CN112074270A - 前列腺癌的预防或治疗剂 - Google Patents

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Abstract

本发明的课题在于提供下述前列腺癌的预防或治疗剂：能够比较简便并且廉价地制造，并且以对难治性的去势抵抗性前列腺癌(尤其是，作为最难治性的前列腺癌的卡巴他赛耐性的去势抵抗性前列腺癌)也发挥抗癌效果的低分子化合物作为有效成分。将氯哌斯汀或其药学上可接受的盐作为前列腺癌(优选卡巴他赛耐性的去势抵抗性前列腺癌)的预防或治疗剂。

Description

前列腺癌的预防或治疗剂
技术领域
本发明涉及包含氯哌斯汀(Cloperastine)或其药学上可接受的盐(以下，有时将它们统称为“氯哌斯汀类”)的、用于预防和/或治疗前列腺癌的制剂。
背景技术
前列腺癌是在作为男性的生殖器之一的前列腺发病的癌症，在欧美、尤其在美国是男性最多发的癌症。认为前列腺癌与动物脂肪的摄取量多的饮食习惯、高龄相关。实际上，在日本，伴随着饮食习惯的欧美化、高龄化，近年来，前列腺癌的患病数也急速地增加，例如，在2013年的各部位癌患病数中，前列腺癌为第4位。前列腺癌在70岁以后时患病率会急剧增加，因此预想在以日本为代表的高龄化加剧的各发达国家中今后会进一步增加。因此，正在谋求开发出对前列腺癌有效的治疗方法。
作为前列腺癌的治疗方法，临床上已知有外科治疗、激素疗法、化学疗法、放射线治疗等。其中，第一选择为以前列腺摘除术为代表的外科治疗，但在被诊断为癌症晚期的情况下、因外科治疗后的复发等而手术困难的情况下，选择激素疗法等治疗方法、利用多西他赛等抗癌剂的化学疗法。
已知前列腺癌的扩散是受作为雄性激素的雄激素的刺激，雄激素受体(androgenreceptor；AR)对其发生、加剧发挥了大的作用。因此，作为前列腺癌的激素疗法(内分泌疗法)，通常采用抑制雄激素的作用的方法(雄激素阻断疗法[Androgen DeprivationTherapy；ADT])。ADT暂时是有效的，但通常在数年以内会发展为对ADT显示出抵抗性的激素难治性前列腺癌(Hormone Refractory Prostate Cancer；HRPC)、雄激素非依赖性前列腺癌(Androgen Independent Prostate Cancer；AIPC)。对如此发展的去势抵抗性前列腺癌(Castration Resistant Prostate Cancer；CRPC)(也称为“复发性晚期前列腺癌”)可以使用多西他赛、恩杂鲁胺，但出现了对这些药剂也显示耐药性的癌细胞，在临床上成为问题。作为应对该问题的手段之一，报道了与多西他赛等并用的治疗方法(专利文献1)。
作为可应用于前列腺癌的新型紫杉烷系抗癌剂，有卡巴他赛。对于卡巴他赛而言，确认了对具有包含多西他赛的前治疗史的去势抵抗性前列腺癌也发挥抗肿瘤效果，应当称为内科疗法的最后的堡垒。卡巴他赛在美国、欧洲被批准应用于激素治疗抵抗性前列腺癌，2014年7月4日在日本也被批准应用于前列腺癌。卡巴他赛的结构与紫杉醇、多西他赛类似，但与P糖蛋白(P-gp)的亲和性低，因此认为不易产生由P-gp活化导致的耐药性。然而，也报道了卡巴他赛耐性前列腺癌的病例，卡巴他赛耐性前列腺癌的治疗极为紧迫。
另一方面，以氯哌斯汀盐酸盐为有效成分的HUSTAZOL(Nipro ES Pharma co.,Ltd.制)作为止咳剂而市售。但是，目前为止尚不知晓氯哌斯汀具有前列腺癌的预防或治疗效果。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本专利第5605511号公报
发明内容
发明所要解决的课题
本发明的课题在于提供下述前列腺癌的预防或治疗剂：能够比较简便并且廉价地制造，并且以对难治性的去势抵抗性前列腺癌(尤其是，作为最难治性的前列腺癌的卡巴他赛耐性的去势抵抗性前列腺癌)也发挥抗癌效果的低分子化合物作为有效成分。
用于解决课题的手段
通过基于新型AR抑制剂的CRPC治疗，对获得了卡巴他赛耐性的CRPC患者，使用该治疗前(获得卡巴他赛耐性前)的CRPC组织的福尔马林固定石蜡包埋(Formalin fixedparaffin embedded；FFPE)试样和该治疗后(获得卡巴他赛耐性后)的CRPC组织的FFPE试样，制作各个试样的基因表达谱。接着，对可使获得卡巴他赛耐性后的CRPC的基因表达谱转变为获得卡巴他赛耐性前的CRPC的基因表达谱的化合物进行分析，结果，作为筛选的结果，得到70种化合物作为前列腺癌的候补药剂。然后，关于上述70种前列腺癌的候补药剂，研究针对转移性CRPC细胞株、卡巴他赛耐性CRPC细胞株的抗癌效果，结果，也有大量化合物未发现抗癌效果，但在反复试验后，发现氯哌斯汀对转移性CRPC、卡巴他赛耐性CRPC细胞株具有高的抗癌效果。另外也确认了，通过氯哌斯汀与现有的抗癌剂(卡巴他赛)并用，会进一步提高对卡巴他赛耐性前列腺癌的抗癌效果。本发明是基于上述见解而完成的。
即，本发明如下所示。
〔1〕前列腺癌的预防或治疗剂，其特征在于，包含氯哌斯汀或其药学上可接受的盐。
〔2〕如上述〔1〕所述的预防或治疗剂，其特征在于，为经口施予。
〔3〕如上述〔1〕或〔2〕所述的预防或治疗剂，其特征在于，前列腺癌为去势抵抗性前列腺癌或恩杂鲁胺耐性前列腺癌。
〔4〕如上述〔3〕所述的预防或治疗剂，其特征在于，去势抵抗性前列腺癌为卡巴他赛耐性。
〔5〕如上述〔1〕～〔4〕中任一项所述的预防或治疗剂，其特征在于，与抗癌剂并用。
〔6〕如上述〔5〕所述的预防或治疗剂，其特征在于，抗癌剂为卡巴他赛。
另外，作为本发明的其他实施方式，可以举出：预防或治疗前列腺癌的方法，其包括对需要预防或治疗前列腺癌的对象施予氯哌斯汀类的步骤；作为前列腺癌的预防或治疗剂使用的氯哌斯汀类；用于前列腺癌的预防或治疗中的用途的氯哌斯汀类；氯哌斯汀类用于制造前列腺癌的预防或治疗剂的用途。
发明效果
氯哌斯汀类对前列腺癌、特别是恩杂鲁胺耐性前列腺癌、难治性CRPC、尤其是作为最难治性前列腺癌的卡巴他赛耐性CRPC也通过下述作用而发挥优异的抗癌(肿瘤)效果，所述作用包括：前列腺癌细胞增殖抑制作用、前列腺癌细胞中的上皮间充质转化(EpithelialMesenchymal Transition；EMT)的抑制作用、前列腺癌细胞的浸润抑制作用、前列腺癌细胞的细胞凋亡诱导作用等。通过与现有的抗癌剂(优选卡巴他赛)并用，上述效果也能够进一步提高。另外，本发明的前列腺癌的预防或治疗剂将作为能够比较简便地制造的低分子化合物的氯哌斯汀类作为前列腺癌的预防或治疗的有效成分，因此在能够比较简便并且廉价地制造的方面也优异。
附图说明
[图1]为示出对将DU145细胞株及PC3细胞株在各种浓度(0μM、0.1μM、1μM、及10μM)的氯哌斯汀存在下培养时的活细胞水平进行分析而得到的结果的图。纵轴的“活细胞水平”作为以将氯哌斯汀非存在下培养时的活细胞数设为100时的相对值(平均值+标准偏差[SD])而示出。图中的“*”及“***”表示相对于氯哌斯汀非存在下(0μM)培养时的结果，各自在统计学上有显著性差异(p<0.05及p<0.001)。
[图2]为示出对将DU145细胞株(图2A)及PC3细胞株(图2B)在氯哌斯汀存在下(氯哌斯汀处理组)或非存在下(对照组)培养时的6种基因(CDH1基因、VIM基因、SNAI1基因、SNAI2基因、ZEB1基因、及ZEB2基因)的mRNA的表达水平进行分析而得到的结果的图。对于纵轴的“mRNA的表达水平”而言，关于各种基因作为以将对照组中的表达水平设为1时的相对值(平均值+标准偏差[SD])而示出。图中的“*”、“**”、及“***”表示在氯哌斯汀处理组及对照组间，各自在统计学上有显著性差异(p<0.05、p<0.01、及p<0.001)。
[图3]为示出对将DU145细胞株在氯哌斯汀存在下(氯哌斯汀处理组)或非存在下(对照组)培养时的细胞浸润性进行分析而得到的结果(平均值±标准偏差[SD])的图。
[图4]为示出对将LN-CaP细胞株及C4-2AT6细胞株在各种浓度(0μM、0.1μM、1μM、及10μM)的恩杂鲁胺存在下培养时的活细胞水平进行分析而得到的结果的图。纵轴的“活细胞水平”作为以将恩杂鲁胺非存在下培养时的活细胞数设为1时的相对值(平均值+标准偏差[SD])而示出。图中的“*”及“***”表示相对于恩杂鲁胺非存在下(0μM)培养时的结果，各自在统计学上有显著性差异(p<0.05及p<0.001)。
[图5]图5A为示出对将DU145细胞株及DU145CR细胞株在各种浓度(0nM、1nM、2nM、4nM、8nM、及16nM)的卡巴他赛存在下培养时的活细胞水平在体外进行分析而得到的结果的图。纵轴的“活细胞水平”作为以将卡巴他赛非存在下培养时的活细胞数设为1时的相对值(平均值+标准偏差[SD])而示出。图中的“*”及“***”表示在DU145细胞株及DU145CR细胞株间，各自在统计学上有显著性差异(p<0.05及p<0.001)。图5B为示出针对使用DU145细胞株而制作的2组皮下肿瘤模型小鼠(DU145小鼠组[DU145 Cont]、卡巴他赛施予DU145小鼠组[DU145 CBZ])、及使用DU145CR细胞株而制作的2组皮下肿瘤模型小鼠(DU145CR小鼠组[DU145CR Cont]、卡巴他赛施予DU145CR小鼠组[DU145CR CBZ])、对肿瘤体积的变化进行分析而得到的结果的图。纵轴的“肿瘤体积”表示将刚刚施予后(0天)的DU145小鼠组或DU145CR小鼠组的肿瘤体积设为1时的相对值(平均值±标准偏差[SD])。横轴的“天数”表示施予卡巴他赛后的天数。图中的“**”表示在卡巴他赛施予DU145CR小鼠组及卡巴他赛施予DU145小鼠组间，在统计学上有显著性差异(p<0.01)。
[图6]为示出对将C4-2AT6细胞株及DU145CR细胞株在各种浓度(0μM、0.1μM、1μM、及10μM)的氯哌斯汀存在下培养时的活细胞水平进行分析而得到的结果的图。纵轴的“活细胞水平”作为以将氯哌斯汀非存在下(0μM)培养时的活细胞数设为1时的相对值(平均值±标准偏差[SD])而示出。图中的“*”、“**”、及“***”表示相对于氯哌斯汀非存在下培养时的结果，各自在统计学上有显著性差异(p<0.05、p<0.01、及p<0.001)。
[图7]图7A为示出针对使用DU145细胞株而制作的3组皮下肿瘤模型小鼠(对照组、卡巴他赛施予组、及氯哌斯汀施予组)对肿瘤体积的变化进行分析而得到的结果的图。图7B为示出针对使用DU145CR细胞株而制作的3组皮下肿瘤模型小鼠(对照组、卡巴他赛施予组、及氯哌斯汀施予组)对肿瘤体积的变化进行分析而得到的结果的图。纵轴的“肿瘤体积”表示将刚刚施予后(0天)的对照组的肿瘤体积设为1时的相对值(平均值±标准偏差[SD])。横轴的“天数”表示卡巴他赛或氯哌斯汀的施予后的天数。图7B中的“n.s.”表示在施予后第16天在卡巴他赛施予组与对照组间在统计学上没有显著性差异(p>0.05)。另外，图7A中的“**”表示在施予后第16天在卡巴他赛施予组与对照组间在统计学上有显著性差异(p<0.01)。另外，图7A及B中的“***”表示在施予后第16天在氯哌斯汀施予组与对照组间在统计学上有显著性差异(p<0.001)。
[图8]为示出对将DU145细胞株及DU145CR细胞株在氯哌斯汀存在下(氯哌斯汀处理组)或非存在下(对照组)培养时的、Ki67表达细胞的比例进行分析而得到的结果的图。图中的“***”表示在氯哌斯汀处理组与对照组间在统计学上有显著性差异(p<0.001)。
[图9]为示出对将DU145细胞株及DU145CR细胞株在氯哌斯汀存在下(氯哌斯汀处理组)或非存在下(对照组)培养时的、TUNEL阳性细胞的比例进行分析而得到的结果的图。图中的“***”表示在氯哌斯汀处理组与对照组间在统计学上有显著性差异(p<0.001)。
[图10]为示出对将DU145CR细胞株在2nM的卡巴他赛、4nM的卡巴他赛的存在下、或者卡巴他赛非存在下(0nM)、并且在5μM的氯哌斯汀存在下(氯哌斯汀5处理组)、10μM的氯哌斯汀存在下(氯哌斯汀10处理组)、或者氯哌斯汀非存在下(对照组)培养时的活细胞水平进行分析而得到的结果的图。纵轴的“活细胞水平”作为以将卡巴他赛非存在下的对照组中的活细胞数设为1时的相对值(平均值+标准偏差[SD])而示出。图中的“**”及“***”表示各浓度的卡巴他赛中，与对照组相比，各自在统计学上有显著性差异(p<0.01及p<0.001)。另外，图中的“##”及“###”表示氯哌斯汀5处理组及氯哌斯汀10处理组中，与卡巴他赛非存在下时比较，各自在统计学上有显著性差异(p<0.01及p<0.001)。
[图11]图11A为示出针对使用DU145CR细胞株而制作的4组皮下肿瘤模型小鼠(对照组、卡巴他赛施予组、氯哌斯汀施予组、及氯哌斯汀+卡巴他赛施予组)、对肿瘤(图11C的由虚线包围的部位)体积的变化进行分析而得到的结果的图。纵轴的“肿瘤体积”表示将刚刚施予后(0天)的对照组的肿瘤体积设为1时的相对值(平均值±标准偏差[SD])。横轴的“天数”表示施予后的天数。图11B为选取图11A中氯哌斯汀施予组及氯哌斯汀+卡巴他赛施予组的结果并放大而成的图。图11A中的“n.s.”表示在施予后第12天在卡巴他赛施予组与对照组间在统计学上没有显著性差异(p>0.05)。另外，图11A及B中的“***”表示在施予后第12天在氯哌斯汀施予组与对照组间在统计学上有显著性差异(p<0.001)。另外，图11A及B中的“###”表示在施予后第12天在氯哌斯汀+卡巴他赛施予组与氯哌斯汀施予组间在统计学上有显著性差异(p<0.001)。
具体实施方式
本发明的前列腺癌的预防或治疗剂为含有被限定为“用于预防或治疗前列腺癌”这样的用途的氯哌斯汀类的制剂(以下，有时称为“本发明的预防/治疗剂”)，其中，前列腺癌的预防除了预防前列腺癌的发病，还包含预防前列腺癌的症状恶化。本发明的预防/治疗剂可以单独作为医药品(制剂)使用，也可以进一步混合添加剂而以组合物的形态(医药组合物)使用。
对于作为预防或治疗对象的前列腺癌而言，只要是产生恶性肿瘤(癌症)的器官为前列腺的癌症即可，例如，可以举出原位性、浸润性、或转移性的前列腺癌；去势抵抗性、AR靶向药(例如，恩杂鲁胺、阿比特龙等)耐性、紫杉烷系抗癌剂(例如，紫杉醇、多西他赛、卡巴他赛等)耐性、去势抵抗性并且AR靶向药耐性的前列腺癌、去势抵抗性并且紫杉烷系抗癌剂耐性的前列腺癌、或去势抵抗性、AR靶向药耐性并且紫杉烷系抗癌剂耐性的前列腺癌；原位性、浸润性、或转移性并且去势抵抗性前列腺癌；原位性、浸润性、或转移性并且AR靶向药耐性的前列腺癌；原位性、浸润性、或转移性并且紫杉烷系抗癌剂耐性的前列腺癌；原位性、浸润性、或转移性、去势抵抗性并且紫杉烷系抗癌剂耐性的前列腺癌；原位性、浸润性、或转移性、去势抵抗性、AR靶向药耐性并且紫杉烷系抗癌剂耐性的前列腺癌；等等，在后述的本实施例中证实了其效果，因此优选至少为去势抵抗性的前列腺癌、至少为恩杂鲁胺耐性的前列腺癌、至少为卡巴他赛耐性的前列腺癌，更优选至少为去势抵抗性并且卡巴他赛耐性的前列腺癌。
本说明书中，“原位性前列腺癌”是指未浸润及未转移的前列腺癌，即，癌症未扩散至除前列腺以外的组织或器官，而是停留在前列腺中的状态，相当于A～B期的前列腺癌。另外，本说明书中，“浸润性前列腺癌”是指癌症浸润至前列腺周围的组织、器官(例如，膀胱、直肠、精囊)、并且未观察到转移的状态，相当于C期的前列腺癌。另外，本说明书中，“转移性前列腺癌”是指癌症转移，即癌症进入血管、淋巴管、并通过血液、淋巴液的流动而扩散至远离前列腺的组织或器官(例如，淋巴结、骨[脊柱、骨盆骨等]、肝脏、肺)的状态，相当于D期的前列腺癌。
本说明书中，“去势抵抗性前列腺癌(CRPC)”是指，为由外科去势或药物引起的去势状态，并且尽管血清睾酮少于50ng/dL，也与抗雄激素剂的施予没有关系地观察到病情的恶化、PSA(Prostate Specific Antigen；前列腺特异性抗原)上升的前列腺癌。即，是指尽管排除来自精巢的雄激素分泌而血中雄激素为非常低的浓度，前列腺癌也会加剧并且PSA值上升的状态。
作为预防或治疗对象的“浸润性前列腺癌”除了包括前列腺中的癌症以外，方便起见也包括浸润位置的组织或器官中的癌症，优选前列腺中的癌症。另外，作为预防或治疗对象的“转移性前列腺癌”除了包括前列腺中的癌症以外，方便起见也包括转移位置的组织或器官中的癌症，优选前列腺中的癌症。
本说明书中，“卡巴他赛耐性前列腺癌”是指对卡巴他赛显示出耐性的前列腺癌，更具体而言，在体内的情况下是指，将卡巴他赛以10mg/kg(体重)/天对前列腺癌患者施予至少14天时，肿瘤体积增大的前列腺癌。另外，体外的情况下，与卡巴他赛非耐性前列腺癌细胞株相比，卡巴他赛耐性前列腺癌细胞株相对于卡巴他赛的耐药性以50％抑制浓度(IC50)计至少为1.2倍以上，优选为1.5倍以上，更优选为2.0倍以上，进一步优选为2.3倍以上，进一步更优选为2.6倍以上，最优选为2.8倍以上。
本说明书中，“恩杂鲁胺耐性前列腺癌”是指对恩杂鲁胺显示出耐性的前列腺癌，更具体而言，体内的情况下是指，将恩杂鲁胺以25mg/kg(体重)/天对前列腺癌患者施予至少14天时，肿瘤体积增大的前列腺癌。另外，体外的情况下，与恩杂鲁胺非耐性前列腺癌细胞株相比，恩杂鲁胺耐性前列腺癌细胞株对恩杂鲁胺的耐性以50％抑制浓度(IC50)计至少为1.5倍以上，优选为2.0倍以上，更优选为4.0倍以上，进一步优选为5.0倍以上，进一步更优选为7.0倍以上，最优选为7.7倍以上。
本发明的氯哌斯汀为1-{2-[(RS)-(4-氯苯基)(苯基)甲氧基]乙基}哌啶，为下述的化学式所示的化合物。
[化学式1]
Figure BDA0002760061070000091
作为上述氯哌斯汀类中的氯哌斯汀的药学上可接受的盐，只要为药学上可接受的盐即可，例如，可以举出盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、磷酸盐、硝酸盐、硫酸盐、乙酸盐、丙酸盐、甲苯磺酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、乙醇酸盐、甲磺酸盐、丁酸盐、戊酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、芬地柞酸盐(fendizoate)等酸加成盐等。
为了进一步提高对前列腺癌的抗癌作用，优选在本发明的预防/治疗剂的基础上并用抗癌剂。作为与本发明的预防/治疗剂并用的抗癌剂，只要为已知通过抑制DNA复制、抑制细胞分裂等的作用来抑制癌症的增殖(优选前列腺癌的增殖)的物质即可，例如，可以举出环磷酰胺(Cyclophosphamide)、达卡巴嗪(Dacarbazine)、苯丁酸氮芥(Chlorambucil)、甲氨蝶呤(Methotrexate)、阿糖孢苷(Cytarabine)、放线菌素D(Actinomycin D)、博来霉素(Bleomycin)、阿霉素(Doxorubicin)、长春新碱(Vincristine)、长春碱(Vinblastine)、顺铂(Cisplatin)、奥沙利铂(Oxaliplatin)、卡铂(Carboplatin)、伊立替康(Irinotecan)、链脲佐菌素(Streptozocin)、紫杉醇(Paclitaxel)、多西他赛(Docetaxel)、卡巴他赛(Cabazitaxel)、依托泊苷(Etoposide)、吉西他滨(Gemcitabine)、贝伐单抗(Bevacizumab)、利妥昔单抗
(Rituximab)、布雷菲德菌素A(Brefeldin A)、曲妥珠单抗(Trastuzumab)、伊马替尼(Imatinib)、培美曲塞(Pemetrexed)、卡培他滨(Capecitabine)、硼替佐米(Bortezomib)、亮丙瑞林(Leuprorelin)、厄洛替尼(Erlotinib)、舒尼替尼(Sunitinib)、西妥昔单抗(Cetuximab)、戈舍瑞林(Goserelin)、达沙替尼(Dasatinib)、索拉非尼(Sorafenib)、5-氟尿嘧啶(FU)、恩杂鲁胺(Enzalutamide)、阿比特龙(Abiraterone)等，这些之中，由于在后述的本实施例中与氯哌斯汀类的并用效果得到证实，因此可以优选例示出卡巴他赛。
作为本发明的预防/治疗剂，可以还包含药学上可允许的通常的载体、结合剂、稳定剂、赋形剂、稀释剂、pH缓冲剂、崩解剂、等渗剂、添加剂、包衣剂、增溶剂、润滑剂、助溶剂、滑润剂、风味剂、甜味剂、溶剂、凝胶化剂、营养剂等添加剂。作为所述添加剂，具体而言，可以例示出水、生理盐水、动物性脂肪及油、植物油、乳糖、淀粉、明胶、结晶性纤维素、树胶、滑石、硬脂酸镁、羟丙基纤维素、聚亚烷基二醇、聚乙烯醇、甘油。
作为本发明的预防/治疗剂的施予形态，可以举出以粉末、颗粒、片剂、胶囊剂、糖浆剂、混悬液等剂型进行施予的经口施予，以溶液、乳剂、混悬液等剂型进行注射(例如，皮下注射、静脉内注射、肌肉内注射)、或以喷雾剂的形式进行鼻孔内施予的非经口施予，优选经口施予。
本发明的预防/治疗剂中的氯哌斯汀类的施予量根据年龄、体重、性别、症状、对药剂的敏感度等来适当决定，例如为0.1μg～200mg/kg(体重)/天的施予量的范围。在后述的本实施例中，通过使用了模型小鼠的实验，具体示出了12.5mg/kg/天的氯哌斯汀的施予量。对于该施予量而言，基于小鼠的人等效剂量(HED)12.3(参见资料“Guidance for IndustryEstimating the Maximum Safe Starting Dose inInitial Clinical Trials for Therapeuticsin Adult Healthy Volunteers”)，换算为对人的施予量时，约为1.02mg/kg/天。因此，作为本发明的预防/治疗剂中的氯哌斯汀类的施予量，优选1μg～100mg/kg/天，更优选10μg～50mg/kg/天，进一步优选30μg～15mg/kg/天，进一步更优选100μg～8mg/kg/天，最优选500μg～1.5mg/kg/天。需要说明的是，本发明的预防/治疗剂可以每天单次或分多次(例如，2～4次)施予。
作为本发明的预防/治疗剂，除了包含氯哌斯汀类以外，可以还包含对前列腺癌具有抗癌作用的成分，由于氯哌斯汀类单独也发挥抗前列腺癌作用(例如，前列腺癌细胞增殖抑制作用、前列腺癌细胞中EMT的抑制作用、前列腺癌细胞的浸润抑制作用、前列腺癌细胞的细胞凋亡诱导作用等)，因此可以不包含除氯哌斯汀类以外的抗前列腺癌作用成分(例如，蛋白质、DNA、RNA、源自植物的提取物、聚合物)。
对于氯哌斯汀类而言，通过化学合成、利用微生物的生产、利用酶的生产等任意已知的方法均可以制造，也可以使用市售品。例如，可以举出氯哌斯汀盐酸盐(HUSTAZOL[注册商标]，糖衣片10mg，Nipro ES Pharma co.,Ltd.制)、氯哌斯汀盐酸盐(Sigma-Aldrich公司制)、氯哌斯汀芬地柞酸盐(HUSTAZOL[注册商标]，散10％，Nipro ES Pharma co.,Ltd.制)等。
以下，通过实施例更具体地对本发明进行说明，但本发明的技术范围不限定于这些例示。需要说明的是，以下的实施例中，各种细胞株的培养是在RPMI 1640培养液中于5％CO2/20％O2、37℃条件下进行的。
实施例1
1.前列腺癌的候补药剂的筛选
对于通过基于新型AR抑制剂的CRPC治疗获得了卡巴他赛耐性的CRPC患者(n＝3)，在庆应义塾大学伦理委员会的批准下，使用“RNeasy DSP FFPE kit”(Qiagen公司制)，从该治疗前(获得卡巴他赛耐性前)的CRPC组织的FFPE试样和该治疗后(获得卡巴他赛耐性后)的CRPC组织的FFPE试样中提取mRNA。使用“Affymetrix Gene Chip WT Terminal LabelingKit”(Affymetrix公司制)，对所提取的RNA进行cDNA的片段化和标记，用“Gene ChipFluidics Station 450”(Affymetrix公司制)清洗后，使用微阵列系统(Gene ChipScanner 30007G，Affymetrix公司制)进行微阵列分析，对从获得卡巴他赛耐性后的CRPC细胞向获得卡巴他赛耐性前的CRPC细胞的基因表达谱变化率进行分析。接着，应用美国博德(Broad)研究所的CMAP分析对所述变化率与基于临床上可使用的化合物库的基因表达谱的变化率进行比较、验证，筛选的结果为，将发现可使卡巴他赛耐性CRPC细胞的基因表达谱变化为卡巴他赛非耐性CRPC细胞的基因表达谱的70种化合物作为前列腺癌的候补药剂。结果显示出所述候补药剂之一中包含氯哌斯汀。
实施例2
2.对前列腺癌细胞的细胞增殖抑制效果
为了确认氯哌斯汀类对转移性的CRPC具有细胞增殖抑制效果，将转移性CRPC细胞株(DU145细胞株及PC3细胞株)在氯哌斯汀类存在下培养，并对细胞增殖性进行分析。
[方法]
将DU145细胞株及PC3细胞株(两细胞均从ATCC[美国菌种保藏中心]获得)在96孔板上培养24小时后，将氯哌斯汀盐酸盐(Sigma-Aldrich公司制)以成为0.1μM、1μM或10μM的方式添加至培养液，进一步培养24小时后，使用“Premix WST-1Cell Proliferation AssaySystem”(Takara Bio公司制)测定活细胞数。另外，作为对照，一并也进行将DU145细胞株及PC3细胞株在不含氯哌斯汀盐酸盐的培养液中培养的实验。
[结果]
显示：将DU145细胞株及PC3细胞株在氯哌斯汀存在下培养时，与氯哌斯汀非存在下进行培养的情况下相比，活细胞数浓度依赖性地显著减少(参见图1)。
该结果表明：氯哌斯汀类对转移性的CRPC具有细胞增殖抑制效果。
实施例3
3.对转移性CRPC的EMT抑制效果
为了确认氯哌斯汀类有抑制转移性的CRPC细胞中的EMT的效果，将转移性CRPC细胞株(DU145细胞株及PC3细胞株)在氯哌斯汀类存在下培养，并对EMT相关因子的基因表达谱进行分析。
[方法]
将DU145细胞株及PC3细胞株在10μM的氯哌斯汀存在下、或氯哌斯汀非存在下培养24小时后(分别为氯哌斯汀处理组及对照组)、使用“RNeasy Mini kit”(Qiagen公司制)提取mRNA。使用“Prime Script RT reagent Kit”(Takara Bio公司制)将提取的mRNA合成cDNA。为了对编码6种因子(E-钙粘蛋白、波形蛋白、“锌指蛋白SNAI1”、“锌指蛋白SNAI2”、“锌指E-盒结合同源框1”、及“锌指E-盒结合同源框2”)的基因(分别为CDH1基因、VIM基因、SNAI1基因、SNAI2基因、ZEB1基因、及ZEB2基因)的mRNA表达水平进行分析，使用以下表1所示的引物及TaqMan探针组(TaqMan Gene Expression Assays)(Applied Biosystems公司制)和CFX96实时系统(Bio-Rad公司制)，进行定量PCR分析。
[表1]
基因名 引物及TaqMan探针组
CDH1基因 Hs00170423_m1
VIM基因 Hs00958111m1
SNAI 1基因 Hs00195591_m1
SNAI 2基因 Hs00950344m1
ZEB 1基因 Hs01566407_m1
ZEB 2基因 Hs00207691_m1
[结果]
对于编码与EMT相关的5种蛋白质(波形蛋白、“锌指蛋白SNAI1”及“锌指蛋白SNAI2”、以及“锌指E-盒结合同源框1”及“锌指E-盒结合同源框2”)的mRNA表达水平而言，与对照组相比，氯哌斯汀处理组均减少(参见图2A及B)。另外，对于EMT中表达减少的编码E-钙粘蛋白的mRNA表达水平而言，与对照组相比，氯哌斯汀处理组增加(参见图2B)。
这些结果启示：氯哌斯汀类抑制转移性CRPC细胞中的EMT，抑制CRPC的转移·浸润。
实施例4
4.前列腺癌细胞的浸润性的分析
进而，为了确认氯哌斯汀类的抗前列腺癌效果，将DU145细胞株在氯哌斯汀类存在下培养，并对这些细胞株的浸润性进行分析(侵袭试验，Invasion assay)。
[方法]
在添加至实时细胞分析仪xCELLigence(ACEA Biosciences公司制)的各孔中的培养液中，以成为1μM的方式添加氯哌斯汀盐酸盐(Sigma-Aldrich公司制)，添加4.0×104个DU145细胞株后进行培养，经时(0～48小时)地测量通过了基质胶基底膜基质(Corning公司制)的细胞数(氯哌斯汀处理组)。另外，作为比较对照，在不含氯哌斯汀盐酸盐的培养液中培养DU145细胞株，也进行同样的实验(对照组)。需要说明的是，1μM的氯哌斯汀为对正常的细胞增殖没有影响的浓度。
[结果]
确认了：将DU145细胞株在不含氯哌斯汀的培养液中培养时，细胞浸润(参见图3的“对照组”)。另一方面，显示出：将DU145细胞株在含氯哌斯汀的培养液中培养时，细胞的浸润被显著抑制(参见图3的“氯哌斯汀处理组”)。
该结果表明氯哌斯汀类具有抑制前列腺癌的细胞浸润的效果，并且在对细胞增殖没有影响的低浓度下也观察到了所述效果，因此期待开发出副作用少的转移性前列腺癌的预防或治疗剂。
实施例5
5.确认雄激素非依赖性的CRPC模型细胞株C4-2AT6为恩杂鲁胺耐性
本申请的发明人建立了雄激素非依赖性的CRPC模型细胞株C4-2AT6(参见文献“Kosaka et al.,J Urol.2011Jun；185(6)：2376-81.”)。确认所述C4-2AT6细胞株是否为恩杂鲁胺耐性。
[方法]
将C4-2AT6细胞株和作为比较对照的雄激素依赖性的前列腺癌细胞株LN-CaP细胞株(从ATCC[美国菌种保藏中心]获得)各自在96孔板上培养24小时后，将恩杂鲁胺(Chemscene公司制)以成为各种浓度(0μM、0.1μM、1μM、及10μM)的方式添加至培养液，进一步培养48小时后，使用“Premix WST-1Cell Proliferation Assay System”(Takara Bio公司制)测定活细胞数。
[结果]
显示：经恩杂鲁胺处理的C4-2AT6细胞株的活细胞数与经恩杂鲁胺处理的LN-CaP细胞株的活细胞数相比增加(参见图4)。基于所述结果，测定了恩杂鲁胺中的50％抑制浓度(IC50)，结果LN-CaP细胞株的IC50为12.1μM，而C4-2AT6细胞株的IC50为94.3μM。
根据以上的结果确认了：C4-2AT6细胞株是与恩杂鲁胺非耐性株(LN-CaP细胞株)相比、对恩杂鲁胺的耐性上升了约7.8倍的恩杂鲁胺耐性前列腺癌细胞株。
实施例6
6.卡巴他赛耐性前列腺癌细胞株的建立
基于作为转移性CRPC细胞株的DU145细胞株，尝试卡巴他赛耐性前列腺癌细胞株的建立。
6-1方法
[DU145CR细胞株的建立]
将DU145细胞株在0.2nM的卡巴他赛(Carbosynth公司制)存在下培养，在逐渐使卡巴他赛浓度上升至3nM的同时培养约2年，由此建立DU145CR细胞株。
[使用了DU145CR细胞株的体外分析]
将建立的DU145CR细胞株和DU145细胞株分别在96孔板上培养24小时，在各种浓度(0nM、1nM、2nM、4nM、8nM、及16nM)的卡巴他赛存在下进一步培养24小时后，使用“PremixWST-1Cell Proliferation Assay System”(Takara Bio公司制)测定活细胞数。
[使用了DU145CR细胞株的体内分析]
将建立的1×106个DU145CR细胞株和1×106个DU145细胞株分别接种到进行了去势的雄性裸鼠(BALB/C)的皮下，制作皮下肿瘤模型小鼠(DU145CR小鼠及DU145小鼠)。肿瘤的大小达到200mm3左右时，将皮下肿瘤模型小鼠分成4个种类的组(DU145小鼠组及卡巴他赛施予DU145小鼠组、以及DU145CR小鼠组及卡巴他赛施予DU145CR小鼠组)，对卡巴他赛施予DU145小鼠组及卡巴他赛施予DU145CR小鼠组(各自n＝5)进行10mg/kg(体重)的卡巴他赛(Carbosynth公司制)的单次腹腔内施予。需要说明的是，不对DU145小鼠组及DU145CR小鼠组(各自n＝5)进行卡巴他赛施予。在刚刚经口施予后(0天)、以及经口施予4天后、8天后、及12天后，测定肿瘤体积并算出平均值。
6-2结果
[使用了DU145CR细胞株的体外分析]
显示：对于DU145CR细胞株的活细胞数而言，在任意浓度的卡巴他赛存在下，与DU145细胞株的活细胞数相比均增加(参见图5A)。基于所述结果，测定了在卡巴他赛中的IC50，结果DU145细胞株的IC50为3.8nM，而DU145CR细胞株的IC50为11.0nM。
根据以上的结果确认了：建立了对卡巴他赛的耐性上升了约3倍的卡巴他赛耐性前列腺癌细胞株(DU145CR细胞株)。
[使用了DU145CR细胞株体内分析]
显示：在经口施予12天后，与卡巴他赛施予DU145小鼠组中的肿瘤体积相比，卡巴他赛施予DU145CR小鼠组中的肿瘤体积增加至约2倍(参见图5B)。
根据以上的结果确认了：制作了对卡巴他赛的耐性上升了约2倍的卡巴他赛耐性前列腺癌模型动物。
实施例7
7.对恩杂鲁胺耐性前列腺癌细胞株及卡巴他赛耐性前列腺癌细胞株的细胞增殖抑制效果
[方法]
为了确认氯哌斯汀类对恩杂鲁胺耐性的前列腺癌及卡巴他赛耐性的前列腺癌具有细胞增殖抑制效果，使用恩杂鲁胺耐性前列腺癌细胞株(C4-2AT6细胞株)和卡巴他赛耐性前列腺癌细胞株(DU145CR细胞株)，按照实施例2中记载的方法，对氯哌斯汀类存在下的细胞增殖性进行分析。
[结果]
显示：将C4-2AT6细胞株及DU145CR细胞株在氯哌斯汀存在下培养时，与氯哌斯汀非存在下进行培养的情况相比，活细胞数浓度依赖性地显著减少(参见图6)。
该结果表明：氯哌斯汀类对恩杂鲁胺耐性的前列腺癌及卡巴他赛耐性的前列腺癌具有细胞增殖抑制效果。
实施例8
8.对前列腺癌模型小鼠的抗肿瘤效果
为了确认氯哌斯汀类对前列腺癌具有抗肿瘤效果，对转移性CRPC模型小鼠及卡巴他赛耐性前列腺癌模型小鼠施予氯哌斯汀类，对肿瘤体积的变化进行分析。
[方法]
将1×106个转移性CRPC细胞株(DU145细胞株)接种到进行了去势的雄性裸鼠(BALB/C)的皮下，制作皮下肿瘤模型小鼠。肿瘤的大小达到100mm3时，将皮下肿瘤模型小鼠(CRPC模型小鼠)分成3个种类的组(对照组、卡巴他赛施予组、及氯哌斯汀施予组)，针对氯哌斯汀施予组(n＝5)，将氯哌斯汀盐酸盐(Sigma-Aldrich公司制)以氯哌斯汀换算计为12.5mg/kg(体重)/天的用量进行连日经口施予(图7A的“氯哌斯汀施予组”)，针对卡巴他赛施予组(n＝5)，进行10mg/kg(体重)的卡巴他赛(Carbosynth公司制)的单次腹腔内施予(图7A的“卡巴他赛施予组”)。另一方面，对照组(n＝5)中，氯哌斯汀盐酸盐及卡巴他赛均未施予(图7A的对照组)。
另外，将实施例5中建立的1×106个DU145CR细胞株接种到进行了去势的雄性裸鼠(BALB/C)的皮下，制作皮下肿瘤模型小鼠(卡巴他赛耐性CRPC小鼠)。肿瘤的大小达到100mm3时，将皮下肿瘤模型小鼠分为3个种类的组(对照组、卡巴他赛施予组、及氯哌斯汀施予组)，针对氯哌斯汀施予组(n＝5)，将氯哌斯汀盐酸盐(Sigma-Aldrich公司制)以氯哌斯汀换算计为12.5mg/kg(体重)/天的用量进行连日经口施予(图7B的“氯哌斯汀施予组”)，针对卡巴他赛施予组(n＝5)，进行10mg/kg(体重)的卡巴他赛(Carbosynth公司制)的单次腹腔内施予(图7B的“卡巴他赛施予组”)。另一方面，对照组(n＝5)中，氯哌斯汀盐酸盐及卡巴他赛均未施予(图7B的“对照组”)。针对各个CRPC模型小鼠及卡巴他赛耐性CRPC小鼠，在氯哌斯汀盐酸盐的刚刚经口施予后(0天)、以及经口施予4天后、8天后、12天后、及16天后测定肿瘤体积并算出平均值。
[结果]
显示：CRPC模型小鼠中，氯哌斯汀施予组中的肿瘤体积与对照组的肿瘤体积相比减少(参见图7A)。另外，还显示：氯哌斯汀施予组中的肿瘤体积减少水平高于卡巴他赛施予组中的肿瘤体积的减少水平。
另外，显示：对于卡巴他赛耐性CRPC小鼠，通过卡巴他赛的施予，基本无法抑制肿瘤体积的增加，而通过施予氯哌斯汀，肿瘤体积大幅减少(参见图7B)。
根据这些结果，通过体内分析显示出：氯哌斯汀类对CRPC、特别是卡巴他赛耐性的CRPC也具有高的抗肿瘤效果。
实施例9
9.对前列腺癌细胞的细胞增殖抑制效果及细胞凋亡诱导效果
为了确认氯哌斯汀类对CRPC及卡巴他赛耐性的CRPC具有细胞增殖抑制效果及细胞凋亡诱导效果，将转移性CRPC细胞株(DU145细胞株及PC3细胞株)在氯哌斯汀类存在下培养，通过使用了针对细胞增殖标记物(Ki67)的抗体的免疫组织染色法及TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)法进行分析。
[方法]
将DU145细胞株及DU145CR细胞株各自在96孔板上培养24小时，将氯哌斯汀盐酸盐(Sigma-Aldrich公司制)以成为10μM的方式添加至培养液，进一步培养24小时后，用4％多聚甲醛将细胞固定。利用1％BSA(牛血清白蛋白，Bovine Serum Albumin)溶液对经固定处理的细胞进行封闭处理，将使用了抗Ki67抗体(Dako公司制)的一抗反应处理在4℃条件下进行一晚。其后，进行使用了过氧化物酶标记抗小鼠IgG抗体(Nichirei Bioscience公司制)的二抗反应处理，使用DAB Tris片(武藤化学公司制)进行DAB(二氨基联苯胺，diaminobenzidine)染色法。在相差显微镜下观察经免疫组织染色的细胞样品(参见图8A)，并算出Ki67阳性细胞的比例。另外，对经上述固定处理的细胞进行使用了In situ ApoptosisDetection Kit(Takara Bio Inc.制)的TUNEL法。在相差显微镜下观察通过TUNEL法进行了染色的细胞样品(参见图9A)，算出TUNEL阳性细胞(细胞凋亡后的细胞)的比例。
[结果]
显示：将DU145细胞株及DU145CR细胞株在氯哌斯汀存在下培养时，与氯哌斯汀非存在下进行培养的情况下相比，Ki67阳性细胞的比例减少(参见图8)，并且TUNEL阳性细胞的比例增加(参见图9)。
该结果表明：氯哌斯汀类对卡巴他赛耐性等的CRPC具有细胞增殖抑制效果及细胞凋亡诱导效果。
实施例10
10.与抗癌剂的并用带来的对前列腺癌细胞株的细胞增殖抑制效果
关于氯哌斯汀类，为了确认与现有的抗癌剂的并用效果，对氯哌斯汀类与卡巴他赛的并用带来的前列腺癌细胞的增殖抑制效果进行分析。
[方法]
将实施例5中建立的DU145CR细胞株在96孔板上培养24小时后，在5μM或10μM的氯哌斯汀盐酸盐(Sigma-Aldrich公司制)、以及2nM或4nM的卡巴他赛(Carbosynth公司制)的存在下，进一步培养24小时后，使用“Premix WST-1Cell Proliferation Assay System”(Takara Bio公司制)测定活细胞数。另外，作为对照，一并也进行将DU145CR细胞株在不含氯哌斯汀盐酸盐、卡巴他赛的培养液中培养的实验。
[结果]
显示：将DU145CR细胞株在氯哌斯汀及卡巴他赛这两者的存在下培养时，与单独在氯哌斯汀中培养的情况相比，任意浓度下的活细胞数均显著减少(参见图10)。另外，氯哌斯汀及卡巴他赛的联合指数(CI；Combination index)为0.60。
这些结果显示：将氯哌斯汀类与卡巴他赛并用时，与单独使用氯哌斯汀类的情况相比，前列腺癌细胞的细胞增殖抑制效果进一步提高，并且表明通过氯哌斯汀类与卡巴他赛的并用，得到了协同效果。因此，对于前列腺癌而言，通过将氯哌斯汀类与现有的抗癌剂并用，能够充分期待在减轻副作用的同时能够得到更高的抗肿瘤效果。
实施例11
11.与抗癌剂的并用带来的对前列腺癌模型小鼠的抗肿瘤效果
关于氯哌斯汀类，为了确认与现有的抗癌剂的并用效果，对氯哌斯汀类与卡巴他赛与的并用带来的对前列腺癌模型小鼠的抗肿瘤效果进行分析。
[方法]
将实施例5中建立的5×106个DU145CR细胞株接种到进行了去势的雄性裸鼠(BALB/C)的皮下，制作皮下肿瘤模型小鼠(卡巴他赛耐性CRPC小鼠)。肿瘤的大小达到100mm3时，将皮下肿瘤模型小鼠分为4个种类的组(对照组、卡巴他赛施予组、氯哌斯汀施予组、及氯哌斯汀+卡巴他赛施予组)，针对卡巴他赛施予组(n＝5)，进行10mg/kg(体重)的卡巴他赛(Carbosynth公司制)的单次腹腔内施予，针对氯哌斯汀施予组(n＝5)，将氯哌斯汀盐酸盐(Sigma-Aldrich公司制)以氯哌斯汀换算计为12.5mg/kg(体重)/天的用量进行连日经口施予，针对氯哌斯汀+卡巴他赛施予组(n＝5)，将氯哌斯汀盐酸盐以氯哌斯汀换算计为12.5mg/kg(体重)/天的用量进行连日经口施予，并且进行10mg/kg(体重)的卡巴他赛(Carbosynth公司制)的单次腹腔内施予。另一方面，对照组(n＝5)中，氯哌斯汀盐酸盐及卡巴他赛均未施予。对卡巴他赛耐性CRPC小鼠在刚刚经口施予后(0天)、以及经口施予4天后、8天后、及12天后测定肿瘤体积并算出平均值。
[结果]
氯哌斯汀+卡巴他赛施予组中的肿瘤体积与氯哌斯汀施予组中的肿瘤体积相比显著减少(参见图11)。
该结果表明：将氯哌斯汀类与现有的抗癌剂并用时，与单独使用氯哌斯汀类的情况下相比，前列腺癌的抗肿瘤效果进一步提高。
产业上的可利用性
本发明有助于前列腺癌、尤其作为最难治性的前列腺癌的卡巴他赛耐性的去势抵抗性前列腺癌的预防或治疗。

Claims (6)

1.前列腺癌的预防或治疗剂，其特征在于，包含氯哌斯汀或其药学上可接受的盐。
2.如权利要求1所述的预防或治疗剂，其特征在于，为经口施予。
3.如权利要求1或2所述的预防或治疗剂，其特征在于，前列腺癌为去势抵抗性前列腺癌或恩杂鲁胺耐性前列腺癌。
4.如权利要求3所述的预防或治疗剂，其特征在于，去势抵抗性前列腺癌为卡巴他赛耐性。
5.如权利要求1～4中任一项所述的预防或治疗剂，其特征在于，与抗癌剂并用。
6.如权利要求5所述的预防或治疗剂，其特征在于，抗癌剂为卡巴他赛。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113288878A (zh) * 2021-04-15 2021-08-24 地奥集团成都药业股份有限公司 一种盐酸氯哌丁片及其制备方法

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021138578A1 (en) * 2019-12-31 2021-07-08 The Trustees Of Indiana University Repurposing fda-approved drugs as a novel cancer therapeutic avenue through inhibition of prmt5
CN111840286B (zh) * 2020-09-04 2022-09-20 郑州大学 咳平及其盐在制备抗肿瘤药物中的应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104540504A (zh) * 2012-05-16 2015-04-22 苏州泰飞尔医药有限公司 治疗肺部疾病的高穿透力前药组合物和医药组合物

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1322733A (en) 1969-06-24 1973-07-11 Molins Ltd Cigarette making machines
WO2012154944A2 (en) * 2011-05-10 2012-11-15 Stc.Unm Methods of treating autophagy-associated disorders and related pharmaceutical compositions, diagnostics, screening techniques and kits
JP5947623B2 (ja) * 2012-06-04 2016-07-06 インフォコム株式会社 抗がん剤の効果増強剤
JP2019123671A (ja) 2018-01-12 2019-07-25 学校法人慶應義塾 前立腺がんの予防又は治療剤
JP2019127437A (ja) 2018-01-19 2019-08-01 学校法人慶應義塾 カバジタキセル耐性前立腺がんの予防又は治療剤

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104540504A (zh) * 2012-05-16 2015-04-22 苏州泰飞尔医药有限公司 治疗肺部疾病的高穿透力前药组合物和医药组合物

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JOSEPH J. BABCOCK ET AL.: "Integrated Analysis of Drug-Induced Gene ExpressionProfiles Predicts Novel hERG Inhibitors" *
NAN JIET AL.: "Effect of Celastrol on Growth Inhibition of Prostate Cancer Cells through the Regulation of hERG Channel In Vitro" *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113288878A (zh) * 2021-04-15 2021-08-24 地奥集团成都药业股份有限公司 一种盐酸氯哌丁片及其制备方法

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