CN111778243A - 一种具有快速样本提取功能的试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种具有快速样本提取功能的试剂盒。试剂盒将试剂的存放与提取合二为一，适合于野外或者其他现场进行快速的提取；充分利用了电制冷片的一侧制冷一侧加热的效果，将制冷和加热都充分利用，大大节约了能源，且在加热时可以为制冷工作提供预制冷，节约了提取的时间，适合快速提取；设置了方便的转移装置，可以在整个提取过程中进行试剂的转移，快捷、方便，大大提高了工作效率。
Description
技术领域
本发明涉及样本处理领域，尤其涉及一种具有快速样本提取功能的试剂盒。
背景技术
磁珠法核酸提取是以纳米生物磁珠为载体的一种新型核酸提取技术，核酸分子可与磁珠表面的硅羟基发生特异性识别与结合，在外部磁场的作用下发生聚集或分散，从而进行核酸分离纯化。目前，对于DNA的提取，磁珠法核酸提取包括裂解、结合、洗涤、洗脱四个主要步骤。但是目前的提取一般都是在实验室中使用实验室的设备进行提取，还没有适合现场快速提取的试剂盒。
由于进行提取时要控制工作的温度，而试剂的保存也需要控制温度，因此试剂盒的研制一直是一个难题。
发明内容
针对上述内容，为解决上述问题，提供一种具有快速样本提取功能的试剂盒，包括提取试剂以及试剂盒本体；
提取试剂包括磁珠试剂、裂解缓冲液、洗涤试剂、沉淀试剂、洗脱试剂；试剂盒本体包括试剂存储仓和提取工作仓；
裂解缓冲液为SDS裂解缓冲液，成分包括碘化钠、EDTA、盐酸胍、2% SDS、氯化钠、Tris-HCl pH=8.5、PVP、偏重亚硫酸钠；洗脱试剂为氢氧化钠；
洗涤试剂包括EDTA，Tris-HCl pH=7，75％乙醇；沉淀试剂为KAc或者NH4Ac；
存储仓包括常温存储仓和低温存储仓；提取工作仓包括沉淀池、裂解池和提纯池；提取工作仓设置有电制冷装置，沉淀池和低温存储仓通过电制冷装置提供低温；电制冷装置产生的热量为裂解池提供工作温度；
提取工作仓还设置有转移装置，转移装置包括盖体和安装在盖体下方的电磁铁抽取装置，盖体可以盖在沉淀池、裂解池或者提纯池上，盖体内设置有存储液体的容器，电磁铁抽取装置设置有吸液泵和电磁铁。
试剂的具体成分为：
裂解缓冲液为SDS裂解缓冲液，成分包括2-5M碘化钠、2-9mM EDTA、1-2M盐酸胍、2%SDS、100mM氯化钠、Tris-HCl pH=8.5、2% PVP、0.05% 偏重亚硫酸钠；洗脱试剂为1mM的氢氧化钠；
洗涤试剂包括2-9mM EDTA，Tris-HCl pH=7，75％乙醇；沉淀试剂为5M的KAc或者5M的NH4Ac。
裂解池底面设置有加热盘，沉淀池底面设置有制冷盘，制冷盘为电制冷片，电制冷片的底面设置有连接至加热盘的第一热管，电制冷片的上表面设置有连接至低温存储仓的第二热管；第二热管在低温存储仓内的一端连接一个制冷风扇，使第二热管附近的低温空气在低温存储仓内循环；电制冷片的底面设置有散热风扇，可以将多余的热量散去。
转移装置的盖体内设置有电池和存储液体的容器，盖体的外部设置有控制电磁铁和吸液泵的按钮；电磁铁用于吸附磁珠，吸液泵用于将试剂吸入盖体内的容器内，吸液泵还可以将容器内的液体排出；裂解池和纯化池的深度相同均小于沉淀池的深度，且裂解池的深度使得吸液泵可以将裂解池内的液体全部吸收。
所述第二热管从电制冷片引出后环绕沉淀池的内壁后再进入低温存储仓。
一种利用试剂盒进行核酸提取的方法，包括如下步骤：
裂解步骤：
将待处理的组织液加入到裂解池内，然后取出裂解缓冲液，加入裂解池；控制电制冷片的工作，裂解池内的温度为50-65℃，持续60-120min；
沉淀步骤：
将裂解池内的液体利用转移装置进行吸液，将液体吸入容器中，然后将转移装置盖到沉淀池内，排出容器内的液体，加入沉淀试剂，控制电制冷片的工作，使得沉淀池内的液体温度为0℃左右；持续沉淀15-30min；产生沉淀后再利用转移装置将上清液吸入容器；
纯化步骤：
将转移装置盖到纯化池中，纯化池中加入洗涤试剂和磁珠试剂，进行洗涤，一定时间后开启转移装置的电磁铁，使磁珠吸附到转移装置上；
然后将裂解池取出，洗净，将盖体盖到裂解池内，关闭电磁铁，加入洗脱试剂，洗脱DNA完成提取。
本发明的有益效果为：本发明的试剂盒将试剂的存放与提取合二为一，适合于野外或者其他现场进行快速的提取；充分利用了电制冷片的一侧制冷一侧加热的效果，将制冷和加热都充分利用，大大节约了能源，且在加热时可以为制冷工作提供预制冷，节约了提取的时间，适合快速提取；
本发明设置了方便的转移装置，可以在整个提取过程中进行试剂的转移，快捷、方便，大大提高了工作效率。
附图说明
被包括来提供对所公开主题的进一步认识的附图，将被并入此说明书并构成该说明书的一部分。附图也阐明了所公开主题的实现，以及连同详细描述一起用于解释所公开主题的实现原则。没有尝试对所公开主题的基本理解及其多种实践方式展示超过需要的结构细节。
图1为本发明试剂盒整体结构示意图；
图2为本发明的沉淀池位置的结构示意图；
图3为本发明转移装置的结构示意图。
具体实施方式
本发明的优点、特征以及达成所述目的的方法通过附图及后续的详细说明将会明确。
实施例：
一种具有快速样本提取功能的试剂盒，包括提取试剂1以及试剂盒本体2；
提取试剂包括磁珠试剂、裂解缓冲液、洗涤试剂、沉淀试剂、洗脱试剂；试剂盒本体包括试剂存储仓11和提取工作仓12；
裂解缓冲液为SDS裂解缓冲液，成分包括碘化钠、EDTA、盐酸胍、2% SDS、氯化钠、Tris-HCl pH=8.5、PVP、偏重亚硫酸钠；洗脱试剂为氢氧化钠；
洗涤试剂包括EDTA，Tris-HCl pH=7，75％乙醇；沉淀试剂为KAc或者NH4Ac；
存储仓包括常温存储仓和低温存储仓；提取工作仓包括沉淀池21、裂解池22和提纯池23；提取工作仓设置有电制冷装置，沉淀池21和低温存储仓通过电制冷装置提供低温；电制冷装置产生的热量为裂解池22提供工作温度；
提取工作仓还设置有转移装置24，转移装置24包括盖体25和安装在盖体25下方的电磁铁抽取装置，盖体25可以盖在沉淀池21、裂解池22或者提纯池23上，盖体25内设置有存储液体的容器，电磁铁抽取装置设置有吸液泵和电磁铁。
试剂的具体成分为：
裂解缓冲液为SDS裂解缓冲液，成分包括2-5M碘化钠、2-9mM EDTA、1-2M盐酸胍、2%SDS、100mM氯化钠、Tris-HCl pH=8.5、2% PVP、0.05% 偏重亚硫酸钠；洗脱试剂为1mM的氢氧化钠；
洗涤试剂包括2-9mM EDTA，Tris-HCl pH=7，75％乙醇；沉淀试剂为5M的KAc或者5M的NH4Ac。
裂解池22底面设置有加热盘，沉淀池21底面设置有制冷盘，制冷盘为电制冷片26，电制冷片26的底面设置有连接至加热盘的第一热管27，电制冷片26的上表面设置有连接至低温存储仓的第二热管28；第二热管在低温存储仓内的一端连接一个制冷风扇29，使第二热管附近的低温空气在低温存储仓内循环；电制冷片26的底面设置有散热风扇30，可以将多余的热量散去。
转移装置24的盖体25内设置有电池和存储液体的容器，盖体25的外部设置有控制电磁铁和吸液泵的按钮；电磁铁用于吸附磁珠，吸液泵用于将试剂吸入盖体25内的容器内，吸液泵还可以将容器内的液体排出；裂解池22和纯化池的深度相同均小于沉淀池21的深度，且裂解池22的深度使得吸液泵可以将裂解池22内的液体全部吸收。
所述第二热管从电制冷片26引出后环绕沉淀池21的内壁后再进入低温存储仓。
一种利用试剂盒进行核酸提取的方法，包括如下步骤：
裂解步骤：
将待处理的组织液加入到裂解池22内，然后取出裂解缓冲液，加入裂解池22；控制电制冷片26的工作，裂解池22内的温度为50-65℃，持续60-120min；
沉淀步骤：
将裂解池22内的液体利用转移装置24进行吸液，将液体吸入容器中，然后将转移装置24盖到沉淀池21内，排出容器内的液体，加入沉淀试剂，控制电制冷片26的工作，使得沉淀池21内的液体温度为0℃左右；持续沉淀15-30min；产生沉淀后再利用转移装置24将上清液吸入容器；
纯化步骤：
将转移装置24盖到纯化池中，纯化池中加入洗涤试剂和磁珠试剂，进行洗涤，一定时间后开启转移装置24的电磁铁，使磁珠吸附到转移装置24上；
然后将裂解池22取出，洗净，将盖体25盖到裂解池22内，关闭电磁铁，加入洗脱试剂，洗脱DNA完成提取。
以上所述，仅为本发明的优选实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。
Claims (6)
1.一种具有快速样本提取功能的试剂盒，包括提取试剂（1）以及试剂盒本体（2），其特征在于：
提取试剂包括磁珠试剂、裂解缓冲液、洗涤试剂、沉淀试剂、洗脱试剂；试剂盒本体包括试剂存储仓（11）和提取工作仓（12）；
裂解缓冲液为SDS裂解缓冲液，成分包括碘化钠、EDTA、盐酸胍、2% SDS、氯化钠、Tris-HCl pH=8.5、PVP、偏重亚硫酸钠；洗脱试剂为氢氧化钠；
洗涤试剂包括EDTA，Tris-HCl pH=7，75％乙醇；沉淀试剂为KAc或者NH4Ac；
存储仓包括常温存储仓和低温存储仓；提取工作仓包括沉淀池（21）、裂解池（22）和提纯池（23）；提取工作仓设置有电制冷装置，沉淀池（21）和低温存储仓通过电制冷装置提供低温；电制冷装置产生的热量为裂解池（22）提供工作温度；
提取工作仓还设置有转移装置（24），转移装置（24）包括盖体（25）和安装在盖体（25）下方的电磁铁抽取装置，盖体（25）可以盖在沉淀池（21）、裂解池（22）或者提纯池（23）上，盖体（25）内设置有存储液体的容器，电磁铁抽取装置设置有吸液泵和电磁铁。
2.根据权利要求1所述的一种具有快速样本提取功能的试剂盒，其特征在于：
试剂的具体成分为：
裂解缓冲液为SDS裂解缓冲液，成分包括2-5M碘化钠、2-9mM EDTA、1-2M盐酸胍、2%SDS、100mM氯化钠、Tris-HCl pH=8.5、2% PVP、0.05% 偏重亚硫酸钠；洗脱试剂为1mM的氢氧化钠；
洗涤试剂包括2-9mM EDTA，Tris-HCl pH=7，75％乙醇；沉淀试剂为5M的KAc或者5M的NH4Ac。
3.根据权利要求1所述的一种具有快速样本提取功能的试剂盒，其特征在于：
裂解池（22）底面设置有加热盘，沉淀池（21）底面设置有制冷盘，制冷盘为电制冷片（26），电制冷片（26）的底面设置有连接至加热盘的第一热管（27），电制冷片（26）的上表面设置有连接至低温存储仓的第二热管（28）；第二热管在低温存储仓内的一端连接一个制冷风扇（29），使第二热管附近的低温空气在低温存储仓内循环；电制冷片（26）的底面设置有散热风扇（30），可以将多余的热量散去。
4.根据权利要求3所述的一种具有快速样本提取功能的试剂盒，其特征在于：
转移装置（24）的盖体（25）内设置有电池和存储液体的容器，盖体（25）的外部设置有控制电磁铁和吸液泵的按钮；电磁铁用于吸附磁珠，吸液泵用于将试剂吸入盖体（25）内的容器内，吸液泵还可以将容器内的液体排出；裂解池（22）和纯化池的深度相同均小于沉淀池（21）的深度，且裂解池（22）的深度使得吸液泵可以将裂解池（22）内的液体全部吸收。
5.根据权利要求4所述的一种具有快速样本提取功能的试剂盒，其特征在于：
所述第二热管从电制冷片（26）引出后环绕沉淀池（21）的内壁后再进入低温存储仓。
6.一种利用权利要求4的试剂盒进行核酸提取的方法，其特征在于包括如下步骤：
裂解步骤：
将待处理的组织液加入到裂解池（22）内，然后取出裂解缓冲液，加入裂解池（22）；控制电制冷片（26）的工作，裂解池（22）内的温度为50-65℃，持续60-120min；
沉淀步骤：
将裂解池（22）内的液体利用转移装置（24）进行吸液，将液体吸入容器中，然后将转移装置（24）盖到沉淀池（21）内，排出容器内的液体，加入沉淀试剂，控制电制冷片（26）的工作，使得沉淀池（21）内的液体温度为0℃左右；持续沉淀15-30min；产生沉淀后再利用转移装置（24）将上清液吸入容器；
纯化步骤：
将转移装置（24）盖到纯化池中，纯化池中加入洗涤试剂和磁珠试剂，进行洗涤，一定时间后开启转移装置（24）的电磁铁，使磁珠吸附到转移装置（24）上；
然后将裂解池（22）取出，洗净，将盖体（25）盖到裂解池（22）内，关闭电磁铁，加入洗脱试剂，洗脱DNA完成提取。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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