CN111732644B - 抗白粉病相关蛋白Pm41及其编码基因与应用 - Google Patents

抗白粉病相关蛋白Pm41及其编码基因与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111732644B
CN111732644B CN201910212575.2A CN201910212575A CN111732644B CN 111732644 B CN111732644 B CN 111732644B CN 201910212575 A CN201910212575 A CN 201910212575A CN 111732644 B CN111732644 B CN 111732644B
Authority
CN
China
Prior art keywords
wheat
powdery mildew
sequence
cnl
leu
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201910212575.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111732644A (zh
Inventor
刘志勇
李淼淼
王振忠
李贝贝
董玲丽
陆平
吴秋红
陈永兴
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Genetics and Developmental Biology of CAS
Original Assignee
Institute of Genetics and Developmental Biology of CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Genetics and Developmental Biology of CAS filed Critical Institute of Genetics and Developmental Biology of CAS
Priority to CN201910212575.2A priority Critical patent/CN111732644B/zh
Publication of CN111732644A publication Critical patent/CN111732644A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111732644B publication Critical patent/CN111732644B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
    • C12N15/8282—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for fungal resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明公开了抗白粉病相关蛋白Pm41及其编码基因与应用。抗白粉病相关蛋白Pm41的氨基酸序列如序列表中序列3所示。本发明的发明人将Pm41基因转化普通小麦材料Fielder，然后自交2代，得到5个CNL互补转基因T2家系；将Pm41基因转化普通小麦材料Fielder，然后自交2代，得到5个CNL基因过表达T2家系；采用小麦苗期白粉病抗性鉴定方法检测白粉病抗性。结果表明，5个CNL互补转基因T2家系和5个CNL基因过表达T2家系均表现为高抗或免疫白粉病。由此可见，利用本发明提供的蛋白质Pm41及其编码基因能提高小麦的白粉病抗性。本发明具有重要的应用价值。

Description

抗白粉病相关蛋白Pm41及其编码基因与应用
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及抗白粉病相关蛋白Pm41及其编码基因与应用。
背景技术
小麦是全世界广泛种植的重要粮食作物。白粉病的发生严重危害小麦产量和品质。生产实践证明，选育和推广抗病品种是防治小麦白粉病最为经济、安全和环保的措施。然而，新的白粉菌致病生理小种不断出现，导致许多抗白粉病基因降低或丧失抗性。因此需要不断挖掘和克隆新的抗白粉病基因，丰富抗白粉病基因资源，培育具有持久广谱抗病的小麦品种。
目前已经从小麦及其近缘种属种鉴定并正式命名64个抗白粉病基因(Pm1-Pm64)。根据来源不同，大致可以划分为三类：一是普通小麦，如Pm1a和Pm3；二是小麦近缘种，如野生二粒小麦的Pm26和Pm36；三是小麦近缘属，如簇毛麦的Pm21和Pm55。截止目前，仅有Pm2，Pm3，Pm60和Pm21四个基因通过图位克隆或者突变体测序技术被克隆，绝大部分仅处于基因定位阶段。
野生二粒小麦(2n＝4x＝28，AABB)是四倍体和六倍体小麦的祖先，起源于中东“新月沃土”地区，广泛分布于以色列、叙利亚、黎巴嫩和土耳其等地区。野生二粒小麦经历长期复杂的环境演变，积累丰富的遗传多样性，对小麦白粉病具有良好抗性。从野生二粒小麦中已经定位了16个抗白粉病基因(包括Pm16、Pm26、Pm30、Pm36、Pm41、Pm42、Pm64、MlZec1、MlIW72、PmG16、Ml3D232、MlIW170、PmAs846、PmG3M、MlIW172和MlWE30)，然而均未被克隆。
Pm41是一个来源于野生二粒小麦的抗白粉病基因。抗白粉病亲本TZ-2在苗期和成株期均高抗白粉病，遗传分析发现其受显性单基因控制。通过开发分子标记，将其定位在3BL染色体上标记BE489472和Xwmc687之间2.7cM的遗传区间，并正式命名为Pm41；此后，利用比较基因组学方法将Pm41进一步定位于标记XWGGC1505和XWGGC1507之间0.6cM的遗传区间，并找到与其共分离的分子标记XWGGC1506。多年抗性鉴定表明Pm41是一个优异抗白粉病的基因，必将为我国小麦抗白粉病育种提供新抗源。
发明内容
本发明的目的是如何抗小麦白粉病。
本发明首先保护一种抗小麦白粉病相关蛋白，名称为蛋白质Pm41，来源于野生二粒小麦(具体为抗白粉病亲本TZ-2)，可为如下a1)或a2)或a3)或a4)：
a1)氨基酸序列是序列表中序列3所示的蛋白质；
a2)在序列表中序列3所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质；
a3)将a1)或a2)所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与小麦抗病性相关的蛋白质；
a4)与序列表中序列3限定的氨基酸序列具有80％或80％以上同源性，来源于野生二粒小麦(具体为抗白粉病亲本TZ-2)且与小麦抗病性相关的蛋白质。
其中，序列表中序列3由984个氨基酸残基组成。
为了使a1)中的蛋白质便于纯化，可在序列表中序列3所示的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。
表1.标签的序列
标签 残基 序列
Poly-Arg 5-6(通常为5个) RRRRR
Poly-His 2-10(通常为6个) HHHHHH
FLAG 8 DYKDDDDK
Strep-tag II 8 WSHPQFEK
c-myc 10 EQKLISEEDL
上述a3)中的蛋白质Pm41，所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。
上述a3)中的蛋白质Pm41可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。
上述a3)中的蛋白质Pm41的编码基因可通过将序列表中序列2所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变，和/或在其5′端和/或3′端连上表1所示的标签的编码序列得到。
上述a4)中，使用的术语“同源性”指与天然氨基酸序列的序列相似性。“同源性”包括与本发明的序列表中序列3所示的氨基酸序列具有80％，或85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同源性的氨基酸序列。
编码所述蛋白质Pm41的核酸分子也属于本发明的保护范围。
所述编码蛋白质Pm41的核酸分子可为如下b1)或b2)或b3)或b4)或b5)所示的DNA分子：
b1)编码区是序列表中序列2所示的DNA分子；
b2)核苷酸序列是序列表中序列2所示的DNA分子；
b3)核苷酸序列是序列表中序列1所示的DNA分子；
b4)与b1)或b2)或b3)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同源性，来源于野生二粒小麦(具体为抗白粉病亲本TZ-2)且编码所述蛋白质Pm41的DNA分子；
b5)在严格条件下与b1)或b2)或b3)限定的核苷酸序列杂交，且编码所述蛋白质Pm41的DNA分子。
其中，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA或hnRNA等。所述核酸分子可为编码所述蛋白质Pm41的基因及其调控序列形成的核酸分子。
其中，序列表中序列2由2955个核苷酸组成，序列表中序列2所示的核苷酸编码序列表中序列3所示的氨基酸序列。
本领域普通技术人员可以很容易地采用已知的方法，例如定向进化和点突变的方法，对本发明的编码蛋白质Pm41的核苷酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，具有与本发明分离得到的蛋白质Pm41的核苷酸序列75％或者更高同源性的核苷酸，只要编码蛋白质Pm41且与小麦抗病性相关，均是衍生于本发明的核苷酸序列并且等同于本发明的序列。这里使用的术语“同源性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同源性”包括与本发明的编码序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质的核苷酸序列具有75％或更高，80％或更高，或85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同源性的核苷酸序列。
含有所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系也属于本发明的保护范围。
所述重组载体可为将编码所述蛋白质Pm41的核酸分子(即序列表中序列2所示的DNA分子)通过含有编码所述蛋白质Pm41的核酸分子的表达盒插入出发质粒得到的重组质粒。
所述重组载体具体可为实施例中提及的重组质粒pCAMBIA1300-CNL或重组质粒pTPCK303-CNL。所述重组质粒pCAMBIA1300-CNL中，Pm41基因由其自身启动子(序列表中序列1自5’末端起第1-5043位所示)驱动。所述重组质粒pTPCK303-CNL中，Pm41基因由玉米的Ubiquitin启动子驱动。
所述重组微生物可通过将所述重组载体导入出发微生物得到。
所述出发微生物可为酵母、细菌、藻类或真菌。所述细菌可为革兰氏阳性细菌或革兰氏阴性细菌。所述革兰氏阴性细菌可为根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)。所述根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)具体可为根癌农杆菌EHA105。
所述重组微生物具体可为EHA105/pCAMBIA1300-CNL或EHA105/pTPCK303-CNL。EHA105/pCAMBIA1300-CNL是将所述重组质粒pCAMBIA1300-CNL转化根癌农杆菌EHA105得到的重组农杆菌。
EHA105/pTPCK303-CNL是将所述重组质粒pTPCK303-CNL转化根癌农杆菌EHA105得到的重组农杆菌。
所述转基因植物细胞系均不包括繁殖材料。所述转基因植物理解为不仅包含将所述Pm41基因转化受体植物得到的第一代转基因植物，也包括其子代。对于转基因植物，可以在该物种中繁殖该基因，也可用常规育种技术将该基因转移进入相同物种的其它品种，特别包括商业品种中。所述转基因植物包括种子、愈伤组织、完整植株和细胞。
本发明还保护所述蛋白质Pm41，或，编码所述蛋白质Pm41的核酸分子，或，含有编码所述蛋白质Pm41的核酸分子的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系，的应用；所述应用可为D1)或D2)：
D1)调控小麦抗病性；
D2)培育具有抗病性的转基因小麦。
本发明还保护一种培育转基因小麦的方法，可包括向受体小麦中导入提高所述蛋白质Pm41表达和/或活性的物质，得到转基因小麦的步骤；与所述受体小麦相比，所述转基因小麦的抗病性提高。
上述方法中，所述“向受体小麦中导入提高所述蛋白质Pm41表达和/或活性的物质”可通过向受体小麦中导入编码所述蛋白质Pm41的核酸分子实现。
上述方法中，所述编码蛋白质Pm41的核酸分子可为如下b1)或b2)或b3)或b4)或b5)所示的DNA分子：
b1)编码区是序列表中序列2所示的DNA分子；
b2)核苷酸序列是序列表中序列2所示的DNA分子；
b3)核苷酸序列是序列表中序列1所示的DNA分子；
b4)与b1)或b2)或b3)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同源性，来源于野生二粒小麦(具体为抗白粉病亲本TZ-2)且编码所述蛋白质Pm41的DNA分子；
b5)在严格条件下与b1)或b2)或b3)限定的核苷酸序列杂交，且编码所述蛋白质Pm41的DNA分子。
其中，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA或hnRNA等。所述核酸分子可为编码所述蛋白质Pm41的基因及其调控序列形成的核酸分子。
其中，序列表中序列2由2955个核苷酸组成，序列表中序列2所示的核苷酸编码序列表中序列3所示的氨基酸序列。
上述方法中，使用的术语“同源性”指与天然核酸序列的序列相似性。“同源性”包括与本发明的编码序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质的核苷酸序列具有75％或更高，80％或更高，或85％或更高，或90％或更高，或95％或更高同源性的核苷酸序列。
上述方法中，所述“向受体小麦中导入编码所述蛋白质Pm41的核酸分子”可通过向受体植物中导入重组载体实现；所述重组载体可为向表达载体插入编码所述蛋白质Pm41的核酸分子得到的重组质粒。
所述重组载体具体可为实施例中提及的重组质粒pCAMBIA1300-CNL或重组质粒pTPCK303-CNL。
本发明还保护一种小麦育种方法，可包括如下步骤：增加小麦中所述蛋白质Pm41的含量和/或活性，从而提高小麦的抗病性。
上述植物育种方法中，所述“增加小麦中所述蛋白质Pm41的含量和/或活性”可通过多拷贝、改变启动子、调控因子、转基因等本领域熟知的方法，达到增加植物中所述蛋白质Pm41的含量和/或活性的效果。
上述任一所述小麦可为c1)至c3)中的任一种：c1)普通小麦品种Fielder；c2)感白粉病亲本Langdon；c3)抗白粉病亲本TZ-2。
上述任一所述抗病性可为抗白粉菌引起的病害。
上述任一所述白粉菌具体可为白粉菌生理小种E09。
上文中，同源性可以用肉眼或计算机软件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同源性可以用百分比(％)表示，其可以用来评价相关序列之间的同源性。
本发明的发明人将EHA105/pCAMBIA1300-CNL转化高感白粉病的普通小麦材料Fielder，然后自交2代，得到5个CNL互补转基因T2家系；将EHA105/pTPCK303-CNL转化高感白粉病的普通小麦材料Fielder，然后自交2代，得到5个CNL基因过表达T2家系。采用小麦苗期白粉病抗性鉴定方法检测5个CNL互补转基因T2家系、5个CNL基因过表达T2家系和Fielder的白粉病抗性。结果表明，5个CNL互补转基因T2家系和5个CNL基因过表达T2家系均表现为高抗或免疫白粉病。由此可见，利用本发明提供的蛋白质Pm41及其编码基因能提高小麦的白粉病抗性。本发明具有重要的应用价值。
附图说明
图1为检测TZ-2、Langdon和“TZ-2和Langdon的杂交F1代”对白粉菌的抗性。
图2为Pm41基因高密度遗传连锁图谱构建。
图3为CNL基因的表达分析。
图4为CNL基因互补和过表达载体示意图及其转基因T2家系的分子鉴定和白粉病抗性鉴定。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。
以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
下述实施例中，小麦苗期白粉病抗性鉴定方法具体参考如下文献：liu ZY，SunQX，Ni ZF，Yang TM(1999)Development of SCArmarkers linked to the Pm21geneconferring resistance to powdery mildew in common wheat.Plant Breeding 118：215-219。
抗白粉病亲本TZ-2、感白粉病亲本Langdon和白粉菌生理小种E09均记载于如下文献中：Wang ZZ，Cui Y，Chen YX(2014)Comparative genetic mapping and genomicregion collinearity analysis of the powdery mildew resistancegenePm41.Theoretical and Applied Genetics，127:1741-1751。文献中的IW2与本文中的抗白粉病亲本TZ-2是同一材料。在下文中，抗白粉病亲本TZ-2简称TZ-2，感白粉病亲本Langdon简称Langdon，白粉菌生理小种E09为简称白粉菌。
普通小麦品种Fielder为转基因受体材料。普通小麦品种Fielder为高感白粉病的小麦品种。在下文中，普通小麦品种Fielder简称Fielder。
pCAMBIA1300质粒为构建互补转基因载体的基础载体，购买于生化试剂公司，采用限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ进行双酶切，然后利用同源重组方法构建互补转基因载体。
pTPCK303质粒为构建过表达转基因载体的基础载体，购买于生化试剂公司，采用限制性内切酶KpnⅠ和SpeⅠ进行双酶切，然后利用同源重组方法构建过表达转基因载体。
下述实施例中涉及的引物的名称及其核苷酸序列详见表1。
表1
Figure BDA0002000992550000071
实施例1、小麦抗白粉病基因Pm41(以下简称Pm41基因)高密度遗传连锁图谱构建
1、以TZ-2为父本，Langdon为母本进行杂交，得到杂交F1代。
2、完成步骤1后，采用小麦苗期白粉病抗性鉴定方法检测TZ-2、Langdon或杂交F1代的白粉病抗性；采用考马斯亮蓝染色方法(记载于如下文献中：李健强，刘西莉和王红梅(2002)荧光素钠和考马斯亮蓝应用于小麦白粉病菌染色效果比较.菌物系统，21(4):592-596)检测TZ-2、Langdon或杂交F1代的白粉病抗性。
检测结果见图1(F1为杂交F1代，A为叶片接种白粉菌反应，B为白粉菌孢子染色)。结果表明，TZ-2和杂交F1代均抗白粉病，Langdon则高感白粉病。
3、取步骤1得到的杂交F1代，播种于大田，通过自交方式，得到2448个F2分离群体。
4、完成步骤3后，采用小麦苗期白粉病抗性鉴定方法检测来自于F2分离群体的F2:3家系的白粉病抗性。
5、完成步骤4后，从F2:3家系中挑选90个家系(包括45个纯合抗病家系和45个纯合感病家系)，分别在苗期接种白粉菌。接种后24h，将每个抗病家系采集等量叶片混合得到抗病混池，每个感病家系采集等量叶片混合得到感病混池，然后分别提取总RNA，构建转录组测序文库。
6、完成步骤5后，采用高通量测序平台Illumina HiSeq 2000分别对抗病混池和感病混池进行转录组双末端测序。测序原始数据采用小麦BSR-Seq基因定位技术进行分析。
7、完成步骤6后，根据分析结果开发了7个与Pm41紧密连锁的分子标记(见图2中B，相应的引物见表1中精细定位引物)。
8、完成步骤7后，利用文献(Wang ZZ，Cui Y，Chen YX(2014)Comparative geneticmapping and genomic region collinearity analysis of the powdery mildewresistance gene Pm41.Theoretical and Applied Genetics，127:1741-1751)报道的与Pm41基因紧密连锁且位于基因两侧的SSR标记Barc84和Barc77(引物序列见表1)筛选2448个F2分离群体，鉴定出交换单株。
9、完成步骤8后，采用新开发的7个与Pm41紧密连锁分子标记检测步骤8筛选得到的交换单株。用Mapmaker 3.0计算分子标记与Pm41基因的遗传距离。用Mapdraw V2.1软件绘制遗传连锁图谱。最终Pm41基因被定位于分子标记M171和M160之间0.08cM的遗传区间，其中分子标记M78和M97与Pm41基因共分离(见图2中B)。
实施例2、Pm41基因物理图谱构建
1、构建抗白粉病亲本TZ-2的BAC文库(记载于如下文献中：梁永.野生二粒小麦抗白粉病基因MlIW170物理图谱构建和粗山羊草2DS同源区域比较分析[D]；中国农业大学；2015年)。构建的抗白粉病亲本TZ-2的BAC文库共包含326,784个克隆，平均插入片段长度为120kb，约3×基因组覆盖度，含有HindIII酶切位点。BAC文库的阳性克隆被分装在851个384孔板中。将每个384孔板中的所有BAC克隆混合，混合后摇菌提取BAC质粒，建立一级筛选混池，共851个。将851个混池编号后，放置于10×10的100孔盒中，每个100孔盒中的每一个横排10个混合，每一个列池10个混合，混合后摇菌提取BAC质粒，建立了二级筛选混池，共176个。
2、完成步骤1后，在Pm41精细定位的基础上，利用定位区间两侧的分子标记开发特异性探针筛选抗白粉病亲本TZ-2的BAC文库，得到9个BAC阳性克隆(见图2中C，9个BAC阳性克隆分别为412O18、783K1、612H21、391A10、614D21、318M1、111C12、446G18和599A11)。
3、完成步骤2后，利用QIAGEN Large-Construct Kit试剂盒提取BAC阳性克隆的质粒，然后在Illumina Hi Seq2500PE250测序平台进行测序，拼接组装获得了2条Contigs，大小分别为140kb和350kb。利用TriAnnot平台进行基因注释(Leroy P，Guilhot N，Sakai H，et al(2012)TriAnnot：a versatile and high performance pipeline for theautomated annotation of plant genomes.Frontiers in Plant Science，3)，共获得6个基因，分别是TzRlpA基因(编码稀有脂蛋白酶A)、TzGNT基因(编码糖基转移酶)、TzCNL基因、TzHP1基因(编码假定蛋白1)、TzHP2基因(编码假定蛋白2)和TzHP3基因(编码假定蛋白3)(见图2中D)。
实施例3、CNL基因的表达分析
hpi(hour post inoculation)表示接种后的时间。
检测CNL基因或cnl基因的引物为表1中所示的41R-315。检测Actin基因的引物为表1中所示的Actin。
1、待TZ-2或Langdon长至2片叶时，利用白粉菌进行拂弹接种(记载于如下文献中：liu ZY，Sun QX，Ni ZF，Yang TM(1999)Development of SCArmarkers linked to thePm21gene conferring resistance to powdery mildew in common wheat.Plant Breed118:215-219)。
2、完成步骤1后，在0hpi、2hpi、4hpi、12hpi、18hpi、24hpi、36hpi、48hpi、60hpi和72hpi时间点分别取叶片，然后提取RNA，反转录，得到cDNA。
3、分别以步骤2得到的cDNA为模板，进行半定量检测。
半定量检测结果见图3中A(CNLTZ-2表示TZ-2中CNL基因，cnlLangdon表示Langdon中cnl基因，TaActin表示小麦内参Actin基因)。结果表明，接种白粉菌后10个时间点，TZ-2中能检测到CNL基因表达，Langdon中则一直不能检测到CNL基因表达。
4、分别以步骤2得到的cDNA为模板，进行实时荧光定量PCR检测。
实时荧光定量PCR检测结果见图3中B。结果表明，4hpi时CNL基因表达明显上调，12hpi时CNL基因的表达量达到最高峰；随后，CNL基因表达表现下调。因此，TZ-2中CNL基因能够受到白粉菌强烈的诱导表达。
实施例4、CNL基因的克隆
1、采用CNL-1(引物序列见表1)从BAC阳性克隆391A10的质粒中扩增CNL基因，测序拼接获得一个11730bp的核苷酸序列(如序列表中序列1所示)，基因结构预测发现包含有一个完整的CC-NBS-LRR类型的基因(见图2中E)。
2、取TZ-2接种白粉菌后24h的叶片，提取总RNA。
3、完成步骤2后，以TZ-2的总RNA反转录后cDNA为模板，采用CNL-2(引物序列见表1)进行PCR扩增。同时采用
Figure BDA0002000992550000101
RACE 5'/3'Kit RACE试剂盒对CNL基因的5'和3'末端进行扩增。最终获得一个3585bp的核苷酸序列。
4、将步骤3得到的核苷酸序列(3585bp)与步骤1得到的核苷酸序列(11730bp)进行比对。结果发现CNL基因具有两个外显子，11730bp的核苷酸序列包含基因编码区(序列表中序列1自5’末端起第5379-6206位和第6622-8748所示)、启动子区(序列表中序列1自5’末端起第1-5043位所示)、5'-UTR区(序列表中序列1自5’末端起第5044-5378位所示)和3'-UTR区(序列表中序列1自5’末端起第8749-9135位所示)，全长ORF区的核苷酸序列为2955bp。
CNL基因的编码区(2955bp)的核苷酸序列如序列表中序列2所示，编码序列表中序列3所示的CNL蛋白。
实施例5、CNL互补转基因T2家系和CNL基因过表达T2家系的获得与白粉病抗性鉴定
一、重组质粒的构建
1、重组质粒pCAMBIA1300-CNL的构建
(1)取pCAMBIA1300质粒，用限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ进行双酶切，回收约8900bp的载体骨架。
(2)以序列表中序列1所示的DNA片段为模板，采用41HB-1(见表1)进行PCR扩增，得到PCR扩增产物。
(3)利用pEASY-Uni Seamless Cloning and Assembly Kit(CU101-01)同源重组试剂盒将步骤(2)获得的PCR扩增产物和步骤(1)回收的载体骨架进行同源重组，得到重组质粒pCAMBIA1300-CNL(见图4中A)。重组质粒pCAMBIA1300-CNL中，CNL基因由其自身启动子(序列表中序列1自5’末端起第1-5043位所示)驱动。
2、重组质粒pTPCK303-CNL的构建
(1)取pTPCK303质粒，用限制性内切酶Kpn1和Spe1进行双酶切，回收约14000bp载体骨架。
(2)以序列表中序列2所示的DNA片段为模板，采用41OE-1(见表1)进行PCR扩增，得到扩增产物。
(3)利用pEASY-Uni Seamless Cloning and Assembly Kit(CU101-01)同源重组试剂盒将步骤(2)获得的PCR扩增产物和步骤(1)回收的载体骨架进行同源重组，得到重组质粒pTPCK303-CNL。重组质粒pTPCK303-CNL中，CNL基因由玉米的Ubiquitin启动子驱动(见图4中B)。
二、重组农杆菌的获得
1、采用热激转化法，将重组质粒pCAMBIA1300-CNL导入根癌农杆菌EHA105，得到重组农杆菌，命名为EHA105/pCAMBIA1300-CNL。
2、采用热激转化法，将重组质粒pTPCK303-CNL导入根癌农杆菌EHA105，得到重组农杆菌，命名为EHA105/pTPCK303-CNL。
三、转CNL基因小麦的获得
1、采用农杆菌介导的遗传转化方法，将EHA105/pCAMBIA1300-CNL转化高感白粉病的普通小麦材料Fielder，然后自交2代，得到5个CNL互补转基因T2家系，依次命名为T2CNL-1至T2CNL-5。
2、采用农杆菌介导的遗传转化方法，将EHA105/pTPCK303-CNL转化高感白粉病的普通小麦材料Fielder，然后自交2代，得到5个CNL基因过表达T2家系，依次命名为T2OECNL-1至T2OECNL-5。
四、分子鉴定
1、提取小麦叶片的基因组DNA。
小麦为TZ-2、Fielder、T2CNL-1、T2CNL-2、T2CNL-3、T2CNL-4、T2CNL-5、T2OECNL-1、T2OECNL-2、T2OECNL-3、T2OECNL-4或T2OECNL-5。
2、以小麦叶片的基因组DNA为模板，采用引物进行PCR扩增(其中T2CNL-1、T2CNL-2、T2CNL-3、T2CNL-4和T2CNL-5均用41R-483(见表1)进行PCR扩增，T2OECNL-1、T2OECNL-2、T2OECNL-3、T2OECNL-4和T2OECNL-5均用41R-476(见表1)进行PCR扩增，TZ-2和Fielder分别用41R-483和41R-476进行PCR扩增)，得到PCR扩增产物，然后进行如下判断：
如果某小麦采用41R-483进行PCR扩增，得到的PCR扩增产物中含有约420bp的DNA片段，则该小麦含有CNL基因；否则该小麦不含有CNL基因。
如果某小麦采用41R-476进行PCR扩增，得到的PCR扩增产物中含有约750bp的DNA片段，则该小麦含有CNL基因；否则该小麦不含有CNL基因。
实验结果见图4中C和D(“+”表示阳性，即含有CNL基因，“-”表示阴性，即不含CNL基因)。结果表明，5个CNL互补转基因T2家系和5个CNL基因过表达T2家系也均为阳性。
五、白粉病抗性鉴定
采用小麦苗期白粉病抗性鉴定方法检测小麦的白粉病抗性。小麦为TZ-2、Fielder、T2CNL-1、T2CNL-2、T2CNL-3、T2CNL-4、T2CNL-5、T2OECNL-1、T2OECNL-2、T2OECNL-3、T2OECNL-4或T2OECNL-5。
检测结果见图4中C和D。结果表明，5个CNL互补转基因T2家系和5个CNL基因过表达T2家系均表现为高抗或免疫白粉病。
上述结果表明，CNL基因在普通六倍体小麦中具有良好的抗白粉病功能，同时也证实CNL基因就是Pm41基因。
<110> 中国科学院遗传与发育生物学研究所
<120> 抗白粉病相关蛋白Pm41及其编码基因与应用
<160> 3
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 11730
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<400> 1
gttcctgatt atttagtata catgtatggt aagtataagt agtttaacat gaccaatcca 60
tggcatcata tgtttagagg atatgatatg ttgcattgtt gttgtcattg agtgttttca 120
aatcccgaca aatcttctca cgaccgtcat ctccctccga actagatatg gagattccgg 180
acaaaattgt cccatgctcg tcatcttcct tgagtccggt ggtcggcggc atgtgggaag 240
ctcgcatcca tggccgatgg agaggctcga gctcgtgggc gaaggttggg aagaggggcg 300
gcggaactgc ttggtcaaca ccgaggatgg aggaagaggg cgacgggagc catggccgac 360
caggacggcg tgcgaggtcg gaggggcggc ggaactgctt ggttagcacc gatgatggag 420
gaagagagcg acgggagcca tggccgacta ggagcagcgt gcaaggtcag aggggtggct 480
cgccagccgg ggcttgccgc tagggtaagg acggtgctag ctgcagcctg gcagggatgg 540
ccgtcgcacg gaagtagggg tcgcgactgg tgctagtgtg ttgtcacccg atgacccggc 600
tgtaggtaca accaggtttg catacaattt cagaattcat ttcagaaagt aacaaaaact 660
tggctagttt tatattacag ctcacagaaa cctcatgtga cccttacttt caaactacta 720
ggttatactt ttgccttgaa acacaagtac agatgggatg ggttgatgag acggtcgatc 780
tatgaatctc acattttgat cttgagatgg ggtgatctca acatctttca tcttagcggc 840
cagtccatgg agggttccta cacgtcagag taggtccaac ataatcatgt catttttgtt 900
tcgacaaaaa acatagagat taaattgtgt aaattaacaa ccaaaccaag ttcgttttga 960
gatcttttat attaggaacg tgttgttaca tcatggatca acaattgtgt atctttgttt 1020
actccctagt tgccattacg aaattcaaac ttgggatatg tgtcaaatat ttgtgccctt 1080
gccggtcaga tccgtcctgc accggaacgc gcacgagggg gcaaaggagc cctgccgccg 1140
tcacgccctc tggcggtgac agaggagggg aggagcggga gggagggcgc tcggaggcgt 1200
caacagatcc ctctcgtcgc cgtccgcagc tcgcgccacc tggtgcttgg gaccacagat 1260
ctgggcgaca tcaccgccgc caccatgacc caccacatcc caccatcgaa ggtcacccgc 1320
ctcccgacgt agccgctagc aagccaaatc gcgcatccgc gaccctccgc atagtgacgc 1380
caccttgccc gtcagatccg tcccgcatca gatccacgcg cgagggggcg aagaagccct 1440
gtcgccgccc ctaggcggac ttcacccagt catgccctct ggcggcagca agggagggga 1500
ggagggggag gcggctaggg attcgtcccg tcgcctgctg gggcgactct ggagggagtg 1560
atctcaacat ctttcatctt aggaaaaagt ccattttaaa ccttgaactt gtagatattc 1620
ggcgaaatga tcccccacgt cgaaatccct gacaccttga actatgcaat cacggtctaa 1680
atcaaccctg acagatgtca accgggattc acctgactag tgggctagaa agcgacagtc 1740
ttgaccacgg cgcgctgggc cggcccattt ttttgaagtt acagtgcgaa aaaaaatatc 1800
tatgcgtgaa actttttctt ttttatataa tccgtgaaaa aatatctaat gcatgatttt 1860
tttatataat ccgtgaaaaa atatctaatg tgtgaaactt ttttcaactt gtttttaaaa 1920
tttcgaacct tttgaaaaat ctggtggaca ttttaaaaat cattgaactt tttctaaatc 1980
catgtttttc cacaattcat caactttttt tcgaaattga tgaacttttt ccaaacctgt 2040
gaactgttat tgaaaattta tgagtttttt taaatcggtg tttttaaaaa aatatgaact 2100
ttcatccgaa gtcttcccca cgctgagcag gcccattttt ctattacatt gctataaaat 2160
atctaatgca ggaaactttt tcctttttta tataacccgt gaaaaaatat ttaattcatg 2220
tttttccttt ttcatataat acgtaaaaaa tatctaatgc gtgacactat tttaaatatg 2280
tttttcaatt tgtgaacttt tttaccaagc tcgtgaattt ttagaatctc tgaaattttt 2340
ttgaatccat gaacattttt ctatatagat gagaaaaatt ccaaacctgt gaactttttt 2400
ttgaatattg atgggatttt tcgaaaatcg ttgaatttta catttatgta atttaaaccg 2460
gagcgttgac cacggtgtcg tgattttttc gccatattca tgatcttttt ttattttcgt 2520
gaactatttg gagttttttc catttccgtg aactaaagaa gggtcaaata gtactaattt 2580
gcagcagcat acaaataagt gaagtttacg tagtggttaa tggctatagc tgttaacgta 2640
ctgcactgca gttcgactat tgctactaac atattaattg ctgagtcttt ttgttttctt 2700
ttgcgttctc tgtaggttgc tgggcttcac agactgcacg acgtggatag cctgctgggc 2760
cagactgggc tcgcctagtt tttttctttt ggcgcgctac caatcctggg cacggtacac 2820
aatccccgtg ttgcaaatga ccctacggtt cgttttagac cgggattgca tagtttaaag 2880
tacaattgac agggatttga tgttggggtt tgtttcgcgt aacctctaca aaaatcttag 2940
agattcaacc atgtaaatta tcaaccaaac caatttagtt ttgagattta cttattggcg 3000
tatcacagat ttgtcaaaaa caacctattc tttaatttac tataaaaagg aaaaaaaatg 3060
tatgcatacc taggtgtgtg gttccagatg acttggcgat aagtgggcgt gttactcttg 3120
tattccattc acatgtgact tttgtaggat cctacaacgt gctcagtgag acgatgggcg 3180
tgtgagaatt tgttgttgga agaacttcat aaattagaat aatatatttt ttcattgttt 3240
tacttgtaat tgcaacgtca caccgatgtt gcaatatatt tccgaatata accacaaata 3300
gttattctgt tgaaacacgt aatctctatt acaacaaaat gtctgcccgc gcaacggaat 3360
ttgtttgtca caatatcgct accatattgc aacgccgatg cggtttgttg caataggtag 3420
ccactttttt gcaacaatat ttgtagctaa tgcaacgaca agttgatgtt gcaatatctt 3480
tccgaatatt gccacaaata gttattccgt tgaaatacct agtctctatt acaacaaaat 3540
gactaccctc acgcaacgga atttgtttct cgcaatatcg ctaccatatt gcaacgtcga 3600
cacggtttgt tgcaatatga ggcctgtatt gcaacaaagt tagtatttat cgtgaccaaa 3660
ctaagttatg gcagtatgcg cagcctatta ccacaatcgg agaatttgtg gtaatattgt 3720
attttattgc cacaaaatgt agttgtagca ataaattttg ttgcaataga ccggaatctt 3780
tgtagtgcga gtctgtgaag gtttggaagt cgcctgaaga cttaccacga gtgattggac 3840
gaggtctgtg tgaccttagt tcaaggagaa tacggtgagg acttggtgtc ctgggctgcg 3900
tgctcagcga ttgggtgtcc gggactgtgt gtcctcgagt ttaaatactc agccgctcca 3960
accagacgta caactgagac agcagttgga actggtctac caaatcattg tcttcaccaa 4020
ccttactggt tctattccct caactctttc attttctcat cactgtgttg agtgattgtt 4080
tatatctgtg tttgaagact ttgactgaag actttctcaa tttcctcagt tcaatttctt 4140
cagtctgttt gtcttcatct tgtgttatcc tgtgtttacg ctttctgtgc tctgtgcatg 4200
tcttcatttc atcatgatga ccatgcctgt attctgttat gcttacttct gagtacttat 4260
tccgctgcaa gtagttcttt gctaaggaat ttcctcaccg gtaaattctt cataaaatcg 4320
cctattcact cccctctagt tgatataatg cactttcaga gcgcccgctt ttgtccgcac 4380
ggacccattt gtggcccatt tttgcgttca ctttgggccg ggagggcgga caaacggaca 4440
gcaggcggtc acggacgtcc gtttggatcg ccccgttggg ccaacttttg tgtccggatg 4500
acctaaacgg acaaaatgag tcgccccatt ggagttgctc ttataacaaa ttcggtcgtc 4560
ggttgtagca tggccgtgca gcggcggagc tgccactacg ccatgaccgt ggccgcagga 4620
ggacaagaag gtaagtggtg gacgaccatg gcgcccgccc aaggagctcg tcggtgtcga 4680
cctcccgttc atgctacaag gagtccgccc caaggagctc acaggtgaca accatggcgc 4740
ccgcgcaagg agctcgccgg tgacgaccat ggcgcccgca caaagagctc gccgacgtcg 4800
cacgagataa ggaaaagaag agagaaggta tgagcgagct tgtgttttta taggccaggg 4860
gaatgaatgg acgagaggag tccagaagag gataagacat cgtagaggat aaggcagcaa 4920
gccacgcgac cggtcgaaag tttggttacc atcaattatt ggtgcacttg ccttggaaaa 4980
ttcaccccag tgcactagag aagataagac caatcagtgc aaccgctccc ctcttcttca 5040
cccgcctagc tttactcaac gcctctggct gcgccagcga caacatcaag ggagcaacag 5100
attcgatcgg cagccaggct gagcaatggc cgccgagcat cagtagaggt acgttatgac 5160
catgccacga atttagctct tgattcccca tgagccatga gattagttag atcgggtaca 5220
tctgactgtt caatttacag tcttctttct cagatctgaa cctactctgc tcttggtagc 5280
agcagcttgt acttcttctc aagtcaccac ggcagtatct acactcttag attctgtgat 5340
tctgagtggt tcagctggct cgagcacacc aagatccgat ggaacggatc atggtaagcg 5400
ctgccactgg ggtgatgaac tccctcctca agaagctcgc ggaactgttg agcgacgagt 5460
acaagctgca gaaatccgtg aagagaaaaa ttcgctcact ggaactcgag ctgagcagca 5520
tcaatgcttt tctcaggaat ttggctgaca aggaggatct ggacccgcag actaaggaat 5580
ggagagacca ggtgagagag atggcctacg aaatcgaaga ctgcatcgac aagtacatgc 5640
acaagctcaa ccacgaaccg aataaagtag gtggcatcaa gggcttcatc agcaagagca 5700
ttgccaaggt gaaaaatatg ggagttgtcc atgggatttc tgatcagctt gagcaactca 5760
agctccaagt cgttgagaca agcgagcgac acaagaggtt actaatgcct gcgcaagtaa 5820
catctggggt atcaaccaca acaattgacc ctcgaatgcc tgcgctgtat gctgatgcta 5880
ctgatcttgt tggtattgat gcaacaagag atgagctcat cgagctggtg accaaccagg 5940
aagagaaaga gttgaaggtg gtgtcgattg ttgggtatgg aggcttggga aagaccacac 6000
ttgcgatcca ggtatacaga caccttcatg ggcaatttga ttttcaagct aaggtgctga 6060
tgtcaagaat ctttgatatg aagaggatac tacgggcaat actctttcaa actaatgaga 6120
cagattacct ggaccagaac acagaatcat ggggtgaaga tttactcatt gagaagctga 6180
gaaaatttct gatggataaa aggtacctaa ttaataatac tctatctagc tggatgaaaa 6240
cttttgctta tagtcaaata tttcccttat catctcacaa ctcatgtgat gaagatcccg 6300
acaacatgtg ccattgattt ttagaaaaca atctcataaa agcacctccg gcaacccctt 6360
gatctctgac aatatgtgcc attgatattg tatacaacat gtaatctatt gtatagagcc 6420
ggtccataca acttgtccct tatttgggtg cagtcaaaca tagtagtgta cctccaaatc 6480
cgacatatat aactaaagct tattttcatt tttgttctac tggatctctg attctgtagg 6540
aaaaataagc tagattaact gaatcctaac cctcgttcat cttcttgctg gaactctaac 6600
cctgtttact cttgtaggta ctttgttgta attgatgaca tatgggatgc tcgaaactgg 6660
gatgccatca aatgcgcttt tcctgatggc aagcgtggaa gtagaataat gacgacaaca 6720
agaatcaata gtgttgctaa gtcatgctgc acccatcgcc gtgatcatat acacaaatta 6780
agtgttctta gtgaagctga ttctcagtgt ttattttata gaagagcttt ttactgtgaa 6840
gatggatgtc cacctgaact ggaagaagtt gccactgaaa ttgtgcaaag atgtggtggt 6900
ctaccattgg cgataattac tctggccagt ttattgagta ctaaatcata tacaagacga 6960
gagtggatga tagtacagga ttctattggt ttgggactta tgaacaatga tgggatggaa 7020
gacatgaata agatattatc tcttagttat attgatcttc cttaccacct gaaaacgtgt 7080
ttgctgtatc ttagtttatt tccagaagac tttctgatta ctagggatcg attagtaaga 7140
aggtggatag cagaagggtt cattacagca gaatgtggga aaactttaga agaacaaggt 7200
gaaagctatt ttaatgagct tataaataga aatttgatcc aaccaataga tatcaagtat 7260
gatggtcgag caagggcatg ccgtgtgcat gatatgattc ttgatttcat tgtatcgaag 7320
gcggctgaag aaaaatttgc aagtttgatt catcaaaagg atgcagttga ctcacgtttt 7380
aaggttcggc gactctcgct taattatggt tcccaaaaag agttgtgcac ggaatcactc 7440
attgtttctc aagctcgatc cctcagtatc tttgggaatt ctgaacagtt gcctcctctt 7500
tcaaacttca gtgcactgag ggtacttgat atagaaagcc atatccagaa cagttatctg 7560
gtgaatattg gagagttgct tcagttgaaa tatatacggc tttctgcaag cactattaca 7620
gagcttccgg aaaacattgg gcaactaaaa tctttggaga caatggatct gaaaaaaact 7680
gatataaaag aactgccagc aagcattgtt caactgcaac gattgaaaca tctactggtt 7740
caaaatgtaa agttgcctgc cggaattgac aagatgcttt ctctccagga cctgtcagaa 7800
ctaattgtag acgatagctg taaagtaact tctttgctag agctgagaac tttggccaat 7860
ttgagttctc ttggccttgt ttggcgcatc agtgattcac acatggaaaa aacaaagttt 7920
gcggacagtt tgttattggc cctctgtgac cttgccaaat ccaaacttca gtttttaaag 7980
gttaccggtg ctgggtctga tgcttcatat gaattcatgt ttgatccttt ctcctcaact 8040
cctcatcgtc tccaagagtt gaccttatac ccaaactgtt atattggtga gaatccaagt 8100
tggatggcct caatggttaa cctcaccaaa ttgaacatta tggttaatcc agtgacacag 8160
gaagctcttg acatttttgg caacttgcct gtcctgctat ttcttgagct gagctcaaaa 8220
gtaatagttc caaaagggct tatcatcgag agtggcacat tcaaatgcct aaaggtgttt 8280
ggcttgtatt gtccggatat tgagagaggg ctgatgttca aagctggagc catgcagagc 8340
attgaaaatt ttacacttcc attcagcgca catgaaccgc aacctatatt gggtgacaat 8400
gattttggca ttccccatct tcgtacgttg cagcaccttg aagttcggat tagctgcaag 8460
ggagcggtgg cttgggaggt ggaaatgttg gctaatgtca ttaggaaggc tgtcattgaa 8520
ctccccagca atccagagcc acaaatcttg aggtattatg tgaaggagat gatacatgat 8580
gacagggaga agagtacaga ggaagctacc ggggactccc tgtatggcac agaatgttct 8640
cacggtatgg aggatcattc ttatggttat tggtatccgc ttccaccgcc tccacgctat 8700
ttcgtccata ttgctgagga ggatccaaat tcttgctcaa tctgctgaag tgtggaatgc 8760
tgcatcaagg tatcatcact cgtttatgca ctttggtaca tttttcagat gctttttggg 8820
tacttgacta gttgctcttt ctgaatagga tagttgaagt atgaaaccaa taatagcctg 8880
ggtcctgcga ctgttcatag agagtctggc ggaccagctc gaggttgtgc ggagcgtcat 8940
tggattgatt tcgttggctg tagttcttta gctagttgtc atttcgctgg ttctgtaata 9000
agttacattc ccgcctggct gttgctggtt ttgtgatgct ggatatataa tgtttcgcct 9060
ccaagtttag atgtaaacta tagctattta tgttaatcct tggaggggag ctgaacctga 9120
ctgaggccgg tggtttgcat tatcagtttt cagaaatgaa cttttagtag ctatgctcct 9180
tataagtcga aaaaagaaca aatacactat tttgtctcct aatgtgctgt ggcccgtttg 9240
ctaatcctac cttattattg ataagcaaaa cacaagatga tggtgatgca ggctagatcg 9300
aggccgccgc cccgagatcc ccatgtcgcc cgaggcgcca gcggtcagat ctgaagcaga 9360
tcgaccacgg ccaccatagg cgtgccccga acggcccccc acgcgaccac cggggaagca 9420
gctcctgccg tcgccccctg agccctcgct gacgcgcccc gtcgccaact accgccccag 9480
cgtcggcggg caggagagag ggccgagggc ttggcggcgc tagggtcccc ccctggtcgc 9540
cgcgcgggga tgactcacgg gagggaaggg gagcagtttg tttagggttg tatctagatt 9600
tcgtaaagtc cttttaaaat gggagagatt ttcacttccc agcctcttta ccaatcaggg 9660
atgcatatgg ccattttagt atgagtacca agataaaatg gtcctcagaa tttttttaaa 9720
tgagtatcaa gatatttctt gatgataggt tgcaccacac accaagcttg atcctcaata 9780
aacaggggaa acccctatgc atcacctatc aattctagga attgaactcg ggtcgctagg 9840
ctgcacaacc gcacgcccaa ccactaagcc aaggctctct ttgcaacgct ccagccttct 9900
agacacggat atacaccaat ggaaaagcaa tgtcatatat agaagaaatt attttgccca 9960
ttgcttttga aggttctagc cttcaatatt gcacagcatg aacacaaaat aggcttcaat 10020
tttgaaagtt tcaggaaacc aaatgcactc aagtcgtaag cgtttatact tgtggatccc 10080
cttggtagcc tatgggagac aagcatacaa aagaccttct ataacagtct gagtctgtac 10140
caagaggccg atgataacta cagacaatat catcgacaca aagtgaaaca caatttgaga 10200
tagaccttaa gagtaagcta ccataagtta gaagattcca aaattaagtc actacaagaa 10260
ttacatttct tcagaaacgt attcagttgg tagagacact aagtggcatt gcatcaaaca 10320
gttggtgggc atatgatcac tgacatgaaa gtatcaccaa agttttgtat gtactagcac 10380
atatgcccgt ccgttgcaat gggagataaa ataatttgca tttaaagtca ctgagaatta 10440
tatgtgcaag taaaatttcg tgtgcacatg aaaaatgaac atttagcttc ttggtttcac 10500
cgtgtgtcaa gaaatcaatc cgctattttc tcattcattg atcgagggca tttaaaagtt 10560
ttgttacgtc attgtgcgcc agagaaggcc catgagttat gcaatctaca cttcctttca 10620
atcctttcaa gcgaggggat ttaatggtat aaagttttta aatattccaa atattctagg 10680
taagatgaac aattttttaa atcctgaaca gtttttaaaa attaatgtat actttcgaaa 10740
aaacgtaaaa aaaatatgaa agggaacatc ttttaaattt gacaaacatt ttttgaaaac 10800
actaaatttt ctataaaaac ataaacattt ttgaatttgt gaacattttt ttacaggaac 10860
atgtgttgaa aattcataag attttaagaa aatgtgtatc ctttatacac gaacattatt 10920
tttaattttg aaaattcact aaaacaagaa tatatttcga atttggagca ttttttaaat 10980
gccatatttt tttacaaatc ttgaacaatt tttaaagaca attatttttt gaaaaaatgg 11040
gaaacttttt taaagttccg aataattttc aaaatagcaa caaaattttg gaattttgaa 11100
catttttttt acttctgaat gttttcgaga atttttaatt taataaataa attctaaaag 11160
aaaaataaac ttgcaaggga aaaaagagat agggaaagga gaataaaaat agatgtaaaa 11220
taccgaaaaa atgaaaaatg ggccagccaa ttattggttg tcctgtgcga acctccgact 11280
attcatcgct cggtgcagaa aatagaattt tccaagatgc atgggcagaa aataagtggg 11340
ccactttgct gggccacaac gcgcgtccca tgtacgtaaa tattttctag cagacaagcg 11400
catgttacta aaaaaaagca gacaaatgca taagaattta gtaccacttt ggatagaaaa 11460
aattcttttc ggtgaacaga tgaaaaaatt ggcgaaacgc accttgcttt attagtaggt 11520
atagaaacgg gccatcggca tggtcagaga tggagaaggc ggagtcagcg tccacccagt 11580
tcaggggagg gatatgtgga gggggcgttg gagggagagg tgcatatata ggctgcgccg 11640
cgtgagggac gcttcaggaa aggatctgca tgacaggggc gctaggtata gccaaacaag 11700
gtacgcaccg ggaaaggtgc cgatagaaag 11730
<210> 2
<211> 2955
<212> DNA
<213> Artificial sequence
<400> 2
atggaacgga tcatggtaag cgctgccact ggggtgatga actccctcct caagaagctc 60
gcggaactgt tgagcgacga gtacaagctg cagaaatccg tgaagagaaa aattcgctca 120
ctggaactcg agctgagcag catcaatgct tttctcagga atttggctga caaggaggat 180
ctggacccgc agactaagga atggagagac caggtgagag agatggccta cgaaatcgaa 240
gactgcatcg acaagtacat gcacaagctc aaccacgaac cgaataaagt aggtggcatc 300
aagggcttca tcagcaagag cattgccaag gtgaaaaata tgggagttgt ccatgggatt 360
tctgatcagc ttgagcaact caagctccaa gtcgttgaga caagcgagcg acacaagagg 420
ttactaatgc ctgcgcaagt aacatctggg gtatcaacca caacaattga ccctcgaatg 480
cctgcgctgt atgctgatgc tactgatctt gttggtattg atgcaacaag agatgagctc 540
atcgagctgg tgaccaacca ggaagagaaa gagttgaagg tggtgtcgat tgttgggtat 600
ggaggcttgg gaaagaccac acttgcgatc caggtataca gacaccttca tgggcaattt 660
gattttcaag ctaaggtgct gatgtcaaga atctttgata tgaagaggat actacgggca 720
atactctttc aaactaatga gacagattac ctggaccaga acacagaatc atggggtgaa 780
gatttactca ttgagaagct gagaaaattt ctgatggata aaaggtactt tgttgtaatt 840
gatgacatat gggatgctcg aaactgggat gccatcaaat gcgcttttcc tgatggcaag 900
cgtggaagta gaataatgac gacaacaaga atcaatagtg ttgctaagtc atgctgcacc 960
catcgccgtg atcatataca caaattaagt gttcttagtg aagctgattc tcagtgttta 1020
ttttatagaa gagcttttta ctgtgaagat ggatgtccac ctgaactgga agaagttgcc 1080
actgaaattg tgcaaagatg tggtggtcta ccattggcga taattactct ggccagttta 1140
ttgagtacta aatcatatac aagacgagag tggatgatag tacaggattc tattggtttg 1200
ggacttatga acaatgatgg gatggaagac atgaataaga tattatctct tagttatatt 1260
gatcttcctt accacctgaa aacgtgtttg ctgtatctta gtttatttcc agaagacttt 1320
ctgattacta gggatcgatt agtaagaagg tggatagcag aagggttcat tacagcagaa 1380
tgtgggaaaa ctttagaaga acaaggtgaa agctatttta atgagcttat aaatagaaat 1440
ttgatccaac caatagatat caagtatgat ggtcgagcaa gggcatgccg tgtgcatgat 1500
atgattcttg atttcattgt atcgaaggcg gctgaagaaa aatttgcaag tttgattcat 1560
caaaaggatg cagttgactc acgttttaag gttcggcgac tctcgcttaa ttatggttcc 1620
caaaaagagt tgtgcacgga atcactcatt gtttctcaag ctcgatccct cagtatcttt 1680
gggaattctg aacagttgcc tcctctttca aacttcagtg cactgagggt acttgatata 1740
gaaagccata tccagaacag ttatctggtg aatattggag agttgcttca gttgaaatat 1800
atacggcttt ctgcaagcac tattacagag cttccggaaa acattgggca actaaaatct 1860
ttggagacaa tggatctgaa aaaaactgat ataaaagaac tgccagcaag cattgttcaa 1920
ctgcaacgat tgaaacatct actggttcaa aatgtaaagt tgcctgccgg aattgacaag 1980
atgctttctc tccaggacct gtcagaacta attgtagacg atagctgtaa agtaacttct 2040
ttgctagagc tgagaacttt ggccaatttg agttctcttg gccttgtttg gcgcatcagt 2100
gattcacaca tggaaaaaac aaagtttgcg gacagtttgt tattggccct ctgtgacctt 2160
gccaaatcca aacttcagtt tttaaaggtt accggtgctg ggtctgatgc ttcatatgaa 2220
ttcatgtttg atcctttctc ctcaactcct catcgtctcc aagagttgac cttataccca 2280
aactgttata ttggtgagaa tccaagttgg atggcctcaa tggttaacct caccaaattg 2340
aacattatgg ttaatccagt gacacaggaa gctcttgaca tttttggcaa cttgcctgtc 2400
ctgctatttc ttgagctgag ctcaaaagta atagttccaa aagggcttat catcgagagt 2460
ggcacattca aatgcctaaa ggtgtttggc ttgtattgtc cggatattga gagagggctg 2520
atgttcaaag ctggagccat gcagagcatt gaaaatttta cacttccatt cagcgcacat 2580
gaaccgcaac ctatattggg tgacaatgat tttggcattc cccatcttcg tacgttgcag 2640
caccttgaag ttcggattag ctgcaaggga gcggtggctt gggaggtgga aatgttggct 2700
aatgtcatta ggaaggctgt cattgaactc cccagcaatc cagagccaca aatcttgagg 2760
tattatgtga aggagatgat acatgatgac agggagaaga gtacagagga agctaccggg 2820
gactccctgt atggcacaga atgttctcac ggtatggagg atcattctta tggttattgg 2880
tatccgcttc caccgcctcc acgctatttc gtccatattg ctgaggagga tccaaattct 2940
tgctcaatct gctga 2955
<210> 3
<211> 984
<212> PRT
<213> Artificial sequence
<400> 3
Met Glu Arg Ile Met Val Ser Ala Ala Thr Gly Val Met Asn Ser Leu
1 5 10 15
Leu Lys Lys Leu Ala Glu Leu Leu Ser Asp Glu Tyr Lys Leu Gln Lys
20 25 30
Ser Val Lys Arg Lys Ile Arg Ser Leu Glu Leu Glu Leu Ser Ser Ile
35 40 45
Asn Ala Phe Leu Arg Asn Leu Ala Asp Lys Glu Asp Leu Asp Pro Gln
50 55 60
Thr Lys Glu Trp Arg Asp Gln Val Arg Glu Met Ala Tyr Glu Ile Glu
65 70 75 80
Asp Cys Ile Asp Lys Tyr Met His Lys Leu Asn His Glu Pro Asn Lys
85 90 95
Val Gly Gly Ile Lys Gly Phe Ile Ser Lys Ser Ile Ala Lys Val Lys
100 105 110
Asn Met Gly Val Val His Gly Ile Ser Asp Gln Leu Glu Gln Leu Lys
115 120 125
Leu Gln Val Val Glu Thr Ser Glu Arg His Lys Arg Leu Leu Met Pro
130 135 140
Ala Gln Val Thr Ser Gly Val Ser Thr Thr Thr Ile Asp Pro Arg Met
145 150 155 160
Pro Ala Leu Tyr Ala Asp Ala Thr Asp Leu Val Gly Ile Asp Ala Thr
165 170 175
Arg Asp Glu Leu Ile Glu Leu Val Thr Asn Gln Glu Glu Lys Glu Leu
180 185 190
Lys Val Val Ser Ile Val Gly Tyr Gly Gly Leu Gly Lys Thr Thr Leu
195 200 205
Ala Ile Gln Val Tyr Arg His Leu His Gly Gln Phe Asp Phe Gln Ala
210 215 220
Lys Val Leu Met Ser Arg Ile Phe Asp Met Lys Arg Ile Leu Arg Ala
225 230 235 240
Ile Leu Phe Gln Thr Asn Glu Thr Asp Tyr Leu Asp Gln Asn Thr Glu
245 250 255
Ser Trp Gly Glu Asp Leu Leu Ile Glu Lys Leu Arg Lys Phe Leu Met
260 265 270
Asp Lys Arg Tyr Phe Val Val Ile Asp Asp Ile Trp Asp Ala Arg Asn
275 280 285
Trp Asp Ala Ile Lys Cys Ala Phe Pro Asp Gly Lys Arg Gly Ser Arg
290 295 300
Ile Met Thr Thr Thr Arg Ile Asn Ser Val Ala Lys Ser Cys Cys Thr
305 310 315 320
His Arg Arg Asp His Ile His Lys Leu Ser Val Leu Ser Glu Ala Asp
325 330 335
Ser Gln Cys Leu Phe Tyr Arg Arg Ala Phe Tyr Cys Glu Asp Gly Cys
340 345 350
Pro Pro Glu Leu Glu Glu Val Ala Thr Glu Ile Val Gln Arg Cys Gly
355 360 365
Gly Leu Pro Leu Ala Ile Ile Thr Leu Ala Ser Leu Leu Ser Thr Lys
370 375 380
Ser Tyr Thr Arg Arg Glu Trp Met Ile Val Gln Asp Ser Ile Gly Leu
385 390 395 400
Gly Leu Met Asn Asn Asp Gly Met Glu Asp Met Asn Lys Ile Leu Ser
405 410 415
Leu Ser Tyr Ile Asp Leu Pro Tyr His Leu Lys Thr Cys Leu Leu Tyr
420 425 430
Leu Ser Leu Phe Pro Glu Asp Phe Leu Ile Thr Arg Asp Arg Leu Val
435 440 445
Arg Arg Trp Ile Ala Glu Gly Phe Ile Thr Ala Glu Cys Gly Lys Thr
450 455 460
Leu Glu Glu Gln Gly Glu Ser Tyr Phe Asn Glu Leu Ile Asn Arg Asn
465 470 475 480
Leu Ile Gln Pro Ile Asp Ile Lys Tyr Asp Gly Arg Ala Arg Ala Cys
485 490 495
Arg Val His Asp Met Ile Leu Asp Phe Ile Val Ser Lys Ala Ala Glu
500 505 510
Glu Lys Phe Ala Ser Leu Ile His Gln Lys Asp Ala Val Asp Ser Arg
515 520 525
Phe Lys Val Arg Arg Leu Ser Leu Asn Tyr Gly Ser Gln Lys Glu Leu
530 535 540
Cys Thr Glu Ser Leu Ile Val Ser Gln Ala Arg Ser Leu Ser Ile Phe
545 550 555 560
Gly Asn Ser Glu Gln Leu Pro Pro Leu Ser Asn Phe Ser Ala Leu Arg
565 570 575
Val Leu Asp Ile Glu Ser His Ile Gln Asn Ser Tyr Leu Val Asn Ile
580 585 590
Gly Glu Leu Leu Gln Leu Lys Tyr Ile Arg Leu Ser Ala Ser Thr Ile
595 600 605
Thr Glu Leu Pro Glu Asn Ile Gly Gln Leu Lys Ser Leu Glu Thr Met
610 615 620
Asp Leu Lys Lys Thr Asp Ile Lys Glu Leu Pro Ala Ser Ile Val Gln
625 630 635 640
Leu Gln Arg Leu Lys His Leu Leu Val Gln Asn Val Lys Leu Pro Ala
645 650 655
Gly Ile Asp Lys Met Leu Ser Leu Gln Asp Leu Ser Glu Leu Ile Val
660 665 670
Asp Asp Ser Cys Lys Val Thr Ser Leu Leu Glu Leu Arg Thr Leu Ala
675 680 685
Asn Leu Ser Ser Leu Gly Leu Val Trp Arg Ile Ser Asp Ser His Met
690 695 700
Glu Lys Thr Lys Phe Ala Asp Ser Leu Leu Leu Ala Leu Cys Asp Leu
705 710 715 720
Ala Lys Ser Lys Leu Gln Phe Leu Lys Val Thr Gly Ala Gly Ser Asp
725 730 735
Ala Ser Tyr Glu Phe Met Phe Asp Pro Phe Ser Ser Thr Pro His Arg
740 745 750
Leu Gln Glu Leu Thr Leu Tyr Pro Asn Cys Tyr Ile Gly Glu Asn Pro
755 760 765
Ser Trp Met Ala Ser Met Val Asn Leu Thr Lys Leu Asn Ile Met Val
770 775 780
Asn Pro Val Thr Gln Glu Ala Leu Asp Ile Phe Gly Asn Leu Pro Val
785 790 795 800
Leu Leu Phe Leu Glu Leu Ser Ser Lys Val Ile Val Pro Lys Gly Leu
805 810 815
Ile Ile Glu Ser Gly Thr Phe Lys Cys Leu Lys Val Phe Gly Leu Tyr
820 825 830
Cys Pro Asp Ile Glu Arg Gly Leu Met Phe Lys Ala Gly Ala Met Gln
835 840 845
Ser Ile Glu Asn Phe Thr Leu Pro Phe Ser Ala His Glu Pro Gln Pro
850 855 860
Ile Leu Gly Asp Asn Asp Phe Gly Ile Pro His Leu Arg Thr Leu Gln
865 870 875 880
His Leu Glu Val Arg Ile Ser Cys Lys Gly Ala Val Ala Trp Glu Val
885 890 895
Glu Met Leu Ala Asn Val Ile Arg Lys Ala Val Ile Glu Leu Pro Ser
900 905 910
Asn Pro Glu Pro Gln Ile Leu Arg Tyr Tyr Val Lys Glu Met Ile His
915 920 925
Asp Asp Arg Glu Lys Ser Thr Glu Glu Ala Thr Gly Asp Ser Leu Tyr
930 935 940
Gly Thr Glu Cys Ser His Gly Met Glu Asp His Ser Tyr Gly Tyr Trp
945 950 955 960
Tyr Pro Leu Pro Pro Pro Pro Arg Tyr Phe Val His Ile Ala Glu Glu
965 970 975
Asp Pro Asn Ser Cys Ser Ile Cys
980

Claims (6)

1.蛋白质Pm41的应用，为D1）或D2）：
D1）调控小麦抗病性；
D2）培育具有抗病性的转基因小麦；
所述抗病性为抗白粉菌引起的病害；
所述小麦为普通小麦品种Fielder；
所述蛋白质Pm41，为如下a1）或a2）：
a1）氨基酸序列是序列表中序列3所示的蛋白质；
a2）在序列表中序列3所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。
2.编码权利要求1中 所述蛋白质Pm41的核酸分子的应用，为D1）或D2）：
D1）调控小麦抗病性；
D2）培育具有抗病性的转基因小麦；
所述抗病性为抗白粉菌引起的病害；
所述小麦为普通小麦品种Fielder。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于：所述核酸分子为如下b1）或b2）或b3）所示的DNA分子：
b1）编码区是序列表中序列2所示的DNA分子；
b2）核苷酸序列是序列表中序列2所示的DNA分子；
b3）核苷酸序列是序列表中序列1所示的DNA分子。
4.含有权利要求2或3中所述核酸分子的表达盒、重组载体或重组微生物的应用，为D1）或D2）：
D1）调控小麦抗病性；
D2）培育具有抗病性的转基因小麦；
所述抗病性为抗白粉菌引起的病害；
所述小麦为普通小麦品种Fielder。
5.一种培育转基因小麦的方法，包括向受体小麦中导入编码权利要求1中所述蛋白质Pm41的核酸分子，得到转基因小麦的步骤；与所述受体小麦相比，所述转基因小麦的抗病性提高；
所述抗病性为抗白粉菌引起的病害；
所述小麦为普通小麦品种Fielder。
6.一种小麦育种方法，包括如下步骤：向受体小麦中导入编码权利要求1中所述蛋白质Pm41的核酸分子，从而提高小麦的抗病性；
所述抗病性为抗白粉菌引起的病害；
所述小麦为普通小麦品种Fielder。
CN201910212575.2A 2019-03-20 2019-03-20 抗白粉病相关蛋白Pm41及其编码基因与应用 Active CN111732644B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910212575.2A CN111732644B (zh) 2019-03-20 2019-03-20 抗白粉病相关蛋白Pm41及其编码基因与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910212575.2A CN111732644B (zh) 2019-03-20 2019-03-20 抗白粉病相关蛋白Pm41及其编码基因与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111732644A CN111732644A (zh) 2020-10-02
CN111732644B true CN111732644B (zh) 2021-11-16

Family

ID=72645646

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910212575.2A Active CN111732644B (zh) 2019-03-20 2019-03-20 抗白粉病相关蛋白Pm41及其编码基因与应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111732644B (zh)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115850414B (zh) * 2021-09-03 2025-04-18 山东农业大学 小麦抗白粉病基因PmD479及其应用
WO2023152742A1 (en) * 2022-02-08 2023-08-17 Carmel Haifa University Economic Corporation Ltd. Pm69 and use thereof
CN116003547B (zh) * 2022-07-26 2025-05-27 河南农业大学 西尔斯山羊草抗白粉病相关蛋白Pm57及其编码基因和应用
CN118516393A (zh) * 2023-02-20 2024-08-20 中国科学院遗传与发育生物学研究所 小麦广谱抗白粉病基因wtk7-tm克隆、功能标记及其应用
CN117343941B (zh) * 2023-11-15 2024-10-25 南京农业大学 小麦内源白粉菌抗性基因及其应用
CN120020143A (zh) * 2023-11-17 2025-05-20 中国科学院遗传与发育生物学研究所 小麦广谱抗白粉病基因Pm26克隆及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7868149B2 (en) * 1999-07-20 2011-01-11 Monsanto Technology Llc Plant genome sequence and uses thereof
CN107011421A (zh) * 2017-05-25 2017-08-04 中国科学院遗传与发育生物学研究所 小麦抗白粉病相关蛋白TaEDS1‑A1及其编码基因与应用
CN108026150A (zh) * 2015-08-04 2018-05-11 双刃基金会 小麦秆锈病抗性基因及使用方法
CN112176083A (zh) * 2019-07-05 2021-01-05 中国科学院遗传与发育生物学研究所 小麦抗白粉病相关基因Pm41的功能型分子标记及其应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7868149B2 (en) * 1999-07-20 2011-01-11 Monsanto Technology Llc Plant genome sequence and uses thereof
CN108026150A (zh) * 2015-08-04 2018-05-11 双刃基金会 小麦秆锈病抗性基因及使用方法
CN107011421A (zh) * 2017-05-25 2017-08-04 中国科学院遗传与发育生物学研究所 小麦抗白粉病相关蛋白TaEDS1‑A1及其编码基因与应用
CN112176083A (zh) * 2019-07-05 2021-01-05 中国科学院遗传与发育生物学研究所 小麦抗白粉病相关基因Pm41的功能型分子标记及其应用

Non-Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A CNL protein in wild emmer wheat confers powdery mildew resistance;Miaomiao Li 等;《New Phytol》;20200722;第228卷(第3期);第1027-1037页 *
Comparative genetic mapping and genomic region collinearity analysis of the powdery mildew resistance gene Pm41;Zhenzhong Wang 等;《Theor Appl Genet》;20140607;第127卷(第8期);第1741-1751页 *
disease resistance rpp1 3-like protein 3 [Hordeum vulgare];GenBank;《GenBank》;20191129;KAE8767686.1 *
PREDICTED: Triticum dicoccoides disease resistance protein RGA5-like (LOC119278609),mRNA,GenBank;GenBank;《GenBank》;20201113;XM_037559940.1 *
Triticum dicoccoides powdery mildew resistance protein Pm41 (Pm41 ) gene, complete cds;GenBank;《GenBank》;20200321;MN395289.1 *
Triticum turgidum subsp. durum genome assembly, chromosome: chr3B;GenBank;《GenBank》;20190211;LT934116.1 VAH85177.1 *
UniProtKB-A0A6G8D918(A0A6G8D918_TRIDC);UniProtKB;《UniProtKB》;20200812;A0A6G8D918 *
小麦抗白粉病基因Pm41和MlHLT遗传作图和物理定位;王振忠;《中国优秀博硕士学位论文全文数据库(博士)农业科技辑》;20190115(第01（2019）期);D046-62 *
小麦抗白粉病基因Pm41高密度遗传连锁图谱构建;王振忠 等;《第三届全国小麦基因组学及分子育种大会论文集》;20121231;第11页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111732644A (zh) 2020-10-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111732644B (zh) 抗白粉病相关蛋白Pm41及其编码基因与应用
AU2019276382B2 (en) Use of Yr4DS gene of Aegilops tauschii in stripe rust resistance breeding of Triticeae plants
KR101303110B1 (ko) 옥수수 이벤트 ｍｉｒ604
CN110511945B (zh) 一种水稻育性调控基因及其突变体与应用
CN114350687B (zh) 一种水稻抗白叶枯病基因、蛋白及其应用
CN111978387A (zh) 水稻稻瘟病抗性基因Pikg、编码蛋白及其应用
US20170137838A1 (en) Stress tolerant wheat plants
CN101932710B (zh) 增强对稻瘟病菌的抗性的基因以及该基因的应用
CN112176083B (zh) 小麦抗白粉病相关基因Pm41的功能型分子标记及其应用
CN113490683A (zh) 灰斑病抗性相关蛋白ZmWAK-RLK及其编码基因和应用
CN102603878B (zh) 一个植物谷蛋白转运储藏相关蛋白OsVps9a 及其编码基因与应用
CN113234733B (zh) 一个水稻叶绿体发育的相关基因及分子标记和应用
CN109136232A (zh) 簇毛麦抗白粉病基因DvRGA-1、DvRGA-2及其应用
CN107266543B (zh) 抗逆相关蛋白IbRAP2-12及其编码基因与应用
CN102732531B (zh) 一种水稻稻瘟病抗性基因RMg7或RMg8或RMg9及其应用
CN112458105B (zh) 一种普通野生稻粒型相关编码基因及其应用
CN111763249B (zh) 植物白粉病抗性相关蛋白Pm5e及其编码基因和应用
CN115772211A (zh) 水稻小穗发育基因lgs1、编码蛋白、重组载体、重组细胞及应用
CN104293799B (zh) 一种水稻稻瘟病抗性基因RMg38及其应用
CN109912706B (zh) 一种水稻弱势早衰相关基因、蛋白质、分子标记及应用
CN100529078C (zh) 控制水稻绒毡层降解的蛋白编码序列
CN106350525B (zh) 一种水稻粒型基因dss及其编码蛋白质和应用
CN114438100B (zh) 一种高效分离带有野生稻血缘的抗白叶枯病基因及其家族成员的方法
WO2018184333A1 (zh) 蛋白质nog1在调控植物产量和穗粒数中的应用
CN117535340B (zh) 蛋白质pce1在调控高粱株高和粒重中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant