CN111766288B - 一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法 - Google Patents

一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111766288B
CN111766288B CN202010571487.4A CN202010571487A CN111766288B CN 111766288 B CN111766288 B CN 111766288B CN 202010571487 A CN202010571487 A CN 202010571487A CN 111766288 B CN111766288 B CN 111766288B
Authority
CN
China
Prior art keywords
nico
solution
oxygen
concentration
electrode
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010571487.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111766288A (zh
Inventor
魏琴
杨磊
杜宇
杨兴龙
刘蕾
任祥
张诺
胡丽华
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of Jinan
Original Assignee
University of Jinan
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University of Jinan filed Critical University of Jinan
Priority to CN202010571487.4A priority Critical patent/CN111766288B/zh
Publication of CN111766288A publication Critical patent/CN111766288A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111766288B publication Critical patent/CN111766288B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/416—Systems
    • G01N27/48—Systems using polarography, i.e. measuring changes in current under a slowly-varying voltage
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
    • G01N21/76—Chemiluminescence; Bioluminescence
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/28—Electrolytic cell components
    • G01N27/30—Electrodes, e.g. test electrodes; Half-cells
    • G01N27/327—Biochemical electrodes, e.g. electrical or mechanical details for in vitro measurements
    • G01N27/3275—Sensing specific biomolecules, e.g. nucleic acid strands, based on an electrode surface reaction
    • G01N27/3277—Sensing specific biomolecules, e.g. nucleic acid strands, based on an electrode surface reaction being a redox reaction, e.g. detection by cyclic voltammetry
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/28—Electrolytic cell components
    • G01N27/30—Electrodes, e.g. test electrodes; Half-cells
    • G01N27/327—Biochemical electrodes, e.g. electrical or mechanical details for in vitro measurements
    • G01N27/3275—Sensing specific biomolecules, e.g. nucleic acid strands, based on an electrode surface reaction
    • G01N27/3278—Sensing specific biomolecules, e.g. nucleic acid strands, based on an electrode surface reaction involving nanosized elements, e.g. nanogaps or nanoparticles
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57407—Specifically defined cancers
    • G01N33/57423—Specifically defined cancers of lung
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Electrochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Plasma & Fusion (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)

Abstract

本发明涉及一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法，属于新型纳米材料领域与生物传感技术领域；本发明以N‑(4‑氨丁基)‑N‑乙基异鲁米诺(ABEI)作为还原剂制备钯功能化富氧空位NiCo2O4（ABEI@Pd/NiCo2O4）作为传感基底，研制一种免疫传感器并应用于非小细胞肺癌疾病标志物CYFRA 21‑1的实际样品检测，通过硼氢化钠常温还原法制得富氧空位NiCo2O4，高浓度氧空位可改善NiCo2O4电子结构，增强其电子迁移率，富氧空位NiCo2O4具有更加优异的电化学活性，可高效催化电解液中的溶解氧O2转化为超氧阴离子自由基O2 •−，从而增强ABEI与O2 •−之间的电致化学发光反应实现信号高效稳定输出，该传感器检出限至20 pg/mL，线性范围50 pg/mL‑50 ng/mL，在非小细胞肺癌早期诊断中具有明显的潜在应用价值。

Description

一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法
技术领域
本发明属于新型纳米材料领域与生物传感技术领域。
背景技术
CYFRA 21-1是细胞角蛋白19的可溶性片段，被认为是一种主要用于检测肺癌的肿瘤标记物，尤其对非小细胞肺癌的诊断具有重要价值。如果肺部存在不清晰的环形阴影，同时血清CYFRA21-1浓度高于30 ng/mL，原发性支气管肺癌的可能性非常高，各类非小细胞肺癌阳性检出率为70%～85%，CYFRA21-1的血清浓度水平高低与肿瘤临床分期正相关，也可作为肺癌手术和放化疗后追踪早期复发的有效指标，CYFRA 21-1的血清高浓度水平提示疾病处于进展期和预后不良，质量成功的标志是CYFRA 21-1的血清浓度迅速下降，反之则表示病灶未完全清除，CYFRA 21-1对各型肺癌诊断的敏感性依次为：鳞癌>腺癌>大细胞癌>小细胞癌。到目前为止，只有荧光法、电化学分析、色谱分析等几种分析方法得到了发展。因此，发展一种简单、快速、准确的测定方法，对于CYFRA 21-1的即时检测具有重要意义。
作为一门由生物、化学、医学、电子技术等多种学科相互交叉而兴起的研究热点，电致化学发光免疫分析是电致化学发光技术与免疫分析方法的有机结合，制得的免疫传感器具有成本低、选择性好、灵敏度高、分析速度快，易于自动化、微型化与集成化等优点，已被广泛应用于疾病标志物分析、食品安全分析、环境污染分析等领域。
近年来，鲁米诺-溶解氧与ABEI-溶解氧体系得到越来越多的关注。与传统的鲁米诺-过氧化氢体系相比，溶解氧作为共反应剂具有无生物毒性、廉价易得等优点，可以避免以过氧化氢作为共反应剂时引起的生理活性丧失等弊端，目前已在抗原抗体等生物检测中得到越来越广泛的应用与研究。尽管如此，ABEI-溶解氧体系也存在一定局限性，其发光性能并不理想，从而也限制了其在电致化学发光传感器中应用。为此，本发明通过硼氢化钠常温还原法制得富氧空位NiCo2O4，高浓度氧空位可改善NiCo2O4电子结构，增强其电子迁移率，富氧空位NiCo2O4具有更加优异的电化学活性，可高效催化电解液中的溶解氧O2转化为超氧阴离子自由基O2 •−，从而大大增强ABEI与O2 •−之间的电致化学发光反应，实现信号高效稳定输出。
发明内容
本发明的任务之一是为了拓宽ABEI-溶解氧体系在电致化学发光传感的应用，提出一种基于富氧空位NiCo2O4增强ABEI与溶解氧之间电致化学发光反应的方法，该方法可显著增强ABEI-溶解氧体系的发光效率，大大提升了该体系在免疫传感中的应用；
本发明的技术任务之二是弥补现有CYFRA 21-1检测技术的不足，提供一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光免疫传感器的用途，该传感器能够快速检测CYFRA 21-1，具有灵敏度高、特异性强、重现性好的优点，检出限为20 pg/mL，线性范围50 pg/mL-50 ng/mL。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
1. 一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）ABEI@Pd/NiCo2O4溶液按以下步骤制备：
首先，将摩尔质量为0.24 ~ 0.48 mol的尿素溶解于300 mL去离子水中配成溶液，加热至80 ~ 100 °C，然后，称取一定摩尔比的六水合硝酸镍与六水合硝酸钴溶于200 ~400 mL去离子水中，使得混合溶液中的金属离子浓度为0.06 mol/L，随后将尿素溶液逐滴加入上述混合溶液中，持续搅拌0.5 ~ 1.5 h，将得到的混合溶液放置在80 ~ 100 °C下，老化24 ~ 48 h，然后将所得固体抽滤洗涤3次，在60 °C下干燥6 h，将所得固体在400 ~ 600°C下煅烧4 h得到NiCo2O4纳米线，取质量为80 ~ 100 mg的产品溶于体积为10 mL的超纯水中配成浓度为2 ~ 4 mg/mL的NiCo2O4溶液，随后加入10 mol/L的硼氢化钠溶液，超声3 ~ 6h后，离心分离，洗涤干燥后，制得富氧空位NiCo2O4纳米线；
称取50 ~ 80 mg富氧空位NiCo2O4纳米线溶于25 ~ 40 mL超纯水中，加入体积为3~ 6 mL、浓度为10 mmol/L的四氯合钯（II）酸溶液超声处理5 ~ 20 min，随后加入5 ~ 10mL、浓度为1 mmol/L的ABEI溶液，震荡0.5 ~ 2 h后，老化处理2 ~ 3 h，将溶液中的固体离心分离，70 °C下真空干燥12 h得到ABEI@Pd/NiCo2O4固体；
（2）将直径为4 mm的玻碳电极依次用1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm氧化铝抛光粉抛光处理，用超纯水冲洗干净；
（3）在玻碳电极表面滴涂6 μL、浓度为2 ~ 4 mg/mL的ABEI@Pd/NiCo2O4溶液为传感基底，将其置于37 °C晾干；
（4）滴加6 μL、浓度为100 μg/mL的CYFRA 21-1抗体溶液，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（5）滴加3 μL、质量分数为1 ~ 3%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（6）滴加6 μL、一定浓度的 CYFRA 21-1标准溶液，37 °C下孵化0.5 ~ 2 h，用pH7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干，传感器构建完毕。
本发明的有益成果
（1）由于ABEI-溶解氧体系发光效率低，在电致化学发光领域的应用受到了限制，本发明首次提出一种富氧空位NiCo2O4促进ABEI-溶解氧体系电致化学发光性能的方法，富氧空位NiCo2O4具有更加优异的电化学活性，可高效催化电解液中的溶解氧O2转化为超氧阴离子自由基O2 •−，从而大大增强ABEI与O2 •−之间的电致化学发光反应，有助于ABEI-溶解氧体系在电致化学发光领域的进一步应用与研究；
（2）本发明基于富氧空位NiCo2O4促进ABEI-溶解氧电致化学发光原理提出了一种精准可靠的免疫传感技术。弥补了现有电化学检测技术操作复杂、灵敏度低、重现差的问题，将该技术应用于CYFRA 21-1的样品检测，检出限为20 pg/mL，线性范围50 pg/mL-50ng/mL，具有响应速度快、灵敏度高、重现好、制备简单、成本低、绿色环保的优点。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明，应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
实施例1.一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将直径为4 mm的玻碳电极依次用1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm氧化铝抛光粉抛光处理，用超纯水冲洗干净；
（2）在玻碳电极表面滴涂6 μL、浓度为2 mg/mL的ABEI@Pd/NiCo2O4溶液为传感基底，将其置于37 °C晾干；
（3）滴加6 μL、浓度为100 μg/mL的CYFRA 21-1抗体溶液，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（4）滴加3 μL、质量分数为1 %的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（5）滴加6 μL、一定浓度的 CYFRA 21-1标准溶液，37 °C下孵化0.5 ~ 2 h，用pH7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干，传感器构建完毕。
实施例2. 一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将直径为4 mm的玻碳电极依次用1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm氧化铝抛光粉抛光处理，用超纯水冲洗干净；
（2）在玻碳电极表面滴涂6 μL、浓度为3 mg/mL的ABEI@Pd/NiCo2O4溶液为传感基底，将其置于37 °C晾干；
（3）滴加6 μL、浓度为100 μg/mL的CYFRA 21-1抗体溶液，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（4）滴加3 μL、质量分数为2%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（5）滴加6 μL、一定浓度的 CYFRA 21-1标准溶液，37 °C下孵化0.5 ~ 2 h，用pH7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干，传感器构建完毕。
实施例3. 一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将直径为4 mm的玻碳电极依次用1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm氧化铝抛光粉抛光处理，用超纯水冲洗干净；
（2）在玻碳电极表面滴涂6 μL、浓度为4 mg/mL的ABEI@Pd/NiCo2O4溶液为传感基底，将其置于37 °C晾干；
（3）滴加6 μL、浓度为100 μg/mL的CYFRA 21-1抗体溶液，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（4）滴加3 μL、质量分数为3%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（5）滴加6 μL、一定浓度的 CYFRA 21-1标准溶液，37 °C下孵化0.5 ~ 2 h，用pH7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干，传感器构建完毕。
实施例4.所述ABEI@Pd/NiCo2O4溶液，按以下步骤制备：
首先，将摩尔质量为0.24 mol的尿素溶解于300 mL去离子水中配成溶液，加热至80 °C，然后，称取一定摩尔比的六水合硝酸镍与六水合硝酸钴溶于200 mL去离子水中，使得混合溶液中的金属离子浓度为0.06 mol/L，随后将尿素溶液逐滴加入上述混合溶液中，持续搅拌0.5 h，将得到的混合溶液放置在80 °C下，老化24 h，然后将所得固体抽滤洗涤3次，在60 °C下干燥6 h，将所得固体在400 °C下煅烧4 h得到NiCo2O4纳米线，取质量为80 ~100 mg的产品溶于体积为10 mL的超纯水中配成浓度为2 mg/mL的NiCo2O4溶液，随后加入10mol/L的硼氢化钠溶液，超声3 h后，离心分离，洗涤干燥后，制得富氧空位NiCo2O4纳米线；
称取50 mg富氧空位NiCo2O4纳米材料溶于25 mL超纯水中，加入体积为3 mL、浓度为10 mmol/L的四氯合钯（II）酸溶液超声处理5 min，随后加入5 mL、浓度为1 mmol/L的ABEI溶液，震荡0.5 h后，老化处理2 h，将溶液中的固体离心分离，70 °C下真空干燥12 h得到ABEI@Pd/NiCo2O4固体。
实施例5. 所述ABEI@Pd/NiCo2O4溶液，按以下步骤制备：
首先，将摩尔质量为0.36 mol的尿素溶解于300 mL去离子水中配成溶液，加热至90 °C，然后，称取一定摩尔比的六水合硝酸镍与六水合硝酸钴溶于300 mL去离子水中，使得混合溶液中的金属离子浓度为0.06 mol/L，随后将尿素溶液逐滴加入上述混合溶液中，持续搅拌1 h，将得到的混合溶液放置在90 °C下，老化36 h，然后将所得固体抽滤洗涤3次，在60 °C下干燥6 h，将所得固体在500 °C下煅烧4 h得到NiCo2O4纳米线，取质量为90 mg的产品溶于体积为10 mL的超纯水中配成浓度为3 mg/mL的NiCo2O4溶液，随后加入10 mol/L的硼氢化钠溶液，超声5 h后，离心分离，洗涤干燥后，制得富氧空位NiCo2O4纳米线；
称取70 mg富氧空位NiCo2O4纳米材料溶于30 mL超纯水中，加入体积为5 mL、浓度为10 mmol/L的四氯合钯（II）酸溶液超声处理10 min，随后加入7 mL、浓度为1 mmol/L的ABEI溶液，震荡1 h后，老化处理2.5 h，将溶液中的固体离心分离，70 °C下真空干燥12 h得到ABEI@Pd/NiCo2O4固体。
实施例6.所述ABEI@Pd/NiCo2O4溶液，按以下步骤制备：
首先，将摩尔质量为0.48 mol的尿素溶解于300 mL去离子水中配成溶液，加热至100 °C，然后，称取一定摩尔比的六水合硝酸镍与六水合硝酸钴溶于300 mL去离子水中，使得混合溶液中的金属离子浓度为0.06 mol/L，随后将尿素溶液逐滴加入上述混合溶液中，持续搅拌1.5 h，将得到的混合溶液放置在100 °C下，老化48 h，然后将所得固体抽滤洗涤3次，在60 °C下干燥6 h，将所得固体在600 °C下煅烧4 h得到NiCo2O4纳米线，取质量为100mg的产品溶于体积为10 mL的超纯水中配成浓度为4 mg/mL的NiCo2O4溶液，随后加入10mol/L的硼氢化钠溶液，超声6 h后，离心分离，洗涤干燥后，制得富氧空位NiCo2O4纳米线；
称取80 mg富氧空位NiCo2O4纳米材料溶于40 mL超纯水中，加入体积为6 mL、浓度为10 mmol/L的四氯合钯（II）酸溶液超声处理20 min，随后加入10 mL、浓度为1 mmol/L的ABEI溶液，震荡2 h后，老化处理3 h，将溶液中的固体离心分离，70 °C下真空干燥12 h得到ABEI@Pd/NiCo2O4固体。

Claims (1)

1.一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）ABEI@Pd/NiCo2O4溶液按以下步骤制备：
首先，将摩尔质量为0.24 ~ 0.48 mol的尿素溶解于300 mL去离子水中配成溶液，加热至80 ~ 100 °C，然后，称取一定摩尔比的六水合硝酸镍与六水合硝酸钴溶于200 ~ 400 mL去离子水中，使得混合溶液中的金属离子浓度为0.06 mol/L，随后将尿素溶液逐滴加入上述混合溶液中，持续搅拌0.5 ~ 1.5 h，将得到的混合溶液放置在80 ~ 100 °C下，老化24 ~48 h，然后将所得固体抽滤洗涤3次，在60 °C下干燥6 h，将所得固体在400 ~ 600 °C下煅烧4 h得到NiCo2O4纳米线，取质量为80 ~ 100 mg的产品溶于体积为10 mL的超纯水中配成浓度为2 ~ 4 mg/mL的NiCo2O4溶液，随后加入10 mol/L的硼氢化钠溶液，超声3 ~ 6 h后，离心分离，洗涤干燥后，制得富氧空位NiCo2O4纳米线；
称取50 ~ 80 mg富氧空位NiCo2O4纳米线溶于25 ~ 40 mL超纯水中，加入体积为3 ~ 6mL、浓度为10 mmol/L的四氯合钯（II）酸溶液超声处理5 ~ 20 min，随后加入5 ~ 10 mL、浓度为1 mmol/L的ABEI溶液，震荡0.5 ~ 2 h后，老化处理2 ~ 3 h，将溶液中的固体离心分离，70 °C下真空干燥12 h得到ABEI@Pd/NiCo2O4固体；
（2）将直径为4 mm的玻碳电极依次用1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm氧化铝抛光粉抛光处理，用超纯水冲洗干净；
（3）在玻碳电极表面滴涂6 μL、浓度为2 ~ 4 mg/mL的ABEI@Pd/NiCo2O4溶液为传感基底，将其置于37 °C晾干；
（4）滴加6 μL、浓度为100 μg/mL的CYFRA 21-1抗体溶液，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（5）滴加3 μL、质量分数为1 ~ 3%的牛血清白蛋白溶液，以封闭电极表面的非特异性活性位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干；
（6）滴加6 μL、一定浓度的 CYFRA 21-1标准溶液，37 °C下孵化0.5 ~ 2 h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液PBS冲洗电极表面，将其置于4 °C晾干，传感器构建完毕。
CN202010571487.4A 2020-06-22 2020-06-22 一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法 Active CN111766288B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010571487.4A CN111766288B (zh) 2020-06-22 2020-06-22 一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010571487.4A CN111766288B (zh) 2020-06-22 2020-06-22 一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111766288A CN111766288A (zh) 2020-10-13
CN111766288B true CN111766288B (zh) 2022-10-28

Family

ID=73451154

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010571487.4A Active CN111766288B (zh) 2020-06-22 2020-06-22 一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111766288B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113559880B (zh) * 2021-07-30 2023-09-01 曲阜师范大学 一种Pd@NiCo2O4双功能纳米仿酶及其制备方法与应用

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104297478B (zh) * 2014-09-09 2015-12-30 济南大学 一种基于酸中心复合物的免疫传感器的制备方法及应用
CN106248656B (zh) * 2016-08-22 2018-11-23 福建师范大学 一种基于纳米NiCo2O4@AD双功能催化剂的电化学发光免疫传感器的制备方法及应用
CN110031529B (zh) * 2019-05-18 2021-07-13 福建师范大学 一种基于NiCo2O4纳米片的热致增敏型甲状腺球蛋白电致化学发光免疫传感器
CN110455786B (zh) * 2019-08-26 2021-08-20 济南大学 一种基于CeO2@SnS2促进鲁米诺电致化学发光传感器的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN111766288A (zh) 2020-10-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11073517B1 (en) Method for preparing nanohybrid used for ratiometric fluorescence and ratiometric electrochemical sensing simultaneously
CN110220888B (zh) 一种三联吡啶钌功能化mof的电化学发光传感器的制备方法
Wang et al. Copper-doped terbium luminescent metal organic framework as an emitter and a co-reaction promoter for amplified electrochemiluminescence immunoassay
Liu et al. Core–shell Fe3O4–Au magnetic nanoparticles based nonenzymatic ultrasensitive electrochemiluminescence immunosensor using quantum dots functionalized graphene sheet as labels
CN111766289B (zh) 一种基于富氧空位CeO2电致化学发光免疫传感器的制备方法
CN109444403B (zh) 一种基于Ru(bpy)32+/Zn-oxalate的免疫传感器的制备方法
CN108896638B (zh) 一种基于二氧化钛掺杂石墨烯负载海参状金钯核壳纳米粒子的免疫传感器的制备方法及应用
CN110687175B (zh) 一种基于二氧化铈和纳米银双增强苝四羧酸发光的电化学发光传感器的构建方法
CN108226252B (zh) 一种检测乳腺癌的电流型免疫传感器的制备方法及应用
CN110455786B (zh) 一种基于CeO2@SnS2促进鲁米诺电致化学发光传感器的制备方法
CN111208178A (zh) 一种基于钴基金属有机框架物双重放大苝四羧酸信号构建电化学发光传感器的方法
Zhong et al. Dual-wavelength responsive photoelectrochemical aptasensor based on ionic liquid functionalized Zn-MOFs and noble metal nanoparticles for the simultaneous detection of multiple tumor markers
Liao et al. Ratiometric electrochemical immunosensor triggered by an advanced oxidation process for the ultrasensitive detection of carcinoembryonic antigen
CN111766288B (zh) 一种基于富氧空位NiCo2O4电致化学发光传感器的制备方法
CN111766290B (zh) 一种基于三维碳化钛-二硫化钼复合物生物传感器的制备方法
CN104297478A (zh) 一种基于酸中心复合物的免疫传感器的制备方法及应用
CN111766282B (zh) 一种基于尖晶石型锌铁氧体的竞争型光电化学免疫传感器的制备方法及应用
CN108982629B (zh) 一种利用双检测方法相互验证的电流型免疫传感器的制备方法及应用
CN111337557A (zh) 一种基于CeO2@MnO2的免疫传感器的制备方法及应用
CN106770530A (zh) 一种鳞状细胞癌标志物夹心型免疫传感器的制备方法及应用
CN112630278B (zh) 一种检测神经元特异性烯醇化酶的夹心型电化学免疫传感器的制备方法及应用
CN111830101B (zh) 一种掺杂二茂铁甲酸的ZIF-8猝灭RuSi纳米微粒检测降钙素原的电化学发光传感器
CN111766281B (zh) 一种基于尖晶石型锰铁氧体的夹心型光电化学免疫传感器及其制备方法
Wang et al. Electrochemiluminescence immunosensor based on Cu3 (PO4) 2 hybrid nanoflowers as a novel luminophore for the sensitive detection of prostate-specific antigen
CN110441372B (zh) 以多金属氧酸盐为电子供体的羟基氧化铁复合材料光电化学传感器的制备方法及应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant