CN112458105B

CN112458105B - 一种普通野生稻粒型相关编码基因及其应用

Info

Publication number: CN112458105B
Application number: CN202011517723.0A
Authority: CN
Inventors: 潘英华; 邓国富; 高利军; 戴高兴
Original assignee: Guangxi Zhuang Nationality Autonomous Region Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: Guangxi Zhuang Nationality Autonomous Region Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2020-12-21
Filing date: 2020-12-21
Publication date: 2023-07-28
Anticipated expiration: 2040-12-21
Also published as: CN112458105A

Abstract

本发明公开了一种普通野生稻粒型相关编码基因GL12‑2在调控水稻粒型中的应用，所述普通野生稻粒型相关编码基因GL12‑2来源于稻属普通野生稻(Oryzarufipogon Griff.)的Y12株系的DNA序列；所述调控水稻粒型是指调控水稻粒型变短、变窄。本发明首次鉴定了与普通野生稻粒型相关基因GL12‑2，普通野生稻粒型相关基因GL12‑2在功能增强或表达量上升的条件下会得到粒型普通野生稻，证明普通野生稻粒型相关基因蛋白或其蛋白在控制普通野生稻粒型中发挥重要作用；本发明获得的GL12‑2基因表达升高的转基因水稻，作为新的水稻种质材料，可用于研究粒型水稻机理和发现更多的调控普通野生稻粒型发育的基因。

Description

一种普通野生稻粒型相关编码基因及其应用

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及一种普通野生稻粒型相关编码基因及其应用。

背景技术

水稻是人类最重要的粮食作物之一，世界上有100多个国家种植水稻，2/3的人口以水稻作为主粮。亚洲地区对稻米的需求量逐年增加，由于经济快速发展、人口压力增大、工业用地剧增、耕地面积减少，水稻生产面临巨大的压力。稻米品质与粒形密切相关，其外观品质主要由粒形、垩白度和透明度等指标来衡量。因此对水稻优质化育种提供粒型基因资源，是科学家们的主要研究方向。

调控水稻粒长的主效基因主要包括GS3、qGL3、GL4和GLW7，已克隆的GS3基因包含5个外显子，编码一个由232个氨基酸组成的跨膜蛋白，对粒重起负调控作用。qGL3编码一个属于蛋白磷酸酶PPKL家族的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶，通过调控细胞周期蛋白T1；3控制水稻籽粒大小和产量。GL4通过调控外颖和内颖纵向细胞的伸长，控制非洲栽培稻的粒长。因此粒型基因的克隆在水稻品种改良中起着重要作用。

当今水稻优质化育种的主要问题是基因来源范围狭窄，导致水稻的优良基因选择范围不大。如何在野生稻里挖掘新的优良基因显得尤为关键。当广西普通野生稻中蕴藏着丰富的基因，挖掘普通野生稻的有利基因，从普通稻中发掘并鉴定粒型新资源，深入探究调控粒型的分子机制，将有助于水稻育种家在育种过程中为分子设计育种改良水稻优质提供理论依据，最终实现高效育种。

发明内容

本发明针对上述技术问题，提供一种普通野生稻粒型相关编码基因及其应用，旨在得到一种粒型相关的普通野生稻。

为实现上述目的，本发明提供的技术方案如下：

一种普通野生稻粒型相关编码基因，名称为GL12-2，来源于稻属普通野生稻(Oryzarufipogon Griff.)的Y12株系的DNA序列，GL12-2在水稻粒型中的应用。

其中，所述普通野生稻粒型相关编码基因GL12-2为a)或b)：

a)cDNA序列如SEQ ID No.1所示的基因序列，由2919个碱基组成；

b)将SEQ ID No.1所示的基因序列经过一个或几个碱基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有普通野生稻粒型相关基因编码的GL12-2蛋白活性的由a)衍生的蛋白质。

其中，与所述普通野生稻粒型相关基因GL12-2相关的生物材料，在培育粒型普通野生稻的转基因水稻中的应用；所述与普通野生稻粒型相关基因GL12-2相关的生物材料为下述A1)至A20)中的任一种：

A1)核酸分子1；所述核酸分子1为编码所述普通野生稻粒型相关基因GL12-2的核酸分子；

A2)含有A1)所述核酸分子1的表达盒；

A3)含有A1)所述核酸分子1的重组载体；

A4)含有A2)所述表达盒的重组载体；

A5)含有A1)所述核酸分子1的重组微生物；

A6)含有A2)所述表达盒的重组微生物；

A7)含有A3)所述重组载体的重组微生物；

A8)含有A4)所述重组载体的重组微生物；

A9)含有A1)所述核酸分子1的转基因植物细胞系；

A10)含有A2)所述表达盒的转基因植物细胞系；

A11)含有A3)所述重组载体的转基因植物细胞系；

A12)含有A4)所述重组载体的转基因植物细胞系；

A13)含有A1)所述核酸分子1的转基因植物组织；

A14)含有A2)所述表达盒的转基因植物组织；

A15)含有A3)所述重组载体的转基因植物组织；

A16)含有A4)所述重组载体的转基因植物组织；

A17)含有A1)所述核酸分子1的转基因植物器官；

A18)含有A2)所述表达盒的转基因植物器官；

A19)含有A3)所述重组载体的转基因植物器官；

A20)含有A4)所述重组载体的转基因植物器官。

上述与所述普通野生稻粒型相关基因GL12-2相关的生物材料在调控水稻粒型中的应用，所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA或hnRNA等。

上述与所述普通野生稻粒型相关基因GL12-2相关的生物材料中，所述表达盒是指能够在宿主细胞中表达相应蛋白质的DNA，该DNA不但可包括启动相关基因转录的启动子，还可包括终止相关基因转录的终止子，如A2)所述的含有编码所述普通野生稻粒型相关蛋白GL12-2的核酸分子的表达盒，是指能够在宿主细胞中表达所述普通野生稻粒型相关基因GL12-2的DNA。

构建含有所述GL12-2基因表达盒的重组载体的现有的植物表达载体，为pET-28a、pCAMBIA2301、pSP72、pROKII、pBin438、pCAMBIA1302、pCAMBIA1301、pCAMBIA1300、pBI121、pCAMBIA1391-Xa或pCAMBIA1391-Xb(CAMBIA公司)等中的一种。

上述生物材料中，A5)-A8)中任一所述重组微生物或B5)-B8)中任一所述重组微生物具体可为细菌、酵母、藻或真菌。其中，细菌可来自埃希氏菌属(Escherichia)、欧文氏菌(Erwinia)、根癌农杆菌属(Agrobacterium)、黄杆菌属(Flavobacterium)、产碱菌属(Alcaligenes)、假单胞菌属(Pseudomonas)、芽胞杆菌属(Bacillus)等。

上述生物材料中，A9)-A12)中任一所述的转基因细胞系，A13)-A16)中任一所述的转基因植物组织，A17)-A20)中任一所述的转基因植物器官不包括植物的繁殖材料。

本发明所提供的一种培育粒型的转基因水稻的方法，将SEQ ID No.1所示的普通野生稻粒型相关基因GL12-2构建过表达载体导入水稻中，获得GL12-2基因过表达的转基因水稻。

其中，所述水稻为籼稻测253。

其中，所述过表达载体为重组表达载体PMDC32或载体pCAMBIA1301；将表达载体PMDC32或载体pCAMBIA1301的Asc I和PacI识别位点间的序列替换为SEQ ID No.1所示的DNA序列。

其中，所述重组表达载体PMDC32可通过使用农杆菌介导、Ti质粒，植物病毒载体，直接DNA转化，微注射，电穿孔等常规生物技术方法导入植物细胞或组织。

其中，所述方法还包括从导入SEQ ID No.1所示DNA序列的受体水稻中筛选出普通野生稻粒型相关基因GL12-2表达量升高的水稻，得到所述GL12-2基因表达水平升高的转基因水稻的步骤。

其中，所述转基因水稻理解为不仅包含将所述基因转化受体水稻得到的第一代转基因水稻，也包括其子代。对于转基因水稻，可以在该物种中繁殖该基因，也可用常规育种技术将该基因转移进入相同物种的其它品种，特别包括商业品种中。所述转基因水稻包括种子、愈伤组织、完整植株和细胞。

本发明将如SEQ ID No.1所示DNA序列的普通野生稻粒型相关编码基因GL12-2导入水稻中，获得GL12-2基因表达水平提高的转基因水稻。表达水平高于受体亲本水稻，而且该过表达转基因水稻出现了粒型的表现。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

本发明首次鉴定了与普通野生稻粒型相关基因GL12-2，普通野生稻粒型相关基因GL12-2在功能增强或表达量上升的条件下会得到粒型普通野生稻，证明普通野生稻粒型相关基因蛋白或其蛋白在控制普通野生稻粒型中发挥重要作用；本发明不仅为进一步阐明普通野生稻粒型的分子机理提供基础，而且为水稻育种提供新的基因资源和育种资源。本发明获得的GL12-2基因表达升高的转基因水稻，作为新的水稻种质材料，可用于研究粒型水稻机理和发现更多的调控普通野生稻粒型发育的基因。

附图说明

图1为普通野生稻粒型相关基因GL12-2表达水平升高的过表达转基因水稻的GL12-2基因的转录水平的检测；其中，Ce253代表受体亲本籼稻测253植株，OE-GL12-2a、OE-GL12-2b、OE-GL12-2c代表转入重组载体PMDC32-GL12-2的过表达阳性植株OE-GL12-2独立转化事件。

图2为普通野生稻粒型相关基因GL12-2表达水平升高的过表达转基因水稻的表型观察；其中，Ce253代表受体亲本籼稻测253植株，OE-GL12-2a、OE-GL12-2b、OE-GL12-2c代表转入重组载体PMDC32-GL12-2的过表达阳性植株OE-GL12-2独立转化事件。

具体实施方式

下面结合附图具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

下述实施例中的水稻籼稻测253(也称为野生型水稻，简称Ce253)，公众可从广西壮族自治区农业科学院水稻研究所获得该生物材料，该生物材料只为重复本发明的相关实验所用，不可作为其它用途使用。

下述实施例中所用表达载体PMDC32为市售所得；公众也可从中广西壮族自治区农业科学院水稻研究所获得该生物材料，该生物材料只为重复本发明的相关实验所用，不可作为其它用途使用。

下述实施例中的农杆菌为根癌农杆菌EHA105(Agrobacterium tumefaciensEHA105)(New Agrobacterium helper plasmids for gene transfer toplants.Hood,ElizabethE；Gelvin,StantonB；Melchers,LeoS；Hoekema,Andre.Trans genic research,2(4):p.208-218(1993))为市售所得；公众也可从广西壮族自治区农业科学院水稻研究所获得该生物材料，该生物材料只为重复本发明的相关实验所用，不可作为其它用途使用。

实施例1

普通野生稻粒型相关基因GL12-2过表达载体的构建

1、GL12-2基因的获得

以普通野生稻Y12(Oryzarufipogon Griff.)的DNA为模板，用如下引物primer1和primer2进行PCR扩增获得目的基因：

primer1：5'ATGGACGGGTTTGGCCTG 3'；

primer2：5'TCAGTGAAGATCATTCCA 3'。

将PCR产物回收纯化后连接入Zero(购买自北京全式金公司)测序载体，转化DH5α感受态细胞，挑选阳性克隆后，进行测序。

测序结果表明，扩增得到的PCR产物序列如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，长度为2919bp，命名为GL12-2基因，GL12-2基因编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

2、普通野生稻粒型相关基因GL12-2过表达载体(重组表达载体OE-GL12-2)的构建

1)用primer1和primer2扩增野生稻cDNA，获得GL12-2基因的序列，并连接到重组载体Zero-GL12-2，得到了Zero-GL12-2的阳性克隆，用限制性内切酶AscI和PacI酶切重组载体Zero-GL12-2获得GL12-2片段，连接重组成OE-GL12-2；

2)用限制性内切酶Asc I和PacI酶切表达载体PMDC32，得到线性表达载体PMDC32，回收该线性片段；将步骤1)中得到的片段1OE-GL12-2采用同源重组定向克隆的方法整合到线性表达载体PMDC32上(具体方法参考PMDC32使用说明书)，得到同源重组产物1，再将同源重组产物1转入DH5α感受态细胞，37℃培养过夜，得到重组载体OE-GL12-2；

3)对步骤2)所得重组载体OE-GL12-2进行测序，结果表明该重组载体OE-GL12-2是在表达载体PMDC32的Asc I酶切位点正向插入了如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，即成功将PMDC32的Asc I和PacI识别位点(识别序列)间的DNA序列替换为如SEQ ID No.1所示的DNA序列。

实施例2

培育普通野生稻粒型相关基因GL12-2表达水平升高的过表达GL12-2转基因植株及转基因植株的鉴定

一、培育普通野生稻粒型相关基因GL12-2表达水平升高的过表达GL12-2转基因植株，将重组载体OE-GL12-2通过根癌农杆菌EHA105介导转化籼稻测253粳稻，具体方法如下：

1、将实施例1所得重组载体OE-GL12-2用热激法导入根癌农杆菌EHA105中得到含有重组载体OE-GL12-2的重组根癌农杆菌EHA105；将含有重组载体OE-GL12-2的重组根癌农杆菌EHA105在28℃培养16h，收集菌体；采用含有浓度为100μM乙酰丁香酮的N6液体培养基(Sigma，产品目录号为C1416)将菌体进行稀释，得到稀释菌液，稀释菌液的OD₆₀₀≈0.5；

2、将培养至一个月的水稻成熟胚胚性愈伤组织与步骤1的稀释菌液混合侵染30min，采用滤纸吸干菌液后转入N6固体共培养培养基中，在24℃共培养3d，得到共培养处理后的愈伤组织；

3、将步骤2的共培养处理后的愈伤组织接种在含有质量浓度为150mg/L潮霉素的N6固体筛选培养基(向N6固体培养基中加入潮霉素得到N6固体筛选培养基，N6固体筛选培养基中潮霉素的质量浓度为150mg/L)上进行第一次筛选；

4、在第一次筛选开始的第16天挑取健康愈伤组织转入含有质量浓度为200mg/L潮霉素的N6固体筛选培养基(向N6固体培养基中加入潮霉素得到N6固体筛选培养基，N6固体筛选培养基中潮霉素的质量浓度为200mg/L)上进行第二次筛选，每15天继代一次，共继代1次；

5、挑取步骤4获得的抗性愈伤组织转入含有质量浓度为150mg/L潮霉素的分化培养基上(分化培养基：6-BA 2mg，NAA 0.2mg，N6 4g，水解酪蛋白1g，肌醇0.1g，蔗糖25g，山梨醇2.4g，琼脂粉7g，去离子水1L)进行分化，在24℃培养45d(此时植株地上部分高度约为15cm)，打开瓶口炼苗3天，然后移栽至温室栽培，即为转OE-GL12-2植株(T0代)。

二、普通野生稻粒型相关基因GL12-2表达水平升高的OE-GL12-2转基因植株的PCR鉴定提取

获得的转OE-GL12-2植株的T0代幼苗和受体亲本水稻籼稻测253植株的幼苗(简称为Ce253)的基因组DNA，并采用引物

primer1：5'AAAAGTTCGACAGCGTCTCCGACC 3'；

primer2：5'TCTACACAGCCATCGGTCCAGACG 3'；进行PCR分子检测鉴定阳性苗，得到900bp PCR产物的植株为阳性苗，取其中三株分别标记为OE-GL12-2a、OE-GL12-2b、OE-GL12-2c。

三、普通野生稻粒型相关基因GL12-2表达水平升高的过表达转基因植株的GL12-2基因表达水平的鉴定：

分别提取上述“二”步骤操作得到的OE-GL12-2a、OE-GL12-2b、OE-GL12-2c植株和受体亲本水稻籼稻测253植株(简称为Ce253)叶片的RNA，设定内参为Actin，利用内参引物Actin-F和Actin-R，以及GL12-2基因特异性定量引物GL12-2-qRT-F和GL12-2-qRT-R进行荧光定量PCR反应来检测不同转基因植株GL12-2基因的表达水平的变化，上述引物如下：

Actin-F：5’-ATTTGGCACCACACATTCTAC-3’；

Actin-R：5’-ATAACCTTCGTAGATTGGGACT-3’；

GL12-2-RT-F：5'TTCAAGGAGGCTGCTGATGA 3'

GL12-2-RT-R:5'CAACCGAGATCCATGCCTTG 3'

结果表明(图1)，在转入重组载体P OE-GL12-2的阳性植株中GL12-2基因的表达水平均比对照(Ce253)的GL12-2基因的表达水平的显著上升。

四、普通野生稻粒型相关基因GL12-2表达水平上升的GL12-2过表达转基因植株的表型鉴定

分别将上述“二”步骤操作得到的OE-GL12-2a、OE-GL12-2b、OE-GL12-2c和受体亲本水稻籼稻测253植株种植并收获T2代种子，对种子使用万深SC-G考种仪测量种子的粒宽数据，统计粒宽数据。观察结果如图2，与受体亲本水稻测253种子相比，OE-GL12-2植株的种子粒宽比测253明显变小，并达到显著差异，从而证明了GL12-2基因参与控制粒型普通野生水稻形成过程，即该GL12-2基因为普通野生水稻粒型基因。

前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。

序列表

<110> 广西壮族自治区农业科学院

<120> 一种普通野生稻粒型相关编码基因及其应用

<130> JC

<160> 2

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 2919

<212> DNA

<213> Oryzarufipogon Griff.

<400> 1

atggacgggt ttggcctgag ctccacccac tccgccgtga agtcgctcgt cggccggctg 60

accgacgttc tctccgacca agtgcagctg ctaggagggc tgaggcgcga ggtgcagttc 120

atccgggacg agatggagag catgaacggc ttcctcctca atcatgcccg caggggccgc 180

atggaccacc agctccaggc gtggatgaac caggtcaagg acctcgccaa ccattcccag 240

tactgcgtcg accagtactt gcggtgcctc ggcaccacca gccaccgctc gccgggtggc 300

ctctggggct ccgtgcgccg tctcccccgg ttcgtcagca cgttgccggc gcgctaccgg 360

ttggctatcc aaatccagga catcaagatc cgggtagtgg aggttagcca gaggcagcag 420

aggtatcctc tccatggcac ggctaccgag caggagccgc agtctggcat ggccagcgat 480

catagccagc aagctttcct taccggtgac agtgaagccg atcagcagga gcatcttcgg 540

aggcgtatct tggccgaaga cgactctggc ctgttcaagg aggctgctga tgagctcacc 600

agctggctga cagtggaagg agatggcaga tcagatctca gaatcatccc cattgtcggc 660

tcccgtggca tgggcaaaac cactcttgct gagcaagtgt acaaaggtta ttcctcaagg 720

ttggcagacc acaaggcatg gatctcggtt ggctccaacc aatctccaca gcaagtactc 780

cgggacatac tcgcgcagat tgtagggctt catgctaata atctgcagga catgggaaca 840

tggggaaaca gccaaatcgc actgatgatt caggagcagc tggaaggtaa aaggttcctt 900

attgttcttg atgatgtctg ctccgagtcg ctctggaaag atatcgaagc ttctctccac 960

tgcggtaatt ctgctcccag tgctatactt gtcaccacaa gcttgcctga agtggcacag 1020

tcattttgtc cttacagaat atatgatcta aggtatatcc aggaggagca taaccgctcc 1080

ttagttgatt tcttcctcgt gagagcagct aacttgataa gtgacaatgg tcatggcaaa 1140

gctggtctca aggaggaggt tcttcgcagc attttagtaa aatgttcccc ctgtatcttt 1200

agcatgaaga tgcttctccg attcctttat gcgaatccta acaagaccct acaggaactg 1260

catgacttca gcaacagcct gtgcttctgc agccctctgc atctgtcttc atggctgtcc 1320

aatgccgaga aaatgctcac attctgctac aacgccttgc cttgtgatta caggagctgc 1380

ttgctgtatc ttaccatttt ccccaatgac cacaatatca ggagaacgag cctgctcaga 1440

aaatggatcg cggaaggcct aatagctgaa agagatggac tgagtgcatt tgatgttgcc 1500

aaccgatgtt ttgatgctct tctcgctcaa agatttgttc ttcctggtga tgttggaaat 1560

tcaggcaagg taaacagctg cagagtgcac aatctagtac gtgacttcat tgcctgggtc 1620

atcagagatg acaactttgt gtacacaaag ctaccagtcg acttggctca ccgtcttccc 1680

atccacaatg gagaaagact gcagcaggtc tcgcggatca aacttcgtgc ttctcatttc 1740

gacgattgtt ggagcatgac aaggtgttgc ttcacaacga agtcagtgga tcccttggct 1800

ggcatatcca tgttacttag atcaattcag gaatctgctc aactaggatt acgcctcaat 1860

gtacttgatc tagaaggctg caaaggattg gagaagtatc acctgaacag cgtttgcaag 1920

atatttcaac tcaagtattt gagcctcagg aatacagatg tttcccactt gcccaagaag 1980

atcgacaagc tacagtacct ggagacactt gacatccggc aaacccagat aaaggcattc 2040

ccaggaaagc attttatcct tcctgggctg aagcacctac ttgctggttg caccaattgt 2100

cctagcaaga aaaataatct catggaaaag gaatcttgct cgttttccac tgtgctcatg 2160

cctcaaaaaa ttgtgaggat gggaaagttg gagatactat gctatgctga ggtttccagt 2220

ggcctcactg ggctaatggg catttgtcag ttacgacgac tcagaaaatt gggagtactc 2280

ttgcaaggta atgcagcttg taatctggat tacttgttcc gacaaatcga tatgttggat 2340

agaagcctgc actctttgtc aatccggatg gaacgactga agttagccaa agacgatgct 2400

cgcaaaaggg atgacatggt acccacgtca tttcccttct cacctccaaa gtttgttcag 2460

aagctaaaca tcagtggcat cagaagtgca ttgcttggtt ggattggtga cctccaccaa 2520

ctttccaaga taactctgca tgagacttca ctcacggaac atgttctcgg tatcctggga 2580

cagcttggca gcctgcggtg cctcaagctc cagtgcaatt caaccatggg tagcagtcta 2640

tcgttcagga gtggagcgtt tcggaacctc gtagctcttg ttgtccagga caataacctc 2700

cttgacatta tctttgatta cggagcagct ccaaggcttg agagagtgat attgtctatc 2760

gccgccattg actctctgtc tggagtacag caccttcagc agctgaaaga gctcgagctc 2820

catggaagtg caagaaacat aggcgaggtc gaacaggcca tagcaggaca ccataataat 2880

ccagttttca gacacgagca atggaatgat cttcactga 2919

<210> 2

<211> 972

<212> PRT

<213> Oryzarufipogon Griff.

<400> 2

Met Asp Gly Phe Gly Leu Ser Ser Thr His Ser Ala Val Lys Ser Leu

1 5 10 15

Val Gly Arg Leu Thr Asp Val Leu Ser Asp Gln Val Gln Leu Leu Gly

20 25 30

Gly Leu Arg Arg Glu Val Gln Phe Ile Arg Asp Glu Met Glu Ser Met

35 40 45

Asn Gly Phe Leu Leu Asn His Ala Arg Arg Gly Arg Met Asp His Gln

50 55 60

Leu Gln Ala Trp Met Asn Gln Val Lys Asp Leu Ala Asn His Ser Gln

65 70 75 80

Tyr Cys Val Asp Gln Tyr Leu Arg Cys Leu Gly Thr Thr Ser His Arg

85 90 95

Ser Pro Gly Gly Leu Trp Gly Ser Val Arg Arg Leu Pro Arg Phe Val

100 105 110

Ser Thr Leu Pro Ala Arg Tyr Arg Leu Ala Ile Gln Ile Gln Asp Ile

115 120 125

Lys Ile Arg Val Val Glu Val Ser Gln Arg Gln Gln Arg Tyr Pro Leu

130 135 140

His Gly Thr Ala Thr Glu Gln Glu Pro Gln Ser Gly Met Ala Ser Asp

145 150 155 160

His Ser Gln Gln Ala Phe Leu Thr Gly Asp Ser Glu Ala Asp Gln Gln

165 170 175

Glu His Leu Arg Arg Arg Ile Leu Ala Glu Asp Asp Ser Gly Leu Phe

180 185 190

Lys Glu Ala Ala Asp Glu Leu Thr Ser Trp Leu Thr Val Glu Gly Asp

195 200 205

Gly Arg Ser Asp Leu Arg Ile Ile Pro Ile Val Gly Ser Arg Gly Met

210 215 220

Gly Lys Thr Thr Leu Ala Glu Gln Val Tyr Lys Gly Tyr Ser Ser Arg

225 230 235 240

Leu Ala Asp His Lys Ala Trp Ile Ser Val Gly Ser Asn Gln Ser Pro

245 250 255

Gln Gln Val Leu Arg Asp Ile Leu Ala Gln Ile Val Gly Leu His Ala

260 265 270

Asn Asn Leu Gln Asp Met Gly Thr Trp Gly Asn Ser Gln Ile Ala Leu

275 280 285

Met Ile Gln Glu Gln Leu Glu Gly Lys Arg Phe Leu Ile Val Leu Asp

290 295 300

Asp Val Cys Ser Glu Ser Leu Trp Lys Asp Ile Glu Ala Ser Leu His

305 310 315 320

Cys Gly Asn Ser Ala Pro Ser Ala Ile Leu Val Thr Thr Ser Leu Pro

325 330 335

Glu Val Ala Gln Ser Phe Cys Pro Tyr Arg Ile Tyr Asp Leu Arg Tyr

340 345 350

Ile Gln Glu Glu His Asn Arg Ser Leu Val Asp Phe Phe Leu Val Arg

355 360 365

Ala Ala Asn Leu Ile Ser Asp Asn Gly His Gly Lys Ala Gly Leu Lys

370 375 380

Glu Glu Val Leu Arg Ser Ile Leu Val Lys Cys Ser Pro Cys Ile Phe

385 390 395 400

Ser Met Lys Met Leu Leu Arg Phe Leu Tyr Ala Asn Pro Asn Lys Thr

405 410 415

Leu Gln Glu Leu His Asp Phe Ser Asn Ser Leu Cys Phe Cys Ser Pro

420 425 430

Leu His Leu Ser Ser Trp Leu Ser Asn Ala Glu Lys Met Leu Thr Phe

435 440 445

Cys Tyr Asn Ala Leu Pro Cys Asp Tyr Arg Ser Cys Leu Leu Tyr Leu

450 455 460

Thr Ile Phe Pro Asn Asp His Asn Ile Arg Arg Thr Ser Leu Leu Arg

465 470 475 480

Lys Trp Ile Ala Glu Gly Leu Ile Ala Glu Arg Asp Gly Leu Ser Ala

485 490 495

Phe Asp Val Ala Asn Arg Cys Phe Asp Ala Leu Leu Ala Gln Arg Phe

500 505 510

Val Leu Pro Gly Asp Val Gly Asn Ser Gly Lys Val Asn Ser Cys Arg

515 520 525

Val His Asn Leu Val Arg Asp Phe Ile Ala Trp Val Ile Arg Asp Asp

530 535 540

Asn Phe Val Tyr Thr Lys Leu Pro Val Asp Leu Ala His Arg Leu Pro

545 550 555 560

Ile His Asn Gly Glu Arg Leu Gln Gln Val Ser Arg Ile Lys Leu Arg

565 570 575

Ala Ser His Phe Asp Asp Cys Trp Ser Met Thr Arg Cys Cys Phe Thr

580 585 590

Thr Lys Ser Val Asp Pro Leu Ala Gly Ile Ser Met Leu Leu Arg Ser

595 600 605

Ile Gln Glu Ser Ala Gln Leu Gly Leu Arg Leu Asn Val Leu Asp Leu

610 615 620

Glu Gly Cys Lys Gly Leu Glu Lys Tyr His Leu Asn Ser Val Cys Lys

625 630 635 640

Ile Phe Gln Leu Lys Tyr Leu Ser Leu Arg Asn Thr Asp Val Ser His

645 650 655

Leu Pro Lys Lys Ile Asp Lys Leu Gln Tyr Leu Glu Thr Leu Asp Ile

660 665 670

Arg Gln Thr Gln Ile Lys Ala Phe Pro Gly Lys His Phe Ile Leu Pro

675 680 685

Gly Leu Lys His Leu Leu Ala Gly Cys Thr Asn Cys Pro Ser Lys Lys

690 695 700

Asn Asn Leu Met Glu Lys Glu Ser Cys Ser Phe Ser Thr Val Leu Met

705 710 715 720

Pro Gln Lys Ile Val Arg Met Gly Lys Leu Glu Ile Leu Cys Tyr Ala

725 730 735

Glu Val Ser Ser Gly Leu Thr Gly Leu Met Gly Ile Cys Gln Leu Arg

740 745 750

Arg Leu Arg Lys Leu Gly Val Leu Leu Gln Gly Asn Ala Ala Cys Asn

755 760 765

Leu Asp Tyr Leu Phe Arg Gln Ile Asp Met Leu Asp Arg Ser Leu His

770 775 780

Ser Leu Ser Ile Arg Met Glu Arg Leu Lys Leu Ala Lys Asp Asp Ala

785 790 795 800

Arg Lys Arg Asp Asp Met Val Pro Thr Ser Phe Pro Phe Ser Pro Pro

805 810 815

Lys Phe Val Gln Lys Leu Asn Ile Ser Gly Ile Arg Ser Ala Leu Leu

820 825 830

Gly Trp Ile Gly Asp Leu His Gln Leu Ser Lys Ile Thr Leu His Glu

835 840 845

Thr Ser Leu Thr Glu His Val Leu Gly Ile Leu Gly Gln Leu Gly Ser

850 855 860

Leu Arg Cys Leu Lys Leu Gln Cys Asn Ser Thr Met Gly Ser Ser Leu

865 870 875 880

Ser Phe Arg Ser Gly Ala Phe Arg Asn Leu Val Ala Leu Val Val Gln

885 890 895

Asp Asn Asn Leu Leu Asp Ile Ile Phe Asp Tyr Gly Ala Ala Pro Arg

900 905 910

Leu Glu Arg Val Ile Leu Ser Ile Ala Ala Ile Asp Ser Leu Ser Gly

915 920 925

Val Gln His Leu Gln Gln Leu Lys Glu Leu Glu Leu His Gly Ser Ala

930 935 940

Arg Asn Ile Gly Glu Val Glu Gln Ala Ile Ala Gly His His Asn Asn

945 950 955 960

Pro Val Phe Arg His Glu Gln Trp Asn Asp Leu His

965 970

Claims

1.一种普通野生稻粒型相关编码基因GL12-2在调控水稻粒型中的应用，其特征在于：所述普通野生稻粒型相关编码基因GL12-2来源于稻属普通野生稻的Y12株系；所述调控水稻粒型是指调控水稻粒型变短、变窄；

其中，所述普通野生稻粒型相关编码基因GL12-2的DNA序列如SEQ IDNo.1所示。

2.根据权利要求1所述的普通野生稻粒型相关编码基因GL12-2在培育粒型变短、变窄的转基因水稻中的应用。

3.根据权利要求1所述应用，其特征在于：通过将SEQ ID No.1所示的普通野生稻粒型相关基因GL12-2构建过表达载体导入水稻中，获得GL12-2基因过表达的转基因水稻。

4.根据权利要求3所述应用，其特征在于：所述水稻为籼稻测253。

5.根据权利要求3所述应用，其特征在于：所述过表达载体为重组表达载体PMDC32或载体pCAMBIA1301；将表达载体PMDC32或载体pCAMBIA1301的AscI和PacI识别位点间的序列替换为SEQ ID No.1所示的DNA序列。

6.根据权利要求5所述应用，其特征在于：所述重组表达载体PMDC32可通过使用农杆菌介导，植物病毒载体，直接DNA转化常规生物技术方法导入植物细胞或组织。

7.根据权利要求3所述应用，其特征在于：还包括从导入SEQ ID No.1所示DNA序列的受体水稻中筛选出普通野生稻粒型相关基因GL12-2表达量升高的水稻，得到所述GL12-2基因表达水平升高的转基因水稻的步骤。