CN111893066B

CN111893066B - 一种解淀粉芽孢杆菌scau-070及其应用

Info

Publication number: CN111893066B
Application number: CN202010773894.3A
Authority: CN
Inventors: 潘庆; 吴峰; 张晓勇
Original assignee: South China Agricultural University
Current assignee: South China Agricultural University
Priority date: 2020-08-04
Filing date: 2020-08-04
Publication date: 2023-01-06
Anticipated expiration: 2040-08-04
Also published as: CN111893066A

Abstract

本发明公开了一种解淀粉芽孢杆菌SCAU‑070及其应用。本发明分离筛选得到了一种解淀粉芽孢杆菌SCAU‑070，该菌株已于2020年7月1日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，其保藏编号为GDMCC No：61074。该菌株能够显著促进水产动物的生长，抑制水产动物养殖水体环境中的水生动物致病菌无乳链球菌、海豚链球菌、藤黄微球菌和副溶血性弧菌的生长，提高水产动物组织的抗氧化能力，并调节水产动物组织中细胞因子的含量；因此，该菌株对于减少抗生素和违禁药物的使用具有重要意义，在制备水产动物饲料添加剂、用于调节水产动物养殖水体环境的微生态制剂、以及用于提高水产动物机体免疫力的药物中具有良好的应用前景和市场价值。

Description

一种解淀粉芽孢杆菌SCAU-070及其应用

技术领域

本发明属于微生物学技术领域。更具体地，涉及一种解淀粉芽孢杆菌SCAU-070及其应用。

背景技术

根据联合国粮农组织对全球水产行业的状况调查显示，2016年鱼类总产量为1.71亿吨，其中约88％(超过1.51亿吨)被用于人类直接消费，这一比例在最近几十年中显着增加，这也意味着人们对水产的消费量达到了前所未有的高值并有可能继续上升。

在水产养殖种类中，罗非鱼被认为是世界第一流行的养殖鱼类，罗非鱼每年为全球粮食安全贡献450万吨，是一种相对便宜和高质量的蛋白质来源。然而，由于疾病暴发，特别是在夏季较高的水温下，养殖鱼类的死亡率往往很高。为了应对疾病在水生动物间的流行，抗生素被广泛用于预防水产养殖中的疾病风险。但是，大规模的抗生素滥用会造成严重的细菌耐药性，同时也会危害人类和水生动物。在这一严峻背景下，可替代抗生素的益生菌在水产养殖业的应用，日益成为应对病害的主流方法，被认为是环保的水产养殖工具。

随着对肠道菌群功能的不断深入了解，人们发现了益生菌在水产养殖中具有许多优势，包括改善消化率，提供营养，促进生长，调节微生物定植，改善免疫反应，改善水质和控制各种疾病等。例如，公开号为CN111394275A、公开日为2020年2月22日的中国发明专利公开了一种解淀粉芽孢杆菌SS1，该菌株具有提高鱼类碳水化合物利用率、促进鱼类生长、改善鱼类血糖稳态、缓解鱼类脂肪异常沉积、增加体蛋白沉积以及提高抗病能力的功能，能够用于制备水产饲料和水产养殖中。因此，筛选分离更多的益生菌用于水产养殖中，对于水产养殖业的健康稳定发展具有重要意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服水产养殖业中存在的抗生素滥用的缺陷和不足，提供一种解淀粉芽孢杆菌SCAU-070及其在水产养殖中的应用。

本发明的目的是提供一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)SCAU-070。

本发明另一目的是提供所述解淀粉芽孢杆菌SCAU-070在制备水产动物饲料添加剂中的应用。

本发明另一目的是提供所述解淀粉芽孢杆菌SCAU-070在制备用于调节水产动物养殖水体环境的微生态制剂中的应用。

本发明另一目的是提供所述解淀粉芽孢杆菌SCAU-070在制备用于提高水产动物机体免疫力的药物中的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明从健康罗非鱼肠道中分离得到了一种解淀粉芽孢杆菌菌株，经分离培养、形态观察以及16SrDNA序列分析，鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)SCAU-070，并于2020年7月1日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，其保藏编号为GDMCC No：61074，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

本发明发现该菌株能够显著促进水产动物(尤其是罗非鱼)的生长，抑制水产动物养殖水体环境中的水生动物致病菌(无乳链球菌、海豚链球菌、藤黄微球菌和副溶血性弧菌)的生长，提高水产动物组织的抗氧化能力，并调节水产动物组织中细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-10和补体C3)的含量；因此，以下应用均应在本发明的保护范围之内：

所述解淀粉芽孢杆菌SCAU-070在制备水产动物饲料添加剂中的应用。

具体优选地，所述饲料添加剂能够促进水产动物的生长。

所述解淀粉芽孢杆菌SCAU-070在制备用于调节水产动物养殖水体环境的微生态制剂中的应用。

具体优选地，所述微生态制剂能够抑制水产动物养殖水体环境中的水生动物致病菌的生长。

更优选地，所述水生动物致病菌为无乳链球菌、海豚链球菌、藤黄微球菌或副溶血性弧菌中的任意一种或几种。

更进一步优选地，所述水生动物致病菌为海豚链球菌。

所述解淀粉芽孢杆菌SCAU-070在制备用于提高水产动物机体免疫力的药物中的应用。

具体优选地，所述药物能够提高水产动物组织的抗氧化能力，并调节水产动物组织中细胞因子的含量。

更优选地，所述细胞因子包括TNF-α、IL-6、IL-10和补体C3。

优选地，所述水产动物为罗非鱼。

更优选地，所述罗非鱼为吉富罗非鱼。

本发明具有以下有益效果：

本发明分离筛选得到了一种解淀粉芽孢杆菌SCAU-070，该菌株对无乳链球菌、海豚链球菌、藤黄微球菌和副溶血性弧菌4种常见的水生动物致病菌形成了明显的抑菌圈，其中对海豚链球菌的抑制生长效果最好；显著促进水生动物的生长，降低其饲料系数；提高水生动物抗氧化及免疫能力的作用，还能够有效调节水生动物组织中多种细胞因子的含量；

因此，本发明解淀粉芽孢杆菌SCAU-070可用于促进水产动物生长、提高水产动物的抗氧化能力和免疫能力、预防或治疗水产动物疾病，减少抗生素和违禁药物的使用，在制备水产动物饲料添加剂、用于调节水产动物养殖水体环境的微生态制剂、以及用于提高水产动物机体免疫力的药物中的应用前景广泛。

附图说明

图1是所得菌株的16SrDNA序列构建所得的系统进化树。

图2是解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对海豚链球菌的抑菌效果。

图3是解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对罗非鱼组织中细胞因子含量的影响结果。

具体实施方式

以下结合具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。

实施例1解淀粉芽孢杆菌SCAU-070的分离鉴定

1、实验方法

(1)采样：健康吉富罗非鱼采自华南农业大学动物科学学院地下养殖室。

(2)培养基：富集用液体培养基(LB培养基)：蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl 10g，蒸馏水1000mL，pH值7.0-7.2。

分离用培养基：LB培养基中加质量分数1.5％-2％的琼脂。

(3)芽孢杆菌的分离

将罗非鱼外表用沾有75％酒精的棉花消毒后，置于超净台解剖。分离出罗非鱼肠道，并用已消毒的镊子和剪刀挤出肠道内容物。

将罗非鱼肠道内容物用1mL无菌水彻底研磨。稀释10倍后，将0.1mL细菌液涂布于准备好的分离培养基上(每种培养基至少3份)，反复划线培养直至分离得到多株纯菌株。

从罗非鱼肠道分离得到1株菌，编号为SCAU-070。其菌落形态为白色不透明，表面粗糙，有隆起，边缘不规则。从分离培养基平板上挑取纯化的菌落，接种于富集用液体培养基中，37℃，200r/min培养12h，4℃保存备用。用革兰氏染色后再1000倍显微镜下观察该菌株为革兰氏阳性菌，呈杆状，可形成内生芽孢，呈椭圆形，两端钝圆，芽孢囊不膨大，中生到次端生，有运动性。初步鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus)。

(4)芽孢杆菌的鉴定

取一个菌落并添加5mL DNA提取缓冲液(100mmol/L Tris-HCl，100mmol/L EDTA-Na₂、1mol/L NaCl，1％CTAB pH 8.0)，添加10％SDS 800μL并在37℃下孵育保持1小时。在此期间，将混合物连续混合几次，将等体积的饱和苯酚：氯仿：异戊醇(25：24：1)添加到离心管中，并以12000r/min的速度离心10分钟，萃取两次，用氯仿：异戊醇(24：1)以12000r/min的速度离心10分钟，萃取一次。将上清液放入新的离心管中，加入0.6体积的异丙醇使DNA沉淀1h，以12000r/min的速度离心10min，并弃去上清液。将DNA沉淀溶解在0.1mL TE缓冲液(10mmol/L Tris-HCl，1mmol/L EDTA，pH 8.0，带有RNase酶)中，在100℃加热30分钟。将混合物在4℃下以10000r/min离心10分钟，以获得模板DNA。

PCR扩增16S rDNA序列、PCR产物纯化后，测序。PCR的反应引物为：上游引物K1F，其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，下游引物K2R，其核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。PCR条件为：95℃预变性5min；95℃变性60s、55℃退火60s、72℃延伸90s；最后72℃延伸10min。所得菌株的16S rDNA测序由BIOTREE(中国)进行。在NCBI数据库中进行BLAST比对分析，与已登陆的解淀粉芽孢杆菌16SrDNA进行同源性比对分析，并借助MEGA7.0将所得菌株的16SrDNA序列和参考的芽孢杆菌属、芽孢乳杆菌属、赖氨酸芽孢杆菌以及葡萄球菌的序列进行比对分析，并用Neighbor-Joining法构建系统进化树。

2、实验结果

所得菌株的16SrDNA序列与解淀粉芽孢杆菌16SrDNA序列同源性为99％，所得菌株的16SrDNA序列构建所得的系统进化树如图1所示，可以看出，在系统发育树中所得菌株与解淀粉芽孢杆菌聚为一簇，鉴定其为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)SCAU-070，并于2020年7月1日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，其保藏编号为GDMCC No：61074，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

解淀粉芽孢杆菌SCAU-070的16SrDNA序列如SEQ ID NO:1所示。

实施例2解淀粉芽孢杆菌SCAU-070的抑菌实验

1、琼脂块法抑菌实验

(1)实验方法

用LB琼脂培养基将解淀粉芽孢杆菌SCAU-070在37℃下培养24h，切下含有解淀粉芽孢杆菌SCAU-070细胞的琼脂块并将其置于指示微生物的测试平板上。以无乳链球菌、海豚链球菌、藤黄微球菌和副溶血性弧菌4种常见的水生动物致病菌作为指示微生物，将带有琼脂块和指示微生物的测试板在37℃下培养27h，抗菌活性表示为生长抑制区的直径(以毫米为单位)，每个测试进行三遍。

(2)实验结果

解淀粉芽孢杆菌SCAU-070的抑菌实验结果如表1所示，解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对海豚链球菌的抑菌效果如图2所示，从表1和图2可以看出，该菌株对4种常见的水生动物致病菌(无乳链球菌、海豚链球菌、藤黄微球菌和副溶血性弧菌)均形成了明显的抑菌圈，其中，对海豚链球菌的抑菌效果最好。

表1解淀粉芽孢杆菌SCAU-070的抑菌实验结果

2、活性提取物最低抑菌浓度实验

(1)实验方法

首先，以1％的接种量将新鲜的解淀粉芽孢杆菌SCAU-070接入灭菌的200mL LB液体培养基，然后在30℃，180r/min持续18h，接着以10000r/min发酵。离心5分钟后，将上清液用0.22μm的微孔滤膜过滤，得到无菌滤液。将无菌滤液和正丁醇以1：7的比例超声提取0.5小时。收集萃取层，并使用旋转蒸发仪在45℃减压浓缩。将得到的粗提取物溶解在1mL甲醇中，并在4℃下储存直至使用。最后，将细菌的过夜培养物在相应的培养基中在600nm下调节至光密度为0.6。然后，将不同浓度(50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL、6.2μg/mL、3.1μg/mL和1.6μg/mL)的活性提取物在30℃下转移至96孔聚苯乙烯微量滴定板的孔中(每孔100μL)，孵育24小时。MIC记录为活性提取物的最低抑菌浓度，在该浓度下未观察到细菌生长。每个提取物与阳性对照(链霉素)一式三份进行。

(2)实验结果

解淀粉芽孢杆菌SCAU-070的活性提取物最低抑菌浓度结果如表2所示，可以看出，该菌株抑制无乳链球菌、海豚链球菌、藤黄微球菌和副溶血性弧菌生长的活性提取物最低抑菌浓度依次为6.2μg/mL、3.1μg/mL、12.5μg/mL和25μg/mL。说明该菌株对海豚链球菌的抑制生长效果最好。

表2解淀粉芽孢杆菌SCAU-070的活性提取物最低抑菌浓度结果

以上实施例1和2的实验结果表明：解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对无乳链球菌、海豚链球菌、藤黄微球菌和副溶血性弧菌4种常见的水生动物致病菌形成了明显的抑菌圈，其中对海豚链球菌的抑制生长效果最好，说明解淀粉芽孢杆菌SCAU-070具有抑制致病菌的特征，具有作为调节水产动物养殖水体环境的微生态制剂的应用潜力。

实施例3解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对罗非鱼的益生作用

1、实验方法

(1)解淀粉芽孢杆菌SCAU-070添加饲料的准备

将解淀粉芽孢杆菌SCAU-070接种在LB液体培养基中，于37℃培养24h，之后按照发酵工艺：葡萄糖42g/L、L-谷氨酸14g/L、MgSO₄ 0.5g/L、KCl 0.5g/L、KH₂PO₄ 1g/L、FeSO₄0.15mg/L、MnSO₄ 5.0mg/L、CuSO₄ 0.16mg/L，pH 7.0，温度27℃、转速200r/min，接种量4％，装液量50mL/250mL，摇床中培养36h。随后发酵液在8000rpm离心15min后弃去上清液。为了去除残留的营养体，所有的芽孢被转入溶菌酶(4mg/mL)中处理10min，处理后的芽孢用无菌水冲洗并8000rpm离心15min，重复一次。之后的芽孢放入68℃的水浴锅热处理1h。处理后的芽孢放置于4℃短暂保存供饲料配置使用。

将基础罗非鱼日粮中的配料粉逐级混合，接着加入水和油，之后混合1×10⁷CFU/g解淀粉芽孢杆菌SCAU-070。然后使用双螺杆挤出机(VALVA60-III，中国广州)将混合团挤出成直径2毫米的颗粒饲料，放在空调室中并在空气中干燥，然后过筛，放入密封袋中于-20℃的冰箱中保存，备用。

(2)罗非鱼饲养

从广东省罗非鱼良种场购买健康的吉富罗非鱼，在正式实验开始前，罗非鱼先在250L的养殖水桶中适应环境2周，水桶采用循环淡水并且在这段期间给罗非鱼投喂灭菌后的罗非鱼基础饲料。然后，体重介于10.6克到12.2克的罗非鱼被选中，再随机分成2个投喂组(解淀粉芽孢杆菌SCAU-070含量分别为0和10⁷cfu/g)。每组包括3个250L的水桶，每桶分别装30条罗非鱼。

(3)数据分析

将记录的原始数据资料进行整理后输入计算机，然后所有数据均通过适用于Windows的SPSS 20.0软件进行了统计分析。用Duncan来检验方法之间的差异。当数据显示相似的变化时，首先测试数据的均匀性，然后使用one-way ANOVA来测试。当该值为(P<0.05)时，被认为室统计学上的显著差异，结果表示为平均值±SD(标准差)。

(4)生长试验

生长试验包括2个喂食剂量组：饲料中解淀粉芽孢杆菌SCAU-070含量分别为0cfu/g和10⁷cfu/g。罗非鱼按照体重的4％-7％每天投喂3次(8:30am，1:00pm，5:30pm)。为了防止各组间出的产生菌污染，每个水桶采用独立循环系统，并且每两天会对水桶进行50％-70％的清洁淡水替换。此次试验共进行8周，每两周都会对各组罗非鱼进行称重，每天的饲料投喂量以及死亡个体重量都会仔细记录。其中增重率、饲料系数和特定生长的计算公式如下：

增重率＝100％×(终末体重-初始体重)/初始体重；

饲料系数＝总饲料摄食量/(终末总重+死亡总重-初始总重)；

特定生长率＝(ln试验鱼终末体重-ln试验鱼初始体重)/饲养天数×100％。

2、实验结果

解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对罗非鱼的生长实验结果如表3所示，可以看出，在试验开始之前，各组罗非鱼的体重没有出现显著性差异(P>0.05)；经过8周的喂养后，饲料中解淀粉芽孢杆菌SCAU-070含量为10⁷cfu/g的罗非鱼的终末体重、增重率和特定生长率，都显著高于饲料中不添加解淀粉芽孢杆菌SCAU-070的罗非鱼组(P<0.05)，而饲料系数显著低于饲料中不添加解淀粉芽孢杆菌SCAU-070的罗非鱼组(P<0.05)。说明解淀粉芽孢杆菌SCAU-070能够显著促进罗非鱼的生长，降低其饲料系数，具有作为水产动物饲料添加剂的开发利用价值。

表3解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对罗非鱼的生长实验结果

注：生长数据表示为平均值±标准差的形式，具有相同上标字母的表示无统计学差异，即P>0.05。

实施例4解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对罗非鱼血清生理生化指标的影响

1、实验方法

(1)采集血清

每个水桶中随机抽取两条吉富罗非鱼。使用100μl/L剂量的丁香油麻醉后，用无菌的1毫升皮下注射器直接从鱼尾静脉抽取血液。血液在室温下自然凝固60min，凝固的血液在4℃下以2500r/min离心20min。最后，将收集的血清储存无菌的冻存管中，于-80℃保藏。

(2)罗非鱼血清生理生化指标的检测

血清中的谷丙转氨酶(ALT)，谷草转氨酶(AST)，总胆汁酸(TBA)，总蛋白(TP)，白蛋白(ALB)，球蛋白(GLB)使用武汉赛维尔生物科技有限公司的自动化学分析仪进行检测，数据分别表示为U/L(ALT和AST)，u mol/L(TBA)，g/L(TP、ALB和GLB)。血清中的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)使用南京建城生物工程研究所市售试剂盒中描述的方法进行测量，其中使用全波长多功能酶标仪在450nm和532nm处测量吸光度，数据分别表示为U/mL(SOD)和nmol/mL(MDA)。

2、实验结果

解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对罗非鱼血清生理生化指标的影响结果如表4所示，可以看出，饲料中解淀粉芽孢杆菌SCAU-070含量为10⁷cfu/g的罗非鱼组，其血清中的总蛋白、白蛋白、球蛋白和超氧化物歧化酶，都显著高于未添加解淀粉芽孢杆菌SCAU-070的罗非鱼组(P<0.05)，丙二醛含量则是显著低于未添加解淀粉芽孢杆菌SCAU-070的罗非鱼组(P<0.05)；另外，相比无菌组，解淀粉芽孢杆菌SCAU-070含量为10⁷cfu/g的罗非鱼组的谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆汁酸和白蛋白/球蛋白比值有所提高，但无显著性差异(P>0.05)。说明解淀粉芽孢杆菌SCAU-070能够显著提高罗非鱼血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白和超氧化物歧化酶的含量，显著降低丙二醛的含量。

表4解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对罗非鱼血清生理生化指标的影响结果

注：血清生理生化数据表示为平均值±标准差的形式，具有相同上标字母的表示无统计学差异，即P>0.05。

实施例5解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对罗非鱼组织抗氧化能力的影响

1、实验方法

(1)采集组织

抽血后，立即从所有12条吉富罗非鱼中无菌切除脾脏，后肠和肾脏组织，并保存在-80℃的无菌冻存管中，待使用。

(2)罗非鱼组织抗氧化指标的检测

将脾脏，后肠和头肾用生理盐水匀浆，在4℃下离心，然后将上清液用于分离。接着使用南京建城生物工程研究所的相应试剂盒测量脾脏，后肠和头肾的超氧化物歧化酶，丙二醛和总抗氧化能力，然后使用全波长多功能酶标仪测定其含量或活性。

2、实验结果

解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对罗非鱼组织抗氧化能力的影响结果如表5所示，可以看出，在脾脏中，有菌组的超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力均显著高于无菌组(P<0.05)，有菌组的丙二醛含量有所降低，但无显著差异；在后肠中，有菌组的总抗氧化能力显著高于无菌组(P<0.05)；在头肾组织中，有菌组的超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力同样显著高于无菌组(P<0.05)。说明解淀粉芽孢杆菌SCAU-070能够显著提高罗非鱼脾脏和头肾中超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力，显著提高罗非鱼后肠中总抗氧化能力。

表5解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对罗非鱼组织抗氧化能力的影响结果

注：组织抗氧化数据表示为平均值±标准差的形式，具有相同上标字母的表示无统计学差异，即P>0.05。

实施例6解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对罗非鱼组织中细胞因子含量的影响

1、实验方法

罗非鱼组织中细胞因子含量的检测：从上海益集实业有限公司购买ELISA试剂盒以测量每种细胞因子的含量。该试剂盒使用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)。依次将样品，标准品和HRP标记的检测抗体添加到包被相应抗体的包被微孔中，孵育并彻底清洗。底物辣根过氧化物酶(TMB)用于显色，而TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，在酸的作用下转化为最终的黄色。颜色深度与样品中补体C3，IL-6，IL-10和TNF-α的含量呈正相关。用酶标仪测定450nm处的吸光度，最后计算样品浓度。

2、实验结果

解淀粉芽孢杆菌SCAU-070对罗非鱼组织中细胞因子含量的影响结果如图3所示，可以看出，相比未加菌组，在加解淀粉芽孢杆菌SCAU-070量为10⁷cfu/g的罗非鱼组中的两类促炎因子(TNF-α和IL-6)有所降低，甚至在后肠和头肾组织中，加菌组的IL-6含量显著低于未加菌组(P<0.05)；同时，无论是在脾脏、后肠还是头肾组织中，加菌组的IL-10含量都显著高于未加菌组(P<0.05)；另外，在脾脏和头肾组织中，加菌组补体C3含量也显著高于未加菌组(P<0.05)。说明解淀粉芽孢杆菌SCAU-070能够显著提高罗非鱼脾脏、后肠和头肾组织中IL-10含量，显著提高罗非鱼脾脏和头肾组织中补体C3含量，显著降低后肠和头肾组织中IL-6含量。

以上实施例4、5和6的实验结果表明：解淀粉芽孢杆菌SCAU-070可以提高罗非鱼的抗氧化能力，并通过调节组织中细胞因子的含量来提高鱼体本身的免疫能力；因此，解淀粉芽孢杆菌SCAU-070可以提高水产动物的免疫力，能够用于制备提高水产动物免疫药物的益生菌。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

序列表

<110> 华南农业大学

<120> 一种解淀粉芽孢杆菌SCAU-070及其应用

<160> 3

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 880

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

gacgctgagc tagatcctgc gctcagagtt tgatcctggc tcagagtgtt gcatcactga 60

gcttagaggt tgaacctgtg agtaacacgt gggtaacctg cccataagac tgggataact 120

ccgggaaacc ggggctaata ccggataaca ttttgaaccg catggttcga aattgaaagg 180

cggcttcggc tgtcacttat ggatggaccc gcgtcgcatt atctagttgg tgaggtaacg 240

gctcaccaag gcaacgatgc gtagccgacc tgagagggtg atcggccaca ctgggactga 300

gacacggccc agactcctac gggaggcagc agtagggaat cttccgcaat ggacgaaagt 360

ctgacggagc aacgccgcgt gagtgatgaa ggctttcggg tcgtaaaact ctgttgttag 420

ggaagaacaa gtgctagttg aataagctgg caccttgacg gtacctaacc agaaagccac 480

ggctaactac gtgccagcag ccgcggtaat acgtaggtgg caagcgttat ccggaattat 540

tgggcgtaaa gcgcgcgcag gtggtttctt aagtctgatg tgaaagccca cggctcaacc 600

gtggagggtc attggaaact gggagacttg agtgcagaag aggaaagtgg aattccatgt 660

gtagcggtga aatgcgtaga gatatggagg aacaccagtg tcgaaggcga ctttctggtc 720

tgtaactgac actgaggcgc gaaagcgtgt gagcaacagg attagatacc ctgctagtca 780

acgacgtaaa cgatgagtgc taagtgctta gaggatttcg accttagtgc tgagcttaac 840

gcataagcac tccgtcctgg tgtaatacgg tcgtcaaggc 880

<210> 2

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

agagtttgat cctggctcag 20

<210> 3

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 3

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Claims

1.一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)SCAU-070在制备用于调节水产动物养殖水体环境的微生态制剂中的应用，所述微生态制剂用于抑制水产动物养殖水体环境中的水生动物致病菌的生长，所述水生动物致病菌为无乳链球菌（ Streptococcus agalactiae ）、海豚链球菌（ Streptococcus iniae ）、藤黄微球菌（ Micrococcus luteus ）或副溶血性弧菌（ Vibrio parahemolyticus ）中的任意一种或几种；

所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)SCAU-070，已于2020年7月1日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，其保藏编号为GDMCC No：61074。

2.权利要求1中所述解淀粉芽孢杆菌SCAU-070在制备用于提高水产动物机体免疫力的药物中的应用，所述药物用于调节水产动物组织中细胞因子的含量，所述水产动物为罗非鱼。

3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述罗非鱼为吉富罗非鱼。