CN112088011A

CN112088011A - 用于受控的卵巢刺激的组合物

Info

Publication number: CN112088011A
Application number: CN201980029235.4A
Authority: CN
Inventors: 伊恩·科廷厄姆
Original assignee: Firelink
Current assignee: Firelink; Ferring BV
Priority date: 2018-04-30
Filing date: 2019-04-25
Publication date: 2020-12-15
Also published as: US20210038694A1; JP2024056722A; WO2019211153A1; EP3787667A1; JP2021522268A; TW201945024A

Abstract

用于不育症的治疗的包括FSH和hCG的组合物。

Description

用于受控的卵巢刺激的组合物

本发明涉及用于治疗不育症的组合物和药物产品。

背景技术

辅助生殖技术(ART)如体外受精(IVF)是众所周知的。ART通常需要受控的卵巢刺激(COS)的步骤，其中一批卵泡被刺激至完全成熟。标准的COS方案包括将促性腺激素，如促卵泡激素(FSH)，单独地或以与黄体生成素(LH)活性的组合施用，以刺激多个卵泡的发育。COS经常需要在刺激前和/或在刺激期间施用GnRH类似物，或GnRH激动剂来预防早熟的LH激增，所述激增可能在计划的卵母细胞取回前诱导排卵。通常用于COS的药品组合物包括重组促卵泡激素(rFSH)，所述重组促卵泡激素(rFSH)包括

和GONAL-

尿液来源的FSH，重组FSH+LH制剂，尿液来源的促生育素[人更年期促性腺激素(hMG)]和高纯化人更年期促性腺激素(HP-hMG)。

在过于高的卵巢应答的情况下，COS可以与卵巢过度刺激综合征(OHSS)的风险关联，其在严重的情况下可危及生命。预测妇女对COS的卵巢应答潜力的能力可允许开发个人化或个性化的COS方案。这样的个性化方案可以例如，减少在被预计对COS具有过度的卵巢应答的妇女中OHSS的风险，和/或改善被分类为不良应答者的妇女中的妊娠机会。抗苗勒氏激素(AMH)的血清浓度如今被确立为卵巢储备的可靠的生物标志物(Dewailly等，2014)。AMH的水平与在COS期间卵巢对促性腺激素的应答直接相关。因此，高水平的AMH是过度的卵巢应答的良好预测因素和OHSS的风险的指标，与此相对，低水平的AMH预测了对COS的不良卵巢应答。

过去几年临床研究的重点在用于COS的个性化给药方案的开发上，最初没有使用AMH而是基于了卵巢应答的其他预测因素。这些预测因素包括年龄，体重指数(BMI)，FSH和窦卵泡计数(AFC)。作为典型的实例，CONSORT研究应用了一个合并基础FSH，BMI，年龄和AFC的给药算法，来预测用于COS的最佳rFSH起始剂量(Olivennes等，2009)。CONSORT给药算法个性化了rFSH(GONAL-

)用于ART的剂量，根据基础FSH，BMI和AFC的患者特征而分配37.5IU增量。CONSORT为18-34岁年龄的正常排卵妇女的前瞻性，非受限，国际性的，18岁中心的试点研究，包括在长效激动剂治疗方案下经历刺激。重组FSH剂量由算法进行分配，并意在仅为了OHSS的风险而改变。初期的终点为取回的卵母细胞的数量。对包括共计161名患者的五个剂量组进行了分析：75IU(n＝48)，112.5IU(n＝45)，150IU(n＝34)，187.5IU(n＝24)，225IU(n＝10)。在75IU组中，归因于应答不足的取消高于预期(12/48)。总的来说，取回了中位数为9.0的卵母细胞(在75，112.5，150，187.5和225IU组中分别为8.5，8.0，10.0，12.0和8.0)。临床妊娠率/开始的周期分别为31.3，31.1，35.3，50.0和20.0％，(总体为34.2％)。两名患者具有严重的OHSS。结论是在该初步研究中，CONSORT算法达到了足够的卵母细胞产量和良好的妊娠率。然而，算法的调整将是需要的，以降低取消率。因此，需要更可靠的个性化COS方案，其提供足够的刺激应答和/或下降的OHSS的风险。

如上述表明，标准COS方案需要FSH的每日施用来诱导多个卵泡的生长，以得到足够的卵母细胞用于IVF。FSH为由垂体前叶腺分泌的天然激素。在女性中，FSH每月诱导单个占优势的卵泡的生长，所述卵泡在每一天然周期期间发生排卵。FSH包括92个氨基酸的α亚基，所述亚基也常见于其他糖蛋白激素LH和CG中；以及111个氨基酸的β亚基，其为FSH所独有的，赋予该激素以生物学特异性(Pierce和Parsons，1981)。每个亚基通过复合碳水化合物残基的添加而被翻译后修饰。两种亚单位都携带2个用于N-连接聚糖附着的位点，所述α亚基在氨基酸第52和78位，所述β亚基在氨基酸残基第7和24位(Rathnam和Saxena，1975，Saxena和Rathnam，1976)。FSH因此以质量计被糖基化了～约30％(Dias和VanRoey.2001.Fox等.2001)。

从绝经后妇女的尿纯化的FSH已在治疗不育症方面使用多年；既促进在天然繁殖中的排卵，也诱导多个卵泡的生长以得到足够卵母细胞用于ART。直到最近，仅有的被批准的用于卵巢刺激的rFSH产品，如促滤泡素α(GONAL-

Merck Serono/EMD Serono)和促滤泡素β(

MSD/Schering-Plough)来源于自中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系。

存在与FSH制备关联的大量的异质性，所述异质性涉及存在的各种同种型的量上的差异。个体的FSH同种型呈现相同的氨基酸序列，但它们的糖基化程度有差异。这些特定的同种型可以利用它们的碳水化合物分支结构的异质性和唾液酸(末端糖)掺入的差异量进行表征，这两者表现为影响特定的同种型生物活性。

天然FSH的糖基化是高度复杂的。天然来源的垂体FSH中的聚糖可含有较广范围的结构，所述结构可包括单-，二-，三-和四-天线聚糖的组合(Pierce和Parsons，1981.Ryan等.，1987.Baenziger和Green，1988)。聚糖能够携带进一步的修饰：核心岩藻糖基化，平分型葡萄糖胺，利用乙酰氨基乳糖(acetyl lactosamine)延伸的链，部分的或完全的唾液酸化，具有α2，3和α2，6连接的唾液酸化，硫酸化的半乳糖胺代替半乳糖(Dalpathado等.，2006)。此外，在个体的糖基化位点的聚糖结构分布之间存在差异。已在来源于个体的血清和来自绝经后妇女的尿的FSH中发现了类似水平的聚糖复杂性(Wide等.，2007)。

rFSH产品的糖基化反映了存在于宿主细胞系中的糖基转移酶的范围。就可商购获得的来源自改造的CHO细胞的rFSH产品而言，与那些在天然产品上发现的相比，具有更受限的范围的聚糖修饰。在CHO细胞来源的rFSH中发现的降低的聚糖异质性的例子包括：缺乏平分型葡萄糖胺，和核心岩藻糖基化的含量降低，和乙酰基乳糖胺聚糖延伸(Hard等.，1990)。而且，CHO细胞只能够使用α2，3连接来增加唾液酸(Kagawa等，1988，Takeuchi等，1988，Svensson等.，1990)；CHO细胞来源的rFSH仅包括α2，3-连接唾液酸且不包括α2，6-连接唾液酸。

因此，CHO细胞来源的FSH与天然生成的FSH(例如，人垂体/血清/尿的FSH)不同，天然生成的FSH包含具有α2，3和α2，6-连接唾液酸的混合物的聚糖，前者具有主导地位。

本发明的申请人已开发了人细胞系来源的rFSH，其为国际专利申请No.PCT/GB2009/000978的主题，公布为WO2009/127826A。通过改造人细胞系制作了具有α2，3和α2，6-连接唾液酸两者的混合物的重组FSH来表达rFSH和α2，3唾液酸转移酶两者，。表达的产物为高酸性，并携带-α2，3-和α2，6-连接唾液酸两者的混合；后者由内源性唾液酸转移酶活性提供。据发现，唾液酸连接的类型α2，3-或α2，6-能够对FSH的生物学清除具有剧烈影响。具有α2，3和α2，6-连接唾液酸两者的混合物的重组FSH具有两种超过在常规CHO细胞中表达的rFSH的优点：首先，由于两种唾液酸转移酶的组合活性，该材料被更高度地唾液酸化；其次，该材料更接近地类似于天然FSH。这有可能比CHO细胞来源的只有α2，3连接唾液酸(Kagawa等，1988，Takeuchi等，1988，Svensson等.，1990)并具有下降的唾液酸含量(Ulloa-Aguirre等.1995.，Andersen等.2004)的重组产品在生物学上更适当。

人细胞系来源的重组FSH氨基酸序列，其为国际专利申请No.PCT/GB2009/000978的主题，公布为WO2009/127826A，为天然序列，并与天然人FSH和现有的CHO来源的rFSH产品相同。然而，本发明的申请人已经发现，当运用在(例如个性化)COS方案中时，具有α2，3和α2，6-连接唾液酸两者的混合物的人来源的重组FSH产品(即，在人细胞系中产生或表达的重组FSH，例如通过改造人细胞系制作)可能特别有效。

2016年12月13日，欧盟委员会(EC)授予

(，促滤泡素δ，也称为FE999049)销售授权，REKOVELLE为人细胞系来源的重组促卵泡激素(人rFSH)，用于在经历辅助生殖技术(ART)，比如体外受精(IVF)周期的妇女中在受控的卵巢刺激中发展多个卵泡。

为第一个来源于人细胞系的rFSH。

(促滤泡素δ)产品是通过在国际专利申请No.PCT/GB2009/000978中公开的方法生产的。

在IVF/ICSI患者中进行了两项随机的，对照的，盲评，平行组，多中心的2期抗苗勒氏激素(AMH)分层试验，一项在欧洲，一项在日本，目的是调查FE 999049的剂量-应答关系和取回的卵母细胞的数量。在两项试验中，根据筛选时的AMH水平对随机化进行分层；低AMH(5.0-14.9pmol/L)或高AMH(15.0-44.9pmol/L)。在欧洲剂量-应答2期试验中，调查了从5.2μg/天～12.1μg/天的范围的五个剂量的FE 999049，还包括了批准的rFSH产品(GONAL-

150IU/天)的参考组。在日本剂量-应答2期试验中，调查了三个剂量的FE 999049(6μg/天，9μg/天和12μg/天)，还包括了批准的rFSH产品(

150IU/天)的标准疗法。目前，促滤泡素β

为在日本批准的用于在IVF/ICSI周期中的受控的卵巢刺激的唯一的医药产品。

在欧洲和日本2期试验中，日剂量在整个刺激期是固定的。在两项试验中，对于整体群体和对于每一AMH随机分层，观察到针对FE 999049与取回的卵母细胞的数量的统计学显著的剂量-应答关系。用所有的FE999049剂量达到了可接受的妊娠率。此外，在欧洲试验和日本试验中观察到的FE 999049的剂量-应答特征相似。

这项工作使得能够开发用于给药

(促滤泡素δ，FE999049)产品的个性化COS方案。

申请人之前已发现，为了能够选择两个高质量胚胎用于植入，通常需要在9个卵母细胞的范围中取回。

申请人已发现，对于具有低AMH(AMH＜15 pmol/L每升)的受试者，这需要适度地高剂量的促滤泡素δ(例如12μg)来实现。在这剂量时，将会从60％的具有低AMH的受试者取回8～14个卵母细胞。这是意料不到的，并比利用150IU GONAL-

治疗的具有低AMH的受试者的治疗(其中从仅33％的受试者取回8～14个卵母细胞)具有显著改善。申请人发现，不需要根据患者的体重调整此剂量。

然而，群体的60％(和小于30岁的因不育症而治疗的妇女的80％)具有高的AMH(即，AMH≥15pmol/L)。对于这些受试者，取回均值9～11个卵母细胞通常相当地简单；刺激方案具有的问题是OHSS的风险。申请人发现，在以低剂量的促滤泡素δ给药的患者中，取回的卵母细胞与受试者的体重之间有关联。这是指可能存在与用固定剂量的FSH(其在本领域中是通常的)的治疗有关联的风险。本发明的申请人以机构建立了在FSH的剂量与AMH水平和受试者的重量之间的关联，其提供了与常规处理方案相比改善的安全特征(OHSS的风险降低)，并具有可接受或改善的取回的卵母细胞的数量。

的剂量学对于每个患者进行了个性化，目的在于得到与有利的安全/功效特征关联的卵巢应答，即目的在于实现取回足够数量的卵母细胞，并减少干预以预防OHSS。

以微克进行给药。

对于第一治疗周期，个体日剂量将会以妇女的血清AMH浓度和她的体重为基础决定。剂量应基于AMH的新近(即在近12月内)的测定值，所述测定值通过来自Roche：

AMH Plus免疫测定的如下诊断试验而测量。在整个刺激期，个体日剂量将保持不变。

对于具有AMH＜15pmol/L的妇女，

的日剂量为12微克，不考虑体重。

对于具有AMH≥15pmol/L的妇女，通过逐渐增加的AMH浓度，

的日剂量从0.19降低到0.10微克/kg(表A，如下)。

剂量将被四舍五入到最接近的0.33微克，以匹配在注射笔上的给药标度。第一治疗周期的最大日剂量为12微克。对于

剂量的计算而言，体重将在不穿鞋和大衣的情况下在马上开始刺激前进行测量。

表A给药方案

mcg：微克

AMH浓度以pmol/L表示，并将被四舍五入至最接近的整数。如果AMH浓度以ng/mL计，则该浓度应在使用前通过乘以7.14(ng/mL x 7.14＝pmol/L)被转换成pmol/L。

利用

的治疗应在月经出血开始后的第2或3天启动。治疗将继续到达到已经获得足够的卵泡发育(≥3个卵泡≥17mm)，其平均起来是治疗的第9天(在5～20天范围内)。施用了250微克重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)或5,000IU hCG的单次注射来诱导最后的卵泡成熟。在罹患过度的卵泡发育(≥25个卵泡≥12mm)的患者中，利用

的治疗应被停止，并且，不应执行利用hCG触发最后的卵泡的成熟。

对于后续的治疗周期，

的日剂量应根据在之前的周期中患者的卵巢应答进行维持或修改。如果患者在之前的周期中具有足够的卵巢应答而没有患得OHSS，则应使用相同的日剂量。在之前的周期中卵巢低应答的情况下，在后续周期中的日剂量应根据观察到的应答的程度而提高25％或50％。在之前的周期中卵巢过度应答的情况下，在后续周期中的日剂量应根据观察到的应答的程度降低20％或33％。在之前的周期中患得OHSS或处于OHSS的风险的患者中，后续周期的日剂量低于出现OHSS或OHSS的风险的周期中剂量的33％。最大日剂量为24微克。

基于妇女的血清AMH和体重的

个性化给药方案的功效和安全性已在11个国家包括欧洲、北美和拉丁美洲中进行的大型3期试验ESTHER-1(证据基于在欧洲和世界的其他地方的利用人rFSH刺激的试验)中证实。ESTHER-1试验在1,326个IVF/ICSI患者中进行，所述患者对于用如下处理之一的受控的卵巢刺激1∶1随机化：1)在其个性化给药方案中的FE 999049，其具有在整个刺激中固定的日剂量，或2)批准的CHO-来源的rFSH产品(促滤泡素α，GONAL-

)以150IU/天的标准起始剂量，接着基于在刺激期间受试者的卵泡的应答而调整剂量。就进行的妊娠率(30.7％对比31.6％)和进行中的植入率(35.2％对比35.8％)而言，证实了处于其个性化给药方案中的FE 999049不比促滤泡素α差。对于整体群体，在取回的卵母细胞的数量方面，处理组之间没有统计学显著差异，对于FE 999049而言平均值为10.0，对于促滤泡素α而言平均值为10.4。尽管如此，个性化的FE 999049给药方案与促滤泡素α相比导致了在具有AMH＜15pmol/L(处于低应答风险的群体)的患者中取回的卵母细胞统计学显著更多，为平均值8.0对比7.0；以及在具有AMH≥15pmol/L(处于过度应答风险的群体)的患者中的卵母细胞统计学显著更少，为平均值11.6对比13.3。利用FE999049疗法的卵巢应答的这种转变被认识到了其直接临床意义，因为相比于促滤泡素α，罹患极端卵巢应答的患者统计学显著更少，即在具有AMH＜15pmol/L的患者中＜4个卵母细胞(12％对比18％)，以及在具有AMH≥15pmol/L的患者中≥15或≥20个卵母细胞(28％对比35％，以及10％对比16％)。FE 999049与促滤泡素α相比，更多的用FE 999049治疗的患者达到了具有适当卵巢应答的患者的百分比，即43％对比38％，其中，所述适当卵巢应答针对FE999049定义为8-14个卵母细胞，尽管在刺激期间，不同于针对FE 999049的固定剂量的个性化给药方案，在促滤泡素α组中对于37％的患者执行了剂量调整。在FE 999049组中观察到了与CHO-来源的rFSH产品组相比，统计学显著更低总促性腺激素剂量，平均值分别为90μg和104μg。

与促性腺激素治疗关联的最严重的风险为卵巢过度刺激综合征(OHSS)。总体而言，在ESTHER-1的3期试验中，OHSS和/或早期OHSS的预防性干预出现在4.4％的FE 999049周期中及6.5％的促滤泡素α周期中。在利用FE 999049和促滤泡素α的治疗周期中分别观察到发生率3.3％和5.6％的缓和/严重OHSS和/或对早期OHSS的预防性干预。

如上解释的那样，COS方案也可使用FSH和LH活性，且后者可以为人绒毛膜促性腺激素(hCG)形式。人绒毛膜促性腺激素(hCG)为由人胎盘产生的天然糖蛋白。在正常妊娠期间；hCG由胎盘分泌而在LH分泌降低后保持黄体，支持持续的雌激素和孕酮分泌以确保胚胎植入和早期妊娠的进展。在正常月经的周期期间，LH在占优势的卵泡的发展和成熟中支持FSH，并因为hCG也为LH受体的激动剂，在这种作用中hCG能够替换LH。

HCG包括92个氨基酸的α亚基，所述亚基也常见于其他糖蛋白激素LH和FSH中；以及145个氨基酸β的亚基，其为hCG所独有的，指定激素特异性。每个亚基通过复合碳水化合物残基的添加而被翻译后修饰。α亚基在氨基酸第52和78位包含2-N-连接糖基化位点，且β亚基在氨基酸第13和30位包含2-N-连接糖基化位点，且在氨基酸121，127，132和138位有四个O-连接糖基化位点。

从妊娠的妇女的尿提取的HCG[

(Ferring)]已在治疗不育症方面使用多年。生产从尿提取的hCG涉及大量的尿的收集和处理。hCG的重组型式，

(Merck Serono)也是可获得的，并在CHO细胞中表达。

本发明的申请人已经开发了人细胞系来源的重组hCG，其为国际专利申请No.PCT/GB2010/001854的主题，作为WO2011/042688A公布。通过改造人细胞系来表达rhCG和α2，3唾液酸转移酶两者，制作了具有α2，3和α2，6-连接唾液酸两者的混合物的重组hCG。表达产物为高酸性，并携带-α2，3-和α2，6-连接唾液酸两者的混合；后者由内源性唾液酸转移酶活性提供。具有α2，3和α2，6-连接唾液酸两者的混合物的重组hCG具有两种超过在常规CHO细胞中表达的rhCG的优点：首先，由于两种唾液酸转移酶的组合活性，该材料被更高度地唾液酸化；其次，该材料更接近地类似于天然hCG。

FE 999302为人细胞系来源的重组hCG，通过在国际专利申请No.PCT/GB2010/001854中描述的方法生产。FE 999302由辉凌制药开发并意在用于不育症的治疗，按照例如与rFSH组合每日施用而给予。FE 999302为在与FE999049(促滤泡素δ，

)相同的人细胞系中生产。所述细胞系是人来源的细胞系PER.

区别于

一种由CHO细胞产生的重组hCG。PER.

细胞系已可广泛商购多年。进一步地，Per.C6细胞被欧洲细胞培养物收藏中心(European Collection of Cell Cultures)ECACC，UK，以登录号96022940保藏。提及所述保藏的生物材料的欧洲专利申请为由Crucell Holland B.V.在1996年6月14日提交的EP14453322A1。该细胞系在本申请日可通过基于EPC 33条的请求而获得，并且可商购获得。

施用的FE 999302的剂量是以质量指定的，因为它意在用于最终产品。I期试验显示，4-256μg FE 999302的单次的皮下施用，和8μg/天和16μg/天FE 999302的重复的施用是安全的且良好耐受的，没有引起任何安全问题。FE 999302证实了出超过CHO细胞来源的hCG产品的改善的药物动力学(AUC)。

在成功开发以上描述的个性化的促滤泡素δ治疗

后，申请人开发了组合的制剂，其包括处于最佳治疗比的rFSH(

FE 999049，促滤泡素δ)和rhCG(FE 999302)两者。在FSH和hCG被一起施用的方案中，在同一配制剂中具有两种活性成分是有利的，以最小化对患者的注射次数。然而，其中给药是个性化的(即，药物的剂量是针对个体患者而特异性定制的，使得不同患者可能接受显著不同的剂量)，因此可能很难提供适合每个和所有患者的包括FSH和hCG两者的单一制剂。例如，FSH的量可以根据上述方案个性化，但在同一配制剂中具备固定的FSH∶hCG比的hCG的包含物可能意味着，取决于施用的FSH量，而hCG的量是过低的(无效的)或过高的(无效，和/或倾向于导致潜在的严重的副作用)。

本发明的申请人已经开发了包括FSH和hCG的单组合物，其具有无论患者的AMH水平和体重为何，均提供FSH和hCG都有效和安全的给药的FSH和hCG的比。所述组合物允许例如，基于AMH的并取决于患者的AMH水平，他们的体重以及药学上有效的hCG的剂量的FSH的个性化给药。相信在实施例1中提出的II期临床试验将说明，以指定的剂量和比进行的FSH和hCG的施用在例如，改进囊胚和/或胚胎质量(例如，改进3BB种类或更好的囊胚的发育)方面特别有效。更好质量的囊胚使得能够进行更冰冻的胚胎传输，并因此有更高的累积的(即，新鲜和冰冻的组合)的妊娠率。囊胚质量被认为是用于设计3期试验的最佳指标，在所述3期试验中，期望的效果为妊娠和/或累积的妊娠率的增加。相信由以指定的剂量和比施用FSH和hCG也可导致胚胎植入改善。所述的组合物对治疗在之前的治疗中具有不足的卵巢应答(例如，之前的COS周期)的患者也可以是有效的(例如，在更高剂量)，例如OHSS的风险降低。

目前优选的组合物将包括FE999302，其为人

细胞系来源的重组hCG，通过在国际专利申请No.PCT/GB2010/001854中描述的方法生产。然而，可以理解的是，其他的hCG产品如

和

可以使用在所述组合物中。

发明内容

根据本发明的第一方面，提供包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于在具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者中的不育症的治疗，其中，所述重组FSH以或相当于每天11～13μg的剂量施用，且所述重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1，例如3∶1或1.5∶1。所述比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为例如，12∶1，6∶1，3∶1，2∶1，1.5∶1，1∶1等。

优选所述组合物为包含FSH和hCG的单个组合物(例如，单个药物组合物)。

所述组合物可以用于以下应用，其中，重组FSH以每天11～13μg的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1，例如3∶1或1.5∶1。所述比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为例如，12∶1，6∶1，3∶1，2∶1，1.5∶1，1∶1等。

所述组合物可以用于以下应用，其中，重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为3∶1或1.5∶1。

根据本发明的进一步的方面，提供包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于在具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者中的不育症的治疗，其中，重组FSH以每天11～13μg，例如12μg的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为3∶1或1.5∶1[例如，日剂量12μg的rFSH和日剂4μg的rhCG(3∶1)或日剂量12μg的rFSH和日剂8μg的rhCG(1.5∶1)]。

重组FSH和重组hCG可以以每天剂量为12μg的重组FSH和4μg的重组hCG；或12μg的重组FSH和8μg的重组hCG施用。

不育症的治疗可包括测定患者的血清AMH水平的步骤；以及对具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者施用所述剂量的重组FSH和重组hCG的步骤。基于患者的血清AMH水平识别患者的步骤(在治疗前)可发生在紧邻对患者第一次施用FSH和hCG的剂量之前(例如，0～2天前)。测定患者的血清AMH水平的步骤可发生在对患者第一次施用该剂量的长达12月前。优选患者的血清AMH水平通过

AMH Plus免疫测定(可从瑞士Roche获得，见www.roche.com)而测定(测量)。

根据本发明的进一步的方面，提供包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于在具有血清AMH水平≥15pmol/L的患者中的不育症的治疗，其中，组合物以或相当于每kg患者的体重每天0.09～0.19μg重组FSH的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1，例如12∶1，6∶1，3∶1或1.5∶1。所述比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为例如，12∶1，6∶1，3∶1，2∶1，1.5∶1，1∶1等。

组合物可以用于以下应用，其中，组合物以每kg患者的体重每天0.09～0.19μg重组FSH的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1，例如3∶1或1.5∶1。所述比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为例如，12∶1，6∶1，3∶1，2∶1，1.5∶1，1∶1等。

组合物可以用于以下应用，其中，重组FSH的每天剂量为从6μg的最小剂量至12μg的最大剂量。

组合物可以用于以下应用，其中，重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为3∶1或1.5∶1。

根据本发明的一个方面，提供包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于在具有血清AMH水平≥15pmol/L的患者中的不育症的治疗，其中，组合物以每kg患者的体重每天0.09～0.19μg重组FSH的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为3∶1或1.5∶1。

组合物可以用于(i)治疗具有15～24.9pmol/L的血清AMH水平的患者，其中，重组FSH以每kg患者的体重每天0.14～0.19μg的剂量施用；或(ii)用于治疗具有25～34.9pmol/L的血清AMH水平的患者，其中，重组FSH以每kg患者的体重每天以0.11～0.14μg的剂量施用；或(iii)用于根据治疗具有血清AMH水平≥35pmol/L的患者的应用，其中，重组FSH以每kg患者的体重每天0.10～0.11μg重组FSH的剂量施用。

不育症的治疗可包括基于血清AMH水平识别患者的步骤(在治疗前)。不育症的治疗可包括对识别为具有限定的血清AMH水平的患者施用限定的剂量的FSH和hCG的步骤。例如，不育症的治疗可包括基于患者的血清AMH水平和体重识别患者的步骤(在治疗前)；以及对(在治疗前)识别为具有AMH≥15pmol/L(例如AMH≥16pmol/L，例如AMH≥19pmol/L，例如AMH≥26pmol/L，例如AMH≥28pmol/L，例如AMH≥40pmol/L)的患者施用所述剂量的步骤。

(在治疗前)基于患者的血清AMH水平和体重识别患者的步骤可发生在紧邻对患者第一次施用该剂量之前(例如，0～2天前)。识别患者的步骤可以基于之前测定的血清AMH水平(例如，在对患者第一次施用该剂量长达12个月前测定的血清AMH水平)。优选患者的血清AMH水平通过

AMH Plus免疫测定(可从瑞士Roche获得，见www.roche.com)而测定(测量)。患者的体重可以在紧邻对患者第一次施用该剂量之前(例如，0～2天前)测定。如众所周知的，测定患者的体重的步骤可使用体重秤。

优选地rFSH(例如人细胞系来源的重组FSH)包括α2，3-和α2，6-唾液酸化。根据本发明使用的rFSH可具有总唾液酸化的1％～99％为α2，3-唾液酸化。根据本发明使用的rFSH可具有总唾液酸化的1％～99％为α2，6-唾液酸化。重组FSH可具有总唾液酸化的1％～50％为α2，6-唾液酸化，总唾液酸化的50％～99％为α2，3-唾液酸化。优选地，总唾液酸化的80～95％，例如80～90％，例如82～89％，例如85～89％为α2，3-唾液酸化。优选地，5～20％，例如10～20％，例如11～18％，例如11～15％的总唾液酸化为α2，6-唾液酸化。

优选地重组hCG包括α2，6-唾液酸化和α2，3-唾液酸化。根据本发明应用的rhCG可具有总唾液酸化的1％～99％为α2，3-唾液酸化。根据本发明应用的rhCG可具有总唾液酸化的1％～99％为α2，6-唾液酸化。重组hCG可具有总唾液酸化的1％～50％为α2，6-唾液酸化，总唾液酸化的50％～99％为α2，3-唾液酸化。rhCG可优选地进一步包括四(4S)唾液酸化结构。rhCG可优选进一步包括单(1S)，二(2S)，三(3S)和四(4S)唾液酸化结构。单(1S)，二(2S)，三(3S)和四(4S)唾液酸化结构是本领域熟知的，例如在WO2011/042688中描述的。

本文中，所谓“唾液酸化”指存在于FSH(或hCG)碳水化合物结构上的唾液酸残基的量。α2，3-唾液酸化是指在2，3位置(如本领域熟知的)的唾液酸化，而α2，6唾液酸化在2，6位置(也如本领域熟知)。因此“总唾液酸化的％可以为α2，3唾液酸化”指存在于FSH(或hCG)的唾液酸残基的总数量的％，所述FSH在2，3位置被唾液酸化。术语“总唾液酸化的％为α2，6唾液酸化”指存在于FSH(或hCG)的唾液酸残基的总数量的％，所述FSH在2，6位置被唾液酸化。rFSH和/或hCG可以表示单独的同种型或以同种型的混合物形式。

患者为女性患者。患者可以为年龄大于30岁，任选地为年龄大于37岁。患者可在之前已有至少一个周期的失败的不育症治疗。在具体实例中，所述组合物用于治疗年龄大于30岁的患者，所述患者在之前已有至少一个周期的失败的不育症治疗。患者可在之前已有多达三个周期的失败的不育症治疗。

不育症的治疗可以为了促进良好质量的囊胚(例如，种类3BB或更高的囊胚，例如不育症的治疗，以增加在卵母细胞取回后第3天和/或第5天种类3BB或更高的囊胚的数量)和/或改善胚胎植入。本文中，“良好质量的囊胚”定义为种类3BB或更高(即3BB，3BA，3AC，3AB，3AA，4CC，4CB，4CA，4BC，4BB，4BA，4AC，4AB，4AA，5CC，5CB，5CA，5BC，5BB，5BA，5AC，5AB，5AA，6CC，6CB，6CA，6BC，6BB，6BA，6AC，6AB，6AA)。所述不育症的治疗可以是为了增加在卵母细胞取回后第3和/或第5天的种类3BB或更高的囊胚的数量(例如，与利用

或GONAL-

治疗相比，见例如实施例1)。)的不育症的治疗。不育症的治疗可以是为了增加受精的(2PN)卵母细胞的数量(例如与利用

或GONAL-

治疗相比)的不育症的治疗。

根据本发明的进一步的方面，提供包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)(例如单个的)药物组合物，其中，重组FSH与重组hCG的重量比(以μg计的rFSH的量：以μg计的rhCG的量)为3∶1或1.5∶1。

本文中“治疗的第一天”，也称为“刺激的第一天”，指对患者施用(例如，重组)FSH和(例如，重组)hCG的剂量的第一天。治疗(刺激)的第一天可发生在患者的月经周期的第1，2或3天，优选第2天或第3天。换句话说，治疗的第一天(刺激)可以为在患者开始月经出血后一，两或三天，优选两或三天，如在利用GnRH拮抗剂或GnRH激动剂的方案的临床实践中应用的那样。

FSH和hCG的给药在治疗的第一天开始，并可持续2～20天，例如持续2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19或20天。FSH和hCG的给药在治疗的第一天开始，并可持续7～13天，例如9～13天，例如10～13天，例如10～11天。FSH和hCG的给药可以以相当于上述提及的日剂量的剂量施用。例如，组合物可以以12μg FSH和8μg hCG的日剂量，或相当于每三天36μg FSH和24μg hCG(例如用于在第1，4，7天施用等等)进行施用。

组合物(例如药物组合物)或药物可以在用FSH和hCG治疗的第一天前，用(不同的)药物组合物对患者进行预处理后进行施用(例如在受试者被用类固醇，GnRH激动剂，GnRH拮抗剂等(预)处理后)，其中，所述(不同的)药物组合物抑制内源性促性腺激素的产生。本文中，术语“经预处理的”或“预处理”指在用FSH和hCG治疗的第一天前施用抑制内源性促性腺激素的产生药物组合物，如利用长期GnRH激动剂的方案的临床时间中应用的那样。因此，所述组合物(例如药物组合物)或药物可以在施用GnRH激动剂(例如

)之后(例如在施用的开始后，例如在每日施用的开始后)施用12～16，例如13～15，例如14天。组合物可以用于与GnRH激动剂一起施用。

在其他实例中，组合物(例如药物组合物)或药物可以用于在施用GnRH拮抗剂(例如

)前施用，例如用于在施用GnRH拮抗剂5或6天前进行施用。所述产品可以用于与GnRH拮抗剂一起施用。

优选地组合物(例如药物组合物)或药物用于在施用高剂量的hCG(例如4,000～11,000IU hCG，例如5,000IU hCG，10,000IU hCG等；或150～350微克重组hCG，例如250微克重组hCG)前施用，以诱导最后的卵泡的成熟。

以上列出的剂量可以在患者的(受试者的)第一刺激方案中用于不育症的治疗。可以理解的是，对于进一步的刺激周期，可以根据在第一周期中实际的卵巢应答调整剂量。

在各个方面，优选所述不育症的治疗为或包括COS的步骤。优选患者为女性患者(男性不具有卵巢)。不育症的原因可能是妇女的伴侣罹患男性不育症，尽管将会理解为是女性通过COS进行治疗。

申请人设计了“个性化的”COS方案，其中，使用了具体剂量的具有具体特征的重组FSH，基于患者的具体AMH水平，与有效量的hCG一起，来治疗他们，从而增加对刺激产生足够的应答的可能性(例如，在具有低应答潜力的患者中)，和/或降低OHSS的风险(例如，在被分类为高或过度的应答者的患者中)。

AMH的血清水平可以通过任何已证实的AMH测定进行测定(例如测量)。血清AMH水平可以使用AMH Gen-II酶联免疫吸附测定，一种试剂盒(Beckman Coulter，Inc.，Webster，Texas)来测量。血清AMH水平可以使用自动AMH

测定(Beckman Coulter，Inc.，Webster，Texas)测量。优选地，血清AMH水平使用来自Roche Diagnostics的

AMH测定进行测量。可以使用其他测定法。

本文中，血清AMH值通常以pmol/L的形式叙述。其可以用转换公式lng/ml AMH＝7.1pmol/L AMH而转换为ng/mL。

本文中的术语“患者”和“受试者”可互换使用。

本文中的术语“不育症的治疗”包括通过受控的卵巢刺激(COS)的不育症的治疗或包括受控的卵巢刺激(COS)的步骤或阶段的方法，例如体外受精(IVF)，或胞浆内精子注射(ICSI)。术语“不育症的治疗”包括在具有输卵管或不明原因的不育症的受试者中的不育症的治疗，所述不育症的治疗包括在具有子宫内膜异位，例如阶段I或阶段II的子宫内膜异位的受试者中，和/或在具有无排卵性不育症，例如WHO II型无排卵性不育症的受试者中，和/或在有具有男性因素的不育症的伴侣的受试者中的不育症的治疗。该产品(或组合物)可以用于(应用在)在具有子宫内膜异位的受试者中的不育症的治疗(和/或用于受控的卵巢刺激)，所述具有子宫内膜异位的受试者例如为具有阶段I或阶段II的子宫内膜异位的受试者，所述阶段的子宫内膜异位由美国生殖医学学会(ASRM)对于各阶段的子宫内膜异位的分类系统所定义(阶段IV最严重；阶段I最不严重)[American Society for ReproductiveMedicine.Revised American Society for Reproductive Medicine classification ofendometriosis：1996.Fertil Steril 1997；67，817821.]。

组合物或药物可以用于(使用在)在受试者中的不育症的治疗(和/或用于受控的卵巢刺激)，所述受试者在早期卵泡期中具有1～16IU/L，例如1～15IU/L，例如1～12IU/L的正常血清FSH水平。

组合物或药物可以用于(应用在)在受试者中的不育症的治疗(和/或用于受控的卵巢刺激)，所述受试者年龄在18～42岁，例如25～37岁或30～42岁。该产品可以用于(应用在)在受试者中的不育症的治疗(和/或用于受控的卵巢刺激)，所述受试者具有BMI＞1且BMI＜35kg/m²，例如，具有BMI＞18且BMI＜32kg/m²的受试者，例如，具有BMI＞18且BMI＜25kg/m²的受试者，例如，具有BMI＞20且BMI＜25kg/m²的受试者。

rFSH和rhCG可以在人细胞系，优选PER.

细胞系中产生或表达。rFSH和rhCG可以在PER.

细胞系，PER.

来源的细胞系或改良的PER.

细胞系中产生或表达。在PER.

细胞系中产生或表达的rFSH将包括一些α2，6-连接唾液酸(α2，6唾液酸化)，并将包含一些α2，3-连接唾液酸(α2，3唾液酸化)，所述α2，6-连接唾液酸由[该细胞系的]内源性唾液酸转移酶活性提供，所述α2，3-连接唾液酸由内源性唾液酸转移酶活性提供。所述细胞系可以使用α2，3-唾液酸转移酶改良。所述细胞系可以使用α2，6-唾液酸转移酶改良。备选地或额外地，rFSH可包括由[该细胞系的]内源性唾液酸转移酶活性提供的α2，6-连接唾液酸(α2，6唾液酸化)。本文中，术语“人来源的重组FSH”是指在人细胞系中产生或表达的重组FSH(例如，通过改造的人细胞系制成的重组FSH)。

组合物可以为药物组合物。所述药物组合物用于不育症的治疗。所述不育症的治疗可包括在ART前的COS。所述药物组合物可以使用于，例如，已知的FSH制剂用于的医学适应症。

所述组合物或药物组合物可以配制为用于药物施用的任何途径，例如口服，直肠，胃肠外，经皮(例如贴剂技术)，静脉内，肌内，皮下的，脑池内(intracisternalintracisternal)，阴道内，腹膜内，局部(粉剂，软膏或滴剂)或作为口腔或鼻腔喷雾的熟知的组合物。典型的组合物包括药学上可接受的载体，如水溶液，无毒的赋形剂(包括盐和防腐剂)，缓冲剂等等，如在Remington的药品科学第十五版(MattPublishing Company，1975)第1405～1412页和1461～87页，和国家处方集XIV第十四版(美国制药协会，1975)等等中描述的那样。

合适的水性和非水性药品载体，稀释剂，溶剂或媒介的实例包括水，乙醇，多元醇(如甘油，丙二醇，聚乙二醇，等等)，羟甲基纤维素及其合适的混合物，植物油(如橄榄油)，和可注射的有机酯如油酸乙酯。本发明的组合物也可包含添加剂，所述添加剂例如但不限于防腐剂，润湿剂，乳化剂，表面活性剂和分散剂。可以包含抗菌和抗真菌剂来预防微生物的生长，所述抗菌和抗真菌剂包括例如，间甲酚，苯甲醇，对羟基苯甲酸酯，三氯丁醇，苯酚，山梨酸，等等。如果包含防腐剂，则优选苯甲醇，苯酚和/或间甲酚；然而，防腐剂决非限于这些实例。此外，可能期望包含等渗剂如糖，氯化钠，氨基酸等等。

优选组合物或药物包含重组FSH和重组hCG，以及聚山梨醇酯20，L-甲硫氨酸，苯酚，和盐酸精氨酸中的一种或多种。

可注射的制剂可以例如，利用通过留菌过滤器进行过滤，或通过与无菌固体组合物形式的消毒剂混合而被灭菌，所述无菌固体组合物能够在使用前才被溶解或分散在无菌水或其他可注射的无菌溶剂中。可注射的制剂可以在任何合适的容器，例如小瓶，预填充注射器，注射药筒等等中提供。

组合物或药物可以配制为用于单次使用或用于多次使用(多剂量)。如果组合物或药物配制为用于多次使用，则优选包含一种或多种防腐剂。如果包含防腐剂，则优选苯甲醇，苯酚或间甲酚；然而，防腐剂决非限于这些实例。单次使用或多次使用配制的组合物或药物可进一步包含氨基酸或氨基酸的组合。优选氨基酸为精氨酸，例如以精氨酸或更优选的盐酸精氨酸的形式添加。

组合物或药物可以包含在容器如小瓶，预填充的药筒(例如用于单次施用或多次使用)中，或注射装置如“笔”中用于例如多剂量的施用。

组合物或药物组合物可以为制剂(例如可注射的制剂)，其包含FSH和hCG。组合物或药物可以在任何适当的包装中提供。例如，组合物或药物能够包含含有FSH和hCG两者的若干容器(例如，预填充的注射器或小瓶)。注射器或小瓶可以用泡罩包装或其他手段包装以保持无菌。任何组合物或药物能够任选地包含对于使用FSH和hCG制剂的说明。

药物组合物的pH和各种成分的精确浓度按照本领域的常规实践进行调整。见GOODMAN和GILMAN的THE PHARMACOLOGICAL BASIS FOR THERAPEUTICES，第7版。在优选的实施方案中，本发明的组合物或药物作为用于胃肠外施用的组合物进行提供。用于制备胃肠外制剂的一般方法是本领域已知的，并描述在REMINGTON；THE SCIENCE AND PRACTICE OFPHARMACY，同上，第780-820页中。胃肠外组合物可以在液体制剂中或作为固体提供，所述固体将会在施用前才与无菌可注射的溶剂混合。在特别优选的实施方案中，胃肠外组合物以剂量单位形式提供，以便于施用和用量的均匀性。

根据本发明的进一步的方面，提供在具有血清AMH水平＜15pmol/L的(例如女性)患者中不育症的治疗方法，包括对患者施用包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的(例如单个的)组合物的步骤，其中，重组FSH以或相当于每天11～13μg的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1，例如3∶1或1.5∶1。所述比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为例如，12∶1，6∶1，3∶1，2∶1，1.5∶1，1∶1等。重组FSH可以以每天11～13μg的剂量施用，且重组hCG可以以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1，例如3∶1或1.5∶1。所述比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为例如，12∶1，6∶1，3∶1，2∶1，1.5∶1，1∶1等。优选重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为3∶1或1.5∶1。优选地，重组FSH和重组hCG如下施用：12μg重组FSH与4μg重组hCG的每天剂量；或12μg重组FSH与8μg重组hCG的每天剂量。不育症的治疗可包括测定患者的血清AMH水平的步骤；以及对具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者施用所述剂量的重组FSH和重组hCG的步骤。

根据本发明的进一步的方面，提供在具有血清AMH水平≥15pmol/L的(例如女性)患者中不育症的治疗方法，包括对患者施用包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的(例如单个的)组合物的步骤，其中，组合物以或相当于每kg患者的体重每天每天0.09～0.19μg重组FSH的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1，例如3∶1或1.5∶1。所述比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为例如，12∶1，6∶1，3∶1，2∶1，1.5∶1，1∶1等。组合物可以以每kg患者的体重每天0.09～0.19μg重组FSH的剂量施用，且重组hCG可以以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1，例如3∶1或1.5∶1。所述比(以μg计的rFSH的日剂量∶以μg计的rhCG的日剂量)可以为例如，12∶1，6∶1，3∶1，2∶1，1.5∶1，1∶1等。重组FSH的每天剂量为优选从6μg的最小剂量至12μg的最大剂量。优选地，重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比为(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为3∶1或1.5∶1。不育症的治疗可包括测定患者的血清AMH水平的步骤；以及对具有限定的血清AMH水平的患者施用所述剂量的重组FSH和重组hCG的步骤。

根据本发明的进一步的方面，提供重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)在制备用于治疗在具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者中的不育症的(单个的)药物中的用途，其中，重组FSH以或相当于每天11～13μg的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1，例如3∶1或1.5∶1。所述比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为例如，12∶1，6∶1，3∶1，2∶1，1.5∶1，1∶1等。重组FSH可以以每天11～13μg的剂量施用，且重组hCG可以以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1，例如3∶1或1.5∶1。所述比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为例如，12∶1，6∶1，3∶1，2∶1，1.5∶1，1∶1等。重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)优选为3∶1或1.5∶1。优选重组FSH和重组hCG以如下剂量施用：12μg重组FSH与4μg重组hCG的每天剂量；或12μg重组FSH与8μg重组hCG的每天剂量。不育症的治疗可包括测定患者的血清AMH水平的步骤；以及对具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者施用所述剂量的重组FSH和重组hCG的步骤。

根据本发明的进一步的方面，提供重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)在制备用于治疗在具有血清AMH水平≥15pmol/L的患者中的不育症的(卑个的)药物中的用途，其中，组合物以或相当于每kg患者的体重每天0.09～0.19μg重组FSH的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1，例如3∶1或1.5∶1。所述比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为例如，12∶1，6∶1，3∶1，2∶1，1.5∶1，1∶1等。组合物可以以每kg患者的体重每天0.09～0.19μg重组FSH的剂量施用，且重组hCG可以以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1，例如3∶1或1.5∶1。所述比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为例如，12∶1，6∶1，3∶1，2∶1，1.5∶1，1∶1等。重组FSH的每天剂量可以为从6μg的最小剂量至12μg的最大剂量。优选地重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为3∶1或1.5∶1。不育症的治疗可包括测定患者的血清AMH水平的步骤；以及对具有限定的血清AMH水平的患者施用所述剂量的重组FSH和重组hCG的步骤。

本发明的组合物可以例如，以更高的剂量使用于治疗已经历之前的不育症的治疗的过程的患者，或由于其他原因需要更高剂量的FSH的患者。

因此，根据本发明的进一步的方面，提供包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于在已经历之前的不育症的治疗的过程(例如，之前的通过受控的卵巢刺激的不孕症的治疗的过程)(在所述过程中(从患者)取回了5～7个卵母细胞)的患者中不育症的治疗，其中，重组FSH以或相当于每天14～16μg的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。重组FSH可以以每天14～16μg的剂量施用，且重组hCG可以以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为3∶1或1.5∶1。重组FSH可以以每天15μg的剂量施用，且重组hCG以每天5μg或每天7.5μg的剂量施用。

根据本发明的进一步的方面，提供包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于患者中不育症的治疗，所述患者已经历之前的不育症的治疗的过程(例如，之前的通过受控的卵巢刺激的不孕症的治疗的过程)(在所述过程中(从患者)取回了0～4个卵母细胞)，或之前的由于不足的卵巢应答而被取消了的不育症的治疗的过程，其中，重组FSH以或相当于每天18～24μg的剂量施用；且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。重组FSH可以以每天18～24μg的剂量施用，且重组hCG可以以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为3∶1或1.5∶1。重组FSH可以以每天20μg的剂量施用，且重组hCG以每天6.67μg或每天13.33μg的剂量施用。

根据本发明的进一步的方面，提供包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于在患者中的不育症的治疗，其中，重组FSH以或相当于每天14～16μg的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

根据本发明的进一步的方面，提供包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于不育症的治疗，其中，重组FSH以或相当于每天18～24μg的剂量施用；且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

在本发明的这些方面中，不育症的治疗可包括测定患者的血清AMH水平的步骤；以及对具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者施用所述剂量的重组FSH和重组hCG的步骤。重组FSH可包括α2，6-唾液酸化和α2，3-唾液酸化，任选地其中总唾液酸化的1％～50％为α2，6-唾液酸化，总唾液酸化的50％～99％为α2，3-唾液酸化。重组hCG可包括α2，6-唾液酸化和α2，3-唾液酸化，任选地其中hCG包括单(1S)，二(2S)，三(3S)和四(4S)唾液酸化结构。患者可以年龄大于30岁和/或之前已有至少一个周期的失败的不育症治疗。不育症的治疗可促进良好质量的囊胚(例如，种类3BB或更高的囊胚，(即3BB，3BA，3AC，3AB，3AA，4CC，4CB，4CA，4BC，4BB，4BA，4AC，4AB，4AA，5CC，5CB，5CA，5BC，5BB，5BA，5AC，5AB，5AA，6CC，6CB，6CA，6BC，6BB，6BA，6AC，6AB，6AA)例如在卵母细胞取回后第3天和/或第5天增加种类3BB或更高的囊胚的数量)或改善胚胎植入。

本发明的这些方面包括相应的治疗方法，和FSH和hCG在制备用于相应的治疗的药物中的用途。

本发明的组合物通常包含包含FSH和hCG两者的单个的组合物。

然而，在本发明的其他方面提供包含分开的FSH和hCG组合物的产品，其可以用于分开或一起施用。

根据本发明的进一步的方面，提供产品，其应用于在具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者中的不育症的治疗，所述产品包括包含重组促卵泡激素(FSH)的组合物，和包含重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的(例如，分开的)组合物，其中，重组FSH以或相当于每天11～13μg的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。重组FSH可以以每天11～13μg的剂量施用，且重组hCG可以以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为3∶1或1.5∶1。重组FSH和重组hCG可以以每天剂量为12μg重组FSH与4μg重组hCG；或12μg重组FSH与8μg重组hCG施用。不育症的治疗可包括测定患者的血清AMH水平的步骤；以及对具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者施用所述剂量的重组FSH和重组hCG的步骤。

根据本发明的进一步的方面，提供了产品，其应用于在具有血清AMH水平≥15pmol/L的患者中的不育症的治疗，所述产品包括包含重组促卵泡激素(FSH)的组合物，和包含重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的(例如，分开的)组合物，其中，重组FSH以或相当于每kg患者的体重每天0.09～0.19μg重组FSH的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。rFSH可以以每kg患者的体重每天0.09～0.19μg重组FSH的剂量施用，且重组hCG可以以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。重组FSH的每天剂量可以为从6μg的最小剂量至12μg的最大剂量。重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比为(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为3∶1或1.5∶1。该产品可以用于(i)治疗具有15～24.9pmol/L的血清AMH水平的患者，其中，重组FSH以每kg患者的体重每天0.14～0.19μg的剂量施用；或(ii)用于治疗具有25～34.9pmol/L的血清AMH水平的患者，其中，重组FSH以每kg患者的体重每天0.11～0.14μg的剂量施用；或(iii)用于根据治疗具有血清AMH水平≥35pmol/L的患者的应用中，其中，重组FSH以每kg患者的体重每天0.10～0.11μg重组FSH的剂量施用。不育症的治疗可包括测定患者的血清AMH水平的步骤；以及对具有限定的血清AMH水平的患者施用所述剂量的重组FSH和重组hCG的步骤。

根据本发明的进一步的方面，提供了产品，其应用于患者中不育症的治疗，所述患者已经历之前的不育症的治疗的过程(例如，之前的通过受控的卵巢刺激的不孕症的治疗的过程)(在所述过程中(从患者)取回了5～7个卵母细胞)，该产品包括包含重组促卵泡激素(FSH)的组合物，和(例如，分开的)包括重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其中，重组FSH以或相当于每天14～16μg的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。重组FSH可以以每天14～16μg的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为3∶1或1.5∶1。重组FSH可以以每天15μg的剂量施用，且重组hCG可以以每天5μg或每天7.5μg的剂量施用。不育症的治疗可包括测定患者的血清AMH水平的步骤；以及对具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者施用所述剂量的重组FSH和重组hCG的步骤。

根据本发明的进一步的方面，提供了产品，其应用于患者中不育症的治疗，所述患者已经历之前的不育症的治疗的过程(例如，之前的通过受控的卵巢刺激的不孕症的治疗的过程)(在所述过程中(从患者)取回了0～4个卵母细胞)，或之前的由于不足的卵巢应答而被取消了的不育症的治疗的过程，该产品包括包含重组促卵泡激素(FSH)的组合物，和(例如，分开的)包括重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其中，重组FSH以或相当于每天18～24μg的剂量施用；且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。重组FSH可以以每天18～24μg的剂量施用，且重组hCG可以以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)可以为3∶1或1.5∶1。重组FSH可以以每天20μg的剂量施用，且重组hCG可以以每天6.67μg或每天13.33μg的剂量施用。不育症的治疗可包括测定患者的血清AMH水平的步骤；以及对具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者施用所述剂量的重组FSH和重组hCG的步骤。

根据本发明的进一步的方面，提供了产品，其应用于在患者中的不育症的治疗，该产品包括包含重组促卵泡激素(FSH)的组合物，和(例如，分开的)包括重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其中，重组FSH以或相当于每天14～16μg的剂量施用，且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

根据本发明的进一步的方面，提供了产品，其应用于在患者中的不育症的治疗，该产品包括包含重组促卵泡激素(FSH)的组合物，和(例如，分开的)包括重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其中，重组FSH以或相当于每天18～24μg的剂量施用；且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

重组FSH可包括α2，6-唾液酸化和α2，3-唾液酸化，任选地其中总唾液酸化的1％～50％为α2，6-唾液酸化，总唾液酸化的50％～99％为α2，3-唾液酸化。重组hCG可包括α2，6-唾液酸化和α2，3-唾液酸化，任选地其中hCG包括单(1S)，二(2S)，三(3S)和四(4S)唾液酸化结构。患者可以年龄大于30岁和/或之前已有至少一个周期的失败的不育症治疗。不育症的治疗可促进良好质量的囊胚(例如，种类3BB或更高的囊胚，(即3BB，3BA，3AC，3AB，3AA，4CC，4CB，4CA，4BC，4BB，4BA，4AC，4AB，4AA，5CC，5CB，5CA，5BC，5BB，5BA，5AC，5AB，5AA，6CC，6CB，6CA，6BC，6BB，6BA，6AC，6AB，6AA)例如在卵母细胞取回后第3天和/或第5天增加种类3BB或更高的囊胚的数量)或改善胚胎植入。

定义

除非另有定义，本文使用的技术和科学术语具有本发明所属的辅助生殖技术领域的普通技术人员通常理解的含义。本文参考了对本领域普通技术人员已知的各种方法。本领域普通技术人员已知的任何合适的材料和/或方法均可用于实施本发明。然而，对具体的材料和方法进行了描述。除非另有说明，否则在以下描述和实施例中用作参考的材料、试剂等等可从商业来源获得。

应当理解，本文定义的任何定义和术语在本发明的任何方面和实施方案中都意味着具有相同的含义和目的，除非明确地另有说明并非如此。

如本文所用，单数形式″一个″、″一种″和″所述″指定单数和复数两者，除非明确说明仅指定单数。

如本文所用，术语″约″是指数字或范围不限于所列的精确数字或范围，而是涵盖围绕所记载的数字或范围的如本领域普通技术人员将根据使用该数字或范围的上下文理解的范围。除非从本领域的上下文或惯例中另有明显说明，否则“约”意指具体术语的多至加或减10％。

本文中的术语“患者”和“受试者”可互换使用。

重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量以重量计的比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为1.5∶1，与重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量以重量计的比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)3∶2相同。因此，用于根据本发明使用的组合物，其中，重组FSH和重组hCG以12μg重组FSH与8μg重组hCG的每天剂量施用，在此可称为具有重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量以重量计的比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为1.5∶1或3∶2。

rFSH和rhCG的每日剂量以微克为单位指定，微克可缩写为μg或mcg。

本文中的术语“不育症的治疗”包括通过受控的卵巢刺激(COS)的不育症的治疗或包括受控的卵巢刺激(COS)的步骤或阶段的方法，例如体外受精(IVF)，或胞浆内精子注射(ICSI)。术语“不育症的治疗”包括在具有输卵管或不明原因的不育症的受试者中的不育症的治疗，所述不育症的治疗包括在具有子宫内膜异位，例如阶段I或阶段II的子宫内膜异位受试者中，和/或在有具有男性因素的不育症的伴侣的受试者中的不育症的治疗。所述组合物可以用于(应用在)在具有子宫内膜异位的受试者中的不育症的治疗(和/或用于受控的卵巢刺激)，所述具有子宫内膜异位的受试者例如为具有阶段I或阶段II的子宫内膜异位的受试者，所述阶段由美国生殖医学学会(ASRM)对于各阶段的子宫内膜异位的分类系统所定义(阶段IV最严重；阶段I最不严重)[American Society for ReproductiveMedicine.Revised American Society for Reproductive Medicine classification ofendometriosis：1996.Fertil Steril 1997；67，817821.]。

本文中的术语“GnRH激动剂”是指促性腺激素-释放激素激动剂。GnRH激动剂为一类作为促性腺激素-释放激素受体(GnRH受体)的激动剂的药物，为促性腺激素-释放激素的生物学靶点。

本文中的术语“GnRH拮抗剂”是指促性腺激素-释放激素拮抗剂。GnRH拮抗剂为一类对促性腺激素-释放激素受体(GnRH受体)进行拮抗，并因此拮抗促性腺激素-释放激素(GnRH)的作用的药物。

术语“卵泡”在此是指卵巢卵泡，其为包含未成熟卵子或卵母细胞的充满液体的囊。

囊胚在人类(或其它哺乳动物)的早期发育中形成。在人类中，囊胚形成始于受精后约5天。囊胚在(IVF)中的应用通常包括：从妇女取回(收获)由受控的卵巢刺激周期产生的若干卵母细胞；使一个或多个卵母细胞受精(授精)，和培养受精卵(卵母细胞)五天以形成囊胚(即，允许受精的卵母细胞来发育到囊胚阶段)；和将囊胚植入子宫。

根据本文所描述的所有方面，优选本文描述的不育症的治疗为或包括COS的步骤。不育症的原因可以是妇女的伴侣罹患男性不育症，尽管根据本发明将会理解为是女性通过COS进行治疗。

如本文描述的不育症的治疗而言，其可以用于并可以对多个卵泡的发育和在新鲜和/或冷藏保存的胚胎植入在经历辅助生殖技术(ART)的排卵期妇女中后的妊娠有效。

如本文描述的不育症的治疗可以用于并可以对促进良好质量的囊胚(例如，种类3BB或更高的囊胚，例如，不育症的治疗，以增加在卵母细胞取回后第5天的种类3BB或更高的囊胚的数量)和/或改善胚胎植入有效。本文中，“良好质量的囊胚”定义为种类3BB或更高(即3BB，3BA，3AC，3AB，3AA，4CC，4CB，4CA，4BC，4BB，4BA，4AC，4AB，4AA，5CC，5CB，5CA，5BC，5BB，5BA，5AC，5AB，5AA，6CC，6CB，6CA，6BC，6BB，6BA，6AC，6AB，6AA)。所述不育症的治疗可以是为了增加在卵母细胞取回后第5天的种类3BB或更高的囊胚的数量(例如，与利用

或GONAL-

的治疗相比)的不育症的治疗。不育症的治疗可以是为了增加受精的(2PN)卵母细胞的数量(例如，与利用

或GONAL-

的治疗相比)的不育症的治疗。

如本文所用，“治疗的第一天”，也称为“刺激的第一天”，指对患者施用(例如，重组)FSH的剂量的第一天。治疗(刺激)的第一天可发生在患者的月经周期的第1，2或3天，例如第2天或第3天。换句话说，治疗的第一天(刺激)可以为在患者开始月经出血后一，两或三天，例如两或三天，这与该术语在临床实践中的利用GnRH拮抗剂或GnRH激动剂的方案的用法一致。术语“在治疗期间”是指在对患者施用FSH的一天或几天中。

实施例

实施例1：一项为了调查FE 999302的功效和安全性的随机的，双盲，安慰剂-对照的，平行组，剂量范围的试验，FE 999302作为在长期GnRH激动剂方案中经历受控的卵巢刺激的妇女中对促滤泡素δ

的附加治疗

FE 999302为重组人绒毛膜促性腺激素(rhCG)，其由辉凌制药开发并意在用于不育症的治疗，按照与重组人促卵泡激素(rFSH)组合每日施用而给予。FE 999302在人来源的细胞系PER.

中生产，所述细胞系区别于

(一种从中国仓鼠卵巢(CHO)细胞产生的重组hCG)。施用的FE 999302的剂量是以质量指定的，因为是意在用于最终产品。FE 999302通过在国际专利申请No.PCT/GB2010/001854(作为WO2011/042688A公开)中描述的方法生产。I期试验显示，4-256μg FE 999302的单次的皮下施用，和每天8μg和每天16μgFE 999302的重复施用，是安全的且良好耐受的，没有引起任何安全问题。在下调的男性中单次施用rhCG后，针对FE999302的平均AUC比是针对CHO细胞中表达的rhCG的1.5倍大。两种制剂的平均Cmax相似。和在AUC中的差异一致，针对FE 999302的表观清除(即，CL/F比)分别更低(CL/F 0.5vs.0.8L/h)，这被解释为末端半衰期更长(47vs.32小时)。表观分布容积(Vz/F)是类似的。睾丸素的浓度(反映睾丸素的产生，作为对hCG暴露的应答)反映了药代动力学特征略有延迟，导致利用FE 999302为高59％的AUC。剂量分别为125和128μg时，FE999302在男性和妇女中的药代动力学参数是类似的。

材料和方法

这是一项为了调查FE 999302的功效和安全性的2期，多中心的，双盲，随机化的，平行组，剂量范围的试验，FE 999302在长期GnRH激动剂方案后经历卵巢刺激的第一或第二周期的年龄30～42岁的患者中，作为对促滤泡素δ

的附加治疗。该试验被设计为旨在证明FE999302对囊胚质量和与治疗的整体成功结果相关的其他临床相关指标的附加影响。囊胚质量被认为是用于设计3期试验的最佳指标，在所述3期试验中，期望的效果为妊娠和/或累积的妊娠率的增加。

II期剂量范围试验的目的是检验当FE 999302作为用于在ART前的COS的对促滤泡素δ的附加治疗的施用的功效和安全性。基于之前的用hCG辅助FSH用于COS的受控的试验，预计FE999302治疗可改善良好质量的囊胚的总数以及新鲜胚胎植入后的落实。增加良好质量的囊胚的数量和提高落实将增加在新鲜胚胎植入后的治疗周期中妊娠的变化。更高数量的良好质量的囊胚也导致更多的具有冰冻的胚胎植入的潜力的冷藏保存囊胚，从而增加任何给予的治疗周期的累积的妊娠率。

由于FE 999302的治疗窗口相对不确定，此2期剂量范围试验被设计为调查当与促滤泡素δ的组合施用用于在ART前的COS时在广泛的剂量范围内的FE 999302的功效和安全性。在此试验中，由于所有合格的受试者将基于在筛选时或在筛选前长达3个月的血清AMH水平和在随机化时体重而接受个性化剂量的促滤泡素δ，因此COS将不受到影响。

计划随机抽取600名受试者，其中约500名受试者将会被随机化至5种剂量的FE999302(1，2，4，8，或12μg)之一，大约100名受试者被随机化至安慰剂。估计应筛选出多达660名受试者，以实现有600名受试者对于随机化而言合格。

纳入标准

1.在筛选评价前签署知情同意文件。

2.由研究者判断为处于良好的身体和精神状况。

3.筛选时抗苗勒氏激素(AMH)水平为5.0-35.0pmol/L(在中心实验室通过

AMH Plus免疫测定[Roche Diagnostics]测量)。

4.年龄在30和42岁之间的绝经前妇女。受试者在签署知情同意书时必须为最少30岁(包括30岁生日)且不大于42岁(截至43岁生日前那天)。

5.被诊断为输卵管不育症，不明原因的不育症，子宫内膜异位阶段I/II，或具有男性因素的不育症的伴侣的不育妇女，其对使用新鲜或冰冻的来自男性伴侣或捐精者的射出精子的体外授精(IVF)和/或胞浆内精子注射(ICSI)而言合格。

6.＜35岁的受试者在筛选前不育症至少1年，或≥35岁的受试者不育症至少6个月(不适用输卵管或严重男性因素不育症的情况)。

7.试验周期将会是受试者的第一或第二个受控的卵巢刺激周期

而且受试者必须适合基于体重和AMH的用促滤泡素δ的个性化治疗，即，用促滤泡素δ的之前的周期是不被允许的。

8.24-35天的规律月经周期(包含两者)，推测为排卵期。

9.在筛选前6个月内的子宫输卵管造影，宫腔镜检查，生理盐水输注超声检查，或阴道超声检查显示子宫与预期正常功能一致(例如，没有临床干扰性子宫肌瘤的证据，临床干扰性子宫肌瘤定义为黏膜下或壁内的纤维瘤，直径大于3cm，没有息肉，且没有先天性结构异常，其与妊娠机会降低有关联)。

10.在筛选前1年内，阴道超声检查证实两个卵巢的存在及其足够的可视性，没有显著异常的证据(例如，增大的卵巢，其将导致促性腺激素的禁忌使用)，和正常的附件(例如，无输卵管积水)。两个卵巢必须易于进行卵母细胞取回。

11.卵泡早期(周期第2-5天)FSH的血清水平在1和15IU/L之间(在中心实验室测量)。

12.在随机化前的1年内，乙型肝炎表面抗原(HBsAg)，丙型肝炎病毒(HCV)，和人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体血清测试阴性。

13.在筛选时体重指数(BMI)在17.5和32.0kg/m²之间(包含两者)。

14.在首次GnRH激动剂施用后的28天内证实下调。

15.无论引起不育症的原因为何，均愿意接受ICSI。

16.如果≤37岁且愿意接受单囊胚植入。如果≥38岁且愿意接受单个良好质量的囊胚的植入，或如果没有可用的良好质量的囊胚则植入最多2个囊胚。

17.愿意接受在冷藏保存周期中利用来自试验周期的囊胚，每次植入植入最多2个囊胚，并在随机化后1年内执行。

排除标准

1.已知为与停止排卵相关的多囊卵巢综合征(PCOS)，或已知的子宫内膜异位阶段III-IV(由修订后的美国生殖医学学会[ASRM]分类，1996定义)。

2.在之前的受控的卵巢刺激周期中对于IVF/ICSI为卵巢不良应答，定义为直径≥12mm的＜4个的卵泡的发育。

3.在之前的受控的卵巢刺激周期中对于IVF/ICSI为过度的卵巢应答，定义为直径≥12mm的≥25个的卵泡的发育。

4.在刺激第1天的随机化前的下调后(在随机化前囊肿的穿刺是允许的)，在阴道超声检查上观察到一个或更多个卵泡≥10mm(包括囊肿)。

5.已知有复发性流产史(定义为在超声波确认妊娠后[不包括宫外孕]且在妊娠24周前的连续三次流产)。

6.如果适用的话，已知受试者或其伴侣/精子捐献者为异常核型，取决于本试验中用于授精的精子来源。如果将使用伴侣精子，且精子生成严重受损(浓度＜100万/毫升)

正常核型，包括没有Y染色体微缺失必须记录。

7.任何已知的临床上显著的全身性疾病(例如胰岛素依赖型糖尿病)。

8.已知为遗传性或获得性血栓形成倾向疾病。

9.活动性动脉或静脉血栓性栓塞症或严重的血栓性静脉炎，或有这些事件的病史。

10.已知为卟啉症。

11.任何已知的内分泌或新陈代谢异常(垂体，肾上腺、胰腺，肝或肾)但控制性甲状腺功能疾病除外。

12.已知存在抗hCG抗体(基于在受试者的医疗记录中可获得的信息；即不基于在试验中进行的抗FE 999302抗体分析)。

13.已知为卵巢、乳房、子宫、肾上腺、垂体或下丘脑的肿瘤，所述肿瘤将禁忌使用促性腺激素。

14.已知的肾脏或肝脏功能损害。

15.筛选时临床化学和血液学的任何异常发现或随机化时生命体征的任何异常发现，其被研究者判断为与临床相关和/或需要干预。

16.目前正在母乳喂养。

17.未确诊的阴道出血。

18.已知在筛选前的3年内观察到异常宫颈细胞学的临床意义(除非所述临床意义已被解决)。

19.筛选时妇科检查发现排除促性腺激素刺激或与妊娠的机会减少有关联，例如先天性子宫畸形或保留子宫内避孕器。

20.妊娠(阴性妊娠测试必须在筛选时和下调开始前记录)或妊娠的禁忌症。

21.已知目前有活动性盆腔炎症。

22.在筛选前的最后一个月经周期中使用生育改良剂，包括脱氢表雄酮(DHEA)或使用口服避孕药、孕激素或雌激素制剂进行周期规划。

23.筛选前最后一个月经周期期间使用激素制剂(甲状腺药物除外)。

24.已知的化疗史(受孕的情况除外)或放疗史。

25.目前或过去(筛选前1年内)酗酒或吸毒，和/或目前(上个月)每周酒精摄入量超过14单位。

26.目前或过去(筛选前90天内)有每天吸烟10支以上的吸烟习惯。

27.对试验中使用的医药产品的任何活性成分或赋形剂过敏。

28.曾经参加过该试验(即，不允许重新筛选)。

29.筛选前最后90天内使用任何非注册的试验药物。

主要终点：

在卵母细胞取回后第5天的良好质量囊胚(等级3BB或更高)的数量

次要终点

在卵母细胞取回后第5天，受试者具有至少一个良好质量囊胚(等级3BB或更高)

·在卵母细胞取回后第5天，受试者具有至少两个良好质量囊胚(等级3BB或更高)

·在卵母细胞取回后第3天胚胎的数量和质量

·在卵母细胞取回后第5天囊胚的数量和质量

从刺激第1天到刺激第6天、刺激第8天、刺激结束(孕酮、17-OH-孕酮、雄烯二酮、睾酮、雌二醇、抑制素A、抑制素B、FSH和LH)和卵母细胞取回(孕酮、17-OH-孕酮、雄烯二酮、睾酮、雌二醇)的血清激素水平中的变化

·刺激第6天和刺激结束时卵泡的数量和大小

·阳性βhCG(在植入后13-15天血清βhCG试验阳性)

·临床妊娠(在植入后5-6周，至少一个妊娠囊)

·有生命力的妊娠(在植入后5-6周，至少一个有胎心搏动的宫内妊娠囊)

·持续性妊娠(在植入后10-11周，至少一个宫内有活力的胎儿)

·取回的卵母细胞的数量

·细胞分裂中期II卵母细胞的数量

·受精的(2PN)卵母细胞的数量

·促性腺激素总剂量和刺激的天数

·周期取消的发生率

·刺激第1、6、8天和刺激结束时FE 999302的血清浓度

·卵巢过度刺激综合征(早期或晚期，任何等级)的发生率

·不良事件的发生率和强度

·临床化学和血液学参数的循环水平变化

·受试者在刺激期中评估的FE 999302施用后注射部位应答的发生率和强度(红肿、疼痛、瘙痒、肿胀和瘀伤)

·治疗诱导的抗FE 999302抗体的总体发生率，以及中和能力

·发生率多胎妊娠、生化妊娠、自然流产、宫外孕(有和没有内科/外科干预)和消失的双胞胎的发生率

合格的受试者将在他们的月经周期的黄体中期(即周期第21-24天)开始利用GnRH激动剂(醋酸曲普瑞林，

)皮下0.1mg/天进行下调。如果证实了垂体下调(血清雌二醇＜50pg/ml或180pmol/l；当地实验室)，卵巢刺激将在14天(±1天)后开始，并用GnRH激动剂治疗持续到刺激期结束。

在刺激第1天，经下调的受试者将被随机化以接受固定的日剂量，所述日剂量为1，2，4，8，或12μg的FE 999302或安慰剂。所有的随机化的受试者在整个刺激期还将接受个性化的固定日剂量的促滤泡素δ(见表C)，所述日剂量以在筛选时他们的AMH水平(如通过

AMH Plus免疫测定[Roche Diagnostics]而测量)和他们在刺激第1天的体重为基础测定。

在刺激过程中，在刺激第1和6天和此后至少每隔一天，受试者将会通过阴道超声检查被监测。当领先卵泡达到≥15mm时，阴道超声检查必须每日进行。一观察到≥3个卵泡具有≥17mm的直径，就将进行最后的卵泡的成熟的触发。如果有＜25个卵泡具有≥12mm的直径，则将会施用单剂量的hCG

250μg，但如果有≥25个卵泡具有≥12mm的直径，则该周期将被取消。

卵母细胞取回将发生在触发最后的卵泡的成熟后36h(±2h)。所有受精的卵母细胞将被孵育在

(Vitrolife)中进行延时监测，并且将记录胚胎发育，记录至植入日。在卵母细胞取回后第3天的胚胎质量的评估将局部进行。在卵母细胞取回后第5天的囊胚质量的评估将在局部和中央进行，并包含三个参数的评估：如本领域熟知的囊胚扩张和孵化状态(等级1-6)，囊胚内细胞团分级(等级A-D)和滋养外胚层分级(等级A-D)。将通过使用如本领域熟知的Gardner&Schoolcraft系统给予囊胚数值分数，并添加了D-类别用于内细胞团和滋养外胚层。主要终点基于中央评估(central assessment)(通过两个独立的评估者完成)。

对于所有的受试者，囊胚植入在卵母细胞取回后第5天进行。对于≤37岁的受试者，强制性进行单囊胚植入。在≥38岁的受试者中，植入政策取决于可获得囊胚的质量，即，如果他们具有至少一个良好质量的囊胚则植入单个囊胚，以及如果他们没有良好质量的囊胚则植入最多2个囊胚(如果可获得两个囊胚)。其余囊胚可以按照当地的指南和规定被冷藏保存，并由受试者在试验完成后使用。

FE 999302/安慰剂给药方案

受试者将被随机化以接受1，2，4，8，或12μg的FE 999302或安慰剂的日剂量，作为皮下注射剂(见实施例1)。在整个刺激期中，日剂量将保持不变。给药将继续进行，直至已经达到用于触发最后的卵泡的成熟的标准。受试者可以用FE 999302处理最长20天。

促滤泡素δ给药方案

被随机化的受试者将具有他们的个体化剂量，所述剂量基于他们在筛选的时AMH水平和他们在刺激第1天的体重而测定。对于具有低AMH(＜15pmol/L)的受试者不考虑体重，每日促滤泡素δ剂量为12μg。对于具有高AMH(≥15pmol/L)的受试者，每日促滤泡素δ剂量为在0.19～0.10μg/kg的范围的连续标度，即取决于实际的AMH和体重。

在整个刺激期中，促滤泡素δ日剂量将保持不变。最大允许的每日促滤泡素δ剂量为12μg。给药将继续进行，直至已经达到用于触发最后的卵泡的成熟的标准。受试者可以用促滤泡素δ治疗最长20天。不允许进行Coasting。

下表B中详细列出了完整的促滤泡素δ给药方案。

表B促滤泡素δ给药方案

促滤泡素δ以每日在腹部皮下注射的形式施用。为了最小化局部注射位点的反应，建议定期更换注射部位，但注射部位应该总是在受试者的肚脐右侧，以允许来在与FE999302或安慰剂相关的注射位点反应和与在与促滤泡素δ相关的那些之间进行区分。

从上文可以理解的是，某些患者(例如，具有低AMH的那些，具有高AMH和高体重的那些)将以12μg重组FSH与4μg重组hCG；或12μg重组FSH与8μg重组hCG的每天剂量施用FSH和hCG。换句话说，某些患者将被如下给药：其中，重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为3∶1或1.5∶1。预计此试验将说明这些剂量和比是高度有效的(例如，在增加种类BB或更大的卵母细胞的数量；植入等方面)，并代表了通向单组合物的途径，所述途径将为任何患者提供利用FSH和hCG的个性化治疗，无论他们的AMH水平和体重如何。

也预计，基于I期结果，在组合物(和治疗方案)中包含hCG将意味着所述组合物在(例如以更高的剂量)治疗那些在之前的治疗(例如之前的COS周期或多周期)中具有不足的卵巢应答的患者时，也可是安全和有效的。预计包含hCG将意味着这些患者可以通过15或20μg FSH(与hCG一起)的剂量被有效地治疗，所述剂量比现有的用于治疗这些患者的最大剂量(24μg FSH)小得多。

实施例2-

和hCG组合的组合物

为在PER.

细胞系中表达的重组FSH，所述PER.

细胞系通过在WO2013/020996和WO2009/127826A中公开的方法改造。

对

的销售授权持有人为辉凌制药(Ferring Pharmaceuticals)A/S of Kay Fiskers Plads 11，2300Copenhagen S，Denmark，并且其在英国可获自辉凌制药(Ferring Pharmaceuticals)of Drayton Hall，Church Road，West Drayton，UB7 7PS，UK。

中的活性物质为促滤泡素δ(FE999049)。

是高唾液酸化的，并包含了α2，3-和α2，6-唾液酸化，有约85％～90％的总唾液酸化为α2，3-唾液酸化且约10％～15％的总唾液酸化为α2，6-唾液酸化。

是用于注射的透明无色的溶液(注射液)。一毫升的溶液中包含在每一毫升的溶液中33.3微克的促滤泡素δ。其他成分为苯酚，聚山梨醇酯20，L-甲硫氨酸，十水合硫酸钠，十二水合磷酸二钠，浓磷酸，氢氧化钠和注射用水。

FE999302为在PER.

细胞系中表达的重组hCG，所述PER.

细胞系通过在WO201I/042688A和WO2016/170113A中公开的方法被改造。FE999302是高唾液酸化的，并包含α2，3-和α2，6-唾液酸化，以及单-，二-，三-和四-唾液酸化结构的混合。

实施例2A

FE 999302可以通过本领域熟知的方法以例如，3∶1或1.5∶1的FSH∶hCG比添加到

溶液中。一毫升的所述组合的溶液可包含100μg重组FSH和33.3μg FE999302，或一毫升的所述组合的溶液可包含100μg重组FSH和66.7μg FE 999302。

实施例2B

在再一个实施例中，FE 999302与重组FSH(例如，在PER.

细胞系中表达的重组FSH，所述PER.

细胞系通过在WO2013/020996和WO2009/127826A中公开的方法改造)组合的产品可进一步包含苯酚，聚山梨醇酯20，L-甲硫氨酸，盐酸精氨酸，盐酸，氢氧化钠和注射用水。

实施例组合物如下(添加氢氧化钠和盐酸至pH 6.8，每mL活性成分的量根据3∶1或1.5∶1的比在上面列出)：

5.0mg/ml苯酚

0.005mg/ml聚山梨醇酯20

0.15mg/ml L-甲硫氨酸

150mM L-盐酸精氨酸

Q.s盐酸

Q.s氢氧化钠

pH 6.8(在6.0-8.0范围内)

注射用水

一毫升的溶液可包含100μg重组FSH和33.3μg FE 999302(定量FSH∶hCG为3∶1)，或一毫升的组合的溶液可包含100μg重组FSH和66.7μgFE 999302(定量1.5∶1)。

实施例组合物适合于根据本发明的施用。

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Claims

1.包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于在具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者中的不育症的治疗，其中，所述重组FSH以或相当于每天11～13μg的剂量施用，且所述重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

2.用于根据权利要求1的应用的组合物，其中，所述重组FSH以每天11～13μg的剂量施用，且所述重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

3.用于根据权利要求1或权利要求2的应用的组合物，其中，所述重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为3∶1或1.5∶1。

4.用于根据上述权利要求中的任一项的应用的组合物，其中，所述重组FSH和重组hCG以如下的每天剂量进行施用：12μg重组FSH与4μg重组hCG；或12μg重组FSH与8μg重组hCG。

5.用于根据上述权利要求中的任一项的应用的组合物，其中，所述不育症的治疗包括测定所述患者的血清AMH水平的步骤；以及

对具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者施用所述剂量的重组FSH和重组hCG的步骤。

6.包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于在具有血清AMH水平≥15pmol/L的患者中的不育症的治疗，其中，所述组合物以或相当于每kg患者的体重每天0.09～0.19μg重组FSH的剂量施用，且所述重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

7.用于根据权利要求6的应用的组合物，其中，所述组合物以每kg患者的体重每天0.09～0.19μg重组FSH的剂量施用，且所述重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

8.用于根据权利要求6或权利要求7的应用的组合物，其中，所述重组FSH的每天剂量为从6μg的最小剂量至12μg的最大剂量。

9.用于根据权利要求6～8中任一项的应用的组合物，其中，所述重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比为(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)3∶1或1.5∶1。

10.用于根据权利要求6～9中任一项的应用的组合物，在(i)血清AMH水平为15～24.9pmol/L的患者的治疗中，其中，所述重组FSH以每kg患者的体重每天0.14～0.19μg的剂量施用；或(ii)用于治疗具有25～34.9pmol/L的血清AMH水平的患者，其中，所述重组FSH以每kg患者的体重每天0.11～0.14μg的剂量施用；或(iii)用于根据治疗具有血清AMH水平≥35pmol/L的患者的应用中，其中，所述重组FSH以每kg患者的体重每天0.10～0.11μg重组FSH的剂量施用。

11.用于根据权利要求6～10中任一项的应用的组合物，其中，不育症的治疗包括测定所述患者的血清AMH水平的步骤；以及对具有限定的血清AMH水平的患者施用所述剂量的重组FSH和重组hCG的步骤。

12.包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于在患者中的不育症的治疗，所述患者已经历之前的不育症的治疗的过程(例如，之前的通过受控的卵巢刺激的不孕症的治疗的过程)，在所述不育症的治疗的过程中(从患者)取回了5～7个卵母细胞，其中，所述重组FSH以或相当于每天14～16μg的剂量施用，且所述重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

13.用于根据权利要求12的应用的组合物，其中，所述重组FSH以每天14～16μg的剂量施用，且所述重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

14.用于根据权利要求12或权利要求13的应用的组合物，其中，所述重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为3∶1或1.5∶1。

15.用于根据权利要求12～14中任一项所述的组合物，其中，所述重组FSH以每天15μg的剂量施用，且所述重组hCG以每天5μg或每天7.5μg的剂量施用。

16.包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于在患者中的不育症的治疗，所述患者已经历之前的不育症的治疗的过程(例如，之前的通过受控的卵巢刺激的不孕症的治疗的过程)，在所述不育症的治疗的过程中(从患者)取回0～4个卵母细胞，或之前的由于不足的卵巢应答而被取消了的不育症的治疗的过程，其中，重组FSH以或相当于每天18～24μg的剂量施用；且重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

17.用于根据权利要求16的应用的组合物，其中，所述重组FSH以每天18～24μg的剂量施用，且所述重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

18.用于根据权利要求16或权利要求17的应用的组合物，其中，所述重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为3∶1或1.5∶1。

19.用于根据权利要求16～18中任一项的应用的组合物，其中，所述重组FSH以每天20μg的剂量施用，且所述重组hCG以每天6.67μg或每天13.33μg的剂量施用。

20.用于根据权利要求12～19中任一项的应用的组合物，其中，所述不育症的治疗包括测定所述患者的血清AMH水平的步骤；以及对具有血清AMH水平＜15pmol/L的患者施用所述剂量的重组FSH和重组hCG的步骤。

21.包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于在患者中的不育症的治疗，其中，所述重组FSH以或相当于每天14～16μg的剂量施用，且所述重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

22.包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的组合物，其应用于不育症的治疗，其中，所述重组FSH以或相当于每天18～24μg的剂量施用；且所述重组hCG以如下方式施用：使得重组FSH的每天剂量与重组hCG的每天剂量的重量比(以μg计的rFSH的日剂量：以μg计的rhCG的日剂量)为15∶1～1∶1，例如3∶1～1.5∶1。

23.用于根据上述权利要求中的任一项的应用的组合物，其中，所述重组FSH包括α2，6-唾液酸化和α2，3-唾液酸化，任选地其中总唾液酸化的1％～50％为α2，6-唾液酸化，总唾液酸化的50％～99％为α2，3-唾液酸化。

24.用于根据上述权利要求中的任一项的应用的组合物，其中，所述重组hCG包括α2，6-唾液酸化和α2，3-唾液酸化，任选地其中所述hCG包括单(1S)，二(2S)，三(3S)和四(4S)唾液酸化结构。

25.用于根据上述权利要求中的任一项的应用的组合物，其中，所述患者的年龄大于30岁和/或之前已有至少一个周期的失败的不育症治疗。

26.用于根据上述权利要求中的任一项的应用的组合物，其中，不育症的治疗是为了促进良好质量的囊胚(例如，种类3BB或更高的囊胚，(即3BB，3BA，3AC，3AB，3AA，4CC，4CB，4CA，4BC，4BB，4BA，4AC，4AB，4AA，5CC，5CB，5CA，5BC，5BB，5BA，5AC，5AB，5AA，6CC，6CB，6CA，6BC，6BB，6BA，6AC，6AB，6AA)例如不育症的治疗为了在卵母细胞取回后第3天和/或第5天增加种类3BB或更高的囊胚的数量)或改善胚胎植入。

27.包含重组促卵泡激素(FSH)和重组人绒毛膜促性腺激素(hCG)的(例如单个的)药物组合物，其中，所述重组FSH与所述重组hCG的重量比(以μg计的rFSH的量：以μg计的rhCG的量)为3∶1或1.5∶1。