WO2012134169A2 - 조각인 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품 - Google Patents

조각인 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품 Download PDF

Info

Publication number
WO2012134169A2
WO2012134169A2 PCT/KR2012/002278 KR2012002278W WO2012134169A2 WO 2012134169 A2 WO2012134169 A2 WO 2012134169A2 KR 2012002278 W KR2012002278 W KR 2012002278W WO 2012134169 A2 WO2012134169 A2 WO 2012134169A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
lung cancer
composition
extract
present
active ingredient
Prior art date
Application number
PCT/KR2012/002278
Other languages
English (en)
French (fr)
Other versions
WO2012134169A3 (ko
Inventor
황성연
정경채
Original Assignee
주식회사 한국전통의학연구소
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 한국전통의학연구소 filed Critical 주식회사 한국전통의학연구소
Publication of WO2012134169A2 publication Critical patent/WO2012134169A2/ko
Publication of WO2012134169A3 publication Critical patent/WO2012134169A3/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A61K36/483—Gleditsia (locust)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/14—Yeasts or derivatives thereof
    • A23L33/145—Extracts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Definitions

  • the present invention relates to a novel use of extracts which are flakes. Specifically, the present invention relates to a therapeutic composition and a functional food containing the extract as an active ingredient, which is a fragment showing excellent preventive or therapeutic efficacy against lung cancer.
  • lung cancer is a malignant tumor in the lung, and it can be divided into primary lung cancer, which is the first cancer cell in bronchial tissue, bronchiole, alveoli, etc. have.
  • Non-small cell lung cancer which accounts for 80% to 85% of all lung cancers, can be treated by surgical treatment if diagnosed early. Due to the nature of difficult lung cancer, it is often found late and difficult to treat.
  • Non-small cell lung cancer consists of three subtypes: 40% adenocarcinoma, 40% squamous cell carcinoma and 20% large cell carcinoma.
  • TMN staging system is widely accepted for the management of lung cancer.
  • T1-T4 Primary tumors are divided into four T categories (T1-T4) according to tumor size, site and local involvement. Lymph node spread is delivered into the bronchus / pulmonary in the lung (N1), medial spread on the same side as the primary tumor (N2) and mediastinal spread across the primary lung tumor. Or supraclavilcular involvement (N3). There is no distant or metastatic spread (M0 or M1). In general, lung cancer that has not metastasized is treated by surgical removal. However, recurrence rates after lung cancer removal surgery are high (20-50%) (Cancer: Principles & Practice of Oncology, 56th. Ed. In: Devita DV, Hellman S, Rosenberg SA, eds. Philadelphia, PA: Lippincott Williams & Wilkins, 2001 ).
  • non-small cell lung cancer has a high recurrence rate after treatment, and compared with a high incidence rate, resistance to conventional chemotherapy with an anticancer agent is easily generated, making it difficult to treat effectively.
  • the 10-year survival rate is very low, less than 10% despite the recent development of cancer therapy. Therefore, it is very important to develop a treatment for such non-small cell lung cancer.
  • Gleditsiae Semen is the seed of the juniper tree ( Gledisia japonica Miquel var.koraiensis Nakai). It is a herbal medicine used in various folk remedies such as controlling wind and improving bowel function. Thorn is called a sculptor, and it has the effect of sowing, drainage, etc., used in various boils. Overwintering is also possible in central Korea. Gleditsia sinensis Lam. Is a herb used in various folk remedies such as improving intestinal function in East Asia. Thorn is called a sculptor, and it has the effect of sowing, drainage, etc., used in various boils. Overwintering is also possible in central Korea.
  • the present inventors completed the present invention by confirming that the extract of the sculptor can effectively kill lung cancer cells while studying the herbal medicine for sculptor.
  • the present invention provides a composition for the prevention and treatment of lung cancer comprising an active ingredient extracted with sculpting organic solvent.
  • the organic solvent is preferably ethanol.
  • the present invention provides a functional food for preventing lung cancer containing ethanol extract which is a fragment containing a food supplement acceptable food supplement as an active ingredient.
  • the present invention provides a composition for the prevention and treatment of lung cancer containing the ethanol extract of the fragment as an active ingredient.
  • the compositions of the present invention comprise extracts that are flakes as active ingredients and may further comprise pharmaceutically acceptable carriers or diluents.
  • the ethanol extract is preferably extracted for 24 hours at 50 °C, wherein the ethanol extract is more preferably dried and concentrated under 45 °C reduced pressure conditions, the ethanol is Most preferred is 95%.
  • the lung cancer is preferably non-small cell lung cancer, wherein the non-small cell lung cancer is adenocarcinoma (adenocarcinoma), squamous cell carcinoma (squamous cell carcinoma) and large cell cancer ( More preferably caused by a carcinoma selected from the crowd consisting of large cell carcinoma.
  • adenocarcinoma adenocarcinoma
  • squamous cell carcinoma squamous cell carcinoma
  • large cell cancer More preferably caused by a carcinoma selected from the crowd consisting of large cell carcinoma.
  • lung cancer refers to a malignant tumor occurring in the lung, and includes both small cell lung cancer and non-small cell lung cancer such as adenocarcinoma, squamous cell carcinoma, and large cell lung cancer.
  • the "pharmaceutically acceptable carrier” is a pharmaceutically acceptable substance such as a liquid or solid filler, diluent, excipient or solvent which serves to transport the active ingredient from one organ or part of the body to another organ or part of the body. , Composition or vehicle.
  • composition for treating lung cancer of the present invention may be prepared as a medicament by adding one or more pharmaceutically acceptable carriers together with the active ingredient.
  • the carrier may include, but is not limited to, saline, buffered saline, water, glycerol and ethanol, and any suitable agent known in the art (Remingtons's Pharmaceutical Science (Recent Edition), Mack Publishing Company, Easton PA) may be used. .
  • Formulations for pharmaceutical formulation of the extract of the present invention can be administered orally at the time of clinical administration and can be used in the form of general pharmaceutical formulations, when formulated, commonly used fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrants And diluents such as surfactants or excipients.
  • Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, etc.
  • liquid preparations for oral use include suspensions, solvents, emulsions, and syrups.
  • various excipients may be included, such as wetting sweeteners, fragrances, preservatives and the like.
  • the herbal medicine that may be added to the composition of the present invention may be any pharmaceutically acceptable herbal medicine, for example, Angelica tenuissimae Radix, Gastrodiae Rhizoma, Bapleuri Radix, Angelica ( Angelicae gigantis Radix, Persicae Semen, Cinnamomi Ramulus, Rhubarb (Rhei Rhizoma), Licorice (Glycyrrhizae Radix), Cnidii Rhizoma, Aurantii nobilis Pericarpium, Taxa (Alismatis Rhizoma) Coptidis Rhizoma, Scutellariae Radix, Hoelen, Peeoniae Radix, Atractylodis Rhizoma alba, Phellodendri Cortex, Gardeniae Fructus, Pinelliae Tuber, Ramulu Set (Uncaria) Uncus, Ponciri Fructus, Ginseng, Gingseng, Liriopis Tuber, Poly
  • composition of the present invention may be administered in various parenteral formulations during actual clinical administration, and solid preparations include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like.
  • solid preparations include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like.
  • excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives may be included.
  • preparations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations, suppositories.
  • non-aqueous solvent and the suspension solvent propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like can be used.
  • base of the suppository witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogelatin and the like can be used.
  • calcium or vitamin D 3 may be added to enhance the efficacy of the treatment.
  • Such compositions may be presented in unit-dose (single) or multi-dose (several) containers, such as sealed ampoules and vials, and immediately before use, sterile liquid carriers such as water for injection Can be stored under freeze-drying conditions requiring only the addition of. Immediate injection solutions and suspensions can be prepared from sterile powders, granules and tablets.
  • the formulations of the present invention can be applied differently depending on the age, sex, condition of the subject, the absorption of the active ingredient in the body, the inactivation rate and excretion rate, the drug used in combination.
  • the invention also includes formulations of dosage units.
  • the formulations are present in individual dosage forms, such as tablets, coated tablets, capsules, pills, suppositories, and ampoules, wherein the amount of active compound in the drug corresponds to the fraction or multiple of the individual dosage.
  • Dosage units may contain, for example, one, two, three or four times the individual dosage, or 1/2, 1/3 or 1/4 times.
  • the individual dosages preferably contain an amount in which the active compound is administered at one time, which usually corresponds to all, 1/2, 1/3 or 1/4 times the daily dosage.
  • extract refers to an active ingredient isolated from natural products.
  • the extract may be obtained by an extraction process using water, an organic solvent, or a mixed solvent thereof, and includes an extract, a dry powder thereof, or any form formulated using the same.
  • ethanol extract of Sculpture killed 99.7% of A549 non-small cell lung cancer cells at 100 ⁇ g / ml and the EC 50 (half maximal effective concentration) was 14.6 ⁇ g / ml.
  • the above results demonstrate that the extract of the present invention has excellent killing activity of A549 non-small cell lung cancer cells and further has lung cancer treatment and prophylactic activity.
  • prevention means any action that inhibits or delays the development of lung cancer by administration of the composition.
  • treatment means any action that improves or advantageously changes the symptoms of lung cancer by administration of the composition.
  • Extract which is a flake in the present invention may be extracted by using water, an organic solvent, or a mixed solvent thereof. Preferably it is extracted using an organic solvent, in particular ethanol.
  • the extracted solution can be used directly or can be concentrated and / or dried.
  • methanol, ethanol, isopropanol, butanol, ethylene, acetone, hexane, ether, chloroform, ethyl acetate, butyl acetate, dichloromethane, N, N-dimethylformamide (DMF), dimethyl sulfoxide (DMSO), 1,3-butylene glycol, propylene glycol, or a mixed solvent thereof may be used and extracted by room temperature or warming under conditions where the active ingredient of the herbal medicine is not destroyed or minimized.
  • the degree of extraction and loss of the active ingredient of the drug may vary, so select an appropriate organic solvent.
  • the extraction method is not particularly limited, and examples thereof include cold needle extraction, ultrasonic extraction, reflux cooling extraction, and the like.
  • Filtration is a process of removing the suspended solid particles from the extract, it may be used to filter the particles using cotton, nylon or the like, or may be used, such as ultrafiltration, cryofiltration, centrifugal separation, but is not limited thereto.
  • Concentration of the extract may be used, such as concentrated under reduced pressure, reverse osmosis concentration.
  • the drying step after concentration includes freeze drying, vacuum drying, hot air drying, spray drying, reduced pressure drying, foam drying, high frequency drying, infrared drying, and the like. If desired, a process of grinding the final dried extract may be added.
  • the extract can perform an additional fractionation process.
  • the extract is suspended in distilled water to obtain a nonpolar solvent soluble layer by extraction and separation with a nonpolar organic solvent such as hexane, ether, dichloromethane, chloroform, ethyl acetate, or a mixed solvent thereof. It can be used by concentrating and / or drying it.
  • a nonpolar organic solvent such as hexane, ether, dichloromethane, chloroform, ethyl acetate, or a mixed solvent thereof. It can be used by concentrating and / or drying it.
  • the term "pharmaceutically acceptable salts” means salts derived from pharmacologically or physiologically acceptable inorganic acids, organic acids and bases.
  • suitable acid include hydrochloric acid, bromic acid, sulfuric acid, nitric acid, perchloric acid, fumaric acid, maleic acid, phosphoric acid, glycolic acid, lactic acid, salicylic acid, succinic acid, toluene-p-sulfonic acid, tartaric acid, acetic acid, citric acid, methanesulfonic acid, Formic acid, benzoic acid, malonic acid, naphthalene-2-sulfonic acid, benzenesulfonic acid, and the like.
  • Salts derived from suitable bases may include alkali metals such as sodium, alkaline earth metals such as magnesium, ammonium and the like.
  • the pharmaceutical composition for preventing and treating lung cancer diseases of the present invention comprises 0.1 to 50% by weight of the extract or compound based on the total weight of the composition.
  • the composition does not increase the efficacy, but may include additional ingredients that are commonly used in the pharmaceutical composition to improve the smell, taste, time and the like.
  • the composition adds inorganic and organic additives such as vitamins B1, B2, B6, C, E, niacin, carnitine, betaine, folate pantothenic acid, biotin, zinc, iron, calcium, chromium, magnesium, and mixtures thereof. It can be included as.
  • the composition may include a substance having a therapeutic activity against lung cancer, used alone or previously used.
  • the term “patient” refers to humans, horses, sheep, pigs, goats, camels, who have disease caused by lung cancer and its direct and indirect causes, and whose symptoms may be improved by administering the composition of the present invention. Means antelope, dog and other animals.
  • a composition comprising an extract which is a fragment of the present invention, the above-mentioned lung cancer can be effectively prevented and treated.
  • the composition of the present invention can be administered in parallel with existing lung cancer therapeutics.
  • the term "administration” means introducing a predetermined substance into a patient by any suitable method, and the route of administration of the composition of the present invention is oral or parenteral via any general route as long as the target tissue can be reached. May be administered.
  • the composition may be administered by any device in which the active agent may migrate to the target cell.
  • composition of the present invention is administered in a pharmaceutically effective amount.
  • pharmaceutically effective amount means an amount sufficient to treat a disease at a reasonable benefit / risk ratio applicable to medical treatment, and an effective dose level refers to a patient's sexually transmitted disease, age, severity, and drug activity.
  • the compositions of the present invention may be administered as individual therapeutic agents or in combination with other therapeutic agents and may be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents. It may be single or multiple doses.
  • the method of administering the composition comprising the extract or compound prepared according to the preparation method of the present invention is preferably oral administration or intravenous administration.
  • the effective dose is oral administration, it is usually 1 to 1 time per adult. 500 mg / kg is preferred, and in the case of intravenous administration, 1 to 100 mg / kg is preferred, and may be administered 2-3 times a day.
  • Dosage levels for a particular patient may vary depending on sex, age, health condition, diet, time of administration, method of administration, drug mixture, the condition of the patient, and the extent of the onset of neurological disease.
  • the present invention provides a functional food for preventing lung cancer containing ethanol extract which is a fragment containing a food supplement acceptable food supplement as an active ingredient.
  • Functional food of the present invention preferably contains 0.1 to 5% by weight, more preferably 1% by weight of the ethanol extract relative to the total weight.
  • Functional food of the present invention is not particularly limited in the formulation, for example, dairy products including meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gums, ice cream, Various soups, beverages, tea, drinks, alcoholic beverages and vitamin complexes, etc., and includes all of the health food in the usual sense.
  • “functional food” means a food manufactured and processed using raw materials or ingredients having functional properties useful for the human body according to Act No. 6767 of the Health Functional Food Act, and “functional” refers to the structure of the human body And ingestion for the purpose of gaining useful effects in health applications such as nutrient regulation or physiological action for function.
  • the present invention As a result of injecting the extract of the present invention into A549 non-small cell lung cancer cells, it was confirmed that A549 non-small cell lung cancer cells were killed (see FIG. 1 ). Therefore, it can be seen that the extract of the fragment is a new lung cancer treatment effect.
  • the present invention was completed by preparing a functional food for lung cancer prevention containing the extract of the flakes as an active ingredient (see Preparation Example 2 ).
  • the extract of the present invention inhibits the growth of lung cancer cells and induces apoptosis. Therefore, the composition for treating lung cancer according to the present invention will be very effective in the treatment of lung cancer patients.
  • 1 is a result of Alamar Blue analysis to determine the effect of the introduction of sculptor on the growth of lung cancer cells in A549 non-small cell lung cancer cells, human lung cancer cells, wherein the X-axis is the concentration of the extract flakes, Y-axis is surviving Survival rate of human lung cancer cells.
  • Alamar Blue assay is a modified form of the MTT assay, in which a specific enzyme degrades a living cell and then measures the fluorescence intensity of the product as the compound breaks down to determine the relative number of living cells after treatment. I am an experimental method. It will be described in more detail below.
  • A549 cells, a lung cancer cell line used in the present invention were distributed from the Korean Cell Line Bank (KCLB) and used for experiments. Specifically, A549 lung cancer cells RPMI 1640 medium (Robwell Park Memorial) containing 10% FBS (fetal bovine serum, fetal bovine serum) (Welgene) and 25 mM HEPES (4- (2-hydroxyethyl) -1-piperazineethanesulfonic acid) Subculture was performed in a floating culture medium researched and developed by the Institute.
  • KCLB Korean Cell Line Bank
  • the extract extracted from Example 1 confirmed the effect of inhibiting the growth of lung cancer cells A549 non-small cell growth. Specifically, 1.4 X 10 per each well in a 96 well plate 3 The A549 lung cancer cells were seeded and incubated for 24 hours, and then the fragments dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) When the ethanol extract was treated at concentrations of 0 to 100 ⁇ g / ml (specifically, concentrations of 0, 3.125, 6.25, 12.5, 25, 50 and 100 ⁇ g / ml, respectively) for 48 hours, the degree of inhibition of cell growth was confirmed. (Table 1).
  • DMSO dimethyl sulfoxide
  • Table 1 above describes the relative cell numbers of lung cancer cells after 48 hours according to the treatment concentration of each fragment based on the number of survival rates of lung cancer cells of the control group that was not treated with fragment.
  • the extract, a fragment of the present invention demonstrates good A549 non-small cell lung cancer cell killing activity and further has lung cancer treatment and prophylactic activity.
  • Sculpture used in the present invention was widely used as a medicinal herb was determined that there is no problem in stability, but the oral administration and intraperitoneal toxicity experiments were carried out to confirm this.
  • Acute toxicity test was performed using 6-week-old SPF SD rats. Two animals per group were suspended orally administered at a dose of 5 g / kg, each of which was an extract of Example 1 of the present invention, suspended in 0.5% methylcellulose solution. After administration of the test substance, mortality, clinical symptoms, and changes in body weight were observed. Hematological and hematological examinations were performed, and autopsy was performed to observe abdominal and thoracic organ abnormalities.
  • the present inventors have confirmed that the lung cancer treatment effect of the extract sculpted through the above examples to prepare a lung cancer treatment containing the extract sculpted as an active ingredient as follows.
  • the preparation of the following therapeutic agent can be used for the application of the health food as well as the therapeutic agent.
  • the inventors have confirmed that the extract extract is excellent in the lung cancer treatment activity through the above Example to prepare a functional food containing it as an active ingredient as follows.
  • Chewing gum was prepared using conventional methods using the composition and content of 20% gum base, 76.36 to 76.76% sugar, 0.24 to 0.64% flake extract, 1% fruit flavor, and 2% water.
  • composition and content of the sugar 34.36 ⁇ 34.76%, cocoa butter 34%, cocoa mass 15%, cocoa powder 15%, lecithin 0.5%, vanilla flavor 0.5%, flake extract 0.24 ⁇ 0.64% using conventional methods Chocolate was prepared.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pediatric Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

본 발명은 조각인 추출물의 신규한 용도에 관한 것으로, 폐암에 대해 탁월한 예방 또는 치료 효능을 나타내는 조각인 추출물을 유효성분으로 함유하는 치료용 조성물 및 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 조각인 추출물은 폐암 세포의 성장을 억제하고 세포사멸을 유도하는 효과가 있어 폐암 치료 및 예방에 효과적으로 사용할 수 있다.

Description

조각인 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
본 발명은 조각인 추출물의 신규한 용도에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 폐암에 대해 탁월한 예방 또는 치료 효능을 나타내는 조각인 추출물을 유효성분으로 함유하는 치료용 조성물 및 기능성 식품에 관한 것이다.
현대인의 주요 질환 중에서, 암의 치료방법과 진단방법에 관한 연구는 발병빈도가 높은 폐암, 간암, 위암 등을 중심으로 진행되고 있다. 폐암이란 폐에 생긴 악성 종양을 말하며, 크게 암세포가 기관지, 세기관지, 폐포 등 폐를 구성하는 조직에서 처음 발생한 원발성 폐암과 암세포가 다른 기관에서 생겨나 혈관이나 림프관을 타고 폐로 이동해 증식하는 전이성 폐암으로 나눌 수 있다.
2009년에 발표된 한국중앙암등록본부 자료에 의하면 2007년에 우리나라에서는 연 평균 161,920건의 암이 발생되었는데, 그 중 폐암은 남녀를 합쳐서 연 평균 17,846건으로 전체 암 발생의 11.0%로 4위를 차지하였다. 인구 10만명당 조발생률은 36.3건이다. 남녀의 성비는 3.51:1로 남자에게서 더 많이 발생하였다. 발생건수는 남자가 연 평균 12,841건으로 남성의 암 중에서 2위를 차지하였고, 여자는 연 평균 5,005건으로 여성의 암 중에서 5위를 차지하였다. 남녀를 합쳐서 본 연령대별로는 70대가 34.1%로 가장 많고, 60대가 31.3%, 50대가 14.8%의 순이다(보건복지가족부 중앙암등록본부 2009년 12월 21일 발표 자료).
폐암은 현미경적으로 암세포의 크기와 형태에 따라 비소세포 폐암(non-small cell lung cancer: NSCLC)과 소세포 폐암(small cell lung cancer: SCLC)으로 구분된다. 이렇게 비소세포 폐암과 소세포 폐암을 구분하는 것은 임상적 경과와 치료가 다르기 때문인데, 전체 폐암의 80~85%를 차지하는 비소세포 폐암은 조기에 진단할 경우 수술적 요법으로 치료할 수 있으나, 조기 발견이 어려운 폐암의 특성상 늦게 발견되어 치료가 어려운 경우가 많다. 비소세포 폐암은 3종류의 서브 타입으로 구성된다: 40% 선암(adenocarcinoma), 40% 편평상피세포암(squamous cell carcinoma) 및 20% 대세포암(large cell carcinoma). TMN 병기 구분법 (staging system)이 폐암의 관리에 널리 받아들여지고 있다. 일차 종양은 종양 크기, 부위 및 국부적 병발(local involvement)에 따라 4개의 T 카테고리 (T1-T4)로 구분된다. 림프 절 확산(spread)은 폐 내의 기관지/폐(bronchio/pulmonary) 내로 전달(N1), 상기 일차 종양과 같은 측면 상의 종격동 확산(medistinal spread)(N2) 및 상기 일차 폐 종양의 맞은 편으로 종격동 확산 또는 상부클라비움 병발(supraclavilcular involvement)(N3)로 구분된다. 원격 또는 전이 확산(metastatic spread)은 없거나 있다(M0 또는 M1). 일반적으로 전이가 이루어지지 않은 폐암은 외과적 수술을 통하여 제거하는 방법으로 치료를 한다. 그러나, 폐암 제거 수술 후의 재발율은 20 내지 50%로 높다(Cancer: Principles & Practice of Oncology, 56th. ed. In: Devita DV, Hellman S, Rosenberg SA, eds. Philadelphia, PA: Lippincott Williams & Wilkins, 2001).
특히 비소세포성 폐암은 치료 후 재발률이 높고, 높은 발병률에 비하여 기존의 항암제를 이용한 화학적 치료에 대한 내성이 쉽게 발생하여 효과적인 치료가 어려운 것으로 알려져 있다. 상기 비소세포성 폐암의 경우, 최근의 암 치료법의 발달에도 불구하고 10년 생존률이 10% 이하로 매우 낮다. 따라서 이러한 비소세포성 폐암에 대한 치료제 개발이 매우 중요하다.
조각인(Gleditsiae Semen)은 주엽나무(Gledisia japonica Miquel var. koraiensis Nakai)의 씨에 해당하는 것이다. 풍을 다스리고 장 기능을 향상시키는 등의 여러 가지 민간요법으로 사용되는 한약재이다. 가시를 조각자라고 하며 소종, 배농 등의 효능이 있어 각종 종기에 쓴다. 한국의 중부지방에서도 월동이 가능하다. 조각인(Gleditsia sinensis Lam.)은 동아시아 지역에서 장 기능을 향상시키는 등의 여러가지 민간요법으로 사용되는 한약재이다. 가시를 조각자라고 하며 소종, 배농 등의 효능이 있어 각종 종기에 쓴다. 한국의 중부지방에서도 월동이 가능하다.
그러나, 아직까지 어떠한 문헌에서도 조각인의 폐암 억제 효과에 대해서는 알려진 바가 없다.
이에, 본 발명자들은 조각인에 대한 생약 연구를 하던 중, 조각인 추출물이 폐암 세포를 효과적으로 사멸시킬 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 조각인 추출물을 유효성분으로 함유하는 폐암 치료용 조성물 및 기능성 식품을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 조각인을 유기용매로 추출한 유효성분을 포함하는 폐암 예방 및 치료용 조성물을 제공한다. 상기 유기용매는 에탄올인 것이 바람직하다.
또한, 본 발명은 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 조각인 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 폐암 예방용 기능성 식품을 제공한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 조각인 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 폐암 예방 및 치료용 조성물을 제공한다. 본 발명의 조성물은 활성성분으로서 조각인 추출물을 포함하며, 추가적으로 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함할 수 있다.
본 발명의 폐암 예방 및 치료용 조성물에 있어서, 상기 에탄올 추출물은 50℃에서 24시간 동안 추출되는 것이 바람직하고, 이때 상기 에탄올 추출물은 45℃ 감압 조건에서 건조 및 농축되는 것이 보다 바람직하며, 상기 에탄올은 95%인 것이 가장 바람직하다.
또한, 본 발명의 폐암 예방 및 치료용 조성물에 있어서, 상기 폐암은 비소세포 폐암인 것이 바람직하고, 이때 상기 비소세포 폐암은 선암(adenocarcinoma), 편평상피세포암(squamous cell carcinoma) 및 대세포암(large cell carcinoma)으로 이루어진 군중에서 선택된 암종에 의하여 유발되는 것이 보다 바람직하다.
본 발명에서, 사용된 용어 "폐암(lung cancer)"은 폐에 발생하는 악성 종양을 의미하며, 소세포 폐암과 선암, 편평상피세포암, 대세포 폐암 등의 비소세포 폐암을 모두 포함하는 의미이다.
상기 "약제학적으로 허용가능한 담체"는 신체의 한 기관 또는 부분으로부터 신체의 다른 기관 또는 부분으로 활성 성분을 수송하는 역할을 하는 액체 또는 고체 충진제, 희석제, 부형제 또는 용매와 같은 약제학적으로 허용되는 물질, 조성물 또는 운반체(vehicle)를 의미한다.
본 발명의 폐암 치료용 조성물은 유효성분과 함께 추가로 약제학적으로 허용되는 1종 이상의 담체를 첨가하여 약제로 제조할 수 있다. 상기 담체로는 식염수, 완충 식염수, 물, 글리세롤 및 에탄올 등이 있으나 이에 한정되지 않으며, 당해 기술 분야에 알려진 적합한 제제(Remingtons's Pharmaceutical Science(최근판), Mack Publishing Company, Easton PA)를 모두 사용 가능하다.
본 발명의 조각인 추출물을 약제화하기 위한 제제는 임상 투여시에 경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있으며, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드, 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물에 추가될 수 있는 생약재는 약학적으로 허용되는 임의의 생약재일 수 있으며, 예를 들면, 고본(Angelicae tenuissimae Radix), 천마(Gastrodiae Rhizoma), 시호(Bapleuri Radix), 당귀(Angelicae gigantis Radix), 도인(Persicae Semen), 계지(Cinnamomi Ramulus), 대황(Rhei Rhizoma), 감초(Glycyrrhizae Radix), 천궁(Cnidii Rhizoma), 진피(Aurantii nobilis Pericarpium), 택사(Alismatis Rhizoma), 황련(Coptidis Rhizoma), 황금(Scutellariae Radix), 복령(Hoelen), 작약(Paeoniae Radix), 백출(Atractylodis Rhizoma alba), 황백(Phellodendri Cortex), 치자(Gardeniae Fructus), 반하(Pinelliae Tuber), 조구등(Uncaria Ramuluset Uncus), 지실(Ponciri Fructus), 인삼(Gingseng), 맥문동(Liriopis Tuber), 원지(Polygalae Radix), 석창포(Acori graminei Rhizoma), 창출(Atractylodis Rhizoma alba), 감국(Chrysanthemi Flos), 방풍(Ledebouriellae Radix), 생강(Zingiberis Rhizoma crudus), 망초(Natrii sulfas), 대조(Zizyphi Fructus), 단삼(Salviae Radix), 목단피(Mautan Radicis Cortex), 지황(Rehmanniae Radix), 박하(Menthae Herba), 산약(Dioscoreae Rhizoma), 저령(Polyporus), 하수오(Polygonimultiflori Radix), 구자(Allii tuberosi Semen), 결명자(Cassiae Semen), 구기자(Lycii Fructus), 독활(Araliae cordatae Radix), 두충(Eucommiae Cortex), 백화사설초(Hedyotis Herba), 삼백초(Saururus Herba), 인진(Artemisiaecapillaris Herba), 지모(Anemarrhenae Rhizoma), 홍화(Carthami Flos), 황기(Astragali Radix), 석송자(Lycopodium), 은행잎(Ginkgonis Folium), 황정(Polygonati Rhizoma), 연자육(Nelumbinis Semen), 용골(Fossilia ossis Mastodi), 지골피(Lycii radicis Cortex), 우슬(Achyranthis Radix), 숙지황(Rehmanniae Radix preparata), 흑임자(Perillae Semen), 백자인(Thujae Semen), 맥아(Hordei Fructus germinatus), 토사자(Cuscutae Semen), 파극천(Morindae Radix), 해송(Pini koraiensis Radix) 등을 단독으로 또는 배합하여 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물은 실제 임상 투여시에 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드, 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 구체적으로, 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. 또한 치료제의 효능 증진을 위해 칼슘이나 비타민 D3를 첨가할 수 있다. 이러한 조성물은 단위-용량(1회분) 또는 다중-용량(수 회분) 용기, 예를 들면, 밀봉된 앰풀 및 바이알에 제시될 수 있고, 사용 직전에 멸균성 액상 담체, 예를 들면, 주사용 수의 부가 만을 요구하는 동결-건조 조건 하에 저장할 수 있다. 즉석의 주사 용제 및 현탁제는 멸균성 산제, 과립제 및 정제로부터 제조할 수 있다.
본 발명의 제제는 대상의 연령, 성별, 상태, 체내에서 활성 성분의 흡수도, 불활성율 및 배설속도, 병용되는 약물에 따라 달리 적용될 수 있다. 본 발명은 또한 투약 단위의 제형들을 포함한다. 제형은 개별 투약 형태, 예를 들면 정제, 피복 정제, 캡슐제, 환제, 좌약 및 앰플제로 존재하고, 약제 중 유효 화합물의 함량은 개별 투약량의 분율 또는 배수에 해당한다. 투약 단위는, 예를 들면 개별 투여량의 1, 2, 3 또는 4배로, 또는 1/2, 1/3 또는 1/4배를 함유할 수 있다. 개별 투여량은 바람직하기로는 유효 화합물이 1회에 투여되는 양을 함유하며, 이는 통상 1일 투여량의 전부, 1/2, 1/3 또는 1/4배에 해당한다.
본 발명에서 용어, "추출물(extract)"은 천연물로부터 분리된 활성성분을 의미한다. 추출물은 물, 유기용매, 또는 이의 혼합용매를 이용하는 추출과정으로 획득할 수 있으며, 추출액, 이의 건조 분말 또는 이를 이용하여 제형화된 모든 형태를 포함한다.
본 발명의 구체적인 실시에서, 조각인의 에탄올 추출물은 A549 비소세포성 폐암 세포를 100 ㎍/㎖에서 99.7% 사멸시키고, EC50(half maximal effective concentration)은 14.6 ㎍/㎖이었다. 상기 결과는 본 발명의 조각인 추출물이 우수한 A549 비소세포성 폐암 세포의 사멸 활성을 가지며, 나아가 폐암 치료 및 예방 활성을 가진다는 것을 입증하는 것이다.
본 발명에서 용어, "예방"이란 조성물의 투여로 폐암 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 용어, "치료"란 조성물의 투여로 폐암의 증세가 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 조각인 추출물은 물, 유기 용매, 또는 이의 혼합 용매를 사용하여 추출하여 사용할 수 있다. 바람직하게는 유기 용매, 특히 에탄올을 사용하여 추출한다. 추출한 액은 바로 사용하거나 또는 농축 및/또는 건조하여 사용할 수 있다. 유기용매를 사용하여 추출하는 경우, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, N, N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합용매인 유기용매를 사용하며 생약의 유효 성분이 파괴되지 않거나 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출할 수 있다. 추출하는 유기용매에 따라 약제의 유효성분의 추출정도와 손실정도가 차이가 날 수 있으므로, 알맞은 유기용매를 선택하여 사용하도록 한다. 추출 방법은 특별히 제한되지 않고, 예를 들어 냉침 추출, 초음파 추출, 환류 냉각 추출 등이 있다. 여과는 추출액으로부터 부유하는 고체 입자를 제거하는 과정으로, 면, 나일론 등을 이용하여 입자를 걸러내거나 한외여과, 냉동여과법, 원심분리법 등을 사용할 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
추출액의 농축에는 감압농축, 역삼투압 농축 등의 방법이 사용될 수 있다. 농축 후 건조 단계는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조, 감압건조, 포말건조, 고주파건조, 적외선건조 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 경우에 따라, 최종 건조된 추출물을 분쇄하는 공정을 추가할 수 있다.
또한, 상기 추출물은 추가의 분획 공정을 수행할 수 있다. 바람직하게는 상기 추출물을 증류수에 현탁시켜 비극성 유기 용매, 예를 들어, 헥산, 에테로, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸아세테이드 또는 이들의 혼합 용매로 비극성용매 가용층을 추출, 분리하여 수득하도록 하고, 이를 농축 및/또는 건조하여 사용할 수 있다.
본 발명에서, 용어 "약제학적으로 허용가능한 염"이란 약리학적 또는 생리학적으로 허용되는 무기산, 유기산 및 염기로부터 유도된 염을 의미한다. 적합산 산의 예로는 염산, 브롬산, 황산, 질산, 과염소산, 푸마르산, 말레산, 인산, 글리콜산, 락트산, 살리실산, 숙신산, 톨루엔-p-설폰산, 타르타르산, 아세트산, 시트르산, 메탄설폰산, 포름산, 벤조산, 말론산, 나프탈렌-2-설폰산, 벤젠설폰산 등을 포함할 수 있다. 적합한 염기로부터 유도된 염은 알칼리 금속, 예들 들어, 나트륨, 알칼리토금속, 예들 들어, 마그네슘, 암모늄 등을 포함할 수 있다.
본 발명의 폐암 질환 예방 및 치료용 약학조성물은 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물 또는 화합물을 0.1 내지 50 중량%로 포함한다. 또한, 상기 조성물은 약효를 증가시키지는 않으나 약재 조성물에 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 추가성분을 포함할 수 있다. 또한, 상기 조성물은 비타민 B1, B2, B6, C, E, 니아신, 카르니친, 베타인, 엽산 판토텐산, 비오틴, 아연, 철, 칼슘, 크롬, 마그네슘, 이들의 혼합물 등의 무기, 유기 첨가물들을 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 조성물은 단독 사용하거나 기존 사용되어진 폐암에 대한 치료 활성을 가지는 물질을 포함할 수 있다.
본 발명에서 용어, "환자"는 폐암 및 이의 직, 간접적 원인에 의해 유발된 질환을 가지고, 본 발명의 조성물을 투여에 의하여 증상이 호전될 수 있는 인간과 말, 양, 돼지, 염소, 낙타, 영양, 개 등의 동물을 의미한다. 본 발명의 조각인 추출물을 포함하는 조성물을 환자에게 투여함으로써, 상기에서 언급한 폐암을 효과적으로 예방 및 치료할 수 있다. 본 발명의 조성물을 기존의 폐암 치료제와 병행하여 투여할 수 있다.
본 발명에서 용어, "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 환자에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미하며, 본 발명의 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 경구 또는 비경구 투여될 수 있다. 또한, 조성물은 활성 물질이 표적 세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서 용어, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 성병, 연령, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 본 발명의 제조 방법에 따라 제조된 추출물 또는 화합물을 포함하는 조성물의 투여방법은 경구투여 또는 정맥투여가 바람직하고, 일반적으로 그 유효 용량은 경구투여인 경우에는 보통 성인을 기준으로 1회에 1 내지 500 ㎎/㎏이 바람직하며, 정맥투여인 경우에는 1 내지 100 ㎎/㎏이 바람직하며, 하루 2-3 회 투여될 수 있다. 특정 환자에 대한 투여용량 수준은 성별, 연령, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 약제혼합, 환자의 상태 및 신경 질환의 발병 정도에 따라 변화될 수 있다.
또한, 본 발명은 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 조각인 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 폐암 예방용 기능성 식품을 제공한다.
본 발명의 기능성 식품은 에탄올 추출물을 총중량에 대해 0.1 내지 5중량% 포함하는 것이 바람직하며, 1중량%로 포함하는 것이 더욱 바람직하다. 본 발명의 기능성 식품은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바는 없으며, 예를 들어 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명에 있어서 "기능성 식품"은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.
본 발명에서는 A549 비소세포성 폐암 세포에 본 발명의 조각인 추출물을 투입한 결과, A549 비소세포성 폐암 세포가 사멸하는 것을 확인하였다(도 1 참조). 따라서, 조각인 추출물이 폐암 치료 효과가 있다는 것을 새롭게 알 수 있다. 이에, 본 발명에서는 조각인 추출물을 유효성분으로 함유하는 폐암 예방용 기능성 식품을 제조함으로써 본 발명을 완성하였다(제조예 2 참조)
상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 조각인 추출물은 폐암 세포의 성장을 억제하고 세포사멸을 유도한다. 따라서 본 발명에 따른 폐암 치료용 조성물은 폐암 환자의 치료에 매우 효과적일 것이다.
도 1은 인간 폐암 세포인 A549 비소세포성 폐암 세포에서 조각인의 도입이 폐암 세포의 성장에 미치는 영향을 알아보기 위한 Alamar Blue 분석 결과이고, 이때 X축은 조각인 추출물의 농도이고, Y축은 생존한 인간 폐암 세포의 생존율을 나타낸다.
이하, 본 발명을 하기 실시예에 의거하여 보다 상세하게 설명하고자 한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명은 하기 실시예에 의해 한정되는 것이 아니고, 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 치환 및 균등한 타 실시예로 변경할 수 있음은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 명백할 것이다.
<실시예 1> 조각인 추출물의 제조
서울 약재상에서 구입한 조각인(중국산) 3 ㎏을 음지 및 실온에서 5일간 건조하고 분쇄하였다. 상기 분쇄된 조각인을 95% 에탄올(ethanol) 30 ℓ에 침지시키고 50℃에서 24시간 동안 추출하였다. 이것을 여과지를 통하여 여과한 후 45℃ 감압 조건에서 건조 및 농축하여 총 추출물 419 g을 수득하고, -20℃에서 보관하였다.
<실시예 2> 조각인 추출물이 폐암 세포의 성장에 미치는 영향
상기 실시예 1에서 추출한 조각인 추출물이 폐암 세포의 성장에 미치는 영향을 알아보기 위하여, 인간 폐암 세포인 A549 비소세포성 폐암 세포에 조각인의 에탄올 추출물을 48시간 처리하고 Alamar Blue 분석을 시행하였다. Alamar Blue 분석은 MTT 분석의 변형된 형태인데, 특정 효소에 의해서 분해되는 화합물을 살아있는 세포에 처리한 후 화합물이 분해되면서 나오는 생성물의 형광 세기를 측정함으로써 약물을 처리한 후 살아있는 세포의 상대적인 숫자를 알아내는 실험방법이다. 하기에서 보다 상세히 설명한다.
<2-1> 인간 폐암 세포주의 준비 및 처리
본 발명에 사용된 폐암 세포주인 A549 세포는 한국세포주은행(Korean Cell Line Bank, KCLB)으로부터 분양받아 실험에 이용하였다. 구체적으로, A549 폐암 세포를 10% FBS(fetal bovine serum, 소태아혈청)(Welgene)와 25 mM HEPES (4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid)를 포함하는 RPMI 1640 배지(Robwell Park Memorial Institute에 의하여 연구 개발된 부유배양용 배지)에서 계대배양하였다.
<2-2> A549 비소세포성 세포의 세포 성장 억제 측정
상기 실시예 1에서 추출한 조각인 추출물이 폐암 세포인 A549 비소세포성 세포 성장 억제효과를 확인하였다. 구체적으로, 96 웰 플레이트에 각 웰 당 1.4 X 103 개의 A549 폐암 세포를 주입(seeding)하고 24시간 동안 배양한 후, DMSO(Dimethyl sulfoxide)에 녹인 상기 조각인 에탄올 추출물을 각각 0 내지 100 ㎍/㎖ 농도(구체적으로, 각각 0, 3.125, 6.25, 12.5, 25, 50 및 100 ㎍/㎖ 농도)로 48시간 동안 처리하였을 때, 세포 성장을 저해하는 정도를 확인하였다(표 1). 각 농도의 추출물을 처리한 후, 96-웰 플레이트에서 각 웰에 채워진 0.2 ㎖의 세포 배양액에 20 ㎕의 Alamar Blue 시약을 첨가한 후 플레이트를 인큐베이터에서 2시간 동안 배양하였다. 각 웰의 세포를 고르게 반응시키기 위하여 플레이트를 천천히 흔들고, 544 ㎚의 파장에서 조사광을 조사하면서 590 ㎚에서 형광의 세기를 형광광도계(Fluorescence Microplate Reader; Molecular Devices Corp.)로 측정하였고, 폐암 세포의 생존율을 도 1에 나타내었다.
표 1
조각인 농도 폐암 세포 생존율 (평균) 표준편차
0 ㎍/㎖ 1.000 0.000
3.125 ㎍/㎖ 0.900 0.069
6.25 ㎍/㎖ 0.799 0.067
12.5 ㎍/㎖ 0.702 0.023
25 ㎍/㎖ 0.031 0.003
50 ㎍/㎖ 0.002 0.002
100 ㎍/㎖ 0.003 0.001
그 결과, 표 1 및 도 1에서 나타난 바와 같이, 조각인의 처리 농도가 높을수록 폐암 세포의 성장이 감소하였으며, 이로부터 조각인이 폐암 치료 효과를 가짐을 알 수 있었다. 즉, 3.125 ㎍/㎖에서 10.0%, 6.25 ㎍/㎖에서 20.1%, 12.5 ㎍/㎖에서 28.8%, 25 ㎍/㎖에서 96.7%, 50 ㎍/㎖에서 99.8%, 100 ㎍/㎖에서 99.7%로 폐암 세포를 사멸시켰다. 아울러, EC50(half maximal effective concentration)은 14.6 ㎍/㎖로 측정되었다. 상기 표 1에서 조각인을 처리하지 않은 대조군의 폐암 세포의 생존율 수를 1을 기준으로 하여 각각의 조각인 처리 농도에 따른 48시간 후의 폐암 세포의 상대적 세포수를 기재하였다. 이와 같이, 본 발명의 조각인 추출물은 우수한 A549 비소세포성 폐암 세포 사멸 활성을 가지며, 나아가 폐암 치료 및 예방 활성을 가진다는 것을 입증한다.
<실시예 3> 조각인 추출물에 의한 급성독성 시험
본 발명에 이용된 조각인은 널리 약재로 이용되고 있어서 안정성에 문제가 없을 것으로 판단하였으나, 경구 투여시 및 복강내 투여시의 독성 실험을 수행하여 이를 확인하고자 하였다.
6주령의 특정병원부재(SPF) SD계 랫트를 사용하여 급성독성실험을 실시하였다. 군당 2 마리씩의 동물에 본 발명의 실시예 1의 조각인 추출물을 각각 0.5% 메틸셀룰로즈 용액에 현탁하여 5 g/㎏의 용량으로 단회 경구투여하였다. 시험물질 투여후 동물의 폐사여부, 임상증상, 체중변화를 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액생화학적검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 복강장기와 흉강장기의 이상여부를 관찰하였다.
시험결과, 시험물질을 투여한 모든 동물에서 특기할 만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사, 부검소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다. 이상의 결과 조각인 추출물은 모두 랫트에서 5 g/㎏까지 독성변화를 나타내지 않으며 경구 투여 최소치사량 (LD50)은 5 g/㎏이상인 안전한 물질로 판단되었다.
<제조예 1> 조각인 추출물을 유효성분으로 함유하는 폐암 치료제의 제조
본 발명자들은 상기 실시예를 통해 조각인 추출물의 폐암 치료 효능이 뛰어남을 확인하여 조각인 추출물을 유효성분으로 함유하는 폐암 치료제를 하기와 같이 제조하였다. 또한, 하기 치료제의 제조예는 치료제 뿐만 아니라 건강식품의 제조에도 응용하여 사용될 수 있다.
<1-1> 조각인 추출물을 함유하는 연질캅셀(soft gelatin capsules)
조각인 추출물 20%, 비타민 C 4.5%, 비타민 D3 0.001%, 황산망간0.1%, 밀납10%, 팜유25%, 홍화씨유30.399%
<1-2> 조각인 추출물을 함유하는 정맥주사용 제제의 제조
조각인 추출물0.2%, 만니톨0.3%, 생리식염수9.5%
<1-3> 조각인 추출물을 함유하는 정제(tablet)
조각인 추출물 35%, 비타민 C 10%, 비타민 D3 0.001%, 황산망간 0.1%, 결정셀룰로오즈 25.0%, 유당 17.999%, 스테아린산마그네슘 2%
<제조예 2> 조각인 추출물을 유효성분으로 함유하는 기능성 식품의 제조
본 발명자들은 상기 실시예를 통해 조각인 추출물이 폐암 치료 활성이 뛰어남을 확인하여 이를 유효성분으로 함유하는 기능성 식품을 하기와 같이 제조하였다.
<2-1> 음료의 제조
꿀 522 ㎎, 치옥토산아미드 5 ㎎, 니코틴산아미드 10 ㎎, 염산리보플라빈나트륨 3 ㎎, 염산피리독신 2 ㎎, 이노시톨 30 ㎎, 오르트산 50 ㎎, 조각인 추출물 0.48 ~ 1.28 ㎎, 물 200 ㎖의 상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 음료를 제조하였다.
<2-2> 츄잉껌의 제조
껌베이스 20 %, 설탕 76.36 ~ 76.76 %, 조각인 추출물 0.24 ~ 0.64 %, 후르츠향 1 %, 물 2 %의 상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 츄잉껌을 제조하였다.
<2-3> 캔디의 제조
설탕 50 ~ 60 %, 물엿 39.26 ~ 49.66 %, 조각인 추출물 0.24 ~ 0.64 %, 오렌지향 0.1 %의 상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 캔디를 제조하였다.
<2-4> 비스켓의 제조
박력1급 88 ㎏, 중력1급 76.4 ㎏, 정백당 16.5 ㎏, 식염 2.5 ㎏, 포도당 2.7 ㎏, 팜쇼트닝 40.5 ㎏, 암모 5.3 ㎏, 중조 0.6 ㎏, 중아황산나트륨 0.55 ㎏, 쌀가루 5.0 ㎏, 비타민 B1 0.003 ㎏, 비타민 B2 0.003 ㎏, 밀크향 0.16 ㎏, 물 71.1 ㎏, 전지분유 4 ㎏, 대용분유 1 ㎏, 제일인산칼슘 0.1 ㎏, 살포염 1 ㎏, 분무유 25 ㎏, 조각인 추출물 0.2 ~ 0.5 ㎏의 상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 비스켓을 제조하였다.
<2-5> 아이스크림의 제조
유지방 10.0 %, 무지유고형분 10.8 %, 설탕 12.0 %, 물엿 3.0 %, 유화안정제(스팬, span) 0.5 %, 향료(스트로베리) 0.15 %, 물 63.31 ~ 62.91 %, 조각인 추출물 0.24 ~ 0.64 %의 상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 아이스크림을 제조하였다.
<2-6> 쵸코렛의 제조
설탕 34.36 ~ 34.76 %, 코코아 버터 34 %, 코코아 매스 15 %, 코코아 파우다 15 %, 레시틴 0.5 %, 바닐라향 0.5 %, 조각인 추출물 0.24 ~ 0.64 %의 상기 조성 및 함량으로 하여 통상적인 방법을 사용하여 초코렛을 제조하였다.
한편, 본 발명의 구체적 범위는 상기 기술한 실시예 보다는 특허청구범위에 의하여 한정지어지며, 특허청구 범위의 의미와 범위 및 그 등가적 개념으로 도출되는 모든 변경 및 변형된 형태를 본 발명의 범위로 포함하여 해석하여야 한다.

Claims (8)

  1. 조각인을 유기 용매로 추출한 유효성분을 포함하는 폐암 예방 및 치료용 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 유기 용매는 에탄올인 것을 특징으로하는 폐암 예방 및 치료용 조성물.
  3. 제 2항에 있어서, 상기 에탄올로 추출한 유효성분은 50℃에서 24시간 동안 추출되는 것을 특징으로 하는 폐암 예방 및 치료용 조성물.
  4. 제 3항에 있어서, 상기 에탄올 추출물은 45℃ 감압 조건에서 건조 및 농축되는 것을 특징으로 하는 폐암 예방 및 치료용 조성물.
  5. 제 1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하는 것을 특징으로 하는 폐암 예방 및 치료용 조성물.
  6. 제 1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폐암은 비소세포 폐암인 것을 특징으로 하는 폐암 예방 및 치료용 조성물.
  7. 제 6항에 있어서, 상기 비소세포 폐암은 선암(adenocarcinoma), 편평상피세포암(squamous cell carcinoma) 및 대세포암(large cell carcinoma)으로 이루어진 군중에서 선택된 암종에 의하여 유발되는 것을 특징으로 하는 폐암 예방 및 치료용 조성물.
  8. 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 조각인 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 폐암 예방용 기능성 식품.
PCT/KR2012/002278 2011-03-28 2012-03-28 조각인 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품 WO2012134169A2 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020110027367A KR20120109141A (ko) 2011-03-28 2011-03-28 조각인 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
KR10-2011-0027367 2011-03-28

Publications (2)

Publication Number Publication Date
WO2012134169A2 true WO2012134169A2 (ko) 2012-10-04
WO2012134169A3 WO2012134169A3 (ko) 2013-03-07

Family

ID=46932121

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2012/002278 WO2012134169A2 (ko) 2011-03-28 2012-03-28 조각인 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품

Country Status (2)

Country Link
KR (1) KR20120109141A (ko)
WO (1) WO2012134169A2 (ko)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103202376A (zh) * 2013-03-22 2013-07-17 安徽华佗国药股份有限公司 一种润肤养颜茶及其制备方法
CN103202373A (zh) * 2013-03-22 2013-07-17 安徽华佗国药股份有限公司 一种润肠通便茶及其制备方法
CN104352984A (zh) * 2014-11-20 2015-02-18 郑心 一种适用于热毒炽盛型的肺抑瘤膏及其制备方法
CN111632149A (zh) * 2020-05-14 2020-09-08 青岛市肿瘤医院 一种治疗肺癌的药物组合物及其制剂
CN111808835A (zh) * 2019-04-10 2020-10-23 四川竹芊芊生物科技有限公司 一种竹原纤维复合素酶制备及贮藏方法

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014077434A1 (ko) * 2012-11-16 2014-05-22 주식회사 한국전통의학연구소 조각인 추출물을 포함하는 췌장암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
WO2014077433A1 (ko) * 2012-11-16 2014-05-22 주식회사 한국전통의학연구소 조각인 추출물을 포함하는 신장암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR970000235A (ko) * 1995-06-14 1997-01-21 최영태 조각자나무로부터 추출한 생약 성분으로 된 항균 항암제
KR20060125078A (ko) * 2005-06-01 2006-12-06 비엘시바이오테크(주) 모자반과 주엽나무 추출액을 이용한 항암특성을 갖는기능성 쌀 제조방법과 제조된 쌀
KR20090106264A (ko) * 2008-04-04 2009-10-08 충주대학교 산학협력단 조각자 가시 추출물을 포함하는 대장암 예방 또는 치료용조성물

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR970000235A (ko) * 1995-06-14 1997-01-21 최영태 조각자나무로부터 추출한 생약 성분으로 된 항균 항암제
KR20060125078A (ko) * 2005-06-01 2006-12-06 비엘시바이오테크(주) 모자반과 주엽나무 추출액을 이용한 항암특성을 갖는기능성 쌀 제조방법과 제조된 쌀
KR20090106264A (ko) * 2008-04-04 2009-10-08 충주대학교 산학협력단 조각자 가시 추출물을 포함하는 대장암 예방 또는 치료용조성물

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
J. KOREAN SOC. APPL. BIOL. CHEM. vol. 49, no. 3, 2006, pages 248 - 253 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103202376A (zh) * 2013-03-22 2013-07-17 安徽华佗国药股份有限公司 一种润肤养颜茶及其制备方法
CN103202373A (zh) * 2013-03-22 2013-07-17 安徽华佗国药股份有限公司 一种润肠通便茶及其制备方法
CN103202376B (zh) * 2013-03-22 2015-04-29 安徽华佗国药股份有限公司 一种润肤养颜茶及其制备方法
CN104352984A (zh) * 2014-11-20 2015-02-18 郑心 一种适用于热毒炽盛型的肺抑瘤膏及其制备方法
CN111808835A (zh) * 2019-04-10 2020-10-23 四川竹芊芊生物科技有限公司 一种竹原纤维复合素酶制备及贮藏方法
CN111632149A (zh) * 2020-05-14 2020-09-08 青岛市肿瘤医院 一种治疗肺癌的药物组合物及其制剂
CN111632149B (zh) * 2020-05-14 2022-09-30 青岛市肿瘤医院 一种治疗肺癌的药物组合物及其制剂

Also Published As

Publication number Publication date
KR20120109141A (ko) 2012-10-08
WO2012134169A3 (ko) 2013-03-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2012134169A2 (ko) 조각인 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
WO2012134252A2 (ko) 마자인 추출물을 포함하는 신장암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
KR20120109785A (ko) 선복화 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
WO2013147340A1 (ko) 유향 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
WO2012134250A2 (ko) 감송향 추출물을 포함하는 신장암 치료용 조성물 및 화장료 조성물
WO2012134167A2 (ko) 비파엽 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
KR20120109139A (ko) 왕불유행 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
KR20120109790A (ko) 유향 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
KR102054437B1 (ko) 조각인 추출물을 포함하는 신장암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
KR20180043763A (ko) 관중 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물
WO2014069692A1 (ko) 선복화 추출물을 포함하는 신장암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
KR20120111765A (ko) 백두구 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 화장료 조성물
KR20120122410A (ko) 목향 추출물을 포함하는 신장암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
WO2012134168A2 (ko) 영릉향 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 화장료 조성물
WO2014069695A1 (ko) 유향 추출물을 포함하는 췌장암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
WO2012134164A2 (ko) 관동화 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
WO2014077433A1 (ko) 조각인 추출물을 포함하는 신장암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
WO2012134251A2 (ko) 감송향 추출물을 포함하는 췌장암 치료용 조성물 및 화장료 조성물
WO2014069686A1 (ko) 괄루근 추출물을 포함하는 신장암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
WO2014069691A1 (ko) 사상자 추출물을 포함하는 신장암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
WO2014069689A1 (ko) 목향 추출물을 포함하는 신장암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
KR20120109140A (ko) 익지인 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
WO2014069690A1 (ko) 백화사설초 추출물을 포함하는 신장암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
KR20120111122A (ko) 대계근 추출물을 포함하는 신장암 치료용 조성물 및 건강 기능성 식품
WO2012134163A2 (ko) 감송향 추출물을 포함하는 폐암 치료용 조성물 및 화장료 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 12765831

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 12765831

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2