CN111825814A - 一种儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物及其制备方法与应用 - Google Patents

一种儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物及其制备方法。以Fe3O4为载体，以模板分子(甲氧基肾上腺素和多巴胺为双模板分子)通过热自由基聚合反应与α‑甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯在偶氮二异丁腈作用下形成磁性分子印迹聚合物。本发明以磁性Fe3O4纳米粒子为原材料，制备乙烯基化Fe3O4纳米粒子以在其表面修饰有碳碳双键，再采用表面分子印迹技术制备磁性分子印迹聚合物，其对甲氧基肾上腺素、甲氧基去甲肾上腺素和3‑甲氧酪胺分子具有较强的选择能力和吸附性，对目标待测物的吸附量高且可循环使用，能够高效分离和富集尿液样本中的甲氧基肾上腺素、甲氧基去甲肾上腺素和3‑甲氧酪胺分子。

Description

一种儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物及其制备方法与 应用
技术领域
本发明属于分子印迹聚合物的合成技术领域，具体涉及一种儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物及其制备方法与应用。
背景技术
嗜铬细胞瘤是起源于肾上腺髓质或副神经节的神经内分泌肿瘤，临床表现变化很大，但最常见的表现为头痛，出汗，心悸和高血压。由于过量分泌儿茶酚胺类物质，这些肿瘤可能引发致命的心血管并发症。目前，临床上以甲氧基肾上腺素(MN)、甲氧基去甲肾上腺素(NMN)和3-甲氧酪胺(3-MT)作为诊断嗜铬细胞瘤的生化指标。
分子印迹聚合物(MIP)是一种可以特异性结合目标分子的人工受体材料，因稳定性高、合成方法简单及成本低廉，可以被广泛地应用于各类样品预处理过程。磁性纳米材料不仅具有较大的比表面积，而且具有磁导向性、超顺磁性的特点。磁性分子印迹聚合物(MMIP)是将磁性纳米材料与选择性分离材料分子印迹聚合物相结合，得到具有磁性和快速选择性分离特定目标分子的复合材料，可以快速地从复杂样品中实现目标物的分离富集，并且在外加磁场的作用下，MMIP可以快速地从实际样品中分离出来，具有十分广阔的应用前景。结合磁纳米粒子合成的MMIP，具有较大的比表面积以及超顺磁性，可以提高样品中痕量物质的分离、富集和萃取能力，省去了传统的固相萃取过程需要的活化、上样、淋洗、洗脱及旋干等繁琐操作，缩短了样品前处理时间；其结合位点也暴露在磁性纳米粒子表面，有利于特定目标物的洗脱，减少洗脱时间。在此，本发明合成了一种用于分离NMN，MN和3-MT的MMIP，并应用于人随机尿样本中的目标待测物的分离和富集。
名为分子印迹纳米管膜的制备及对人体尿液中儿茶酚胺类药物的检测Preparation of a Molecularly Imprinted Polymer Nanotubes Membrane and ItsApplication in the Determination of Catecholamines in Urine Samples[期刊论文]丘秀珍，华永标，郭会时，卢文贯，QIU Xiuzhen，HUA Yongbiao，GUO Huishi，LU Wenguan-《高等学校化学学报》2018年4期的期刊论文中采用以多巴胺(DA)为模板，多孔阳极氧化铝膜(AAO)为反应载体，合成了多巴胺分子印迹聚合物纳米管膜(AAO@MIP)对人体尿液中的儿茶酚胺类药物的含量进行检测，其不足在于：AAO@MIP重复性低、回收率低、吸附性能不高、对多巴胺、肾上腺素和去甲肾上腺素的选择能力和吸附性不高等。
发明内容
本发明的第一目的是提供一种儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物。
本发明的第二目的是提供一种儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物的制备方法。
本发明的第三目的是探讨儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物在尿液样本中提取分离甲氧基肾上腺素、甲氧基去甲肾上腺素和3-甲氧酪胺分子的应用。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
由于采用了上述技术方案，本发明具有如下的优点：
1、本发明的制备方法以磁性Fe3O4纳米粒子、α-甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁腈等为原料，通过表面分子印迹技术得到了一种新型MMIP，该聚合物对NMN，MN和3-MT具有较强的选择能力和吸附性，对目标待测物的吸附量高且可循环使用，能够高效分离和富集生物样本中的NMN，MN和3-MT；
2、本发明的制备方法简单高效，制备得到MMIP成本低廉，该聚合物对NMN，MN和3-MT的吸附时间短，10min内即可达到吸附平衡，30min内可完成样品预处理过程。
3、本发明所用模板分子为甲氧基去甲肾上腺素和多巴胺双模板分子。
4、MMIP的平均回收率在93.2％-112.8％之间，回收率结果好，即表明MMIP处理随机尿样本时准确性高。
5、采用MMIP交替检测正常人和嗜铬细胞瘤患者随机尿样本各7份，共计14份，结果表明MMIP可以重复使用14次，即证明MMIP可循环使用，重复性好。
本发明的其他优点、目标和特征在某种程度上将在随后的说明书中进行阐述，并且在某种程度上，基于对下文的考察研究对本领域技术人员而言将是显而易见的，或者可以从本发明的实践中得到教导。本发明的目标和其他优点可以通过下面的说明书和权利要求书来实现和获得。
附图说明
本发明的附图说明如下：
图1是本发明的实验1制备的MMIP合成示意图；
图2是本发明实验1制备的MMIP的扫描电镜图；
图3是实验2中MMIP在不同pH环境下的吸附效率图；
图4是实验2中MMIP在不同吸附时间下的吸附效率图；
图5是实验2中MMIP在不同洗脱时间下的洗脱效率图；
图6是实验2中MMIP在不同浓度醋酸溶液洗脱条件下的洗脱效率图；
图7是实验3中采用MMIP富集后采用高效液相色谱-荧光法检测的色谱图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。
实验1：
一种儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物的制备方法，如图1所示，具体步骤如下：
产品1：
1)以磁性Fe3O4纳米粒子为原材料，制备乙烯基化Fe3O4纳米粒子；
1-1)将超纯水I和乙醇I混合后，加入3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，加入磁性Fe3O4纳米粒子，得到混合溶液I；超纯水I1份、乙醇I1份、3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷1份、磁性Fe3O4纳米粒子1份；
1-2)将混合溶液I通入氮气除氧，时间10min，密封，在30℃温度下反应时间为12h，反应完成后，用1份乙醇II清洗2-3次，干燥，制得乙烯基化Fe3O4纳米粒子。
2)对乙烯基化Fe3O4纳米粒子，采用表面分子印迹技术制备磁性分子印迹聚合物Fe3O4@SiO2-CH＝CH2@MIP；
2-1)将乙腈和超纯水II混合后，加入乙烯基化Fe3O4纳米粒子，加入模板分子、功能单体、交联剂、引发剂，得到混合溶液II；乙腈16份、超纯水II1份、乙烯基化Fe3O4纳米粒子2份；
2-2)将混合溶液II通入氮气除氧，时间为10min，密封，在55℃温度下反应，反应时间为20h。反应完成后，用2％洗脱剂清洗至无法检测出模板分子为止，干燥，制得磁性分子印迹聚合物Fe3O4@SiO2-CH＝CH2@MIP。
产品2：
1)以磁性Fe3O4纳米粒子为原材料，制备乙烯基化Fe3O4纳米粒子；
1-1)将超纯水I和乙醇I混合后，加入3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，加入磁性Fe3O4纳米粒子，得到混合溶液I；超纯水I为2份、乙醇I2份、3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷2份、磁性Fe3O4纳米粒子2份；
1-2)将混合溶液I通入氮气除氧，时间15min，密封，在50℃温度下反应时间为24h，反应完成后，用2份乙醇II清洗2-3次，干燥，制得乙烯基化Fe3O4纳米粒子。
2)对乙烯基化Fe3O4纳米粒子，采用表面分子印迹技术制备磁性分子印迹聚合物Fe3O4@SiO2-CH＝CH2@MIP；
2-1)将乙腈和超纯水II混合后，加入乙烯基化Fe3O4纳米粒子，加入模板分子、功能单体、交联剂、引发剂，得到混合溶液II；乙腈20份、超纯水II4份、乙烯基化Fe3O4纳米粒子3份；
2-2)将混合溶液II通入氮气除氧，时间为15min，密封，在70℃温度下反应，反应时间为24h。反应完成后，用5％洗脱剂清洗至无法检测出模板分子为止，干燥，制得磁性分子印迹聚合物Fe3O4@SiO2-CH＝CH2@MIP。
产品3：
1)以磁性Fe3O4纳米粒子为原材料，制备乙烯基化Fe3O4纳米粒子；
1-1)将超纯水I和乙醇I混合后，加入3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，加入磁性Fe3O4纳米粒子，得到混合溶液I；超纯水I为1份、乙醇I1份、3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷2份、磁性Fe3O4纳米粒子1份；
1-2)将混合溶液I通入氮气除氧，时间15min，密封，在40℃温度下反应时间为12h，反应完成后，用1份乙醇II清洗2-3次，干燥，制得乙烯基化Fe3O4纳米粒子。
2)对乙烯基化Fe3O4纳米粒子，采用表面分子印迹技术制备磁性分子印迹聚合物Fe3O4@SiO2-CH＝CH2@MIP；
2-1)将乙腈和超纯水II混合后，加入乙烯基化Fe3O4纳米粒子，加入模板分子、功能单体、交联剂、引发剂，得到混合溶液II；乙腈19份、超纯水II1份、乙烯基化Fe3O4纳米粒子2.5份；
2-2)将混合溶液II通入氮气除氧，时间为15min，密封，在65℃温度下反应，反应时间为24h。反应完成后，用2％洗脱剂清洗至无法检测出模板分子为止，干燥，制得磁性分子印迹聚合物Fe3O4@SiO2-CH＝CH2@MIP。
实验2：
磁性分子印迹聚合物MMIP的吸附及洗脱特性
1、实验材料：
磷酸盐缓冲液、以甲氧基肾上腺素(MN)标准品、甲氧基去甲肾上腺素(NMN)标准品、3-甲氧酪胺(3-MT)标准品、醋酸溶液、以实验1中产品3的条件所制得的磁性分子印迹聚合物MMIP
2、实验方法：
在180.0μL 0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH＝5.0，6.0，7.0，8.0，9.0，10.0)中加入20.0μL浓度均为5.0mg/L NMN，MN和3-MT的混合标准品，加入10.0mg MMIP后震荡30s，静置2.0-10.0min后，使用200.0μL的0.5％-5.0％醋酸溶液洗脱0.5-10.0min。
3、实验结果：
表1.MMIP在不同pH值溶液中的吸附效率(n＝3)
Figure BDA0002606977050000051
EA：吸附效率
表2.MMIP在不同吸附时间下的吸附效率(n＝3)
Figure BDA0002606977050000052
表3.MMIP在不同洗脱时间下的洗脱效率(n＝3)
Figure BDA0002606977050000061
EB：洗脱效率
表4.MMIP在不同浓度洗脱剂中的洗脱效率(n＝3)
Figure BDA0002606977050000062
在溶液pH≥8.0时，NMN，MN和3-MT的吸附效率均≥65.0％，结果如表1和图3所示；在吸附时间≥6.0min时，NMN，MN和3-MT的吸附效率均＞54.0％，结果如表2和图4所示；在醋酸浓度≥2.0％时，NMN，MN和3-MT的洗脱效率均＞96.0％，结果如表3和图5所示；在洗脱时间≥7.5min时，NMN，MN和3-MT的吸附效率均≥97.0％，结果如表4和图6所示。
实验3：
磁性分子印迹聚合物MMIP用于分离人随机尿样本中的NMN，MN和3-MT
1、实验材料：
嗜铬细胞瘤患者随机尿样本、正常人随机尿样本、、磷酸盐缓冲液、以实验1中产品3的条件所制得的磁性分子印迹聚合物MMIP、超纯水、醋酸溶液
2、实验方法：
将500.0μL正常人随机尿样本和嗜铬细胞瘤患者随机尿样本分别加入到2.5mL0.01mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH＝9.0)中，加入40.0mg MMIP，振荡30s后吸附8.0min，将磁性分子印迹聚合物MMIP与随机尿液样本分离，以1.0mL超纯水清洗，加入200.0μL 2.0％的醋酸溶液，振荡30s后洗脱7.5min，得到待测物，取50.0μL待测物采用高效液相色谱-荧光法检测。
3、实验结果：
实验结果如图7所示，正常人NMN，MN和3-MT的峰面积分别为1.3±0.4，18.6±0.0，41.3±0.9；嗜铬细胞瘤患者NMN，MN和3-MT的峰面积分别为58.0±0.5，243.2±2.4，49.0±0.8
实验4：
方法学评价
1、实验材料：
嗜铬细胞瘤患者随机尿样本、正常人随机尿样本、磷酸盐缓冲液、甲氧基肾上腺素(MN)标准品、甲氧基去甲肾上腺素(NMN)标准品、3-甲氧酪胺(3-MT)标准品、醋酸溶液、以实验1中产品3的条件所制得的磁性分子印迹聚合物MMIP、超纯水
2、实验方法：
2.1绘制标准曲线：制备NMN，MN和3-MT系列浓度标准溶液，浓度分别为250μg/L，500μg/L，1000μg/L，2000μg/L，5000μg/L，10000μg/L，取50μL浓度标准液加入到500.0μL随机尿样本中，再加入2.5mL 0.01mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH＝9.0)，加入40.0mg MMIP，振荡30s后吸附8.0min，将磁性分子印记聚合物MMIP与随机尿样本分离，1.0mL超纯水清洗，加入200.0μL 2.0％的醋酸溶液，振荡30s后洗脱7.5min，得到待测物，取50.0μL待测物采用高效液相色谱-荧光法检测。
2.2MMIP的精密度：取嗜铬细胞瘤患者和正常人随机尿样本，分为嗜铬细胞瘤患者随机尿样本组和正常人随机尿样本组，分别取500.0μL嗜铬细胞瘤患者随机尿样、正常人随机尿样本，两组试验中分别加入到2.5mL 0.01mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH＝9.0)中，加入40.0mg MMIP，振荡30s后吸附8.0min，将磁性分子印迹聚合物MMIP与随机尿样本分离，1.0mL超纯水清洗，加入200.0μL 2.0％的醋酸溶液，振荡30s后洗脱7.5min，得到嗜铬细胞瘤患者待测物和正常人待测物，批内、批间实验各进行5次，分别取50.0μL嗜铬细胞瘤患者待测物和正常人待测物采用高效液相色谱-荧光法检测。
2.3 MMIP的回收率：分别添加高(800μg/L)、中(250μg/L)、低(50μg/L)三种浓度的NMN，MN和3-MT标准混合溶液到随机尿液样本中，取500.0μL加有标准混合溶液的随机尿样本加入到2.5mL 0.01mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH＝9.0)中，加入40.0mg MMIP，振荡30s后吸附8.0min，将磁性分子印迹聚合物与随机尿样本分离，用1.0mL超纯水清洗，加入200.0μL2.0％的醋酸溶液，振荡30s后洗脱7.5min，得到待测物，取50.0μL待测物采用高效液相色谱-荧光法检测待测物峰面积，每个浓度测定3次。
3、实验结果：
表5梯度条件
Figure BDA0002606977050000081
表6尿液样本中NMN，MN和3-MT的标准曲线
Figure BDA0002606977050000082
表7 MMIP精密度试验(n＝5)
Figure BDA0002606977050000083
表8 MMIP回收率(n＝3)
Figure BDA0002606977050000084
Figure BDA0002606977050000091
色谱条件
色谱柱：Shim-Pack VP-ODS(150mm×4.6mm，4.6μm，日本Shimadzu公司)
流速：0.8mL/min
柱温：30℃
进样量：50μL
流动相组成：70mmol/L磷酸二氢钠(A)和甲醇(B)，采用梯度洗脱，洗脱条件如表5所示；
在优化后的色谱条件下检测，得到待测物的峰面积，用待测物峰面积扣除随机尿样本中原有待测物的峰面积的值作为Y，加入待测物浓度为X，绘制标准曲线，NMN，MN和3-MT的线性范围均为25-1000μg/L，其R2均＞0.999，线性关系较好，结果见表6；
荧光检测条件：激发波长278nm，发射波长320nm；
MMIP批内精密度≤4.9％，批间精密度≤6.3％，表明采用MMIP对随机尿样本进行预处理有较好的重复性；
相对回收率＝(加入标准品后尿液中待测物浓度-尿液样本中原有待测物浓度)/加入标准品浓度×100％，MMIP平均回收率在93.2％-112.8％之间，回收率结果较好，表明MMIP预处理随机尿样本有较好的准确性。
实验5：
MMIP使用寿命实验
1、实验材料：
嗜铬细胞瘤患者随机尿样本、正常人随机尿样本、磷酸盐缓冲液、醋酸溶液、以实验1中产品3的条件所制得的磁性分子印迹聚合物MMIP、超纯水
2、实验方法：
2.1 MMIP使用次数：取嗜铬细胞瘤患者和正常人随机尿样本，分为嗜铬细胞瘤患者随机尿样本组和正常人随机尿样本组，分别取500.0μL嗜铬细胞瘤患者随机尿样、正常人随机尿样本，两组试验中分别加入到2.5mL 0.01mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH＝9.0)中，加入40.0mg MMIP，振荡30s后吸附8.0min，将磁性分子印迹聚合物与随机尿样本分离，1.0mL超纯水清洗，加入200.0μL2.0％的醋酸溶液，振荡30s后洗脱7.5min，得到嗜铬细胞瘤患者待测物和正常人待测物，分别取50.0μL嗜铬细胞瘤患者待测物和正常人待测物采用高效液相色谱-荧光法检测，对正常人随机尿样本和嗜铬细胞瘤患者随机尿样本交替进行样本预处理各7次，共计14次。
2.2 MMIP存放时间：取嗜铬细胞瘤患者随机尿样本，取500.0μL加入到2.5mL0.01mmol/L的磷酸盐缓冲液(pH＝9.0)中，加入40.0mg MMIP，振荡30s后吸附8.0min，将磁性分子印迹聚合物MMIP与随机尿样本分离，用1.0mL超纯水清洗，加入200.0μL2.0％的醋酸溶液，振荡30s后洗脱7.5min，得到嗜铬细胞瘤患者待测物，取50.0μL采用高效液相色谱-荧光法检测，将MMIP置于室温下干燥存放1天、14天和28天后用于预处理嗜铬细胞瘤患者随机尿样本。
3、实验结果：
表9 MMIP重复使用次数(n＝7)
Figure BDA0002606977050000101
表10 MMIP存放时间(n＝3)
Figure BDA0002606977050000102
采用MMIP交替检测正常人和嗜铬细胞瘤患者随机尿样本各7份，共计14份，正常人样本检测变异系数在5.5％以内，嗜铬细胞瘤患者随机尿样本检测变异系数在4.6％以内，表明其可以重复使用至少14次，结果如表9所示。
将MMIP置于室温下干燥存放1天、14天和28天后用于预处理随机尿样本富集NMN，MN和3-MT。在14天内富集量减少在0.7％-5.2％之间，表明在室温干燥存放14天后，MMIP仍有较好的富集能力；在28天内富集量减少在11.6％-17.6％之间，表明在室温干燥存放28天后，MMIP富集能力明显下降。因此，MMIP可在室温下干燥存放时间不应超过两周，结果如表10所示。
最后用说明的是：以上所述仅为本发明的优选实验而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行同等替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、同等替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物，其特征在于，所述磁性分子印迹聚合物Fe3O4@SiO2-CH＝CH2@MIP，以Fe3O4为载体在其表面修饰碳碳双键，1-2份甲氧基肾上腺素、1-2份多巴胺通过热自由基聚合反应与1份α-甲基丙烯酸、1-2份乙二醇二甲基丙烯酸酯在1-2份偶氮二异丁腈作用下形成磁性分子印迹聚合物，其粒径大小为20-50nm。
2.如权利要求1所述的儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物其特征在于，所述甲氧基肾上腺素为2份、多巴胺为2份、乙二醇二甲基丙烯酸酯为1份、偶氮二异丁腈为1.6份。
3.一种如权利要求2所述儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：
1)以磁性Fe3O4纳米粒子为原材料，制备乙烯基化Fe3O4纳米粒子；
2)对乙烯基化Fe3O4纳米粒子，采用表面分子印迹技术制备磁性分子印迹聚合物Fe3O4@SiO2-CH＝CH2@MIP。
4.如权利要求3所述的儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述制备乙烯基化Fe3O4纳米粒子的具体步骤如下：
1-1)将超纯水I和乙醇I混合后，加入3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，加入磁性Fe3O4纳米粒子，得到混合溶液I；超纯水I为1-2份、乙醇I1-2份、3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷1-2份、磁性Fe3O4纳米粒子1-2份；
1-2)将混合溶液I通入氮气除氧，时间10-15min，密封，在30-50℃温度下反应时间为12-24h，反应完成后，用1-2份乙醇II清洗2-3次，干燥，制得乙烯基化Fe3O4纳米粒子。
5.如权利要求4所述的儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，超纯水I为1份、乙醇I为1份、3-(异丁烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷为2份、乙醇I为1份、磁性Fe3O4纳米粒子为1份、氮气除氧时间为15min、反应温度为40℃、反应时间为12h。
6.如权利要求3所述的儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，步骤2)中所述制备磁性分子印迹聚合物Fe3O4@SiO2-CH＝CH2@MIP的具体步骤如下：
2-1)将乙腈和超纯水II混合后，加入乙烯基化Fe3O4纳米粒子，加入模板分子、功能单体、交联剂、引发剂，得到混合溶液II；乙腈16-20份、超纯水II1-4份、乙烯基化Fe3O4纳米粒子2-3份；
2-2)将混合溶液II通入氮气除氧，时间为10-15min，密封，在55-70℃温度下反应，反应时间为20-24h。反应完成后，用2％-5％洗脱剂清洗至无法检测出模板分子为止，干燥，制得磁性分子印迹聚合物Fe3O4@SiO2-CH＝CH2@MIP。
7.如权利要求6所述的儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，所述模板分子为甲氧基去甲肾上腺素和多巴胺双模板，所述功能单体为α-甲基丙烯酸，所述交联剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯，所述引发剂为偶氮二异丁腈，所述洗脱剂为乙酸溶液。
8.如权利要求7所述的儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，甲氧基去甲肾上腺素为1-2份、多巴胺为1-2份、α-甲基丙烯酸为1份、乙二醇二甲基丙烯酸酯为1-2份、偶氮二异丁腈为1-2份。
9.如权利要求8所述的儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，甲氧基去甲肾上腺素为2份、多巴胺2份、乙二醇二甲基丙烯酸酯为1份、偶氮二异丁腈为1.6份、乙腈为19份、超纯水II为1份、乙烯基化Fe3O4纳米粒子为2.5份、氮气除氧时间为15min、反应温度为65℃、反应时间为24h、乙酸溶液浓度为2％。
10.一种如权利要求1或2所述儿茶酚胺类物质磁性分子印迹聚合物在生物样本中提取分离甲氧基肾上腺素、甲氧基去甲肾上腺素和3-甲氧酪胺分子的应用；
所述磁性分子印迹聚合物固相萃取材料对生物样本中甲氧基肾上腺素、甲氧基去甲肾上腺素和3-甲氧酪胺分子进行富集和分离。
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