CN111826298A - 一株高效降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了高效降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）及其应用，属于生物技术领域，该凝结芽孢杆菌命名为ASAG215，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.18368。最佳降解效果的条件为：凝结芽孢杆菌初始浓度为108 CFU/mL，pH值为6.6~7.0，培养温度为40~48℃，转速为120 rpm~160 rpm。本发明所述菌株2 h内将50μg/mL玉米赤霉烯酮降解为无毒产物，降解率达92%以上。本发明还提供了含有该菌株的降解玉米赤霉烯酮的菌制剂和菌制剂的运用。本发明使用的菌制剂制备方法简单，不含抗生素成分，无毒副作用，无耐药性，无污染，具有显著的经济效益和实际应用价值。

Description

一株高效降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌及其应用
技术领域
本发明属于有益微生物降解技术领域，具体涉及的是一株能够高效降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌及其应用。
背景技术
玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEA）又称F-2毒素，是一类2，4-二羟基苯甲酸的内酯化合物，主要由禾谷镰孢菌（Fusarium.graminearum）、粉红镰孢菌（F.roseum）和尖孢镰孢菌（F.oxysporum）等产生。ZEA具有类雌性激素作用，可与子宫内雌激素受体产生不可逆结合，从而影响动物的生殖生理。据联合国粮农组织估计，全世界每年有25%的农作物被霉菌毒素污染，其中受ZEA污染严重，全球畜禽因食用ZEA污染的饲料使畜牧业每年遭受近百亿美元的经济损失。畜禽摄入污染ZEA的饲料引起动物生产性能和繁殖性能的下降、并降低动物免疫力诱发疾病。同时，ZEA还可残留在肉、蛋以及奶制品等畜产品中，通过食物链，对人类健康造成巨大威胁。
近年来，研究报道了大量有关ZEA的去毒方法。主要有物理法、化学法和生物法。物理法和化学法是传统的ZEA去毒法，但这些方法由于去毒不彻底、影响饲料适口性、造成营养成分损失、难以规模化生产等缺点，没有被广泛运用。而微生物及其生物酶降解ZEA法因具有安全环保、解毒彻底、特异性强等优点而备受研究者关注。目前虽有研究报道，真菌、细菌及其代谢酶能降解ZEA，但一方面出于安全性考虑，一些具有较高降解ZEA活性的微生物菌株不能直接应用于食品或饲料中；另一方面微生物降解酶由于分离纯化过程复杂、活性不稳定等问题，尚较难应用于实际生产中。
综上所述，为解决农产品、饲料原料及饲料中ZEA污染问题，有必要从自然资源中分离筛选安全、高效降解ZEA的微生物菌种，尤其是可直接在实际生产中利用的菌种，并进一步研究其生物特性及降解产物毒性，研发适用于饲料行业的ZEA微生物菌制剂，减少养殖业的经济损失。大部分关于降解ZEA的菌株为真菌（酵母菌）或不允许直接在实际生产中运用的细菌（假单胞菌）。现有技术中，公布号CN105385616A的发明专利公开了一种用于降解玉米赤霉烯酮的枯草芽孢杆菌ASAGF141，该菌株反应6h对终浓度为20μg/mL的ZEA的降解率达90％以上。而现有专利中菌株的降解时间均较长，不能在食物排出肠道前完全降解ZEA，且现有菌株对高浓度ZEA降解效果有待提高。
发明内容
为了克服现有技术中的不足，解决ZEA降解时间长、不能在食物排出肠道前完全降解、且对高浓度ZEA降解效果差的技术问题，本发明提供一株能快速、高效地降解玉米赤霉烯酮的凝结芽孢杆菌及其应用。
本发明通过以下技术方案予以实现。
一株凝结芽孢杆菌ASAG215，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.18368，保藏单位地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为：2019年8月6日。本发明所提供的高效降解ZEA的凝结芽孢杆菌ASAG215（保藏编号：CGMCCNo.18368）菌株是从山西省太原古交养驴基地的驴肠道内容物中分离得到，ASAG215仍然可能发生突变或变异。例如，用化学药剂如亚硝基胍（NTG）、或物理方法如紫外、辐射得到的诱变菌株，只要保留降解ZEA的能力特征，也属于本发明的一部分。
进一步地，所述凝结芽孢杆菌ASAG215菌株在LB培养基上生长，菌落圆形，白色，扁平，边缘不整齐，革兰氏阳性菌，细胞呈杆状，无鞭毛，端生芽孢，芽孢1.2~1.5μm，椭圆到柱状，芽孢形成后菌体无明显膨大。葡萄糖：+；蔗糖：+；乳糖：+；甘露醇：+；淀粉水解：+；玉米淀粉：+；吲哚产生：+；甲基红：+；明胶液化：+；脲酶：+；分解酪素：+；50℃生长：+。
根据Takara细菌基因组DNA提取试剂盒步骤和PCR方法提取并扩增该菌株的基因组DNA，通过测定16SrRNA基因序列的全长约为1500bp，测序后在NCBI使用Blast比对，从GenBank数据库中对相关序列进行系统发育分析，结果发现与凝结芽孢杆菌的AB362708.116SrRNA基因序列有100％的同源性，结合生理生化特征，鉴定为凝结芽孢杆菌。
一种高效降解玉米赤霉烯酮的菌剂，其中：所述菌剂的活性成分为凝结芽孢杆菌ASAG215或其衍生的突变菌株，所述凝结芽孢杆菌ASAG215的保藏编号为CGMCCNo.18368。
进一步地，该菌剂为液态菌剂或固态菌剂。
一种所述的菌剂的制备方法，包括以下步骤：
（1）、浓度为30%的甘油与保藏编号为CGMCCNo.18368的凝结芽孢杆菌ASAG215或其衍生的突变株菌液在固体培养基上活化，菌液与甘油的体积比为1:1；所述的固体培养基成分为：所述的固体培养基成分为：蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH值为6.5~7.0；
（2）、将步骤（1）活化后的菌液1mL接种于50mL的种子培养液中，培养至OD值为0.7~0.8，达到对数生长期，得到种子液；所述的种子培养液的成分为：蛋白胨10g，葡萄糖60g，酵母膏5g，MgSO4·7H2O0.5g，CaCO310g，蒸馏水1000mL，pH值为6.8~7.2；
（3）、将步骤（2）获得的种子液接种于发酵培养基中，培养至稳定期，OD值为1.0~1.2，制得液态菌剂；所述的发酵培养基成分为：蛋白胨10g，葡萄糖10g，酵母浸粉6g，MgSO4·7H2O1.0g，K2HPO4·3H2O2.0g蒸馏水1000mL，pH值为6.5~7.0。
进一步地，该方法还包括将所述液态菌剂与玉米芯粉按照1:5的质量比混合均匀，再向其中加入2~5%w/v的保护剂，搅拌均匀后进行喷雾干燥，制得固态菌剂；所述的喷雾干燥条件为：进风口温度160~180℃，出口温度60~90℃，进料速度1~1.5L/h。
所述的凝结芽孢杆菌ASAG215或者所述的菌剂在降解玉米赤霉烯酮中的应用。
进一步地，所述的凝结芽孢杆菌ASAG215对玉米赤霉烯酮所起降解效果的是胞内酶。
进一步地，凝结芽孢杆菌ASAG215对玉米赤霉烯酮降解的步骤为：凝结芽孢杆菌ASAG215的初始浓度为108CFU/mL，pH值为6.6~7.0，培养温度为40~48℃，转速为120rpm~160rpm。当ZEA初始浓度为50μg/mL时，2h后凝结芽孢杆菌对其降解率达92%。
凝结芽孢杆菌ASAG215降解ZEA活性组分的确定方法，按照下述步骤进行：取凝结芽孢杆菌ASAG215的发酵液、菌体细胞和胞内提取物运用于降解ZEA。发现发酵上清液对ZEA的降解率显著高于菌体细胞和胞内提取物，证明凝结芽孢杆菌ASAG215降解ZEA活性组分存在于发酵上清液中。
进一步地，凝结芽孢杆菌液态菌剂在降解玉米赤霉烯酮时，按照质量比1:100的配比喷施于玉米赤霉烯酮污染的谷物或饲料原料，所述液态菌剂的活细胞数量达108CFU/mL。
进一步地，凝结芽孢杆菌固态菌剂在降解玉米赤霉烯酮时，采用按照0.05~0.10%的添加量加入到谷物、饲料原料或者饲料中，混合均匀，所述固态菌剂的活细胞数量达108CFU/mL。
进一步地，所述谷物包括玉米、小麦、花生粕、稻谷或高粱等；所述饲料原料及饲料包括玉米、小麦、花生粕、稻谷、高粱等饲料原料及它们加工而成的饲料。
与现有技术相比本发明的有益效果为：
1、本发明使用的凝结芽孢杆菌ASAG215，能高效快速的降解ZEA。当ZEA初始浓度为50μg/mL时，2h后凝结芽孢杆菌ASAG215对其降解率达95%；
2、本发明使用的凝结芽孢杆菌ASAG215，可以直接作为饲料添加剂加入饲料中使用，不会破坏饲料中的营养成分，对饲料的感官品质没有影响，菌种安全且生产成本低、易操作、耐高温。解决饲料原料及饲料ZEA污染问题，提高畜牧业经济效益。
附图说明
图1为凝结芽孢杆菌ASAG215降解玉米赤霉烯酮的效率曲线图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细描述。
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例均按照常规实验条件。另外，对于本领域技术人员而言，在不偏离本发明的实质和范围的前提下，对这些实施方案中的物料成分和用量进行的各种修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
实施例中涉及到的百分号“%”，若未特别说明，指质量百分比；溶液的百分比指100mL中含有的溶质克数。
实施例1 降解ZEA的凝结芽孢杆菌ASAG215的分离与鉴定
1．菌的分离
（1）从山西省太原古交养驴基地的驴屠宰后，无菌管收集肠道内容物，并注明采集名称、地点、时间等信息。将1g肠道内容物放在10mL分离缓冲液，离心，取上清，用浓度梯度法逐级稀释10、100、1000和1000倍。
（2）将不同浓度稀释的肠道内容物悬浊液涂布在固体平板上，42℃培养36h，挑取平板上形态特征、颜色、大小不同的菌株进行平板划线纯化，接纯化后的菌株进行ZEA降解试验，分析得到降解效率最高的一株菌，该菌编号为ASAG215。
2．菌的鉴定
（1）菌株ASAG215在LB培养基上为圆形，白色，扁平，边缘不整齐，革兰氏阳性菌，细胞呈杆状，无鞭毛，端生芽孢。芽孢1.2~1.5μm，椭圆到柱状。芽孢形成后菌体无明显膨大；葡萄糖：+；蔗糖：+；乳糖：+；甘露醇：+；淀粉水解：+；玉米淀粉：+；吲哚产生：+；甲基红：+；明胶液化：+；脲酶：+；分解酪素：+；50℃生长：+。生化特性符合凝结芽孢杆菌的特征。
（2）经PCR扩增得到16S rRNA基因序列，全长约1500 bp。测序后，在NCBI上使用Blast比对，从GenBank数据库中获得相关序列并进行系统发育分析，测序结果见SEQ IDNO:1。结果表明，菌株ASAG215与凝结芽孢杆菌（AB362708.1）16S rRNA同源性达到100％，基因分析表明该菌株ASAG215为凝结芽孢杆菌。
SEQ ID NO:1：
1~60 tagagtttga tcatggctca ggacgaacgc tggcggcgtg cctaatacat gcaagtcgtg
61~120 cggacctttt aaaagcttgc ttttaaaagg ttagcggcgg acgggtgagt aacacgtggg
121~180 caacctgcct gtaagatcgg gataacgccg ggaaaccggg gctaataccg gatagttttt
181~240 tcctccgcat ggaggaaaaa ggaaagacgg cttcggctgt cacttacaga tgggcccgcg
241~300 gcgcattagc tagttggtgg ggtaacggct caccaaggca acgatgcgta gccgacctga
301~360 gagggtgatc ggccacattg ggactgagac acggcccaaa ctcctacggg aggcagcagt
361~420 agggaatctt ccgcaatgga cgaaagtctg acggagcaac gccgcgtgag tgaagaaggc
421~480 cttcgggtcg taaaactctg ttgccgggga agaacaagtg ccgttcgaac agggcggcgc
481~540 cttgacggta cccggccaga aagccacggc taactacgtg ccagcagccg cggtaatacg
541~600 taggtggcaa gcgttgtccg gaattattgg gcgtaaagcg cgcgcaggcg gcttcttaag
601~660 tctgatgtga aatcttgcgg ctcaaccgca agcggtcatt ggaaactggg aggcttgagt
661~720 gcagaagagg agagtggaat tccacgtgta gcggtgaaat gcgtagagat gtggaggaac
721~780 accagtggcg aaggcggctc tctggtctgt aactgacgct gaggcgcgaa agcgtgggga
781~840 gcaaacagga ttagataccc tggtagtcca cgccgtaaac gatgagtgct aagtgttaga
841~900 gggtttccgc cctttagtgc tgcagctaac gcattaagca ctccgcctgg ggagtacggc
901~960 cgcaaggctg aaactcaaag gaattgacgg gggcccgcac aagcggtgga gcatgtggat
961~1020 taattcgaag caacgcgaag aaccttacca ggtcttgaca tcctctgacc tccctggaga
1021~1080 cagggccttc cccttcgggg gacagagtga caggtggtgc atggttgtcg tcagctcgtg
1081~1140 tcgtgagatg ttgggttaag tcccgcaacg agcgcaaccc ttgaccttag ttgccagcat
1141~1200 tcagttgggc actctaaggt gactgccggt gacaaaccgg aggaaggtgg ggatgacgtc
1201~1260 aaatcatcat gccccttatg acctgggcta cacacgtgct acaatggatg gtacaaaggg
1261~1320 ctgcgagacc gcgaggttaa gccaatccca gaaaaccatt cccagttcgg attgcaggct
1321~1380 gcaacccgcc tgcatgaagc cggaatcgct agtaatcgcg gatcagcatg ccgcggtgaa
1381~1440 tacgttcccg ggccttgtac acaccgcccg tcacaccacg agagtttgta acacccgaag
1441~1500 tcggtgaggt aacctttacg gagccagccg ccgaaggtgg gacagatgat tggggtgaag
1501~1542 tcgtaacaag gtagccgtat cggaaggtgc ggttggatca cc
实施例2 凝结芽孢杆菌ASAG215对ZEA的降解作用
1．ZEA测定方法
采用高效液相色谱法检测ZEA，条件如下，安捷伦C18柱（4.6 mm×150 mm×5 μm）；流动相：乙腈：水：甲醇（46：46：8）；流速：1.0 mL/min；柱温：27˚C；检测波长：λex=274 nm，λem=440 nm；进样量：20 μL。根据峰面积对比标准曲线得到ZEA含量。
2．凝结芽孢杆菌ASAG215对ZEA的降解
（1）将1 mL保藏的凝结芽孢杆菌ASAG215接种到装有50mL灭菌培养基（蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH为6.5~7.0）中，以42℃，160rpm条件下培养24 h后（OD值为0.8），取900µL发酵培养液（浓度为108 CFU/mL）与100µL ZEA标准品混合，使ZEA标准品终浓度为50 μg/mL；同时，以含相同终浓度ZEA的培养基作为对照，分别在反应0h、2h、4h、6h、8h、16h和24h取样，测定ZEA浓度。
（2）ZEA降解率（%）=（初始ZEA浓度-取样后测得的ZEA浓度）/初始ZEA浓度×100%。
（3）结果分析：图1为本发明所述菌株在不同时间内对ZEA降解效果。通过与对照组相比，随着时间的增加，原培养液中ZEA含量逐渐下降。在2h时，对ZEA的降解率就达到92%，8h时实验室条件下检测不到ZEA的存在。
3．凝结芽孢杆菌ASAG215降解ZEA活性组分的确定
（1）选取100mL凝结芽孢杆菌ASAG215发酵液，在4℃的冷冻离心机中，10000g离心10min，将上清液取出备用（置于冰中）；将菌体细胞沉淀用PBS缓冲液冲洗两次后，复溶于缓冲液并置于冰中备用；另一菌体细胞沉淀清洗复溶后，使用超声波细胞粉碎仪将菌体细胞破碎两次，释放胞内活性物质，在4℃下，12000g离心20min，取上清液，并用灭菌的0.22μm的纤维素膜过滤，得到菌体的胞内提取物，置于冰中备用。
（2）分别取900µL发酵上清液（细胞悬浮液、胞内提取物）与100µL ZEA标准品（终浓度为50 μg/mL）混合；同时以含相同终浓度ZEA的培养基作为对照，反应2h后测定ZEA浓度，计算降解率。
（3）结果分析：发酵上清液对ZEA的降解率显著高于菌体细胞和胞内提取物，发酵上清液对ZEA的2h降解率为90.4%，而菌体和胞内提取物对AFB1的降解率分别为5.3%和2.7%，证明凝结芽孢杆菌ASAG215降解ZEA活性组分存在于发酵上清液中。
实施例3 降解ZEA的ASAG215液态菌剂的制备
菌种活化：将在30%浓度甘油中（菌液：甘油=1：1）保藏的ASAG215或其衍生的突变株接种于固体培养基上，于40℃下培养24h，并测定其降解ZEA的降解率。其中：固体培养基成分为：蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH为6.5~7.0；
种子培养：取测定2h ZEA降解率达92%的活化后的菌液接种于液体培养基中，培养至OD值为0.8，达到对数生长期，得到备用种子液。其中：液体培养基成分为：蛋白胨10g，葡萄糖60g，酵母膏5g，MgSO4·7H2O 0.5g，CaCO3 10g，蒸馏水1000mL，pH为6.8~7.2；然后，用10L的种子罐，将上述备用菌株按照2%接种量接种入灭菌后（1.1kg/cm2压力和121℃高压湿热灭菌）的液体培养基中，培养温度45℃，搅拌速度160rpm，无菌空气通入量为1:1，约24~32小时培养至对数期，获得种子液。
发酵培养：采用500升生产罐，将上述种子液将按照2%接种量接种入灭菌后（1.1kg/cm2压力和121℃高压湿热灭菌）的发酵培养基中，制得液态菌剂，该液态菌剂中活菌数至少达到108CFU/mL。其中：发酵培养基成分为：蛋白胨10g，葡萄糖10g，酵母浸粉6g，MgSO4·7H2O 1.0g，K2HPO4·3H2O 2.0g蒸馏水1000mL，pH为6.5~7.0；发酵条件为：通气量为1:1~1.2，搅拌速度为120 rpm~180 rpm，培养温度45~48℃，培养时间约24~32h。
实施例4 降解AF的ASAG215固态菌剂的制备
将实施例3中产生出来的ASAG215液态菌剂与玉米芯粉按照1:5的质量比混合均匀，加入2~5%w/v的保护剂，搅拌均匀后进行喷雾干燥。制得固态菌剂。所述的喷雾干燥条件为：进风口温度160~180℃，出口温度60~90℃，进料速度1~1.5L/h。
实施例5 ASAG215液态菌剂对谷物中ZEA的降解效果
将实施例3中产生出来的ASAG215液态菌剂（活细胞数量达108CFU/mL）按照质量比1:100的配比喷施于ZEA污染的玉米粉中，同时，用发酵培养基以同样的配比喷洒到AF污染的玉米粉作为对照组；混合均匀后，40℃下反应6h。
分别从试验组和对照组选取称取25 g样品，置于250 mL锥形瓶中，加入5 g氯化钠和100 mL甲醇水溶液（体积比为6:4），然后高速振荡提取30 min，静置，过滤。取10 mL滤液用40 mL PBS缓冲液稀释滤液，然后过滤。过滤液采用ZEA免疫亲和柱（北京中检维康技术有限公司）进行净化，结果表明ASAG215液态菌剂对ZEA污染的玉米粉降解率达79.3%，对照组无任何降解作用。
实施例6 ASAG215固态菌剂对谷物中ZEA的降解效果
将实施例5中制备得到的ASAG2152固态菌剂（活细胞数量达108CFU/mL）按照0.05、0.10%的添加量加入ZEA污染的玉米粉中，混合均匀，40℃下反应2h。按照实施例5的方法对加入固态菌剂和未加固态菌剂的ZEA污染的玉米粉中ZEA含量进行测定，结果表明ASAG215固态菌剂对ZEA污染的玉米粉降解率达89.92%。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。
序列表
<110> 山西大学
上海新叶生物科技有限公司
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tagagtttga tcatggctca ggacgaacgc tggcggcgtg cctaatacat gcaagtcgtg 60
cggacctttt aaaagcttgc ttttaaaagg ttagcggcgg acgggtgagt aacacgtggg 120
caacctgcct gtaagatcgg gataacgccg ggaaaccggg gctaataccg gatagttttt 180
tcctccgcat ggaggaaaaa ggaaagacgg cttcggctgt cacttacaga tgggcccgcg 240
gcgcattagc tagttggtgg ggtaacggct caccaaggca acgatgcgta gccgacctga 300
gagggtgatc ggccacattg ggactgagac acggcccaaa ctcctacggg aggcagcagt 360
agggaatctt ccgcaatgga cgaaagtctg acggagcaac gccgcgtgag tgaagaaggc 420
cttcgggtcg taaaactctg ttgccgggga agaacaagtg ccgttcgaac agggcggcgc 480
cttgacggta cccggccaga aagccacggc taactacgtg ccagcagccg cggtaatacg 540
taggtggcaa gcgttgtccg gaattattgg gcgtaaagcg cgcgcaggcg gcttcttaag 600
tctgatgtga aatcttgcgg ctcaaccgca agcggtcatt ggaaactggg aggcttgagt 660
gcagaagagg agagtggaat tccacgtgta gcggtgaaat gcgtagagat gtggaggaac 720
accagtggcg aaggcggctc tctggtctgt aactgacgct gaggcgcgaa agcgtgggga 780
gcaaacagga ttagataccc tggtagtcca cgccgtaaac gatgagtgct aagtgttaga 840
gggtttccgc cctttagtgc tgcagctaac gcattaagca ctccgcctgg ggagtacggc 900
cgcaaggctg aaactcaaag gaattgacgg gggcccgcac aagcggtgga gcatgtggat 960
taattcgaag caacgcgaag aaccttacca ggtcttgaca tcctctgacc tccctggaga 1020
cagggccttc cccttcgggg gacagagtga caggtggtgc atggttgtcg tcagctcgtg 1080
tcgtgagatg ttgggttaag tcccgcaacg agcgcaaccc ttgaccttag ttgccagcat 1140
tcagttgggc actctaaggt gactgccggt gacaaaccgg aggaaggtgg ggatgacgtc 1200
aaatcatcat gccccttatg acctgggcta cacacgtgct acaatggatg gtacaaaggg 1260
ctgcgagacc gcgaggttaa gccaatccca gaaaaccatt cccagttcgg attgcaggct 1320
gcaacccgcc tgcatgaagc cggaatcgct agtaatcgcg gatcagcatg ccgcggtgaa 1380
tacgttcccg ggccttgtac acaccgcccg tcacaccacg agagtttgta acacccgaag 1440
tcggtgaggt aacctttacg gagccagccg ccgaaggtgg gacagatgat tggggtgaag 1500
tcgtaacaag gtagccgtat cggaaggtgc ggttggatca cc 1542

Claims (11)

1.一株凝结芽孢杆菌ASAG215，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.18368。
2.根据权利要求1所述的一株凝结芽孢杆菌ASAG215，其特征在于：所述凝结芽孢杆菌ASAG215菌株在LB培养基上生长，菌落圆形，白色，扁平，边缘不整齐，革兰氏阳性菌，细胞呈杆状，无鞭毛，端生芽孢，芽孢1.2~1.5μm，椭圆到柱状，芽孢形成后菌体无明显膨大。
3.一种高效降解玉米赤霉烯酮的菌剂，其特征在于：所述菌剂的活性成分为凝结芽孢杆菌ASAG215或其衍生的突变菌株，所述凝结芽孢杆菌ASAG215的保藏编号为CGMCCNo.18368。
4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于：该菌剂为液态菌剂或固态菌剂。
5.一种如权利要求3所述的菌剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）、浓度为30%的甘油与保藏编号为CGMCCNo.18368的凝结芽孢杆菌ASAG215或其衍生的突变株菌液在固体培养基上活化，菌液与甘油的体积比为1:1；所述的固体培养基成分为：所述的固体培养基成分为：蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化钠5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH值为6.5~7.0；
（2）、将步骤（1）活化后的菌液1mL接种于50mL的种子培养液中，培养至OD值为0.7~0.8，达到对数生长期，得到种子液；所述的种子培养液的成分为：蛋白胨10g，葡萄糖60g，酵母膏5g，MgSO4·7H2O0.5g，CaCO310g，蒸馏水1000mL，pH值为6.8~7.2；
（3）、将步骤（2）获得的种子液接种于发酵培养基中，培养至稳定期，OD值为1.0~1.2，制得液态菌剂；所述的发酵培养基成分为：蛋白胨10g，葡萄糖10g，酵母浸粉6g，MgSO4·7H2O1.0g，K2HPO4·3H2O 2.0g，蒸馏水1000mL，pH值为6.5~7.0。
6.根据权利要求5所述的菌剂的制备方法，其特征在于：该方法还包括将所述液态菌剂与玉米芯粉按照1:5的质量比混合均匀，再向其中加入2~5%w/v的保护剂，搅拌均匀后进行喷雾干燥，制得固态菌剂；所述的喷雾干燥条件为：进风口温度160~180℃，出口温度60~90℃，进料速度1~1.5L/h。
7.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌ASAG215或者权利要求3和5中的任一项所述的菌剂在降解玉米赤霉烯酮中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述的凝结芽孢杆菌ASAG215对玉米赤霉烯酮所起降解效果的是胞内酶。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：凝结芽孢杆菌ASAG215对玉米赤霉烯酮降解的步骤为：凝结芽孢杆菌ASAG215的初始浓度为108CFU/mL，pH值为6.6~7.0，培养温度为40~48℃，转速为120rpm~160rpm。
10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：凝结芽孢杆菌液态菌剂在降解玉米赤霉烯酮时，按照质量比1:100的配比喷施于玉米赤霉烯酮污染的谷物或饲料原料，所述液态菌剂的活细胞数量达108CFU/mL。
11.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：凝结芽孢杆菌固态菌剂在降解玉米赤霉烯酮时，采用按照0.05~0.10%的添加量加入到谷物、饲料原料或者饲料中，混合均匀，所述固态菌剂的活细胞数量达108CFU/mL。
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