意。

截至2019年3月5日，在所有4个群组(45mg、135mg、300mg和600mg)中，DLT可评价患者中均未报告剂量限制性毒性(DLT)。没有任何注射部位反应或全身性输注反应。未报告药物相关SAE、研究中死亡或导致研究中断的AE。(参见表10)。此外，除了1例暂时性治疗相关的3级嗜中性粒细胞计数降低事件和1例暂时性贫血事件外，没有任何明显的实验室发现。一名患者的疾病进展与3级血小板计数降低、贫血和肌酸酐升高相关。这项研究正在进行中，并且继续对患者进行追踪。

表10.TEAE的总结

截至2019年3月5日，无论是否在所有4个群组中有因果关系，按优选条款而言，最常见的TEAE(在>2名患者中)是贫血(n＝7名患者)、失眠(各自n＝5名患者)、上呼吸道感染、头晕、头痛和高血压(各自n＝4名患者)以及腹泻、疲劳、食欲不振和肌肉痉挛(各自n＝3名患者)。除贫血(n＝2名患者)、腹泻、血小板计数减少、嗜中性粒细胞计数减少、肌酸酐升高、头痛、高血压和肌肉骨骼疼痛(各自n＝1名患者)均为3级外，所有AE均为1级或2级；只有1例低嗜中性粒细胞计数事件和1例贫血事件被报告为与研究药物有关。没有观察到IRR、细胞因子释放综合征或注射部位反应的病例。因此，本发明提供了与先前的抗CD38抗体如达雷木单抗、伊沙妥昔单抗或MOR202相比，用于临床应用的安全抗CD38抗体。

图20示出皮下施用的Ab79暴露随时间推移增加剂量而增加，其与靶标介导的药物清除一致。

皮下施用的Ab79以剂量依赖性方式降低血液中的成浆细胞水平(图21)、骨髓抽吸物中的成浆细胞(图22)和骨髓抽吸物中的浆细胞(图23)。在每周≥45mg剂量下在外周血中和≥300mg下在骨髓中CD38在靶细胞上饱和。在≤300mg剂量下以剂量依赖性方式降低了骨髓和外周血中靶细胞的水平。

在患有晚期RRMM的患者中，AB79已显示出抗肿瘤活性的早期迹象，如通过一些患者的疾病负担减少至少50％以及其它患者的延长的疾病稳定所证明。尽管需要另外的数据来表征这种药物的临床益处，但新兴数据支持AB79的持续开发。

目前有两种CD38 mAb正在临床开发中：静脉内达雷木单抗被批准用于患有MM的患者(复发性和新诊断的)，并且静脉内伊沙妥昔单抗正在临床研究中。达雷木单抗单一疗法或与标准抗骨髓瘤方案的组合最常见的不良反应(≥20％)是输注相关反应(IRR)、嗜中性粒细胞减少症、血小板减少症、疲劳、恶心、腹泻、便秘、呕吐、肌肉痉挛、关节痛、背痛、发热、发冷、头晕、失眠、咳嗽、呼吸困难、周围水肿、外周感觉神经病变和上呼吸道感染。(Darzalex USPI)。达雷木单抗可引起重度和/或严重的输液反应，包括过敏反应，并且在所有患者中大约一半中报告(Darzalex USPI)。还必须注意达雷木单抗对某些实验室测定的干扰，这重要地可能使血液相容性测试复杂化。(Darzalex USPI)。伊沙妥昔单抗是人源化抗CD38单克隆抗体，也正处于多发性骨髓瘤的临床研究。伊沙妥昔单抗的报告AE(≥24％)包括输注反应、恶心、疲劳、呼吸困难和咳嗽，其通常为≤2级Richter等人(2016)JCO 34(15):8005；Dimopoulos等人(2018)Blood 132(增刊1):ASH摘要155/口头报告))。因此，基于可获得的证据，仍然需要新的剂，包括具有更高选择性的、由此具有更大效力、从而产生更少毒性的并提高患者便利性以继续改善临床结果的新一代CD-38靶向疗法。

2期

2a期研究群体包括大约18名参与者。2a期的剂量和用药是基于对先前1期群组的可用安全性、功效、PK和药效学数据的审查而得出的。

表11：2期群组

2a期的主要结果量度

长达一年的主要结果量度包括以下：

·总体应答率(ORR)：ORR被定义为在研究过程中达到肿瘤减少50％(％)或更好的部分应答(PR)的参与者百分比。PR被定义为血清M-蛋白减少≥50％以及24小时尿液M-蛋白减少≥90％或减少至少于(<)200毫克(mg/)24小时。

2a期的次要结果量度

长达一年的次要结果量度包括以下：

·2a期：具有DLT的参与者数量

·2a期：报告一种或多种TEAE的参与者数量

·2a期：具有导致剂量改变的TEAE的参与者数量

·2a期：具有导致治疗中断的TEAE的参与者数量

·2a期：具有临床意义的实验室值的参与者数量

·2a期：具有临床意义的生命体征测量值的参与者人数

·2a期：应答持续时间(DOR)：DOR是从第一次应答记录日期至第一次记录PD日期的时间。PD是从以下任一项中最低应答值增加≥25％：血清M-蛋白(增加必须≥0.5g/dL；血清M组分增加≥1g/dL足以定义复发，如果起始M组分是≥5g/dL)，和/或尿液M-蛋白(增加必须≥200mg/24小时)，和/或仅在无可测量的血清和/或尿液M蛋白水平的参与者中，涉及/不涉及游离轻链(FLC)水平之间的差异(增加必须>10mg/dL)，并且仅在无可测量的血清和/或尿液M-蛋白水平且无通过FLC水平的可测量疾病的参与者中，骨髓浆细胞百分比(百分比必须≥10％)或明确发展新的骨病变或软组织浆细胞瘤或骨病变或软组织浆细胞瘤的大小增加，以及可完全归因于浆细胞增生性病症的高钙血症的发展。

·2a期：无进展存活期(PFS)：PFS是从首次给药日期至最早PD日期的时间。PD是从以下任一项中最低应答值增加≥25％：血清M-蛋白(增加必须≥0.5g/dL；血清M组分增加≥1g/dL足以定义复发，如果起始M组分是≥5g/dL)，和/或尿液M-蛋白(增加必须≥200mg/24小时)，和/或仅在无可测量的血清和/或尿液M蛋白水平的参与者中，涉及/不涉及FLC水平之间的差异(增加必须>10mg/dL)，并且仅在无可测量的血清和/或尿液M-蛋白水平且无通过FLC水平的可测量疾病的参与者中，骨髓浆细胞百分比(百分比必须≥10％)或明确发展新的骨病变或软组织浆细胞瘤或骨病变或软组织浆细胞瘤的大小增加，以及可完全归因于浆细胞增生性病症的高钙血症的发展。

·2a期：总体存活期(OS)：OS被定义为从首次给药日期至由于任何原因所致的死亡日期的时间。

·2a期：应答时间(TTR)：TTR被定义为从首次给药日期至首次记录应答(部分应答(PR)或更好)日期的时间。PR被定义为血清M-蛋白减少≥50％和/或24小时尿液M-蛋白减少≥90％或减少至<200mg/24小时。

1期和2a期研究的纳入标准：

在第一剂量的AB79之前的指定最小间隔时间内，受试者已接受任何以下治疗/程序的最终剂量：骨髓瘤特异性疗法(30天的清除期)；抗体疗法(包括抗CD38)(120天的清除期)；皮质类固醇疗法(30天的清除期)；自体移植(90天的清除期)；放射疗法(30天的清除期)；大手术(30天的清除期)。

对于患有MM的参与者，可测量的疾病被定义为以下之一：(a)血清M-蛋白≥500mg/dL(≥5g/L)；(b)尿液M-蛋白≥200mg/24小时；(c)对于血清蛋白电泳(SPEP)或尿液蛋白电泳(UPEP)中没有可测量的M-蛋白的参与者，涉及的FLC水平≥10mg/dL(≥100mg/L)的血清FLC测定结果，所提供得血清FLC比例异常。

先前疗法应符合所有以下标准：(a)先前至少用蛋白酶体抑制剂(PI)、免疫调节药物(IMid)、烷化剂和类固醇治疗的参与者；(b)对至少1种PI和至少1种IMid而言难治或不耐受的参与者；如果那些线中一个包含PI和IMid的组合，则患者已接受了≥3个先前线治疗，或者已接受了至少2个先前线治疗；(c)参与者先前可能以单一剂或组合的形式暴露于抗CD38药物，但这不是必需的。

在所述研究的2a期部分中，患有MM的参与者还必须在治疗期间的任何时间对至少1种抗CD38单克隆抗体疗法而言难治。“难治性”被定义为在治疗期间或停止治疗后60天内M-蛋白的至少25％增加或PD。“治疗线”被定义为计划的治疗计划的1个或多个周期。这可包括1个或多个计划的单剂疗法或组合疗法周期，以及以计划方式施用的一系列治疗。当由于PD、复发或毒性而将计划的治疗过程修改为包括其它治疗剂(单独或组合)时，新的治疗线开始。当治疗结束后的计划观察期因所述疾病的另外治疗的需要而中断时，新的治疗线也开始。

所述研究的排除标准：

1.美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准(NCI CTCAE)≥3级的感觉或运动神经病变。

2.已接受同种异体干细胞移植。

3.已接受抗CD38抗体疗法，并且在接受AB79之前未完成120天的清除期。

4.未从先前骨髓瘤治疗或程序(化学疗法、免疫疗法、放射疗法)的不良反应恢复至NCI CTCAE≤1级或基线。

5.MM中枢神经系统(CNS)累及的临床体征。

6.活动性慢性乙型肝炎病毒(HBV)或丙型肝炎病毒(HCV)感染、活动性HIV或巨细胞病毒(CMV)感染。

7.POEMS(多发性神经病变、脏器肿大、内分泌病、单克隆丙种球蛋白病和皮肤变化)综合征、意义不明的单克隆丙种球蛋白病、郁积型骨髓瘤、孤立性浆细胞瘤、淀粉样变性、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症或IgM骨髓瘤。

8.筛查时Coombs测试呈阳性。

以引用的方式并入

在本申请中可能引用的所有引用的参考文献(包括文献参考文献、专利、专利申请和网站)的内容出于任何目的均特此明确地以引用的方式整体并入，其中所引用的参考文献也特此明确地以引用的方式整体并入，其程度如同出于任何目的而明确且单独地指示每个单个参考文献以引用的方式整体并入一般。

等效方案

可在不脱离本公开的精神或基本特征下以其它特定形式来实施本公开。因此，上述实施方案在所有方面都应视为具有说明性而非限制本公开。因此，本公开的范围是由随附权利要求而非由上述描述所指示，且因此属于权利要求的等效性含义和范围内的所有变化都意图包括在本文中。对于本领域技术人员显而易见的用于实施本发明的修改意图落入所附权利要求的范围内。

序列表

<110> 武田制药有限公司(Takeda Pharmaceutical Company Limited)

<120> 抗CD38抗体的皮下给药

<130> 101588-5010-WO

<150> 62/649,489

<151> 2018-03-28

<160> 13

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 300

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 人CD38

<400> 1

Met Ala Asn Cys Glu Phe Ser Pro Val Ser Gly Asp Lys Pro Cys Cys

1 5 10 15

Arg Leu Ser Arg Arg Ala Gln Leu Cys Leu Gly Val Ser Ile Leu Val

20 25 30

Leu Ile Leu Val Val Val Leu Ala Val Val Val Pro Arg Trp Arg Gln

35 40 45

Gln Trp Ser Gly Pro Gly Thr Thr Lys Arg Phe Pro Glu Thr Val Leu

50 55 60

Ala Arg Cys Val Lys Tyr Thr Glu Ile His Pro Glu Met Arg His Val

65 70 75 80

Asp Cys Gln Ser Val Trp Asp Ala Phe Lys Gly Ala Phe Ile Ser Lys

85 90 95

His Pro Cys Asn Ile Thr Glu Glu Asp Tyr Gln Pro Leu Met Lys Leu

100 105 110

Gly Thr Gln Thr Val Pro Cys Asn Lys Ile Leu Leu Trp Ser Arg Ile

115 120 125

Lys Asp Leu Ala His Gln Phe Thr Gln Val Gln Arg Asp Met Phe Thr

130 135 140

Leu Glu Asp Thr Leu Leu Gly Tyr Leu Ala Asp Asp Leu Thr Trp Cys

145 150 155 160

Gly Glu Phe Asn Thr Ser Lys Ile Asn Tyr Gln Ser Cys Pro Asp Trp

165 170 175

Arg Lys Asp Cys Ser Asn Asn Pro Val Ser Val Phe Trp Lys Thr Val

180 185 190

Ser Arg Arg Phe Ala Glu Ala Ala Cys Asp Val Val His Val Met Leu

195 200 205

Asn Gly Ser Arg Ser Lys Ile Phe Asp Lys Asn Ser Thr Phe Gly Ser

210 215 220

Val Glu Val His Asn Leu Gln Pro Glu Lys Val Gln Thr Leu Glu Ala

225 230 235 240

Trp Val Ile His Gly Gly Arg Glu Asp Ser Arg Asp Leu Cys Gln Asp

245 250 255

Pro Thr Ile Lys Glu Leu Glu Ser Ile Ile Ser Lys Arg Asn Ile Gln

260 265 270

Phe Ser Cys Lys Asn Ile Tyr Arg Pro Asp Lys Phe Leu Gln Cys Val

275 280 285

Lys Asn Pro Glu Asp Ser Ser Cys Thr Ser Glu Ile

290 295 300

<210> 2

<211> 301

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 食蟹猴CD38

<400> 2

Met Ala Asn Cys Glu Phe Ser Pro Val Ser Gly Asp Lys Pro Cys Cys

1 5 10 15

Arg Leu Ser Arg Arg Ala Gln Val Cys Leu Gly Val Cys Leu Leu Val

20 25 30

Leu Leu Ile Leu Val Val Val Val Ala Val Val Leu Pro Arg Trp Arg

35 40 45

Gln Gln Trp Ser Gly Ser Gly Thr Thr Ser Arg Phe Pro Glu Thr Val

50 55 60

Leu Ala Arg Cys Val Lys Tyr Thr Glu Val His Pro Glu Met Arg His

65 70 75 80

Val Asp Cys Gln Ser Val Trp Asp Ala Phe Lys Gly Ala Phe Ile Ser

85 90 95

Lys Tyr Pro Cys Asn Ile Thr Glu Glu Asp Tyr Gln Pro Leu Val Lys

100 105 110

Leu Gly Thr Gln Thr Val Pro Cys Asn Lys Thr Leu Leu Trp Ser Arg

115 120 125

Ile Lys Asp Leu Ala His Gln Phe Thr Gln Val Gln Arg Asp Met Phe

130 135 140

Thr Leu Glu Asp Met Leu Leu Gly Tyr Leu Ala Asp Asp Leu Thr Trp

145 150 155 160

Cys Gly Glu Phe Asn Thr Phe Glu Ile Asn Tyr Gln Ser Cys Pro Asp

165 170 175

Trp Arg Lys Asp Cys Ser Asn Asn Pro Val Ser Val Phe Trp Lys Thr

180 185 190

Val Ser Arg Arg Phe Ala Glu Thr Ala Cys Gly Val Val His Val Met

195 200 205

Leu Asn Gly Ser Arg Ser Lys Ile Phe Asp Lys Asn Ser Thr Phe Gly

210 215 220

Ser Val Glu Val His Asn Leu Gln Pro Glu Lys Val Gln Ala Leu Glu

225 230 235 240

Ala Trp Val Ile His Gly Gly Arg Glu Asp Ser Arg Asp Leu Cys Gln

245 250 255

Asp Pro Thr Ile Lys Glu Leu Glu Ser Ile Ile Ser Lys Arg Asn Ile

260 265 270

Arg Phe Phe Cys Lys Asn Ile Tyr Arg Pro Asp Lys Phe Leu Gln Cys

275 280 285

Val Lys Asn Pro Glu Asp Ser Ser Cys Leu Ser Gly Ile

290 295 300

<210> 3

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> HCDR1 AB79

<400> 3

Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr Gly

1 5

<210> 4

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> HCDR2 AB79

<400> 4

Ile Ser Trp Asn Gly Gly Lys Thr

1 5

<210> 5

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> HCDR3 AB79

<400> 5

Ala Arg Gly Ser Leu Phe His Asp Ser Ser Gly Phe Tyr Phe Gly His

1 5 10 15

<210> 6

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> LCDR1 AB79

<400> 6

Ser Ser Asn Ile Gly Asp Asn Tyr

1 5

<210> 7

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> LCDR2 AB79

<400> 7

Arg Asp Ser

1

<210> 8

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> LCDR3 AB79

<400> 8

Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu Ser Gly Ser

1 5 10

<210> 9

<211> 135

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> (VH)链氨基酸序列

<400> 9

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Asp Ile Ser Trp Asn Gly Gly Lys Thr His Tyr Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Gln Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Ser Leu Phe His Asp Ser Ser Gly Phe Tyr Phe Gly His

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly

115 120 125

Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala

130 135

<210> 10

<211> 129

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> (VL)链氨基酸序列

<400> 10

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asp Asn

20 25 30

Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Arg Asp Ser Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Ser Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln

100 105 110

Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu

115 120 125

Leu

<210> 11

<211> 453

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 重链(HC)氨基酸

<400> 11

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ser Asp Ile Ser Trp Asn Gly Gly Lys Thr His Tyr Val Asp Ser Val

50 55 60

Lys Gly Gln Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Ser Leu Phe His Asp Ser Ser Gly Phe Tyr Phe Gly His

100 105 110

Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly

115 120 125

Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly

130 135 140

Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val

145 150 155 160

Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe

165 170 175

Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val

180 185 190

Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val

195 200 205

Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys

210 215 220

Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu

225 230 235 240

Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr

245 250 255

Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

260 265 270

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val

275 280 285

Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser

290 295 300

Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu

305 310 315 320

Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala

325 330 335

Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro

340 345 350

Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln

355 360 365

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala

370 375 380

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr

385 390 395 400

Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu

405 410 415

Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser

420 425 430

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

435 440 445

Leu Ser Pro Gly Lys

450

<210> 12

<211> 216

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 轻链(LC)氨基酸

<400> 12

Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln

1 5 10 15

Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asp Asn

20 25 30

Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu

35 40 45

Ile Tyr Arg Asp Ser Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg

65 70 75 80

Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu

85 90 95

Ser Gly Ser Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln

100 105 110

Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu

115 120 125

Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr

130 135 140

Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys

145 150 155 160

Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr

165 170 175

Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His

180 185 190

Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys

195 200 205

Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

210 215

<210> 13

<211> 318

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 人CD157

<400> 13

Met Ala Ala Gln Gly Cys Ala Ala Ser Arg Leu Leu Gln Leu Leu Leu

1 5 10 15

Gln Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Ala Ala Gly Gly Ala Arg Ala

20 25 30

Arg Trp Arg Gly Glu Gly Thr Ser Ala His Leu Arg Asp Ile Phe Leu

35 40 45

Gly Arg Cys Ala Glu Tyr Arg Ala Leu Leu Ser Pro Glu Gln Arg Asn

50 55 60

Lys Asn Cys Thr Ala Ile Trp Glu Ala Phe Lys Val Ala Leu Asp Lys

65 70 75 80

Asp Pro Cys Ser Val Leu Pro Ser Asp Tyr Asp Leu Phe Ile Asn Leu

85 90 95

Ser Arg His Ser Ile Pro Arg Asp Lys Ser Leu Phe Trp Glu Asn Ser

100 105 110

His Leu Leu Val Asn Ser Phe Ala Asp Asn Thr Arg Arg Phe Met Pro

115 120 125

Leu Ser Asp Val Leu Tyr Gly Arg Val Ala Asp Phe Leu Ser Trp Cys

130 135 140

Arg Gln Lys Asn Asp Ser Gly Leu Asp Tyr Gln Ser Cys Pro Thr Ser

145 150 155 160

Glu Asp Cys Glu Asn Asn Pro Val Asp Ser Phe Trp Lys Arg Ala Ser

165 170 175

Ile Gln Tyr Ser Lys Asp Ser Ser Gly Val Ile His Val Met Leu Asn

180 185 190

Gly Ser Glu Pro Thr Gly Ala Tyr Pro Ile Lys Gly Phe Phe Ala Asp

195 200 205

Tyr Glu Ile Pro Asn Leu Gln Lys Glu Lys Ile Thr Arg Ile Glu Ile

210 215 220

Trp Val Met His Glu Ile Gly Gly Pro Asn Val Glu Ser Cys Gly Glu

225 230 235 240

Gly Ser Met Lys Val Leu Glu Lys Arg Leu Lys Asp Met Gly Phe Gln

245 250 255

Tyr Ser Cys Ile Asn Asp Tyr Arg Pro Val Lys Leu Leu Gln Cys Val

260 265 270

Asp His Ser Thr His Pro Asp Cys Ala Leu Lys Ser Ala Ala Ala Ala

275 280 285

Thr Gln Arg Lys Ala Pro Ser Leu Tyr Thr Glu Gln Arg Ala Gly Leu

290 295 300

Ile Ile Pro Leu Phe Leu Val Leu Ala Ser Arg Thr Gln Leu

305 310 315

权利要求书(按照条约第19条的修改)

1.一种用于治疗受试者的复发性/难治性多发性骨髓瘤的方法，所述方法包括向所述受试者皮下施用足够的分离的人抗CD38抗体，其中所述抗CD38抗体包含可变重(VH)链区，所述可变重链区包含具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:5的氨基酸序列的CDR3；和可变轻(VL)链区，所述可变轻链区包含具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的CDR3，其中以45至1,800毫克的剂量施用所述抗体。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述抗CD38抗体的施用不会引起溶血性贫血或血小板减少症。

3.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中施用所述抗CD38抗体使得3级或4级的选自由以下组成的组的一种或多种治疗相关不良事件(TRAE)或治疗突发不良事件(TEAE)的发生率低于30％：贫血、溶血性贫血、血小板减少症、疲劳、输注相关反应(IRR)、白细胞减少症和淋巴细胞减少症。

4.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述抗CD38抗体导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的RBC耗减。

5.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述抗CD38抗体导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的血小板耗减。

6.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述VH链区具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列，并且所述VL链区具有SEQ ID NO:10的氨基酸序列。

7.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述抗CD38抗体包含SEQ ID NO:11的重链氨基酸序列和SEQ ID NO:12的轻链氨基酸序列。

8.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中以135至1,800毫克、600至1,800毫克、1,200至1,800毫克、45至1,200毫克、45至600毫克、45至135毫克、135至1,200毫克、135至600毫克或1,200至1,800毫克的剂量施用所述抗体。

9.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中以药学上可接受的组合物的形式施用所述人抗CD38抗体。

10.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述剂量是每周一次剂量。

11.一种包含分离的抗体的单位剂型，所述分离的抗体包含含有SEQ ID NO:9的重链可变区和含有SEQ ID NO:10的轻链可变区，其中所述分离的抗体结合至CD38并且不结合至人红细胞，并且所述单位剂型被配制用于以45至1,800毫克的剂量皮下施用所述抗体；并且其中所述单位剂型被配制用于在复发性/难治性多发性骨髓瘤的治疗中皮下施用所述抗体。

12.如权利要求11所述的单位剂型，其中所述单位剂型被配制用于以135至1,800毫克、600至1,800毫克、1,200至1,800毫克、45至1,200毫克、45至600毫克、45至135毫克、135至1,200毫克、135至600毫克或1,200至1,800毫克的剂量皮下施用所述抗体。

13.如权利要求11或权利要求12所述的单位剂型，其中分离的抗体包含含有SEQ IDNO:11的重链和含有SEQ ID NO:12的轻链。

14.如权利要求11至12中任一项所述的单位剂型，其中所述抗CD38抗体不会引起溶血性贫血或血小板减少症。

15.如权利要求11至14中任一项所述的单位剂型，其中所述抗CD38抗体导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的RBC耗减。

16.如权利要求11至15中任一项所述的单位剂型，其中所述抗CD38抗体导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的血小板耗减。

17.如权利要求11至16中任一项所述的单位剂型，其中所述剂量是每周一次剂量。

Claims

1.一种用于治疗受试者的疾病的方法，所述方法包括向所述受试者皮下施用足够的分离的人抗CD38抗体，其中所述抗CD38抗体包含可变重(VH)链区，所述可变重链区包含具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ IDNO:5的氨基酸序列的CDR3；和可变轻(VL)链区，所述可变轻链区包含具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的CDR3，其中所述疾病是指示与CD38结合的疾病，并且其中以45至1,800毫克的剂量施用所述抗体。

6.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述疾病是自身免疫性疾病或癌症。

7.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述疾病选自由以下组成的组：系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)、炎症性肠病(IBD)、溃疡性结肠炎、系统性轻链淀粉样变性和移植物抗宿主病。

8.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述疾病选自由以下组成的组：多发性骨髓瘤、慢性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、浆细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、B细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤。

9.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述疾病是多发性骨髓瘤。

10.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述VH链区具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列，并且所述VL链区具有SEQ ID NO:10的氨基酸序列。

11.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述抗CD38抗体包含SEQ ID NO:11的重链氨基酸序列和SEQ ID NO:12的轻链氨基酸序列。

12.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中以135至1,800毫克、600至1,800毫克、1,200至1,800毫克、45至1,200毫克、45至600毫克、45至135毫克、135至1,200毫克、135至600毫克或1,200至1,800毫克的剂量施用所述抗体。

13.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中以药学上可接受的组合物的形式施用所述人抗CD38抗体。

14.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述剂量是每周一次剂量。

15.一种用于治疗受试者中的血液癌症的方法，所述方法包括向所述受试者皮下施用分离的人抗CD38抗体，其中所述抗CD38抗体包含可变重(VH)链区，所述可变重链区包含具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ IDNO:5的氨基酸序列的CDR3；和可变轻(VL)链区，所述可变轻链区包含具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的CDR1、具有SEQ ID NO:7的氨基酸序列的CDR2和具有SEQ ID NO:8的氨基酸序列的CDR3，并且其中以45至1,800毫克的剂量施用所述抗体。

16.如权利要求15所述的方法，其中所述抗CD38抗体不会引起溶血性贫血或血小板减少症。

17.如权利要求15或16所述的方法，其中施用所述抗CD38抗体使得3级或4级的选自由以下组成的组的一种或多种治疗相关不良事件(TRAE)或治疗突发不良事件(TEAE)的发生率低于30％：贫血，包括溶血性贫血；血小板减少症；疲劳；输注相关反应(IRR)；白细胞减少症和淋巴细胞减少症。

18.如权利要求15至17中任一项所述的方法，其中所述抗CD38抗体导致少于10％的RBC耗减。

19.如权利要求15至18中任一项所述的方法，其中所述抗CD38抗体导致少于10％的血小板耗减。

20.如权利要求15至19中任一项所述的方法，其中所述血液癌症选自由以下组成的组：多发性骨髓瘤、慢性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、浆细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、B细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤。

21.如权利要求20所述的方法，其中所述血液癌症是多发性骨髓瘤。

22.如权利要求15至21中任一项所述的方法，其中所述VH链区具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列，并且所述VL链区具有SEQ ID NO:10的氨基酸序列。

23.如权利要求15至22中任一项所述的方法，其中所述抗CD38抗体包含SEQ ID NO:11的重链氨基酸序列和SEQ ID NO:12的轻链氨基酸序列。

24.如权利要求15至23中任一项所述的方法，其中以135至1,800毫克、600至1,800毫克、1,200至1,800毫克、45至1,200毫克、45至600毫克、45至135毫克、135至1,200毫克、135至600毫克或1,200至1,800毫克的剂量施用所述抗体。

25.如权利要求15至24中任一项所述的方法，其中以药学上可接受的组合物的形式施用所述人抗CD38抗体。

26.如权利要求15至25中任一项所述的方法，其中所述剂量是每周一次剂量。

27.一种包含分离的抗体的单位剂型，所述分离的抗体包含含有SEQ ID NO:9的重链可变区和含有SEQ ID NO:10的轻链可变区，其中所述分离的抗体结合至CD38并且不结合至人红细胞，并且所述单位剂型被配制用于以45至1,800毫克的剂量皮下施用所述抗体。

28.如权利要求27所述的单位剂型，其中所述单位剂型被配制用于以135至1,800毫克、600至1,800毫克、1,200至1,800毫克、45至1,200毫克、45至600毫克、45至135毫克、135至1,200毫克、135至600毫克或1,200至1,800毫克的剂量皮下施用所述抗体。

29.如权利要求27或权利要求28所述的单位剂型，其中分离的抗体包含含有SEQ IDNO:11的重链和含有SEQ ID NO:12的轻链。

30.如权利要求27至29中任一项所述的单位剂型，其中所述单位剂型被配制用于在选自由以下组成的组的血液癌症的治疗中皮下施用所述抗体：多发性骨髓瘤、慢性成淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、浆细胞白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、B细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤。

31.如权利要求30所述的单位剂型，其中所述血液癌症是多发性骨髓瘤。

32.如权利要求27至31中任一项所述的单位剂型，其中所述抗CD38抗体不会引起溶血性贫血或血小板减少症。

33.如权利要求27至32中任一项所述的单位剂型，其中所述抗CD38抗体导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的RBC耗减。

34.如权利要求27至33中任一项所述的单位剂型，其中所述抗CD38抗体导致少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％的血小板耗减。

35.如权利要求27至34中任一项所述的单位剂型，其中所述剂量是每周一次剂量。