CN111996128B - 一种适合工厂化栽培的金针菇及其分子鉴定方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一株金针菇菌种‘农万金8号’，属于金针菇属(Flammulina velutipes)，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。由于本发明所提供的‘农万金8号’菌种具有菇体洁白、菌盖略大、菌柄略粗，菇柄坚挺，基部绒毛较少等优良金针菇菌种的品质特点。改良了其亲本F0321菌盖较大、较薄，菌柄较软，商品感观较差等缺点，以及另一亲本F0323栽培管理难度大，容易出现菌被、顶芽等缺点，比对照菌株‘农金3号’（Flv0303）增产28.6%，商品外观良好，适合于市场需求，综合性状优良并适合进行工厂化生产，具有良好的推广前景。

Description

一种适合工厂化栽培的金针菇及其分子鉴定方法

技术领域

本发明涉及一株金针菇菌种。具体涉及一种适合工厂化栽培的金针菇农万金8号及其分子鉴定方法。

背景技术

金针菇[Flammulina velutiper (Fr.) Sing] 隶属于担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、白蘑科、金针菇属，其菌盖滑嫩、柄脆、营养丰富、味美适口而著称于世。福建省是中国南方金针菇的主栽地区。随着金针菇栽培规模的扩大，市场上对金针菇在栽培，颜色和产量上也产生了越来越高的评判标准，如，菌柄粗细和均匀与否、剖切面空隙、菌柄脆度、保鲜持久度、菌盖大小、菇体颜色等评价标准。目前菌柄均匀、菇体密集、菇体白成为金针菇市场的主要趋势。现有的金针菇主要栽培品种中，‘农金3号’（Flv0303）菌盖白色、半球形、圆整、边缘内卷，相对湿度低于80%时，菌盖中央略显淡黄色。菌柄白色、圆柱形、中空，基部有绒毛，2012年福建省作物品种审定委员会认定，该品种适宜福建省工厂化袋式栽培。但随着市场的发展，市场对金针菇品质要求越来越高，要求白色金针菇不仅要产量高，色白还要口感脆嫩，致使生产企业后备品种不足的问题日益凸显，选育品质优、产量高、商品性佳、市场前景好的优良品种显得尤为重要。

发明内容

本发明要解决现有生产中使用的金针菇品种单产低，出菇不整齐，色偏黄等的技术问题，从而提供一株芽数多，菇体整齐，菇体白，菇柄口感脆度好，品质优、产量高的金针菇菌种。

本发明的金针菇菌种‘农万金8号’，属于金针菇属 (Flammulina velutipes )，该菌株的分类命名为：金针菇(Flammulina velutipes ) 农万金8号保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为 2020 年6月15日，保藏编号为CGMCC NO.20203。

‘农万金8号’菌种在20℃、PDA 培养基上菌丝生长最快，菌丝最强壮、均匀，尖端菌丝较整齐、粗壮，菌落边缘较圆整。子实体菌盖略大、菌柄略粗 ，菇体坚挺，基部绒毛少，菇体颜色比对照品种农金3号更稳定，商品外观良好，适合于市场需求。

‘农万金8号’由金针菇‘F0321’和‘F0323’通过杂交育成，杂交菌株‘农万金8号’编号为‘Flv0012’，筛选后进入栽培试验。F0321具有产量较高、菇根白、周期较短等特点，但是菌盖较大、较薄，菌柄较软，商品感观较差。国内工厂化栽培（瓶栽）主要品种，源于日本。F0323的优点是菌盖较小、厚实，产量高。但该品种栽培管理难度大，容易出现菌被、顶芽等问题，一旦出现，大幅度减产或无收成。该品种的栽培周期比F0321长2-3天。国内工厂化栽培（瓶栽）主要品种，源于日本。对照品种F0303，经2012年福建省作物品种审定委员会认定并推广的福建省工厂化袋式栽培品种，该品种菌盖白色、半球形、圆整、边缘内卷，相对湿度低于80%时，菌盖中央略显淡黄色。菌柄白色、圆柱形、中空，基部有绒毛。多次栽培试验表明，杂交菌株‘Flv0012’比对照菌株‘农金3号’（Flv0303）增产28.6%，其菌盖大小、菌盖厚度和菌柄直径的数据均优于对照菌株‘农金3号’（Flv0303）。对于商品外观，（Flv0012）菇体洁白、菌盖略大、菌柄略粗，菇柄坚挺，基部绒毛较少，商品外观良好，适合于市场需求。定名为‘农万金8号’（图1）。

从图2的拮抗结果可看出，杂交子农万金8号与亲本F321、F0323以及对照菌株F0303无明显的拮抗线，但F0012的菌丝形态明显区别于F0321和F0303，但与F0323无明显区别，F0012与亲本F0321、F0323以及对照菌株F0303是否为不同菌株需通过分子手段进一步验证。

本发明的金针菇菌种根据基因组测序数据采用Kmer差减组装技术，获得差异片段（SV）（图4），选取10个SV序列设计特异性引物10对（P1～P10），对F0321、F0012和F0323进行扩增，除了P3没有扩增成功外，其它引物均获得PCR产物，扩增结果见图5。各特异性片段的PCR扩增结果分析如图3所示。F0321有7个特异片段（P1、P2、P4、P5、P8、P9和P10），F0323有2个特异片段（P6和P7），而F0012继承了两亲本的特异片段，进一步证明它是杂交子。根据省食用菌品种鉴定技术规程的要求，我们把省认定的2个金针菇品种也进行了DNA指纹检测。结合‘F0306’的基因组数据，进一步开发了9对特异性扩增引物（P11～P19），对五个品种进行扩增和产物测序，扩增结果见图5。各特异性片段的PCR扩增结果分析如图3所示。从图3可以看出，P12、P14和P15是‘农金3号’和‘农金6号’的特异序列；P16、P17、P18、P19是‘F0321’、‘F0323’和‘农万金8号’的特有序列；P11和P13是‘农万金8号’区别于其它品种的序列。综合上述检测结果，可以确定F0012是‘F0321’和‘F0323’的杂交子，它与亲本及省认定品种的DNA指纹有显著的差异，是不同的品种。

本发明的优点在于：本发明所提供的‘农万金8号’（Flv0012）平均产量365.35g/瓶，对照品种‘农金3号’（Flv0303）平均产量为284.02g/瓶，“农万金8号”（Flv0012）比对照菌株增产28.6%，其菌盖大小、菌盖厚度和菌柄直径的数据均优于对照菌株’农金3号’（Flv0303）。对于商品外观，‘农万金8号’（Flv0012）菇体洁白、菌盖略大、菌柄略粗，菇柄坚挺，基部绒毛较少，符合市场需求。

附图说明

图1为‘农万金8号’(Flv0012)与对照菌株‘农金3号’(Flv0303)的标准图片，其中平皿为Flv0012 20℃培养7天的图片，中间是‘农金3号’，右边是‘农万金8号’；

图2为‘农万金8号’(Flv0012)与亲本‘F0321’和‘F0323’以及对照菌株‘农金3号’(Flv0303)的拮抗试验；

图3为五个金针菇品种特异性片段检测结果示意图（F0012‘农万金8号’、F0321、F0323、对照菌株F0303‘农金3号’、F0306‘农金6号’）；

图4为 Kmer差减组装获得的差异片段；其中4A为P1-P5，4B为P6-P10；

图5为各特异片段PCR电泳图，其中5A为P1-P10扩增电泳图（M，5000 bp Marker；CK，不加模板的阴性对照；1，F0321；2，F0012；3，F0323）；5B为P11-P19扩增电泳图（M，5000bp Marker；CK，不加模板的阴性对照；1，F0303；2，F0321；3，F0012；4，F0323；5，F0306）。

具体实施方式

实施例1：选用主栽的金针菇‘F0321’和‘F0323’做杂交亲本，选取亲本‘F0321’单孢菌株20个，‘F0323’单孢菌株20个生长速度较快、气生菌丝较发达的单孢菌株，按照全组合方式配对，共配制获得60个组合，经镜检含有锁状联合的杂交子数量47份，进行初筛出菇实验后，选择能够出菇的杂交子20个进入复筛。进过复筛后有14个杂交子正常出菇，产量高于对照菌株’农金3号’的杂交子数量有13个，但产量高于400g/瓶的菌种仅有3个，其中Flv0012综合性状较好，达到预期育种目标，该杂交菌株定名为“农万金8号”，用于开展后续的批次试验。

以拮抗反应法对‘农万金8号’菌株与其亲本进行差异对比。

检测依据：依据中华人民共和国农业行业标准《NY/T 1845-2010 食用菌菌种区别性鉴定 拮抗反应》进行待检样品的接种、培养和观察。

检测材料：金针菇菌株4个，其中待检菌株为‘农万金8号’，亲本F0321、F0323以及对照菌株F0303。

检验方法：严格按照无菌操作，用Φ8 mm 打孔器分别打取活化后适龄菌种菌落边缘作接种块，两接种块间隔10 mm，菌丝朝上。在20℃的温度下，通风、避光培养至接种块菌丝接触后，再在自然光下培养7d。

结果与分析：在灯下或自然光下，观察培养物表面两菌株交界处菌丝反应，结果如图所示(图2)。

检测结论：从图2的拮抗结果可看出，‘农万金8号’，亲本F0321、F0323以及对照菌株F0303之间的菌丝均存在较明显差异，菌丝形态完全不同，F0321、F0323菌丝偏稀疏，F0303菌丝较浓密，‘农万金8号’菌丝最浓密。但不同菌株间的拮抗线不太明显。

实施例2：用SV检测技术对本菌株进行与其亲本的DNA差异对比。

检测材料：金针菇菌株5个，其中待检菌株为 ‘农万金8号’，对照菌株 F0321、和F0323、F0303（农金3号）、农金六号。

检验方法：根据基因组测序数据，采用Kmer差减组装技术，获得差异片段（SV），相应选取若干个SV序列设计特异性引物对待测样品进行扩增。（参考文献见 Alkan, C.,Coe, B. P. & Eichler, E. E. Genome structural variation discovery andgenotyping. Nature reviews. Genetics, 2011 (12)：363–376；朱风丽等, 韩国赤芝全基因组重测序分析，世界科学技术-中医药现代化，21(4)：764-774.）。SV试验引物序列由擎科生物技术有限公司合成。

待检菌株菌丝体活化，培养，基因组DNA提取，电泳检测均参照中华人民共和国农业行业标准进行。

菌种真实性鉴定所用SV引物如下：

表1 SV的引物序列

表2杂交子与对照菌株F0303（农金3号）、农金六号的SV引物

结果与分析：利用SV检测技术建立金针菇菌株的DNA指纹图谱：本发明的金针菇菌种根据基因组测序数据采用Kmer差减组装技术，获得差异片段（SV）（图4），选取10个SV序列设计特异性引物10对（P1～P10），对F0321、F0012和F0323进行扩增，除了P3没有扩增成功外，其它引物均获得PCR产物，扩增结果见图5。各特异性片段的PCR扩增结果分析如图3所示。F0321有7个特异片段（P1、P2、P4、P5、P8、P9和P10），F0323有2个特异片段（P6和P7），而F0012继承了两亲本的特异片段，进一步证明它是杂交子。根据省食用菌品种鉴定技术规程的要求，我们把省认定的2个金针菇品种也进行了DNA指纹检测。结合‘F0306’的基因组数据，进一步开发了9对特异性扩增引物（P11～P19），对五个品种进行扩增和产物测序，扩增结果见图5。各特异性片段的PCR扩增结果分析如图3所示。从图3可以看出，P12、P14和P15是‘农金3号’和‘农金6号’的特异序列；P16、P17、P18、P19是‘F0321’、‘F0323’和‘农万金8号’的特有序列；P11和P13是‘农万金8号’区别于其它品种的序列。综合上述检测结果，可以确定F0012是‘F0321’和‘F0323’的杂交子，它与亲本及省认定品种的DNA指纹有显著的差异，是不同的品种。

检测结论：SV分析结果表明，待检菌株金针菇‘农万金8号’是‘F0321’和‘F0323’的杂交子，它与亲本及省认定品种的DNA指纹有显著的差异，是不同的品种。

各特异片段DNA序列如下：

P1（1146bp）

CAGACGACCAACATCGACTTGTCGCAGGATGCTGCAATGATTTGGAGTCTCTGCTTTCAGGCGATTGAAGAGATTCTAATTGCTAGTGGCACTGTTCTTCCACCCTCCCTTGACCATGGCGACGTCAATCCTCTCTGGATTGTCCTCAAGCCAGGTGAGCCACCTAGAGATGGTGGACGTCTTGGAGGTCGTGTCTATTCCCGAGACCGCAACTGGGATAATCCTCAATTCTGGACGAAATCACATATCATAAGCCTAGGTTTCAAAGGTCATATGCGTTCTATTTCACCGGAAAAACCGGTAATCTTCTTGGGTGAGTTTGAACATTCTATTATACTTCAATGTACTCATTACTACTCGTAGCTGCACGTAACGGTCCTGCTACGATCAATGGACATGCATGTGGCTGTGAAAGAGTCATGATGGGAGTAGAAGAACTCAACTTCGACGATGCAGAGGAACCATCACATTATTCTTCATGTCCAACGACAGACGCCATTCTATCTACTTCTATACTACCACTGGGGTCTCTCTCTGCTGATCCTTCCGCCACTTCTGGTATGATTTTATATCTGCTCCATTCTATCATTAATACATCATCTTTTAGGCTCTTCATTCGCAGATACTCTTCAAAGAGAGCATCCTAATGCTGCCTTTCGGGAAGTGCTCGCTCAGGTACCTCAGATTCGTGAAAACATCAATACCGAGGTGGCAGCATTTACAAATAGCCCACAATCAGGTCAACGTCGACCAAGATCAGAATCTGCGGAGGTTTGTGCCTTGTGCACTCCTTGTATATATTATTTACAATTTACAGGAGGCTCTATTAACTCTTGGTGGGCGACATGATTCGACTCGTCGCCGCTCTCAAAGTCTGGCTGCCGAGAATGCCATGGAGGTTGCAGAAACTGTCGCCAATTCCTCAGACGATGATATCGACTTCGAAGCGCTAGCTCCTCAAAGTTCCGCGGACCTCATTCACAATATTCGCCAACATCTTCCTTCGAGTACTATTCGCGATAATACTGGATTCTCCCTTACTCTGGATCCTAGTTATCATCCGCGTCCCGGCAGTGCAATCGTTGCTCAAACCTTTCTGAACGCTCTGTTTTTGCATCATGGCGCTAGAGAAGTCATTCCAACGCC

P2（2495bp）

GTCGAGTAACATCACGCCATAAACGCTCAATTCGGATGTTATGAACACTTCTTTACAGGAAGTCAGTGTTAGGTAAATGAAAATATCAAACACTTACCTTCCCCATATGTATGAGCCACGCTCACTACCATAGTTTGTCTCCATAAATTCCGCCACACGAAGATTCTCTACTCCATGATCTCCGCGTACTCTGCTAGGTGTCCCATACTCCTCACGTGCCTGATGGAACACATCCAGTACTGTGTCTGCACGGTTATTATCACTTGCACGAATGCCAGTTACTAGTCGAGAATAACCATCGATGAATGCGTGAATCACAATACGATACTTGATGAGACCTATATTTAATTTAGTGATTAGATCGTTTTCTGAGACCAAAATACGTACCGTGCTGGCCGTCATGATGCCATAAAGAGTTTGGGCCTGGTACACGATATGTCCGACGTCCAATCAAGCGAGCAGTAAGACCAGCTGGAGTTCCCATTACACGTTCATAAGATGCTCGTATTCTCTCTCTCGAAACGTGATGTCCCATCTCCCGTATCTGTCCTGTAATCATGCGTCGGCCAAATGAAGGAAAGATCTCCAAGATATGGTGCATGATAATATCCAACTCCTGGTCCGTAAGCTGAGACATTGGCGCAGTTGAAGACCGATAGAAACGAAGACTCTGTCCGGAGTCTGGATCCTCATAAGTCACGTACACTGGTGGACATGGCTGAACAAGTCCTGCTTCCAATGCTCGCCGTCGGACCGTACGTGAAGAACAATCAAAAATAGGTCCTAAATGAGTAGGTCCACGGAGTTCGAGAGCACCTTCCAAGATGTTTGGCTCAATAATTGTTCGAGGTCTACCACGACGACCAGTATACAATGTATAGATAGTCTAGAGTAGATTAATATAAATAGTGAACGCTTGAATCCAAAACATACCTGTAGTTGCCGAGTAGAACCACCATCGCCTGAGCTATTAGCTGCTCGTTCCAACGCATTCAACATGTTCATGAGGCCTTCGTGTATATCCTCGTACTCCTCAGTAGAAAGCAAATACTGTCGCTAAAGAATATATGAATATATTATCAGAAGGAGTCAAAGTATGTACTATACCTCTGCCACAGTTCCAAGAAAGCGGTTTACCACCTGATGTTGATGCTCCAGACGCTGTCGGTCACCAATCTGAGTCTGAATAGCTGTACGAACACCCCGACCCAGCTCATAATATGCAAGACGTAGTGTTTCCACAGTTTGCTCTGTAGAAAGATTTAGAGATGGATCGCCAGTGCCAGATTGAGCATTAAGAGAAAGATAAAGTCCAGATGCAAGAAGAAAAAGTAGCCATCGTCGAAGATACATGATGGGTCGAAAGCAAGAAAGATTATGTAAGTATCAAAAAAAACTGTCTAATCATCTGTATCACTATCAGAATCGATCTGCTGTTTGAGCTGACGTGCTGTCTTCTTCTTCCTTTTCCCCTTCTTCAAAGTCTCTCCACCAGGAAGTAGCAATGTCCGCTTACAAAGTCCATGCTCCACCGTAAATATACCAAATCCCATGTCACGTTGCTCCTGCACCGAAAGTCCAACATCCGACAACACAAACAGGTAGAGCTCTTCAAAGCCTTCTACAACCTGATTAGCCGCACATCCCAACCGTTGAAGCTCACTAGCTGCTCCCATCTGCAACCAATGCACAATTGACGCCTCTGTAGTCACCGATGGCTCAACAATAATCCCTGCCTCCACCATATCAACCACGAGAAGATAGGAAGTTAATCGTCCAAAAGCAGGGAGACGAGTCTTCACCAGCGCTTTGACAAGTCCATCAAAGTCTGCACGGTAAATACGAACCAGCTCCAGAATCTCCATACGTCTATCCCAATATGTCTGAGCACATTTTGTAGCTCGACCTTTGGTAACTCCATGAGCGGCATTAGAACAGAAGAACTTCTCCCCTTGTATCTTGCCGTCCCAAGGTGTCGTTAAGAAGGCTGACCAGCTGTCCAAATCGGCAAAGTAAAGAGAGTGTCCCGAAGTGCGAGCAGCGGGAGTATTGAATAGGATACCGCGCCAGATCAAAAGACTGAAGATCTTGCTCTGATTGAGTGGATGAGCAGAATCGAACGGTCCTCCAATACGTGTGACTGCCTGACGTGAAGGTGCATGATTCCGGAAGGCTAGAAATGAATCGGGGCGTTTTTGAATATTGCTGATGGCTTTCGAAGGTAACAGCGATGATGTAGATTTATGTGCATGCCATGACTGACGAAGGAAGTCGACAAAGGAGTTCTTTGCAGCGGTGGATAGGACAGCTCCTTGGTTGGAAGACGGTGGAAAGGTATAAGGGATAGAAGGAGGGATAGAATTGGATGAGAGAGTAGCAGTCTTCGATTTAAGTTGAAGGTTTGTCTGCATATAGTTGTCTCTAGCCAAGGCGAGAGCGTCGAGCGCGTCTATAAAGCTACCATCCTGGTAGCGTGGATGGTGGATGATTCCGTC

P4（206bp）

GCGCTGAAGACCGATAAAAAACGTACAACGTGTGGACGTTACTGTCATTCCATGTCCATCCACTCCTTGGCGTCCTCGATCTCAGAGGCAACGCAATCGCCGAATGCTGTAACGTCTGCATCGTCAAAGATATCAGAGCTCCTACTGTTGTCGAACGCGGTTGTGTCGACGTCGTCGAAGATGTCGGAGCTATTTTCGCCCCCAAA

P5（256bp）

TTCATGTTAAGTGGGTGCATTTATAAACGTAGGAAACTTACTCGATGGAAGAAATTGCGAGATCGCCCAAATAGTGCGTTGCTTGAATACTCTCGAGTCAGCCTTCTGGGCCGTCTGCTTCTTCTCCTTCGGAGCAGGGGCCTTGGTATTTGCGTCTGGTACAGCTACCGTTTCCACGCCATTCCGTATTTCACTCGTAACCTGAAGACGTCTGGGTTTGGGGAATGGTCGACGAACAAGAAAGTCGAGCGGTTTG

P6（203bp）

TATGCGTACGCTTCAACGAATCGTGTAGCATGGTGATGCGACGTGGCATTAACTGTGTTTAAACGTCAAACGCAGTTGTATAGTAGCATGAAAAATACACACCTTTTTCTGAAACCCCAAGCCCCGCGGCGAGCGAGCCTCTCGCTATCGGATTGTCGCAGCGCGAAACGACGACCGTAGATGATGGTGGGAGGGAAGATAGA

P7（258bp）

GTGTCGAGGATTGCGAAAGACCGGAAATCATTGATGCGTATGCGTACGCTTCAACGAATCGTGTAGCATGGTGATGCGACGTGGCATTAACTGTGTTTAAACGTCAAACGCAGTTGTATAGTAGCATGAAAAATACACACCTTTTTCTGAAACCCCAAGCCCCGCGGCGAGCGAGCCTCTCGCTATCGGATTGTCGCAGCGCGAAACGACGACCGTAGATGATGGTGGGAGGGAAGATAGATATCCTGTGTCCCCGTC

P8（1521bp）

CACTCCAAAGTTATCGCCCAGAGGAACGTCAAAGCCGCTCTTGAATTCAGTAAAGAATTCATGTGTCCCAAAGCTTCGTGCTGTTGTTCCTGGCTCGAGTTTGAGAAGAGATTTCCAGAAGATCTTGTTCTTCAACGCTTGTCGATCGATAGACTCCATATTCTCCAAGTCAGATGGCTGGTAAAGGAAAATGTATCAGCGTGATTAGTATGGAGAGAAAAGCAAGAAATACCTGACGATCAAATAGACCTAGAACCGCAGCAATAGCTTCAGAGATTGGATCTCCTATGCGTTCAGGCCATTGACGAAGTAGATTAGCTTGAAGAGGATCGAACTTCTCAACGAGTTGGATATCCACGACAGCCTCTAAACCCATGAAAAGAGCGACCATAAAAGCCGGAGAGAGACCAGGATGAAGTGCCCCAGTAAGTGCGAGAAAAATAGCGATAAGACTGCCGTAACTTTTAGCCTTGATTAGTCGATCTCTCGTGAGAGCCATATCAATATTGAGGGAGAAATATTCCGGCTCTGAGCTGACTTGCTGGAAGATCTCCTTGTCATGGAACATAAGTTCGATAGCGTGACCTAACATTTCACGAAGAACTCCTTCGCCAAAGCCCCATTCACTATGATAGGAATGTTAGTAAGAAAGAGATAGAGTTTGAAGATTGAGGGCTTACATGTTGACGTGGATGTTATCCACATGAAATAGCTGAGAGATGCTAGAAAAGGTTGTCATGTTGACACCTGGCGTTGGAATGACTTCTCTAGCGCCATGATGCAAAAACAGAGCGTTCAGAAAGGTTTGAGCAACGATTGCACTGCCGGGACGCGGATGATAACTAGGATCCAGAGTAAGGGAGAATCCAGTATTATCGCGAATAGTACTCGAAGGAAGATGTTGGCGAATATTGTGAATGAGGTCCGCGGAACTTTGAGGAGCTAGCGCTTCGAAGTCGATATCATCGTCTGAGGAATTGGCGACAGTTTCTGCAACCTCCATGGCATTCTCGGCAGCCAGACTTTGAGAGCGGCGACGAGTCGAATCATGTCGCCCACCAAGAGTTAATAGAGCCTCCTGTAAATTGTAAATAATATATACAAGGAGTGCACAAGGCACAAACCTCCGCAGATTCTGATCTTGGTCGACGTTGACCTGATTGTGGGCTATTTGTAAATGCTGCCACCTCGGTATTGATGTTTTCACGAATCTGAGGTACCTGAGCGAGCACTTCCCGAAAGGCAGCATTAGGATGCTCTCTTTGAAGAGTATCTGCGAATGAAGAGCCTAAAAGATGATGTATTAATGATAGAATGGAGCAGATATAAAATCATACCAGAAGTGGCGGAAGGATCAGCAGAGAGAGACCCCAGTGGTAGTATAGAAGTAGATAGAATGGCGTCTGTCGTTGGACATGAAGAATAATGTGATGGTTCCTCTGCATCGTCGAAGTTGAGTTCTTCTACTCCCATCATGACTCTTTCACAGCCACATGCATGTCCATTGATCGTAGCAGGACC

P9（1569bp）

GCTACCAGCGACCTATGAAGAGTCAGTCGCTGCTTGGCGTCTGGCTCAGCGTACACTTTTGGAGTTTGACGCTCGCTTGGTCTGGCTTGTTGACGTCCGCATGGCGTACTACACACCCCAAGCAAAACGCCCTCCCATACGCAATGTCATTGGGGCCCTAACGGACCAGCTTGATGTTGCCGAAAATTGCTTGCGGGTATGTCTGTCCATCTATCGCTTTTGCGTTTTAATCACTGATCACACTATTCAGTCCGGAATACCTTGCTGGCTCTCTCGATTGTTGAATGCAGTAGATGGCGTGAAGGTGGCTAAGTGGTACGACGATGTTGCTGTTGAAGACCTTCCCACTCGCAAGGTCGATGTTTCCATGTCTTTCGCCAACTTCTCGCCACCTCGTCCAATCATCTACACGGGGCAGGCAGGCAACTTAGACCGGTATCGGGCGATGGCAGAGTATATGTCACAGCTCGCCTTTCCCAAGCGCACAATCTATGGAGCAGAAGGCTCCCGTCCTGTACTGGATCCAGATGTTGCAGTTTTTACACCAGCCGAGGCAAGTGCCGCCAGGTCGGGATCAGCGTCTGAAGCTGGTCCATCCAGAATCGTTCGGCCTCAAGCAAGAGGTGTTCCTCCTTGTATGTTCCTTTCTATGTCTATTTGCCTATCGTAACTGACATTGTACAGACGCCAAACCCAAGCCCGCCAAAAAACAAGATCGAAACAAATTCACTGATGTCGTCTCTCCGCTCATGCCACGACCATTGCGTTTTTGGATGGAGGCTAGTGAATATGCTGGACGTGGTTTCAATCCGAATACACCCGTGCGGGAAGGGTTTTCGCGAGGTTACATCTTTCCAGACCCCAATCTGTTAGCTGGACACCATGATCTGACATCGCGCGCTGCTTATTTTACAACATATCTGAAGTTGCGCCAGGTTCTCATCTATAGGCTGTCTTGCGCAGAGAACAACGACATGCCTGTCAGTGGATGGCGTAAAGTCCTCGGGATGGAACTTCACGGGTCCCGTACCGACACTGCGTCTTCGAAAGCCCGGAAAGATATACAGCAGTCATTGGGAAAGTGTATCGAGGGTATGGGAGTAAGTTGTATTCTGGTCTTACACTTTTCGATCGATAATTAATTGTTTTCAGGTCTCTTTAGATCTCTCCAACCTCAAGGAGGCACCAGTCATGTGGCGAGATGTCATCTTGCAGCCATTTCAAGAGCCGCCTGTCAACGTCGCGAAAGAAATCCTGTGGGAGATGTTCGAGATCTCCTTCCGCATGGAGTTTATGTCTCTCGATTCCATGGTGTATGAGCCAAAGTCAGCTGGATTCGACGCACCGATGCCCGATGAAGGGGAAGGGGAGACAGGGGACTTCGATGATCTTGACGCATCTGACGATACTCAGCGTGCCATTAACGTCATTACAGCGATCAAGCATTTCAATGGCAGGCTTGTTCCTGAGAGTGTGGAAGACGGTCGGAGAGGCTTTGCTTCCCAGGATATGCTGGAGCGTCGCAAGAGTCTTTGGGGGCTGTATAGGGTTATGCGGACTTGGGTGAAG

P10（1034bp）

AGTTTTTACACCAGCCGAGGCAAGTGCCGCCAGGTCGGGATCAGCGTCTGAAGCTGGTCCATCCAGAATCGTTCGGCCTCAAGCAAGAGGTGTTCCTCCTTGTATGTTCCTTTCTATGTCTATTTGCCTATCGTAACTGACATTGTACAGACGCCAAACCCAAGCCCGCCAAAAAACAAGATCGAAACAAATTCACTGATGTCGTCTCTCCGCTCATGCCACGACCATTGCGTTTTTGGATGGAGGCTAGTGAATATGCTGGACGTGGTTTCAATCCGAATACACCCGTGCGGGAAGGGTTTTCGCGAGGTTACATCTTTCCAGACCCCAATCTGTTAGCTGGACACCATGATCTGACATCGCGCGCTGCTTATTTTACAACATATCTGAAGTTGCGCCAGGTTCTCATCTATAGGCTGTCTTGCGCAGAGAACAACGACATGCCTGTCAGTGGATGGCGTAAAGTCCTCGGGATGGAACTTCACGGGTCCCGTACCGACACTGCGTCTTCGAAAGCCCGGAAAGATATACAGCAGTCATTGGGAAAGTGTATCGAGGGTATGGGAGTAAGTTGTATTCTGGTCTTACACTTTTCGATCGATAATTAATTGTTTTCAGGTCTCTTTAGATCTCTCCAACCTCAAGGAGGCACCAGTCATGTGGCGAGATGTCATCTTGCAGCCATTTCAAGAGCCGCCTGTCAACGTCGCGAAAGAAATCCTGTGGGAGATGTTCGAGATCTCCTTCCGCATGGAGTTTATGTCTCTCGATTCCATGGTGTATGAGCCAAAGTCAGCTGGATTCGACGCACCGATGCCCGATGAAGGGGAAGGGGAGACAGGGGACTTCGATGATCTTGACGCATCTGACGATACTCAGCGTGCCATTAACGTCATTACAGCGATCAAGCATTTCAATGGCAGGCTTGTTCCTGAGAGTGTGGAAGACGGTCGGAGAGGCTTTGCTTCCCAGGATATGCTGGAGCGTCGCAAGAGTCTTTGGGGGCTGTATAGGGTTATGCGGACTTGGGTGAA

P11（1463bp）

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P12（1810bp）

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P14（1111bp）

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实施例3：‘农万金8号’共进行了多次稳产性试验，结果表明，‘农万金8号’具备工厂化栽培的要求，产量显著高于亲本F0303（农金3号）。

稳产性试验参试菌株：‘农金3号’（Flv0303）。

试验地点：福建万辰生物科技股份有限公司。

试验安排：菌种统一制作，试验点按照当地生产管理方式进行工厂化栽培，瓶栽，采用多区制移动床架模式栽培（塑料瓶,0.43kg（干料）/瓶）。

试验结果：试验制种时期‘农万金8号’菌丝在 PDA 中菌丝较浓密，最适生长温度为 20 ℃。‘农万金8号’栽培结果如图1所示。

栽培发现：(1)接种到采收的时间，‘农万金8号’与对照菌株‘农金3号’相同均为45天；(2) ‘农万金8号’（Flv0012）平均产量365.35g/瓶，对照品种‘农金3号’（Flv0303）平均产量为284.02g/瓶，“农万金8号”（Flv0012）比对照菌株增产28.6%，(3)‘农万金8号’（Flv0012）其菌盖大小、菌盖厚度和菌柄直径的数据均优于对照菌株‘农金3号’（Flv0303）。(4) 对于商品外观，‘农万金8号’（Flv0012）菇体洁白、菇柄坚挺，基部绒毛较少，符合市场需求的。

稳产性试验菌株产量结果统计

表3杂交子批次试验结果

试验菌株产量统计学分析：三个批次试验结果，‘农万金8号’（Flv0012）平均产量365.35g/瓶，对照品种‘农金3号’（Flv0303）平均产量为284.02g/瓶，“农万金8号”（Flv0012）比对照品种增产28.6%，‘农万金8号’（Flv0012）菇体洁白、菇柄坚挺，基部绒毛较少，符合市场需求的。

实施例4：‘农万金8号’生产性试验结果表明，适合工厂化生产。

参试菌株：’农金3号’（Flv0303）。

试验地点：福建万辰生物科技股份有限公司。

试验安排：菌种统一制作，杂交子‘农万金8号’总瓶数3200瓶，对照亲本’农金3号’（Flv0303）总瓶数3200瓶，试验点按照当地生产管理方式进行工厂化栽培，采用多区制移动床架模式，采用塑料瓶栽培（同实施例3）。

菌株发菌速度统计：两个品种菌丝生长速度相近，出菇时间一样，从接种到采收均为45天，两个品种没有差异。

‘农万金8号’（Flv0012）：带根鲜菇平均产量为400.5g/瓶，‘农金3号’（Flv0303）：带根鲜菇平均产量为278.9g/瓶，‘农万金8号’（Flv0012）产量比对照菌株‘农金3号’（Flv0303）高43.6%。

表4生产性试验采收记录表 （产量 g）

注：⑴ Flv0303为省认定品种‘农金3号’、Flv0012为杂交品种‘农万金8号’、⑵生产性试验每个测产区随机挑选16瓶，平均单产(g/瓶)=(测产区1+测产区2+测产区3+测产区4+测产区5)/80瓶。

生产性试验结果表明：‘农金3号’菌盖较小、菌柄较细，菇体较软，菇体基部绒毛多，商品外观不佳；‘农万金8号’的菌盖略大、菌柄略粗，菇体坚挺，基部绒毛少，商品外观良好，适合于市场需求。

SEQUENCE LISTING

<110> 福建农林大学

福建万辰生物科技股份有限公司

<120> 一种适合工厂化栽培的金针菇农万金8号及其分子鉴定方法

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<170> PatentIn version 3.3

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<400> 20

ccctctacca ggatgaacca 20

<210> 21

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 21

gtatcctatc ccagccgaca 20

<210> 22

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 22

agtgttgagg ttgacgagtg 20

<210> 23

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 23

atctctgtgt cgtgtgcttc 20

<210> 24

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 24

gggtcagata gccaatgctc 20

<210> 25

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 25

gtcaggactc gccattagac 20

<210> 26

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 26

cgttcgactc ctttcttcgt 20

<210> 27

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 27

actaatgaac gaccgacagc 20

<210> 28

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 28

tgttggggat ggtagacact 20

<210> 29

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 29

ctacttgacc acagacgcag 20

<210> 30

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 30

aggatacggg catacacctt 20

<210> 31

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 31

tctaccaacc ccgtcgataa 20

<210> 32

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 32

cgacatttcc aatacgccac 20

<210> 33

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 33

ccctatcgta acagtcagcc 20

<210> 34

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 34

agtcatccca accgacattc 20

<210> 35

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 35

gctccttcac accacgaata 20

<210> 36

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 36

tttgtagtcc atccccacca 20

<210> 37

<211> 1146

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 37

cagacgacca acatcgactt gtcgcaggat gctgcaatga tttggagtct ctgctttcag 60

gcgattgaag agattctaat tgctagtggc actgttcttc caccctccct tgaccatggc 120

gacgtcaatc ctctctggat tgtcctcaag ccaggtgagc cacctagaga tggtggacgt 180

cttggaggtc gtgtctattc ccgagaccgc aactgggata atcctcaatt ctggacgaaa 240

tcacatatca taagcctagg tttcaaaggt catatgcgtt ctatttcacc ggaaaaaccg 300

gtaatcttct tgggtgagtt tgaacattct attatacttc aatgtactca ttactactcg 360

tagctgcacg taacggtcct gctacgatca atggacatgc atgtggctgt gaaagagtca 420

tgatgggagt agaagaactc aacttcgacg atgcagagga accatcacat tattcttcat 480

gtccaacgac agacgccatt ctatctactt ctatactacc actggggtct ctctctgctg 540

atccttccgc cacttctggt atgattttat atctgctcca ttctatcatt aatacatcat 600

cttttaggct cttcattcgc agatactctt caaagagagc atcctaatgc tgcctttcgg 660

gaagtgctcg ctcaggtacc tcagattcgt gaaaacatca ataccgaggt ggcagcattt 720

acaaatagcc cacaatcagg tcaacgtcga ccaagatcag aatctgcgga ggtttgtgcc 780

ttgtgcactc cttgtatata ttatttacaa tttacaggag gctctattaa ctcttggtgg 840

gcgacatgat tcgactcgtc gccgctctca aagtctggct gccgagaatg ccatggaggt 900

tgcagaaact gtcgccaatt cctcagacga tgatatcgac ttcgaagcgc tagctcctca 960

aagttccgcg gacctcattc acaatattcg ccaacatctt ccttcgagta ctattcgcga 1020

taatactgga ttctccctta ctctggatcc tagttatcat ccgcgtcccg gcagtgcaat 1080

cgttgctcaa acctttctga acgctctgtt tttgcatcat ggcgctagag aagtcattcc 1140

aacgcc 1146

<210> 38

<211> 2495

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 38

gtcgagtaac atcacgccat aaacgctcaa ttcggatgtt atgaacactt ctttacagga 60

agtcagtgtt aggtaaatga aaatatcaaa cacttacctt ccccatatgt atgagccacg 120

ctcactacca tagtttgtct ccataaattc cgccacacga agattctcta ctccatgatc 180

tccgcgtact ctgctaggtg tcccatactc ctcacgtgcc tgatggaaca catccagtac 240

tgtgtctgca cggttattat cacttgcacg aatgccagtt actagtcgag aataaccatc 300

gatgaatgcg tgaatcacaa tacgatactt gatgagacct atatttaatt tagtgattag 360

atcgttttct gagaccaaaa tacgtaccgt gctggccgtc atgatgccat aaagagtttg 420

ggcctggtac acgatatgtc cgacgtccaa tcaagcgagc agtaagacca gctggagttc 480

ccattacacg ttcataagat gctcgtattc tctctctcga aacgtgatgt cccatctccc 540

gtatctgtcc tgtaatcatg cgtcggccaa atgaaggaaa gatctccaag atatggtgca 600

tgataatatc caactcctgg tccgtaagct gagacattgg cgcagttgaa gaccgataga 660

aacgaagact ctgtccggag tctggatcct cataagtcac gtacactggt ggacatggct 720

gaacaagtcc tgcttccaat gctcgccgtc ggaccgtacg tgaagaacaa tcaaaaatag 780

gtcctaaatg agtaggtcca cggagttcga gagcaccttc caagatgttt ggctcaataa 840

ttgttcgagg tctaccacga cgaccagtat acaatgtata gatagtctag agtagattaa 900

tataaatagt gaacgcttga atccaaaaca tacctgtagt tgccgagtag aaccaccatc 960

gcctgagcta ttagctgctc gttccaacgc attcaacatg ttcatgaggc cttcgtgtat 1020

atcctcgtac tcctcagtag aaagcaaata ctgtcgctaa agaatatatg aatatattat 1080

cagaaggagt caaagtatgt actatacctc tgccacagtt ccaagaaagc ggtttaccac 1140

ctgatgttga tgctccagac gctgtcggtc accaatctga gtctgaatag ctgtacgaac 1200

accccgaccc agctcataat atgcaagacg tagtgtttcc acagtttgct ctgtagaaag 1260

atttagagat ggatcgccag tgccagattg agcattaaga gaaagataaa gtccagatgc 1320

aagaagaaaa agtagccatc gtcgaagata catgatgggt cgaaagcaag aaagattatg 1380

taagtatcaa aaaaaactgt ctaatcatct gtatcactat cagaatcgat ctgctgtttg 1440

agctgacgtg ctgtcttctt cttccttttc cccttcttca aagtctctcc accaggaagt 1500

agcaatgtcc gcttacaaag tccatgctcc accgtaaata taccaaatcc catgtcacgt 1560

tgctcctgca ccgaaagtcc aacatccgac aacacaaaca ggtagagctc ttcaaagcct 1620

tctacaacct gattagccgc acatcccaac cgttgaagct cactagctgc tcccatctgc 1680

aaccaatgca caattgacgc ctctgtagtc accgatggct caacaataat ccctgcctcc 1740

accatatcaa ccacgagaag ataggaagtt aatcgtccaa aagcagggag acgagtcttc 1800

accagcgctt tgacaagtcc atcaaagtct gcacggtaaa tacgaaccag ctccagaatc 1860

tccatacgtc tatcccaata tgtctgagca cattttgtag ctcgaccttt ggtaactcca 1920

tgagcggcat tagaacagaa gaacttctcc ccttgtatct tgccgtccca aggtgtcgtt 1980

aagaaggctg accagctgtc caaatcggca aagtaaagag agtgtcccga agtgcgagca 2040

gcgggagtat tgaataggat accgcgccag atcaaaagac tgaagatctt gctctgattg 2100

agtggatgag cagaatcgaa cggtcctcca atacgtgtga ctgcctgacg tgaaggtgca 2160

tgattccgga aggctagaaa tgaatcgggg cgtttttgaa tattgctgat ggctttcgaa 2220

ggtaacagcg atgatgtaga tttatgtgca tgccatgact gacgaaggaa gtcgacaaag 2280

gagttctttg cagcggtgga taggacagct ccttggttgg aagacggtgg aaaggtataa 2340

gggatagaag gagggataga attggatgag agagtagcag tcttcgattt aagttgaagg 2400

tttgtctgca tatagttgtc tctagccaag gcgagagcgt cgagcgcgtc tataaagcta 2460

ccatcctggt agcgtggatg gtggatgatt ccgtc 2495

<210> 39

<211> 206

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 39

gcgctgaaga ccgataaaaa acgtacaacg tgtggacgtt actgtcattc catgtccatc 60

cactccttgg cgtcctcgat ctcagaggca acgcaatcgc cgaatgctgt aacgtctgca 120

tcgtcaaaga tatcagagct cctactgttg tcgaacgcgg ttgtgtcgac gtcgtcgaag 180

atgtcggagc tattttcgcc cccaaa 206

<210> 40

<211> 256

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 40

ttcatgttaa gtgggtgcat ttataaacgt aggaaactta ctcgatggaa gaaattgcga 60

gatcgcccaa atagtgcgtt gcttgaatac tctcgagtca gccttctggg ccgtctgctt 120

cttctccttc ggagcagggg ccttggtatt tgcgtctggt acagctaccg tttccacgcc 180

attccgtatt tcactcgtaa cctgaagacg tctgggtttg gggaatggtc gacgaacaag 240

aaagtcgagc ggtttg 256

<210> 41

<211> 203

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 41

tatgcgtacg cttcaacgaa tcgtgtagca tggtgatgcg acgtggcatt aactgtgttt 60

aaacgtcaaa cgcagttgta tagtagcatg aaaaatacac acctttttct gaaaccccaa 120

gccccgcggc gagcgagcct ctcgctatcg gattgtcgca gcgcgaaacg acgaccgtag 180

atgatggtgg gagggaagat aga 203

<210> 42

<211> 258

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 42

gtgtcgagga ttgcgaaaga ccggaaatca ttgatgcgta tgcgtacgct tcaacgaatc 60

gtgtagcatg gtgatgcgac gtggcattaa ctgtgtttaa acgtcaaacg cagttgtata 120

gtagcatgaa aaatacacac ctttttctga aaccccaagc cccgcggcga gcgagcctct 180

cgctatcgga ttgtcgcagc gcgaaacgac gaccgtagat gatggtggga gggaagatag 240

atatcctgtg tccccgtc 258

<210> 43

<211> 1521

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 43

cactccaaag ttatcgccca gaggaacgtc aaagccgctc ttgaattcag taaagaattc 60

atgtgtccca aagcttcgtg ctgttgttcc tggctcgagt ttgagaagag atttccagaa 120

gatcttgttc ttcaacgctt gtcgatcgat agactccata ttctccaagt cagatggctg 180

gtaaaggaaa atgtatcagc gtgattagta tggagagaaa agcaagaaat acctgacgat 240

caaatagacc tagaaccgca gcaatagctt cagagattgg atctcctatg cgttcaggcc 300

attgacgaag tagattagct tgaagaggat cgaacttctc aacgagttgg atatccacga 360

cagcctctaa acccatgaaa agagcgacca taaaagccgg agagagacca ggatgaagtg 420

ccccagtaag tgcgagaaaa atagcgataa gactgccgta acttttagcc ttgattagtc 480

gatctctcgt gagagccata tcaatattga gggagaaata ttccggctct gagctgactt 540

gctggaagat ctccttgtca tggaacataa gttcgatagc gtgacctaac atttcacgaa 600

gaactccttc gccaaagccc cattcactat gataggaatg ttagtaagaa agagatagag 660

tttgaagatt gagggcttac atgttgacgt ggatgttatc cacatgaaat agctgagaga 720

tgctagaaaa ggttgtcatg ttgacacctg gcgttggaat gacttctcta gcgccatgat 780

gcaaaaacag agcgttcaga aaggtttgag caacgattgc actgccggga cgcggatgat 840

aactaggatc cagagtaagg gagaatccag tattatcgcg aatagtactc gaaggaagat 900

gttggcgaat attgtgaatg aggtccgcgg aactttgagg agctagcgct tcgaagtcga 960

tatcatcgtc tgaggaattg gcgacagttt ctgcaacctc catggcattc tcggcagcca 1020

gactttgaga gcggcgacga gtcgaatcat gtcgcccacc aagagttaat agagcctcct 1080

gtaaattgta aataatatat acaaggagtg cacaaggcac aaacctccgc agattctgat 1140

cttggtcgac gttgacctga ttgtgggcta tttgtaaatg ctgccacctc ggtattgatg 1200

ttttcacgaa tctgaggtac ctgagcgagc acttcccgaa aggcagcatt aggatgctct 1260

ctttgaagag tatctgcgaa tgaagagcct aaaagatgat gtattaatga tagaatggag 1320

cagatataaa atcataccag aagtggcgga aggatcagca gagagagacc ccagtggtag 1380

tatagaagta gatagaatgg cgtctgtcgt tggacatgaa gaataatgtg atggttcctc 1440

tgcatcgtcg aagttgagtt cttctactcc catcatgact ctttcacagc cacatgcatg 1500

tccattgatc gtagcaggac c 1521

<210> 44

<211> 1569

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 44

gctaccagcg acctatgaag agtcagtcgc tgcttggcgt ctggctcagc gtacactttt 60

ggagtttgac gctcgcttgg tctggcttgt tgacgtccgc atggcgtact acacacccca 120

agcaaaacgc cctcccatac gcaatgtcat tggggcccta acggaccagc ttgatgttgc 180

cgaaaattgc ttgcgggtat gtctgtccat ctatcgcttt tgcgttttaa tcactgatca 240

cactattcag tccggaatac cttgctggct ctctcgattg ttgaatgcag tagatggcgt 300

gaaggtggct aagtggtacg acgatgttgc tgttgaagac cttcccactc gcaaggtcga 360

tgtttccatg tctttcgcca acttctcgcc acctcgtcca atcatctaca cggggcaggc 420

aggcaactta gaccggtatc gggcgatggc agagtatatg tcacagctcg cctttcccaa 480

gcgcacaatc tatggagcag aaggctcccg tcctgtactg gatccagatg ttgcagtttt 540

tacaccagcc gaggcaagtg ccgccaggtc gggatcagcg tctgaagctg gtccatccag 600

aatcgttcgg cctcaagcaa gaggtgttcc tccttgtatg ttcctttcta tgtctatttg 660

cctatcgtaa ctgacattgt acagacgcca aacccaagcc cgccaaaaaa caagatcgaa 720

acaaattcac tgatgtcgtc tctccgctca tgccacgacc attgcgtttt tggatggagg 780

ctagtgaata tgctggacgt ggtttcaatc cgaatacacc cgtgcgggaa gggttttcgc 840

gaggttacat ctttccagac cccaatctgt tagctggaca ccatgatctg acatcgcgcg 900

ctgcttattt tacaacatat ctgaagttgc gccaggttct catctatagg ctgtcttgcg 960

cagagaacaa cgacatgcct gtcagtggat ggcgtaaagt cctcgggatg gaacttcacg 1020

ggtcccgtac cgacactgcg tcttcgaaag cccggaaaga tatacagcag tcattgggaa 1080

agtgtatcga gggtatggga gtaagttgta ttctggtctt acacttttcg atcgataatt 1140

aattgttttc aggtctcttt agatctctcc aacctcaagg aggcaccagt catgtggcga 1200

gatgtcatct tgcagccatt tcaagagccg cctgtcaacg tcgcgaaaga aatcctgtgg 1260

gagatgttcg agatctcctt ccgcatggag tttatgtctc tcgattccat ggtgtatgag 1320

ccaaagtcag ctggattcga cgcaccgatg cccgatgaag gggaagggga gacaggggac 1380

ttcgatgatc ttgacgcatc tgacgatact cagcgtgcca ttaacgtcat tacagcgatc 1440

aagcatttca atggcaggct tgttcctgag agtgtggaag acggtcggag aggctttgct 1500

tcccaggata tgctggagcg tcgcaagagt ctttgggggc tgtatagggt tatgcggact 1560

tgggtgaag 1569

<210> 45

<211> 1034

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 45

agtttttaca ccagccgagg caagtgccgc caggtcggga tcagcgtctg aagctggtcc 60

atccagaatc gttcggcctc aagcaagagg tgttcctcct tgtatgttcc tttctatgtc 120

tatttgccta tcgtaactga cattgtacag acgccaaacc caagcccgcc aaaaaacaag 180

atcgaaacaa attcactgat gtcgtctctc cgctcatgcc acgaccattg cgtttttgga 240

tggaggctag tgaatatgct ggacgtggtt tcaatccgaa tacacccgtg cgggaagggt 300

tttcgcgagg ttacatcttt ccagacccca atctgttagc tggacaccat gatctgacat 360

cgcgcgctgc ttattttaca acatatctga agttgcgcca ggttctcatc tataggctgt 420

cttgcgcaga gaacaacgac atgcctgtca gtggatggcg taaagtcctc gggatggaac 480

ttcacgggtc ccgtaccgac actgcgtctt cgaaagcccg gaaagatata cagcagtcat 540

tgggaaagtg tatcgagggt atgggagtaa gttgtattct ggtcttacac ttttcgatcg 600

ataattaatt gttttcaggt ctctttagat ctctccaacc tcaaggaggc accagtcatg 660

tggcgagatg tcatcttgca gccatttcaa gagccgcctg tcaacgtcgc gaaagaaatc 720

ctgtgggaga tgttcgagat ctccttccgc atggagttta tgtctctcga ttccatggtg 780

tatgagccaa agtcagctgg attcgacgca ccgatgcccg atgaagggga aggggagaca 840

ggggacttcg atgatcttga cgcatctgac gatactcagc gtgccattaa cgtcattaca 900

gcgatcaagc atttcaatgg caggcttgtt cctgagagtg tggaagacgg tcggagaggc 960

tttgcttccc aggatatgct ggagcgtcgc aagagtcttt gggggctgta tagggttatg 1020

cggacttggg tgaa 1034

<210> 46

<211> 1463

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 46

gccaccttcc gtttactctt ggtaatggcc attctttcga acttttctcg tctcctagta 60

ttccgattat ctggaatgac atgcttagac accgggaagg cattgatcgt cgttatctct 120

tcccatgcgt cacacgcttc atactgggaa atgcgggcgt tagattcgtt attgaactcg 180

acaagcatag ctatgtattc cttatggtct tcctcgtcct cctcttcggt gcgatctatc 240

gttattacat gcgcctctct caacgccgtc caacgaccgt aatgaggaca gtctcgagcg 300

taatgcttcg ggctggtgca aatgtagcag tcaccaggtg gttccttggg actacagcgg 360

gagtcatccc tcacgaagtg gtaacctcct atcgtctgac cgtgtggcca attcttcttg 420

cctactttat ccaccttctt cttgctgcct atcgcgaaga cttcctttgc ctctgctgct 480

aggatcggat taaactctgc ttcttcgtct tctacttctt ccactgtcgt aacatgggcc 540

gatttacgag ggaacggtct gtacgacgaa gatgacgatc ttcgaacatt gcgaggatta 600

gctaaccacg cgttcagcag agcattcgcg ttcgcgtcca ctgaagcagt cagtgatagt 660

accgacgggg tcatagtcgg gttcagatac agtgaccatt ccgtaggcgc ggtatgcagg 720

attcgggtaa tagcggtgat tccatctggg tcggaagggt aaaggaaagg gtgaagcgtg 780

agtcgtcggt ttatgaagtc actgggtgtt tcgttctcgt gattcacttg acgaaatttc 840

atcgcttcaa actccagaat tcgctccgaa tgccattgtc gatgcataaa gcatacccgt 900

aaggcttctc tcatccattc ccaaccgcgg cccagccata ccttgtcggc ttccggaatg 960

ttttgccacc aagtagcagc tttacccgac cacttcgagg gtgcgataac agccagcgcg 1020

ttatgtacct ctggtccgat ccgtgagaga tccgccattt ggaccagata cggaatgaga 1080

gtatctcctt ctccgtccca tcctggtaca accgaactct gtagtttccg gttgatttgc 1140

catggttcga caggacgtgg tagtccaccc gttctagcat caggaccgtc gggaggaccg 1200

ggtggcggag gggcgccccc attcgggaat ccgcttcccc cgctaccgct tggaaatcct 1260

ccccctggga atccgccgtt accgccccct cctccacttc ctcctccgcc gcgccctgga 1320

tgattagggc ctcctccgta gttgcctcca tttcccctcc aatttggtgg gttaggtggt 1380

ccggagctac ctggattatt gaaccccttt cctgcggcgc tataagctgc ctgcgaagaa 1440

aattggttca tcctggtaga ggg 1463

<210> 47

<211> 1810

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 47

gtatcctatc ccagccgaca ccatatcggg ttacatccaa gggcatcaga aaagcatgat 60

tcttccggtt gcattctata tcagtccaga ccctgtcttc aacgggccca acgctttccg 120

tgcggcattc tgtggcgcag tcgtcaccaa gaacagcgca cggaaggtgg aataatttcg 180

ctaatacaac atgggtgtct atctaagcct ccttcctcgc aaaccaacgc tcgtgtcgac 240

tcgcaatgac aatttgctaa gaatatatca gttcagttca gcgcactagc atgagaatgg 300

acccaccctt ccccaaacgc tgtgtcggaa cagatcactt tctgagccgc tgcgactggt 360

ctcgaacgtg ttgtccggaa aagtcatgga aaacttattc cagacctgca gaaaaaattc 420

cctcttctcc agcggcgtgg cgtccacggg gggcctgaaa tgctcctcgt tgtgattcaa 480

gagccacttt ttctggtttt ttgtgaactc caatgcaata actgcaactg agtcagaaag 540

agattggcgg cagaatagga actccaaacg aaccacgatc cacggtgact gcagcaaatt 600

taggcttggg aactctcttc ttctttgctt ttagcgcttt ctgaggtttg ttctcatcga 660

gcgccggggc ctgtaaacgc acgctccctc ggttgggagg catgaaggca gaaagagagg 720

aattgaatgc ctgcccttct gcaaatcaaa acaatcaaaa cacgaacgct ctcgtgcctt 780

aactgttcgc tagcagattc ttccaataga tccaatcaga cgacgacgaa accacagaaa 840

gacatagaac ttttctttat acaggcaata ttcaaccact tagtcgggaa cgtcgttgcc 900

aatgtcgcac gagttaagca gacataattc taccgtattt taattcatac tgtgtactat 960

gtctgctacc aagagctgaa cacgcaatca actccaacga gtcaaattca atcggcgcgc 1020

tgtgcaccgt tgcagtaccc tgggggacaa ctgaccccaa acatcgtaac ggtcgatgca 1080

tcgaagataa agctcctggg caatgggttt atactgctct cgaaggcgag taagctttgt 1140

gaacgctagg tggaggtcgt gttagaaagg gcagagtatc agctgaaatg acaaacattg 1200

ttcaccaggc cagaggcggc gagattcttc cacgcgcaga acatacaaga gctccgccca 1260

tgcgactatg ttggtcttat cgtcgaccac agtttcgatg ccgatagcct catgcgtgat 1320

gagaaggtaa tccggctggg tgacaagaca agcccagtac gtgagatccc gaagtgaggt 1380

gactccggat gcatgtaagt catccaataa aaatgaggcg tcgacattgc ccaagcgttc 1440

ttccagtgtt tcggagatct caggacccgc gacctgaggg cgaacataga ggagctggtc 1500

cctcatgaac ctagagatgt atattaggac gactgaagaa caataacggg ataacccacc 1560

gctgcgctga gctccaagcc cggactcgac gtttacgctt gtcgaaaggg aggataggtc 1620

gatgatccat gatacttggg gaggcagaga tatcacgaac gaagtgcgtc tgttccgttg 1680

aagttcgttc atacctaaat ggggtaactg atgatccggt tggatcttgt tcccacaaga 1740

acaactcaaa ttcttaaata tcagccctga tcaacagtat cgcgctatca cactcgtcaa 1800

cctcaacact 1810

<210> 48

<211> 1459

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 48

atctctgtgt cgtgtgcttc ctggatcttg agtgaatggg gtgttgtcca taataacact 60

cgacgatctg ctggaacatg agggcggaac ggggaaggat tgatttcgtt tcctttggtt 120

ggttttcgtg ctttcttcgg aggaagagat agagaagccg ctatccgaac atcgtgtaaa 180

gcatcttgag acttgagtgc tgggattgta gaagaaaccc gcaagtctgg tgtctccgta 240

tctgccatca atcccataga tcgttcgaaa agcaagccca catctgatga gtggcccaac 300

atgtggaaat gtggtgtggt tgagattgta tctgctgccg atgaaatatt caacgtcacg 360

agaggtactg gtggagatat gggagtaaac cacatgaatt cgtcgaagct aggtggcatc 420

ctgaaggtaa ggtgaaagat ctgaaggtaa agtaaaggac cgttttagac gttgtttagg 480

taatccaagc tgtccgcgtg aaataggatc tgaagggttt tctgctgaac gaatataaat 540

aaaacgagga atgatgaggt gctctgccgt cgccatataa gtacgccgaa cacaaagatt 600

gatagctaca ttgttgctcc tccccttggt atgagcgcca atcgctccgt tgttgtctga 660

atgcattagg agatgtatct ccgaaaatcc tatctggatt aggaaataaa tcagtagttc 720

gagtgccact gcttcgagcc aacagatatc tcgtcctttg actttccatc cctctaccag 780

tcgaaaggcg taccaatgat cttggataat gataccgata ccccaatcgg tggacgcatc 840

gacaaaaatg ccgatatcct gtaacggctg caacgggcga agctgacgaa atgcatatgg 900

atctgatagc cgattgaacc accatatcaa agtcttccgg actgattctg atgcatgccg 960

gcgagagaat tcatgtccgt taaatccaga catgaagttg gatatggcag gaagacgtga 1020

ggatccatct atgtagatga aaataatgtg taccagcgaa ccgtgaagaa cctggatctc 1080

gaggagggag aaggcttcgt gatccgcgat cttgtccagt gcgactgaga tacgtgccag 1140

gaatttgagg cgtttattct ctggaaggga tacccggcgg agaatgaggt cccagtagaa 1200

accgatgaaa accatgtaat agtcgaacca ctcgcccgtt tttgttggat gccacggcgt 1260

gtcgagatta cggattaggt caagtgcacc ttctttgtca aaatggtatc tgaaatatcc 1320

atcgacaaat tttcctgcgc cgtccggtct ctggaatacc gagatgtcgt cctcgtactt 1380

gctaggatga agaagaggga gcccatctga tacggatgcc atggtccaaa tatccaccag 1440

agcattggct atctgaccc 1459

<210> 49

<211> 1111

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 49

gtcaggactc gccattagac cactactcaa gaaactctgc ttgcgtttaa gtatcggaaa 60

agccagggtc atagacgact cacccgttta ttttcgacat ataaatataa tttgagattt 120

acggatatga gtcgttcagc tccatatagc gctgcataga gatgatcaag aagtggtggt 180

ggtgggaaga ggagttgaca tcggccgatc aaactatcgg atcaaatctg cgaacgcgcc 240

acttttcatg tgtatacacc aatatattga ttctagtcat atataagtgc caacgatagt 300

aaaagtgagt agttaagata cgaaactcaa gactgagaac aatgttaagt gcgacgtcga 360

catactcacg taattctatg gtatcatcct cttggacgga tgataattct ggagcgccga 420

tatgagaatc ttgaatcgaa tgtcggttca acagggcaat agaggcggcg ggcatatacg 480

tcaatcttat tcgaagaagc tatgcattgg aatggaatgg atatctatac tctcccggag 540

cactgcccac ctctccagca gatcctcgcg atgcacatac acctcaaaga aatcacccca 600

cttggaggat actaggaaca catactcgtt cggtccaagc ctagtgcacg tgaaatatac 660

cgctgggata ctggcagctt tcccccggcg tatccgggcc tcaagcatct ctataatatc 720

ttccgcaaaa accttcaact tgtgaacaag gaggtacaag tttttcaagt tcggtaagac 780

gccagatccg agtgctttcg tcacttgggg tgtggcggcg aatcggccga gatatagatt 840

gatgactgac ggagcgcgcg acagaaaagc cacggtgtcg ttcgggttgc agccctcgta 900

gtcgatggac aggttgatca aacgggcggc tgccaacatt ggcaagcagg gatgacgact 960

gggagagcta gtccggtgcc taaagctaag ttcaagcgtc tccaatgctg gagcggtcga 1020

agtgcttgga aagttcgtgg aaaattggtt tggcggattc gcttatccgg atggtatgga 1080

gtacgggaag aacgaagaaa ggagtcgaac g 1111

<210> 50

<211> 1793

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 50

actaatgaac gaccgacagc tggcctcctc agccaggagg aaagggagga cccacgacca 60

gcggagtatc ttccaaccga cgagcgcctc actccagatg gccgtgttgc taccctgacg 120

cactcgggag gattcgcatg catggacatc ccttccatcc gcatccttga ggccacagag 180

gagttgccgg attggaagat ggatgcgaga gcagctttca caggcgaagt tttccaggat 240

cttgcacgat gtacggatct agctgaggaa ggtgagcaac tgtttacatt atactatgcg 300

tacatgcctc ctgtgattcc cgactggggg gatacaggag tgatgcccaa tacctccttt 360

acgtttgcga tagcttcgct aatgcgaact ccttttattc tagcagccgc caacgatgta 420

caagccaatg gaccaattct aggaccgcgc gtcaccatca accatggccg actaactgag 480

ctactgcgcc agtattccta tgagacgcgt gcccacctca gcgctctcct tacctatctc 540

gtcgagatca ttgcacgcag taagtactca caataccttt tccatacaca atggttgaaa 600

tacttggccg cagtcctcac gaagtccagc aatttacgag ggttagcagc aatcaccgga 660

gaaaccagca cacatccagg atggaataca ccggttaatg acgagaccca gacagtgacg 720

tttgaaggtc tcgctaacat cctgtgcgac ccacaccttt tccgtacgga ggtaaattta 780

tttaggcaat gggacgatat ggcaactaat ccctcttcac gccaggcctc ttccattgag 840

attttcgaat ccttcaccac gactacgcca accatatcga cgcacgatac gtcagctgac 900

gaggtggtgc atgatgacga aatcggacga agcaacactc ccttaaccat gagactggct 960

gacgatatcg cgtccatgtt caaggacccc gagacgcaag accaaccgtc tcccattatc 1020

cataccaacc atcaatatac tgaagccatt gaagaaggtg cttctattac tcatcgtata 1080

cggacactga gactgacaga ttccttacct tccttagcac ggcctaccac actcaagaaa 1140

cctgtcattc aagtcgacga tgacactccc gaggacagcc gcatcatcgt caggtccgat 1200

agacgctacg ttgatgaccg acgagtgcaa gtccgagtcg gtaagcacat tagaattttc 1260

atctcagtcc aaggagctga gatgcccctc gaaatagatt caggaccatc cttgaccccg 1320

actgagattg cgaccgacga cgagaccact cttgaagtct tgcagttgac agctccagca 1380

tctatggaaa taccacgtcc tgccactcca atgcctacgc gatctaccgc agcgggaaaa 1440

tacccttgca agaccatcaa tcctaacctc cttatgaaat ccaccttcga gactgatgac 1500

tctgattcat ccgacgacga catggacaca gactcggaat cgggatactc cacggagacc 1560

acatcgatgt ccggatcttc cactgaatct tcatccgatg acgaggctca gtcaatgcac 1620

gctactatcg gggcagaaga tgaccacgac cgacttgaag acatgggtaa gaatcccgct 1680

agccctttga gtctcaaaac tgacatacgg ttgattaaag atttaatgga cgcaccaagg 1740

tctccaccgc ctccaccatc tccagagacg tacagtgtct accatcccca aca 1793

<210> 51

<211> 1495

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 51

ctacttgacc acagacgcag agagccgtgg gtacgttcaa gcaccttttc ttgtatgcta 60

cgaatttcca gtagcgctgc ccgaatgtct gggtcagtcg tgaaactaag atgatatttt 120

gtgagtacgg gattggcgaa aacttgagaa cgtacgaaga gatggtgtcg agagacaccc 180

tagctttggc gcccttcgtt cttccatcaa tccaagcctc ggatcgggtc ttcctatagc 240

actcctttgc attcttgcgc aagcgcaggc gctccctggt caatattgtc aagttgtgcg 300

cattacatca caagaatata tgcctacctg gcccagtacg ctctcttgga gcggaggaca 360

gcctgaactc gtgcagtgtc cgtctgataa gtcatgaatt ctatgacaag gactcggtgg 420

agcgctgact gaacgcgcaa cgttggtcta agtaggtggt cgaaaggtga tctccgttcc 480

gaatcccgag aattgatctc cgtgcataca gtaggtttta gctagatact tttgctttgc 540

tgtcctcaat gtactccggc gcggcgtcgg ctgcctttga aacgaagctt tggctcgttt 600

gtaaatggtt agcctaccct acaagtgtat gtatagtgca tgaccagcta acaagacaaa 660

aataccctac tttcgctaga atattcggct acgctccctc atctctcact ctagtaggta 720

atcactggct ctccccagat acactcaatg tctcacttcg ttttcagagt aaggtgtcat 780

ctaaactaat tcctctgtct accactactc gcttcacacc gccgcctcaa atcttgttaa 840

gaaatacata acctttgaac tctatgctat agcttcccgt gctcgacggt tagaccaggg 900

ctcaaatatc ggcctttgcc tttaccttag gcttaaacca tcatggtcag gctccctcca 960

tcccccgact tccactccaa gtgtttctct gaggagcccg tggacgtatc cgttgtctca 1020

ttattgtggg tactatgata taaattttca agcgtcgcct aataacgaga tatttttgtt 1080

agtgtccttc gttgtcattt gcgctcttcc gccgccgccg tcacgtctac caaccccgtc 1140

gataacgcgg accttttcat cgcagaactg gggagcatcg ggggctgctt cctgcagcca 1200

atatttttcc aaatgggagt ggagacaatg gaagatctac gcctcctcgc tggactgtgc 1260

atcttatggg agtacaggga gcttcttgac catgcccttg gctggcggag tggagggtgg 1320

aatcggcgca ttttgcactc ctggttgaca cacctccgcc agaaagaggt ggatagctca 1380

ccaggaatca atggtatgtt attacctgtt caggcgacac actctgacga ctttacctag 1440

gcgtttcgcg ccacacccat tttcgtaagg ccatgaaggt gtatgcccgt atcct 1495

<210> 52

<211> 1056

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 52

tctaccaacc ccgtcgataa cgcggacctt ttcatcgcag aactggggag catcgggggc 60

tgcttcctgc agccaatatt tttccaaatg ggagtggaga caatggaaga tctacgcctc 120

ctcgctggac tgtgcatctt atgggagtac agggagcttc ttgaccatgc ccttggctgg 180

cggagtggag ggtggaatcg gcgcattttg cactcctggt tgacacacct ccgccagaaa 240

gaggtggata gctcaccagg aatcaatggt atgttattac ctgttcaggc gacacactct 300

gacgacttta cctaggcgtt tcgcgccaca cccattttcg taaggccatg aaggtgtatg 360

cccgtatcct cggttccagt gtcccctgtc tcaccatccc tgttcaattt gggtccccac 420

tgccgtttct tttgtttaca tttcgcaagc cgactaaggc tatcatcatt tatccttcat 480

atgtagcttc aagtactttg tgattcatgt aggcgatata tttcatgcat tggcgcgaga 540

aaccgtatct gcgatccgac gacctgcccg aacccacaac ctctcgaccg tttcaccgtc 600

tgtcactacg cctgggtgca atctccacct cccccatgcg tgcagatcca cgggatcaga 660

acggcgatgc agcgtgtgca acataactaa attttctgat ggttaacagt tgatccaggc 720

aacaatggca tccttacttc ggcgacgctc cagccaacct gcataaaggt caaacgggcg 780

ggggatagct gattgaactg catcctgtcg catattaggt cgcattggct acttttatgg 840

atgagaaatg ggaaggttca aaggaggtac acctacaatg aaaatcggat agagtggaaa 900

tgtggtggta aatctttact ctggaaaaca gggagatctt tttcaaatgg cggcagagag 960

ctagcgtgtg cgatacgacg gatgtatcag cccgtacctt gcctcgtttt tgataccaaa 1020

cgctctggca gagcctgtgg cgtattggaa atgtcg 1056

<210> 53

<211> 1080

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 53

ccctatcgta acagtcagcc agctacagca atagtaaagt atgtatacct cattcaaaat 60

ctcagctgac gctccagtga aatcattggc acgctcctct acacctggca tgtcgtcgtc 120

accctcttca gcctcgtcgg cactaccttc cgagtcgctt ttatcctctg gaggacctgc 180

acttatagga ggatgactct ctctggacga atgagctctg tgacctaaaa tcgaagttca 240

aaacggtaaa gatactgcaa gctatgaact aacctttgtc tttggcggct ggcgtctttg 300

cctggatcat attccagtca gtatcatcct ctgcctcgtc catattggga gctctgtatt 360

gatgagtcac cggtcgttgg agcctgagca taatcttagg cgcgtcactg aggctttctc 420

ccttcttgga cggtgtcgag accttgggtg tagtaacggt gggtttgatg ctacttcgct 480

tggtagcaga cgtcgggggt gtcacctttg gaatgacatc tggggtggca ggaattgtct 540

tcggaacagc ggctggggtg gcgggtgtcg tctttgtgat agcgtgtgaa gcactcttag 600

cgctggtctt ctttgctgga gccttcggaa cagtggtggg aaccgtcttc ttggtgatag 660

aggtagcagg agccttcttt gcaggagttc gagtctcaac tgctgatacg gaattcttgg 720

ccctctttgc gttcggctgg gatgttgcag catttccctc aacaccgtcc tcgggtggtg 780

cctcgggctt tcgctttttt ttcttgctgc cagtcgtgtc caatgccgca gtggccttga 840

ccttagctgc acgggaggct gagtaacagg taaggctagt tatccgcgaa catatttcgg 900

gttactcacg tcgaccttgt ttagattctg ctgcctctgg cgtaacagct ggcacaccat 960

catcgtcacc tccaaaaagt cgcgcacgcg caactgtata ttcggaggca tatttcggtg 1020

gcatcttaaa ggagtggagt gtttggtttg aatgagtggg gaatgtcggt tgggatgact 1080

<210> 54

<211> 1235

<212> DNA

<213> 人工序列

<400> 54

gctccttcac accacgaata ttgcacgttc gacatggacg cacaccatta tggccaacca 60

tatgagaaac gagagatacc gctggaatgt cgccaaaaat gagcatcaaa taggctcgaa 120

gatggaaagt ttcattcttc gagacatcaa atgcgcgaac acccttggag agctgcatga 180

gctcagtgac aagcggccag gcaaatgaat caaagtcctt cggcttcttg ggtccaggta 240

tgacaccgac acacaagatg tgctcgaaat gaaagcgtac ttcgggtgga aggttgtagt 300

tgtagacaag taatggccag catgtttttt tgcggcggcg ccatggagca aacccgtctg 360

tcgagagtcc gagagcaacg tcacgtaacg attcgaagtg tttatacgga aggtcgacac 420

cattgagttt gacgtatgtc ttgatgaatg gtcagattga tggtaggata ctagaatcag 480

caacatacct cttggagtag gttgtatagc ttcccatcga agacgtcttc gacaccatct 540

gcattcttct tgaacaatcc tcggtaggcc atcttgtcga tcatagattg actacgaaag 600

tagccaacaa ggcgagggat aagggggata tagttgaact gcttccgagg tcgtttgccg 660

tcagacttgt atcgtggctc cttgcagtaa ggacagttcg tctcatctgc atgaggaccg 720

gcaaaagcgc agcacgaatt aacgcagcag tcatacggga cagggaggaa cttcgccaaa 780

aactccaccc gagattttgc aactttccac gtttccaagt ccgggttagc aaatgcccat 840

gcctgttcat cgaatgcgtc gtccgttagg tggtgctcga gtttatgtgc aaagcgacgc 900

agcaatatga gttcctcgtc tgttagttcc gtagctagat agaatggtca gaaatggtac 960

caattgaatg aatgataaga tcagcgtacc aaactctgca agctcctgct ctaggttctg 1020

cgtgataaga tcctcaagcg aaagaccgtt cacctgatca cgaatgcttt catccatctc 1080

tgcctcccag tcgtcgtcat cgtctggtgc gctagggcct atattgatat cgtcctcatc 1140

gggaacgtct tcaacagtga cacgttgcga ggtggtctga ggaagagggg cacgagcagt 1200

ctcttcaata agagttggtg gggatggact acaaa 1235

Claims (2)

1.一种金针菇（Flammulina velutipes）菌株农万金8号，其特征在于，该菌株的分类命名为：金针菇（Flammulina velutipes）农万金8号，已于2020年6月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.20203；

所述金针菇农万金8号的亲本为金针菇F0321和F0323。

2.一种如权利要求1所述金针菇菌株农万金8号的真实性鉴定方法，其特征在于，根据基因组测序数据，采用Kmer差减组装技术，获得差异片段SV，相应选取SV序列设计特异性引物对待测样品进行扩增，判断与亲本DNA指纹的差异性；

所述特异性引物序列如下：

P1：F：CAGACGACCAACATCGACTT，R：GGCGTTGGAATGACTTCTCT；

P2：F：GTCGAGTAACATCACGCCAT，R：GACGGAATCATCCACCATCC；

P4：F：GCGCTGAAGACCGATAAAAA，R：TTTGGGGGCGAAAATAGCTC；

P5：F：TTCATGTTAAGTGGGTGCATT，R：CAAACCGCTCGACTTTCTTG；

P6：F：TATGCGTACGCTTCAACGA，R：TCTATCTTCCCTCCCACCATC；

P7：F：GTGTCGAGGATTGCGAAAGA，R：GACGGGGACACAGGATATCTA；

P8：F：CACTCCAAAGTTATCGCCCA，R：GGTCCTGCTACGATCAATGG；

P9：F：GCTACCAGCGACCTATGAAG，R：CTTCACCCAAGTCCGCATAA；

P10：F：AGTTTTTACACCAGCCGAGG，R：TTCACCCAAGTCCGCATAAC。

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