CN112136033A - 具有气溶胶含量受控的封闭式液滴分选仪的流式细胞仪及其使用方法 - Google Patents
具有气溶胶含量受控的封闭式液滴分选仪的流式细胞仪及其使用方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供具有封闭式颗粒分选模块的流式细胞仪。除所述封闭式颗粒分选模块以外，所述流式细胞仪的方面还包括与所述封闭式颗粒分选模块的入口以流体连通方式耦合的样品输入模块；与所述封闭式颗粒分选模块的第一出口以流体连通方式耦合的废物池；以及与所述封闭式颗粒分选模块的第二出口以流体连通方式耦合的第一分选颗粒收集系统。本文所述的流式细胞仪被配置成控制所述封闭式颗粒分选模块(包括所述模块的分选室)内的气溶胶含量。本发明还提供所述流式细胞仪的使用方法，以及属于与所述流式细胞仪结合使用的消耗品的套件，所述套件包括所述流式细胞仪的一个或更多个组件。
Description
相关专利申请的交叉引用
根据《美国法典》第35章第119节(e)项的规定，本专利申请案主张于2018年4月27日提交的编号为62/663,936的美国临时专利申请案提交日期的优先权；该专利中的内容以引用方式并入本文中。
背景技术
流式颗粒分选系统(例如，分选流式细胞仪)用于基于所述颗粒的至少一种被测特征对流体样品中的颗粒进行分选。在流式颗粒分选系统中，流体悬浮液中的颗粒(例如分子、与分析物结合的微珠或个别细胞)以流的形式穿过检测区域，在所述检测区域内，传感器检测流中含有的所述类型的待分选颗粒。传感器在检测所述类型的待分选颗粒时，触发一种分选机制，所述机制选择性地分离出目的颗粒。
通常通过使流体介质穿过检测区域来进行颗粒感测，在所述检测区域内，所述颗粒暴露于来自一台或更多台激光器的辐照光下，并且测定所述颗粒的光散射和荧光特性。颗粒或其组分用荧光染料标记以便进行检测，且各种不同的颗粒或组分可以通过用光谱特性不同的荧光染料标记来同时加以检测。采用一台或更多台光电传感器进行检测，以便对每种不同的荧光染料发出的荧光进行独立测定。
流式颗粒分选系统的一种类型是静电分选类型。在静电分选仪中，流体悬浮液从喷嘴中喷射而出，使其振动，从而使所述流破碎成均匀的离散液滴。所述分选机制包括与所述流连通的液滴充电装置，以在液滴与喷射流脱离时，对含有所述类型的待分选颗粒的液滴进行充电。所述液滴流穿过由两块带相反电荷的偏转板建立的横向静电场。含有所述类型的待分选颗粒的带电液滴的偏转方向和数量与所述液滴电荷的极性和大小有关，而且所述带电液滴会被收集在不同的收集容器中。不带电的液滴穿过静电场时不会发生偏转，且会被收集在中央容器中。
发明内容
本发明提供具有封闭式颗粒分选模块的流式细胞仪。除所述封闭式颗粒分选模块以外，所述流式细胞仪的方面还包括与所述封闭式颗粒分选模块的入口以流体连通方式耦合的样品输入模块；与所述封闭式颗粒分选模块的第一出口以流体连通方式耦合的废物池；以及与所述封闭式颗粒分选模块的第二出口以流体连通方式耦合的第一分选颗粒收集系统。本文所述的流式细胞仪被配置成控制所述封闭式颗粒分选模块(包括所述模块的分选室)内的气溶胶含量。本发明还提供所述流式细胞仪的使用方法，以及属于与所述流式细胞仪结合使用的消耗品的套件，所述套件包括所述流式细胞仪的一个或更多个组件。
附图说明
结合附图阅读以下详细说明，可获得对本发明最全面的理解。附图中包括以下图示：
图1提供了根据本发明的实施例所述的封闭式颗粒分选模块的图示。
图2提供了流式细胞仪系统的图示，其中图1所示的封闭式颗粒分选模块与所述系统耦合，得到根据本发明的实施例所述的无菌流式细胞仪型细胞分选仪。
图3提供了根据本发明的实施例所述的流式细胞仪型细胞分选仪的示意图。
具体实施方式
本发明提供具有封闭式颗粒分选模块的流式细胞仪。除所述封闭式颗粒分选模块以外，所述流式细胞仪的方面还包括与所述封闭式颗粒分选模块的入口以流体连通方式耦合的样品输入模块；与所述封闭式颗粒分选模块的第一出口以流体连通方式耦合的废物池；以及与所述封闭式颗粒分选模块的第二出口以流体连通方式耦合的第一分选颗粒收集系统。本文所述的流式细胞仪被配置成控制所述封闭式颗粒分选模块(包括所述模块的分选室)内的气溶胶含量。本发明还提供所述流式细胞仪的使用方法，以及属于与所述流式细胞仪结合使用的消耗品的套件，所述套件包括所述流式细胞仪的一个或更多个组件。
在更加详细地描述本发明之前，应当理解，本发明不限于所描述的特定实施例，因为在实际实施中一定会存在差异。还应当理解，本文中使用的术语仅用于描述特定实施例，而无意限制本发明构思，本发明的范围将仅由所附权利要求书限定。
在提供数值范围的情况下，应当理解，该范围的上限和下限之间的每个中间值以及在该范围内的任何其他规定值或中间值都包含在本发明的范围内。除非上下文另有明确规定，否则每个中间值应低至下限单位的十分之一。这些较小范围的上限和下限可独立地包括在较小范围内，并且也包括在本发明内，需遵守所述范围内任何特别排除的限值的要求。在所述范围包括一个或两个限值的条件下，排除了那些所包括限值中的任一个或两个的范围也包括在本发明内。
本文中提出的某些范围在数值前带有术语“大约”。本文中使用术语“大约”的目的是为其后的精确数字以及与该术语之后数字接近或近似的数字提供文字支持。在确定某一数字是否接近或近似于具体列举的数字时，接近或近似的未列举数字在其出现的上下文中可以是基本上等同于所具体列举数字的数字。
除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语的含义与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同。尽管与本文所描述的方法和材料类似或等同的方法和材料也可用于本发明的实施或测试中，但下文描述了具有代表性的示例性方法和材料。
在本说明书中引用的所有出版物和专利通过引用方式并入本文中，犹如每一单独出版物或专利被具体地和单独地表明通过引用方式并入，且通过引用并入本文的目的是公开和描述与引用的出版物相关的方法和/或材料。任何出版物的引用均是针对其在申请日之前公开的内容，并且不应将其解释为承认由于之前的发明使得本发明无权早于此类出版物。此外，所提供的出版日期可能与实际出版日期不同，可能需要单独确认。
需要注意的是，如本文和所附权利要求书中所使用的，单数形式的“一”、“一个”和“所述/该”包括复数指代对象，除非上下文另有明确说明。还应注意，可以起草权利要求以排除任何可选要素。因此，该陈述旨在作为使用诸如“单独”、“仅”等与陈述权利要求要素有关的专用术语或使用“否定”限制的前置基础。
在阅读本发明后，以下内容对所属领域的技术人员来说是显而易见的，本文所描述和列出的每个单独的实施例都具有分层的组分和特征，这些组分和特征可在不脱离本发明的范围和精神的情况下与其他几个实施例中任一实施例的特征进行快速分解或合并。可按陈述的事件顺序或逻辑上可能的任何其他顺序实施任何陈述的方法。
尽管为了语法的流畅性已经或将要描述该设备和方法，并进行功能上的说明，但应明确理解，除非《美国法典》第35章有明确规定，否则任何情况下都不得将权利要求解释为必须受“方式”或“步骤”的限制，而应按照等效物的司法原则与权利要求中所述定义的含义和等效物的完整范围相符，当明确按照《美国法典》第35章第112节的规定编写权利要求时，权利要求应与《美国法典》第35章第112节中的法定等效物完全相符。
流式细胞仪
如上所述，本发明提供具有封闭式颗粒分选模块的流式细胞仪。本文所述的流式细胞仪包括流式细胞仪系统以及与其可操作地耦合的封闭式颗粒分选模块。在一些情况下，所述流式细胞仪系统和封闭式颗粒分选模块的配置使得所述封闭式颗粒分选模块可以轻易地与所述流式细胞仪系统可操作地接合并从所述系统中移除。下文进一步详细描述本发明的流式细胞仪的每一所述组件。
所述流式细胞仪的方面在于其被配置成控制所述封闭式颗粒分选模块(例如，其分选室)内的气溶胶含量。本发明人发现，在封闭式颗粒分选模块中，例如在本发明的流式细胞仪的封闭式颗粒分选模块中，倾向于在所述分选室中形成气溶胶，这会引起与所述分选模块的功能有关的问题，例如，偏转板产生电弧、敏感元件受到液体污染。本发明的实施例通过控制所述封闭式颗粒分选模块(例如所述封闭式颗粒分选模块的分选室)内的气溶胶含量来解决这些问题。在一些情况下，控制所述气溶胶含量是指使所述分选室内的气溶胶液滴(如有)数量少于导致出现上述一个或更多个问题(例如，产生电弧)所需的数量。在一些情况下，控制所述气溶胶含量，以免其超过可检测量。采用一种或多种不同的方法控制本发明的流式细胞仪中的气溶胶含量，例如，下文更为详细地描述的方法。
封闭式颗粒分选模块
如上所述，本发明的流式细胞仪包括用于分选液体样品中的组分(例如生物样品中的细胞)的封闭式颗粒分选模块。依照常规含义，本文中使用的术语“分选”是指分离所述样品中的组分(例如，细胞、非细胞颗粒(例如生物大分子))，并且在一些情况下，如下文所述，将所述已分离组分递送至诸如容器或收集系统等的接收位置，例如，下文更为详细地描述的容器或收集系统。例如，标的颗粒分选模块可被配置成从样品的剩余成分中分选出单一组分，或被配置成分选具有2种或以上组分的样品，例如，3种或以上组分、4种或以上组分、5种或以上组分、10种或以上组分、15种或以上组分，包括分选具有25种或以上组分的样品。可以从所述样品中分离出一种或多种样品组分，并递送至容器中，例如，2种或以上的样品组分、3种或以上的样品组分、4种或以上的样品组分、5种或以上的样品组分、10种或以上的样品组分，包括从所述样品中分离出15种或以上的样品组分，并递送至容器的接收位置。
在实施例中，颗粒分选模块包括封闭式壳体，其具有用于使所述壳体与颗粒分选系统耦合的对准件；位于所述壳体近端的流动池喷嘴；与所述流动池喷嘴孔口通过流体连通的样品询问区域；以及液滴偏转器。术语“封闭的”是指所述颗粒分选模块的每个组件完全包含在所述壳体内，而且所述组件已密封或与所述周围环境隔离。换言之，所述封闭式壳体内的组件未暴露于所述外部环境中，也不与所述外部环境接触。在一些实施例中，所述壳体所包含的所述组件与所述周围环境的气体环境隔离(即，未暴露于所述壳体外的气体中)。在其他实施例中，所述壳体所包含的所述组件与所述周围环境的流体环境隔离(即，未暴露于所述壳体外的任何流体中)。在其他实施例中，所述壳体所包含的所述组件是无菌的，且与所述周围环境中存在的活菌或其他微生物隔离(即，是无菌的)。
目的颗粒分选模块被配置成与流式细胞仪的颗粒分选系统耦合，其中，液滴流在所述颗粒分选模块中产生，且基本上每次都有一股液滴流穿过检测和识别所述颗粒的样品询问区域。液滴偏转器位于所述样品询问区域(例如，分选室内的所述区域)的下游，且被配置成使所述受分析液滴发生偏转以通过不同出口，例如，通过与废物池耦合的第一出口或与已分选颗粒接收器耦合的第二出口，例如，容器或已分选颗粒收集系统，例如下文更为详细地描述的所述容器或系统。
颗粒分选模块可以包括封闭式壳体，其具有用于使所述壳体与流式细胞仪的颗粒分选系统耦合的对准件；位于所述壳体近端的流动池喷嘴；与所述流动池喷嘴孔口通过流体连通的样品询问区域；以及液滴偏转器，例如，位于所述模块的分选室上的液滴偏转器。在一些情况下，所述壳体具有远端、近端以及其间的壁，所述壁组合形成内腔。在实施例中，所述壳体的一面或多面外壁具有用于使所述壳体与流式细胞仪的颗粒分选系统耦合的对准件。例如，所述壳体可以具有两面或更多面壁，所述壁具有用于使所述壳体与颗粒分选系统耦合的对准件，例如，3面或更多面壁，包括4面或更多面具有对准件的壁。在某些实施例中，所述壳体具有一面壁，所述壁具有用于使所述壳体与颗粒分选系统耦合的对准件。具有对准件的每面壁可以包括1个或以上的对准件，例如，2个或以上的对准件、3个或以上的对准件、4个或以上的对准件、5个或以上的对准件、7个或以上的对准件，包括10个或以上的对准件。在某些实施例中，所述颗粒分选设备包括具有3个对准件的外壁。
可以采用任何合适类型的对准件，例如，对准突出物、对准轨道、对准凹口、对准凹槽、对准槽、对准埋头孔、对准沉孔、对准凹部、对准孔或其组合。例如，在一些情况下，所述壳体的外壁包括一个或更多个突出物，例如销、暗榫或凸块。在某些实施例中，所述对准件是销，例如球头销。在其他情况下，所述壳体的外壁包括一个或更多个凹部，例如孔或凹口。在某些情况下，所述壳体的外壁包括一个或更多个对准突出物和一个或更多个对准凹部。关于对准件以及包括所述对准件的封闭式颗粒分选模块的更多详细信息请参阅公开号为US 2017-0299493、申请序列号为15/472,020的美国专利申请案；该专利中的内容以引用方式并入本文中。
在一些实施例中，所述颗粒分选模块的壳体外壁包括一个或更多个电气连接件，其被配置成用于所述颗粒分选模块与所述颗粒分选系统之间的电气连接。例如，所述外壳可以包括2个或以上的电气连接件，例如，3个或以上的电气连接件、4个或以上的电气连接件、5个或以上的电气连接件，包括10个或以上的电气连接件。在一些实施例中，所述电气连接件向所述液滴偏转板供电。可以采用任何合适的电气连接件，例如，在所述壳体外壁上突出或凹入所述外壁的导电引脚、垫、电线或线圈。在某些实施例中，目的颗粒分选模块包括5个或以上的电气引脚。关于电气连接件以及包括所述电气连接件的封闭式颗粒分选模块的更多详细信息请参阅公开号为US 2017-0299493、申请序列号为15/472,020的美国专利申请案；该专利中的内容以引用方式并入本文中。
所述颗粒分选模块壳体的尺寸也可能发生变化，其长度范围为10cm至100cm，例如，15cm至95cm、20cm至90cm、25cm至85cm、30cm至80cm、35cm至75cm，包括40cm至60cm。所述颗粒分选模块壳体的宽度范围可以是1cm至25cm，例如，2cm至20cm、3cm至15cm，包括5cm至10cm。
所述壳体可以由与流体样品(例如，生物样品)相容的任何合适的材料制成，包括金属、玻璃(例如，派热克斯玻璃、硼硅酸盐玻璃)、陶瓷或塑料。在某些实施例中，所述颗粒分选模块壳体由塑料制成，例如，硬质塑料、聚合材料或热塑性材料。例如，合适的塑料可以包括但不限于聚碳酸酯、聚氯乙烯(PVC)、聚氨酯、聚醚、聚酰胺、聚酰亚胺或所述热塑性塑料的共聚物，例如，PETG(经乙二醇改性的聚对苯二甲酸乙二醇酯)及其他聚合塑性材料。在某些实施例中，所述颗粒分选模块壳体由聚酯制成，其中目的聚酯可以包括但不限于聚(对苯二甲酸亚烷基酯)，例如，聚(对苯二甲酸乙二醇酯)(PET)、瓶级PET(基于单乙二醇、对苯二甲酸和其他共聚单体(例如间苯二甲酸、环己烯二甲醇等)制成的共聚物)、聚(对苯二甲酸丁二醇酯)(PBT)和聚(对苯二甲酸己二醇酯)；聚(己二酸亚烷基酯)，例如，聚(己二酸乙二醇酯)、聚(1,4-己二酸丁二醇酯)和聚(己二酸己二醇酯)；聚(辛二酸亚烷基酯)，例如，聚(辛二酸乙二醇酯)；聚(癸二酸亚烷基酯)，例如，聚(癸二酸乙二醇酯)；聚(ε-己内酯)和聚(β-丙内酯)；聚(间苯二甲酸亚烷基酯)，例如，聚(间苯二甲酸乙二醇酯)；聚(2,6-萘-二羧酸亚烷基酯)，例如，聚(2,6-萘-二羧酸乙二醇酯)；聚(磺酰基-4,4'-二苯甲酸亚烷基酯)，例如，聚(磺酰基-4,4'-二苯甲酸乙二醇酯)；聚(对亚苯基二羧酸亚烷基酯)，例如，聚(对亚苯基二羧酸乙二醇酯)；聚(反式-1,4-环己烷二基二羧酸亚烷基酯)，例如，聚(反式-1,4-环己烷二基二羧酸乙二醇酯)；聚(1,4-环己烷-二亚甲基二羧酸亚烷基酯)，例如，聚(1,4-环己烷-二亚甲基二羧酸乙二醇酯)；聚([2.2.2]-二环辛烷-1,4-二亚甲基二羧酸亚烷基酯)，例如，聚([2.2.2]-二环辛烷-1,4-二亚甲基二羧酸乙二醇酯)；乳酸聚合物和共聚物，例如，(S)-聚丙交酯、(R,S)-聚丙交酯、聚(四甲基乙交酯)和聚(丙交酯-共-乙交酯)；以及双酚A、3,3'-二甲基双酚A、3,3',5,5'-四氯双酚A、3,3',5,5'-四甲基双酚A的聚碳酸酯；聚酰胺，例如，聚(对亚苯基对苯二甲酰胺)；聚酯，例如，聚对苯二甲酸乙二醇酯，例如，MylarTM聚对苯二甲酸乙二醇酯等。
如上所述，所述封闭式颗粒分选模块包括位于所述壳体近端且具有孔口的流动池喷嘴。可以采用将流体样品传送至样品询问区域的任何合适的喷嘴流动池，其中在一些实施例中，所述流动池喷嘴包括限定纵向轴线的近端圆柱形部分和端接于具有喷嘴孔口的平坦表面、横向于纵向轴线的远端截头圆锥形部分。近端圆柱形部分的长度(沿纵向轴线测量)可能发生变化，范围为1mm至15mm，例如，1.5mm至12.5mm、2mm至10mm、3mm至9mm，包括4mm至8mm。远端截头圆锥形部分的长度(沿纵向轴线测量)也可能发生变化，范围为1mm至10mm，例如，2mm至9mm、3mm至8mm，包括4mm至7mm。在一些实施例中，流动池喷嘴腔的直径可能发生变化，范围为1mm至10mm，例如，2mm至9mm、3mm至8mm，包括4mm至7mm。
在某些情况下，所述喷嘴腔不包括圆柱形部分，且整个流动池喷嘴腔均为截头圆锥形。在这些实施例中，截头圆锥形喷嘴腔的长度(沿横向于所述喷嘴孔口的纵向轴线测量)范围为1mm至15mm，例如，1.5mm至12.5mm、2mm至10mm、3mm至9mm，包括4mm至8mm。截头圆锥形喷嘴腔近端部分的直径范围为1mm至10mm，例如，2mm至9mm、3mm至8mm，包括4mm至7mm。
在实施例中，所述样品流体介质从所述流动池喷嘴远端处的孔口流出。根据所述流体介质的所需特性，所述流动池喷嘴孔口可以是任何合适的形状，其中目的横截面形状包括但不限于：直线围成的横截面形状(例如，正方形、矩形、梯形、三角形、六边形等)、曲线围成的横截面形状(例如，圆形、椭圆形)以及不规则形状(例如，抛物线形底部连接至平面顶部)。在某些实施例中，目的流动池喷嘴具有圆形孔口。所述喷嘴孔口的尺寸可能发生变化，在一些实施例中，所述尺寸范围为1μm至20000μm，例如，2μm至17500μm、5μm至15000μm、10μm至12500μm、15μm至10000μm、25μm至7500μm、50μm至5000μm、75μm至1000μm、100μm至750μm，包括150μm至500μm。在某些实施例中，所述喷嘴孔口为100μm。
在一些实施例中，所述流动池喷嘴包括被配置成向所述流动池喷嘴提供样品的进样口。在实施例中，所述进样系统被配置成向所述流动池喷嘴腔提供合适的样品流。根据所述流体介质的所需特性，通过所述进样口将样品输送至所述流动池喷嘴腔的输送速率可以是1μL/min或以上，例如，2μL/min或以上、3μL/min或以上、5μL/min或以上、10μL/min或以上、15μL/min或以上、25μL/min或以上、50μL/min或以上，包括100μL/min或以上；在一些情况下，通过所述进样口将样品输送至所述流动池喷嘴腔的输送速率可以是1μL/s或以上，例如，2μL/s或以上、3μL/s或以上、5μL/s或以上、10μL/s或以上、15μL/s或以上、25μL/s或以上、50μL/s或以上，包括100μL/s或以上。
所述进样口可以是位于所述喷嘴腔壁中的孔口，或者是位于所述喷嘴腔近端的导管。在所述进样口是位于所述喷嘴腔壁中的孔口的情况下，所述进样口孔口可以是任何合适的形状，其中目的横截面形状包括但不限于：直线围成的横截面形状(例如，正方形、矩形、梯形、三角形、六边形等)、曲线围成的横截面形状(例如，圆形、椭圆形等)以及不规则形状(例如，抛物线形底部连接至平面顶部)。在某些实施例中，所述进样口具有圆形孔口。所述进样口孔口的尺寸可根据形状而变化，在某些情况下，其开口范围为0.1mm至5.0mm，例如，0.2至3.0mm、0.5mm至2.5mm、0.75mm至2.25mm、1mm至2mm，包括1.25mm至1.75mm，例如1.5mm。
在某些情况下，所述进样口是位于所述流动池喷嘴腔近端的导管。例如，所述进样口可以是导管，其位置使得所述进样口孔口与所述流动池喷嘴孔口在同一条直线上。在所述进样口是与所述流动池喷嘴孔口在同一条直线上的导管的情况下，所述进样管的横截面形状可以是任何合适的形状，其中目的横截面形状包括但不限于：直线围成的横截面形状(例如，正方形、矩形、梯形、三角形、六边形等)、曲线围成的横截面形状(例如，圆形、椭圆形)以及不规则形状(例如，抛物线形底部连接至平面顶部)。所述导管的孔口可根据形状而变化，在某些情况下，其开口范围为0.1mm至5.0mm，例如，0.2至3.0mm、0.5mm至2.5mm、0.75mm至2.25mm、1mm至2mm，包括1.25mm至1.75mm，例如1.5mm。所述进样口的顶端形状可以与所述进样管的横截面形状相同，也可以不同。例如，所述进样口孔口可能包括斜面顶端，其斜面角度范围为1°至10°，例如，2°至9°、3°至8°、4°至7°，包括5°的斜面角度。
在一些实施例中，所述流动池喷嘴也包括被配置成向所述流动池喷嘴提供鞘液的鞘液注入口。在实施例中，所述鞘液注入系统被配置成向所述流动池喷嘴腔提供鞘液流，例如，与所述样品结合，以在所述样品流体介质周围形成分层的鞘液流体介质。根据所述流体介质的所需特性，通过将所述鞘液输送至所述流动池喷嘴腔的输送速率可以是25μL/s或以上，例如，50μL/s或以上、75μL/s或以上、100μL/s或以上、250μL/s或以上、500μL/s或以上、750μL/s或以上、1000μL/ms或以上，包括2500μL/s或以上。
在一些实施例中，所述鞘液注入口是位于所述喷嘴腔壁中的孔口。所述鞘液注入口孔口可以是任何合适的形状，其中目的横截面形状包括但不限于：直线围成的横截面形状(例如，正方形、矩形、梯形、三角形、六边形等)、曲线围成的横截面形状(例如，圆形、椭圆形)以及不规则形状(例如，抛物线形底部连接至平面顶部)。所述进样口孔口的尺寸可根据形状而变化，在某些情况下，其开口范围为0.1mm至5.0mm，例如，0.2至3.0mm、0.5mm至2.5mm、0.75mm至2.25mm、1mm至2mm，包括1.25mm至1.75mm，例如1.5mm。
所述封闭式颗粒分选模块还包括与所述流动池喷嘴孔口通过流体连通的样品询问区域。样品流体介质从位于所述流动池喷嘴远端处的孔口流出，而且可以在所述颗粒分选模块的样品询问区域用光源辐照所述流体介质中的颗粒，下文对此提供了更为详细的描述。所述颗粒分选模块的询问区域的尺寸可以根据所述流体喷嘴的特性而变化，例如，所述喷嘴孔口的尺寸和进样口尺寸。在实施例中，所述询问区域的宽度可以是0.01mm或以上，例如，0.05mm或以上、0.1mm或以上、0.5mm或以上、1mm或以上、2mm或以上、3mm或以上、5mm或以上，包括10mm或以上。所述颗粒分选模块的所述询问区域的长度也可能发生变化，在一些情况下，所述区域的长度可以是0.01mm或以上，例如，0.1mm或以上、0.5mm或以上、1mm或以上、1.5mm或以上、2mm或以上、3mm或以上、5mm或以上、10mm或以上、15mm或以上、20mm或以上、25mm或以上，包括50mm或以上。
所述颗粒分选模块上的询问区域可被配置成有助于辐照所述流出流体介质的平面横截面，或者可被配置成有助于辐照预定长度的扩散场(例如，用扩散激光器或灯辐照)。在一些实施例中，所述颗粒分选模块上的询问区域包括透明窗口，所述透明窗口有助于辐射预定长度的流出流体介质，例如，1mm或以上、2mm或以上、3mm或以上、4mm或以上、5mm或以上，包括10mm或以上。根据用于辐射所述流出流体介质(如下所述)的光源，所述颗粒分选模块的询问区域可被配置成使一定波长范围的光通过，所述波长范围为100nm至1500nm，例如，150nm至1400nm、200nm至1300nm、250nm至1200nm、300nm至1100nm、350nm至1000nm、400nm至900nm，包括500nm至800nm。因此，位于所述询问区域的所述颗粒分选模块可以由任何能够通过所需波长范围的光的透明材料制成，包括但不限于光学玻璃、硼硅酸盐玻璃、派热克斯玻璃、紫外石英、红外石英、蓝宝石以及塑料，例如，用于制成上述壳体的任何聚合塑性材料。
在一些实施例中，目的颗粒分选模块包括位于所述样品询问区域内的比色皿。在一些情况下，所述比色杯利用诸如粘合剂或合适的机械固定方式(例如用夹子或螺钉)等固定在位于所述样品询问区域的所述颗粒分选模块内。在其他情况下，所述比色皿与位于所述样品询问区域的所述颗粒分选模块共模制。在某些情况下，所述比色杯直接并入所述颗粒分选模块中。所述比色杯可以由任何能够通过所需波长范围的光的透明材料制成，包括但不限于光学玻璃、硼硅酸盐玻璃、派热克斯玻璃、紫外石英、红外石英、蓝宝石以及塑料，例如聚碳酸酯、聚氯乙烯(PVC)、聚氨酯、聚醚、聚酰胺、聚酰亚胺或所述热塑性塑料的共聚物，例如，PETG(经乙二醇改性的聚对苯二甲酸乙二醇酯)及其他聚合塑性材料，包括聚酯，其中目的聚酯可以包括但不限于聚(对苯二甲酸亚烷基酯)，例如，聚(对苯二甲酸乙二醇酯)(PET)、瓶级PET(基于单乙二醇、对苯二甲酸和其他共聚单体(例如间苯二甲酸、环己烯二甲醇等)制成的共聚物)、聚(对苯二甲酸丁二醇酯)(PBT)和聚(对苯二甲酸己二醇酯)；聚(己二酸亚烷基酯)，例如，聚(己二酸乙二醇酯)、聚(1,4-己二酸丁二醇酯)和聚(己二酸己二醇酯)；聚(辛二酸亚烷基酯)，例如，聚(辛二酸乙二醇酯)；聚(癸二酸亚烷基酯)，例如，聚(癸二酸乙二醇酯)；聚(ε-己内酯)和聚(β-丙内酯)；聚(间苯二甲酸亚烷基酯)，例如，聚(间苯二甲酸乙二醇酯)；聚(2,6-萘-二羧酸亚烷基酯)，例如，聚(2,6-萘-二羧酸乙二醇酯)；聚(磺酰基-4,4'-二苯甲酸亚烷基酯)，例如，聚(磺酰基-4,4'-二苯甲酸乙二醇酯)；聚(对亚苯基二羧酸亚烷基酯)，例如，聚(对亚苯基二羧酸乙二醇酯)；聚(反式-1,4-环己烷二基二羧酸亚烷基酯)，例如，聚(反式-1,4-环己烷二基二羧酸乙二醇酯)；聚(1,4-环己烷-二亚甲基二羧酸亚烷基酯)，例如，聚(1,4-环己烷-二亚甲基二羧酸乙二醇酯)；聚([2.2.2]-二环辛烷-1,4-二亚甲基二羧酸亚烷基酯)，例如，聚([2.2.2]-二环辛烷-1,4-二亚甲基二羧酸乙二醇酯)；乳酸聚合物和共聚物，例如，(S)-聚丙交酯、(R,S)-聚丙交酯、聚(四甲基乙交酯)和聚(丙交酯-共-乙交酯)；以及双酚A、3,3'-二甲基双酚A、3,3',5,5'-四氯双酚A、3,3',5,5'-四甲基双酚A的聚碳酸酯；聚酰胺，例如，聚(对亚苯基对苯二甲酰胺)；聚酯，例如，聚对苯二甲酸乙二醇酯，例如，MylarTM聚对苯二甲酸乙二醇酯等。在实施例中，所述比色皿可使一定波长范围的光通过，所述波长范围为100nm至1500nm，例如，150nm至1400nm、200nm至1300nm、250nm至1200nm、300nm至1100nm、350nm至1000nm、400nm至900nm，包括500nm至800nm。
在一些实施例中，所述样品询问区域包括一个或更多个光学调节组件。“光学调节”是指根据需要改变辐照至所述样品询问区域中的光或从受辐照流体介质中收集到的光。在一些实施例中，所述样品询问区域包括光学调节组件，所述组件用于调节由光源辐照至所述样品询问区域中的光。在其他实施例中，所述样品询问区域包括光学调节组件，所述组件用于在源自受辐照流体介质的光被传输至检测器进行测定之前调节所述光。在其他实施例中，所述样品询问区域包括光学调节组件，所述组件用于在所述光被传输至检测器进行测定之前，调节由光源辐照至所述样品询问区域中的光以及源自受辐照流体介质的光。例如，所述光学调节可以是增加所述光的尺寸、使所述光聚焦或使所述光准直。在一些情况下，光学调节是一种放大方案，以便增加所述光(例如，射束点)的尺寸，例如，使所述尺寸增加5％或以上、10％或以上、25％或以上、50％或以上，包括使所述尺寸增加75％或以上。在其他实施例中，光学调节包括使所收集的光聚焦，以减小所述光的尺寸，例如，减小5％或以上、10％或以上、25％或以上、50％或以上，包括使所述射束点尺寸减小75％或以上。在某些实施例中，光学调节包括使所述光准直。依照常规含义，术语“准直”是指对光传播的共线性进行光学调节或基于公共传播轴线减少所述光的发散。在某些情况下，准直包括使光束的空间横截面变窄。
光学调节组件可以是使所收集的光发生所需改变的任何合适的设备或结构，并且可以包括但不限于透镜、镜子、针孔、狭缝、光栅、光折射器及其任何组合。所述颗粒分选模块可以根据需要包括置于所述样品询问区域的一个或更多个光学调节组件，例如，两个或以上、三个或以上、四个或以上，包括五个或以上的光学调节组件。
在所述颗粒分选模块包括置于所述样品询问区域的一个或更多个光学调节组件的情况下，所述光学调节组件可以与所述颗粒分选模块物理耦合(例如，利用粘合剂实现)；与所述壳体共模制；或直接集成至所述颗粒分选模块壳体中，其中所述光学调节组件位于所述样品询问区域。因此，可以将所述光学调节组件和所述颗粒分选模块集成至单个装置中。
在一些实施例中，所述光学调节组件是聚焦透镜，其放大率范围为0.1至0.95，例如，放大率范围为0.2至0.9、放大率范围为0.3至0.85、放大率范围为0.35至0.8、放大率范围为0.5至0.75，包括放大率范围为0.55至0.7，例如放大率为0.6。例如，在某些情况下，所述聚焦透镜是放大率约为0.6的双消色差缩倍透镜。所述聚焦透镜的焦距可以发生变化，所述焦距范围为5mm至20mm，例如，6mm至19mm、7mm至18mm、8mm至17mm、9mm至16mm，包括范围为10mm至15mm的焦距。在某些实施例中，所述聚焦透镜焦距约为13mm。
在其他实施例中，所述光学调节组件是准直仪。所述准直仪可以是任何合适的准直方案，例如，一面或多面镜子或曲面透镜或其组合。例如，在某些情况下，所述准直仪是单面准直透镜。在其他情况下，所述准直仪是一面准直镜。在其他情况下，所述准直仪包括两面透镜。在其他情况下，所述准直仪包括一面镜子和一面透镜。在所述准直仪包括一面或多面透镜的情况下，所述准直透镜的焦距可以发生变化，所述焦距范围为5mm至40mm，例如，6mm至37.5mm、7mm至35mm、8mm至32.5mm、9mm至30mm、10mm至27.5mm、12.5mm至25mm，包括范围为15mm至20mm的焦距。
在某些实施例中，所述光学调节组件是波长分离器。依据常规含义，本文中使用的术语“波长分离器”是指用于将多色光分离成其分量波长的光学方案。根据某些实施例的波长分离可以包括选择性阻挡所述多色光的特定波长或波长范围或使其通过。可能属于标的流动池喷嘴的一部分或与之结合使用的目的波长分离方案包括但不限于有色玻璃、带通滤光片、干涉滤光片、二向色镜、衍射光栅、单色仪及其组合，以及其他波长分离方案。在一些实施例中，所述波长分离器是滤光片。例如，所述滤光片可以是最小带宽范围为2nm至100nm的带通滤光片，例如，3nm至95nm、5nm至95nm、10nm至90nm、12nm至85nm、15nm至80nm，包括最小带宽范围为20nm至50nm的带通滤光片。
在实施例中，颗粒分选模块还包括液滴偏转器，其被配置成使从所述流体喷嘴中流出的流体介质所形成的液滴流中含有受分析细胞的液滴转移至接收位置，例如，与容器或已分选颗粒收集系统可操作地耦合的出口。已转移液滴此处可以称之为已分选液滴。使目的液滴转移至接收位置可以通过液滴偏转器实现，所述液滴偏转器会对所述液滴进行静电充电，并通过施加静电场使所述带电液滴与所述流体介质发生偏转。所述静电场可以由位于所述流体介质附近的偏转板产生。本文中使用的术语“偏转”是指使目的液滴与受分析液滴流体介质发生静电偏转，以便识别和跟踪所述流体介质中的细胞，且只有所述流体介质中包括目的细胞的所述液滴发生转移并被收集在容器中。在一些情况下，所述颗粒分选模块包括被配置成使单滴液滴偏转至每个容器中的液滴偏转器。
所述颗粒分选模块被配置成产生受分析液滴流，并使每个受分析液滴与受分析液滴流发生偏转，而后进入已偏转液滴接收位置。本文中使用的术语“已偏转液滴接收位置”是指所述液滴偏转器的下游位置，其中，在含有目的细胞的已分选液滴通过所述液滴偏转板发生偏转后，可以在所述位置收集所述液滴。目的颗粒分选模块可以根据需要具有两块或以上的偏转板，例如，3块或以上、4块或以上、5块或以上、6块或以上、7块或以上、8块或以上、9块或以上，包括10块或以上的偏转板。
所述流体介质中的颗粒可以通过任何合适的偏转板方案发生偏转，包括但不限于编号如下的美国专利中所述的细胞分选偏转板：3,960,449；4,347,935；4,667,830；5,245,318；5,464,581；5,483,469；5,602,039；5,643,796；5,700,692；6,372,506和6,809,804，这些专利中的内容以引用方式全文并入本文。在某些实施例中，所述偏转板包括用于对流式细胞术系统中所使用的流体介质中的细胞进行分选的带电板，所述系统诸如BDBiosciences InfluxTM细胞分选仪、BD Biosciences FACSAriaTMIII和BDFACSAriaTMFusion细胞分选仪、BD Biosciences FACSJazzTM细胞分选仪、BD BiosciencesFACSMelodyTM细胞分选仪等。
目的颗粒分选模块中的偏转板可以根据待分选的细胞类型、分选速率、向细胞施加的外加电压以及样品中待分选的组分数量进行配置。在实施例中，合适的偏转板的长度范围为5mm至100mm，例如，6mm至90mm、7mm至80mm、8mm至70mm、9mm至60mm，包括10mm至50mm。所述偏转板的宽度也可以发生变化，其范围为1mm至25mm，例如，2mm至20mm、3mm至15mm，包括5mm至10mm。每块偏转板之间的距离可以根据外加电压以及所述流体介质中待分选的颗粒尺寸而变化。在一些实施例中，每块偏转板之间的距离可以是1mm或以上，例如，2mm或以上、3mm或以上、4mm或以上、5mm或以上，包括10mm或以上。例如，每块偏转板之间的距离的范围可以是1mm至25mm，例如，2mm至22.5mm、3mm至20mm、4mm至17.5mm，包括5mm至15mm。所述偏转板还可以互成一定角度进行定向，例如成15°至75°角、成20°至70°角、成25°至65°角，包括成30°至60°角。
施加至偏转板以转移带电颗粒的电压(详见下文)可以是10mV或更高，例如，25mV或更高、50mV或更高、100mV或更高、250mV或更高、500mV或更高、750mV或更高、1000mV或更高、2500mV或更高、5,000mV或更高，包括10000mV或更高。在某些实施例中，施加至所述偏转板的电压范围为0.001V至6000V，包括0.001V至5000V，例如，0.01V至4000V、0.1V至3000V、1V至2000V、5V至1500V、10V至1000V、25V至750V，包括100V至500V。
所述偏转板被配置成将所述流体介质中的颗粒转移至位于所述偏转板下游的接收位置，例如，所述分选室的两个或以上不同出口中的任一个，所述出口诸如第一废物出口或第二分选颗粒出口等。在实施例中，所述偏转板可以不同角度转移每颗颗粒。在一些实施例中，所述偏转板被配置成以与所述流体介质的纵向轴线成0.5度或更大角度的方式使每颗颗粒发生偏转，例如，1度或以上、1.5度或以上、2度或以上、2.5度或以上、3度或以上、5度或以上、7.5度或以上，包括以与所述流体介质的纵向轴线成10度或更大角度的方式使每颗颗粒发生偏转。例如，每颗颗粒可以在与所述流体介质的纵向轴线成一定角度的情况下发生转移，所述角度范围为0.1度至30度，例如0.5度至25度、1度至20度、2度至15度，包括5度至10度。
在一些实施例中，标的颗粒分选模块的远端被配置成用于耦合至一个或更多个容器，以收集来自所述流体介质中的已偏转颗粒液滴。例如，所述颗粒分选模块的远端可被配置成用于通过诸如所述壳体上的出口等耦合至1个或多个容器，例如，2个或以上的容器、3个或以上的容器、4个或以上的容器、5个或以上的容器、6个或以上的容器、10个或以上的容器，包括25个或以上的容器。在某些情况下，所述壳体远端可以包括一个或更多个用于使所述壳体与容器耦合的对准件。用于使所述壳体远端与容器耦合的合适对准件可以包括但不限于对准突出物、对准轨道、对准凹口、对准凹槽、对准槽、对准埋头孔、对准沉孔、对准凹部、对准孔或其组合。在一些实施例中，所述壳体远端还包括一个或更多个用于将所述容器固定在所述壳体远端的紧固件。合适的紧固件可以包括但不限于磁体、钩环扣、闩锁、凹口、凹槽、销、系绳、铰链、尼龙搭扣、非永久性粘合剂或其组合。在某些实施例中，所述壳体远端包括通过螺纹连接使容器与所述壳体耦合的螺纹。
在某些实施例中，所述颗粒分选模块包括在所述壳体远端接收来自所述流体介质的已偏转颗粒的一个或更多个容器。例如，根据这些实施例的所述颗粒分选模块可以包括2个或以上的容器，例如，3个或以上的容器、4个或以上的容器、5个或以上的容器、6个或以上的容器，包括10个或以上的容器。在一些实施例中，所述容器通过诸如鲁尔旋锁连接、无菌管焊接或与所述壳体进行螺纹连接等，实现与所述壳体远端的机械耦合。在其他实施例中，所述容器通过永久性或非永久性粘合剂固定在所述壳体远端处。在其他实施例中，所述容器与所述颗粒分选模块壳体共模制。在其他实施例中，所述容器与所述壳体集成在一起，使得所述容器和壳体构成单个装置。在其他情况下，所述容器可以通过诸如被配置成输送已分选液滴的管道系统等，从而与所述壳体以流体连通方式耦合，其中所述实施例可以实现已分选液滴的无菌收回，例如，通过捏夹和切割所述流体输送结构(例如，管道系统)。用于收集来自所述流体介质的液滴的合适容器可以包括但不限于试管、锥形管、多隔室容器(例如微量滴定板(例如96孔板))、离心管、培养管、微管、盖、比色皿、瓶子、直线型聚合物容器和袋子以及其他类型的容器。
目的容器也可以是柔性样品容器，例如袋子，例如，无菌袋。“柔性”是指使所述样品容器相较于其原始形状发生弯曲或屈曲且无任何明显的结构变化，例如，撕裂、破裂、穿孔等。例如，柔性样品容器可以相较于其原始形状发生屈曲和/或变形，同时仍保持密封层状态，防止所述样品容器内的流体与周围环境接触。在一些情况下，所述柔性样品容器由杨氏模量不超过1GPa的柔性材料制成，例如，0.7GPa或以下，包括0.5GPa或以下，例如，0.3GPa或以下、0.1GPa或以下、0.05GPa或以下、0.01GPa或以下。在某些实施例中，所述柔性样品容器中的流体是无菌的，即，无或基本上无活菌或其他微生物。在某些实施例中，容器(例如，低温容器)中可能含有缓冲液。目的容器包括基于乙烯-醋酸乙烯酯(EVA)的容器，例如，EVA冻存袋、CRYOCTYTETM冻存袋(Baxter Healthcare Corporation，伊利诺伊州迪尔菲尔德)、CELL-
低温冻存袋(Charter Medical，北卡罗来纳州温斯顿-塞勒姆)、ORIGENCRYOSTORETM冻存袋(OriGen BioMedical，得克萨斯州奥斯汀)。
关于容器以及包括所述容器的封闭式颗粒分选模块的更多详细信息请参阅公开号为US 2017-0299493、申请序列号为15/472,020的美国专利申请案；该专利中的内容以引用方式并入本文中。
在一些情况下，所述容器是已分选颗粒收集系统，其包括收集容器，所述收集容器具有与所述封闭式颗粒分选模块的出口存在液滴接收关系的分选管；样品输出端，其使所述收集容器的细胞收集位置与真空接收容器(例如，
采血管)的配合连接件可操作地耦合。关于所述已分选颗粒收集系统的更多详细信息请参阅以下出版物：于2018年4月27日提交的申请序列号为62/663,792的美国专利申请案(代理人案号：BECT-157PRV；P-15882@)；以及于2019年4月22日提交的申请序列号为16/390,376且主张相应优先权的美国专利申请案；所述专利中的内容以引用方式并入本文中。
有关所述分选模块的任何流体连接件(例如，在所述分选模块内和/或在所述分选模块与所述系统的其他方面(例如，接收容器(例如袋子)、输入管等)之间)可以根据需要通过无菌管焊接制成。可以采用任何合适的无菌管焊接系统和材料。
图1提供了根据本发明的实施例所述的封闭式颗粒分选模块的图示。如图1所示，封闭式颗粒分选模块100包括壳体105，所述壳体105包围着所述分选模块的不同组件，例如，样品询问区域140和分选室125。样品输入端110位于所述分选模块的顶端或近端。图中还示出了鞘液输入端120和废物池接头115。废物出口130和已分选颗粒出口135位于所述模块的底部且负责为所述分选室提供出口。
流式细胞仪系统
如上所述，本发明的方面还包括流式细胞仪系统，所述封闭式颗粒分选模块可与所述系统可操作地接合，从而得到被配置成用于分选样品中的颗粒组分(例如生物样品中的细胞)的流式细胞仪，即，细胞分选仪型流式细胞仪。根据某些实施例的系统包括一个或更多个封闭式颗粒分选模块(例如，如上所述的分选模块)；在所述颗粒分选模块的近端与入口以流体连通方式耦合的样品输入模块；以及与所述颗粒分选模块的出口以流体连通方式耦合的废物池，例如，槽或其他容器。在实施例中，所述系统被配置成与一个或更多个上述封闭式颗粒分选模块耦合。为了连接所述颗粒分选模块，所述系统可以包括被配置成与所述颗粒分选模块壳体上的对准件耦合的配准器。配准器可以包括一个或更多个对准件，所述对准件与所述颗粒分选系统壳体上的对准件互补。例如，所述配准器可以包括2个或以上的对准件，例如，3个或以上的对准件、4个或以上的对准件、5个或以上的对准件、7个或以上的对准件，包括10个或以上的对准件。在某些实施例中，所述颗粒分选系统配准器包括3个对准件。关于对准件以及包括所述对准件的流式细胞仪系统的更多详细信息请参阅公开号为US2017-0299493、申请序列号为15/472,020的美国专利申请案；该专利中的内容以引用方式并入本文中。
如上所述，系统还包括在所述颗粒分选模块的近端与入口以流体连通方式耦合的样品输入模块。在实施例中，所述样品输入模块被配置成向所述颗粒分选模块中的所述流动池喷嘴腔提供合适的样品流。根据从所述流体喷嘴中流出的所述流体介质的所需特性，通过所述样品输入模块将样品输送至所述颗粒分选模块的输送速率可以是1μL/min或以上，例如，2μL/min或以上、3μL/min或以上、5μL/min或以上、10μL/min或以上、15μL/min或以上、25μL/min或以上、50μL/min或以上，包括100μL/min或以上；在一些情况下，所述流速可以是1μL/s或以上，例如，2μL/s或以上、3μL/s或以上、5μL/s或以上、10μL/s或以上、15μL/s或以上、25μL/s或以上、50μL/s或以上，包括100μL/s或以上。
在实施例中，所述样品流体输入端包括容器、盖和进入所述容器内腔的一个或更多个端口。所述容器具有远端、近端以及位于所述远端与近端之间的壁，所述壁组合形成所述容器的内腔。在一些实施例中，所述容器的外壁和内腔的横截面形状相同，其中目的横截面形状包括但不限于曲线围成的横截面形状(例如，圆形、椭圆形)、直线围成的横截面形状(例如，正方形、矩形、梯形、三角形、六边形等)以及不规则形状(例如，抛物线形底部连接至平面顶部)。例如，所述容器的外壁和内腔都可以具有圆形或椭圆形横截面，或者所述容器的外壁和内腔都可以具有多边形(例如，八边形)横截面。在其他实施例中，所述容器的外壁和内腔具有不同的横截面形状(例如，具有多边形横截面的容器和具有圆形横截面的内腔)。在某些实施例中，所述容器是管，且所述外壁和内壁的横截面形状均为圆形。
所述容器的内腔尺寸可以根据所述样品尺寸和颗粒分选模块的尺寸而变化，其中，在一些情况下，所述容器的内腔长度范围可以是1cm至25cm，例如，2.5cm至22.5cm、5cm至20cm、7.5cm至17.5cm，包括10cm至15cm；而所述容器的内腔宽度范围可以是1cm至20cm，例如，2cm至17.5cm、3cm至15cm、4cm至12.5cm，包括5cm至10cm。在所述容器的内腔具有圆柱形横截面的情况下，在一些实施例中，所述直径可能发生变化，所述直径范围为1cm至10cm，例如，2cm至9cm、3cm至8cm，包括4cm至7cm。因此，所述容器的体积可能发生变化，其范围为1至500cm3，例如，5至250cm3、10至200cm3、15至150cm3、20至125cm3，包括25至100cm3。在一些实施例中，所述样品输入模块的容器是管，其体积范围为1mL至500mL，例如，2mL至400mL、3mL至300mL、4mL至200mL、5mL至150mL，包括10mL至100mL。
所述容器可以由任何合适的材料制成，包括但不限于玻璃、金属或塑料(例如，柔性或硬质塑料)、聚合材料或热塑性材料(例如，如上所述的材料)。
在实施例中，所述样品输入模块的容器还包括被配置成封闭所述容器近端的盖。例如，所述盖可以是螺旋盖、卡扣盖或通过永久性、半永久性或非永久性粘合剂粘接在容器上的盖。在某些情况下，所述盖与所述容器的壁形成液封。所述盖可以是所述容器的一个组成部分，包括将所述盖与所述容器一同模制，将所述盖锡焊、焊接或使用永久性粘合剂粘接在所述容器上。在其他实施例中，所述盖可释放地附接在容器上。“可释放地”是指所述盖可以自由地从所述容器的近端拆下并重新附接于所述容器的近端。在将所述盖可释放地附接在容器上的情况下，可以通过任何合适的附接方案将所述盖非永久性地紧固在容器上，包括但不限于钩环扣、闩锁、凹口、凹槽、销、系绳、铰链、尼龙搭扣、非永久性粘合剂、带螺纹的螺钉或其组合。在某些情况下，所述容器包括带螺纹的外壁，并与所述盖的内壁进行螺纹连接。
所述盖可以包括一个或更多个通入所述容器内腔中的端口，例如，2个或以上的端口、3个或以上的端口、4个或以上的端口，包括5个或以上的端口。在某些实施例中，所述盖包括两个端口。所述端口可以是被配置成与所述容器的内腔通过流体或气体连通的任何合适的端口。在一些实施例中，所述盖包括端口，所述端口被配置成将气体输送至所述容器中以在所述容器内产生正压，并且将所述容器内的样品流体通过第二端口输送至所述颗粒分选模块。在某些情况下，所述容器包括所述盖中的第三开口，以排出空气。
可以根据所述端口的所需功能采用任何合适的端口配置，其中端口示例包括通道、孔口、具有止回阀的通道、鲁尔圆锥接头、具有易碎密封件的端口(例如，一次性端口)以及其他类型的端口。在某些实施例中，所述端口配置有鲁尔圆锥接头，例如鲁尔旋锁或鲁尔滑锁。所述样品输入模块的盖中的端口可以是任何合适的形状，其中目的端口的横截面形状包括但不限于：直线围成的横截面形状(例如，正方形、矩形、梯形、三角形、六边形等)、曲线围成的横截面形状(例如，圆形、椭圆形等)以及不规则形状(例如，抛物线形底部连接至平面顶部)。所述端口的尺寸可能发生变化，在一些实施例中，所述端口的尺寸范围为1mm至100mm，例如，2mm至95mm、3mm至90mm、4mm至80mm、5mm至70mm、6mm至60mm，包括10mm至50mm。在一些实施例中，所述端口是一个圆形孔口，且所述端口的直径范围为1mm至100mm，例如，2mm至90mm、4mm至80mm、5mm至70mm、6mm至60mm，包括10mm至50mm。因此，根据所述端口的形状，所述盖中的端口可以是具有面积范围为0.01mm2至250mm2的开口，例如，0.05mm2至200mm2、0.1mm2至150mm2、0.5mm2至100mm2、1mm2至75mm2、2mm2至50mm2，包括5mm2至25mm2。
关于样品输入模块以及包括所述样品输入模块的系统的更多详细信息请参阅公开号为US 2017-0299493、申请序列号为15/472,020的美国专利申请案；该专利中的内容以引用方式并入本文中。
如上所述，目的颗粒分选系统还包括与所述颗粒分选模块的出口以流体连通方式耦合的废物池。在一些实施例中，所述废物槽包括一个或更多个端口，例如，用于排放所述颗粒分选模块中的累积气体压力的端口；用于收集来自所述颗粒分选模块的废物的端口；以及用于排放所述废物池中的累积气体压力的端口；或其任何组合。在一些实施例中，所述废物池可以通过一个或更多个端口与所述颗粒分选模块通过流体连通。例如，所述废物池可以包括2个或以上的端口，例如，3个或以上的端口、4个或以上的端口，包括5个或以上的端口。在某些实施例中，所述废物池包括两个端口。所述端口可以是被配置成与所述废物池的内腔通过流体或气体连通的任何合适的端口。在一些实施例中，所述废物池包括被配置成排放(即释放)所述废物池中的累积气体压力的端口。在其他实施例中，所述废物池包括接收来自所述颗粒分选模块的废液的端口。在其他实施例中，所述废物池包括被配置成排放所述颗粒分选模块中的累积气体压力的端口，例如，排放所述颗粒分选模块的流动池部分。
可以根据所述端口的所需功能采用任何合适的端口配置，其中端口示例包括通道、孔口、具有止回阀的通道、鲁尔圆锥接头、具有易碎密封件的端口(例如，一次性端口)以及其他类型的端口。在某些实施例中，所述端口配置有鲁尔圆锥接头，例如鲁尔旋锁或鲁尔滑锁。所述废物槽端口可以是任何合适的形状，其中目的端口的横截面形状包括但不限于：直线围成的横截面形状(例如，正方形、矩形、梯形、三角形、六边形等)、曲线围成的横截面形状(例如，圆形、椭圆形等)以及不规则形状(例如，抛物线形底部连接至平面顶部)。所述端口的尺寸可能发生变化，在一些实施例中，所述端口的尺寸范围为1mm至100mm，例如，2mm至95mm、3mm至90mm、4mm至80mm、5mm至70mm、6mm至60mm，包括10mm至50mm。在一些实施例中，所述端口是圆形孔口，且所述端口的直径范围为1mm至100mm，例如，2mm至90mm、4mm至80mm、5mm至70mm、6mm至60mm，包括10mm至50mm。因此，根据所述端口的形状，所述废物槽中的端口可以是具有面积范围为0.01mm2至250mm2的开口，例如，0.05mm2至200mm2、0.1mm2至150mm2、0.5mm2至100mm2、1mm2至75mm2、2mm2至50mm2，包括5mm2至25mm2。
在一些实施例中，所述废物池可以通过一根或更多根导管与所述颗粒分选模块以流体连通方式耦合。例如，所述颗粒分选模块可以通过2根或以上的导管与所述废物池以流体连通方式耦合，例如，3根或以上的导管，包括5根或以上的导管。将所述颗粒分选模块与所述废物槽耦合的导管包括与所述颗粒分选模块连接的近端以及与所述废物槽连接的远端。
每根导管的长度可能发生变化，而且每根导管的长度可以独立地为5cm或以上，例如，7cm或以上、10cm或以上、25cm或以上、30cm或以上、50cm或以上、75cm或以上、100cm或以上、250cm或以上，包括500cm或以上。每根导管的管腔直径可能发生变化，所述直径可以是0.5mm或以上，例如，0.75mm或以上、1mm或以上、1.5mm或以上、2mm或以上、5mm或以上、10mm或以上、25mm或以上，包括50mm或以上。例如，所述管腔直径的范围可以是0.5mm至50cm，例如，1mm至25mm，包括5mm至15mm。
每根导管均可以由薄材料制成，例如所述导管壁的厚度为5mm或以下，例如，3mm或以下、2mm或以下，包括1mm或以下或0.5mm或以下，例如，0.4mm或以下、0.3mm或以下、0.2mm或以下，包括0.1mm或以下。在某些实施例中，所述导管由杨氏模量不超过1GPa的柔性材料制成，例如，0.9GPa或以下、0.8GPa或以下、0.7GPa或以下、0.6GPa或以下、0.5GPa或以下、0.4GPa或以下、0.3GPa或以下、0.2GPa或以下、0.1GPa或以下，包括0.01GPa或以下。在某些实施例中，所述导管由聚合材料制成，例如，但不限于诸如如上所述的材料，包括但不限于：聚氯乙烯(PVC)、醋酸乙烯乙酯(EVA)、聚乙烯、聚丙烯、其组合等。
所述废物池可以包括一个或更多个腔室。在一些实施例中，所述废物池具有单个腔室，其用于收集来自所述颗粒分选模块的所有废弃组分。在其他实施例中，所述废物池具有一个以上的腔室，例如，2个或以上的腔室、3个或以上的腔室，包括4个或以上的腔室。多腔室废物槽中的每个腔室可以具有一根或更多根入口和出口导管。例如，所述两个或更多个腔室可与单根导管通过流体连通。所述两个或更多个腔室的内腔可以通过Y型接头、阀门(例如，夹管阀)等连接在一起。
在所述废物池包括一个以上的腔室的情况下，每个不同的腔室可被配置成接收相同或不同的流体。例如，第一废物槽室可以收集并容纳来自所述流体介质的不带电且未偏转的颗粒，而第二废物槽室可以收集并容纳来自所述流体介质的已偏转但尚未收集的颗粒。在其他实施例中，第一废物槽室可以收集并容纳来自所述流体介质的过量鞘液和废弃的过量样品流体，而第二废物槽室可以收集来自所述流体介质的已分选但不合需求的样品流体组分。
在一些实施例中，所述废物池包括一个或更多个端口，例如，用于排放所述颗粒分选模块中的累积气体压力的端口；用于收集来自所述颗粒分选模块的废物的端口；以及用于排放所述废物槽中的累积气体压力的端口；或其任何组合。来自所述颗粒分选模块的废物流可以通过导管输送至所述废物槽。所述导管可以通过接头与所述废物槽耦合，例如，鲁尔旋锁接头或螺纹配合接头。
关于废物池以及包括所述废物池的系统的更多详细信息请参阅公开号为US2017-0299493、申请序列号为15/472,020的美国专利申请案；该专利中的内容以引用方式并入本文中。
根据某些实施例的颗粒分选系统还包括用于将鞘液输送至所述封闭式颗粒分选模块的流动池喷嘴处的鞘液输送子系统。依照常规含义，本文中使用的术语“鞘液”是指通过导管(例如，流式细胞仪中的导管)输送的流体，所述导管用于形成与含有样品的流体同轴的环状流，从而以流体动力学方式使所述鞘液流中心含有颗粒的样品流体形成聚集流。目的鞘液可以是任何合适的缓冲组合物(例如，用于流式细胞仪的缓冲组合物)，并且可以包括一种或多种盐，包括但不限于磷酸钾、氯化钾、磷酸钠、氯化钠、防腐剂以及螯合剂，例如乙二胺四乙酸二钠(EDTA)。在实施例中，所述鞘液分配系统包括含有鞘液的储液池；以及导管，其近端与所述鞘液池通过流体连通，而其远端与所述颗粒分选模块的鞘液输入端通过流体连通。
在一些实施例中，所述鞘液输送子系统包括具有柔性容器的加压壳体，所述柔性容器具有位于所述壳体内的鞘液池。在其他实施例中，所述鞘液输送子系统包括壳体以及位于所述壳体内的第一柔性容器和第二柔性容器。所述第一柔性容器包括储液池和具有近端和远端的导管，其中所述近端与所述储液池以流体连通方式耦合，而所述远端被配置成用于使所述导管与所述颗粒分选模块耦合；所述第二柔性容器包括储气池和与所述储气池通过气体连通的端口。在这些实施例中，所述第二柔性容器与所述第一柔性容器均位于所述壳体内，而且所述第二柔性容器被配置成向所述第一柔性容器的储液池施加压力，以将鞘液从所述导管远端输送至所述颗粒分选模块中。
在某些实施例中，目的颗粒分选系统包括用于将鞘液输送至所述颗粒分选模块的鞘液输送子系统，例如，以下出版物中所述的鞘液输送子系统：于2016年10月24日提交的公开号为WO 2017/040151的第PCT/US2016/048433号共同未决的PCT专利申请案；以及现作为第9,551,643号美国专利发布的第14/365,602号美国专利申请案，这些专利中的内容以引用方式全文并入本文。关于鞘液输送子系统以及包括所述鞘液输送子系统的系统的更多详细信息请参阅公开号为US 2017-0299493、申请序列号为15/472,020的美国专利申请案；该专利中的内容以引用方式并入本文中。
如上所述，有关所述分选模块的任何流体连接件(例如，在所述分选模块内和/或在所述分选模块与所述系统的其他方面(例如，接收容器(例如袋子)、输入管等)之间)可以根据需要通过无菌管焊接制成。可以采用任何合适的无菌管焊接系统和材料。
如上所述，本发明的系统被配置成控制所述封闭式颗粒分选模块或其至少一个区域(例如，分选室)内的气溶胶含量。在一些实施例中，所述系统被配置成减少所述分选室内气溶胶的产生。“减少气溶胶的产生”是指，与合适的控件(例如，公开号为US 2017-0299493、申请序列号为15/472,020的美国专利申请案中所述的设备)相比，使产生的气溶胶减少2倍或以上，例如，5倍或以上，包括10倍或以上。
可以采用一种或多种气溶胶减少方法来减少气溶胶的产生，例如，如下所述的方法。在一些情况下，所述封闭式颗粒分选模块被配置成最大限度地减少所述废物流与所述颗粒分选模块内表面的接触。在这些情况下，选择或制造所述封闭式颗粒分选模块(包括其分选室)的内部构造或设计构型，使所述废物流和分选流(在一些情况下)避免与其固体表面接触。在一些情况下，所述特定分选模块被配置成使所述废物流通过第一出口(即，使所述分选室与废物池以流体连通方式耦合的出口)排出且不会接触所述第一出口壁。例如，所述出口可与所述废物流的纵向轴线轴向对准，使所述废物流在穿过所述出口时恰好穿过所述出口的中心。在这种情况下，所述出口的尺寸可能发生变化，其中，在一些情况下，所述出口的直径范围为2.5至25mm，例如，5至10mm。在一些情况下，所述废物池通过柔性管线(例如，如上所述的管线)与所述第一出口以流体连通方式耦合。虽然所述柔性管线的尺寸可能发生变化，但是在一些情况下，所述柔性管线的内径范围为2.5mm至25mm，例如，5mm至10mm。如有需要，将所述柔性管线配置成使所述废物流首先在与所述出口相距预先确定的距离处与所述柔性管线的内壁接触。虽然所述距离可能发生变化，但可以选择所述距离，以减少因接触而形成的气溶胶液滴流回所述分选室的几率。在一些情况下，所述柔性管线的纵向轴线与所述出口的中心对准，所述对准距离为5mm或以上，例如，10mm或以上，包括25mm或以上，包括50mm或以上。为了最大限度地减少气溶胶的产生，在一些情况下，将柔性管线配置成使所述废物流首先以较小的角度接触所述柔性管线的内壁。虽然在这种情况下所述接触角可能发生变化，但是在某些实施例中，所述接触角的范围为0.5至25°，例如，0.5至15°，包括0.5至5°。
此外或者除了通过合适的分选室和/或废物管线构造(例如，如上所述的构造)来减少气溶胶形成之外，本发明的流式细胞仪系统可被配置成使所述封闭式颗粒分选模块的分选室内的温度维持在露点以上。依照常规含义，本文中使用的术语“露点”是指低于其则水滴开始冷凝且可以形成露水的温度(根据压力和湿度而变化)。所述系统可被配置成在分选室内提供范围为1至30℃的露点，例如，2至25℃，包括3至15℃。本发明的系统可被配置成采用各种不同的方法使所述分选室内的温度维持在所述露点以上。在一些情况下，所述系统包括被配置成使所述温度维持在所述露点以上的加热器。所述加热器可以是任何合适类型的加热器，例如，电阻式加热器、可见光辐射加热器、红外辐射加热器等。目的电阻式加热器包括但不限于具有金属加热元件、陶瓷加热元件、聚合物PTC加热元件、组合加热元件、复合加热元件等的加热器。所述加热元件可被配置成使其为所述封闭式颗粒分选模块的分选室进行辐射加热。所述加热元件可以根据需要集成至所述流式细胞仪系统和/或所述封闭式颗粒分选模块中。因此，在一些情况下，所述加热元件是所述流式细胞仪系统的一个组成部分，而非所述封闭式颗粒分选模块的一部分。在其他情况下，所述加热元件被集成至所述封闭式颗粒分选模块中。给定加热器可以根据需要由单个加热元件或两个或以上的加热元件制成。在一些情况下，所述加热元件被配置成使所述封闭式颗粒分选模块的分选室内的温度范围为5至40℃，例如，10至35℃，包括15至30℃。
另外或此外，所述流式细胞仪可被配置成控制所述分选室内的湿度。在这种情况下，所述流式细胞仪可被配置成使所述分选室内的相对湿度低于75％，例如，低于60％，包括低于50％；在一些情况下，所提供的相对湿度的范围可以是1至50％，例如，5至25％，包括5至15％。可以采用任何合适的方法来控制所述分选室的湿度。在一些情况下，所述系统包括位于所述分选室与所述废物池之间的封闭式再循环气流管道。封闭式再循环气流管道是指在所述废物池与所述封闭式颗粒分选模块之间提供的未通向外部环境的再循环气体管线，这使得诸如空气等气体可以在所述废物池内部与所述封闭式颗粒分选室内部之间循环，且不会受到外部环境的污染。所述封闭式再循环气流管道由一根或更多根不同的流体管线组成，例如，如上所述的管线，这些流体管线与所述废物池内部和所述封闭式颗粒分选模块连接。通过所述封闭式再循环气流管道的气流流速可能发生变化，并且在一些情况下，所述流速为5至500mL/min，例如，10至200mL/min。可以采用任何合适的方法来提供所需气流，其中在一些情况下，可以利用诸如蠕动泵等泵来提供所需气流。如有需要，所述再循环气流管道可以包括干燥剂，例如，放置于所述封闭式再循环气流管道的一个或更多个区域或位置。可以采用任何合适的干燥剂，例如但不限于：干燥的粘土材料，例如，蒙脱石粘土、硅胶等。
如上所述，标的系统被配置成对样品(例如，生物样品)中的颗粒组分进行分选。在一些实施例中，系统进一步包括被配置成辐照和识别流体介质中的样品的颗粒组分的光检测系统。在这些实施例中，系统包括一个或更多个用于辐照流体介质中的样品的光源。所述光源可以是一种宽带光源，其发射出具有宽范围波长的光，例如，跨度为50nm或以上、100nm或以上、150nm或以上、200nm或以上、250nm或以上、300nm或以上、350nm或以上、400nm或以上，包括500nm或以上的跨度。例如，一种合适的宽带光源发射出波长范围为200nm至1500nm的光。合适的宽带光源的另一示例包括发射出波长范围为400nm至1000nm的光的光源。可以采用任何合适的宽带光源方案，例如，卤素灯、氘弧灯、氙弧灯、稳定的光纤耦合宽带光源、具有连续光谱的宽带LED、超辐射发光二极管、半导体发光二极管、宽光谱LED白色光源、多颗LED集成光源及其他宽带光源或上述任意组合。
在其他实施例中，所述光源是一种发射出特定波长或窄范围波长的光的窄带光源。在一些情况下，所述窄带光源发射出具有窄范围波长的光，例如，所述波长为50nm或以下、40nm或以下、30nm或以下、25nm或以下、20nm或以下、15nm或以下、10nm或以下、5nm或以下、2nm或以下，且包括发射出一种特定波长的光(即单色光)的光源。可以采用任何合适的窄带光源方案，例如，窄波长LED、激光二极管或与一个或更多个光学带通滤波器、衍射光栅、单色仪耦合的宽带光源或其任意组合。
在某些实施例中，所述光源是一种激光器。在一些情况下，目的系统包括气体激光器，例如，氦氖激光器、氩激光器、氪激光器、氙激光器、氮激光器、CO2激光器、CO激光器、氟化氩(ArF)准分子激光器、氟化氪(KrF)准分子激光器、氯化氙(XeCl)准分子激光器或氟化氙(XeF)准分子激光器或其组合。在其他情况下，目的系统包括染料激光器，例如，二苯乙烯、香豆素或罗丹明激光器。在其他情况下，目的激光器包括金属蒸气激光器，例如，氦镉(HeCd)激光器、氦汞(HeHg)激光器、氦硒(HeSe)激光器、氦银(HeAg)激光器、锶激光器、氖铜(NeCu)激光器、铜激光器或金激光器及其组合。在其他情况下，目的系统包括固态激光器，例如，红宝石激光器、Nd:YAG激光器、NdCrYAG激光器、Er:YAG激光器、Nd:YLF激光器、Nd:YVO4激光器、Nd:YCa4O(BO3)3激光器、Nd:YCOB激光器、钛蓝宝石激光器、thulim YAG激光器、YAG镱激光器、三氧化二镱激光器或掺铈激光器及其组合。
目的系统可以根据需要包括一种或多种光源，例如，两种或以上的光源、三种或以上的光源、四种或以上的光源、五种或以上的光源，包括十种或以上的光源。所述光源可能包括光源类型的任意组合。例如，在一些实施例中，标的系统包括激光器阵列，例如，具有一台或更多台气体激光器、一台或更多台染料激光器和一台或更多台固态激光器的阵列。在其他情况下，在采用两个光源的情况下，第一光源可以是宽带白光源(例如，宽带白光LED)；而第二光源可以是宽带近红外光源(例如，宽带近红外LED)。在其他情况下，在采用两个光源的情况下，第一光源可以是宽带白光源(例如，宽带白光LED)；而所述第二光源可以是窄光谱光源(例如，近红外LED或激光器)。在一些情况下，所述光源是各自发射出特定波长的光的多个窄带光源，例如，两台或以上的激光器、三台或以上的激光器，包括五台或以上的激光器。在其他情况下，所述光源是由两个或以上的LED组成的阵列，例如由三个或以上的LED组成的阵列、由五个或以上的LED组成的阵列，包括由十个或以上的LED组成的阵列。
在一些实施例中，光源发射出波长范围为200nm至1500nm的光，例如，250nm至1250、300nm至1000nm、350nm至900nm，包括400nm至800nm。例如，所述光源可能包括发射的光的波长范围为200nm至900nm的宽带光源。在其他情况下，所述光源包括发射出波长范围为200nm至900nm的光的多个窄带光源。例如，所述光源可以是多个窄带LED(1nm–25nm)，每个LED分别发射出波长介于200nm至900nm之间的光。在一些实施例中，所述窄带光源是发射出波长范围为200nm至900nm的光的一个或更多个窄带灯，例如，窄带镉灯、铯灯、氦灯、汞灯、汞-镉灯、钾灯、钠灯、氖灯、锌灯或其任意组合。在其他实施例中，所述窄带光源包括发射出波长范围为200nm至1000nm的光的一台或更多台激光器，例如，如上所述的气体激光器、准分子激光器、染料激光器、金属蒸气激光器和固态激光器。
所述光源相对于所述流体介质以一定角度安置，例如，所成角度范围为10°至90°、15°至85°、20°至80°、25°至75°，包括30°至60°。在某些实施例中，所述光源相对于所述样品以90°角安置。
在这些实施例中，目的系统还包括一台或更多台用于检测和测定来自所述流体介质的光的检测器。目的检测器可能包括但不限于光学传感器或光电检测器，例如，有源像素传感器(APS)、雪崩光电二极管、图像传感器、电荷耦合装置(CCD)、增强型电荷耦合装置(ICCD)、发光二极管、光子计数器、辐射热测定器、热电检测器、光敏电阻、光伏电池、光电二极管、光电倍增管、光电晶体管、量子点光电导体或光电二极管及其组合以及其他光电检测器。在某些实施例中，采用电荷耦合装置(CCD)、半导体电荷耦合装置(CCD)、有源像素传感器(APS)、互补金属氧化物半导体(CMOS)、图像传感器或N型金属氧化物半导体(NMOS)图像传感器测量透射光。在一些实施例中，所述成像传感器是CCD相机。例如，所述相机可以是电子倍增CCD(EMCCD)相机或增强型CCD(ICCD)相机。在其他实施例中，所述成像传感器是CMOS型相机。在用CCD测定荧光或散射光的情况下，所述CCD的有效检测表面积可能发生变化，例如，所述表面积的范围为0.01cm2至10cm2、0.05cm2至9cm2、0.1cm2至8cm2、0.5cm2至7cm2，包括1cm2至5cm2。标的系统中的光电检测器数量可以根据需要而有所不同，例如，1台或以上、2台或以上、3台或以上、5台或以上，包括10台或以上的光电检测器。在标的系统包括一台以上的光电检测器的情况下，每台光电检测器可以是相同的，或者由两台或更多台光电检测器组成的集合可以是不同光电检测器的组合。
根据辐照光源类型和样品特性(例如，样品中颗粒的粒径)，所述检测器可以安置在与所述流体介质相距一定距离的位置。例如，所述检测器可以安置在与所述样品相距0.01mm或以上距离的位置，例如，0.05mm或以上、0.1mm或以上、0.5mm或以上、1mm或以上、2.5mm或以上、5mm或以上、10mm或以上、15mm或以上、25mm或以上，包括与所述样品相距50mm或以上。所述检测器也可以相对于所述样品以一定角度安置，所述角度可以发生变化。例如，所述检测器可以相对于所述流体介质以一定角度安置，所成角度范围为10°至90°，例如，15°至85°、20°至80°、25°至75°，包括30°至60°。在某些实施例中，所述检测器相对于所述流体介质以90°角安置。在一些实施例中，系统包括安置以检测来自所述流体介质的前向散射光的检测器。在其他实施例中，系统包括安置以检测来自所述流体介质的侧向散射光的检测器。在其他实施例中，系统包括安置以检测来自所述流体介质的荧光的检测器。
关于流式细胞仪系统及其组件的更多详细信息请参阅公开号为US2017-0299493、申请序列号为15/472,020的美国专利申请案；该专利中的内容以引用方式并入本文中。
图2提供了流式细胞仪系统的图示，所述系统被配置成与图1所示的封闭式颗粒分选模块可操作地接合，从而得到无菌流式细胞仪型细胞分选仪。如图2所示，系统200包括门205和210，所述门打开后可显露出位置215，所述位置可以与封闭式颗粒分选模块可操作地接合。图中还示出了样品输入模块220。
图3提供了根据本发明的实施例所述的流式细胞仪型细胞分选仪的示意图。如图3所示，细胞分选仪300包括通过管线315与样品输入模块310可操作地耦合的封闭式颗粒分选模块305，其中样品输入模块310包括样品管316、样品管线317和空气过滤器318。封闭式颗粒分选模块305还通过鞘液管线321与鞘液子系统320耦合，其中所述鞘液子系统包括容纳一定量的鞘液的鞘液袋322和鞘液过滤器323。加热元件307a和307b位于分选室306附近，且与之成辐射加热关系。所述分选室的第一中央输出端308与废物流轴向对准，且通过管线331与废物池330通过流体连通。在与出口308相距较远的情况下，管线331的纵向轴线与出口308的中心对准，使所述废物流在接近分选室的位置处避免与管线331的内壁接触。此外，管线331在与输出端308相距较远的位置处逐渐弯曲，使得废物流在与内壁接触时，以较小的角度进行，从而最大限度地减少气溶胶的形成。为了在所述分选室中提供足够的气流以实现所需的低湿度，管线331是封闭式再循环气流管道的组成部分，所述再循环气流管道还包括废物袋335和回流管线337，其中回流管线337通过在进入位置309处与所述分选室连接，从而使废物袋335与所述分选室通过气体连通。回流管线337包括干燥剂室338，所述干燥剂室在气体通过进入位置309重新引入所述分选室之前，除去所述气体中的水蒸气。图中还示出了空气过滤器339。为了在所述封闭式再循环气流管道中提供所需气流，提供了蠕动泵340。图中示出了与所述封闭式颗粒分选模块的已分选颗粒输出端304存在颗粒接收关系的已分选颗粒收集系统350。已分选颗粒收集系统350包括收集袋351、培养基输入管线352、具有配合元件354的样品输出端353以及
采血管355。
用于对流体介质中样品的颗粒组分进行分选的方法
本发明的方面还包括用于对样品中的颗粒(例如，生物样品中的细胞)进行分选的方法。根据某些实施例的方法包括辐照含有颗粒分选模块询问区域内流体介质中的颗粒的样品；检测来自所述样品的光(例如，荧光)；以及将所述样品中的颗粒分选至两个或更多个样品收集容器中。在某些实施例中，所述样品是生物样品，并且方法包括分选和收集两种或更多种不同类型的细胞。
在一些实施例中，所述样品是一种生物样品。依据常规含义，术语“生物样品”是指整个生物体、植物、真菌或动物组织的子集、细胞或组成部分，在某些情况下，可能见于血液、粘液、淋巴液、滑液、脑脊液、唾液、支气管肺泡灌洗液、羊水、羊膜脐带血、尿液、阴道液和精液中。因此，“生物样品”既指天然生物体或其组织的子集，也指利用所述生物体或其组织的子集制备的匀浆、裂解物或提取物，包括但不限于：血浆；血清；脊髓液；淋巴液；皮肤、呼吸道、胃肠道、心血管和泌尿生殖道切片；眼泪；唾液；乳汁；血细胞；肿瘤；器官等。生物样品可以是任何类型的生物组织，包括健康组织和病理组织(例如，癌组织、恶性组织、坏死组织等)。在某些实施例中，所述生物样品是一种液体样品，例如，血液或其衍生物(例如，血浆、眼泪、尿液、精液等)，其中，在某些情况下，样品是一种血液样品，包括全血样品，例如，血液通过静脉穿刺或手指针刺获取的血液(其中，血液在分析之前可能会也可能不会与任何试剂(例如防腐剂、抗凝剂等)混合)。
在某些实施例中，所述样品来源为“哺乳动物”，此术语被广泛地用于描述属于哺乳动物类的生物体，包括食肉动物(例如狗和猫)、啮齿类动物(例如小鼠、豚鼠和大鼠)以及灵长类动物(例如人、黑猩猩和猴子)。在某些情况下，受试者是人类。方法可适用于从任何发育阶段(即新生儿、婴儿、少年、青少年、成人)的男性和女性受试者中获取的样品，在其中某些实施例中，所述人类受试者是少年、青少年或成人。尽管本发明适用于取自人类受试者的样品，但应当理解，所述方法也可对取自其他动物受试者(即在“非人类受试者”中)的血液实施，这些受试者包括但不限于鸟类、小鼠、大鼠、狗、猫、家畜和马。
根据各种参数，例如，通过使特定荧光标记物附着在目的细胞上而确定的表型特征，可以将目的细胞从所述流体介质中分离出来。在一些实施例中，所述系统被配置成使确定包括靶细胞的受分析液滴发生偏转。可以采用标的方法对各种细胞进行分选。目的靶细胞包括但不限于干细胞、T细胞、树突细胞、B细胞、粒细胞、白血病细胞、淋巴瘤细胞、病毒细胞(例如，HIV细胞)、NK细胞、巨噬细胞、单核细胞、成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞和类红细胞。目的靶细胞包括具有合适的细胞表面标记物或抗原的细胞，其可以被合适的亲和剂或其共轭物捕获或标记。例如，所述靶细胞可以包括细胞表面抗原，例如CD11b、CD123、CD14、CD15、CD16、CD19、CD193、CD2、CD25、CD27、CD3、CD335、CD36、CD4、CD43、CD45RO、CD56、CD61、CD7、CD8、CD34、CD1c、CD23、CD304、CD235a、T细胞受体α/β、T细胞受体γ/δ、CD253、CD95、CD20、CD105、CD117、CD120b、Notch4、Lgr5(N-末端)、SSEA-3、TRA-1-60抗原、双唾液酸神经节苷脂GD2和CD71。在一些实施例中，所述靶细胞选自含有HIV的细胞、Treg细胞、抗原特异性T细胞群体、肿瘤细胞或来自全血、骨髓或脐带血的造血祖细胞(CD34+)。
在实施标的方法时，将颗粒分选模块与颗粒分选系统耦合。为了将所述颗粒分选模块与所述颗粒分选系统耦合，适当安置位于所述颗粒分选模块壳体外壁上的对准件，使其与所述颗粒分选系统配准器上的对准件接触。如有，在所述颗粒分选模块壳体外壁上的对准件与所述颗粒分选系统配准器上的对准件接触，以使所述颗粒分选模块固定在所述颗粒分选系统上时，可以接合一个或更多个紧固件。根据受分析的样品，所述颗粒分选模块可在任何所需持续时间内与所述颗粒分选系统接触，例如，1分钟或更长时间、2分钟或更长时间、5分钟或更长时间、10分钟或更长时间、30分钟或更长时间、60分钟或更长时间、120分钟或更长时间、240分钟或更长时间，包括480分钟或更长时间。
在将所述颗粒分选模块与所述颗粒分选系统耦合之后，将一定量的流体样品注入所述颗粒分选模块中。注入所述颗粒分选模块的样品量可能发生变化，例如，所述样品量的范围为0.001mL至1000mL，例如，0.005mL至900mL、0.01mL至800mL、0.05mL至700mL、0.1mL至600mL、0.5mL至500mL、1mL至400mL、2mL至300mL，包括5mL至100mL样品。
根据本发明的实施例的方法包括对样品中已标记的颗粒(例如，靶细胞)进行计数和分选。在实施标的方法时，先将包括所述颗粒的流体样品引入所述颗粒分选模块流体喷嘴中。从所述流体喷嘴中流出后，所述颗粒基本上以每次一颗的方式穿过所述样品询问区域，在所述区域内，每颗颗粒受光源辐照；根据需要分别记录每颗颗粒的光散射参数和荧光发射测量值(例如，两个或多个光散射参数以及一个或更多个荧光发射测量值)。所述流体介质中的颗粒基本上以每次一颗的方式经流路穿过所述颗粒分选模块中的样品询问区域，在所述区域内，每颗颗粒受光源照射。根据所询问的流体介质的性质，可以用光辐照0.001mm或以上的流体介质，例如，0.005mm或以上、0.01mm或以上、0.05mm或以上、0.1mm或以上、0.5mm或以上，包括用光辐照1mm或以上的流体介质。在某些实施例中，方法包括在所述样品询问区域内辐照所述流体介质的平面横截面，例如，用激光(如上所述)辐照。在其他实施例中，方法包括在所述样品询问区域内辐照预定长度的流体介质，例如，对应于扩散激光束或灯的辐照轮廓。
在某些实施例中，方法包括在流动池喷嘴孔口处或附近辐照所述流体介质。例如，方法可以包括在与所述喷嘴孔口相距约0.001mm或以上的位置辐照所述流体介质，例如，0.005mm或以上、0.01mm或以上、0.05mm或以上、0.1mm或以上、0.5mm或以上，包括与所述喷嘴孔口相距1mm或以上。在某些实施例中，方法包括辐照紧邻所述流动池喷嘴孔口的所述流体介质。
穿过感测区域时，采用检测器(例如，光电倍增管(或“PMT”))记录穿过每颗颗粒的光(在某些情况下，称之为前向光散射)；反射方向正交于穿过所述感测区域的颗粒流向的光(在某些情况下，称之为正交或侧向光散射)；以及在所述颗粒穿过所述感测区域且用所述能源照射时，用荧光标记物标记的颗粒发出的荧光。前向光散射(或FSC)、正交光散射(SSC)和荧光发射(FL1、FL2等)中的每一项都包括每颗颗粒(或每个“事件”)的单独参数。因此，例如，可以收集(记录)用两种不同的荧光标记物标记的颗粒的两个、三个或四个参数。
如上所述，合适的光检测方案包括但不限于光学传感器或光电检测器，例如，有源像素传感器(APS)、雪崩光电二极管、图像传感器、电荷耦合装置(CCD)、增强型电荷耦合装置(ICCD)、发光二极管、光子计数器、辐射热测定器、热电检测器、光敏电阻、光伏电池、光电二极管、光电倍增管、光电晶体管、量子点光电导体或光电二极管及其组合以及其他光电检测器。在某些实施例中，采用电荷耦合装置(CCD)、半导体电荷耦合装置(CCD)、有源像素传感器(APS)、互补金属氧化物半导体(CMOS)、图像传感器或N型金属氧化物半导体(NMOS)图像传感器测定来自所述颗粒分选模块样品询问区域内受辐照的流体介质的光。在某些实施例中，用电荷耦合装置(CCD)测定光。在用CCD测定来自所述颗粒分选模块样品询问区域内受辐照的流体介质的所述光时，所述CCD的有效检测表面积可能发生变化，例如，所述表面积的范围为0.01cm2至10cm2、0.05cm2至9cm2、0.1cm2至8cm2、0.5cm2至7cm2，包括1cm2至5cm2。
对每颗颗粒的记录数据进行实时分析，或者根据需要将所述数据存储于数据存储器和分析工具(例如，计算机)中。第4,284,412号美国专利描述了配备有单个光源的目的流式细胞仪的配置及其用途，而第4,727,020号美国专利描述了配备有两个光源的流式细胞仪的配置及其用途。
在根据某些实施例的本发明公开内容的实施例中，根据需要，将所述颗粒暴露于激发光并在一个或更多个检测通道中测定每颗颗粒的荧光，从而对所述颗粒进行检测和唯一识别。检测通道中所发射的用于识别颗粒及与其相关的结合复合物的荧光可以在用单个光源激发后测定，或者可以在用不同光源激发后单独测定。如果采用单独的激发光源来激发所述颗粒标记物，则可以选择所述标记物，使得所有标记物对于所采用的每个激发光源而言都是可激发的。
某些实施例中的方法还包括诸如使用计算机等进行数据采集、分析和记录，其中多个数据通道记录来自每个检测器的数据，所述数据是有关在每颗颗粒穿过所述颗粒分选模块的样品询问区域时所发出的光散射和荧光的数据。在这些实施例中，分析包括对颗粒进行分类和计数，使得各颗粒以一组数字化参数值的形式存在。可以将标的系统设置为在选定参数下触发，以便将目的颗粒与背景和噪点区分开来。“触发”是指用于检测参数的预设阈值，并且可用作检测颗粒穿过所述光源的手段。检测到超出所选参数阈值的事件会触发所述颗粒的光散射和荧光数据采集。未采集所述介质中待分析的导致响应低于所述阈值的颗粒或其他组分的数据。所述触发参数可以是检测由于颗粒穿过所述光束而引起的前向散射光。而后，所述流式细胞仪检测并收集所述颗粒的光散射和荧光数据。
然后，基于针对整个群体收集的数据，通过“设门”来进一步分析特定目的子群体。为了选择合适的门，将所述数据绘制成图，以实现潜在子群体的最佳分离。可以通过在二维点阵图上绘制前向光散射(FSC)与侧向(即正交)光散射(SSC)的关系来执行此步骤。然后，选择颗粒的子群体(即，所述门内的细胞)，排除不在所述门内的颗粒。如有需要，可以利用计算机界面上的光标在所需子群体周围画一条线来选择所述门。然后，通过将所述颗粒的其他参数(例如荧光)绘制成图来进一步分析所述门内的颗粒。如有需要，可以将上述分析配置成给出所述样品中目的颗粒的计数。
在某些实施例中，运行所述系统以确定一个时间段，在所述时间段内，位于所述颗粒分选模块远端的一个或更多个容器与已偏转液滴接收位置对准。在一些情况下，所述偏转信号包括初始偏转子信号和最终偏转子信号；并且运行所述系统，通过在所述时间段开始时发送初始偏转子信号来产生所述偏转信号，所述偏转信号将所述偏转器配置成使受分析液滴(如有)发生偏转。在某些情况下，方法包括在所述时间段结束时将最终偏转子信号发送至所述颗粒分选模块，所述偏转子信号将所述偏转器配置成避免使受分析液滴发生偏转。在一些实施例中，方法包括在所述时间段内，在单个受分析液滴发生偏转之后，将最终偏转子信号发送至所述颗粒分选模块，其中所述最终偏转子信号将所述偏转器配置成避免使受分析液滴发生偏转。
在一些情况下，所述方法可以包括使所述分选模块的分选室内维持所需温度。例如，所述方法可以包括运行一个或更多个加热元件，所述加热元件可以与所述系统或模块集成在一起，以使所述分选室内维持所需温度，例如，如上所述的温度，其中所述分选室内的所需温度可以高于露点。
在一些实施例中，方法包括使所述颗粒分选模块与所述颗粒分选系统脱离，这可以通过使所述对准件(和紧固件，如有)脱扣来实现。在一些情况下，方法进一步包括在移除所述第一颗粒分选模块之后，将第二颗粒分选模块重新附接于所述颗粒分选系统上。可以洗涤所述第一颗粒分选模块并对其进行灭菌以供日后使用(例如，用高压釜灭菌)，或者可以将其丢弃。因此，在一些实施例中，本文所述的颗粒分选模块是一次性的，例如在使用一次之后。
计算机控制系统
本发明的方面进一步包括用于实施标的方法的计算机控制系统，其中所述系统进一步包括一台或更多台计算机，使用于实施本文所述的方法的系统实现完全自动化或部分自动化。在一些实施例中，系统包括具有计算机可读存储介质的计算机，所述存储介质中存储有计算机程序，其中，所述计算机程序包括在加载到所述计算机上时，用以在颗粒分选模块样品询问区域内辐照流体介质中的样品的指令；用以检测来自所述样品的光并测定在一种或多种波长下所检测到的光的算法；以及用以将所述样品中的颗粒分选至两个或多个样品收集容器中的算法。
在实施例中，所述系统包括输入模块、处理模块和输出模块。在一些实施例中，标的系统可以包括输入模块，所述输入内容诸如：有关每个流体样品的参数或信息、所采用的光源的强度和波长(离散或范围)、所述颗粒分选模块的特性(包括流动池喷嘴腔尺寸)、喷嘴孔口尺寸、所述颗粒分选模块样品询问区域的尺寸、所述偏转板的外加电压、容器在所述颗粒分选模块远端所处的位置、用光源辐照的持续时间、不同光源的数量、光源与所述颗粒分选模块样品询问区域内的所述流体介质之间的距离、任何光学调节组件的焦距、流体介质(例如，鞘液)的折射率、任何波长分离器的存在情况、波长分离器的特性(包括带通宽度)、不透明性、光栅间隔以及光电检测器的特性和灵敏度。
所述处理模块包括具有用于执行标的方法步骤的多个指令的存储器，例如，在颗粒分选模块样品询问区域内辐照流体介质中的样品；检测来自所述流体介质中的样品的光；测定在一种或多种波长下所检测到的光；以及将所述样品中的颗粒分选至两个或多个样品收集容器中，所述容器位于所述颗粒分选模块的远端。
在所述处理模块执行标的方法的一个或更多个步骤之后，输出模块将所述结果传达给用户，例如，通过在显示器上显示或通过打印报告传达。
标的系统可能包括硬件和软件组件，其中硬件组件可能是一个或更多个平台，例如，服务器，其使得系统的功能元件(即，系统中执行特定任务(例如，管理信息的输入和输出、处理信息等)的元件)可以通过在系统所装备的一个或更多个计算机平台上执行软件应用程序来发挥作用。
系统可能包括显示器和操作员输入设备。操作员输入设备可以是键盘、鼠标等。所述处理模块包括可以访问存储器的处理器，所述存储器具有其上存储的用于执行标的方法步骤的指令，例如，在颗粒分选模块样品询问区域内辐照流体介质中的样品；检测来自所述流体介质中的样品的光；测定在一种或多种波长下所检测到的光；以及将所述样品中的颗粒分选至两个或多个样品收集容器中，所述容器位于所述颗粒分选模块的远端。
所述处理模块可能包括操作系统、图形用户界面(GUI)控制器、系统存储器、记忆存储设备、输入—输出控制器、高速缓冲存储器、数据备份单元及许多其他设备。所述处理器可以是一种市售处理器，也可以是已经或将可用的其他处理器中的任何一种。如本领域所公知，所述处理器执行操作系统，而操作系统以众所周知的方式与固件和硬件连接，且帮助处理器协调和执行各种计算机程序的功能，所述计算机程序可以用各种编程语言编写，例如，Java、Perl、C++、其他高级或低级语言及其组合。所述操作系统通常与处理器协作，以协调并执行计算机其他组件的功能。所述操作系统还根据已知技术提供调度、输入—输出控制、文件和数据管理、内存管理、通信控制及相关服务。
所述系统存储器可以是各种已知或日后推出的记忆存储设备中的任何一种。示例包括任何通常可用的随机存取存储器(RAM)、磁性介质(例如，常驻硬盘或磁带)、光学介质(例如，读写光盘)、闪存设备或其他记忆存储设备。所述记忆存储设备可以是各种已知或日后推出的设备中的任何一种，包括光盘驱动器、磁带驱动器、可移动硬盘驱动器或软盘驱动器。所述类型的记忆存储设备通常从程序存储介质(未示出)中读取内容和/或将内容写入程序存储介质中，所述程序存储介质包括光盘、磁带、可移动硬盘或软盘等。这些程序存储介质中的任何一种，或现在正在使用的或以后可能开发的其他介质，均可以视为一种计算机程序产品。可以理解的是，这些程序存储介质通常存储计算机软件程序和/或数据。计算机软件程序，也被称为计算机控制逻辑，通常存储在系统存储器和/或与记忆存储设备结合使用的程序存储设备中。
在一些实施例中，描述了一种计算机程序产品，其包含存储有控制逻辑(计算机软件程序，包括程序代码)的计算机可用介质。所述控制逻辑由计算机处理器执行时，可使处理器执行本文所述的功能。在其他实施例中，一些功能主要利用诸如硬件状态机等在硬件中实施。启用硬件状态机以执行本文所述的功能，这对相关领域的技术人员来说是显而易见的。
存储器可以是处理器能在其中存储和检索数据的任何合适的设备，例如，磁性、光学或固态存储设备(包括磁盘、光盘或磁带或RAM，或任何其他合适的固定或便携式设备)。处理器可能包括通用数字微处理器，其已基于携带必要程序代码的计算机可读介质进行适当编程。编制程序可以通过通信信道远程提供给处理器，也可以利用任何与存储器连接的设备预先保存在计算机程序产品中，例如，存储器或某些其他便携式或固定计算机可读存储介质。例如，磁盘或光盘可以携带编制程序，且可以用磁盘写入器/读取器读取。本发明的系统还包括用于实施上述方法的编制程序，例如，计算机程序产品、算法。根据本发明的编制程序可以记录在计算机可读介质中，例如，任何可以由计算机直接读取和访问的介质。所述介质包括但不限于：磁性存储介质，例如软盘、硬盘存储介质和磁带；光学存储介质，例如CD-ROM；电存储介质，例如RAM和ROM；便携式闪存驱动器；所述类别的混合体，例如磁性/光学存储介质。
处理器还可以访问通信信道，以与位于远程位置的用户通信。远程位置是指用户与系统无直接联系，而是将输入信息从外部设备(例如，连接至广域网(“WAN”)、电话网络、卫星网络或任何其他合适的通信信道，包括移动电话(即，智能手机))转发至输入管理器。
在一些实施例中，根据本发明的系统可以被配置成包括通信接口。在一些实施例中，所述通信接口包括用于与网络和/或另一设备通信的接收机和/或发射机。所述通信接口可被配置成用于有线或无线通信，包括但不限于：射频(RF)通信(例如，射频识别(RFID)、Zigbee通信协议、WiFi、红外通信、无线通用串行总线(USB)、超宽带(UWB)、
通信协议和蜂窝通信，例如码分多址(CDMA)或全球移动通信系统(GSM)。
在一个实施例中，所述通信接口被配置成包括一个或更多个通信端口，例如，物理端口或接口(例如，USB端口、RS-232端口)或任何其他合适的电气连接端口，以实现标的系统与任何外部设备(例如，被配置成实现类似互补数据通信的计算机终端(例如，在医师的办公室或医院环境中))之间的数据通信。
在一个实施例中，所述通信接口被配置成用于红外通信、
通信或任何其他合适的无线通信协议，以使标的系统能够与其他设备进行通信，例如，计算机终端和/或网络、支持通信的移动电话、个人数字助手，或用户可以结合使用以管理病症(例如，HIV、AIDS或贫血症)治疗的任何其他通信设备。
在一个实施例中，所述通信接口被配置成利用互联网协议(IP)通过移动电话网络、短信服务(SMS)提供数据传输连接；向连接至互联网的局域网(LAN)内的个人计算机(PC)提供无线连接；或在WiFi热点提供WiFi连接，以连接至互联网。
在一个实施例中，标的系统被配置成通过通信接口与服务器设备进行无线通信，例如，利用通用标准，例如802.11或
RF协议或IrDA红外协议。所述服务器设备可以是另一种便携式设备，例如，智能手机、个人数字助手(PDA)或笔记本电脑；或一种更大型的设备，例如，台式电脑、器械等。在一些实施例中，服务器设备包括显示器(例如，液晶显示器(LCD))和输入设备(例如，按钮、键盘、鼠标或触摸屏)。
在一些实施例中，所述通信接口被配置成利用上述一种或多种通信协议和/或机制，自动或半自动地将存储于标的系统中的数据(例如，存储于可选数据存储单元中)与网络或服务器设备进行通信。
输出控制器可能包括用于各种已知显示设备中的任何一种的控制器，以向本地或远程用户(无论是人还是机器)提供信息。如果任何一种所述显示设备提供视觉信息，则所述信息通常可以在逻辑上和/或物理上组成图像元素阵列。图形用户界面(GUI)控制器可能包括各种已知或日后待开发的软件程序中的任何一种程序，以在系统和用户之间提供图形输入和输出接口，以及处理用户输入。计算机的功能元件可能通过系统总线进行相互通信。其中一些通信可能在替代性实施例中利用网络或其他类型的远程通信来实现。所述输出管理器也可能根据已知技术，向位于远程位置的用户提供由处理模块生成的信息，例如，通过因特网、电话或卫星网络。所述输出管理器可能根据各种已知技术来实现数据显示。在某些示例中，数据可能包括SQL、HTML或XML文档、电子邮件或其他文件或其他形式的数据。所述数据可能包括互联网URL地址，以便用户可以从远程源中检索其他SQL、HTML、XML或其他文档或数据。标的系统中的一个或更多个平台可以是任何类型的已知计算机平台或日后待开发的一种计算机平台，尽管其通常属于某一类计算机(通常称之为服务器)。但是，所述平台也可以是一种大型计算机、工作站或其他计算机类型。它们可以通过任何已知的或日后待开发的电缆或其他通信系统(包括联网或其他方式连接的无线系统)进行连接。它们可以位于同一位置，也可以在物理上分离。可以在任何计算机平台上采用各种操作系统，具体可能取决于所选择的计算机平台类型和/或品牌。适当的操作系统包括Windows NT、WindowsXP、Windows 7、Windows 8、iOS、Sun Solaris、Linux、OS/400、Compaq Tru64 Unix、SGIIRIX、Siemens Reliant Unix等。
套件
本发明的方面进一步包括套件，其中套件包括一个或更多个封闭式颗粒分选模块，例如，本文所述的分选模块。在一些实施例中，所述套件还包括一个或更多个样品输入模块和一个或更多个废物池，例如，袋子。套件还可以包括一根或更多根使所述样品输入模块和废物槽与所述颗粒分选模块以流体连通方式耦合的导管。在一些情况下，套件还包括用于使标的系统的组件耦合在一起的接头，例如，用于使所述样品输入模块与所述颗粒分选模块耦合的接头；用于使所述废物槽与所述颗粒分选模块耦合的接头；以及用于使鞘液输送子系统与所述颗粒分选模块耦合的接头。套件可以包括接头，例如，鲁尔旋锁接头、螺纹配合接头以及连接两个具有易碎密封件的组件的接头。所述套件可以包括一个或更多个已分选颗粒接收容器，例如，已分选颗粒收集组件及其组成部件，例如，如上所述的真空接收容器。在某些情况下，套件可以包括一种或多种测定组分(例如，如上所述的标记试剂、缓冲液等)。在一些情况下，所述套件可以根据需要进一步包括样品收集设备，例如，被配置成刺穿皮肤以获得全血样品的柳叶刀或针、移液器等。
所述套件的各种分析组件可以装在单独的容器中，其中一些或全部都可以预先组合。例如，在一些情况下，所述套件中的一个或更多个组件(例如，颗粒分选模块、样品输入模块、废物槽)装在密封袋中，例如，无菌包装，例如无菌箔袋或封套中。
除上述组件外，标的套件可能进一步包括(在某些实施例中)用于实施标的方法的说明书。这些说明书可能以各种形式存在于标的套件中，其中一种或多种可能存在于套件中。这些说明书可能存在的一种形式是印在合适的介质或基材(例如，其上印有信息的一张纸或几张纸)、套件包装、包装说明书等之上的印刷信息。这些说明书存在的另一种形式是其上已记录有信息的计算机可读介质，例如，软盘、光盘(CD)、便携式闪存驱动器等。这些说明书可能存在的另一种形式是网址，可以借此通过互联网访问远程网站上的信息。
效用
标的颗粒分选模块、颗粒分选系统、方法和计算机系统可用于需要分析和分选流体介质内的样品(例如，生物样品)中的颗粒组分的各种应用中。本发明的实施例还可以用于提高颗粒分选系统的无菌性，这有助于收集纯度更高的样品，减少受分析样品之间交叉污染的发生率，例如，在研究和高通量实验室测试中。本发明的实施例还可以用于需要提供满足以下要求的流式细胞仪的情况：细胞分选准确性有所改善；颗粒收集能力增强；颗粒带电效能提高；颗粒带电更准确；以及细胞分选过程中的颗粒偏转增强。
本发明的实施例还可以用于可能需要将利用生物样品制备的细胞用于研究、实验室测试或用于治疗的应用中。在一些实施例中，标的方法和装置有助于获得利用目标流体或组织生物样品制备的单种细胞。例如，标的方法和系统有助于从流体或组织样品中获得细胞，以用作诸如癌症等疾病的研究或诊断试样。同样，标的方法和系统有助于从流体或组织样品中获得用于治疗的细胞。与传统的流式细胞术系统相比，本发明的方法和装置能够以更高的效率和更低的成本从生物样品(例如，器官、组织、组织碎片、流体)中分离和收集细胞。
本发明的实施例提供了封闭式分选设备和方法，这可以降低(如无法消除)以下一项或多项：待处理样品受污染的风险；操作员暴露于样品组分的风险，这在处理具有生物危害性的样品时至关重要；等等。
采用本文所述的系统和方法得到的流式细胞术分选样品可以在细胞治疗方案中或需要将无菌活细胞输注入受试者体内的任何应用中施用于受试者。可以通过施用流式细胞术分选样品进行治疗的病症包括但不限于血液疾病、免疫系统疾病、器官损伤等。
因此，本文所述的系统和方法可用于细胞治疗方案。细胞治疗方案是可能需要制备活细胞材料(包括，例如细胞和组织)并将其作为治疗剂引入受试者体内的方案。典型的细胞治疗方案可以包括以下步骤：样品采集、细胞分离、基因修饰、体外培养和扩增、细胞收获、减少样品体积和洗涤、生物保存、储存以及将细胞引入受试者体内。所述方案可以始于从受试者的源组织中采集活细胞和组织，以产生细胞和/或组织样品。所述样品可以通过任何合适的步骤来采集，所述步骤包括，例如，对受试者施用细胞动员剂；抽取受试者的血液；抽取受试者的骨髓等。采集样品之后，可以通过若干种方法进行细胞富集，所述方法包括，例如，基于离心的方法、基于过滤器的方法、淘析、磁性分选法、荧光激活细胞分选法(FACS)等。在一些情况下，可以通过任何合适的方法(例如，核酸酶介导的基因编辑)对所富集的细胞进行基因修饰。所述经基因修饰的细胞可以在体外进行培养、活化和扩增。在一些情况下，保存(例如低温保存)和储存所述细胞，以供日后使用，日后使用时，使所述细胞解冻，然后施用于患者体内，例如，可将所述细胞注入患者体内。
虽然本文附有权利要求书，但本发明的范围还受以下条款限定：
1.一种流式细胞仪，其包含：
封闭式颗粒分选模块，其具有包含液滴偏转器的分选室；
与所述封闭式颗粒分选模块的入口以流体连通方式耦合的样品输入模块；
与所述封闭式颗粒分选模块的第一出口以流体连通方式耦合的废物池；以及
与所述封闭式颗粒分选模块的第二出口以流体连通方式耦合的第一分选颗粒收集系统；
其中所述流式细胞仪被配置成控制所述分选室内的气溶胶含量。
2.根据条款1所述的流式细胞仪，其中所述系统被配置成减少所述分选室内气溶胶的产生。
3.根据条款1至2中任一项所述的流式细胞仪，其中所述封闭式颗粒分选模块被配置成最大限度地减少废物流与所述颗粒分选模块内表面的接触。
4.根据条款3所述的流式细胞仪，其中所述特定分选模块被配置成使所述废物流在不与所述第一出口壁接触的情况下通过所述第一出口排出。
5.根据条款4所述的流式细胞仪，其中所述第一出口的直径范围为5至10mm。
6.根据条款5所述的流式细胞仪，其中所述废物池通过内径范围为5至10mm的柔性管线与所述第一出口以流体连通方式耦合。
7.根据条款6所述的流式细胞仪，其中所述柔性管线被配置成使所述废物流在距离所述第一出口5mm或更长距离处先与所述柔性管线的内壁接触。
8.根据条款7所述的流式细胞仪，其中所述柔性管线被配置成使所述废物流首先以较小的角度接触所述柔性管线的内壁。
9.根据前述条款中任一项所述的流式细胞仪，其中所述流式细胞仪被配置成使所述分选室内的温度维持在露点以上。
10.根据条款9所述的流式细胞仪，其中所述流式细胞仪包含加热器。
11.根据条款10所述的流式细胞仪，其中所述加热器并未集成至所述封闭式颗粒分选模块中。
12.根据条款10所述的流式细胞仪，其中所述加热器集成至所述封闭式颗粒分选模块中。
13.根据条款9至12中任一项所述的流式细胞仪，其中所述流式细胞仪被配置成控制所述分选室内的湿度。
14.根据条款13所述的流式细胞仪，其中所述系统包含位于所述分选室与所述废物池之间的封闭式再循环气流管道。
15.根据条款14所述的流式细胞仪，其中所述封闭式再循环气流管道包含蠕动泵。
16.根据条款14和15中任一项所述的流式细胞仪，其中所述封闭式再循环气流管道包含一种干燥剂。
17.根据前述条款中任一项所述的流式细胞仪，其中所述已分选颗粒收集系统包含：
(a)具有与所述第二出口存在液滴接收关系的分选管的收集容器；以及
(b)样品输出端，其使所述收集容器的细胞收集位置与真空接收容器的配合连接件可操作地耦合。
18.根据前述条款中任一项所述的流式细胞仪，其中所述封闭式颗粒分选模块进一步包含：
壳体，其包含近端、远端以及其间的壁，所述壁包含用于使所述壳体在所述流式细胞仪内对准的对准件。
位于所述壳体近端的流动池喷嘴，所述流动池喷嘴包含孔口；以及
与所述流动池喷嘴孔口通过流体连通的样品询问区域。
19.根据前述条款中任一项所述的流式细胞仪，进一步包含与所述封闭式颗粒分选模块的第三出口以流体连通方式耦合的第二收集系统。
20.根据前述条款中任一项所述的流式细胞仪，其中所述流式细胞仪是无菌的。
21.一种流式细胞术样品处理方法，所述方法包含：
将样品引入根据条款1至20中任一项所述的流式细胞仪的封闭式颗粒分选模块中；以及
对所述引入样品中的颗粒进行分选。
22.根据条款21所述的方法，其中所述方法包含使所述分选室内的温度维持在露点以上。
23.根据条款21和22中任一项所述的方法，其中所述颗粒是细胞。
24.根据条款21至23中任一项所述的方法，其中所述方法在无菌条件下执行。
25.一种封闭式颗粒分选模块，其包含：
壳体，其包含近端和远端；
位于所述壳体近端的流动池喷嘴，所述流动池喷嘴包含孔口；
与所述流动池喷嘴孔口通过流体连通的样品询问区域；
与所述询问区域存在液滴接收关系的分选室，所述分选室包含：
液滴偏转器
被配置成使废物流与废物池以流体连通方式耦合的第一出口；以及
被配置成使已分选颗粒与收集系统以流体连通方式耦合的第二出口；
其中所述颗粒分选模块被配置成最大限度地减少所述废物流与所述颗粒分选模块内表面的接触。
26.根据条款25所述的封闭式颗粒分选模块，其中所述特定分选模块被配置成使所述废物流在不与所述第一出口壁接触的情况下通过所述第一出口排出。
27.根据条款26所述的封闭式颗粒分选模块，其中所述第一出口的直径范围为5至10mm。
28.根据条款25至27中任一项所述的封闭式颗粒分选模块，其中所述封闭式颗粒分选模块进一步包含加热器。
29.根据条款25至28中任一项所述的封闭式颗粒分选模块，其中所述颗粒分选模块进一步包含对准件。
30.根据条款25至29中任一项所述的封闭式颗粒分选模块，进一步包含位于所述样品询问区域内的比色皿。
31.根据条款25至30中任一项所述的方法，其中所述模块是无菌的。
32.一种套件，其包含：
根据条款25至31中任一项所述的封闭式颗粒分选模块；以及
用于所述封闭式颗粒分选模块的无菌包装。
33.根据条款32所述的套件，其中所述套件进一步包含已分选颗粒收集系统。
34.根据条款33所述的套件，其中所述已分选颗粒收集系统包含：
(a)具有与所述第二出口存在液滴接收关系的分选管的收集容器；以及
(b)样品输出端，其使所述收集容器的细胞收集位置与真空接收容器的配合连接件可操作地耦合。
35.根据条款35所述的套件，其中所述套件进一步包含真空接收容器。
尽管为了达到清晰理解的目的采用图示和示例的方式详细描述了前述发明，但是鉴于本发明的教学意义，对于本领域普通技术人员显而易见的是，在不脱离所附权利要求书的精神或范围的情况下，可对其进行特定的变更和修改。
因此，前述内容仅说明了本发明的原理。应当理解，本领域技术人员将能够设计出各种结构，尽管这里没有明确表述或示出，但这些设计反应了本发明的原理，未超出本发明的精神和范围。此外，本文列举的所有示例和条件语言主要为了帮助读者理解本发明的原理和发明人为进一步拓展本领域所提供的构想，并且应解释为不受这些具体列举的示例和条件的限制。而且，本文中引用本发明的原理、方面和实施例及其特定示例的所有陈述旨在涵盖其在结构和功能上的等同物。此外，所述等同物拟包括目前已知的等同物和日后待开发的等同物，即，开发出的任何功能相同的原件且与结构无关。而且，无论在权利要求书中是否明确叙述了本发明的公开内容，都不会向公众披露其中的任何内容。
因此，本发明的范围并不限于本文中显示和描述的示例性实施例。相反，本发明的范围和精神通过所附权利要求书体现。在权利要求书中，只有当权利要求书的限制内容开头明确使用短语“用于……的手段”或“用于……的步骤”时，《美国法典》第35章第112节(f)或《美国法典》第35章第112节(6)明确定义为被援引；如果权利要求书的限制内容中未使用所述短语，则《美国法典》第35章第112节(f)或《美国法典》第35章第112节(6)未被援引。
Claims (15)
1.一种流式细胞仪，其包含：
封闭式颗粒分选模块，其具有包含液滴偏转器的分选室；
与所述封闭式颗粒分选模块的入口以流体连通方式耦合的样品输入模块；
与所述封闭式颗粒分选模块的第一出口以流体连通方式耦合的废物池；以及
与所述封闭式颗粒分选模块的第二出口以流体连通方式耦合的第一分选颗粒收集系统；
其中所述流式细胞仪被配置成控制所述分选室内的气溶胶含量。
2.根据权利要求1所述的流式细胞仪，其中所述系统被配置成减少所述分选室内气溶胶的产生。
3.根据权利要求1至2中任一项所述的流式细胞仪，其中所述封闭式颗粒分选模块被配置成最大限度地减少废物流与所述颗粒分选模块内表面的接触。
4.根据权利要求3所述的流式细胞仪，其中所述特定分选模块被配置成使所述废物流在不与所述第一出口壁接触的情况下通过所述第一出口排出。
5.根据前述权利要求中任一项所述的流式细胞仪，其中所述流式细胞仪被配置成使所述分选室内的温度维持在露点以上。
6.根据权利要求5所述的流式细胞仪，其中所述流式细胞仪包含加热器。
7.根据权利要求6所述的流式细胞仪，其中所述流式细胞仪被配置成控制所述分选室内的湿度。
8.根据权利要求7所述的流式细胞仪，其中所述系统包含位于所述分选室与所述废物池之间的封闭式再循环气流管道。
9.根据权利要求8所述的流式细胞仪，其中所述封闭式再循环气流管道包含蠕动泵。
10.根据权利要求9所述的流式细胞仪，其中所述封闭式再循环气流管道包含一种干燥剂。
11.根据前述权利要求中任一项所述的流式细胞仪，其中所述封闭式颗粒分选模块进一步包含：
壳体，其包含近端、远端以及其间的壁，所述壁包含用于使所述壳体在所述流式细胞仪内对准的对准件。
位于所述壳体近端的流动池喷嘴，所述流动池喷嘴包含孔口；以及
与所述流动池喷嘴孔口通过流体连通的样品询问区域。
12.根据前述权利要求中任一项所述的流式细胞仪，其中所述流式细胞仪是无菌的。
13.一种流式细胞术样品处理方法，所述方法包含：
将样品引入根据权利要求1至12中任一项所述的流式细胞仪的封闭式颗粒分选模块中；以及
对所述引入样品中的颗粒进行分选。
14.一种封闭式颗粒分选模块，其包含：
壳体，其包含近端和远端；
位于所述壳体近端的流动池喷嘴，所述流动池喷嘴包含孔口；
与所述流动池喷嘴孔口通过流体连通的样品询问区域；
与所述询问区域存在液滴接收关系的分选室，所述分选室包含：
液滴偏转器
被配置成使废物流与废物池以流体连通方式耦合的第一出口；以及
被配置成使已分选颗粒与收集系统以流体连通方式耦合的第二出口；
其中所述颗粒分选模块被配置成最大限度地减少所述废物流与所述颗粒分选模块内表面的接触。
15.一种套件，其包含：
根据权利要求14所述的封闭式颗粒分选模块；以及
用于所述封闭式颗粒分选模块的无菌包装。
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Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US10914671B2 (en) * | 2018-04-27 | 2021-02-09 | Becton, Dickinson And Company | Flow cytometers having enclosed droplet sorters with controlled aerosol content and methods of using the same |
| WO2022203792A1 (en) * | 2021-03-24 | 2022-09-29 | Becton, Dickinson And Company | Closed-system sorting flow cytometer adapters and methods of use thereof |
| KR102649357B1 (ko) * | 2021-12-27 | 2024-03-19 | 광주과학기술원 | 초미세먼지 산화 독성 통합 측정 시스템 및 측정 방법 |
| CN114459965A (zh) * | 2021-12-30 | 2022-05-10 | 中船重工安谱（湖北）仪器有限公司 | 一种气溶胶监测系统及方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5641457A (en) * | 1995-04-25 | 1997-06-24 | Systemix | Sterile flow cytometer and sorter with mechanical isolation between flow chamber and sterile enclosure |
| US20090127167A1 (en) * | 2005-06-02 | 2009-05-21 | Universitat Duisburg Essen | Device and Method for Separation of Microparticles in Particular Biohazardous and Hazardous Materials |
| CN106537114A (zh) * | 2014-04-21 | 2017-03-22 | 贝克顿·迪金森公司 | 用于可调地密封流式细胞仪样品操作室的滑移带密封盒 |
| US20170299493A1 (en) * | 2016-04-15 | 2017-10-19 | Becton, Dickinson And Company | Enclosed droplet sorter and methods of using the same |
| CN207051160U (zh) * | 2017-05-15 | 2018-02-27 | 中国科学院微生物研究所 | 一种分选型流式细胞仪 |
Family Cites Families (67)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3989381A (en) * | 1975-05-05 | 1976-11-02 | Coulter Electronics, Inc. | Optical chamber with spherical reflective portion and apparatus employing same |
| US3960449A (en) | 1975-06-05 | 1976-06-01 | The Board Of Trustees Of Leland Stanford Junior University | Measurement of angular dependence of scattered light in a flowing stream |
| US4347935A (en) | 1979-05-16 | 1982-09-07 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Method and apparatus for electrostatically sorting biological cells |
| US4284412A (en) | 1979-07-13 | 1981-08-18 | Ortho Diagnostics, Inc. | Method and apparatus for automated identification and enumeration of specified blood cell subclasses |
| US4284496A (en) | 1979-12-10 | 1981-08-18 | Newton William A | Particle guiding apparatus and method |
| US4667830A (en) | 1981-06-15 | 1987-05-26 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Method and means for sorting individual particles into containers for culturing, cloning, analysis, or the like |
| US4727020A (en) | 1985-02-25 | 1988-02-23 | Becton, Dickinson And Company | Method for analysis of subpopulations of blood cells |
| US5245318A (en) | 1987-07-24 | 1993-09-14 | Canon Kabushiki Kaisha | Particle analyzing apparatus having pressure control system |
| CA1335181C (en) | 1988-10-11 | 1995-04-11 | R. Alan Hardwick | System for selective cell separation from cell concentrate |
| JPH0448245A (ja) * | 1990-06-15 | 1992-02-18 | Canon Inc | 粒子測定装置 |
| US5483469A (en) | 1993-08-02 | 1996-01-09 | The Regents Of The University Of California | Multiple sort flow cytometer |
| US5464581A (en) | 1993-08-02 | 1995-11-07 | The Regents Of The University Of California | Flow cytometer |
| EP0672458A3 (en) | 1994-03-04 | 1996-02-28 | Cleveland Clinic Foundation | Magnetic cytometry method and apparatus. |
| US5700692A (en) | 1994-09-27 | 1997-12-23 | Becton Dickinson And Company | Flow sorter with video-regulated droplet spacing |
| US5602039A (en) | 1994-10-14 | 1997-02-11 | The University Of Washington | Flow cytometer jet monitor system |
| US5643796A (en) | 1994-10-14 | 1997-07-01 | University Of Washington | System for sensing droplet formation time delay in a flow cytometer |
| US5574232A (en) * | 1995-06-01 | 1996-11-12 | Robert Davidson | Liquid sample flow-through analysis cell |
| CA2260991C (en) | 1997-11-18 | 2009-03-24 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Multiplex flow immunoassays with magnetic particles as solid phase |
| US6071689A (en) | 1997-12-31 | 2000-06-06 | Xy, Inc. | System for improving yield of sexed embryos in mammals |
| US6281018B1 (en) | 1998-02-26 | 2001-08-28 | Coulter International Corp. | Selective purification and enrichment sorting of flow cytometer droplets based upon analysis of droplet precursor regions |
| US6079836A (en) * | 1998-07-20 | 2000-06-27 | Coulter International Corp. | Flow cytometer droplet break-off location adjustment mechanism |
| US6372506B1 (en) * | 1999-07-02 | 2002-04-16 | Becton, Dickinson And Company | Apparatus and method for verifying drop delay in a flow cytometer |
| US6809804B1 (en) | 2000-05-11 | 2004-10-26 | Becton, Dickinson And Company | System and method for providing improved event reading and data processing capabilities in a flow cytometer |
| US7378280B2 (en) | 2000-11-16 | 2008-05-27 | California Institute Of Technology | Apparatus and methods for conducting assays and high throughput screening |
| US7166443B2 (en) | 2001-10-11 | 2007-01-23 | Aviva Biosciences Corporation | Methods, compositions, and automated systems for separating rare cells from fluid samples |
| US6780377B2 (en) | 2002-01-22 | 2004-08-24 | Dakocytomation Denmark A/S | Environmental containment system for a flow cytometer |
| US6880414B2 (en) | 2002-08-08 | 2005-04-19 | Becton Dickinson And Company | Sort block and liquid collection device for sorting flow cytometer |
| US7201875B2 (en) | 2002-09-27 | 2007-04-10 | Becton Dickinson And Company | Fixed mounted sorting cuvette with user replaceable nozzle |
| CA3074799C (en) | 2003-03-28 | 2022-12-06 | Inguran, Llc | Apparatus, methods and processes for sorting particles and for providing sex-sorted animal sperm |
| US20050011582A1 (en) | 2003-06-06 | 2005-01-20 | Haug Jeffrey S. | Fluid delivery system for a flow cytometer |
| FR2865145B1 (fr) | 2004-01-19 | 2006-02-24 | Commissariat Energie Atomique | Dispositif de dispense de gouttelettes microfluidiques notamment pour la cytometrie. |
| US20060118167A1 (en) * | 2004-12-03 | 2006-06-08 | Xy, Inc. | Pressure regulated continuously variable volume container for fluid delivery |
| US7153475B2 (en) * | 2005-05-09 | 2006-12-26 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Aerosol particle analyzer for measuring the amount of analyte in airborne particles |
| WO2008080224A1 (en) | 2006-12-29 | 2008-07-10 | Tanner Scott D | Cell injector for flow cytometer having mass spectrometer detector and method for using same |
| US7880108B2 (en) | 2007-10-26 | 2011-02-01 | Becton, Dickinson And Company | Deflection plate |
| US8747290B2 (en) | 2007-12-07 | 2014-06-10 | Miltenyi Biotec Gmbh | Centrifuge for separating a sample into at least two components |
| EP2271919A1 (en) | 2008-04-16 | 2011-01-12 | Cynvenio Biosystems, Inc. | Magnetic separation system with pre and post processing modules |
| US20120164718A1 (en) | 2008-05-06 | 2012-06-28 | Innovative Micro Technology | Removable/disposable apparatus for MEMS particle sorting device |
| JP5487638B2 (ja) | 2009-02-17 | 2014-05-07 | ソニー株式会社 | 微小粒子分取のための装置及びマイクロチップ |
| US20110020855A1 (en) | 2009-07-21 | 2011-01-27 | Masataka Shinoda | Method and apparatus for performing cytometry |
| JP2011043386A (ja) | 2009-08-20 | 2011-03-03 | Gtr Tec Corp | 氷結トラップを有する透過量測定装置 |
| JP5437148B2 (ja) * | 2010-04-23 | 2014-03-12 | ベイバイオサイエンス株式会社 | フローサイトメータおよびセルソータ |
| JP2011237201A (ja) | 2010-05-06 | 2011-11-24 | Sony Corp | 微小粒子分取装置、マイクロチップ及びマイクロチップモジュール |
| CA2826544C (en) * | 2011-02-04 | 2020-06-30 | Cytonome/St, Llc | Particle sorting apparatus and method |
| EP2701850B1 (en) | 2011-04-27 | 2018-08-15 | Becton Dickinson and Company | Devices and methods for separating magnetically labeled moieties in a sample |
| WO2012148584A1 (en) | 2011-04-29 | 2012-11-01 | Becton Dickinson & Co. | Cell sorter system and method |
| US8753573B2 (en) | 2011-04-29 | 2014-06-17 | Becton, Dickinson And Company | Multi-way sorter system and method |
| JP6203733B2 (ja) | 2011-09-28 | 2017-09-27 | アコーソート アクチエボラグＡｃｏｕＳｏｒｔ ＡＢ | 細胞および／または粒子を分離するシステムおよび方法 |
| USD676567S1 (en) | 2011-10-21 | 2013-02-19 | Becton, Dickinson & Company | Sort chamber |
| ES2927464T3 (es) | 2011-12-21 | 2022-11-07 | Becton Dickinson Co | Sistemas de citometría de flujo para la separación estéril de componentes de muestra marcados magnéticamente |
| CN104204768B (zh) * | 2012-02-09 | 2018-07-10 | 贝克曼考尔特公司 | 分选流式细胞仪 |
| US9592483B2 (en) * | 2012-06-07 | 2017-03-14 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Fluid mixing and rinsing system for a flow cytometer |
| WO2013185023A1 (en) * | 2012-06-07 | 2013-12-12 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Automated and accurate drop delay for flow cytometry |
| WO2014047206A1 (en) | 2012-09-18 | 2014-03-27 | Cytonome/St, Llc | Flow cell for particle sorting |
| AU2013318001B2 (en) | 2012-09-19 | 2016-06-16 | Inguran, Llc | Flow cytometer nozzle tip |
| USD715925S1 (en) | 2012-10-05 | 2014-10-21 | 3M Innovative Properties Company | Extender for syringe |
| WO2014066553A1 (en) | 2012-10-26 | 2014-05-01 | Becton, Dickinson And Company | Devices and methods for manipulating components in a fluid sample |
| USD717438S1 (en) | 2012-11-12 | 2014-11-11 | Edan Diagnostics | Fluid cartridge |
| AU2014250805B2 (en) | 2013-04-12 | 2017-09-21 | Becton, Dickinson And Company | Automated set-up for cell sorting |
| CN105579829B (zh) | 2013-08-16 | 2019-02-19 | 生物辐射实验室股份有限公司 | 来自流式细胞器中的流体流的液滴的分离和/或充电的定时和/或相位调整 |
| JPWO2015053393A1 (ja) * | 2013-10-10 | 2017-03-09 | 公益財団法人神奈川科学技術アカデミー | イメージングセルソーター |
| US10221844B2 (en) * | 2014-05-16 | 2019-03-05 | Cytonome/St, Llc | Fluid handling system for a particle processing apparatus |
| US10520414B2 (en) | 2015-02-23 | 2019-12-31 | Tsi Incorporated | Condensation particle counter false count performance |
| US20180113063A1 (en) | 2015-09-04 | 2018-04-26 | Becton, Dickinson And Company | Flow cytometer sterile fluid dispensing systems and methods for using the same |
| USD802150S1 (en) | 2015-11-06 | 2017-11-07 | Draeger Medical Systems, Inc. | Pod mount |
| JP6707257B2 (ja) * | 2016-05-06 | 2020-06-10 | アライドフロー株式会社 | 処理装置 |
| US10914671B2 (en) * | 2018-04-27 | 2021-02-09 | Becton, Dickinson And Company | Flow cytometers having enclosed droplet sorters with controlled aerosol content and methods of using the same |
-
2019
- 2019-04-22 US US16/390,742 patent/US10914671B2/en active Active
- 2019-04-22 EP EP19793159.5A patent/EP3785015A4/en active Pending
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-
2020
- 2020-11-23 US US17/101,319 patent/US11441996B2/en active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5641457A (en) * | 1995-04-25 | 1997-06-24 | Systemix | Sterile flow cytometer and sorter with mechanical isolation between flow chamber and sterile enclosure |
| US20090127167A1 (en) * | 2005-06-02 | 2009-05-21 | Universitat Duisburg Essen | Device and Method for Separation of Microparticles in Particular Biohazardous and Hazardous Materials |
| CN106537114A (zh) * | 2014-04-21 | 2017-03-22 | 贝克顿·迪金森公司 | 用于可调地密封流式细胞仪样品操作室的滑移带密封盒 |
| US20170299493A1 (en) * | 2016-04-15 | 2017-10-19 | Becton, Dickinson And Company | Enclosed droplet sorter and methods of using the same |
| CN207051160U (zh) * | 2017-05-15 | 2018-02-27 | 中国科学院微生物研究所 | 一种分选型流式细胞仪 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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