CN111643581B - 一种具有减肥功效的中药组合物、包含其的香囊及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种具有减肥功效的中药组合物、包含其的香囊及其制备方法，属于中药领域。所述中药组合物主要由人参、大黄、当归、藤茶、枳实、迷迭香、肉桂、苍术、红花、山楂、黄芪、罗布麻和冰片组成，对3T3‑L1细胞分化、脂肪细胞内甘油三酯累积及脂肪水解均具有明显抑制作用，进而具有较好的体外脂代谢调节功能。所述中药香囊的治疗方法天然无副作用、方便简洁、效果持久，可以有效提升用者的依从性，且可通过抑制脂肪合成、促进脂肪分解等途径达到减轻体重的效果，有效降低血清瘦素水平，改善瘦素抵抗，恢复瘦素调节糖脂代谢的生理效应，并通过降低血清瘦素水平，改善外周瘦素抵抗状态，从而达到干预肥胖大鼠瘦素抵抗的目的。

Description

一种具有减肥功效的中药组合物、包含其的香囊及其制备 方法
技术领域
本发明属于中药领域，具体涉及一种具有减肥功效的中药组合物、包含其的香囊及其制备方法。
背景技术
肥胖是一种慢性代谢性疾病，是指因机体热量的摄入大于消耗，造成脂肪在体内积聚过多，导致体重超常的病症。肥胖已成为全世界面临的重大健康问题，是导致糖尿病、高血压、血脂异常及代谢综合征(MS)以及心血管疾病的高危因素。我国的肥胖病发生率呈年轻化、逐年增高的趋势，2017年中国疾病控制中心发布了《慢性病及其危害因素监测数据》报告，数据显示全国肥胖率为11.9％，超重率为30.1％，给个人、家庭和社会带来沉重负担。
传统的治疗方法为口服药物或外敷擦剂。但口服药物的长期服用会刺激胃肠道，外用擦剂也会造成局部皮肤不适，并且存在使用方式繁琐费时、使用者依从性差的问题。
因此，开发一种天然无副作用、方便简洁、效果持久的治疗方法就成为了本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
有鉴于此，本发明的第一个目的是针对现有技术中存在的问题，提供一种天然无副作用的具有减肥功效的中药组合物。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种具有减肥功效的中药组合物，主要由人参、大黄、当归、藤茶、枳实、迷迭香、肉桂、苍术、红花、山楂、黄芪、罗布麻和冰片组成。
值得说明的是，此中药组合以人参、大黄、当归为君药，以藤茶、枳实、迷迭香、黄芪为臣药，以肉桂、苍术、红花、山楂、罗布麻为佐药，以冰片为使药，通过补气健脾、活血行气、润肠通便达到调节机体功能、加速脂肪分解的目的，以实现减肥降脂之功效。
其中，人参味甘，气温、微寒、气味俱轻，可升可降，阳中有阴，无毒；如下食也，必加大黄、枳实；加以山楂，极会去滞消积。
大黄，味苦，气大寒，阴中之阴，降也，无毒。入胃与大肠。其性甚速，走而不守，善荡涤积滞，调中化食，通利水谷，推陈致新，导瘀血，滚痰涎，破症结，散坚聚，止疼痛，败痈疽热毒，消肿胀，俱各如神。然有佐使，各经皆达也；惟人参、大黄同用于一时，自然相制相宜，大黄无过攻之虞，而人参无过补之失也。
当归，味甘辛，气温，可升可降，阳中之阴，无毒。入心、脾、肝三脏。但其性甚动，入之补气药中则补气，入之补血药中则补血，入之升提药中则提气，入之降逐药中则逐血也。而且用之寒则寒，用之热则热，无定功也。
藤茶，味苦，微涩，性凉，清热利湿，平肝降压，活血通络。
枳实，味苦、酸，气寒，阴中微阳，无毒；无坚不破，佐之大黄，则祛除荡积之功更神；然而切不可单用，必附之补气、补血之药，则破气而气不耗，攻邪而正不伤，逐血而血不损，尤为万全耳。
迷迭香，味辛，性温，无毒，芳香健胃，亢进消化机能。
肉桂，味辛、甘、香、辣，气大热，沉也，阳中之阴也，有小毒。入肾、脾、膀胱、心胞、肝经。养精神，和颜色，兴阳耐老，坚骨节，通血脉，疗下焦虚寒，治秋冬腹痛、泄泻、奔豚，利水道，温筋暖脏，破血通经，调中益气，实卫护营，安吐逆疼痛，此肉桂之功用也。
苍术，气辛，味浓，性散能发汗。入足阳明、太阴经。亦能消湿，去胸中冷气，辟山岚瘴气，解瘟疫尸鬼之气，尤善止心疼。但散多于补，不可与白术并论。
红花，气温味辛，可升可降，阳也。多用破血，少用养血。大都辛温则能和血，故少用养血。若过于辛温，则血又走散，故多用破血。
山楂，气平，味酸涩，带甘辛，无毒。利痰消食，下积气，散滞血。疗疝，止腹疼。专治肉积，能开脾健胃。理脾用之，膨胀立消。行气化痰，起胀解毒。又能破人参之滞气，用参，多以此监之。
黄芪，味甘，气微温，气薄而味浓，可升可降，阳中之阳也，无毒。专补气。入手太阴、足太阴、手少阴之经。其功用甚多，而其独效者，尤在补血。人参得黄芪，兼能补营卫而固腠理，健脾胃而消痰食。
罗布麻，味淡涩，性凉，有小毒。清凉泻火，强心利尿，降血压。治心脏病，高血压，神经衰弱，肾炎浮肿。
冰片，味辛苦，性凉、无毒。有开窍醒神、清热止痛、散郁火、生肌之效。
进一步的，所述组合物的重量比为：人参2-8份、大黄7-13份、当归14-20份、藤茶10-16份、枳实9-15份、迷迭香8-15份、肉桂4-8份、苍术7-13份、红花2-6份、山楂2-8份、黄芪2-8份、罗布麻2-8份、冰片0.1-0.6份。
本发明的第二个目的在于提供一种可以方便简洁、效果持久，可以有效提高使用者依从性的具有减肥功效的中药香囊。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种中药香囊，包括所述具有减肥功效的中药组合物，且所述中药组合物主要由人参、大黄、当归、藤茶、枳实、迷迭香、肉桂、苍术、红花、山楂、黄芪、罗布麻和冰片组成。
值得说明的是，香囊属于中医佩香疗法的一种，是将芳香药末装入特制布袋中佩挂身上，借药味挥发以防治疾病的方法，在我国的运用源远流长。中药学理论认为，芳香味能散、能行、能开，具有化湿、辟秽、开窍、醒脾等效应。本发明采用迷迭香、肉桂、苍术等具有辛香走串之性的药物，配伍以具有益气活血、镇静安神等功效的药物，如黄芪等，以实现减肥降脂之功效。
本发明的第三个目的在于提供一种所述中药香囊的制备方法。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种中药香囊的制备方法，包括如下步骤：
I、按重量比称量人参2-8份、大黄7-13份、当归14-20份、藤茶10-16份、枳实9-15份、迷迭香8-15份、肉桂4-8份、苍术7-13份、红花2-6份、山楂2-8份、黄芪2-8份、罗布麻2-8份，分别粉碎至80-100目，混合均匀，得到混合中药粉，备用；
II、将冰片研细至80-100，得到冰片碎，备用；
III、按重量比称取步骤I的中药粉1000份，步骤II的冰片碎5份，混合均匀，得到具有减肥功效的中药组合物；
IV、将步骤III中得到的中药组合物作为内容物填充至香囊中，即得到所述中药香囊。
与现有技术相比，本发明优点在于：
1、本发明提供了一种主要由人参、大黄、当归、藤茶、枳实、迷迭香、肉桂、苍术、红花、山楂、黄芪、罗布麻和冰片组成的中药组合物及包含其的香囊，使用所述中药组合物配伍严谨，疗效显著，且佩戴香囊的治疗方法天然无副作用、方便简洁、效果持久，可以有效提升用者的依从性。
2、本发明提供的中药组合物对3T3-L1细胞分化、脂肪细胞内甘油三酯累积及脂肪水解均具有明显抑制作用，具有较好的体外脂代谢调节功能。
3、本发明的中药香囊通过抑制脂肪合成、促进脂肪分解等途径达到减轻体重的效果，可有效降低血清瘦素水平，改善瘦素抵抗，恢复瘦素调节糖脂代谢的生理效应，并通过降低血清瘦素水平，改善外周瘦素抵抗状态，从而达到干预肥胖大鼠瘦素抵抗的目的。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1为本发明实验1大鼠造模期间进食量。
图2为本发明实验1造模期间大鼠体重变化。
图3为本发明实验1造模期间大鼠Lee’s指数变化。
图4为本发明实验1中药香囊对进食量的影响。
图5为本发明实验1中药香囊对体重的影响。
图6为本发明实验1中药香囊对Lee’s指数的影响。
图7为本发明实验1中药香囊对甘油三酯的影响。
图8为本发明实验1中药香囊对总胆固醇的影响。
图9为本发明实验1中药香囊对高密度脂蛋白的影响。
图10为本发明实验1中药香囊对低密度脂蛋白的影响。
图11为本发明实验1中药香囊对空腹血糖的影响。
图12为本发明实验1中药香囊对脂肪重量的影响。
图13为本发明实验1中药香囊对脂肪系数的影响。
图14为本发明实验1中药香囊对瘦素的影响。
图15为本发明实验1中药香囊对脂联素的影响。
图16为本发明实验1中药香囊对抵抗素的影响。
图17为本发明实验1中药香囊对激素敏感性脂肪酶的影响。
图18为本发明实验2香囊内容物水提干膏粉对3T3-L1脂肪细胞活度的影响。
图19为本发明实验2香囊内容物水提干膏粉对3T3-L1细胞分化的影响。
图20为本发明实验2香囊内容物水提干膏粉对3T3-L1脂肪细胞中甘油三酯累积的影响。
图21为本发明实验2香囊内容物水提干膏粉对3T3-L1脂肪细胞中脂肪水解的影响。
具体实施方式
下面将结合说明书附图对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明公开了一种天然无副作用的具有减肥功效的中药组合物，所述重要组合物主要由人参、大黄、当归、藤茶、枳实、迷迭香、肉桂、苍术、红花、山楂、黄芪、罗布麻和冰片组成。
进一步地，本发明还提供一种可以方便简洁、效果持久，可以有效提高使用者依从性的具有减肥功效的中药香囊及其制备方法。本发明采用迷迭香、肉桂、苍术等具有辛香走串之性的药物，配伍以具有益气活血、镇静安神等功效的药物，如黄芪等，以实现减肥降脂之功效。
为更好地理解本发明，下面通过以下实施例对本发明作进一步具体的阐述，但不可理解为对本发明的限定，对于本领域的技术人员根据上述发明内容所作的一些非本质的改进与调整，也视为落在本发明的保护范围内。
实施例1
一种具有减肥功效的中药组合物：
包括人参5份、大黄8份、当归15份、藤茶10份、枳实10份、迷迭香10份、肉桂6份、苍术8份、红花2份、山楂5份、黄芪5份、罗布麻2份、冰片0.5份。
实施例2
一种具有减肥功效的中药组合物：
包括人参3份、大黄10份、当归18份、藤茶12份、枳实12份、迷迭香8份、肉桂5份、苍术10份、红花3份、山楂3份、黄芪5份、罗布麻3份、冰片0.3份。
实施例3
一种中药香囊及其制备方法，包括如下步骤：
I、按重量比称量包括人参4份、大黄7份、当归18份、藤茶10份、枳实9份、迷迭香12份、肉桂6份、苍术12份、红花2份、山楂5份、黄芪8份、罗布麻4份，分别粉碎至80目，混合均匀，得到混合中药粉，备用；
II、将冰片研细至80目，得到冰片碎，备用；
III、按重量比称取步骤I的中药粉1000份，步骤II的冰片碎5份，混合均匀，得到具有减肥功效的中药组合物；
IV、将步骤III中得到的中药组合物作为内容物填充至香囊中，即得到所述中药香囊。
实施例4
一种中药香囊及其制备方法，包括如下步骤：
I、按重量比称量人参6份、大黄12份、当归16份、藤茶15份、枳实12份、迷迭香15份、肉桂8份、苍术8份、红花4份、山楂8份、黄芪5份、罗布麻5份，分别粉碎至100目，混合均匀，得到混合中药粉，备用；
II、将冰片研细至100目，得到冰片碎，备用；
III、按重量比称取步骤I的中药粉1000份，步骤II的冰片碎5份，混合均匀，得到具有减肥功效的中药组合物；
IV、将步骤III中得到的中药组合物作为内容物填充至香囊中，即得到所述中药香囊。
实施例5
一种中药香囊及其制备方法，包括如下步骤：
I、按重量比称量人参5份、大黄8份、当归15份、藤茶10份、枳实10份、迷迭香10份、肉桂6份、苍术8份、红花2份、山楂5份、黄芪5份、罗布麻2份，分别粉碎至90目，混合均匀，得到混合中药粉，备用；
II、将冰片研细至80目，得到冰片碎，备用；
III、按重量比称取步骤I的中药粉1000份，步骤II的冰片碎5份，混合均匀，得到具有减肥功效的中药组合物；
IV、将步骤III中得到的中药组合物作为内容物填充至香囊中，即得到所述中药香囊。
实施例6
一种中药香囊及其制备方法，包括如下步骤：
I、按重量比称量人参3份、大黄10份、当归18份、藤茶12份、枳实12份、迷迭香8份、肉桂5份、苍术10份、红花3份、山楂3份、黄芪5份、罗布麻3份，分别粉碎至100目，混合均匀，得到混合中药粉，备用；
II、将冰片研细至90目，得到冰片碎，备用；
III、按重量比称取步骤I的中药粉1000份，步骤II的冰片碎5份，混合均匀，得到具有减肥功效的中药组合物；
IV、将步骤III中得到的中药组合物作为内容物填充至香囊中，即得到所述中药香囊。
为了进一步验证本发明的优异效果，发明人还进行了如下验证实验：
实验1：中药香囊的功效学研究
1实验材料
1.1受试物
实施例3制备得到的中药香囊。
1.2仪器与试剂
AB204PB1502电子天平(MettlerToledo产品)；
303-0型台式培养箱恒温培养箱(北京市永光明医疗仪器邮箱公司)；
TrilogyII型生化分析仪(Trilogy公司)；
envision2105型酶标仪(PE公司)。
甘油三酯(TG)试剂盒，批号：20190325；总胆固醇(TC)试剂盒，批号：20190327；低密度脂蛋白(LDL-C)试剂盒，批号：20190326；高密度脂蛋白(HDL-C)试剂盒，批号：20190328；以上试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。葡萄糖(GLU)试剂盒，批号：20181209137，由上海荣盛生物药业有限公司提供；大鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒，批号：GR2019-03；大鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒，批号：GR2019-03、大鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒，批号：GR2019-03；大鼠激素敏感性脂肪酶(HSL)，批号：GR2019-03；均由武汉基因美生物科技有限公司提供。
1.3实验动物
SPF级SD大鼠70只，雄性，体重140-160g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，许可证号：SYXK(湘)2016-0002，合格证号：43004700055343。动物饲养在湖南省中医药研究院实验动物中心SPF级动物室，实验动物使用许可证号：SYXK(湘)2015-0008。伦理学审查编号：20180034。
2剂量设计
成人用量为200g/30天，6.67g/天。
本试验采用体表面积计算法来计算各受试物的动物用剂量。大鼠的等效剂量为6.67g×0.018/0.2(kg)＝0.60(g/kg)。大鼠高、中、低剂量分别为等效剂量的15、10、5倍，因此，大鼠外敷中药香囊剂量分别为9.00、6.00、3.00g/kg。
3试验方法
3.1肥胖大鼠造模
大鼠适应性喂养3天后，随机选取10只作为正常对照组，给予正常饲料，剩余动物作为模型组，给予高脂饲料(配方见表1)进行8周的肥胖大鼠造模，期间大鼠自由摄食饮水，每周计算进食量，称体重，量体长并计算Lee’s指数。
表1
Figure BDA0002569497500000091
3.2减肥降脂实验
从模型组大鼠中选取体重达标的40只，根据体重，随机分为模型对照组、中药香囊高、中、低剂量组。根据中药香囊的使用特点，成模后的大鼠给予正常饲料，自由摄食饮水，每周计算进食量；大鼠每周称重，测量体长，计算Lee’s指数。脱去所有大鼠腹部的毛，脱毛面积约为5×5cm2。每天上、下午各一次将纱布放入恒温培养箱中，60℃预热10min后裹住中药香囊敷在大鼠腹部15min；正常组和模型组敷预热纱布。连续敷4周。末次外敷中药香囊后，禁食不禁水12小时，称重，用10％水合氯醛麻醉动物，腹主动脉取血，离心，取血清，检测TG、TC、HDL-C、LDL-C、GLU及血清Lep、ADP、Resistin，HSL含量。打开腹腔，暴露肾脏和睾丸，完整剥离并剪取双侧肾周围脂肪、双侧睾丸周围脂肪，并称湿重，计算脂肪系数即脂/体比(脂/体比＝(双侧肾周围脂肪重量+双侧睾丸周围脂肪重量)÷体重×100％)。
3.3统计分析方法
采用SPSS20.0统计分析软件进行统计学分析。计量资料进行单因素方差分析，两两比较，方差齐，采用LSD(L)法进行分析，方差不齐的实验数据采用Dunnett’s法进行统计学处理。
4实验结果
4.1高脂饲料对肥胖大鼠成模的影响
造模大鼠通过饲养8周高脂饲料，与正常组比较，进食量没有显著差异(P>0.05)，大鼠的体重和Lee’s指数随着高脂饲料给予时间的增加而逐渐呈现出显著性差异(P＜0.01)。造模期间进食量见图1、造模期间大鼠体重变化见图2、造模期间大鼠Lee’s指数变化见图3，以及，造模期间大鼠体重(
Figure BDA0002569497500000101
g)变化见表2、大鼠造模期间Lee’s指数变化
Figure BDA0002569497500000102
见表3。
表2
Figure BDA0002569497500000103
注：与正常组比较：**P＜0.01。
表3
Figure BDA0002569497500000104
Figure BDA0002569497500000111
注：与正常组比较：**P＜0.01。
4.2中药香囊对肥胖大鼠的影响
4.2.1对肥胖大鼠一般情况的影响
如图4所示，外敷中药香囊期间，各组大鼠之间进食量没有显著性差异(P﹥0.05)，说明中药香囊的使用，并不会造成食欲减退的现象。
如表4、图5体重变化所示，随着时间的延长，高、中、低剂量组与模型组的体重差异性逐渐变大，外敷中药香囊第4周，高、中剂量组与模型组比较，产生显著性差异(P＜0.05)。
如表5、图6所示，随着时间的延长，高、中、低剂量组与模型组的Lee’s指数差异性逐渐变大，外敷中药香囊第4周，高剂量组与模型组比较，有显著性差异(P＜0.05)。
表4
Figure BDA0002569497500000112
Figure BDA0002569497500000121
注：与正常组比较：##P＜0.01；与模型组比较：*P＜0.05。
表5
Figure BDA0002569497500000122
注：与正常组比较：##P＜0.01；与模型组比较：*P＜0.05。
4.2.2对肥胖大鼠血脂的影响
如表6、图7～10所示：与正常组比较，模型组大鼠血清TG、TC、LDL-C均升高、HDL-C降低，均具有统计学差异(P＜0.01)。与模型组比较，外敷中药香囊4周后，中药香囊高、中、低剂量组大鼠血清TG、TC、LDL-C均有所降低，HDL-C有所升高，其中高剂量组血清TG、TC和LDL-C有统计学差异(P＜0.05)。
表6
Figure BDA0002569497500000123
注：与正常组比较：##P＜0.01；与模型组比较：*P＜0.05。
4.2.3对肥胖大鼠血糖的影响
如表7和图11所示，与正常组比较，模型组大鼠空腹血糖水平显著升高(P＜0.01)；与模型组比较，外敷中药香囊4周后，高剂量组空腹血糖水平显著降低(P＜0.01)，中、低剂量组空腹血糖水平降低(P＜0.05)。
表7
Figure BDA0002569497500000131
注：与正常组比较：##P＜0.01；与模型组比较：*P＜0.05,**P＜0.01。
4.2.4对肥胖大鼠脂肪系数的影响
如表8和图12、13所示，与正常组比较，模型组大鼠脂肪重量和脂肪系数显著升高(P＜0.01)；与模型组比较，外敷中药香囊4周后，高剂量组脂肪重量降低(P＜0.05)，中、低剂量组脂肪重量和脂肪系数虽有所升高，但无统计学意义(P＞0.05)。
表8
Figure BDA0002569497500000132
注：与正常组比较：##P＜0.01；与模型组比较：*P＜0.05。
4.2.5对肥胖大鼠脂肪细胞因子的影响
如表9-1和图14所示，与正常组比较，模型组大鼠血清瘦素水平显著升高(P＜0.01)，与模型组比较，中药香囊外敷4周后，高、中剂量组血清瘦素水平降低(P＜0.05)，低剂量组血清瘦素水平虽有所降低，但无统计学意义(P＞0.05)。如表9-1和图15所示，与正常组比较，模型组大鼠血清脂联素水平显著升高(P＜0.01)；与模型组比较，外敷中药香囊4周后，高剂量组血清脂联素水平降低(P＜0.05)，中、低剂量组血清脂联素水平虽有所降低，但无统计学意义(P＞0.05)。
表9
Figure BDA0002569497500000141
注：与正常组比较：##P＜0.01；与模型组比较：*P＜0.05。
如表10和图16所示，与正常组比较，模型组大鼠血清抵抗素水平显著升高(P＜0.01)；与模型组比较，外敷中药香囊4周后，高、中、低剂量组血清抵抗素水平降低(P＜0.05)。如表9-2和图17所示，与正常组比较，模型组大鼠血清激素敏感性脂肪酶水平显著升高(P＜0.01)；与模型组比较，外敷中药香囊4周后，高剂量组血清激素敏感性脂肪酶水平显著降低(P＜0.01),中、低剂量组血清激素敏感性脂肪酶水平虽有所降低，但无统计学意义(P＞0.05)。
表10
Figure BDA0002569497500000142
注：与正常组比较：##P＜0.05,##P＜0.01；与模型组比较：*P＜0.05,**P＜0.01。
5小结
参照保健食品安全性实验方法使用操作手册的方法，采用高糖高脂饲料喂养大鼠8周，建立了与人类肥胖症类似的营养性肥胖大鼠模型。该模型体重和体脂比较正常组显著增加，说明模型成立。与模型组比较，外敷中药香囊4周后，大鼠高剂量组体重降低、脂肪重量明显下降，中、低剂量的脂肪重量和脂肪系数也均有所降低，但无统计学意义，表明中药香囊可能通过抑制脂肪合成、促进脂肪分解等途径达到减轻体重的效果。
本实验中，模型组大鼠的空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白的水平较正常组显著升高，表明高脂组大鼠伴随着血清瘦素水平的升高，体内葡萄糖和脂肪的分解明显加速，大大超过了机体的代偿能力，因而出现了严重的糖脂代谢紊乱。外敷中药香囊4周后，高剂量组大鼠的空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白水平均降低，高密度脂蛋白水平升高，其余各组受试物也均有不同程度的改善作用，其机制可能与降低血清瘦素水平，改善瘦素抵抗，恢复瘦素调节糖脂代谢的生理效应有关。
模型组大鼠由于体内血脂浓度较高、脂肪细胞增生等，导致脂联素和激素敏感性脂肪酶水平降低，瘦素、抵抗素水平升高；外敷中药香囊4周后，随着血液中瘦素水平的降低，减弱了脂肪组织中的炎症状态，纠正了糖脂代谢紊乱，因而脂联素水平升高，抵抗素出现了不同程度的降低，表明中药香囊可能主要是通过降低血清瘦素水平，改善外周瘦素抵抗状态，从而达到干预肥胖大鼠瘦素抵抗的目的。
实验2：香囊内容物水提干膏粉体外脂代谢调节作用研究
1实验材料
受试物：实施例5提供香囊的中药组合物水提干膏粉。
细胞株：3T3-L1细胞源自中国科学院上海生科院细胞资源中心。
主要试剂：DMEM(Gibco)，FBS(Gibco)，Penicillin/Streptomycin(Gibco)，Dexamethasone(Sigma)，Insulin(Sigma)，3-Isobutyl-1-methylxanthine(Sigma)，Corticosterone(Sigma)，11-dehydrocorticosterone(Sigma)；甘油三酯测定试剂盒、游离脂肪酸测定试剂盒、甘油测定试剂盒、油红O染液。
主要仪器：CO2培养箱(Thermo)，多功能酶标仪(PerkinElmer)，倒置显微镜(Leica)，低温高速离心机(Thermo)。
2实验方法
2.13T3-L1脂肪细胞的培养、传代及诱导分化
3T3-L1细胞于37℃、5％CO2条件下常规培养于含10％FBS的高糖DMEM培养基中，待细胞生长至汇合度为80％左右，10％胰酶(含EDTA)消化传代并接种于相应的细胞培养板或皿中。实验时将细胞接种于培养板，在细胞长满后第二天将培养液换成含10％FBS、1μM胰岛素、0.25μM地塞米松和0.5mMIBMX的DMEM培养液，诱导细胞分化(day0)，72h后将培养液换成含10％FBS和1μM胰岛素的DMEM培养液，继续处理72h，然后将培液换成含10％FBS的DMEM继续培养，每2天更换培养液1次，诱导分化8-10天，待脂肪细胞分化达90％以上，3T3-L1细胞呈现脂肪细胞表型时用于实验。
2.2受试物对3T3-L1细胞活度的影响
接种于48孔板的3T3-L1细胞，按上述实验方法诱导分化8-10天，待脂肪细胞分化达90％以上，开始实验。受试物浓度分别设为500μg/mL、200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、12.5μg/mL，设置0.1％DMSO作为溶剂对照。每组设6个复孔，受试物与脂肪细胞共孵育24h后，每孔加入MTT溶液(MTT终浓度为5mg/mL)，放回细胞培养箱中反应4h后取出。每孔加入100μL二甲基亚砜进行溶解，于酶标仪波长560nm处检测OD值，计算生长抑制率。抑制率＝(空白孔平均值-实验组平均值)/空白组平均值×100％。
2.3受试物对3T3-L1细胞分化的影响
培养于24孔板的3T3-L1细胞按上述诱导脂肪细胞分化的实验方法，在诱导分化第一天(day0)开始加入受试物，受试物浓度分别设为25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL，0.1％DMSO作为溶剂对照，同时设置不诱导分化组、100μg/mL药物处理但不诱导分化组。每2天换液(药)1次，药物连续处理8-10天。待3T3-L1细胞分化成熟后，移去细胞培养液，用PBS洗细胞3遍，3.7％中性甲醛固定1h后，再用PBS洗3遍，室温晾干20min，用油红O染色液染色30min，PBS洗2遍后，用60％异丙醇洗去多余染料，蒸馏水冲洗2遍后，倒置显微镜观察、拍照后用异丙醇洗脱油红并测定其吸收值(OD510nm)。
2.4受试物对3T3-L1脂肪细胞中甘油三酯累积的影响
培养于24孔板的3T3-L1细胞完全分化后，受试物浓度分别设为25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL，同时设置0.1％DMSO作为溶剂对照。处理48h后，用冰PBS冲洗细胞终止反应，用蒸馏水收集细胞，经超声破碎细胞后，采用GPO-PAP法测定甘油三酯浓度。
2.5受试物对3T3-L1脂肪细胞中脂肪水解的影响
培养于24孔板的3T3-L1细胞完全分化后，受试物浓度分别设为25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL，同时设置0.1％DMSO作为溶剂对照。按实验设计换入含不同浓度受试物的DMEM预处理1h，换入含或不含有异丙肾上腺素的无酚红DMEM培养液，同时加入不同浓度的受试物，对照组加入0.1％DMSO，处理24h后，收集细胞培养液，GPO-POD法测定培养液中的甘油浓度，同时用Bradford法测定细胞中蛋白含量，用蛋白量校正3T3-L1细胞的脂肪水解水平。
3实验结果
3.1香囊内容物水提干膏粉对3T3-L1脂肪细胞活度的影响
由图18结果可见：香囊内容物水提干膏粉对3T3-L1脂肪细胞活度随药物浓度增加，生长抑制率逐步上升。与对照组比较，200μg/mL和500μg/mL显著抑制细胞生长，其差异具有显著性(P<0.05或P<0.01)。
3.2香囊内容物水提干膏粉对3T3-L1细胞分化的影响
由图19结果可见：香囊内容物水提干膏粉本身不诱导3T3-L1细胞分化，对诱导3T3-L1细胞分化为脂肪细胞具有明显抑制作用；油红O洗脱后OD值与细胞分化程度成正相关，OD值随香囊内容物水提干膏粉浓度增加而降低，与对照组比较，其差异具有显著性(P<0.05或P<0.01)
3.3香囊内容物水提干膏粉对3T3-L1脂肪细胞内甘油三酯累积的影响
由图20结果可见：香囊内容物水提干膏粉剂量依赖性降低3T3-L1脂肪细胞中甘油三酯的累积。与对照组比较，50μg/mL和100μg/mL香囊内容物水提干膏粉显著降低脂肪细胞内甘油三酯累积，其差异具有显著性(P<0.01)。
3.4香囊内容物水提干膏粉对3T3-L1脂肪细胞中脂肪水解的影响
由图21结果可见：香囊内容物水提干膏粉对3T3-L1脂肪细胞的脂肪水解具有轻微抑制作用，释放的甘油剂量依赖性减少，100μg/mL香囊内容物水提干膏粉显著降低甘油的释放，其差异具有显著性(P<0.05)。异丙肾上腺素显著增加3T3-L1脂肪细胞的脂肪水解作用，其差异具有显著性(P<0.01)，香囊内容物水提干膏粉对异丙肾上腺素诱导的脂肪水解具有明显抑制作用，50μg/mL和100μg/mL香囊内容物水提干膏粉显著降低甘油的释放，其差异具有显著性(P<0.01)。
4实验结论
香囊内容物水提干膏粉对3T3-L1细胞分化、脂肪细胞内甘油三酯累积及脂肪水解均具有明显抑制作用，提示其具有较好的体外脂代谢调节功能。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (2)

1.一种中药香囊，其特征在于，包括具有减肥功效的中药组合物；及所述中药组合物的重量比为：人参2-8份、大黄7-13份、当归14-20份、藤茶10-16份、枳实9-15份、迷迭香8-15份、肉桂4-8份、苍术7-13份、红花2-6份、山楂2-8份、黄芪2-8份、罗布麻2-8份、冰片0.1-0.6份。
2.一种如权利要求1所述的中药香囊的制备方法，其特征在于，所述方法具体包括以下步骤：
I、按重量比称量人参2-8份、大黄7-13份、当归14-20份、藤茶10-16份、枳实9-15份、迷迭香8-15份、肉桂4-8份、苍术7-13份、红花2-6份、山楂2-8份、黄芪2-8份、罗布麻2-8份，分别粉碎至80-100目，混合均匀，得到混合中药粉，备用；
II、将冰片研细至80-100目，得到冰片碎，备用；
III、按重量比称取步骤I的混合中药粉1000份，步骤II的冰片碎5份，混合均匀，得到具有减肥功效的中药组合物；
IV、将步骤III中得到的中药组合物作为内容物填充至香囊中，即得到所述中药香囊。
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