CN111909147B

CN111909147B - Dna-pk抑制剂

Info

Publication number: CN111909147B
Application number: CN202010384197.9A
Authority: CN
Inventors: 刘斌; 陈博
Original assignee: Shandong Xuanzhu Pharma Co Ltd
Current assignee: Shandong Xuanzhu Pharma Co Ltd
Priority date: 2019-05-10
Filing date: 2020-05-09
Publication date: 2021-07-20
Anticipated expiration: 2040-05-09
Also published as: CN111909147A

Abstract

本发明属于医药技术领域。特别地，本发明涉及一类可用作DNA依赖蛋白激酶(DNA‑PK)的抑制剂的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物及其立体异构体，含有所述化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物及其立体异构体的药物组合物及制剂，以及所述化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物及其立体异构体的用途。

Description

DNA-PK抑制剂

技术领域

本发明属于医药技术领域。特别地，本发明涉及一类可用作DNA依赖蛋白激酶(DNA-PK)抑制剂的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物及其立体异构体，含有所述化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物及其立体异构体的药物组合物及制剂，以及所述化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物及其立体异构体的用途。

背景技术

癌症是全世界难治疗的恶性疾病，治疗难度大，死亡率高，给患者和家庭带来沉重的负担，是影响我国居民健康的主要疾病。近年来，我国癌症发病率明显增加，其死亡率也呈逐渐上升趋势，癌症防治面临着严峻的形势。

目前，放疗以及化疗是除手术切除外治疗癌症的最有效手段，同时放疗是对恶性肿瘤最有效的非手术治疗。放射线和相当多的抗癌药物均可直接或间接作用于DNA或DNA代谢过程，从而导致DNA损伤，其中，DNA双链断裂(DNA double strand break，DSB)对于癌细胞来讲是最致命的。DNA损伤后，会引发受损DNA修复等一系列细胞反应，而修复的结果就是提高癌细胞的存活，这也是肿瘤细胞对放化疗抵抗的机制之一。DNA双链断裂如果不及时和完整修复，会通过细胞凋亡或/和有丝分裂障碍导致细胞死亡。因此，只要抑制这些DNA损伤的修复，就可以提高癌细胞对放化疗的敏感性，抑制癌细胞增殖。

在人等高等真核生物细胞中，DSB的修复主要是通过DNA依赖性蛋白激酶(DNA-Dependent Protein Kinase，DNA-PK)主导的DNA非同源末端连接(nonhomologous endjoining，NHEJ)进行，由此修复损伤的DNA，保持细胞活性和基因组稳定性。NHEJ修复主要参与G1/S期DNA损伤修复，并且不需要DNA末端连接模板。NHEJ修复需要许多蛋白质和信号通路的共济协调。Ku70/80亚单位的异质二聚体和催化亚单元DNA依赖性蛋白激酶(DNA-PKcs)，共同组成了有活性的DNA-PK酶复合物。

DNA-PKcs属于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)超家族成员，是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶；PI3K超家族还包括ATM，ATR，mTOR和4个PI3K亚型。当DNA-PK与断裂的DNA结合时，才能激活其激酶活性。Ku的重要功能是与DNA末端结合，招募DNA-PKcs，二者组成DNA-PK全酶并激活DNA-PKcs；活化的DNA-PKcs引导Artemis蛋白(一种内切核酸酶)结合于受损位点，依靠其核酶活性进行DNA断端处理以利于连接修复，然后XRCC4/DNA-连接酶IV复合物被活化的DNA-PKcs招募，最后由DNA-连接酶IV定位并连接断裂的DNA双链末端，完成修复。XRCC4是与DNA-连接酶IV形成复合体的一种蛋白质，可以增加DNA-连接酶IV的活性。DNA-PKcs存在40个可自身磷酸化的氨基酸残基，最典型的自磷酸化位点发生在Ser2056(POR簇)和Thr2609(ABCDE簇)。NHEJ被认为通过三个关键的步骤开展：识别DSB——Ku70/80结合至不完全的DNA末端，募集两分子的DNA-PKcs至DSB的相邻侧；进行DNA加工以移除端点出的不可连接末端或其他损伤形式；最后连接DNA末端。

由于肿瘤细胞具有较高基础水平的内源性复制压力(癌基因诱导的复制压力)和DNA损伤，并且在肿瘤细胞中DNA修复机制效率较低，因此肿瘤细胞对DNA-PK的敏感性更高。

目前，开发高效且选择性好的DNA-PK的抑制剂具有重要的临床意义，其可协同增强化疗和放疗效果，有效抑制肿瘤生长，同时可有效降低对正常细胞的损伤，减少副作用。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种结构新颖的、对DNA-PK具有良好抑制作用的化合物。进一步的，该类化合物可用于增加受试者对于放疗和/或一种或多种抗癌剂的敏感性。更进一步的，该类化合物可与放疗和/或一种或多种抗癌剂联用用于治疗良性肿瘤或癌症。

本发明技术方案如下：

本发明提供下述通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体：

其中，X₁、X₂、X₃、X₄分别独立地选自-CH-或-N-；

Y选自-NH-、-CH₂-、-S-或-O-；

R₁选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、硝基、C_1-6烷基、C_1-6烷基氨基、二(C_1-6烷基)氨基、卤代C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、氨基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基或氨基C_1-6烷氧基；

环A和环B分别独立地选自任选被1-4个取代基所取代的6-10元芳基或5-10元杂芳基，所述的取代基选自下列基团：氘原子、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基或氨基C_1-6烷氧基；

m、p分别独立地选自为0、1、2、3或4。

在某些实施方案中，环A选自任选被1-4个取代基所取代的苯基或5-6元含氮杂芳基，所述的取代基选自下列基团：氘原子、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基或氨基C_1-6烷氧基。

在某些实施方案中，环B选自任选被1-4个取代基所取代的苯基或5-6元含氮杂芳基，所述取代基选自下列基团：氘原子、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基或氨基C_1-6烷氧基。

在某些实施方案中，环A选自如下环系：

虚键---表示环A与环B连接的位置；

环B选自如下的环系：

虚键---分别表示环B与Y或与环A连接的位置；

每个Q¹、Q²分别独立地选自氘原子、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基或氨基C_1-6烷氧基；

n选自0、1、2或3。

在某些实施方案中，X₁、X₂、X₃、X₄分别独立地选自-CH-或-N-，且至少有一个选自-N-。

在某些实施方案中，X₁为-N-。

在某些实施方案中，Y为-NH-。

在某些实施方案中，环A选自如下环系：

虚键---表示环A与环B连接的位置；

每个Q¹、Q²分别独立地选自氘原子、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、C_1-4烷基、卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基C_1-4烷氧基或氨基C_1-4烷氧基；

n选自0、1、2或3。

在某些实施方案中，环B选自如下的环系：

虚键---分别表示环B与Y或与环A连接的位置。

在某些实施方案中，m、p分别独立地选自为1、2或3。

在某些实施方案中，所述的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其异构体，具有如下通式(II)所示的结构：

在某些实施方案中，所述的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其异构体，具有如下通式(III)所示的结构：

其中，R₁选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、硝基、C_1-4烷基、C_1-4烷基氨基、二(C_1-4烷基)氨基、卤代C_1-4烷基、羟基C_1-4烷基、氨基C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、卤代C_1-4烷氧基、羟基C_1-4烷氧基或氨基C_1-4烷氧基；

每个Q¹分别独立地选自氘原子、卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、C_1-4烷基、卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基C_1-4烷氧基或氨基C_1-4烷氧基；

Q²选自卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、C_1-4烷基、卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基C_1-4烷氧基或氨基C_1-4烷氧基；

n选自0、1、2或3；

m、p分别独立地选自1、2或3。

在某些实施方案中，R₁选自氢、卤素、羟基、氰基、氨基、硝基、C_1-4烷基、C_1-4烷基氨基、二(C_1-4烷基)氨基、卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基或卤代C_1-4烷氧基。

在某些实施方案中，R₁选自氟、氯、溴、碘、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、三氟甲基、甲氧基或乙氧基。

在某些实施方案中，R₁选自氟、氯、溴、碘、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、三氟甲基、甲氧基或乙氧基。

在某些实施方案中，R₁选自氢或C_1-4烷基。

在某些实施方案中，R₁选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。

在某些实施方案中，每个Q¹分别独立地选自氘原子、氟、氯、溴、碘、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基三氟甲基、甲氧基或乙氧基。

在某些实施方案中，每个Q¹分别独立地选自氘原子、氟、氯、溴、碘、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。

在某些实施方案中，每个Q¹分别独立地选自氘原子、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。

在某些实施方案中，Q²选自氟、氯、溴、碘、羟基、氨基、硝基、氰基、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、丙氧基或异丙氧基。

在某些实施方案中，Q²选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。

在某些实施方案中，n选自0、1或2。

在某些实施方案中，m、p分别独立地选自1、2或3。

本发明中各技术方案之间可以相互组合形成新的技术方案，所形成的新的技术方案同样包括在本发明的范围之内。

另一方面，本发明还提供了本发明化合物的制备方法：

制备通式(I)所示的化合物的方法：

其中，Z₁、Z₂分别独立地选自氨基保护基，例如，Z₁、Z₂分别独立地选自Boc、Cbz或Fmoc。Y’选自氟、氯、溴或碘。相应X₁-X₄、R₁、环A、环B、Y、m、p的定义如前所述。

在本发明的某些实施方案中，通式(I)、(II)或(III)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物及其立体异构体，选自如下化合物：

。

其中，化合物结构中标记有“*”号的碳原子代表该碳原子为单一构型的手性碳原子，如为R构型或S构型。

本发明还提供了一种药物组合物，其含有前述通式(I)、(II)或(III)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体，及一种或多种药用载体和/或稀释剂；所述药物组合物可以制成临床上或药学上可接受的任一剂型，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂、注射剂(包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液)、栓剂、吸入剂或喷雾剂等。

在本发明的某些实施方案中，上述药物制剂可以以口服、肠胃外、直肠或经肺给药等方式施用于需要这种治疗的患者或受试者。用于口服给药时，所述药物组合物可制成口服制剂，例如可以制成常规的口服固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。用于肠胃外给药时，上述药物制剂也可制成注射剂、包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，配置注射剂时，可以不加入附加剂，也可以根据药物的性质加入适宜的附加剂。用于直肠给药时，所述药物组合物可制成栓剂等。用于经肺给药时，所述药物组合物可制成吸入剂或喷雾剂等。

本发明的药物组合物或药物制剂中可用的药用载体和/或稀释剂可以是药物制剂领域中任何常规的载体和/或稀释剂，特定载体和/或稀释剂的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。

在另一方面，本发明还涉及前述通式(I)、(II)或(III)所示化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其异构体在制备预防和/或治疗良性肿瘤或癌症的药物中的用途，所述药物可与放疗和/或一种或多种抗癌剂联用以预防和/或治疗良性肿瘤或癌症等疾病，所述癌症包括原位癌和转移的癌症。

进一步的，本发明还涉及含有前述通式(I)、(II)或(III)所示化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其异构体的药物制剂在制备药物中的用途，所述药物可与放疗和/或一种或多种抗癌剂联用以预防和/或治疗良性肿瘤或癌症等疾病，所述癌症包括原位癌和转移的癌症。

在另一方面，本发明还涉及前述通式(I)、(II)或(III)所示化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其异构体在用于制备使癌细胞对于抗癌剂和/或电离辐射敏感的药物中的用途。

进一步的，本发明还涉及含有前述通式(I)、(II)或(III)所示化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其异构体的药物制剂在用于制备使癌细胞对于抗癌剂和/或电离辐射敏感的药物中的用途。

所述的电离辐射是指患者在接受放疗过程中所接受的各种不同能量的射线的辐射。

本发明涉及的含有前述通式(I)、(II)或(III)所述的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体的药物可以单独给药，或者与一种或多种第二治疗剂联合使用。因此，在某些实施方案中，本发明还提供一种药物组合物，其含有前述通式(I)、(II)、(IIa)或(IIb)所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体，以及一种或多种第二治疗活性剂。在某些实施方案中，所述第二治疗剂选自：抗癌剂，包括有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢物、DNA嵌合剂、抗肿瘤抗生素、生长因子抑制剂、信号传导抑制剂、细胞周期抑制剂、酶抑制剂、类维生素A受体调控剂、蛋白酶体抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、生物应答调节剂、激素类药物、血管再生抑制剂、细胞生长抑制剂、靶向抗体、HMG-CoA还原酶抑制剂和异戊二烯基蛋白质转移酶抑制剂。

在某些实施方案中，所述的第二治疗活性剂可以是减轻或降低本发明化合物在用于治疗受试者疾病时所产生的一种或多种副作用的药物，也可以是增强本发明化合物药效的药物。

在某些实施方案中，待组合的各成分(例如，本发明的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物、其立体异构体与第二治疗剂)可同时给药或依次顺序地分开用药。例如，可以在施用本发明化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体之前、同时或之后，施用第二治疗剂。此外，待组合的各成分还可以以同一制剂形式或以分开的不同制剂的形式联合给药。

在另一方面，本发明还涉及含有前述通式(I)、(II)或(III)所示化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其异构体的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物可与放疗和/或一种或多种抗癌剂联用以预防和/或治疗良性肿瘤或癌症等疾病，所述癌症包括原位癌和转移的癌症。

进一步，本发明还涉及含有前述通式(I)、(II)或(III)所示化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其异构体的药物组合物在用于制备使癌细胞对于抗癌剂和/或电离辐射敏感的药物中的用途。

在另一方面，本发明还提供了一种治疗与DNAPK过度活化相关的疾病的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的前述通式(I)、(II)或(III)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体，前述药物制剂或药物组合物；所述与DNAPK过度活化相关的疾病选自良性肿瘤或癌症，所述的癌症包括原位癌和转移的癌症。

在另一方面，本发明还提供了一种增强患者对于抗癌剂或放疗敏感性的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的前述通式(I)、(II)或(III)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体，前述药物制剂或药物组合物；所述的抗癌剂如前文所述。

进一步，本发明还提供了一种增强患者对于抗癌剂或放疗敏感性的方法，该方法包括向接受化疗前/后的患者施用有效量的前述通式(I)所述化合物、其药学上可接受的盐或其异构体，前述药物制剂或药物组合物；所述的抗癌剂如前文所述。

在另一方面，本发明还提供了一种试剂盒，包含：

(a)有效量的一种或多种前述通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐或其异构体，和(b)有效量的一种或多种其他抗癌剂；所述的抗癌剂如前文所述。

【定义和一般术语】

在本申请的说明书和权利要求书中，化合物都是依据化学结构式而命名，如果表示同一化合物时化合物的命名和化学结构式不符，以化学结构为准。

在本申请中，除非另有说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员通常理解的含义，然而为了更好的理解本发明，下面提供了部分术语的定义。当本申请所提供的术语的定义和解释与本领域技术人员所通常理解的含义不符的时候，以本申请所提供的术语的定义和解释为准。

本发明所述的“卤素”是指氟、氯、溴和碘，优选氟和氯。

本发明所述的“C_1-6烷基”表示直链或支链的含有1-6个碳原子的烷基，包括例如“C_1-4烷基”、“C_1-3烷基”、“C_1-2烷基”、“C_2-4烷基”、“C_2-3烷基”、“C_3-4烷基”等，具体实例包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、异己基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、1,2-二甲基丙基等。本发明所述的“C_1-4烷基”指C_1-6烷基中的含有1-4个碳原子的具体实例。

本发明所述的“C_1-6烷氧基”是指“C_1-6烷基-O-”，所述的“C_1-6烷基”如前文所定义。本发明所述的“C_1-4烷氧基”是指“C_1-4烷基-O-”，所述的“C_1-4烷基”如前文所定义。

本发明所述的“羟基C_1-6烷基、氨基C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基”是指C_1-6烷基中的一个或多个氢分别被一个或多个羟基、氨基或卤素所取代。C_1-6烷基如前文所定义

本发明所述“羟基C_1-6烷氧基、氨基C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷氧基”是指“C_1-6烷氧基”中的一个或多个氢被一个或多个羟基、氨基或卤素所取代。

本发明所述的“C_1-6烷基氨基、二(C_1-6烷基)氨基”分别是指C_1-6烷基-NH-、

本发明所述的“6-10元芳基”包括“6-8元单环芳基”和“8-10元稠环芳基”。

本发明所述的“6-8元单环芳基”是指含有6-8个环碳原子的单环芳基，其实例包括但不限于：苯基、环辛四烯基等；优选苯基。

本发明所述的“8-10元稠环芳基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的、含有8-10个环碳原子的、不饱和的、具有芳香性的环状基团，优选“9-10元稠环芳基”，具体实例如萘基等。

本发明所述的“5-10元杂芳基”包括“5-8元杂芳基”和“8-10元稠杂芳基”。

本发明所述的“5-8元杂芳基”是指含有5-8个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的具有芳香性的单环环状基团。任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。“5-8元单杂芳基”包括例如“5-7元杂芳基”、“5-6元杂芳基”、“5-6元含氮杂芳基”、“6元含氮杂芳基”等，所述的“含氮杂芳基”中的杂原子至少含有一个氮原子，例如，仅包含1个或2个氮原子，或者，包含一个氮原子和其他的1个或2个杂原子(例如氧原子和/或硫原子)，或者，包含2个氮原子和其他的1个或2个杂原子(例如氧原子和/或硫原子)。“5-8元单环杂芳基”的具体实例包括但不仅限于呋喃基、噻吩基、吡咯基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、咪唑基、吡唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、2-吡啶酮基、4-吡啶酮基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、1,2,3-三嗪基、1,3,5-三嗪基、1,2,4,5-四嗪基、氮杂环庚三烯基、1,3-二氮杂环庚三烯基、氮杂环辛四烯基等。本发明所述的“5-6元杂芳基”是指含有5-6个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的具体实例。

本发明所述的“8-10元稠杂芳基”是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的原子所形成的、含有8-10个环原子(其中至少一个环原子为杂原子，例如氮原子、氧原子或硫原子)的、不饱和的具有芳香性的环状结构。任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。包括“9-10元稠杂芳基”，“8-9元稠杂芳基”等，其稠和方式可以为苯并5-6元杂芳基、5-6元杂芳基并5-6元杂芳基等；具体实例包括但不限于：吡咯并吡咯、吡咯并呋喃、吡唑并吡咯、吡唑并噻吩、呋喃并噻吩、吡唑并噁唑、苯并呋喃基、苯并异呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、喹啉基、2-喹啉酮基、4-喹啉酮基、1-异喹啉酮基、异喹啉基、吖啶基、菲啶基、苯并哒嗪基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、嘌呤基、萘啶基等。

任选地，环状结构中的环原子(例如碳原子、氮原子或硫原子)可以被氧代。其具体实例包括但不限于：2-呋喃基、3-呋喃基、N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、3-异唑基、4-异唑基、5-异唑基、2-唑基、4-唑基、5-唑基、N-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、哒嗪基(如3-哒嗪基)、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、四唑基(如5-四唑基)、三唑基(如2-三唑基和5-三唑基)、2-噻吩基、3-噻吩基、吡唑基(如2-吡唑基)、异噻唑基、1,2,3-二唑基、1,2,5-二唑基、1,2,4-二唑基、1,2,3-三唑基、1,2,3-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、吡嗪基、1,3,5-三嗪基。

本发明所述“任选被取代”是指被取代基上的一个或多个氢原子可以被一个或多个取代基“取代”或“不取代”的两种情形。

本发明所述的“抗癌剂”是指对肿瘤具有一定治疗作用的药剂，包括但不限于有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢物、DNA嵌合剂、抗肿瘤抗生素、生长因子抑制剂、信号传导抑制剂、细胞周期抑制剂、酶抑制剂、类维生素A受体调控剂、蛋白酶体抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、生物应答调节剂、激素类药物、血管再生抑制剂、细胞生长抑制剂、靶向抗体、HMG-CoA还原酶抑制剂和异戊二烯基蛋白质转移酶抑制剂等；所述的肿瘤包括良性肿瘤和癌症。

本发明所述的“化疗”是化学药物治疗的简称，主要通过使用化学治疗药物杀灭癌细胞达到治疗的目的。

本发明所述的“放疗”是指一种肿瘤治疗方法，即肿瘤放射治疗，主要利用放射线进行肿瘤局部治疗，所述的“放射线”包括放射性同位素产生的α、β、γ射线和各类x射线治疗机或加速器产生的x射线、电子线、质子束及其他粒子束等。

本发明所述的“药学上可接受的盐”指化合物中存在的酸性官能团(例如-COOH、-OH、-SO₃H等)与适当的无机或者有机阳离子(碱)形成的盐，包括与碱金属或碱土金属形成的盐、铵盐，以及与含氮有机碱形成的盐；以及化合物中存在的碱性官能团(例如-NH2等)与适当的无机或者有机阴离子(酸)形成的盐，包括与无机酸或有机酸(例如羧酸等)形成的盐。

本发明所述的“异构体”是指当本发明化合物含有一个或多个不对称中心，因而可作为外消旋体和外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单一非对映异构体。本发明化合物可以有不对称中心，这类不对称中心各自独立地产生两个光学异构体。本发明的范围包括所有可能的光学异构体和它们的混合物。本发明所述的化合物若含有烯烃双键，除非特别说明，包括顺式异构体和反式异构体。本发明所述的化合物可以以互变异构体(官能团异构体的一种)形式存在，其通过一个或多个双键位移而具有不同的氢的连接点，例如，酮和它的烯醇形式是酮-烯醇互变异构体。本发明化合物含有螺环结构，受环的立体空间结构的影响，环上的取代基可存在于环两侧从而形成相对的顺式(cis)和反式(trans)异构体。各互变异构体及其混合物都包括在本发明的范围中。所有化合物的对映异构体、非对映异构体、外消旋体、内消旋体、顺反异构体、互变异构体、几何异构体、差向异构体及其混合物等，均包括在本发明范围中。

本发明所述的“氘代物”是指化合物结构中的一个或多个¹H被²H(也被表示为“D”)取代所形成的结构。

本发明所述的“保护基”是指当多功能基有机化合物进行反应时，为使反应只发生在所希望的基团处，而避免其他基团遭受影响，此反应前将其他基团先加以保护，当反应完成后再恢复。能保护某种基团的试剂称为该基团的保护基。所述的“氨基保护基”其实例包括但不限于苄氧羰基(Cbz)、叔丁氧羰基(Boc)、9-芴甲氧羰基(Fmoc)、苄基(Bn)、对甲氧苯基(Pmp)、三苯甲基衍生物保护基等。

本发明所述的“有效量”是指能够预防、减轻、延缓、抑制或治愈受试者病症的药物剂量。给药剂量的大小与药物给药方式、药剂的药代动力学、疾病的严重程度、受试者的个性体征(性别、体重、身高、年龄)等来确定。

本发明所述的“电离辐射”是指患者在接受放疗过程中所接受的各种不同能量的射线的辐射。

本发明化合物可通过对映体特异性合成或从对映异构体混合物拆分以得到个别对映异构体的形式制备。常规拆分技术包括使用各种众所周知的色谱方法拆分起始物质或最终产物的对映异构体的混合物。

除非另外描绘或者说明，否则本文列举的结构包括该结构的所有同分异构(如对映体、非对映体和几何(或构象))形式；例如，每个非对称中心的R和S构型、(Z)和(E)双键异构体以及(Z)和(E)构象异构体。因此，本发明化合物的单种立体化学异构体以及对映体、非对映体和几何(或构象)混合物均在本发明范围之内。已画有立体化学中心(通常通过使用阴影键或加粗键定义)的化合物在立体化学上是纯的，但绝对立体化学仍未限定。这种化合物可具有R或S构型。在已确定绝对构型的那些情形中，在绘图中手性中心标记有(R)或(S)。

除非另外说明，否则本发明化合物的所有互变异构形式均在本发明范围之内。另外，除非另外说明，否则本文描绘的结构也旨在包括仅在一个或多个富含同位素的原子的存在方面不同的化合物。例如，具有本发明结构，不同的是用氘或氚替换氢或用富含¹³C-或¹⁴C的碳替换碳的化合物在本发明范围之内。这种化合物可用作分析工具、生物测定法中的探针或用作具有改善的治疗特性的DNA-PK抑制剂。

发明的有益效果

1、本发明化合物、其药学上可接受的盐、氘代物或其立体异构体具有优异的DNA-PK抑制作用，其在生物体内具有良好的药代动力学性质，作用持久，生物利用度高，能够增强癌细胞对放疗和/或一种或多种抗癌剂的敏感性。

2、本发明化合物、其药学上可接受的盐、氘代物或其立体异构体对良性肿瘤和癌症具有较好的治疗作用。

具体实施方式

以下通过具体实施例，对本发明作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所能实现的技术均属于本发明的范围。

1本发明的化合物的制备实施例

制备例中，缩写所代表的含义如下：

MeOH：甲醇；DMF：N,N-二甲基甲酰胺；DCM：二氯甲烷；

Na₂CO₃：碳酸钠；Pd(OAc)₂：醋酸钯；Pd(PPh₃)₄：四(三苯基膦)钯；

CuI：碘化酮；PtO₂：氧化铂；Tf₂O：三氟甲磺酸酐；

Zn(CN)₂：氰化锌；(Boc)₂O：二碳酸二叔丁酯；PE：石油醚；

KF：氟化钾NIS：N-碘代丁二酰亚胺；dppf：双二苯基膦二茂铁；

EA：乙酸乙酯；TFA：三氟乙酸；TEA：三乙胺；

Py：吡啶 Dioxane：二恶烷 ACN：乙腈

Pd(dppf)Cl₂：[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯；Pd₂(dba)₃：三(二亚苄基丙酮)二钯；

Xantphos：4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽；LiOH·H₂O：一水合氢氧化锂。

制备例1：6-(1-((2'-甲基-[4,5'-联嘧啶]-6-基)氨基)丙-2-基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]喹啉-1-酮的制备(化合物1)

(1)(2-(4-羟基喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将8-溴喹啉-4-醇(5g,22.3mmol)，(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯(9.5g,33.4mmol)，Pd(dppf)Cl₂(1.2g,1.64mmol)，碳酸钠(4.7g,44.3mmol)溶于二氧六环(120mL)和水(20mL)中，110℃反应16小时，加入水(100mL)用浓盐酸调节pH＝6，乙酸乙酯(200mL×3)萃取分液，有机相浓缩，残余物经柱层析(DCM:MeOH＝100:1-20:1)得到化合物(6.1g，产率：91.2％)。

(2)(2-(4-羟基-3-碘喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将2-(4-羟基喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯(3g,10mmol)溶于DMF(40mL)中，0℃加入NIS(2.25g,10mmol)，25℃反应16小时，反应完毕，倒入水(300mL)中，过滤，滤饼水洗(100mL)，干燥，再将滤饼加入到甲醇(50mL)中，浓缩，过滤，滤饼干燥得到化合物(3g，产率：70.4％)。

(3)(2-(3-氰基-4-羟基喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将(2-(4-羟基-3-碘喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯(3g,7.05mmol)，Zn(CN)₂(1.08g,9.13mmol)，Pd₂(dba)₃(390mg,0.43mmol)，和dppf(300mg,0.72mmol)溶于DMF(60mL)和水(15mL)中，120℃反应2小时，反应完毕，加入到水(15mL)中，过滤，滤饼经C18柱层析(乙腈/水＝10％-80％)得到化合物(1.6g，产率：69.8％)。

(4)(2-(3-(氨基甲基))-4-羟基喹啉-8-基))烯丙基))氨基甲酸叔丁酯的制备

将(2-(3-氰基-4-羟基喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯(760mg,2.34mmol)溶于甲醇(100mL)和氨水(5mL)中，加入雷尼镍(0.2g)，20℃氢气环境下反应12小时，硅藻土过滤，滤液浓缩的目标化合物(730mg，产率：94.9％)。

(5)(2-(3-(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)-4-羟基喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将(2-(3-(氨基甲基)-4-羟基喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯(730mg,2.2mmol)溶于DCM(30mL)中，加入(Boc)₂O(719.4mg,3.3mmol)，25℃反应3小时，浓缩，残余物经柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)得到化合物(550mg，产率：52.5％)。

(6)(2-(3-(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)-4-羟基喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将(2-(3-(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)-4-羟基喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯(550mg,1.3mmol)溶于甲醇(50mL)中，加入Pd/C(0.2g)，25℃氢气环境下反应5小时，过滤，滤液浓缩的目标化合物(550mg，产率：99.5％)。

(7)3-(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)-8-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基)喹啉-4-基三氟甲磺酸酯的制备

将(2-(3-(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)-4-羟基喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(460mg,1.07mmol)和吡啶(250mg,3.16mmol)加入DCM(40mL)中，-10℃，N₂保护，加入三氟甲磺酸酐(450mg,1.6mmol)，反应2小时，加入水(50mL)，柠檬酸(1g)，分液，DCM层无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得目标产物(500mg,产率82.9％)。

(8)6-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基)-1-氧代-1,3-二氢-2H-吡咯并[3,4-c]喹啉-2-羧酸叔丁酯的制备

将3-(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)-8-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基)喹啉-4-基三氟甲磺酸酯(0.5g，0.89mmol)，Pd(OAc)₂(20mg,0.089mmol)，Xantphos(100mg,0.17mmol)，和三乙胺(780mg,1.78mmol)溶于DMF(40mL)和甲醇(4mL)中，85℃反应2小时，反应完毕，加入到水(200mL)中，过滤，滤饼柱层析(PE:EA＝3:1)纯化得目标产物(230mg，产率58.6％)。

(9)6-(1-氨基丙-2-基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]喹啉-1-酮三氟乙酸盐的制备

将6-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基)-1-氧代-1,3-二氢-2H-吡咯并[3,4-c]喹啉-2-羧酸叔丁酯(220mg,0.5mmol)，溶于DCM(20mL)中，加入TFA(4mL)，25℃反应3小时，浓缩得粗品(300mg)。

(10)6-(1-((2'-甲基-[4,5'-联嘧啶]-6-基)氨基)丙-2-基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]喹啉-1-酮的制备

将6-(1-氨基丙-2-基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]喹啉-1-酮三氟乙酸盐(190mg,粗品)，6-氯-2'-甲基-4,5'-联嘧啶(200mg,0.97mmol)和TEA(200mg,1.89mmol)，溶于乙腈(20mL)中，80℃反应8小时。反应完毕，浓缩，残余物经TLC分离(DCM:MeOH＝20:1)再经C18柱层析(乙腈/水＝10％-70％)得到化合物(8mg)。

分子式:C₂₃H₂₁N₇O 分子量:411.5 LC-MS(M/e):412.0(M+H⁺)

¹H-NMR(400MHz,DMSO)δ:9.18(s,1H),9.13(s,2H),9.04(s,1H),8.78(s,1H),8.40-8.60(m,1H),7.75-7.85(m,1H),7.60-7.75(m,2H),6.85-7.05(m,1H),4.45-4.60(m,3H),3.75-3.90(m,2H),2.67(s,3H),1.38(s,3H).

制备例2：6-(1-((2'-甲基-[4,5'-联嘧啶]-6-基)氨基)丙-2-基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[3,4-c]喹啉-1-酮异构体的制备(化合物1'和化合物1”)

被拆分化合物：化合物1

拆分方法：高效液相色谱

拆分方法：

色谱柱型号	CHIRALPAK IG-3(IG30CD-WE016)
		色谱柱规格	0.46cm I.D.×15cm L
进样量	5.0ul
		流动相	MeOH/DCM＝70/30(V/V)
流速	1.0ml/min
		波长	UV 254nm
柱温	35℃
		HPLC设备	Shimadzu LC-20AT

拆分结果：

[α]*：测定时温度为20℃，使用D钠光，溶剂为DMSO，溶液浓度为2mg/ml。

化合物1'和化合物1”均为单一构型化合物。

制备例3：7-(1-((2'-甲基-[4,5'-联嘧啶]-6-基)氨基)丙-2-基)-3,4-二氢苯并[c][2,6]萘啶-1(2H)-酮的制备(化合物4)

(1)(2-(4-羟基-3-碘喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将(2-(4-羟基喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(4.2g,13.9mmol)和NIS(3.4g,15.3mmol)溶于DMF(30mL)中，25℃下反应2h，LCMS检测反应完成，向反应液中加入水(100mL)，抽滤得目标化合物(5.9g)，产率99.3％。

(2)(2-(3-(氰甲基)-4-羟基喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将(2-(4-羟基-3-碘喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(4.8g,11.2mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)异恶唑(2.6g,13.5mol)，Pd(dppf)Cl₂(804mg,1.1mmol)，KF(1.9g,33mmol)溶于二甲基亚砜(40mL)和水(33mL)中，120℃反应16h。水洗，EA萃取，有机相旋干，硅胶柱层析(EA:PE＝1:1)分离得目标化合物(3.2g,产率83.9％)。

(3)(2-(3-(2-(2-氨基乙基)-4-羟基喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将(2-(3-(氰甲基)-4-羟基喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(1.4g,4.1mmol)，Raney-Ni(1g)，氨水(2mL)，THF(4mL)加入到MeOH(20mL)中，25℃下反应16h。LCMS检测反应完成，过滤，滤液旋干得1.8g粗品，直接用于下一步。

(4)(2-(3-(2-(((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-4-羟基喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将(2-(3-(2-(2-氨基乙基)-4-羟基喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(1.8g,粗品)溶于DCM(30mL)，加入Boc₂O(1.4g,6.2mmol)和三乙胺(1.6g,15.6mmol)25℃下反应16h。LCMS检测反应完毕，硅胶柱层析(MeOH:DCM＝1:20)分离得到目标化合物(1.5g,两步产率82.9％)。

(5)3-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-8-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)氨基丙-2-基)喹啉-4-基三氟甲磺酸酯的制备

将(2-(3-(2-(((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-4-羟基喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(1g,2.2mmol)溶于DCM(10mL)中，加入Py(521mg,6.6mmol)，-20℃下滴加Tf₂O(744mg,2.6mmol),继续反应1h,TLC检测反应完成，加水淬灭,饱和柠檬酸水洗，DCM萃取，有机相旋干得目标化合物1.2g，收率95.4％。

(6)(2-(3-(2-(((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-4-氰基喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将3-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-8-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)氨基丙-2-基)喹啉-4-基三氟甲磺酸酯(1.2g,2.1mmol)，Zn(CN)₂(292mg,2.5mmol)，Pd(PPh₃)₄(121mg,0.1mmol)溶于DMF(10mL)中，氮气保护，100℃下反应4h，TLC检测反应完成，旋干，硅胶柱层析(EA:PE＝1:1)分离得目标化合物800mg，产率83.8％。

(7)2-(1-亚氨基-1,2,3,4-四氢苯并[c][2,6]萘啶-7-基)丙-1-胺的制备

将(2-(3-(2-(((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)-4-氰基喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(800mg,1.76mmol)溶于HCl/dioxane(4M,20mL)中，100℃下反应2h，TLC检测反应完成，旋干得800mg粗品，直接用于下一步反应。

(8)7-(1-氨基丙烷-2-基)-3,4-二氢苯并[c][2,6]萘啶-1(2H)-酮的制备

将2-(1-亚氨基-1,2,3,4-四氢苯并[c][2,6]萘啶-7-基)丙-1-胺(200mg,0.78mmol)溶于0.1M的NaOH水溶液(2.4mL)中，40℃下反应16h，LCMS检测反应完成，DCM萃取，有机相旋干得目标化合物80mg，收率39.7％。

(9)7-(1-(((2'-甲基-[4,5'-联嘧啶]-6-基)氨基)丙-2-基)-3,4-二氢苯并[c][2,6]萘啶-1(2H)-酮的制备

将7-(1-氨基丙烷-2-基)-3,4-二氢苯并[c][2,6]萘啶-1(2H)-酮(80mg,0.31mmol)，6-氯-2'-甲基-4,5'-联嘧啶(64mg,0.31mmol)，TEA(94mg,0.93mmol)溶于乙腈(5mL)中，130℃下反应1.5h，TLC检测反应完成，旋干硅胶柱层析(MeOH:DCM＝1:20)得目标化合物45mg，收率34.2％。

分子式:C₂₄H₂₃N₇O 分子量:425.2 LC-MS(M/e):426.2(M+H⁺)

¹H-NMR(400MHz,MeOD)δ:9.02-9.13(m,3H),8.85-9.02(m,1H),8.30-8.46(m,1H),7.68-7.72(m,1H),7.50-7.62(m,1H),6.75-6.85(m,1H),4.65(s,1H),3.70-4.00(m,2H),3.45-3.65(m,2H),3.05-3.10(m,2H),2.78(s,3H),1.60(s,3H).

制备例4：7-(1-(((2'-甲基-[4,5'-联嘧啶]-6-基)氨基)丙-2-基)-3,4-二氢苯并[c][2,6]萘啶-1(2H)-酮异构体的制备(化合物4'和化合物4”)

被拆分化合物：化合物4

拆分方法：高效液相色谱

拆分方法：

色谱柱型号	CHIRALPAK IA-3(IA30CE-OB011)
		色谱柱规格	0.46cm I.D.×25cm L
进样量	20ul
		流动相	MeOH/ACN＝98/2(V/V)
流速	1.0ml/min
		波长	UV 254nm
柱温	35℃
		HPLC设备	Shimadzu LC-20AD CP-HPLC-05

拆分结果：

化合物4'和化合物4”均为单一构型化合物。

制备例5：8-(1-((2'-甲基-[4,5'-联嘧啶]-6-基)氨基)丙-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-氮杂并[4,3-c]喹啉-1-酮的制备(化合物7)

(1)(2-(4-羟基喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将8-溴-4-羟基喹啉(18.0g,80.4mmol)，(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯(34.4g,121.5mmol)，Pd(dppf)Cl₂(2.9g,4.0mmol)，Na₂CO₃(17.0g,160.8mmol)溶于1,4-二氧六环(200mL)和水(20mL)，加毕，100℃反应16h。浓缩溶剂，硅胶柱纯化(DCM:MeOH＝20:1)后EA打浆，过滤，滤饼干燥得目标化合物(16.5g，收率：68.4％)。

(2)(2-(4-羟基-3-碘喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将(2-(4-羟基喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯(16.5g,55.0mmol)溶于DMF(220mL)，0℃下分批次加入NIS(12.4g,55mmol)，加毕25℃反应16h。倒入冷水中，固体析出，过滤，滤饼用甲醇打浆得标题化合物(15.3g，收率：65.4％)。

(3)(2-(3-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-1-炔-1-基)-4-羟基喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将((2-(4-羟基-3-碘喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.0g,4.7mmol)，Pd(PPh₃)₄(542.9mg,0.47mmol)，CuI(179.1mg,0.94mmol)，TEA(919.1mg,9.4mmol)溶于THF(50mL)，搅拌30min，加入N-Boc-丙炔胺(1.1g,7.0mmol)，加毕80℃反应2h。加水淬灭，EA萃取，硅胶柱纯化(PE:EA＝1:1)得标题化合物(850mg，收率39.9％)。

(4)(2-(3-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基)-4-羟基喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将(2-(3-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-1-炔-1-基)-4-羟基喹啉-8-基)烯丙基)氨基甲酸叔丁酯(600mg,1.3mmol)溶于MeOH(50mL)，加入PtO₂(200mg)，加毕25℃氢化反应4h。浓缩溶剂，硅胶柱纯化(PE:EA＝1:1)得标题化合物(520mg，收率85.5％)。

(5)8-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基)-3-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基)-4-基三氟甲磺酸喹啉酯的制备

将(2-(3-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基)-4-羟基喹啉-8-基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(500mg,1.1mmol)溶于DCM(50mL)，加入吡啶(260.7mg,3.3mmol)，-20℃下，滴加Tf₂O(460mg,1.6mmol)，加毕-20℃下反应2h。加水淬灭，有机相用柠檬酸水溶液洗涤，有机相干燥浓缩得标题化合物(520mg，收率80.8％)。

(6)8-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基)-3-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基)喹啉-4-羧酸甲酯的制备

将8-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基)-3-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基)-4-基三氟甲磺酸喹啉酯(520.0mg,0.88mmol),Pd(OAc)₂(19.7mg,88.0μmol)，XantPhos(98.4mg,0.17mmol)，N,N-二异丙基乙胺(172.0mg,1.7mmol)溶于MeOH(2mL)和DMF(20mL)，80℃下，CO气体环境下反应2h。加水稀释，EA萃取，浓缩溶剂硅胶柱纯化(PE:EA＝2:1)得标题化合物(150mg，收率34.0％)。

(7)8-(1-氨基丙-2-基)-3-(3-氨基丙基)喹啉-4-羧酸甲酯的制备

8-(1-((叔丁氧基羰基)氨基)丙-2-基)-3-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基)喹啉-4-羧酸甲酯(130mg,0.26mmol)溶于DCM(5mL)，加入TFA(2mL)，加毕，25℃反应1h。浓缩溶剂C18柱纯化(MeCN＝0-20％)得标题化合物(75mg，收率96.0％)。

(8)8-(1-氨基丙-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-氮杂并[4,3-c]喹啉-1-酮的制备

将8-(1-氨基丙-2-基)-3-(3-氨基丙基)喹啉-4-羧酸甲酯(75mg,0.25mmol)溶于混合溶剂MeOH/THF/H₂O＝3:1:1(10mL),加入LiOH·H₂O(52.3mg,1.25mmol)加毕30℃反应3h。浓缩溶剂，加水稀释，DCM萃取，有机相浓缩直接用于下一步。

(9)8-(1-((2'-甲基-[4,5'-联嘧啶]-6-基)氨基)丙-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-氮杂并[4,3-c]喹啉-1-酮的制备

将8-(1-氨基丙-2-基)-2,3,4,5-四氢-1H-氮杂并[4,3-c]喹啉-1-酮(N/A,0.25mmol)，6-氯-2'-甲基-4,5'-嘧啶(51.5mg,0.25mmol)，TEA(101.2mg,1.0mmol)溶于MeCN(10mL)，80℃反应48h。浓缩溶剂，制备板纯化(DCM:MeOH＝15:1)得标题化合物(15mg，两步收率13.8％)。

分子式:C₂₅H₂₅N₇O 分子量:439.5 LC-MS(M/e):439.9(M+H⁺)

¹H-NMR(400MHz,DMSO)δ:9.10-9.13(m,2H),8.86(s,1H),8.55-8.62(m,1H),8.40-8.50(m,1H),8.09(d,J＝8Hz,1H),7.65-7.8(m,1H),7.57-7.61(m,1H),4.45-4.60(m,1H),3.70-3.90(m,1H),2.90(s,3H),2.696(s,2H),1.85-2.05(m,2H),1.39(d,J＝4.8Hz 3H),1.24(m,3H).

2本发明化合物的药理活性试验

以下通过药理实验例进一步阐述本发明化合物的有益效果，但不应将此理解为本发明化合物仅具有下列有益效果。

实施例中，缩写所代表的含义如下：

EDTA：乙二胺四乙酸

DMSO：二甲基亚砜

Tris：三羟甲基氨基甲烷

Brij-35：月桂醇聚氧乙烯醚

DTT：二硫苏糖醇

实验例1：本发明化合物的体外酶学活性

供试品：本发明实施例合成的化合物，其结构式、制备方法见制备例。

实验试剂：

名称	品牌
		ADP-Glo Kinase Assay	Promege
DNA-PK	Promege

实验方法：

1.配制1倍的激酶缓冲液和终止液

1)1倍激酶缓冲液

40mM Tris,pH 7.5

0.0055％Brij-35

20mM MgCl₂

0.05mM DTT

2.化合物配制

1)化合物的检测起始浓度为1μM，配制成100倍浓度，即100μM。取2μl 10mM化合物，加入198μl 100％DMSO，配制成100μM化合物溶液。在96孔板上第二个孔中加入100μl的100倍的化合物，其他孔加入60μl的100％DMSO。从第二孔中取30μl化合物加入第三孔中，依次往下做3倍稀释，共稀释10个浓度。

2)转移100μl 100％DMSO和阳性对照wortmannin的最高浓度(400nM)分别到两个空的孔中作为Max孔和Min孔。

3)使用Echo转移50nl化合物到384孔板中。

3.配制2x激酶溶液

1)使用1倍激酶缓冲液配制2倍DNA-PK激酶溶液。

2)转移2.5μl 2倍酶溶液到384孔板反应孔中。

3)振荡，混匀，室温下静置。

4.配制2x底物溶液

1)使用1倍激酶缓冲液配制2倍底物溶液。

2)转移2.5μl 2倍底物溶液到384孔板反应孔中起始反应。

3)振荡，混匀。

5.激酶反应和终止

1)将384孔板盖上盖子，于28℃下孵育3小时。

2)转移5μl ADP-Glo试剂，于28℃下孵育2小时。

6.反应结果的检测

1)转移10μl激酶检测试剂到384孔板反应孔中终止反应。

2)室温下静止30分钟。

7.数据读取

在Envision读取样品数值。

8.抑制率计算

1.从Envision上复制数据。

2.把其转化成抑制率数据。

抑制百分数＝(max-conversion)/(max-min)*100.其中max是指DMSO对照的转化率，min是指无酶活对照的转化率，conversion是指供试品化合物各浓度下的转化率。

3.将数据导入MS Excel并使用XLFit excel add-in version 5.4.0.8进行曲线拟合。

9.结果

结果表明：本发明化合物对DNA-PK激酶活性有较好的抑制作用。

Claims

1.通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体：

其中，X₁为-N-；

X₂、X₃、X₄分别独立地为-CH-；

Y为-NH-；

R₁选自氢、卤素、羟基、C_1-6烷基、C_1-6烷基氨基、二(C_1-6烷基)氨基、卤代C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、氨基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基或氨基C_1-6烷氧基；

环A为

虚键

表示环A与环B连接的位置；每个Q¹、Q²分别独立地选自氘原子、卤素、羟基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基或氨基C_1-6烷氧基；

环B选自任选被1-4个取代基所取代的如下基团：

所述的取代基选自下列基团：氘原子、卤素、羟基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基或氨基C_1-6烷氧基，虚键

分别表示环B与Y或与环A连接的位置；

n选自0、1、2或3；

m、p分别独立地选自为0、1、2、3或4。

2.如权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体，其具有通式(II)所示的结构，

其中，R₁选自氢、C_1-4烷基、卤代C_1-4烷基、羟基C_1-4烷基、氨基C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、卤代C_1-4烷氧基、羟基C_1-4烷氧基或氨基C_1-4烷氧基；

每个Q¹分别独立地选自氘原子、C_1-4烷基、卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基C_1-4烷氧基或氨基C_1-4烷氧基；

Q²选自C_1-4烷基、卤代C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、羟基C_1-4烷氧基或氨基C_1-4烷氧基。

3.如权利要求1或2所述的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体，其中，

R₁选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、三氟甲基、甲氧基或乙氧基；

每个Q¹分别独立地选自氘原子、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基；

Q²选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、丙氧基或异丙氧基；

n选自0、1或2；

m、p分别独立地选自为1、2或3。

4.如权利要求3所述的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体，具有通式(III)所示的结构，

其中，

R₁选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；

每个Q¹分别独立地选自氘原子、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；

Q²选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基；

n选自0、1或2；

m、p分别独立地选自1、2或3。

5.如权利要求1中所述的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体，所述化合物选自：

。

6.如权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体，所述化合物选自：

7.含有权利要求1-6任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体的药物制剂，其特征在于，包含一种或多种药学上可接受的赋形剂，该药物制剂为药学上可接受的任一剂型。

8.含有权利要求1-6任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体的药物组合物，其特征在于，包含一种或多种第二治疗活性剂，所述的第二治疗活性剂选自抗癌剂，所述抗癌剂选自有丝分裂抑制剂、烷化剂、抗代谢物、DNA嵌合剂、抗肿瘤抗生素、生长因子抑制剂、信号传导抑制剂、细胞周期抑制剂、酶抑制剂、类维生素A受体调控剂、生物应答调节剂、激素类药物、血管再生抑制剂、细胞生长抑制剂、靶向抗体。

9.权利要求8所述的药物组合物，其中，所述酶抑制剂选自蛋白酶体抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂和异戊二烯基蛋白质转移酶抑制剂。

10.权利要求1-6任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其立体异构体、权利要求7所述的药物制剂、或权利要求8所述的药物组合物在制备预防和/或治疗良性肿瘤或癌症的药物中的用途，所述的癌症选自原位癌和转移的癌症。

11.权利要求10所述的用途，所述用途是用于制备与放疗和/或一种或多种抗癌剂联用以预防和/或治疗良性肿瘤或癌症的药物中的用途。

12.权利要求1-6任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其异构体、权利要求7所述的药物制剂、或权利要求8所述的药物组合物在用于制备使癌细胞对于抗癌剂和/或放疗敏感的药物中的用途。

13.一种试剂盒，其由如下部分构成：

(a)有效量的一种或多种权利要求1-6任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物或其异构体，

和(b)有效量的一种或多种其他抗癌剂。

14.一种通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其氘代物及其立体异构体的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：

其中，Z₁、Z₂分别独立地选自Boc、Cbz或Fmoc；Y’选自氟、氯、溴或碘；相应的X₁-X₄、R₁、环A、环B、Y、m、p如权利要求1-4任一项所定义。