CN111773180A - 一种甘露聚糖在诱导骨再生方面的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种甘露聚糖在制备诱导骨再生的食品、药物和/或医疗器械中的应用，属于生物医药领域，为治愈骨损伤等骨疾病提供解决方案。甘露聚糖可用于制备诱导骨再生的食品、药物和/或医疗器械，具有功能性强、活性稳定等优点，可应用于器官移植、骨外伤、骨质疏松等病症。本发明所述的甘露聚糖是从海胆黄中提取得到的天然碳水化合物，避免了类似功能药物使用存在的缺陷，诸如细胞毒性、机体抗感染能力下降、对成骨细胞的繁殖抑制等副作用。这为防治骨质疏松等骨疾病提出了新的思路和具体应用，为开发人工骨修复材料提供了物质基础，具有潜在的社会效益和经济效益。
Description
技术领域
本发明属于骨疾病治疗的技术领域，涉及一种甘露聚糖的应用，具体涉及甘露聚糖在制备诱导骨再生的食品、药物和/或医疗器械中的应用。
背景技术
随着现代工业、交通的飞速发展，各种外伤引起的骨缺损日益增多；另外，骨肿瘤、感染以及畸形等疾病的治疗也需要植骨或骨替代物治疗。目前，自体骨移植仍是临床最常用的方法，但供体的有限性及供骨区的相关并发症限制了其应用，并且增加了患者的痛苦。而异体骨具有较大的抗原性，特别是大型骨缺损需要较多骨量修复时，常因剧烈的免疫排斥反应导致植骨失败，且异体骨来源有限，尚存在潜在的疾病传播、医学伦理等问题，临床应用因而受到了限制。为了克服自体骨以及异体骨应用的诸多缺点和不利条件，寻找和开发能够替代自然骨的材料越来越成为日益迫切的要求。
近年来，人工骨修复材料诱导骨再生的研究已经成为新的热门研究方向，其诱导骨再生的作用倍受关注，成为了促骨再生研究的中心课题。人工骨修复材料与自然骨相比，具有来源广泛、多途径、物美价廉等优点，其在临床上的应用和发展潜力将非常广阔。
已有文献研究表明非硫酸化多糖，如甘露聚糖(SUP)，能够协同BMP-2促进成骨细胞分化，主要由于SUP与BMP-2结合对BMP-2的结构起到一定的稳定作用，使得与细胞表面受体结合的机会大大提高引起的。BMP-2作为一种调节骨代谢和骨发育重要的细胞因子之一，存在于骨基质中，诱导异位骨的形成，对骨折、骨质疏松的治疗具有重要意义。但是BMP-2本身也存在一些剂量难掌握、半衰期短易降解、活性不稳定等的问题，以至于不能很好地发挥它的功能。但是我们最新的研究表明单独加入SUP也可以诱导成骨分化、促进骨再生。本发明多糖的新型应用能更好地发挥SUP的促骨功能，减少了其他方法中协同BMP-2诱导成骨分化所带来的成本增加，实践操作复杂等附带影响因素。
本发明涉及的多糖SUP结构均一，平均分子量为4.4kDa，主要由含少量葡萄糖的甘露糖和N-乙酰氨基葡萄糖组成，主链由1，4-D-Man和1，3-D-Man交替组成。已有文献研究结果表明SUP可协同促进BMP-2诱导的C2C12成肌细胞向成骨细胞分化，其显著增强了碱性磷酸酶(ALP)的活性，具有促进骨再生的作用。然而我们通过研究发现SUP不需要与BMP-2协同工作也可以完成成骨分化诱导，因此，减少了用药成本和操作难度，鉴于此申请甘露聚糖的应用。
发明内容
本发明涉及甘露聚糖制备诱导骨再生方面的应用，提供一种甘露聚糖在制备诱导骨再生的食品、药物和/或医疗器械中的应用，为治疗骨疾病提供一些应用。
本发明的目的是基于甘露聚糖现有的特定结构下为促成骨的应用提供有价值的参考。
为了达到上述目的，本发明提供了一种甘露聚糖在制备诱导骨再生的食品、药物和/或医疗器械中的应用。本发明所涉及的甘露聚糖可以用化学合成的方式制备，也可以从天然生物中制备得到。论文《虾夷马粪海胆生殖腺多糖的提取、纯化及鉴定》中公开了一种甘露聚糖，是从海胆黄体中提取得到，为杂多糖，主要由甘露糖和少量的葡萄糖和N-乙酰氨基葡萄糖组成，平均分子量为4.4kDa，主链由1，4-D-Man和1，3-D-Man交替组成；本发明涉及的甘露聚糖可以选用该论文所述的甘露聚糖。本发明中涉及的甘露聚糖的结构式参见论文：Jingfeng Yang,Meng Yi,Jinfeng Pan,Jun Zhao,Liming Sun,Xinping Lin,YuegangCao,Lu Huang,Beiwei Zhu,Chenxu Yu.Sea urchin(Strongylocentrotus intermedius)polysaccharide enhanced BMP-2 induced osteogenic differentiation and itsstructural analysis[J].Journal of Functional Foods,2015,14.
本发明提供了所述甘露聚糖在制备诱导骨再生的食品、药物和/或医疗器械中的应用，所述食品、药物和/或医疗器械以甘露聚糖为活性成分，可以用于治疗骨损伤；所述食品可以是饮料、糖果、饼干等；所述药物剂型可以为片剂、粉剂、胶囊型、颗粒或口服液等；所述医疗器械可以是多孔支架。所述多孔支架可以通过包埋方法，手术递送到患处，促进成骨分化和骨再生，治疗骨损伤；所述药物可以通过药丸、口服液及口含片等形态，通过人体消化道吸收入体，解决成骨分化相关病症，治疗骨损伤。所述骨损伤包括外伤引起的骨缺损、骨折以及慢性病骨质疏松症；所述相关病症包括轻微骨损伤和骨质疏松症。
所述甘露聚糖可以作为骨修复材料，用于制备人工骨，替代自然骨。
一种甘露聚糖口服液，按重量百分比由下述组分制成：甘露聚糖25～30％、红枣10～15％、山楂3～5％、蜂蜜3～5％、山梨酸钾0.1～0.2％，余量为水；其中，所述甘露聚糖为论文《虾夷马粪海胆生殖腺多糖的提取、纯化及鉴定》食品科学.(2014).35:(21),32-36中记载的经过冻干处理的甘露聚糖粉末。
所述甘露聚糖口服液的制备方法为：
S1、将红枣和山楂切成厚度为2～3mm片状，于59～61℃烘干1～3小时，粉碎机将其粉碎后过50～60目筛，分别得到红枣粉和山楂粉；
S2、甘露聚糖、红枣粉、山楂粉、蜂蜜、山梨酸钾和水混合，搅拌均匀，过滤并灌装于棕色瓶中，封口，110～120℃灭菌15～20分钟；制备得到具有促骨功效的甘露聚糖口服液。
一种甘露聚糖饮料，由下述重量百分比的原料制成：甘露聚糖7～17％、白砂糖5～10％、山梨酸钾0.1～0.2％、余量为水；其中，所述甘露聚糖为论文《虾夷马粪海胆生殖腺多糖的提取、纯化及鉴定》食品科学.(2014).35:(21),32-36中记载的经过冻干处理的甘露聚糖粉末；
所述甘露聚糖饮料的制备方法为：
S1、将甘露聚糖、白砂糖、山梨酸钾、水混合，搅拌均匀，加热到50～60℃，采用均质机以15～20MPa进行均质，得混合料；
S2、将步骤S1所述混合料用真空脱气机脱气4～6分钟，得脱气混合料；
S3、将步骤S2所述脱气混合料灌装到饮料瓶中，密封，于110～121℃灭菌15～20分钟；制得具有促骨功效的甘露聚糖饮料。
一种多孔支架的制备方法，包括步骤：
S1、在20～25℃、将磷酸四钙，无水磷酸二钙和甘露聚糖与饱和NaCl水溶液混合成糊状物，形成水泥浆液；所述水泥浆液中磷酸四钙的浓度为35～37mg/mL、无水磷酸二钙的浓度为12～14mg/mL、甘露聚糖的浓度为5～10μg/mL；其中，所述甘露聚糖为论文《虾夷马粪海胆生殖腺多糖的提取、纯化及鉴定》食品科学.(2014).35:(21),32-36中记载的经过冻干处理的甘露聚糖粉末；
S2、将步骤S1所述水泥浆液在2MPa条件下浇铸在尺寸Φ2×5mm不锈钢圆柱模具中，浇铸1分钟，将所得模型在37℃和100％相对湿度的条件下固化3天后，得样品；所述模具也可以根据治疗需要选取其他的形状及尺寸；
S3、将步骤S2所述样品在纯水中浸泡3天，每12小时更换一次水，直到NaCl颗粒完全溶解，然后在100℃下干燥12小时，以获得多孔支架。
本发明涉及的甘露聚糖具备的活性具有如下特征：
1、本发明多糖能够诱导肌细胞或其他成骨细胞成骨分化，例如小鼠胚胎成骨前体细胞MC3T3-E1的成骨分化为骨细胞，从而达到骨再生目的。
2、在单独加入少量SUP例如10μg/mL的时候，即可显著促进骨再生或增殖。
本发明所述的甘露聚糖在制备诱导骨再生药物的具体应用，具有功效高、活性稳定等优点。具体说：
1、本发明中所涉及的甘露聚糖不含有硫酸基，分子组成结构简单，因而其药物活性稳定。
2、本发明所涉及的甘露聚糖最初发现于海胆黄体内，因而其应用避免了哺乳动物制剂含有的病毒传染人体的风险，比如提取自猪牛体内物质具有传递哺乳动物病毒的风险。
3、本发明所涉及的甘露聚糖结构稳定，活性功能强，无毒副作用。可应用于器官移植、骨外伤、骨质疏松等用药。
4、本发明中涉及的甘露聚糖具有纯天然、无免疫抗原性、对机体不会产生不良影响等优点，这为防治骨质疏松等骨疾病提出了新的思路和具体应用。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
1、本发明提供了甘露聚糖在诱导骨再生药物的新用途，拓宽了甘露聚糖的应用领域，为开发人工骨修复材料提供了物质基础，具有潜在的社会效益和经济效益。
2、本发明的甘露聚糖可单独诱导成骨分化，减少了其他方法中协同BMP-2诱导成骨分化所带来的成本增加，实践操作复杂等附带影响因素。
3、本发明甘露聚糖的结构简单，可以进行人工合成制备、适合大规模生产。
本发明的研究表明单独加入SUP也可以诱导成骨分化、促进骨再生。本发明所述甘露聚糖的新型应用能更好地发挥SUP的促骨功能，减少了其他方法中协同BMP-2诱导成骨分化所带来的成本增加，实践操作复杂等附带影响因素。已有文献研究结果表明SUP可协同促进BMP-2诱导的C2C12成肌细胞向成骨细胞分化，其显著增强了碱性磷酸酶(ALP)的活性，具有促进骨再生的作用。然而我们通过研究发现SUP不需要与BMP-2协同工作也可以完成成骨分化诱导，因此，减少了用药成本和操作难度。
附图说明
图1是小鼠胚胎成骨前体细胞在加入本发明多糖后碱性磷酸酶活性的变化图；表明小鼠胚胎成骨前体细胞MC3T3-E1在加入本发明的甘露聚糖后，其表达的碱性磷酸酶活性变化情况。其中纵坐标为碱性磷酸酶的比活力，横坐标为各实验对象(其中不同小写字母之间表示具有显著性差异)。
图2是大鼠骨折模型加入含有甘露聚糖的多孔支架受损骨组织的愈合情况图；表明大鼠骨折模型在加入含有本发明的甘露聚糖的支架后，其受损骨组织的愈合情况。(其中箭头表示大鼠手术治疗部位)。
图3是微型计算机断层扫描检查小鼠股骨近端受损骨组织图；表明用微计算机断层扫描检查小鼠股骨近端受损骨组织的愈合情况。(其中箭头表示大鼠股骨手术部位)。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方法以及优点更加清楚明了，下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。但应该理解，所述的具体实施例仅用于解释本发明，并不用于限制本发明的范围。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容更加透彻全面。
除非另有定义，本文中所使用的所有科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了方便描述具体的实施例，不是旨在于限制本发明。
为了更好的理解上述方案，下面将结合具体的实施方式以及说明书附图对上述方案进行详细的说明。应当理解，本发明实施例以及实施例中的具体特征是对本申请技术方案的详细的说明，而不是对本申请技术方案的限定。
本发明提供一些甘露聚糖的具体应用，拓宽了甘露聚糖的应用领域。
一、制备方法：
本发明中所述的甘露聚糖可以以化学合成的方式制备也可以从天然生物中制备得到，例如可以从海胆黄中制备得到该多糖。提取方法参见论文：曹月刚，赵君，陈泓宇，陈宁，田姮，何冬梅，杨静峰.虾夷马粪海胆生殖腺多糖的提取、纯化及鉴定.食品科学.(2014).35:(21),32-36。
实验实例的结果见附图1～3
文中简写说明：
1、小鼠胚胎成骨前体细胞(MC3T3-E1)
2、甘露聚糖(SUP)
3、碱性磷酸酶(ALP)
4、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)
5、胎牛血清(FBS)
6、磷酸四钙(TTCP)
7、无水磷酸二钙(DCPA)
8、切除卵巢(OVX)
9、骨体积分数(BV/TV)
10、骨密度(BMD)
二、本发明中所述的甘露聚糖促骨再生的实验证明原理：
碱性磷酸酶在成骨细胞中会大量表达，而在成骨前体细胞中则不表达，因此碱性磷酸酶在成骨前体细胞向成骨细胞转化的实验研究中可以作为一种指示性物质标示出成骨细胞的转化过程，本实验采用小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)作为实验对象，在本多糖的作用下成骨前体细胞会逐渐转化为成骨细胞，因此可以观察到目标细胞中碱性磷酸酶的含量逐渐增加，以此判断甘露聚糖的促骨再生能力。
三、本发明中所述的甘露聚糖促骨再生的具体实验方法如下：
1.碱性磷酸酶(ALP)活性检测：
1)分化培养基的配制
在α-MEM培养基中加入胎牛血清(FBS)体积分数10％，青霉素-链霉素体积分数1％，及加入一定量的β-甘油磷酸五水合物、Vc、地塞米松，使其终浓度达到5mmol/L、50μg/mL、10-7mol/L。
2)将小鼠胚胎成骨前体MC3T3-E1细胞接种在96孔的培养板中，接种密度为8×104/mL，使用分化培养基于37℃、5％CO2，饱和湿度的培养箱中培养24小时后更换新鲜培养液，每孔加入100μL不同浓度样品的分化培养基，配制方式见表1。每组设6个平行孔，每隔3天换液一次，分别培养3天、6天。
3)培养结束后去掉培养基，用HBSS缓冲液洗涤5min×3次。
4)加50μL体积分数4％多聚甲醛溶液，在常温条件下固定30min，用HBSS缓冲液洗涤5min×3次。
5)按照BCIP/NBT(Beyotime,CAS号：C3206)显色试剂盒说明书的方法配制好显色液后，每孔加入50μL，染色24小时。
6)在显微镜下观察，拍照，利用Image pro-plus 6.0软件处理图像，计算其碱性磷酸酶相对活性。
表1.甘露聚糖样品的配制方式
图1所示为小鼠胚胎成骨前体细胞MC3T3-E1在加入BMP-2和本发明所述甘露聚糖3天、6天后，检测其表达的碱性磷酸酶活性变化情况。图1中纵坐标为碱性磷酸酶的比活力，横坐标为各实验对象。从图1中可见，在SUP添加至10μg/mL的浓度下的实验组与其他添加不同浓度SUP的实验组相比，即可有显著碱性磷酸酶的增长，证明本发明所述甘露聚糖在此浓度下即具有较高促骨分化能力。对照组包括空白对照组和阳性对照组，所述阳性对照组为：BMP-2，仅加入50ng/mL BMP-2的MC3T3-E1组。以上实验表明本发明甘露聚糖可以单独诱导成骨分化，避免了协同用药的繁琐操作以及成本损耗。
实施例1：
本实例为通过手术支架包埋甘露聚糖并将其移植到受损骨组织中，促骨再生的应用实例
一种甘露聚糖支架的制备方法，包括如下步骤：
S1、在20～25℃、将磷酸四钙(TTCP)，无水磷酸二钙(DCPA)和SUP按一定比例混合，然后与饱和NaCl水溶液在水中混合成糊状物，形成水泥浆液；
本发明中涉及的含有甘露聚糖的支架中TTCP、DCPA以及SUP的添加比例如下表2所示：
表2.SUP支架中各成分的添加量
S2、将步骤S1所得水泥浆液在2MPa条件下浇铸在尺寸Φ2×5mm不锈钢圆柱模具中，浇铸1分钟(用于细胞培养的Φ5×5mm；用于异位骨形成的Φ2×5mm)，将所得模型在37℃和100％相对湿度的条件下固化3天后，得样品。
S3、将步骤S2所得样品在纯水中浸泡3天(每12小时更换一次水)，直到NaCl颗粒完全溶解，然后在100℃下干燥12小时，以获得多孔支架。
将本实施例制得的多孔支架移植到受损的骨组织模型中，术后30天用微计算机断层扫描检查小鼠股骨近端受损骨组织的愈合情况。
本实施例制备的支架作为载体，具有输送的作用，支架中携带的BMP-2或甘露聚糖能被骨组织吸收，从而发挥诱导骨再生的作用。
图2所示为大鼠骨折模型在加入含有本发明的甘露聚糖的支架后，其受损骨组织的愈合情况。图2显示，治疗30天后，与空白对照组大鼠相比，高剂量组单独添加10μg/mL甘露聚糖治疗的大鼠的总骨痂体积显著增大，且愈合程度呈剂量依赖型。对比单独添加10μg/mL甘露聚糖治疗的大鼠和BMP-2组大鼠，显示甘露聚糖确实能使成骨分化能力增强。在未经治疗的对照组大鼠中，超过一半的骨损伤导致骨不连。实验结果表明单独加入SUP也可以诱导成骨分化、促进骨再生。
图3所示为用微计算机断层扫描检查小鼠股骨近端受损骨组织的愈合情况。实验结果表明，治疗30天后，和空白对照组大鼠相比，单独添加10μg/mL甘露聚糖治疗的高剂量组大鼠受损部位愈合情况更好，且愈合程度呈剂量依赖型。这些数据说明单独添加少量甘露聚糖也能促进骨再生，避免了协同用药的繁琐操作以及成本损耗。
实施例2
1.本实例为口服甘露聚糖对缓解小鼠骨质疏松的应用实例
为了进一步确认内服甘露聚糖是否具有促骨成效，本发明研究了口服甘露聚糖对小鼠骨质疏松模型的影响。
本实施案例以甘露聚糖灌胃小鼠，提供一种缓解骨质疏松等疾病的治疗方法，下述动物实验方案通过动物实验伦理审查，具体包括以下步骤：
2.骨质疏松模型的建立
S1、选取12周龄适应性喂养良好的雌性C57BL/6N小鼠，所有小鼠被随机分为四组，小鼠要接受卵巢切除手术或假手术，得骨质疏松模型组小鼠。(小鼠进行卵巢切除手术会引发骨质疏松等骨疾病，假手术组是将小鼠背部切开一个小口但不进行卵巢切除，假手术组旨在排除背部切开小口对小鼠的影响。)
S2、将步骤S1所得骨质疏松模型组小鼠用微计算机断层扫描仪测定甘露聚糖对去卵巢小鼠的影响。
S3、将步骤S2所得骨质疏松模型组小鼠于灌胃前12～16h，对所有小鼠禁食、自由饮水。接受灌胃治疗，具体灌胃剂量如下所述，疗程为12周(治疗期)。
各组小鼠灌胃剂量：
A、空白对照组：小鼠被切除卵巢。每天以0.2mL/10g小鼠体重灌胃娃哈哈水。
B、假手术组：小鼠背部切开小口但不做卵巢切除手术。每天以0.2mL/10g小鼠体重灌胃娃哈哈水。
C、阳性对照组：小鼠被切除卵巢。将BMP-2用娃哈哈水配制成浓度50ng/mL的溶液，每天以0.2mL/10g小鼠体重灌胃BMP-2。
D、甘露聚糖灌胃组：小鼠被切除卵巢。将甘露聚糖用娃哈哈水配制成10μg/mL的溶液，每天以0.2mL/10g小鼠体重灌胃甘露聚糖
S4、将步骤S3处理组小鼠用微计算机断层扫描仪测定骨骼情况。
4.实验结果
通过微型计算机断层扫描测定了甘露聚糖对切除卵巢(OVX)小鼠的影响。治疗12周后各组内股骨小梁的典型3DμCT图像显示，甘露聚糖灌胃组骨体积分数(BV/TV)和骨密度(BMD)显著升高。与阳性对照组和甘露聚糖灌胃组小鼠相比，空白对照组小鼠骨骼明显松动。甘露聚糖灌胃组小鼠的BV/TV和BMD显著低于阳性对照组小鼠，但显著高于空白对照组小鼠，表明单独添加甘露聚糖的确能诱导骨再生但其活性略低于BMP-2。结果表明，与空白对照组小鼠相比，灌胃甘露聚糖可显著改善各种μCT骨参数，而假手术组和空白对照组之间无显著差异。根据体外(图1)和体内实验(实施例2)结果，我们知道甘露聚糖不仅能单独促进成骨细胞增殖，而且在动物实验中表现出良好的诱导骨再生活性。
实施例3：
一种甘露聚糖口服液
一种甘露聚糖口服液按重量百分比由下述组分制成：甘露聚糖28％、红枣13％、山楂4％、蜂蜜4％、山梨酸钾0.15％，余量为水。其中，所述甘露聚糖为论文《虾夷马粪海胆生殖腺多糖的提取、纯化及鉴定》中记载的经过冻干处理的甘露聚糖粉末。
所述甘露聚糖口服液的制备方法为：
S1、甘露聚糖粉的制备：所述甘露聚糖为论文《虾夷马粪海胆生殖腺多糖的提取、纯化及鉴定》中记载的经过冻干处理的甘露聚糖粉末。
S2、红枣山楂粉的制备：将新鲜红枣和山楂切成厚度为3mm片状后于60℃下烘干2小时，通过粉碎机将其粉碎后过60目筛，得红枣山楂粉。
S3、甘露聚糖口服液的制备：按比例将甘露聚糖粉、红枣山楂粉、蜂蜜、山梨酸钾、水混合，搅拌均匀后用板框过滤器过滤并灌装于棕色瓶中，封口，110℃灭菌20分钟；制备得到具有促骨功效的甘露聚糖口服液。
本发明制备的甘露聚糖口服液，可以用于缓解症状较轻的骨质疏松。成人每天服用步骤S3所述甘露聚口服液30～50mL，儿童可适当减少服用量至20～30mL，长期服用可有效改善骨质疏松等轻微骨损伤。
实施例4:
一种甘露聚糖饮料
一种甘露聚糖饮料，由下述重量百分比的原料配制成的：甘露聚糖12％、白砂糖7％、山梨酸钾0.15％、余量为水；其中，所述甘露聚糖为论文《虾夷马粪海胆生殖腺多糖的提取、纯化及鉴定》中记载的经过冻干处理的甘露聚糖粉末。
所述甘露聚糖饮料的制备方法为：
S1、所述甘露聚糖为论文《虾夷马粪海胆生殖腺多糖的提取、纯化及鉴定》中记载的经过冻干处理的甘露聚糖粉末。
S2、按比例将甘露聚糖粉、白砂糖、山梨酸钾、水混合，搅拌均匀后将混合预料加热到55℃，采用均质机以18MPa进行均质；
S3、将均质好的混合料利用真空脱气机脱气5分钟；
S4、将脱气好的混合料灌装到饮料瓶中，密封，于121℃灭菌20分钟；制得具有促骨功效的甘露聚糖饮料，长期服用可有效改善骨质疏松等轻微骨损伤。
综上实施案例证明本发明可有效诱导成骨促进骨再生，并进一步发挥潜在的促成骨活性，从而可以将甘露聚糖通过常规工艺，制成药剂学上所说的多种剂型，用于制备具有诱导成骨、促进骨再生的功能性食品，功能食品的剂型可以为片剂、粉剂、胶囊型、颗粒或口服液等，亦可在制备预防和辅助治疗骨疾病的药物中应用。
以上所述实例仅为本发明较佳的具体实施方式，因此描述较为具体和详细，但本发明的保护范围并不局限于此。应当指出的是，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思，还可以做出合理的等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种甘露聚糖在制备诱导骨再生的食品、药物和/或医疗器械中的应用。
2.根据权利要求1所述甘露聚糖在制备诱导骨再生的食品、药物和/或医疗器械中的应用，其特征在于，所述甘露聚糖来源于虾夷马粪海胆。
3.根据权利要求1所述甘露聚糖在制备诱导骨再生的食品、药物和/或医疗器械中的应用，其特征在于，所述食品、药物和/或医疗器械以甘露聚糖为诱导骨再生的活性成分。
4.根据权利要求1所述甘露聚糖在制备诱导骨再生的食品、药物和/或医疗器械中的应用，其特征在于，所述食品包括饮料、糖果、饼干。
5.根据权利要求1所述甘露聚糖在制备诱导骨再生的食品、药物和/或医疗器械中的应用，其特征在于，所述药物剂型包括片剂、粉剂、胶囊型、颗粒或口服液。
6.根据权利要求1所述甘露聚糖在制备诱导骨再生的食品、药物和/或医疗器械中的应用，其特征在于，所述医疗器械包括多孔支架。
7.一种甘露聚糖口服液，其特征在于，按重量百分比由下述组分制成：甘露聚糖25～30％、红枣10～15％、山楂3～5％、蜂蜜3～5％、山梨酸钾0.1～0.2％，余量为水；
所述甘露聚糖口服液的制备方法，包括步骤：
S1、将红枣和山楂切成厚度为2～3mm片状，于59～61℃烘干1～3小时，将其粉碎后过50～60目筛，分别得到红枣粉和山楂粉；
S2、将甘露聚糖、红枣粉、山楂粉、蜂蜜、山梨酸钾和水混合，搅拌均匀，过滤并灌装于棕色瓶中，封口，110～120℃灭菌15～20分钟；制备得到甘露聚糖口服液。
8.一种甘露聚糖饮料，其特征在于，由下述重量百分比的原料制成：甘露聚糖7～17％、白砂糖5～10％、山梨酸钾0.1～0.2％、余量为水；
所述甘露聚糖饮料的制备方法，包括步骤：
S1、将甘露聚糖、白砂糖、山梨酸钾、水混合，搅拌均匀，加热到50～60℃，采用均质机以15～20MPa进行均质，得混合料；
S2、将步骤S1所述混合料用真空脱气机脱气4～6分钟，得脱气混合料；
S3、将步骤S2所述脱气混合料灌装到饮料瓶中，密封，于110～121℃灭菌15～20分钟；制得甘露聚糖饮料。
9.一种多孔支架的制备方法，其特征在于，包括步骤：
S1、在20～25℃、将磷酸四钙，无水磷酸二钙和甘露聚糖与饱和NaCl水溶液混合，得水泥浆液；所述水泥浆液中磷酸四钙的浓度为35～37mg/mL、无水磷酸二钙的浓度为12～14mg/mL、甘露聚糖的浓度为5～10μg/mL；
S2、将步骤S1所述水泥浆液在2MPa条件下浇铸在模具中，浇铸1分钟，将所得模型在37℃、100％相对湿度的条件下固化3天，得样品；
S3、将步骤S2所述样品在纯水中浸泡3天，每12小时更换一次水，然后在100℃下干燥12小时，得多孔支架。
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