CN110981635A - 一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于微生物菌剂领域，涉及一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂，包括按质量百分含量计的如下组分：黑曲霉发酵物20‑30%，固氮菌菌粉10‑20%，里氏木霉发酵物15‑25%，哈茨木霉发酵物10‑20%，碳水化合物1‑5%，白炭黑1‑5%，以及氨基酸、多肽中的至少一种1‑5%；其制备方法为：先将固体原料和含蔗糖的无机盐溶液混合后灭菌，制成无菌培养基；再将黑曲霉孢子粉、哈茨木霉孢子粉、里氏木霉孢子粉接种于无菌培养基中发酵；最后将氨基酸或多肽与黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物、里氏木霉发酵物、固氮菌菌粉、碳水化合物、白炭黑混合均匀。本发明的菌剂能够使土壤中的秸秆快速分解的同时活化土壤的磷钙等有益元素，固定空气中的氮，达到促进作物生长的目的。

Description

一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂及其 制备方法

技术领域

本发明属于微生物菌剂技术领域，具体涉及一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂及其制备方法。

背景技术

秸秆及植物残体是农作物生产过程中的副产物，其中含有有机质，氮，磷，钾和中微量元素，其中以有机质含量居多，但秸秆中的有机质主要以纤维素，半纤维素和木质素居多，其中纤维素含量最多。纤维素主要有葡萄糖通过β-1，4糖苷键相连，需要通过纤维素酶水解为葡萄糖才能直接被细胞利用，自然界中被人类有效利用的纤维素只占纤维素总量的小部分，绝大多数纤维素没有被人类利用。

有效磷是指土壤中可被植物吸收利用的磷的总称。它包括全部水溶性磷、部分吸附态磷、一部分微溶性的无机磷和易矿化的有机磷等，只是后二者需要经过一定的转化过程后方能被植物直接吸收，有效磷仅占土壤全磷的一小部分，绝大部分磷以无机磷和有机磷存在。真菌可以通过产生相应的有机酸和酶，活化土壤的有机磷，无机磷和中微量元素，对作物的生长产生促进作用。

氮元素在地球非常丰富，绝大多数氮元素以氮气的形式存在。生物固氮是指固氮微生物将大气中的氮气还原成氨的过程。地球上绝大部分氮是由固氮菌固定下来的，同时很多固氮菌还会分泌植物激素和有机酸等活性物质，促进植物生长。

秸秆还田是当今世界上普遍重视的一项培肥地力的增产措施，在杜绝了秸秆焚烧所造成的大气污染的同时还有增肥增产作用。秸秆还田能增加土壤有机质，改良土壤结构，使土壤疏松，孔隙度增加，容量减轻，促进微生物活力和作物根系的发育。但秸秆在自然界难以分解，并且秸秆作为植物残体，容易成为链格孢，镰刀菌等有害微生物的繁殖场所，导致土壤病害增加。现有技术中通过农用微生物菌剂来加速分解纤维素。但是，目前国内的农用微生物菌剂所选用的菌种单一，功能缺乏多样性，分解效率低，且大多采用的是菌原粉，需要萌发后长成菌丝，再表达各种酶，才能分解大分子有机物，这一过程可能需要好几天的时间。因此有必要设计一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂及其制备方法，以克服上述问题。

发明内容

为了克服上述现有技术存在的不足，本发明的目的是提供一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂及其制备方法，能够使土壤中的秸秆快速分解的同时活化土壤的磷钙等有益元素，固定空气中的氮，达到促进作物生长的目的。

为实现上述目的，本发明的技术方案为一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂，包括按质量百分含量计的如下组分：黑曲霉发酵物20-30%，固氮菌菌粉10-20%，里氏木霉发酵物15-25%，哈茨木霉发酵物10-20%，碳水化合物1-5%，白炭黑1-5%，以及氨基酸、多肽中的至少一种 1-5%。

进一步地，所述黑曲霉发酵物、所述里氏木霉发酵物和所述哈茨木霉发酵物是以秸秆、豆粕为主要原料，分别采用黑曲霉孢子粉、里氏木霉孢子粉和哈茨木霉孢子粉经发酵、干燥、粉碎而成的；所述黑曲霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所述里氏木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所述哈茨木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g。

进一步地，所述固氮菌菌粉为圆褐固氮菌菌粉、固氮芽孢杆菌菌粉、硅酸盐细菌菌粉中的至少一种，所述固氮菌菌粉的菌含量≥50亿/g。

进一步地，所述氨基酸为天门冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸中的至少一种；所述多肽为聚天门冬氨酸、聚半胱氨酸、聚谷氨酸中的至少一种。

进一步地，所述白炭黑的pH为6-7，细度为80-300目。

进一步地，所述碳水化合物为葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖中的至少一种。

本发明还提供上述的具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：

1）粉碎：将秸秆、豆粕和稻壳分别进行初步粉碎，过40目筛后按比例混合，得到固体原料；

2）溶解：将蔗糖和无机盐溶解在水中，配成含蔗糖的无机盐溶液；

3）灭菌：将固体原料和含蔗糖的无机盐溶液按比例混合后高压蒸汽灭菌，制成无菌培养基；

4）发酵：将黑曲霉孢子粉、哈茨木霉孢子粉、里氏木霉孢子粉分别接种于无菌培养基，在25-35℃下培养3-5天，分别得到黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物；

5）干燥：将黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物铺开风干或低温干燥；

6）混合：按比例将氨基酸、多肽中的至少一种与黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物、里氏木霉发酵物、固氮菌菌粉、碳水化合物、白炭黑混合均匀。

进一步地，步骤3）中，固体原料和含蔗糖的无机盐溶液按照质量比1：1-2混合，且固体原料中秸秆、豆粕、稻壳的质量比为12-16：4-6：2-5。秸秆和稻壳本身是农业生产的废弃物，含有丰富的纤维素，半纤维素等碳水化合物，原料容易获得且价格低廉，豆粕是油类加工的副产品，可以为微生物提供蛋白质和中微量元素。

进一步地，所述无机盐包括硫酸铵、氯化钠和磷酸二氢钾；所述含蔗糖的无机盐溶液中，蔗糖的浓度为2g/L，硫酸铵的浓度为8g/L，氯化钠的浓度为6g/L，磷酸二氢钾的浓度为2g/L。

进一步地，步骤2）中将蔗糖和无机盐加入到水中在20-30℃下溶解30min配成含蔗糖的无机盐溶液；步骤3）中灭菌过程的温度为121℃，时间为30-60min；步骤5）中铺开风干或低温干燥至发酵物的含水量低于25%，低温干燥的温度不超过35℃。

进一步地，步骤4）的发酵过程中，菌原粉接种量为1kg无菌培养基加入100亿个真菌孢子。

本发明的原理如下：

在原材料选用方面：秸秆是成熟农作物茎叶（穗）部分的总称，通常指小麦、水稻、玉米、薯类、油菜、棉花、甘蔗和其它农作物（通常为粗粮）在收获籽实后的剩余部分，农作物光合作用的产物有一半以上存在于秸秆中，秸秆富含氮、磷、钾、钙、镁和有机质等，是一种来源广泛的可再生的生物资源；黑曲霉是曲霉属真菌中的一个常见种，广泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和土壤中，是重要的发酵工业菌种，可生产淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、柠檬酸、葡糖酸和没食子酸等；里氏木霉和哈茨木霉属于木霉属是农业生产中的常用菌种，在生产过程中产酶的同时不产毒素，可以产生多种代谢产物，加速秸秆腐熟，活化土壤，促进作物生产；固氮菌是土壤中的自生固氮菌，对植物没有特异性，能在土壤中独立的固定空气中的氮元素，并能够产生植物活性物质，促进作物生长；

在菌种搭配方面：由于土壤里的微生物相对复杂，使用单一菌容易被土壤某些微生物拮抗，导致菌剂效果不理想，因此本发明根据不同微生物的生长特性和功能特性，将黑曲霉，里氏木霉和哈茨木霉和固氮微生物进行合理搭配，菌种之间无任何拮抗，黑曲霉、里氏木霉和哈茨木霉同属于真菌，都可以产生纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶及小分子有机酸等，降低被抑制的概率；且黑曲霉产酸能力较强，具有溶磷，溶钙的作用，可以更好的溶解土壤里的矿物养分，供作物和其它微生物使用；里氏木霉产纤维素酶能力明显优于其它真菌，可以为别的微生物提供好的碳源；哈茨木霉具有较强的占位能力，可以保护植物根系，防止病原菌定植；固氮菌可以利用纤维素酶分解纤维素后产生的葡萄糖固定空气中的氮，同时产生植物活性物质促进植物生长；每种菌都有各自的侧重点，可以作到优势互补。此外，本发明的农用微生物菌剂采用的是黑曲霉发酵物、里氏木霉发酵物和哈茨木霉发酵物，既包含菌也包含该菌产生的各种酶和其它代谢物，酶等代谢物可以进入土壤后可立即发挥作用，将土壤的有机大分子如纤维素等分解为小分子，促进菌体生长。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

（1）本发明提供的农用微生物菌剂，含有多种微生物及其代谢产物和酶，具有所需营养条件低，功能及代谢产物多样，不拮抗，不容易被抑制等优点；且能够使田间秸秆快速腐熟，同时活化土壤中的难溶磷和钙使之变为有效态以及固氮，促进作物的生长以及对营养物质的吸收，

（2）本发明可以促进肥料的腐熟，真菌在发酵过程中产生的纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶等可以促进肥料的腐熟和营养元素的活化；

（3）本发明能有效提高土壤微生物群落的数量和种类，能在植物的根际周围形成保护膜，防止病原微生物对植物的伤害；

（4）本发明提供的农用微生物菌剂中的固氮菌能够固化氮气，使之能被植物利用，生长过程的产生的活性物质能够促进植物生长，达到增产提质的作用；

（5）本发明的农用微生物菌剂中通过加入白炭黑增加固体粉末的流动性，帮助混匀，同时可以吸收水分，保持固体样品的干燥；

（6）本发明的农用微生物菌剂用于秸秆还田，活化土壤大中微量元素，促进作物生长，其施用方式为冲施。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

本实施例提供一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂，包括按质量百分含量计的如下组分：黑曲霉发酵物30%，圆褐固氮菌菌粉20%，里氏木霉发酵物25%，哈茨木霉发酵物20%，蔗糖2%，谷氨酸 1%，白炭黑2%。

上述的农用微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：

1）粉碎：将秸秆、豆粕和稻壳分别进行初步粉碎，过40目筛后，将秸秆粉、豆粕粉和稻壳粉按质量比为14：5：3混合，得到固体原料；

2）溶解：将蔗糖、硫酸铵、氯化钠和磷酸二氢钾加入到水中在25℃下溶解30min配成含蔗糖的无机盐溶液；所述含蔗糖的无机盐溶液中，蔗糖的浓度为2g/L，硫酸铵的浓度为8g/L，氯化钠的浓度为6g/L，磷酸二氢钾的浓度为2g/L；

3）灭菌：将固体原料和含蔗糖的无机盐溶液按照质量比1：1混合后，置于大型灭菌锅中，于121℃高压蒸汽灭菌30min，制成无菌培养基；

4）发酵：将黑曲霉孢子粉、哈茨木霉孢子粉、里氏木霉孢子粉分别接种于无菌培养基，在28℃下培养4天，发酵结束后，分别得到黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物；

5）干燥：将黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物铺开风干或低温干燥发酵物的含水量低于25%，低温干燥的温度不超过35℃；

6）混合：按比例将黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物、里氏木霉发酵物、圆褐固氮菌菌粉、蔗糖、谷氨酸、白炭黑混合均匀，即得农用微生物菌剂。

进一步地，所采用的黑曲霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的里氏木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的哈茨木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的圆褐固氮菌菌粉的菌含量≥50亿/g。

实施例2

本实施例提供一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂，包括按质量百分含量计的如下组分：黑曲霉发酵物20%，硅酸盐细菌菌粉20%，里氏木霉发酵物25%，哈茨木霉发酵物20%，麦芽糖5%，聚天门冬氨酸 5%，白炭黑5%。

上述的农用微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：

1）粉碎：将秸秆、豆粕和稻壳分别进行初步粉碎，过40目筛后，将秸秆粉、豆粕粉和稻壳粉按质量比为12：6：5混合，得到固体原料；

2）溶解：将蔗糖、硫酸铵、氯化钠和磷酸二氢钾加入到水中在20℃下溶解30min配成含蔗糖的无机盐溶液；所述含蔗糖的无机盐溶液中，蔗糖的浓度为2g/L，硫酸铵的浓度为8g/L，氯化钠的浓度为6g/L，磷酸二氢钾的浓度为2g/L；

3）灭菌：将固体原料和含蔗糖的无机盐溶液按照质量比1：2混合后，置于大型灭菌锅中，于121℃高压蒸汽灭菌40min，制成无菌培养基；

4）发酵：将黑曲霉孢子粉、哈茨木霉孢子粉、里氏木霉孢子粉分别接种于无菌培养基，在25℃下培养5天，发酵结束后，分别得到黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物；

5）干燥：将黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物铺开风干或低温干燥发酵物的含水量低于25%，低温干燥的温度不超过35℃；

6）混合：按比例将黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物、里氏木霉发酵物、硅酸盐细菌菌粉、麦芽糖、聚天门冬氨酸、白炭黑混合均匀，即得农用微生物菌剂。

进一步地，所采用的黑曲霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的里氏木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的哈茨木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的硅酸盐细菌菌粉的菌含量≥50亿/g。

实施例3

本实施例提供一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂，包括按质量百分含量计的如下组分：黑曲霉发酵物25%，硅酸盐细菌菌粉20%，里氏木霉发酵物25%，哈茨木霉发酵物15%，麦芽糖2，葡萄糖3%，聚谷氨酸 5%，白炭黑5%。

上述的农用微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：

1）粉碎：将秸秆、豆粕和稻壳分别进行初步粉碎，过40目筛后，将秸秆粉、豆粕粉和稻壳粉按质量比为16：4：2混合，得到固体原料；

2）溶解：将蔗糖、硫酸铵、氯化钠和磷酸二氢钾加入到水中在30℃下溶解30min配成含蔗糖的无机盐溶液；所述含蔗糖的无机盐溶液中，蔗糖的浓度为2g/L，硫酸铵的浓度为8g/L，氯化钠的浓度为6g/L，磷酸二氢钾的浓度为2g/L；

3）灭菌：将固体原料和含蔗糖的无机盐溶液按照质量比1：1.5混合后，置于大型灭菌锅中，于121℃高压蒸汽灭菌60min，制成无菌培养基；

4）发酵：将黑曲霉孢子粉、哈茨木霉孢子粉、里氏木霉孢子粉分别接种于无菌培养基，在35℃下培养3天，发酵结束后，分别得到黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物；

5）干燥：将黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物铺开风干或低温干燥发酵物的含水量低于25%，低温干燥的温度不超过35℃；

6）混合：按比例将黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物、里氏木霉发酵物、硅酸盐细菌菌粉、麦芽糖、葡萄糖、聚谷氨酸、白炭黑混合均匀，即得农用微生物菌剂。

进一步地，所采用的黑曲霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的里氏木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的哈茨木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的硅酸盐细菌菌粉的菌含量≥50亿/g。

实施例4

本实施例提供一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂，包括按质量百分含量计的如下组分：黑曲霉发酵物30%，圆褐固氮菌菌粉15%，里氏木霉发酵物20%，哈茨木霉发酵物20%，麦芽糖5%，聚谷氨酸 1%，谷氨酸4%，白炭黑5%。

上述的农用微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：

1）粉碎：将秸秆、豆粕和稻壳分别进行初步粉碎，过40目筛后，将秸秆粉、豆粕粉和稻壳粉按质量比为14：5：4混合，得到固体原料；

2）溶解：将蔗糖、硫酸铵、氯化钠和磷酸二氢钾加入到水中在30℃下溶解30min配成含蔗糖的无机盐溶液；所述含蔗糖的无机盐溶液中，蔗糖的浓度为2g/L，硫酸铵的浓度为8g/L，氯化钠的浓度为6g/L，磷酸二氢钾的浓度为2g/L；

3）灭菌：将固体原料和含蔗糖的无机盐溶液按照质量比1：1.5混合后，置于大型灭菌锅中，于121℃高压蒸汽灭菌30min，制成无菌培养基；

4）发酵：将黑曲霉孢子粉、哈茨木霉孢子粉、里氏木霉孢子粉分别接种于无菌培养基，在28℃下培养4天，发酵结束后，分别得到黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物；

5）干燥：将黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物铺开风干或低温干燥发酵物的含水量低于25%，低温干燥的温度不超过35℃；

6）混合：按比例将黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物、里氏木霉发酵物、圆褐固氮菌菌粉、麦芽糖、葡萄糖、聚谷氨酸、白炭黑混合均匀，即得农用微生物菌剂。

进一步地，所采用的黑曲霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的里氏木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的哈茨木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的圆褐固氮菌菌粉的菌含量≥50亿/g。

实施例5

本实施例提供一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂，包括按质量百分含量计的如下组分：黑曲霉发酵物30%，圆褐固氮菌菌粉10%，硅酸盐细菌菌粉10%，里氏木霉发酵物25%，哈茨木霉发酵物15%，蔗糖3%，聚天门冬氨酸 4%，白炭黑3%。

上述的农用微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：

1）粉碎：将秸秆、豆粕和稻壳分别进行初步粉碎，过40目筛后，将秸秆粉、豆粕粉和稻壳粉按质量比为14：5：4混合，得到固体原料；

2）溶解：将蔗糖、硫酸铵、氯化钠和磷酸二氢钾加入到水中在25℃下溶解30min配成含蔗糖的无机盐溶液；所述含蔗糖的无机盐溶液中，蔗糖的浓度为2g/L，硫酸铵的浓度为8g/L，氯化钠的浓度为6g/L，磷酸二氢钾的浓度为2g/L；

3）灭菌：将固体原料和含蔗糖的无机盐溶液按照质量比1：2混合后，置于大型灭菌锅中，于121℃高压蒸汽灭菌30min，制成无菌培养基；

4）发酵：将黑曲霉孢子粉、哈茨木霉孢子粉、里氏木霉孢子粉分别接种于无菌培养基，在28℃下培养4天，发酵结束后，分别得到黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物；

5）干燥：将黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物铺开风干或低温干燥发酵物的含水量低于25%，低温干燥的温度不超过35℃；

6）混合：按比例将黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物、里氏木霉发酵物、圆褐固氮菌菌粉、硅酸盐细菌菌粉、蔗糖、聚天门冬氨酸、白炭黑混合均匀，即得农用微生物菌剂。

进一步地，所采用的黑曲霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的里氏木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的哈茨木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所采用的圆褐固氮菌菌粉的菌含量≥50亿/g，所采用的硅酸盐细菌菌粉的菌含量≥50亿/g。

下面通过以下对本发明进一步说明。

1、对磷钙的活化实验

配置培养基，所用培养基配方为葡萄糖10g/L，硫酸铵0.5g/L，酵母粉0.5g/L，氯化钠0.3g/L，氯化钾0.3g/L，硫酸镁7水0.3g/L，硫酸亚铁7水0.03g/L，硫酸锰1水0.02g/L，磷酸钙5.0g/L，混合好后，分装至锥形瓶中，每瓶50ml，121℃，20min灭菌后，冷却后，实验组为将本发明实施例1的农用微生物菌剂混和无菌水后，稀释至10-4接种该培养基上，同时对照组为本发明实施例1的农用微生物菌剂灭活后，稀释至相同梯度，接种至液体培养基，28℃培养5天，之后10000r/min，离心10min，用钼锑抗比色法测定上清液磷含量，用原子吸收测定钙含量，实验组相对对照组，磷含量增加125mg/L，钙含量增加200mg/L。

2、盆栽效果实验

将本发明实施例3制备的农用微生物菌剂在盆栽快菜上进行，实验于2019年8月25日在湖北省武汉市蔡甸区武汉楚强生物科技有限公司实验室进行，利用实施例3制备的农用微生物菌剂与适量有机肥和秸秆混匀后随底肥施入，盆栽基质为菜园壤土，每盆定植4株，每7天进行一次用化肥追肥，共追肥2次，40天后进行采收，测定供试作物可食用部分鲜重、根长，可溶性糖含量，并用SPSS软件对结果进行差异显著性分析，分析结果见表1；

由表1可知，与未施用菌剂相比，施用本发明的农用微生物菌剂，可食用部分干重和地下根长都有明显的增加，说明施用菌剂后，可显著提高快菜的产量；与未施用菌剂，施用本发明的农用微生物菌剂后，可溶性糖含量有显著的增加，说明施用菌剂后，可显著提高快菜的可溶性糖含量，提高作物品质。

3、秸秆腐熟实验

将水稻秸秆剪成5cm左右与豆饼、禽畜粪便以适宜比例混合，加入适量尿素或硫酸铵，同时加入适量水使秸秆充分吸水，按待发酵物料总质量的0.2%施入本发明实施例6提供的农用微生物菌剂，空白组为自然发酵（未加菌剂处理），对照组为采用等量的市售秸秆腐熟剂发酵或哈茨木霉发酵物，15天测定失重和纤维素酶活，结果如表2所示。

由表2可以看出，与未施用菌剂相比，施用本发明的农用微生物菌剂，失重增加，纤维素酶活增加，说明本发明的农用微生物菌剂可以促进秸秆腐熟，且与市售秸秆腐熟剂和单一哈茨木霉发酵物相比，本发明的农用微生物菌剂的腐熟效果更佳。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂，其特征在于，包括按质量百分含量计的如下组分：黑曲霉发酵物20-30%，固氮菌菌粉10-20%，里氏木霉发酵物15-25%，哈茨木霉发酵物10-20%，碳水化合物1-5%，白炭黑1-5%，以及氨基酸、多肽中的至少一种 1-5%。

2.如权利要求1所述的一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂，其特征在于：所述黑曲霉发酵物、所述里氏木霉发酵物和所述哈茨木霉发酵物是以秸秆、豆粕为主要原料，分别采用黑曲霉孢子粉、里氏木霉孢子粉和哈茨木霉孢子粉经发酵、干燥、粉碎而成的；所述黑曲霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所述里氏木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g，所述哈茨木霉孢子粉的孢子含量≥50亿/g。

3.如权利要求1所述的一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂，其特征在于：所述固氮菌菌粉为圆褐固氮菌菌粉、固氮芽孢杆菌菌粉、硅酸盐细菌菌粉中的至少一种，所述固氮菌菌粉的菌含量≥50亿/g。

4.如权利要求1所述的一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂，其特征在于：所述氨基酸为天门冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸中的至少一种；所述多肽为聚天门冬氨酸、聚半胱氨酸、聚谷氨酸中的至少一种。

5.如权利要求1所述的一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂，其特征在于：所述白炭黑的pH为6-7，细度为80-300目。

6.如权利要求1所述的一种具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂，其特征在于：所述碳水化合物为葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖中的至少一种。

7.一种如权利要求1-6任一项所述的具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1）粉碎：将秸秆、豆粕和稻壳分别进行初步粉碎，过40目筛后按比例混合，得到固体原料；

2）溶解：将蔗糖和无机盐溶解在水中，配成含蔗糖的无机盐溶液；

3）灭菌：将固体原料和含蔗糖的无机盐溶液按比例混合后高压蒸汽灭菌，制成无菌培养基；

4）发酵：将黑曲霉孢子粉、哈茨木霉孢子粉、里氏木霉孢子粉分别接种于无菌培养基，在25-35℃下培养3-5天，分别得到黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物；

5）干燥：将黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物和里氏木霉发酵物铺开风干或低温干燥；

6）混合：按比例将氨基酸、多肽中的至少一种与黑曲霉发酵物、哈茨木霉发酵物、里氏木霉发酵物、固氮菌菌粉、碳水化合物、白炭黑混合均匀。

8.如权利要求7所述的具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂的制备方法，其特征在于：步骤3）中，固体原料和含蔗糖的无机盐溶液按照质量比1：1-2混合，且固体原料中秸秆、豆粕、稻壳的质量比为12-16：4-6：2-5。

9.如权利要求8所述的具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述无机盐包括硫酸铵、氯化钠和磷酸二氢钾；所述含蔗糖的无机盐溶液中，蔗糖的浓度为2g/L，硫酸铵的浓度为8g/L，氯化钠的浓度为6g/L，磷酸二氢钾的浓度为2g/L。

10.如权利要求7所述的具有固氮解磷解钾解纤维素功能的农用微生物菌剂的制备方法，其特征在于：步骤2）中将蔗糖和无机盐加入到水中在20-30℃下溶解30min配成含蔗糖的无机盐溶液；步骤3）中灭菌过程的温度为121℃，时间为30-60min；步骤5）中铺开风干或低温干燥至发酵物的含水量低于25%，低温干燥的温度不超过35℃。