CN111803608A - 一种具有抗病毒作用的中药组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种具有抗病毒作用的中药组合物，原料包括：作为君药的广藿香、香薷、黄精；作为臣药的紫苏叶、草果、茯苓、陈皮、五指毛桃；作为佐使药的桔梗、生姜、大枣、金银花、枇杷叶、桑叶、莱菔子、甘草。本发明还公开了上述中药组合物的制备方法，以及上述中药组合物作为抗新型冠状病毒或抗流感病毒的应用。本发明所述中药组合物所选用的原料均为常用中药，安全性高，适用于有接触风险、流行风险的、或者有潜在新型冠状病毒(COVID‑19)及流感病毒感染的人群以及健康人群预防服用。本发明所述制备工艺采用挥发油包合技术，充分保留芳香成分，方法简单高效，适合工业化生产。

Description

一种具有抗病毒作用的中药组合物
技术领域
本发明涉及中医药技术领域，更具体地说，本发明涉及一种具有抗病毒作用的中药 组合物及其制备方法及应用。
背景技术
目前国家疾控中心已宣布将新冠肺炎纳入国家“乙类”传染病，采取“甲类”传染病预防和控制措施，该病毒的传播途径主要为直接接触、气溶胶传播和接触传播，基于目前的流行病学调查显示，该病毒的潜伏期一般为1-14天，最长可达24天以上，大多患者在 感染3-7天后出现相应症状，应注意的是患者在潜伏期也有可能传播病毒，且人群普遍易 感。
新型冠状病毒感和流感病毒都属于中医的疫气，所引起的疾病属于疫病的范畴，其特 点是具有传染性，目前现代医学尚未找到针对此病毒的特效药。中医药在中国经历了几千 年的发展，在我国重大疫病防治中积累了丰富经验，形成了独特的理论和有效方法，中医 理论认为“正气存内，邪不可干”，强调了人体正气的抗病防病能力的重要性，中药并非 针对某一病毒，它主要是提高人体的综合免疫力，协调各脏腑组织器官的功能，调和气血 阴阳，使正气易复，调动机体内源性保护物质与病毒做斗争，并根据正邪相争所表现症候 辨证论治，因人、因时、因地予以攻补兼施，同时减轻缓解某些西药的毒副作用，在疾病防治中上体现出独特优势，如在2003年的SARS的预防、治疗和康复中优势明显，效果 显著，发挥了不可替代的作用。
中医药在我国新冠病毒肺炎的防治中发挥重大作用，在我国新冠肺炎确诊病例中中医 药总体使用率为91.5％，总有效率达到了90％以上，做到“轻症完美拿下，重症力挽狂澜”， 中医队伍进行了新冠肺炎临床疗效的同步观察，已筛选出金花清感颗粒、莲花清瘟胶囊、 血必净注射液和清肺排毒汤、化湿败毒方、宣肺败毒方等有明显疗效的“三药三方”，应用于新冠肺炎不同的阶段，中医药是多靶点治疗，追求机体内部的阴阳平衡，通过调整整体的免疫力来对抗外来的感染，对新冠病毒导致的炎症、免疫失调及器官功能的损害均有治疗作用，可降低轻症和普通型病人向重型、重型向危重型的转化、提高对重型和危重型病人的治疗效果，促进重型和危重型病人的康复。
但是目前仍缺乏一种抗病毒作用针对性强、适用范围广、安全性高、作用全面和工艺 先进的中药组合物。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述缺陷，并提供至少后面将说明的优点。
本发明的另一个目的是提供一种具有抗新型冠状病毒及流感病毒作用的中药组合 物，确切的讲是提高机体对新型冠状病毒及常见流感病毒抵抗力的中药组合物。
本发明的另一个目的是提供一种中药组合物作为抗新型冠状病毒及流感病毒的应 用。
本发明的另一个目的是保留中药组合物中挥发性成分的中药组合物的制备方法。
为了实现本发明的这些目的和其它优点，本发明的方案如下：
新型冠状病毒感染的肺炎及流感病毒引起的疾病均属于中医疫病的范畴，具有传染 性，其核心病机为湿浊阻滞，病变主要在肺。以发热、乏力、干咳为主要表现，少数患者伴有鼻塞、流涕、咽痛和腹泻等症状。轻型患者仅表现为低热、轻微乏力等，无肺炎表现。 重症患者多在发病一周后出现呼吸困难和/或低氧血症，严重者快速进展为急性呼吸窘迫 综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍等，目前现代医学尚未 找到针对此病毒的特效药。根据目前对新型冠状病毒感染的肺炎的认识及轻型的特点为 “疫毒时邪犯表、卫表失和”，当治以“解表发散，扶正散邪”的论述；以及中医药辨证 论治新型冠状病毒感染的肺炎的仝小林院士及中医大夫的临床分析，针对当下气候湿冷、 寒湿时邪偏盛，早期证型多为“寒湿郁肺”等“寒湿疫”的特点，筛选出一种具有抗新冠 病毒及流感病毒的中药组合物。
一种具有抗病毒作用的中药组合物，其原料包括：
作为君药的广藿香、香薷、黄精；
作为臣药的紫苏叶、草果、茯苓、陈皮、五指毛桃；
作为佐使药的桔梗、生姜、大枣、金银花、枇杷叶、桑叶、莱菔子、甘草。
本发明提供的中药组合物由茯苓、黄精、五指毛桃、广藿香、紫苏叶、陈皮、生姜、大枣、香薷、草果、桔梗、枇杷叶、桑叶、金银花、莱菔子和甘草组成，在多年临床实践 基础上，根据临床反馈，以传统中医理论为指导，结合新冠病毒及流感病毒的致病特点， 辨证分析，精心选药组方而成。
因新型冠状病毒及流感病毒多由口鼻而入，属于温病学的范畴，温病四大家叶天士 指出“温邪上受，首先犯肺”又云：“肺主气属卫”，故在防护中应首重顾护正气，尤其 是脾肺之气，使卫气能更好的预防外邪侵袭人体。配方以广藿香、香薷、黄精为君药，
广藿香芳香化浊，和中止呕，发表解暑，《本草正义》云：“藿香芳香而不嫌其猛 烈，温煦而不偏于燥烈，能祛除阴霾湿邪，而助脾胃正气，为湿困脾阳，倦怠无力，饮食 不甘，舌苔浊垢者最捷之药。”功能芳香辟秽，化湿和中，并能发表宣肺。香薷发汗解表， 化湿和中；《本草纲目》记载：“然暑有乘凉饮冷，致阳气为阴邪所遏，遂病头痛，发热 恶寒，烦躁口渴，或吐或泻、或霍乱者，宜用此药，以发越阳气，散水和脾。”有“夏月 麻黄”之称，黄精平补三阴，《日华子本草》：言其“补五劳七伤……益脾胃，润心肺”。 既能补气养阴，又能健脾补肺，三者同用，补肺益气，化湿辟秽，以“正气存内，邪不可 干”，有助于机体抵御外侵时邪。
臣药为紫苏叶、草果、茯苓、陈皮、五指毛桃，紫苏叶辛温质轻，《滇南本草》谓 其“发汗，解伤风头痛，消痰，定吼喘。”既能发散风寒，又能祛痰止咳，并能理气和中， 可协助君药增强宣肺散邪之功。草果芳香温燥，《本草纲目》引李杲云其：“温脾胃，止 呕吐，治脾寒湿、寒痰；益真气，消一切冷气臌胀……兼辟瘴解瘟。”功能燥湿散寒，运 脾辟秽。茯苓利水渗湿，健运脾胃；陈皮燥湿健脾，化痰止咳；既能协助君药增强温化寒 湿之功；又能与苏叶理气和中，健运脾胃，固护中州。五指毛桃补气扶正。臣药相伍，可 协助君药和胃运脾除湿、益肺通畅气机，以提高调理体质、健脾除湿、扶正固本之效。
佐使药为桔梗、生姜、大枣、金银花、枇杷叶、桑叶、莱菔子、甘草，桔梗开宣肺 气，化痰止咳，能增强君药、臣药的宣肺散邪止咳之功，并为肺经引经药，与降气止咳的 苦杏仁相配，宣降肺气；生姜、大枣相配，既能运脾和胃，又能调和营卫；金银花为清热 解毒的要药，并芳和香质轻，发表散邪；现代研究，具有广谱的抑制病毒作用，现代研究， 有抑制病毒的功能；枇杷叶清肺降气止咳；桑叶散热润燥止咳；莱菔子降气化痰除胀。以 上七味同用，既能开宣肺气、化痰止咳，又能调和营卫、补中益气，有助于清解热毒、驱 邪防疫；甘草调和诸药，内含甘草酸等成分具有明确的抑制病毒作用。
优选的是，所述的具有抗病毒作用的中药组合物中，所述原料按重量份计包括：茯苓4～12份、黄精4～12份、五指毛桃4～12份、广藿香3～9份、紫苏叶3～9份、陈皮3～9 份、生姜3～9份、大枣3～9份、香薷2～6份、草果2～6份、桔梗2～6份、枇杷叶2～6份、 桑叶2～6份、金银花1～4份、莱菔子1～4份、甘草1～4份。
优选的是，所述的具有抗病毒作用的中药组合物中，所述原料按重量份计包括：茯苓8～30份、黄精8～30份、五指毛桃8～30份、广藿香6～20份、紫苏叶6～20份、陈皮6～20份、生姜6～20份、大枣6～20份、香薷4～15份、草果4～15份、桔梗4～15份、枇杷叶4～15份、桑叶4～15份、金银花2～10份、莱菔子2～10份、甘草2～10份。
优选的是，所述的具有抗病毒作用的中药组合物中，所述原料按重量份计包括：茯苓20份、黄精20份、五指毛桃20份、广藿香15份、紫苏叶15份、陈皮15份、生姜 15份、大枣15份、香薷10份、草果10份、桔梗10份、枇杷叶10份、桑叶5份、金银 花6份、莱菔子5份、甘草4份。
优选的是，所述的具有抗病毒作用的中药组合物中，所述原料按重量份计包括：茯苓30份、黄精25份、五指毛桃20份、广藿香20份、紫苏叶16份、陈皮15份、生姜 12份、大枣12份、香薷12份、草果12份、桔梗10份、枇杷叶10份、桑叶8份、金银 花5份、莱菔子4份、甘草4份。
优选的是，所述的具有抗病毒作用的中药组合物中，所述中药组合物为粉剂、颗粒剂、茶剂、口服液、喷剂、片剂、胶囊剂、丸剂或散剂。
一种中药组合物的制备方法，包括如下步骤：
S1、取所述中药组合物的原料，加10倍水浸泡1小时，然后使用密闭的罐体进行提取，收集得到挥发油和2倍药材量的冷凝芳香水，对提取液过滤后得到第一滤液，将药渣 加8倍量水煎煮提取1小时，过滤得到第二滤液；
S2、将第一滤液和第二滤液合并，减压浓缩(温度70℃，真空度-0.06～-0.08Mpa)至相对密度1.05-1.07(50℃)的清膏，加入麦芽糊精，混合均匀，喷雾干燥(入口温度 160℃，出口温度70～80℃)得到干膏；
S3、将所得的干膏过60目筛，得干膏粉，备用；
S4、取0.2～2份β-环糊精，加入所述冷凝芳香水搅拌均匀，加入挥发油，采用高速乳化均质机研磨使其均匀，研磨30分钟，冷藏静置12h，倾出上清液，收集沉淀，置真 空干燥箱40℃进行真空干燥，粉碎过60目筛，得到包合物；
S5、将0.4～15份麦芽糊精和0.06～0.24份甜菊糖苷分别过60目筛后，与所述干膏粉、 包合物混合30分钟直到混合均匀，得到混合粉，将所述混合粉制成粉剂、颗粒剂、茶剂、片剂、胶囊剂、丸剂或散剂。
一种中药组合物的制备方法，包括如下步骤：
步骤一、取所述中药组合物的原料，加10倍量水浸泡，使用密闭的罐体进行水煎煮提取，第一次提取时收集2倍药材量的冷凝芳香水和第一滤液，将药渣加8倍量水再煎煮 提取1小时，过滤，得到第二滤液；
步骤二、将冷凝芳香水、第一滤液和第二滤液合并得到提取液，冷却至室温，离心，取上清液；
步骤三、将甜菊糖苷与上清液混合，并用纯化水定容至规定体积，搅拌溶解并混合均匀，配制成灌装液；
步骤四、将灌装液灌装，灭菌(116℃，40min)，制成口服液或喷剂。
所述的中药组合物，或所述的方法制得的中药组合物作为抗病毒的应用。
所述的中药组合物，或所述的方法制得的中药组合物作为抗新型冠状病毒或抗流感 病毒的应用。
本发明至少包括以下有益效果：
第一、本发明根据目前对新型冠状病毒感染的肺炎的认识及轻型的特点为“疫毒时邪 犯表、卫表失和”，当治以“解表发散，扶正散邪”的论述，以及中医药辨证论治新型冠状病毒感染的肺炎的中医专家的临床分析，针对当下气候湿冷、寒湿时邪偏盛，早期证型多为“寒湿郁肺”等“寒湿疫”的特点，制定出具有抗新冠病毒及流感病毒的中药组合物， 具有以下特点：①针对性强，适用范围广：从扶正固本、未病先防的理论出发，用以增强 机体的抵抗新冠肺炎病毒的能力为目的，主要用于新冠肺炎的日常预防，适用于新冠肺炎 患者密切接触者、疫情高发区人群、医务人员、外勤人员、免疫力低下者、慢性基础病患 者、普通人群等，②安全性高：产品原料均为安全性好、作用平和、针对性强的药食同源 中药材，各原料用量均为预防给药剂量，无毒副作用，可长期和连续服用，产品无香精， 无色素，无防腐剂，安全性有保证；③作用全面：以扶正固本、未病先防的中医理论为指 导，配伍得当，通过振奋肺脾功能，协调各脏腑组织器官的功能，从不同角度阻击外邪病 毒侵袭，防止病情发生。以扶正固本、未病先防的中医理论为指导，配伍得当，通过振奋 肺脾功能，协调各脏腑组织器官的功能，从不同角度阻击外邪病毒侵袭，防止病情发生。 ④工艺先进：采用环糊精包合技术充分保留芳香物质成分不损失，口感适宜，适宜服用。
第二、本发明的中药组合物选择传统的水煎煮提取，符合传统汤剂的用法，即可保证 效果又可保证其使用的安全性。
第三、本发明的制备方法中使用密闭的罐体提取，收集冷凝芳香水以保证挥发油不损 失，有效的保留了广藿香、紫苏叶等药材中富含的挥发油，现代众多科学研究文献表现挥 发油也具有显著机制病毒活性，是药效物质基础之一。优于传统煎煮用法中为了保证疗效 而将药材后下。
第四、本发明的中药组合物原料为多种药食同源中药材，价廉质优，制备简单，使用 方便，经实验及人群观察发现，对新型冠状病毒及流感病毒具有抑制作用，无其他不良反 应，适于当下健康及亚健康人群饮用，具有良好的应用前景。
第五、本发明的中药组合物具有芳香化湿、益肺健脾，扶正固本、抵御外邪、解毒防疫的功效，经现代药理学研究证实具有抗病毒能力，用于包括新冠肺炎和常见流感预防和治疗，具有疗效确切，无毒副作用，成本低廉，便于应用的优势，适于当下有接触风险、 流行风险的、或者有潜在新型冠状病毒及流感病毒感染的人群以及健康人群预防服用。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发 明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字 能够据以实施。
需要说明的是，下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试 剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例1
具有抗病毒作用的中药组合物的原料组成：
以克为单位：茯苓400、黄精400、五指毛桃400、广藿香300、紫苏叶300、陈皮300、生姜300、大枣300、香薷200、草果200、桔梗200、枇杷叶200、桑叶200、金银花120、 莱菔子100、甘草100。
制备方法：
S1、取上述原料，加10倍水浸泡1小时，使用密闭的罐体水煎煮提取收集挥发油和2倍量冷凝芳香水，提取液过滤，得第一滤液，药渣加水8倍量煎煮提取1小时，滤过， 得第二滤液；
S2、将第一滤液和第二滤液合并，减压浓缩(温度65～70℃，真空度-0.06～-0.08Mpa) 至相对密度1.05-1.07(50℃)的清膏，加入750克麦芽糊精，混合均匀，喷雾干燥(入口 温度160℃，出口温度70～80℃)，得干膏；
S3、干膏过60目筛，得干膏粉，备用；
S4、取50克β-环糊精，加入到芳香水中搅拌均匀，加入挥发油，采用高速乳化均质机研磨使其均匀，研磨30分钟，冷藏静置12h，倾出上清液，收集沉淀，置真空干燥箱 40℃干燥，粉碎过60目，得包合物；
S5、将3000克麦芽糊精和6克甜菊糖苷分别过60目筛后，与干膏粉、包合物混合30min，混合均匀，得混合粉，可制备粉剂。
实施例2
具有抗病毒作用的中药组合物的原料组成：
以克为单位计算：茯苓400、黄精400、五指毛桃400、广藿香300、紫苏叶300、陈 皮300、生姜300、大枣300、香薷200、草果200、桔梗200、枇杷叶200、桑叶200、金 银花120、莱菔子100、甘草100。
制备方法：
S1、取上述原料，加10倍水浸泡1小时，使用密闭的罐体水煎煮提取，第一次提取时收集2倍药材量的冷凝芳香水和第一滤液，将药渣加水8倍量煎煮提取1小时，滤过， 得第二滤液；
S2、将冷凝芳香水、第一滤液和第二滤液合并得提取液，并放冷至20～25℃室温，离 心，取上清液；
S3、将12克甜菊糖苷加入上清液，并用纯化水定容至规定体积，搅拌30分钟使溶解并混合均匀，配制成灌装液；
S4、灌装，灭菌(116℃，40min)，制成口服液。
实施例3
具有抗病毒作用的中药组合物的原料组成：
以克为单位计算：茯苓400、黄精400、五指毛桃400、广藿香300、紫苏叶300、陈 皮300、生姜300、大枣300、香薷200、草果200、桔梗200、枇杷叶200、桑叶200、金 银花120、莱菔子100、甘草100。
制备方法：
取上述原料，加10倍水浸泡1小时，使用密闭的罐体水煎煮提取，第一次提取时收集2倍药材量的冷凝芳香水和第一滤液，将药渣加水8倍量煎煮提取1小时，滤过，得第 二滤液，将第一滤液和第二滤液合并，浓缩，干燥，得干膏；干膏加入糊精制粒得到颗粒； 冷凝芳香水采用环糊精包合得包合物；颗粒外加包合物制得颗粒剂。
实施例4
具有抗病毒作用的中药组合物的原料组成：
以克为单位计算：茯苓400、黄精400、五指毛桃400、广藿香300、紫苏叶300、陈 皮300、生姜300、大枣300、香薷200、草果200、桔梗200、枇杷叶200、桑叶200、金 银花120、莱菔子100、甘草100。
制备方法：取上述原料，加14倍水浸泡1小时，使用密闭的罐体水煎煮提取4小时，提取时收集挥发油，药液滤过，得滤液；将滤液放冷至室温，离心，取上清液，加入挥发 油、吐温80、甜菊糖苷、苯甲酸钠，并用纯化水定容至规定体积制成喷剂。
实施例5
抗新型冠状病毒细胞实验
本实验委托中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所进行，所有实验操作 均在BSL-3实验室内完成。
材料：受试物(实施例2制备的中药组合物)，Vero细胞，由微生物流行病研究所细胞库保存，新型冠状病毒(COVID-19)，滴度为107CCID50/ml，由微生物流行病研究所 病毒库及P3毒种冰箱-80℃保存。使用病毒滴度为100CCID50/孔。
方法：
a、无菌96孔培养板，每孔加入100μl浓度为1×105cell/ml Vero细胞，37℃ 5％CO2培养24小时；
b、受试药物浓度设置7个(如表1)，每个浓度4～12个复孔，每孔100μl作用1h， 然后每孔再加入等体积100CCID50病毒，作用1h；
c、1h后，弃去96孔培养板中所有液体，加入稀释的药液；
d、同时设立细胞对照组(空白对照)和病毒对照(阴性对照)；
e、细胞在37℃，5％CO2孵箱中孵育5天；
f、光学显微镜下观察细胞病变效应(Cytopathic effect，CPE)，细胞完全病变记录为 “++++”，75％病变记录为“+++”，50％病变记录为“++”，25％病变记录为“+”，未 病变记录为“－”；
g、结果判断：细胞不出现CPE为有效抑制病毒的浓度，出现CPE则为无效。
结果：
a、抗新冠病毒作用结果见表1。
表1抗新型冠状病毒的作用
Figure BDA0002518237570000091
由表1可知，从细胞上观察，与对照组相比，各剂量组的细胞COVID-19复制效率降低，细胞病变率从75％降低至25％，说明受试物(中药组合物)在1:8～100稀释条件下， 能有效抑制新冠肺炎病毒导致的CPE，有体外抗COVID-19活性的作用。
实施例6
抗流感病毒作用细胞实验
本实验委托中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所进行，所有实验操作 均在BSL-3实验室内完成。
材料：受试物(实施例2制备的中药组合物)，阳性对照药：连花清瘟胶囊(石家庄以岭药业股份有限公司)，A549细胞株，由微生物流行病研究所细胞库保存，甲型流感 病毒H1N1亚型(FM1株、PR8株、B10株、B59株)、副流感病毒(仙台株)、柯萨奇 病毒亚型(COX-B4型、COX-B5型)购于中国疾病预防控制中心，呼吸道合胞病毒(RSV) 购于首都儿科研究所，上述病毒由微生物流行病研究所实验室(ABSL-2)传代，-80℃保存。
方法：
(1)对A549细胞的TC50、TC0测定受试物(中药组合物)用完全培养基(DMEM 高糖+10％FBS)配制成浓度为50g/L的母液，受试物母液按1:8、1:16、1:9、1:27、1:81、 1:10、1:100梯度稀释7个浓度，连花清瘟胶囊母液按1:4、1:8、1:16、1:32梯度稀释4个 浓度。完全培养基培养的A549细胞接种于96孔板，置于37℃，5％CO2孵箱培养24h 后贴壁细胞密度达到80％，丢弃原培养基，换成含药培养基，继续培养48h用CPE抑制 法评价细胞病变，采用Reed-Muench法计算50％细胞毒性浓度(TC50)、最大无毒浓度 (TC0)；实验设正常组和阳性对照组。
(2)对多种病毒的IC50、治疗指数(TI)测定
参照最大无毒浓度(TC0)稀释疏受试物，最大浓度梯度不超过TC0。完全培养基培养的A549细胞接种于96孔板，24h后贴壁细胞密度达到80％丢弃原培养基，分别加入100TCID50病毒液、甲型流感病毒H1N1型(FM1株、PR8株、B10株、B59株)、副 流感病毒(仙台株)、COX-B4型、COX-B5型、RSV，吸附1h后弃掉病毒液，换成含 药培养基，继续培养48h，用CPE抑制法评价细胞病变，采用Reed-Muench法计算IC50、 TI，TI值越大，表明药物对病毒的抑制作用越强，并设正常组和阳性对照组。
结果：
a、对细胞的毒性作用按Reed-Muench法计算得受试物(中药组合物)TC50＝2.246g/L、 TC0＝1.582g/L，连花清瘟胶囊TC50＝3.531g/L、TC0＝1.712g/L；可见受试物(中药组合物) TC50和TC0均低于连花清瘟胶囊，安全性高。
b、受试物(中药组合物)对多种病毒的体外抗病毒作用结果见表2。受试物(中药组合物)对柯萨奇病毒B4型、B5型的抑制作用优于连花清瘟胶囊，对甲型流感病毒H1N1 型(FM1株、PR8株、B10株、B59株)、副流感病毒(仙台株)的抑制作用与连花清瘟 胶囊相当，对呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用弱于连花清瘟胶囊，从实验结果可以看 出，受试物(中药组合物)体外具有广谱抗病毒作用，并且对副流感病毒(仙台株)的抑 制效果最好，TI＝13.65。
表2体外抗病毒作用
Figure BDA0002518237570000111
实施例7
2020年2月，在北京、河北等地对115例(年龄在12～78周岁)服用本实施例2中 药组合物的非隔离人员进行观察，以7～15天为服用周期，共收集有效调查问卷94份(部 分是以家庭为单位的调查问卷)。观察服药人群的体温、精神状态，食欲、睡眠、二便等 一般状况，通过调查问卷回访数据分析，以验证本配方的安全性及预防感冒的效果。调查 结果表明，在服用本中药组合物期间均未有体温异常、感冒、出现感染等事件发生。同时 均未产生任何不适，体感愉悦，精神状态良好，食欲和二便等一切正常，表明本发明的中 药组合物服用安全性高，为大样本人群观察提供参考依据。
实施例8
动物安全性实验
材料：
实验动物：SPF级昆明种鼠、SD大鼠；受试物(本发明中药组合物)
a、小鼠经口急性毒性试验(MTD)：选用18～22克SPF级昆明种小鼠20只，雌雄 各半，适应性喂养5天后以22.4g/kg·BW的剂量(浓缩液)经口一次灌胃，灌胃量为 0.2ml/10kg·BW，给药后连续观察14天。记录中毒表现及死亡情况。
b、大鼠经口急性毒性试验(MTD)：选用180～220克SPF级昆明种大鼠20只，雌 雄各半，适应性喂养5天后以22.4g/kg·BW的剂量(浓缩液)经口一次灌胃，灌胃量为 2ml/10kg·BW，给药后连续观察14天。记录中毒表现及死亡情况。
c、污染物致突变性检测试验(Ames试验)：采用鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97a、 TA98、TA100、TA102四株试验菌株进行试验。用多氯联苯(PCB)诱导大鼠后制备的肝匀浆作为体外代谢活化系统。试验设0.2、0.5、1.0、2.5、5.0mg/皿5个剂量，以蒸馏水为 空白对照，同时设阳性对照。称取样品(浓缩液)0.3g加蒸馏水至6mL，再以蒸馏水稀释， 配置试验样品浓度分别为2、5、10、25、50mg/mL。在顶层琼脂中加入0.1mL试验菌株 增菌液、0.1mL受试物溶液和0.5mLS-9混合液(当需要代谢活化时)，混匀后倒入底层 培养基平板上，每个剂量及对照均做3个平行样。在37℃培养48h，计数每皿回变菌落数。 若受试物的回变菌落数是空白对照菌落数2倍以上，并具有剂量和反应关系对应者则定位 阳性。
d、小鼠睾丸染色体畸变试验：用体重25～30g的性成熟雄性小鼠25只，随机分为5组，每组5只。以2.0mg/kg·BW剂量(ipQd×2)的丝裂霉素为阳性对照(称取丝裂霉 素4.0mg，加生理盐水至20mL，经腹腔注射给药，给药量为0.1mL/10g·BW)。阴性对 照组给等量蒸馏水。样品剂量分别为5.60、11.2、22.4g/kg·BW，高剂量组用浓缩液原液 进行试验，低、中剂量组分别称取浓缩液5.60g、11.20g，加蒸馏水至20mL，灌胃量为 0.2mL/10g·BW，每日灌胃一次，连续5天，于首次给予受试物后的第十三天，5组同时 腹腔注射秋水仙素一次(4mg/kg·BW)，6h后处死动物，取双侧睾丸制片，Giemsa染色， 每组分析5只动物的染色体，每只动物分析100个中期相细胞，计算睾丸染色体畸变发生 率(％)，用SPSS10.0 forWindows中X2检验进行统计处理。
结果：
a、大、小鼠经口急性毒性试验(MTD)结果见表3，以22.4g/kg·BW的剂量(浓 缩液)灌胃两种性别的大小鼠，观察14天，期间未见明显的中毒表现和死亡情况，根据 急性毒性分析，受试物(本发明中药组合物，实施例2)属于无毒。
表3对大、小鼠的急性毒性实验
Figure BDA0002518237570000131
b、污染物致突变性检测试验(Ames试验)结果见表4，受试物(中药组合物)各剂 量组回变菌落数均未超过空白对照组菌落数2倍，亦无剂量和反应关系对应者，对鼠伤寒 沙门氏菌TA97a、TA98、TA100、TA102四株试验菌株，在加与不加S-9时，均无致突变 作用。
表4 Ames试验
Figure BDA0002518237570000132
注：以上结果为三个平皿回变菌落数的平均数±标准差
c、小鼠睾丸染色体畸变试验结果见表5，受试物(中药组合物，实施例2)各剂量组小鼠睾丸染色体畸变发生率与阴性对照组比较差异均无显著性(P＞0.05)，而丝裂霉素 阳性对照组与阴性对照组比较差异有显著性(P＜0.05)。因此，受试物(中药组合物) 对小鼠睾丸染色体畸变发生率无影响。
表5对小鼠睾丸染色体畸变发生率的影响
Figure BDA0002518237570000141
*与阴性对照组比较差异有显著性(P＜0.05)
由上述实验可知，抗病毒中药组合物对两种性别的大、小鼠经口急性毒性试验(MTD) 均大于22.4g/kg·BW，根据急性毒性分级，受试物(中药组合物)属于无毒物；Ames试验结果为阴性，说明受试物(中药组合物)无致突变的作用；小鼠睾丸染色体畸变试验结 果为阴性，说明受试物(中药组合物)对小鼠睾丸染色体畸变无影响。综上所述，受试物 (中药组合物)属于无毒物，人体可以安全服用。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运 用。它完全可以被适用于各种适合本发明的领域。对于熟悉本领域的人员而言，可容易地 实现另外的修改。

Claims (10)

1.一种具有抗病毒作用的中药组合物，其特征在于，原料包括：
作为君药的广藿香、香薷、黄精；
作为臣药的紫苏叶、草果、茯苓、陈皮、五指毛桃；
作为佐使药的桔梗、生姜、大枣、金银花、枇杷叶、桑叶、莱菔子、甘草。
2.如权利要求1所述的具有抗病毒作用的中药组合物，其特征在于，所述原料按重量份计包括：茯苓4～12份、黄精4～12份、五指毛桃4～12份、广藿香3～9份、紫苏叶3～9份、陈皮3～9份、生姜3～9份、大枣3～9份、香薷2～6份、草果2～6份、桔梗2～6份、枇杷叶2～6份、桑叶2～6份、金银花1～4份、莱菔子1～4份、甘草1～4份。
3.根据权利要求1所述的具有抗病毒作用的中药组合物，其特征在于，所述原料按重量份计包括：茯苓8～30份、黄精8～30份、五指毛桃8～30份、广藿香6～20份、紫苏叶6～20份、陈皮6～20份、生姜6～20份、大枣6～20份、香薷4～15份、草果4～15份、桔梗4～15份、枇杷叶4～15份、桑叶4～15份、金银花2～10份、莱菔子2～10份、甘草2～10份。
4.根据权利要求3所述的具有抗病毒作用的中药组合物，其特征在于，所述原料按重量份计包括：茯苓20份、黄精20份、五指毛桃20份、广藿香15份、紫苏叶15份、陈皮15份、生姜15份、大枣15份、香薷10份、草果10份、桔梗10份、枇杷叶10份、桑叶5份、金银花6份、莱菔子5份、甘草4份。
5.根据权利要求3所述的具有抗病毒作用的中药组合物，其特征在于，所述原料按重量份计包括：茯苓30份、黄精25份、五指毛桃20份、广藿香20份、紫苏叶16份、陈皮15份、生姜12份、大枣12份、香薷12份、草果12份、桔梗10份、枇杷叶10份、桑叶8份、金银花5份、莱菔子4份、甘草4份。
6.如权利要求1至5中任一所述的具有抗病毒作用的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物为粉剂、颗粒剂、茶剂、口服液、喷剂、片剂、胶囊剂、丸剂或散剂。
7.一种中药组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、取权利要求1～5任一所述中药组合物的原料，加水浸泡，然后进行提取，收集得到挥发油和冷凝芳香水，对提取液过滤后得到第一滤液，将药渣加水煎煮提取，过滤得到第二滤液；
S2、将第一滤液和第二滤液合并，减压浓缩得到相对密度1.05～1.07的清膏，加入麦芽糊精，混合均匀，喷雾干燥得到干膏；
S3、将所得的干膏过筛，得干膏粉，备用；
S4、取β-环糊精，加入所述冷凝芳香水搅拌均匀，加入挥发油，研磨均匀，冷藏静置，倾出上清液，收集沉淀进行真空干燥，粉碎，得到包合物；
S5、将麦芽糊精和甜菊糖苷分别过筛后，与所述干膏粉、包合物混合均匀，得到混合粉，将所述混合粉制成粉剂、颗粒剂、茶剂、片剂、胶囊剂、丸剂或散剂。
8.一种中药组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一、取权利要求1～5任一所述中药组合物的原料，加水浸泡，水煎煮提取，第一次提取时收集冷凝芳香水和第一滤液，将药渣加水再煎煮提取，过滤，得到第二滤液；
步骤二、将冷凝芳香水、第一滤液和第二滤液合并得到提取液，冷却至室温，离心，取上清液；
步骤三、将甜菊糖苷与上清液混合，并用纯化水定容至规定体积，搅拌溶解并混合均匀，配制成灌装液；
步骤四、将灌装液灌装，灭菌，制成口服液或喷剂。
9.一种如权利要求1至6中任一所述的中药组合物，或权利要求7或8所述的方法制得的中药组合物作为抗病毒的应用。
10.一种权利要求1至6中任一所述的中药组合物，或权利要求7或8所述的方法制得的中药组合物作为抗新型冠状病毒或抗流感病毒的应用。
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