一种竹原纤维复合素酶制备及贮藏方法
技术领域
本发明属于竹原纤维复合素酶技术领域,更具体地说,尤其涉及一种竹原纤维复合素酶制备及贮藏方法。
背景技术
纤维素酶(β-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶)是降解纤维素生成葡萄糖的一组酶的总称,它不是单体酶,而是起协同作用的多组分酶系,是一种复合酶,主要由外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成,还有很高活力的木聚糖酶。作用于纤维素以及从纤维素衍生出来的产物。
纤维素酶根据其催化反应功能的不同可分为内切葡聚糖酶,来自真菌的简称EG,来自细菌的简称Cen、外切葡聚糖酶,来自真菌的简称CBH,来自细菌的简称Cex) 和β-葡聚糖苷酶(β-1,4- glucosidase,EC.3.2.1.21)简称BG。内切葡聚糖酶随机切割纤维素多糖链内部的无定型区,产生不同长度的寡糖和新链的末端。外切葡聚糖酶作用于这些还原性和非还原性的纤维素多糖链的末端,释放葡萄糖或纤维二糖。β-葡萄糖苷酶水解纤维二糖产生两分子的葡萄糖。真菌纤维素酶产量高、活性大,在畜牧业和饲料工作中主要应用真菌来源的纤维素酶。
现有竹原纤维复合素酶的制备方法,所培养出的竹原纤维复合素酶活性较低、产量较小,由于生产成本高,降低生产成本,提高产量和活性是亟待需要解决的问题,并且对成品竹原纤维复合素酶进行贮藏设备造价高昂不利于节约生产成本。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点,而提出的一种竹原纤维复合素酶制备及贮藏方法。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
一种竹原纤维复合素酶制备及贮藏方法,包括如下步骤:
S1、选取物料:选取山东或安徽地区生产的皂荚,中华蜂的蜂蜜,天麻,以及水;所述皂荚采用表皮新鲜的皂荚,所述蜂蜜采用含水量小于等于20%的蜂蜜,所述天麻采用冬季采摘的冬麻,所述水为含硒地下水;
S2、准备物料:按质量比份计算,准备皂荚450份-550份、蜂蜜80份-120份、天麻280份-320份和水900份-1100份;
S3、加工物料:将准备好的皂荚洗净,通过切片机切成片状,将准备好的干燥后的天麻通过粉碎机粉碎,将加工好的物料收集,通过紫外线杀菌1h-1.5h;
S4、搅拌物料:将加工后的物料放入密闭搅拌罐中,加入水,通过密闭搅拌罐将物料搅拌混合均匀,再将混合均匀的物料输送到密闭玻璃罐中;
S5、密封反应:将均匀混合的物料静置放置在密闭玻璃罐中34天-38天进行菌液培养;
S6、灭活:将密闭玻璃罐中所得到的液体通过灭菌液进行杂菌灭活,密封静置1天-2天,得到复合酶液;
S7、残品过滤:将复合酶液通过滤网进行过滤,将过滤出的残渣进行收集,将过滤所得液体收集到玻璃器皿罐中;
S8、成品贮藏:将玻璃器皿罐密封包装,将密封包装后的玻璃器皿罐放置在地窖中进行存储,所述地窖内的贮藏温度为-5℃-60℃。
优选的,所述 S1中的含硒地下水的含硒量为0.5-0.015毫克/升,且PH值为7.2-8.5。
优选的,所述S4中密闭搅拌罐的搅拌速度为8-14r/min,所述密闭搅拌罐在使用前通过蒸馏水对密闭搅拌罐的内部进行清洗。
优选的,所述S5中密封放置温度为30℃-40℃,所述密闭玻璃罐放置在避光处。
优选的,所述S7中滤网的目数为300目-325目,所述滤网为不锈钢滤网。
优选的,所述S6中的灭菌液为-1%碱水或浓度为1/10000~1/60000新洁尔灭菌溶液。
优选的,所述S7中的残渣通过烘干装置烘干后,再经过紫外线进行灭菌之后收集备用。
优选的,所述S8中地窖内设置有吸湿材料层,且地窖内设置有换气扇,可以保证地窖干燥透气的同时可以将成品溶液的保存时间提高到6-12个月。
优选的,所述S4中水的温度控制在30℃-40℃,所述水在使用前通过紫外线进行杀菌。
本发明的技术效果和优点:本发明提供的一种竹原纤维复合素酶的制备方法,与传统的制备方法相比,本发明可以提高竹原纤维复合素酶的产量和活性,并且可以节约生产成本,产生的残渣可以用于制作有机肥料;本发明提供的一种竹原纤维复合素酶的贮藏方法,可以提高竹原纤维复合素酶贮藏时间,并且可以降低贮藏成本。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合具体实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种竹原纤维复合素酶制备及贮藏方法,包括如下步骤:
S1、选取物料:选取山东或安徽地区生产的皂荚,中华蜂的蜂蜜,天麻,以及水;所述皂荚采用表皮新鲜的皂荚,所述蜂蜜采用含水量小于等于20%的蜂蜜,所述天麻采用冬季采摘的冬麻,所述水为含硒地下水;
S2、准备物料:按质量比份计算,准备皂荚450份、蜂蜜80份、天麻280份和水900份;
S3、加工物料:将准备好的皂荚洗净,通过切片机切成片状,将准备好的干燥后的天麻通过粉碎机粉碎,将加工好的物料收集,通过紫外线杀菌1h-1.5h;
S4、搅拌物料:将加工后的物料放入密闭搅拌罐中,加入水,通过密闭搅拌罐将物料搅拌混合均匀,再将混合均匀的物料输送到密闭玻璃罐中;
S5、密封反应:将均匀混合的物料静置放置在密闭玻璃罐中34天-38天进行菌液培养;
S6、灭活:将密闭玻璃罐中所得到的液体通过灭菌液进行杂菌灭活,密封静置1天-2天,得到复合酶液;
S7、残品过滤:将复合酶液通过滤网进行过滤,将过滤出的残渣进行收集,将过滤所得液体收集到玻璃器皿罐中;
S8、成品贮藏:将玻璃器皿罐密封包装,将密封包装后的玻璃器皿罐放置在地窖中进行存储,所述地窖内的贮藏温度为-5℃-60℃。
通过所述 S1中的含硒地下水的含硒量为0.5-0.015毫克/升,且PH值为7.2-8.5,可以提供竹原纤维复合素酶培养过程中水的酸碱度条件,可以提高竹原纤维复合素酶的活性和产量。通过所述S4中密闭搅拌罐的搅拌速度为8-14r/min,所述密闭搅拌罐在使用前通过蒸馏水对密闭搅拌罐的内部进行清洗,可以保证物料混合均匀的同时,可以避免物料残渣过小,降低成品溶液的浑浊度。通过所述S5中密封放置温度为30℃-40℃,所述密闭玻璃罐放置在避光处,可以提高竹原纤维复合素酶的活性和产量,降低生产成本。通过所述S7中滤网的目数为300目-325目,所述滤网为不锈钢滤网,可以对复合酶液中的残渣进行过滤,减少过滤后所得液体中残渣,降低成品溶液的浑浊度。通过所述S6中的灭菌液为-1%碱水或浓度为1/10000~1/60000新洁尔灭菌溶液,可以将有害菌体灭活,提高成品使用时可能发生的隐患。通过所述S7中的残渣通过烘干装置烘干后,再经过紫外线进行灭菌之后收集备用,可以将残渣用于有机肥生产,由于残渣中含有酶菌种,ph值偏碱性,制作有机肥后可以达到杀虫,松弛土壤的作用,并能有效催生土壤中有机物形成。通过所述S8中地窖内设置有吸湿材料层,且地窖内设置有换气扇,可以保证地窖干燥透气的同时可以将成品溶液的保存时间提高到6-12个月。通过所述S4中水的温度控制在30℃-40℃,所述水在使用前通过紫外线进行杀菌,可以对竹原纤维复合素酶的制备,提供有利的温度条件,有利于提高竹原纤维复合素酶的产量。
实施例2
一种竹原纤维复合素酶制备及贮藏方法,包括如下步骤:
S1、选取物料:选取山东或安徽地区生产的皂荚,中华蜂的蜂蜜,天麻,以及水;所述皂荚采用表皮新鲜的皂荚,所述蜂蜜采用含水量小于等于20%的蜂蜜,所述天麻采用冬季采摘的冬麻,所述水为含硒地下水;
S2、准备物料:按质量比份计算,准备皂荚500份、蜂蜜100份、天麻300份和水1000份;
S3、加工物料:将准备好的皂荚洗净,通过切片机切成片状,将准备好的干燥后的天麻通过粉碎机粉碎,将加工好的物料收集,通过紫外线杀菌1h-1.5h;
S4、搅拌物料:将加工后的物料放入密闭搅拌罐中,加入水,通过密闭搅拌罐将物料搅拌混合均匀,再将混合均匀的物料输送到密闭玻璃罐中;
S5、密封反应:将均匀混合的物料静置放置在密闭玻璃罐中34天-38天进行菌液培养;
S6、灭活:将密闭玻璃罐中所得到的液体通过灭菌液进行杂菌灭活,密封静置1天-2天,得到复合酶液;
S7、残品过滤:将复合酶液通过滤网进行过滤,将过滤出的残渣进行收集,将过滤所得液体收集到玻璃器皿罐中;
S8、成品贮藏:将玻璃器皿罐密封包装,将密封包装后的玻璃器皿罐放置在地窖中进行存储,所述地窖内的贮藏温度为-5℃-60℃。
通过所述 S1中的含硒地下水的含硒量为0.5-0.015毫克/升,且PH值为7.2-8.5,可以提供竹原纤维复合素酶培养过程中水的酸碱度条件,可以提高竹原纤维复合素酶的活性和产量。通过所述S4中密闭搅拌罐的搅拌速度为8-14r/min,所述密闭搅拌罐在使用前通过蒸馏水对密闭搅拌罐的内部进行清洗,可以保证物料混合均匀的同时,可以避免物料残渣过小,降低成品溶液的浑浊度。通过所述S5中密封放置温度为30℃-40℃,所述密闭玻璃罐放置在避光处,可以提高竹原纤维复合素酶的活性和产量,降低生产成本。通过所述S7中滤网的目数为300目-325目,所述滤网为不锈钢滤网,可以对复合酶液中的残渣进行过滤,减少过滤后所得液体中残渣,降低成品溶液的浑浊度。通过所述S6中的灭菌液为-1%碱水或浓度为1/10000~1/60000新洁尔灭菌溶液,可以将有害菌体灭活,提高成品使用时可能发生的隐患。通过所述S7中的残渣通过烘干装置烘干后,再经过紫外线进行灭菌之后收集备用,可以将残渣用于有机肥生产,由于残渣中含有酶菌种,ph值偏碱性,制作有机肥后可以达到杀虫,松弛土壤的作用,并能有效催生土壤中有机物形成。通过所述S8中地窖内设置有吸湿材料层,且地窖内设置有换气扇,可以保证地窖干燥透气的同时可以将成品溶液的保存时间提高到6-12个月。通过所述S4中水的温度控制在30℃-40℃,所述水在使用前通过紫外线进行杀菌,可以对竹原纤维复合素酶的制备,提供有利的温度条件,有利于提高竹原纤维复合素酶的产量。
实施例3
一种竹原纤维复合素酶制备及贮藏方法,包括如下步骤:
S1、选取物料:选取山东或安徽地区生产的皂荚,中华蜂的蜂蜜,天麻,以及水;所述皂荚采用表皮新鲜的皂荚,所述蜂蜜采用含水量小于等于20%的蜂蜜,所述天麻采用冬季采摘的冬麻,所述水为含硒地下水;
S2、准备物料:按质量比份计算,准备皂荚550份、蜂蜜120份、天麻320份和水1100份;
S3、加工物料:将准备好的皂荚洗净,通过切片机切成片状,将准备好的干燥后的天麻通过粉碎机粉碎,将加工好的物料收集,通过紫外线杀菌1h-1.5h;
S4、搅拌物料:将加工后的物料放入密闭搅拌罐中,加入水,通过密闭搅拌罐将物料搅拌混合均匀,再将混合均匀的物料输送到密闭玻璃罐中;
S5、密封反应:将均匀混合的物料静置放置在密闭玻璃罐中34天-38天进行菌液培养;
S6、灭活:将密闭玻璃罐中所得到的液体通过灭菌液进行杂菌灭活,密封静置1天-2天,得到复合酶液;
S7、残品过滤:将复合酶液通过滤网进行过滤,将过滤出的残渣进行收集,将过滤所得液体收集到玻璃器皿罐中;
S8、成品贮藏:将玻璃器皿罐密封包装,将密封包装后的玻璃器皿罐放置在地窖中进行存储,所述地窖内的贮藏温度为-5℃-60℃。
通过所述 S1中的含硒地下水的含硒量为0.5-0.015毫克/升,且PH值为7.2-8.5,可以提供竹原纤维复合素酶培养过程中水的酸碱度条件,可以提高竹原纤维复合素酶的活性和产量。通过所述S4中密闭搅拌罐的搅拌速度为8-14r/min,所述密闭搅拌罐在使用前通过蒸馏水对密闭搅拌罐的内部进行清洗,可以保证物料混合均匀的同时,可以避免物料残渣过小,降低成品溶液的浑浊度。通过所述S5中密封放置温度为30℃-40℃,所述密闭玻璃罐放置在避光处,可以提高竹原纤维复合素酶的活性和产量,降低生产成本。通过所述S7中滤网的目数为300目-325目,所述滤网为不锈钢滤网,可以对复合酶液中的残渣进行过滤,减少过滤后所得液体中残渣,降低成品溶液的浑浊度。通过所述S6中的灭菌液为-1%碱水或浓度为1/10000~1/60000新洁尔灭菌溶液,可以将有害菌体灭活,提高成品使用时可能发生的隐患。通过所述S7中的残渣通过烘干装置烘干后,再经过紫外线进行灭菌之后收集备用,可以将残渣用于有机肥生产,由于残渣中含有酶菌种,ph值偏碱性,制作有机肥后可以达到杀虫,松弛土壤的作用,并能有效催生土壤中有机物形成。通过所述S8中地窖内设置有吸湿材料层,且地窖内设置有换气扇,可以保证地窖干燥透气的同时可以将成品溶液的保存时间提高到6-12个月。通过所述S4中水的温度控制在30℃-40℃,所述水在使用前通过紫外线进行杀菌,可以对竹原纤维复合素酶的制备,提供有利的温度条件,有利于提高竹原纤维复合素酶的产量。
通过对三组实施例研究,可以得出在相同的生产环境和制备工艺的条件下,实施例2制备所得的竹原纤维复合素酶的活性和产量最高。
三组实施例的成分表如下:
1. |
2. 实施例1(份) |
3. 实施例2(份) |
4. 实施例3(份) |
5. 皂荚 |
6. 450 |
7. 500 |
8. 550 |
9. 蜂蜜 |
10. 80 |
11. 100 |
12. 120 |
13. 天麻 |
14. 280 |
15. 300 |
16. 320 |
17. 水 |
18. 900 |
19. 1000 |
20. 1100 |
综上所述:本发明提供的一种竹原纤维复合素酶的制备方法,与传统的制备方法相比,本发明可以提高竹原纤维复合素酶的产量和活性,并且可以节约生产成本,产生的残渣可以用于制作有机肥料;本发明提供的一种竹原纤维复合素酶的贮藏方法,可以提高竹原纤维复合素酶贮藏时间,并且可以降低贮藏成本。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围。