CN112110865A - 一种异烟酰胺阿西莫司共晶体ⅱ及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体提供了一种异烟酰胺阿西莫司共晶Ⅱ、其制备方法和其在制备降血脂药中的用途。本发明制备的异烟酰胺阿西莫司共晶Ⅱ使用Cu‑Kα辐射，以2θ表示的X射线衍射谱图在：10.9±0.2°，22.0±0.2°，23.5±0.2°，26.5±0.2°处有特征峰。本发明制备的异烟酰胺阿西莫司共晶在介质中稳定性好，产品纯度高，生物利用度高，药效更好。本发明制备工艺简单，具有较好的工业应用前景。

Description

一种异烟酰胺阿西莫司共晶体Ⅱ及其制备方法

技术领域

本发明属于药物化学的技术领域，具体涉及一种阿西莫司与异烟酰胺的共晶体及其制备方法与应用。

背景技术

药物共晶新盐型是指通过质子转移引入了新的共晶物质(CCF)，在氢键的作用力下与药物活性有效成分(APT)自组装形成具有固定化学计量比的超分子晶体。它在保留药物本身的药理作用的同时，又能修饰药物的物理化性质，如提高药物的稳定性、降低其引湿性、提高溶解性、提高生物利用度等，为药物共晶体在制药工业方面的应用提供了广阔的发展前景。近几年来，药物共晶体研究越来越受到人们的关注。现阶段，国外对药物共晶体的研究开始逐渐增多并深入；而国内对其研究还相对较少。对于仿制药来说，药物共晶体的研究也可以打破原研药公司对药物晶型的专利保护，利于将仿制药推向市场。因此，获得更多具有新颖、实用和创造性的药物共晶具有重要的现实意义，特别是一些水不溶性药物。

阿西莫司为烟酸衍生物，是一种广谱长效调血脂药，用于各种原发性和继发性高脂血症，主要作用于脂肪组织，通过抑制脂肪组织释放游离脂肪酸，减少血浆低密度脂蛋白及极低密度脂蛋白的合成，从而降低血浆中血浆低密度脂蛋白及极低密度脂蛋白的水平，同时通过抑制肝脂肪酶活性而增高血浆HDL水平。阿西莫司由意大利Farmitalia CarloErba公司研制开发，于1985年在意大利上市，而后，凭借其较高的安全性及显著的疗效，相继在德国、智利、瑞士、中国香港等多个国家和地区上市。

药物共晶体会影响药物的理化性质，直接影响药物在生理pH7.4条件下的溶出及吸收效率，进而影响药物的生物利用度，临床疗效等。通过药物共晶的方式，可以很好的应用共晶优势，这对于理解和掌握药物有效分子的空间排布以及理化性质具有非常重要的作用。

目前关于阿西莫司共晶专利的相关报道较少。CN201811644125公开了一种阿西莫司无水晶型，将阿西莫司悬浮于溶剂A中，加热溶解，搅拌反应，降温析晶，过滤干燥即得。所得晶型稳定性和溶解度均有所改善，但仍有待提高，且生物利用度较差，临床治疗效果有待提高。

CN201811648348公开了一种阿西莫司烟酰胺共晶A，通过阿西莫司和烟酰胺溶于有机溶剂中，加热溶解，溶液澄清后，降温析晶，过滤干燥即得。所得共晶虽然溶解度有所改善，但仍有待提高，且共晶的稳定性和生物利用度有待提高。

CN201811648373公开了一种阿西莫司异烟酰胺共晶I，通过阿西莫司和异烟酰胺溶于有机溶剂中，加热溶解，溶液澄清后，降温析晶，过滤干燥即得。所得共晶虽然稳定性有所改善，但仍有待提高，且该共晶的溶解度较低，影响药物在人体内的吸收。

现有技术中的阿西莫司共晶的溶解性和稳定性均不高，且人体服用后的降脂效果也有待提高。

发明内容

鉴于现有技术的不足，本申请提供了一种异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ。

阿西莫司作为本发明的药物成分，化学名为5-甲基吡嗪-2-羧酸-4-氧化物，为白色或类白色结晶性粉末。CAS号：51037-30-0，分子式为C₆H₆N₂O₃，其结构式如a所示，本发明中所选择的共晶形成物为异烟酰胺，分子式为C₆H₆N₂O，其结构式如b所示。

根据本发明的第一方面，提供了一种异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ。所述共晶体中，阿西莫司与异烟酰胺的摩尔比为1:1。

所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ，使用Cu-Kα辐射，以2θ表示的X射线衍射谱图在10.9±0.2°，22.0±0.2°，23.5±0.2°，26.5±0.2°有特征峰。

优选地，所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ，使用Cu-Kα辐射，以2θ表示的X射线衍射谱图在7.2±0.2°，8.0±0.2°，10.2±0.2°，10.9±0.2°，13.0±0.2°，14.5±0.2°，15.0±0.2°，16.2±0.2°，19.5±0.2°，22.0±0.2°，23.5±0.2°，26.5±0.2°，30.2±0.2°，43.2±0.2°，44.5±0.2°，45.1±0.2°有特征峰。

优选地，所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ，使用Cu-Kα辐射，其特征峰符合如图1所示的X射线粉末衍射图谱。

优选地，所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ，其在差示扫描量热曲线(DSC)中存在吸热峰，为202.76℃。

优选地，所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ，其晶体学参数是：单斜晶系，手性空间群为P2₁/n；晶胞参数为：

α＝90.00°，β＝103.260(3)°，γ＝90.00°，晶胞体积

本申请还提供一种异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ的制备方法，具体制备步骤包括：将阿西莫司和异烟酰胺溶于有机溶剂A与纯化水的混合溶剂中，加热溶解，溶液澄清后，降温析晶，过滤干燥得异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ。

优选的，所述的有机溶剂A选自甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇、乙腈的一种或几种。

进一步优选地，所述有机溶剂A选自甲醇、乙腈中的一种或两种。

优选的，所述的有机溶剂与纯化水的体积比为(4～8)：1，优选的体积比为6：1。

优选的，所述阿西莫司与异烟酰胺投料的摩尔比为1:1.5～3。

进一步优选地，阿西莫司与异烟酰胺投料的摩尔比为1:2。

优选的，所述体系中阿西莫司和混合溶剂的质量体积比为10：(1-3)，其中阿西莫司质量以mg计，混合溶剂体积以ml计。

优选的，所述的溶解加热的温度为45～70℃。

优选的，所述的降温析晶温度为0～30℃。

进一步优选地，降温析晶温度为15～20℃。

优选的，所述的析晶时间为10～72小时。

进一步优选地，所述制备方法包括以下步骤：

将阿西莫司和异烟酰胺溶于有机溶剂A与纯化水的混合溶剂中，45～70℃加热溶解，搅拌回流反应4-14小时，降温至15～20℃析晶10～72小时，过滤洗涤，干燥得异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型II。

本申请进一步的提供一种药物组合物，该组合物含本发明所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ，并包含其它药学上可接受的辅料组分。

优选地，本发明的药物组合物制备如下：使用标准和常规的技术，使本发明化合物与制剂学上可接受的固体或液体载体结合，以及使之任意地与制剂学上可接受的辅助剂和赋形剂结合制备成可用剂型。

优选的，所述的其它组分包括可联合使用的其它活性成分、赋形剂、填充剂等。

优选的，所述的药物组合物为喷雾剂、片剂、胶囊剂、粉针剂、液体注射剂等。

本申请还提供一种异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ作为活性成分制备治疗降血脂药中的应用。

所述异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ可进一步通过下列方法进行确证。

X射线单晶衍射数据在日本理学XtaLAB Synergy型号仪器上收集，测试温度293(2)K，用CuKa辐射，以ω扫描方式收集数据并进行Lp校正。用直接法解析结构，差值傅里叶法找出全部非氢原子，所有碳及氮上的氢原子采用理论加氢得到，采用最小二乘法对结构进行精修。

测试及解析本发明制备的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ所得晶体学数据如表1所示，其晶体学参数是：单斜晶系，手性空间群为P2₁/n；晶胞参数为

α＝90.00°，β＝103.260(3)°，γ＝90.00°，晶胞体积

分子式是：C₃₆H₃₆N₁₂O₁₂，分子量是828.77。本发明的异烟酰胺阿西莫司共晶体的结构解析图3表明，该晶体不存在溶剂，阿西莫司和异烟酰胺通过分子内氢键连接在一起，其中阿西莫司羧基上的O10上的氢原子被异烟酰胺上的N10质子化，形成新的共晶盐型。本发明的异烟酰胺阿西莫司共晶体的堆积图，如附图2所示。

表1阿西莫司共晶体晶型Ⅱ主要晶体学数据

依据上述晶体学数据，其对应的X射线粉末衍射图(Cu-Kα)中特征峰详及具体参数数据见附图1和表2。

表2异烟酰胺阿西莫司共晶晶型Ⅱ的PXRD峰

实施例中所制备的所有样品都具有相同的晶体学参数及X射线粉末衍射谱图。

本发明所述方法制备的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ，其差示扫描量热曲线(DSC)的结果如图4所示，差示扫描量热曲线(DSC)中只有一个吸热峰202.76℃；其热重分析(TGA)只存在一个失重台阶，表明该阿西莫司有机药物共晶不存在溶剂，且结构稳定。所述阿西莫司有机药物共晶存在如图4所示的DSC/TGA图谱。

本发明所述方法制备的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型II相对于目前报道的阿西莫司晶型具有以下优势：

(1)溶解度高。本发明的异烟酰胺阿西莫司共晶晶型Ⅱ相比于现有的阿西莫司共晶晶型具有更好的溶解性。

(2)稳定性高。异烟酰胺阿西莫司共晶晶型Ⅱ光照试验，高温，高湿环境放置后，纯度仍然高于99％，相对于现有的其他阿西莫司共晶晶型，其固体状态稳定性好。

(2)降脂效果更好。异烟酰胺阿西莫司共晶晶型Ⅱ可以有效降低脂肪肝大鼠血清中的胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白的浓度，治疗效果更好。

附图说明

图1：异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ的X射线粉末衍射图谱。

图2：异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ的堆积图。

图3：异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ的ORTEP图。

图4：异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ的差示扫描量热曲线(DSC)图。

具体实施方式

现通过以下实施例来进一步描述本发明的有益效果，实施例仅用于例证的目的，不限制本发明的范围，同时本领域普通技术人员根据本发明所做的显而易见的改变和修饰也包含在本发明范围之内。

实施例1：

将154.1mg阿西莫司，244.2mg异烟酰胺加入到26.4ml的乙腈、4.4ml纯化水混合溶剂中，加热到65℃搅拌回流反应10小时，缓慢降温至15℃后，静置析晶30小时，过滤，50℃下真空干燥10h，得异烟酰胺阿西莫司共晶晶型Ⅱ，收率96.33％。经测定，其X-射线粉末衍射图谱与图1基本一致。

实施例2：

将154.1mg阿西莫司，183.2mg异烟酰胺加入到12.3ml的甲醇、3.1ml纯化水混合溶剂中，加热到45℃搅拌回流反应10小时，缓慢降温至5℃后，静置析晶20小时，过滤，50℃下真空干燥10h，得异烟酰胺阿西莫司共晶晶型Ⅱ，收率95.80％。经测定，其X-射线粉末衍射图谱与图1基本一致。

实施例3：

将154.1mg阿西莫司，366.3mg异烟酰胺加入到41.1ml的乙腈、5.1ml纯化水混合溶剂中，加热到70℃搅拌回流反应10小时，缓慢降温至20℃后，静置析晶60小时，过滤，50℃下真空干燥10h，得异烟酰胺阿西莫司共晶晶型Ⅱ，收率95.37％。经测定，其X-射线粉末衍射图谱与图1基本一致。

实施例4：

将154.1mg阿西莫司，366.3mg异烟酰胺加入到41.1ml的乙醇、5.1ml纯化水混合溶剂中，加热到70℃搅拌回流反应10小时，缓慢降温至30℃后，静置析晶72小时，过滤，50℃下真空干燥10h，得异烟酰胺阿西莫司共晶晶型Ⅱ，收率94.20％，经测定，其X-射线粉末衍射图谱与图1基本一致。

实施例5：

将154.1mg阿西莫司，366.3mg异烟酰胺加入到41.1ml的丙酮、5.1ml纯化水混合溶剂中，加热到60℃搅拌回流反应10小时，缓慢降温至0℃后，静置析晶10小时，过滤，50℃下真空干燥10h，得异烟酰胺阿西莫司共晶晶型Ⅱ，收率94.17％。经测定，其X-射线粉末衍射图谱与图1基本一致。

实施例6

将154.1mg阿西莫司，366.3mg异烟酰胺加入到41.1ml的异丙醇、5.1ml纯化水混合溶剂中，加热到70℃搅拌回流反应10小时，缓慢降温至0℃后，静置析晶10小时，过滤，50℃下真空干燥10h，得异烟酰胺阿西莫司共晶晶型Ⅱ，收率93.87％。经测定，其X-射线粉末衍射图谱与图1基本一致。

实施例7

将154.1mg阿西莫司，610.5mg异烟酰胺加入到56ml的异丙醇、21ml纯化水混合溶剂中，加热到75℃搅拌回流反应10小时，缓慢降温至-10℃后，静置析晶8小时，过滤，50℃下真空干燥10h，得异烟酰胺阿西莫司共晶晶型Ⅱ，收率91.19％。经测定，其X-射线粉末衍射图谱与图1基本一致。

实施例8

将154.1mg阿西莫司，122.1mg异烟酰胺加入到28ml的异丙醇、2.8ml纯化水混合溶剂中，加热到40℃搅拌回流反应10小时，缓慢降温至30℃后，静置析晶96小时，过滤，50℃下真空干燥10h，得异烟酰胺阿西莫司共晶晶型Ⅱ，收率91.07％。经测定，其X-射线粉末衍射图谱与图1基本一致。

对比实施例1

将5.0g(32.4mmol)阿西莫司和4.0g(32.4mmol)异烟酰胺溶于50ml甲醇中，加热至60℃溶解，溶液澄清后，降温至20℃，静止析晶48小时，过滤干燥得异烟酰胺阿西莫司共晶晶型I8.6g，收率96.5％。

对比实施例2

将5.0g(32.4mmol)阿西莫司和5.6g(32.4mmol)精氨酸溶于甲醇水溶液(50ml甲醇+0.5ml水)中，加热至60℃溶解，溶液澄清后，降温至20℃，静止析晶52小时，过滤干燥得阿西莫司精氨酸水合物10.9g，收率97.1％。

验证实施例

1.稳定性试验

异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ的稳定性考察

对本发明实施例1-8制备的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ和对比实施例1-2中制备的异烟酰胺阿西莫司共晶晶型I和阿西莫司精氨酸水合物共晶，置于40℃±2℃、相对湿度75％±5％的恒温恒湿箱中放置6个月进行加速试验，与0、1、2、3、6个月定时取样，测定有关物质含量，其中杂质I为5-甲基吡嗪-2-羧酸，检测结果如下表所示。

表3.加速实验稳定性结果

经试验，本发明制备得到所有的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ均可达相近的稳定性效果。本发明制备得到的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ在加速试验条件下其纯度和杂质未发生明显的变化，而对比实施例1和2制备的阿西莫司异烟酰胺共晶I和阿西莫司精氨酸水合物晶型在相同的实验条件下其纯度降低，杂质含量都有较明显的升高，可见本发明制备的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ相比于现有的晶型具有较好的化学稳定性。

2.异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ的溶解度考察

具体的溶解性试验参考中国药典2015。分别精密称取本发明实施例1-8制备的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ和对比实施例1-2中制备的共晶过量，置于小西林瓶中，分别加入水、0.1mol/L盐酸、pH7.4的磷酸盐缓冲溶液，配置成药物饱和溶液，摇匀溶解，过滤，照紫外-可见分光光度法(通则0401)，在270nm的波长处测定吸光度来计算其溶解度。

表4不同晶型在不同介质中的溶解度

3、阿西莫司对脂肪肝大鼠治疗作用的实验

(1)材料

①药物

本发明阿西莫司异烟酰胺共晶体Ⅱ，现有技术阿西莫司异烟酰胺共晶I，阿西莫司精氨酸水合物晶型。

②试剂：总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酯酶(ALP)和血糖试剂盒。肝组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒。

③仪器：ADVⅡA2400型全自动化生化分析仪，AxⅡoskop-plus型光学显微镜，组织包埋机，全自动组织脱水机，石蜡切片机，病理图像分析系统等。

(2)动物

雄性WⅡstar大鼠，适应性饲养1周后，随机分为正常对照组、模型组、阿西莫司异烟酰胺共晶Ⅱ组，阿西莫司异烟酰胺共晶I组，阿西莫司精氨酸水合物晶型组；每组5只。每组大鼠均自由摄水，正常对照组给予基础饲料，其余4组给予高脂饲料(含88.8％基础饲料、10％猪油、1％胆固醇、0.2％甲基硫氧嘧啶)，连续饲喂5周。从实验第6周末起，各组大鼠仍如前法饲喂，正常对照组和模型组用生理盐水1mL灌胃；其余三组分别给予阿西莫司异烟酰胺共晶Ⅱ溶液，阿西莫司异烟酰胺共晶I溶液，阿西莫司精氨酸水合物晶型溶液灌胃1mL，以阿西莫司0.06/(kg·d)计。5组大鼠均连续灌胃4周，于末次灌胃后24h处死，取血取肝并进行相应指标检测。

(3)检测

观察大鼠的精神状况、测定血清中甘油三酯(TG)，胆固醇(TC)，低密度脂蛋白(LDL-C)，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平、观察不同组肝组织切片变化。

(4)结果

大鼠精神状况：高脂饲料饲喂大鼠前期食量大于正常对照组，体质量增加较快，后期食量减小，活动量减少。三组服用阿西莫司药物共晶晶型的大鼠食量、活动量均明显优于对照组。异烟酰胺组大鼠体质量明显轻于对照组。

肝组织切片变化情况：处死大鼠后取肝组织肉眼观察，发现正常对照组肝组织色泽正常，呈暗红色，切面无油腻感；模型组大鼠肝脏肥大、表面发黄，切面油腻。三组服用阿西莫司药物晶型肝组织略偏大，大部分色泽暗红，接近正常表现。

各组血清脂质比较：与模型组相比，三组服用阿西莫司药物共晶晶型组的TG，TC，

LDL-C水平均明显下降。结果见表5。

表5各组血清脂质的比较

Claims (10)

1.一种异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ，其特征在于，使用Cu-Kα辐射，以2θ表示的X射线衍射谱图在：10.9±0.2°，22.0±0.2°，23.5±0.2°，26.5±0.2°处有特征峰。

2.如权利要求1所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ，其特征在于，使用Cu-Kα辐射，以2θ表示的X射线衍射谱图在7.2±0.2°，8.0±0.2°，10.2±0.2°，10.9±0.2°，13.0±0.2°，14.5±0.2°，15.0±0.2°，16.2±0.2°，19.5±0.2°，22.0±0.2°，23.5±0.2°，26.5±0.2°，30.2±0.2°，43.2±0.2°，44.5±0.2°，45.1±0.2°处有特征峰。

3.如权利要求1所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ，其特征在于，使用Cu-Kα辐射，其特征峰符合如图1所示的X射线粉末衍射图谱。

4.如权利要求1所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ，其特征在于，其在差示扫描量热曲线DSC中存在吸热峰，为202.76℃。

5.如权利要求1所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ，其特征在于，其晶体学参数是：单斜晶系，手性空间群为P2₁/c；晶胞参数为：

α＝90.00°，β＝103.260(3)°，γ＝90.00°，晶胞体积

6.一种异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ的制备方法，其特征在于，具体制备步骤包括：将阿昔莫司和异烟酰胺溶于有机溶剂A与纯化水的混合溶剂中，加热溶解，溶液澄清后，降温析晶，过滤干燥得异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ。

7.如权利要求6所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ的制备方法，其特征在于，阿西莫司与异烟酰胺投料的摩尔比为1:1.5～3。

8.如权利要求6所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ的制备方法，其特征在于，阿西莫司和混合溶剂的质量体积比为10：1-3，其中阿西莫司质量以mg计，混合溶剂体积以ml计。

9.一种药物组合物，其包含权利要求1-5中任一项所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ，并包含其他药学上可接受的辅料组分。

10.权利要求1-5中任一项所述的异烟酰胺阿西莫司共晶体晶型Ⅱ在制备用于降血脂药中的应用。

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