CN111712262A - 用于动员造血干细胞和祖细胞的给药方案 - Google Patents

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帕特里克·C·法拉赫
安东尼·博伊坦诺
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凯文·A·冈卡夫斯
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Abstract

本发明提供了可用于动员供体中的造血干细胞和祖细胞(hematopoietic stem and progenitor cells)的群体，以及可用于确定动员的细胞的样品是否适于释放用于离体扩增和/或治疗用途的组合物和方法。根据本文描述的组合物和方法，可以从供体抽取动员的造血干细胞和祖细胞并将其施用至患者，用于治疗多种干细胞紊乱，尤其包括造血系统疾病(hematopoietic diseases)、代谢紊乱、癌症和自身免疫性疾病。在某些实施方案中，本文描述的组合物和方法导致具有免疫抑制作用并能够降低移植物抗宿主病发生率的CD34dim细胞的群体的动员。

Description

用于动员造血干细胞和祖细胞的给药方案
相关申请的交叉引用
本申请要求于2017年12月6日提交的美国申请第15/834,017号、于2017年12月7日提交的美国临时专利申请第62/596,056号、于2018年8月13日提交的美国申请第16/101,676号、于2018年10月31日提交的美国临时专利申请第62/753,656号和于2018年11月30日提交的美国临时专利申请第62/773,954号的权益和优先权，这些申请的每一个的公开内容在此通过引用以其整体并入。
发明领域
本发明涉及来自供体(诸如人类供体)的造血干细胞和祖细胞(hematopoieticstem and progenitor cells)的动员，以及罹患多种病理(诸如尤其是血液疾病、代谢紊乱、癌症和自身免疫性疾病)的患者的治疗。
发明背景
尽管在医学领域取得了进步，但对治疗造血系统病理，诸如尤其是特定血细胞的疾病、代谢紊乱、癌症和自身免疫性状况仍然存在需求。尽管造血干细胞具有显著的治疗潜力，但阻碍其在临床上使用的一个限制是与使造血干细胞从供体的骨髓释放到外周血相关的困难，从所述供体的外周血中可以分离所述造血干细胞以用于输注到患者中。
另外的限制是高达80％的动员的外周血(mPB)同种异体接受者将经历移植物抗宿主病(GVHD)。尽管与骨髓移植物相比，mPB移植物中CD3+ T细胞的水平更高，但在移植HLA匹配的mPB后观察到的急性GVHD水平与HLA匹配的骨髓相当。一种解释是，G-CSF动员的移植物含有髓源性抑制细胞(MDSC)，其具有能够抑制体外T细胞增殖的有效免疫抑制特性。MDSC在G-CSF动员的移植物中的百分比是可变的，并且临床数据表明，移植了含有较高数目的MDSC的mPB移植物的患者可能会具有更好的结果，包括较低的急性GVHD率(Vendramin等人，(2014)BBMT20(12):2049-2055)。
因此，目前对用于促进造血干细胞和祖细胞动员的组合物和方法存在需求，并且特别地对鉴定适于治疗用途的动员的细胞的群体的方法存在需求。还对始终比现有技术方法产生更高数目的MDSC的用于促进造血干细胞和祖细胞动员的组合物和方法存在需求。
发明概述
本发明提供了用于动员受试者中的造血干细胞和祖细胞的组合物和方法。例如，受试者可以是造血干细胞和祖细胞供体(即供体)，诸如哺乳动物供体，并且特别是人类供体。本发明另外地提供了用于治疗患者(诸如人类患者)的紊乱(诸如干细胞紊乱)的组合物和方法。使用本文描述的组合物和方法，如本文描述的C-X-C趋化因子受体2型(CXCR2)激动剂，诸如Gro-β或其变体，诸如截短形式的Gro-β(例如Gro-βT)，任选地与C-X-C趋化因子受体4型(CXCR4)拮抗剂，诸如1,1′-[1,4-亚苯基双(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷或其变体组合，可以以足以动员造血干细胞和祖细胞的量施用至受试者。重要的是，本文描述的组合物和方法可以被用于将造血干细胞和祖细胞从供体(诸如人类供体)内的干细胞小生境动员到供体的循环外周血中，同时降低造血谱系的其他细胞(诸如白细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞)的动员。因此，本文描述的组合物和方法能够选择性动员供体中的造血干细胞和祖细胞，所述造血干细胞和祖细胞然后可以从供体分离用于治疗用途。
在一些实施方案中，可以将造血干细胞或祖细胞从供体的骨髓动员到外周血，从外周血可以收集和/或分离造血干细胞或祖细胞。在收集动员的细胞后，抽取的造血干细胞或祖细胞然后可以被输注到患者中，该患者可以是供体或另一受试者，诸如与供体HLA匹配的受试者，用于治疗造血系统的一种或更多种病理。在一些实施方案中，首先离体扩增抽取的造血干细胞或祖细胞，然后将这些细胞和/或其后代输注到患者中。本文描述的组合物和方法提供了重要的临床益处，即，使得能够产生相对于其他细胞类型(诸如白细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞)富含造血干细胞的细胞群体。因此，使用本文描述的组合物和方法产生的动员的造血干细胞和祖细胞的群体特别适于造血干细胞移植疗法，任选地先对动员的所述造血干细胞和祖细胞的群体进行离体扩增，以增加可用于输注到患者中的造血干细胞和祖细胞的数量。
此外，本文描述的方法提供了抑制供体中白细胞增多的优点。白细胞增多可导致不利影响，诸如脾破裂、肾功能障碍、急性发热性非传染性肺炎(即肺毒性)、心血管毒性(例如高凝状态、心脏病发作、呼吸困难、心绞痛、心律失常、由于与高嗜中性粒细胞计数相关的促炎作用导致的动脉粥样硬化斑块破裂)、神经性失调(neurological disturbances)(诸如视力模糊、头痛和视网膜出血)和镰状细胞危象。参见，例如，D’Souza等人(2008)Transfusion Medicine Reviews 22(4):280-290。
如本文描述的，造血干细胞能够分化成造血谱系中的众多细胞类型，并且因此可以被施用至患者以便填充(populate)或再填充(re-populate)患者中有缺陷或缺乏的细胞类型。患者可以是例如罹患一种或更多种血液紊乱诸如自身免疫性疾病、癌症、血红蛋白病或其他造血系统病理并且因此需要造血干细胞移植的患者。因此，本发明提供了治疗多种造血系统状况的方法，所述造血系统状况诸如尤其是镰状细胞性贫血症、地中海贫血、范可尼贫血(Fanconi anemia)、威斯科特-奥尔德里奇综合征(Wiskott-Aldrich syndrome)、腺苷脱氨酶缺乏-重症联合免疫缺陷、异染性脑白质营养不良症、Diamond-Blackfan贫血和Schwachman-Diamond综合征、人类免疫缺陷病毒感染和获得性免疫缺陷综合征，以及癌症和自身免疫性疾病。
在第一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后在供体的外周血样品中产生具有从约0.0008至约0.0021的CD34+细胞与白细胞的比率的细胞群体。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与白细胞的比率可以为约0.00080、0.00081、0.00082、0.00083、0.00084、0.00085、0.00086、0.00087、0.00088、0.00089、0.00090、0.00091、0.00092、0.00093、0.00094、0.00095、0.00096、0.00097、0.00098、0.00099、0.00100、0.00101、0.00102、0.00103、0.00104、0.00105、0.00106、0.00107、0.00108、0.00109、0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119、0.00120、0.00121、0.00122、0.00123、0.00124、0.00125、0.00126、0.00127、0.00128、0.00129、0.00130、0.00131、0.00132、0.00133、0.00134、0.00135、0.00136、0.00137、0.00138、0.00139、0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159、0.00160、0.00161、0.00162、0.00163、0.00164、0.00165、0.00166、0.00167、0.00168、0.00169、0.00170、0.00171、0.00172、0.00173、0.00174、0.00175、0.00176、0.00178、0.00179、0.00180、0.00181、0.00182、0.00183、0.00184、0.00185、0.00186、0.00187、0.00188、0.00189、0.00190、0.00191、0.00192、0.00193、0.00194、0.00195、0.00196、0.00197、0.00198、0.00199、0.00200、0.00201、0.00202、0.00203、0.00204、0.00205、0.00206、0.00207、0.00208、0.00209、0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224或0.00225。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与白细胞的比率为从约0.0009至约0.002、约0.001至约0.0019、约0.0011至约0.0018、约0.0012至约0.0017、约0.0013至约0.0016或约0.0014至约0.0015。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与白细胞的比率为从约0.0010至约0.0018，例如样品中造血干细胞与白细胞的比率为约0.00100、0.00101、0.00102、0.00103、0.00104、0.00105、0.00106、0.00107、0.00108、0.00109、0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119、0.00120、0.00121、0.00122、0.00123、0.00124、0.00125、0.00126、0.00127、0.00128、0.00129、0.00130、0.00131、0.00132、0.00133、0.00134、0.00135、0.00136、0.00137、0.00138、0.00139、0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159、0.00160、0.00161、0.00162、0.00163、0.00164、0.00165、0.00166、0.00167、0.00168、0.00169、0.00170、0.00171、0.00172、0.00173、0.00174、0.00175、0.00176、0.00178、0.00179或0.00180。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与白细胞的比率为从约0.0012至约0.0016，例如样品中CD34+细胞与白细胞的比率为约0.00120、0.00121、0.00122、0.00123、0.00124、0.00125、0.00126、0.00127、0.00128、0.00129、0.00130、0.00131、0.00132、0.00133、0.00134、0.00135、0.00136、0.00137、0.00138、0.00139、0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159或0.00160。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与白细胞的比率为约0.0014。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，如通过将施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后供体的外周血样品与施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂前供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使供体的外周血以从约3.40:1至约6.90:1的比例相对于白细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血可以以约3.40:1、3.45:1、3.50:1、3.55:1、3.60:1、3.65:1、3.70:1、3.75:1、3.80:1、3.85:1、3.90:1、3.95:1、4.00:1、4.05:1、4.10:1、4.15:1、4.20:1、4.25:1、4.30:1、4.35:1、4.40:1、4.45:1、4.50:1、4.55:1、4.60:1、4.65:1、4.70:1、4.75:1、4.80:1、4.85:1、4.90:1、4.95:1、5.00:1、5.05:1、5.10:1、5.15:1、5.20:1、5.25:1、5.30:1、5.35:1、5.40:1、5.45:1、5.50:1、5.55:1、5.60:1、5.65:1、5.70:1、5.75:1、5.80:1、5.85:1、5.90:1、5.95:1、6.00:1、6.05:1、6.10:1、6.15:1、6.20:1、6.25:1、6.30:1、6.35:1、6.40:1、6.45:1、6.50:1、6.55:1、6.60:1、6.65:1、6.70:1、6.75:1、6.80:1、6.85:1或6.90:11的比例相对于白细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以从约3.5:1至约6.8:1、约3.6:1至约6.7:1、约3.8:1至约6.6:1、约3.9:1至约6.5:1、约4:1至约6.4:1、约4.1:1至约6.3:1、约4.2:1至约6.2:1、约4.3:1至约6.1:1、约4.4:1至约6:1、约4.5:1至约6:1、约4.6:1至约5.9:1、约4.7:1至约5.8:1或约4.8:1至约5.7:1的比例相对于白细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以从约4.0:1至约6.0:1的比例，诸如约4.00:1、4.05:1、4.10:1、4.15:1、4.20:1、4.25:1、4.30:1、4.35:1、4.40:1、4.45:1、4.50:1、4.55:1、4.60:1、4.65:1、4.70:1、4.75:1、4.80:1、4.85:1、4.90:1、4.95:1、5.00:1、5.05:1、5.10:1、5.15:1、5.20:1、5.25:1、5.30:1、5.35:1、5.40:1、5.45:1、5.50:1、5.55:1、5.60:1、5.65:1、5.70:1、5.75:1、5.80:1、5.85:1、5.90:1、5.95:1或6.00:1的比例相对于白细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以从约4.5:1至约5.5:1的比例，诸如约4.50:1、4.55:1、4.60:1、4.65:1、4.70:1、4.75:1、4.80:1、4.85:1、4.90:1、4.95:1、5.00:1、5.05:1、5.10:1、5.15:1、5.20:1、5.25:1、5.30:1、5.35:1、5.40:1、5.45:1或5.50的比例相对于白细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以约5.1:1的比例相对于白细胞富集CD34+细胞。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用足以产生具有至少约38,000个细胞/ml的CD34+细胞密度，诸如从约38,000个细胞/ml至约100,000个细胞/ml、约40,000个细胞/ml至约90,000个细胞/ml、约50,000个细胞/ml至约80,000个细胞/ml或约60,000个细胞/ml至约70,000个细胞/ml(例如，约38,00个细胞/ml、39,000个细胞/ml、40,000个细胞/ml、41,000个细胞/ml、42,000个细胞/ml、43,000个细胞/ml、44,000个细胞/ml、45,000个细胞/ml、46,000个细胞/ml、47,000个细胞/ml、48,000个细胞/ml、49,000个细胞/ml、50,000个细胞/ml、51,000个细胞/ml、52,000个细胞/ml、53,000个细胞/ml、54,000个细胞/ml、55,000个细胞/ml、56,000个细胞/ml、57,000个细胞/ml、58,000个细胞/ml、59,000个细胞/ml、60,000个细胞/ml、61,000个细胞/ml、62,000个细胞/ml、63,000个细胞/ml、64,000个细胞/ml、65,000个细胞/ml、66,000个细胞/ml、67,000个细胞/ml、68,000个细胞/ml、69,000个细胞/ml、70,000个细胞/ml、71,000个细胞/ml、72,000个细胞/ml、73,000个细胞/ml、74,000个细胞/ml、75,000个细胞/ml、76,000个细胞/ml、77,000个细胞/ml、78,000个细胞/ml、79,000个细胞/ml、80,000个细胞/ml、81,000个细胞/ml、82,000个细胞/ml、83,000个细胞/ml、84,000个细胞/ml、85,000个细胞/ml、86,000个细胞/ml、87,000个细胞/ml、88,000个细胞/ml、89,000个细胞/ml、90,000个细胞/ml、91,000个细胞/ml、92,000个细胞/ml、93,000个细胞/ml、94,000个细胞/ml、95,000个细胞/ml、96,000个细胞/ml、97,000个细胞/ml、98,000个细胞/ml、99,000个细胞/ml、100,000个细胞/ml或更多)的CD34+细胞密度，并且具有不多于约5.3×107个细胞/ml的白细胞密度，诸如约2.3×107个细胞/ml至约5.3×107个细胞/ml、约2.5×107个细胞/ml至约5.1×107个细胞/ml、2.9×107个细胞/ml至约4.5×107个细胞/ml、约3×107个细胞/ml至约4×107个细胞/ml(例如，5.3×107个细胞/ml、5.2×107个细胞/ml、5.1×107个细胞/ml、5×107个细胞/ml、4.9×107个细胞/ml、4.8×107个细胞/ml、4.7×107个细胞/ml、4.6×107个细胞/ml、4.5×107个细胞/ml、4.4×107个细胞/ml、4.3×107个细胞/ml、4.2×107个细胞/ml、4.1×107个细胞/ml、4×107个细胞/ml、3.9×107个细胞/ml、3.8×107个细胞/ml、3.7×107个细胞/ml、3.6×107个细胞/ml、3.5×107个细胞/ml、3.4×107个细胞/ml、3.3×107个细胞/ml、3.2×107个细胞/ml、3.1×107个细胞/ml、3×107个细胞/ml、2.9×107个细胞/ml、2.8×107个细胞/ml、2.7×107个细胞/ml、2.6×107个细胞/ml、2.5×107个细胞/ml、2.4×107个细胞/ml、2.3×107个细胞/ml或更少)的白细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约38,000个细胞/ml至约100,000个细胞/ml的CD34+细胞密度并且具有从约2.3×107个细胞/ml至约5.3×107个细胞/ml的白细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约40,000个细胞/ml至约80,000个细胞/ml的CD34+细胞密度并且具有从约2.5×107个细胞/ml至约5×107个细胞/ml的白细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约50,000个细胞/ml至约90,000个细胞/ml的CD34+细胞密度并且具有从约3×107个细胞/ml至约4×107个细胞/ml的白细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。
在另外的方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后在供体的外周血样品中产生具有从约0.0018至约0.0058的CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率的细胞群体。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率可以为约0.00180、0.00181、0.00182、0.00183、0.00184、0.00185、0.00186、0.00187、0.00188、0.00189、0.00190、0.00191、0.00192、0.00193、0.00194、0.00195、0.00196、0.00197、0.00198、0.00199、0.00200、0.00201、0.00202、0.00203、0.00204、0.00205、0.00206、0.00207、0.00208、0.00209、0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224、0.00225、0.00226、0.00227、0.00228、0.00229、0.00230、0.00231、0.00232、0.00233、0.00234、0.00235、0.00236、0.00237、0.00238、0.00239、0.00240、0.00241、0.00242、0.00243、0.00244、0.00245、0.00246、0.00247、0.00248、0.00249、0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00277、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349、0.00350、0.00351、0.00352、0.00353、0.00354、0.00355、0.00356、0.00357、0.00358、0.00359、0.00360、0.00361、0.00362、0.00363、0.00364、0.00365、0.00366、0.00367、0.00368、0.00369、0.00370、0.00371、0.00372、0.00373、0.00374、0.00375、0.00376、0.00377、0.00378、0.00379、0.00380、0.00381、0.00382、0.00383、0.00384、0.00385、0.00386、0.00387、0.00388、0.00389、0.00390、0.00391、0.00392、0.00393、0.00394、0.00395、0.00396、0.00397、0.00398、0.00399、0.00400、0.00401、0.00402、0.00403、0.00404、0.00405、0.00406、0.00407、0.00408、0.00409、0.00410、0.00411、0.00412、0.00413、0.00414、0.00415、0.00416、0.00417、0.00418、0.00419、0.00420、0.00421、0.00422、0.00423、0.00424、0.00425、0.00426、0.00427、0.00428、0.00429、0.00430、0.00431、0.00432、0.00433、0.00434、0.00435、0.00436、0.00437、0.00438、0.00439、0.00440、0.00441、0.00442、0.00443、0.00444、0.00445、0.00446、0.00447、0.00448、0.00449、0.00450、0.00451、0.00452、0.00453、0.00454、0.00455、0.00456、0.00457、0.00458、0.00459、0.00460、0.00461、0.00462、0.00463、0.00464、0.00465、0.00466、0.00467、0.00468、0.00469、0.00470、0.00471、0.00472、0.00473、0.00474、0.00475、0.00476、0.00477、0.00478、0.00479、0.00480、0.00481、0.00482、0.00483、0.00484、0.00485、0.00486、0.00487、0.00488、0.00489、0.00490、0.00491、0.00492、0.00493、0.00494、0.00495、0.00496、0.00497、0.00498、0.00499、0.00500、0.00501、0.00502、0.00503、0.00504、0.00505、0.00506、0.00507、0.00508、0.00509、0.00510、0.00511、0.00512、0.00513、0.00514、0.00515、0.00516、0.00517、0.00518、0.00519、0.00520、0.00521、0.00522、0.00523、0.00524、0.00525、0.00526、0.00527、0.00528、0.00529、0.00530、0.00531、0.00532、0.00533、0.00534、0.00535、0.00536、0.00537、0.00538、0.00539、0.00540、0.00541、0.00542、0.00543、0.00544、0.00545、0.00546、0.00547、0.00548、0.00549、0.00550、0.00551、0.00552、0.00553、0.00554、0.00555、0.00556、0.00557、0.00558、0.00559、0.00560、0.00561、0.00562、0.00563、0.00564、0.00565、0.00566、0.00567、0.00568、0.00569、0.00570、0.00571、0.00572、0.00573、0.00574、0.00575、0.00576、0.00577、0.00578、0.00579或0.00580。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.002至约0.0056、约0.0022至约0.0054、约0.0024至约0.0052、约0.0026至约0.005、约0.0028至约0.0048或约0.003至约0.0046。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.0026至约0.0046，例如样品中CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率为约0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00277、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349、0.00350、0.00351、0.00352、0.00353、0.00354、0.00355、0.00356、0.00357、0.00358、0.00359、0.00360、0.00361、0.00362、0.00363、0.00364、0.00365、0.00366、0.00367、0.00368、0.00369、0.00370、0.00371、0.00372、0.00373、0.00374、0.00375、0.00376、0.00377、0.00378、0.00379、0.00380、0.00381、0.00382、0.00383、0.00384、0.00385、0.00386、0.00387、0.00388、0.00389、0.00390、0.00391、0.00392、0.00393、0.00394、0.00395、0.00396、0.00397、0.00398、0.00399、0.00400、0.00401、0.00402、0.00403、0.00404、0.00405、0.00406、0.00407、0.00408、0.00409、0.00410、0.00411、0.00412、0.00413、0.00414、0.00415、0.00416、0.00417、0.00418、0.00419、0.00420、0.00421、0.00422、0.00423、0.00424、0.00425、0.00426、0.00427、0.00428、0.00429、0.00430、0.00431、0.00432、0.00433、0.00434、0.00435、0.00436、0.00437、0.00438、0.00439、0.00440、0.00441、0.00442、0.00443、0.00444、0.00445、0.00446、0.00447、0.00448、0.00449、0.00450、0.00451、0.00452、0.00453、0.00454、0.00455、0.00456、0.00457、0.00458、0.00459或0.00460。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率为约0.0036。
在另外的方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，如通过将施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后供体的外周血样品与施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂前供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使供体的外周血以从约2.1:1至约8.1:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血可以以约2.10:1、2.15:1、2.20:1、2.25:1、2.30:1、2.35:1、2.40:1、2.45:1、2.50:1、2.55:1、2.60:1、2.65:1、2.70:1、2.75:1、2.80:1、2.85:1、2.90:1、2.95:1、3.00:1、3.05:1、3.10:1、3.15:1、3.20:1、3.25:1、3.30:1、3.35:1、3.40:1、3.45:1、3.50:1、3.55:1、3.60:1、3.65:1、3.70:1、3.75:1、3.80:1、3.85:1、3.90:1、3.95:1、4.00:1、4.05:1、4.10:1、4.15:1、4.20:1、4.25:1、4.30:1、4.35:1、4.40:1、4.45:1、4.50:1、4.55:1、4.60:1、4.65:1、4.70:1、4.75:1、4.80:1、4.85:1、4.90:1、4.95:1、5.00:1、5.05:1、5.10:1、5.15:1、5.20:1、5.25:1、5.30:1、5.35:1、5.40:1、5.45:1、5.50:1、5.55:1、5.60:1、5.65:1、5.70:1、5.75:1、5.80:1、5.85:1、5.90:1、5.95:1、6.00:1、6.05:1、6.10:1、6.15:1、6.20:1、6.25:1、6.30:1、6.35:1、6.40:1、6.45:1、6.50:1、6.55:1、6.60:1、6.65:1、6.70:1、6.75:1、6.80:1、6.85:1、6.90:1、6.95:1、7.00:1、7.05:1、7.10:1、7.15:1、7.20:1、7.25:1、7.30:1、7.35:1、7.40:1、7.45:1、7.50:1、7.55:1、7.60:1、7.65:1、7.70:1、7.75:1、7.80:1、7.85:1、7.90:1、7.95:1或8.00:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以从约2.5:1至约7:1、约2.6:1至约6.9:1、约2.7:1至约6.8:1、约2.8:1至约6.7:1、约2.9:1至约6.6:1、约3:1至约6.5:1、约3.2:1至约6.4:1、约3.3:1至约6.3:1、约3.4:1至约6.2:1或约3.5:1至约6.1:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以从约5.4:1至约7.4:1的比例，诸如约5.40:1、5.45:1、5.50:1、5.55:1、5.60:1、5.65:1、5.70:1、5.75:1、5.80:1、5.85:1、5.90:1、5.95:1、6.00:1、6.05:1、6.10:1、6.15:1、6.20:1、6.25:1、6.30:1、6.35:1、6.40:1、6.45:1、6.50:1、6.55:1、6.60:1、6.65:1、6.70:1、6.75:1、6.80:1、6.85:1、6.90:1、6.95:1、7.00:1、7.05:1、7.10:1、7.15:1、7.20:1、7.25:1、7.30:1、7.35:1或7.40:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以约6.4:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+细胞。
在又另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以足以在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后在供体的外周血样品中产生具有从约0.0021至约0.0094的CD34+细胞与淋巴细胞的比率的细胞群体。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与淋巴细胞的比率可以为约0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224、0.00225、0.00226、0.00227、0.00228、0.00229、0.00230、0.00231、0.00232、0.00233、0.00234、0.00235、0.00236、0.00237、0.00238、0.00239、0.00240、0.00241、0.00242、0.00243、0.00244、0.00245、0.00246、0.00247、0.00248、0.00249、0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00277、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349、0.00350、0.00351、0.00352、0.00353、0.00354、0.00355、0.00356、0.00357、0.00358、0.00359、0.00360、0.00361、0.00362、0.00363、0.00364、0.00365、0.00366、0.00367、0.00368、0.00369、0.00370、0.00371、0.00372、0.00373、0.00374、0.00375、0.00376、0.00377、0.00378、0.00379、0.00380、0.00381、0.00382、0.00383、0.00384、0.00385、0.00386、0.00387、0.00388、0.00389、0.00390、0.00391、0.00392、0.00393、0.00394、0.00395、0.00396、0.00397、0.00398、0.00399、0.00400、0.00401、0.00402、0.00403、0.00404、0.00405、0.00406、0.00407、0.00408、0.00409、0.00410、0.00411、0.00412、0.00413、0.00414、0.00415、0.00416、0.00417、0.00418、0.00419、0.00420、0.00421、0.00422、0.00423、0.00424、0.00425、0.00426、0.00427、0.00428、0.00429、0.00430、0.00431、0.00432、0.00433、0.00434、0.00435、0.00436、0.00437、0.00438、0.00439、0.00440、0.00441、0.00442、0.00443、0.00444、0.00445、0.00446、0.00447、0.00448、0.00449、0.00450、0.00451、0.00452、0.00453、0.00454、0.00455、0.00456、0.00457、0.00458、0.00459、0.00460、0.00461、0.00462、0.00463、0.00464、0.00465、0.00466、0.00467、0.00468、0.00469、0.00470、0.00471、0.00472、0.00473、0.00474、0.00475、0.00476、0.00477、0.00478、0.00479、0.00480、0.00481、0.00482、0.00483、0.00484、0.00485、0.00486、0.00487、0.00488、0.00489、0.00490、0.00491、0.00492、0.00493、0.00494、0.00495、0.00496、0.00497、0.00498、0.00499、0.00500、0.00501、0.00502、0.00503、0.00504、0.00505、0.00506、0.00507、0.00508、0.00509、0.00510、0.00511、0.00512、0.00513、0.00514、0.00515、0.00516、0.00517、0.00518、0.00519、0.00520、0.00521、0.00522、0.00523、0.00524、0.00525、0.00526、0.00527、0.00528、0.00529、0.00530、0.00531、0.00532、0.00533、0.00534、0.00535、0.00536、0.00537、0.00538、0.00539、0.00540、0.00541、0.00542、0.00543、0.00544、0.00545、0.00546、0.00547、0.00548、0.00549、0.00550、0.00551、0.00552、0.00553、0.00554、0.00555、0.00556、0.00557、0.00558、0.00559、0.00560、0.00561、0.00562、0.00563、0.00564、0.00565、0.00566、0.00567、0.00568、0.00569、0.00570、0.00571、0.00572、0.00573、0.00574、0.00575、0.00576、0.00577、0.00578、0.00579、0.00580、0.00581、0.00582、0.00583、0.00584、0.00585、0.00586、0.00587、0.00588、0.00589、0.00590、0.00591、0.00592、0.00593、0.00594、0.00595、0.00596、0.00597、0.00598、0.00599、0.00600、0.00601、0.00602、0.00603、0.00604、0.00605、0.00606、0.00607、0.00608、0.00609、0.00610、0.00611、0.00612、0.00613、0.00614、0.00615、0.00616、0.00617、0.00618、0.00619、0.00620、0.00621、0.00622、0.00623、0.00624、0.00625、0.00626、0.00627、0.00628、0.00629、0.00630、0.00631、0.00632、0.00633、0.00634、0.00635、0.00636、0.00637、0.00638、0.00639、0.00640、0.00641、0.00642、0.00643、0.00644、0.00645、0.00646、0.00647、0.00648、0.00649、0.00650、0.00651、0.00652、0.00653、0.00654、0.00655、0.00656、0.00657、0.00658、0.00659、0.00660、0.00661、0.00662、0.00663、0.00664、0.00665、0.00666、0.00667、0.00668、0.00669、0.00670、0.00671、0.00672、0.00673、0.00674、0.00675、0.00676、0.00677、0.00678、0.00679、0.00680、0.00681、0.00682、0.00683、0.00684、0.00685、0.00686、0.00687、0.00688、0.00689、0.00690、0.00691、0.00692、0.00693、0.00694、0.00695、0.00696、0.00697、0.00698、0.00699、0.00700、0.00701、0.00702、0.00703、0.00704、0.00705、0.00706、0.00707、0.00708、0.00709、0.00710、0.00711、0.00712、0.00713、0.00714、0.00715、0.00716、0.00717、0.00718、0.00719、0.00720、0.00721、0.00722、0.00723、0.00724、0.00725、0.00726、0.00727、0.00728、0.00729、0.00730、0.00731、0.00732、0.00733、0.00734、0.00735、0.00736、0.00737、0.00738、0.00739、0.00740、0.00741、0.00742、0.00743、0.00744、0.00745、0.00746、0.00747、0.00748、0.00749、0.00750、0.00751、0.00752、0.00753、0.00754、0.00755、0.00756、0.00757、0.00758、0.00759、0.00760、0.00761、0.00762、0.00763、0.00764、0.00765、0.00766、0.00767、0.00768、0.00769、0.00770、0.00771、0.00772、0.00773、0.00774、0.00775、0.00776、0.00777、0.00778、0.00779、0.00780、0.00781、0.00782、0.00783、0.00784、0.00785、0.00786、0.00787、0.00788、0.00789、0.00790、0.00791、0.00792、0.00793、0.00794、0.00795、0.00796、0.00797、0.00798、0.00799、0.00800、0.00801、0.00802、0.00803、0.00804、0.00805、0.00806、0.00807、0.00808、0.00809、0.00810、0.00811、0.00812、0.00813、0.00814、0.00815、0.00816、0.00817、0.00818、0.00819、0.00820、0.00821、0.00822、0.00823、0.00824、0.00825、0.00826、0.00827、0.00828、0.00829、0.00830、0.00831、0.00832、0.00833、0.00834、0.00835、0.00836、0.00837、0.00838、0.00839、0.00840、0.00841、0.00842、0.00843、0.00844、0.00845、0.00846、0.00847、0.00848、0.00849、0.00850、0.00851、0.00852、0.00853、0.00854、0.00855、0.00856、0.00857、0.00858、0.00859、0.00860、0.00861、0.00862、0.00863、0.00864、0.00865、0.00866、0.00867、0.00868、0.00869、0.00870、0.00871、0.00872、0.00873、0.00874、0.00875、0.00876、0.00877、0.00878、0.00879、0.00880、0.00881、0.00882、0.00883、0.00884、0.00885、0.00886、0.00887、0.00888、0.00889、0.00890、0.00891、0.00892、0.00893、0.00894、0.00895、0.00896、0.00897、0.00898、0.00899、0.00900、0.00901、0.00902、0.00903、0.00904、0.00905、0.00906、0.00907、0.00908、0.00909、0.00910、0.00911、0.00912、0.00913、0.00914、0.00915、0.00916、0.00917、0.00918、0.00919、0.00920、0.00921、0.00922、0.00923、0.00924、0.00925、0.00926、0.00927、0.00928、0.00929、0.00930、0.00931、0.00932、0.00933、0.00934、0.00935、0.00936、0.00937、0.00938、0.00939或0.00940。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与淋巴细胞的比率为从约0.0022至约0.0093、约0.0023至约0.0092、约0.0024至约0.0091、约0.003至约0.0085、约0.0035至约0.0075或约0.0045至约0.0065。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与淋巴细胞的比率为从约0.0025至约0.0035，例如样品中CD34+细胞与淋巴细胞的比率为约0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00277、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349或0.00350。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与淋巴细胞的比率为约0.0031。
在另外的方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，如通过将施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后供体的外周血样品与施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂前供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使供体的外周血以从约4.8:1至8.4:1的比例相对于淋巴细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血可以以约4.80:1、4.85:1、4.90:1、4.95:1、5.00:1、5.05:1、5.10:1、5.15:1、5.20:1、5.25:1、5.30:1、5.35:1、5.40:1、5.45:1、5.50:1、5.55:1、5.60:1、5.65:1、5.70:1、5.75:1、5.80:1、5.85:1、5.90:1、5.95:1、6.00:1、6.05:1、6.10:1、6.15:1、6.20:1、6.25:1、6.30:1、6.35:1、6.40:1、6.45:1、6.50:1、6.55:1、6.60:1、6.65:1、6.70:1、6.75:1、6.80:1、6.85:1、6.90:1、6.95:1、7.00:1、7.05:1、7.10:1、7.15:1、7.20:1、7.25:1、7.30:1、7.35:1、7.40:1、7.45:1、7.50:1、7.55:1、7.60:1、7.65:1、7.70:1、7.75:1、7.80:1、7.85:1、7.90:1、7.95:1、8.00:1、8.05:1、8.10:1、8.15:1、8.20:1、8.25:1、8.30:1、8.35:1或8.40:1的比例相对于淋巴细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以从约5:1至约7:1、约5.5:1至约6.5:1或约5.2:1至约5.7:1的比例相对于淋巴细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以从约5.0:1至约6.5:1的比例，诸如约5.00:1、5.05:1、5.10:1、5.15:1、5.20:1、5.25:1、5.30:1、5.35:1、5.40:1、5.45:1、5.50:1、5.55:1、5.60:1、5.65:1、5.70:1、5.75:1、5.80:1、5.85:1、5.90:1、5.95:1、6.00:1、6.05:1、6.10:1、6.15:1、6.20:1、6.25:1、6.30:1、6.35:1、6.40:1、6.45:1或6.50:1的比例相对于淋巴细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以约5.7:1的比例相对于淋巴细胞富集CD34+细胞。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用足以产生具有至少约38,000个细胞/ml的CD34+细胞密度，诸如从约38,000个细胞/ml至约100,000个细胞/ml、约40,000个细胞/ml至约90,000个细胞/ml、约50,000个细胞/ml至约80,000个细胞/ml或约60,000个细胞/ml至约70,000个细胞/ml(例如，约38,00个细胞/ml、39,000个细胞/ml、40,000个细胞/ml、41,000个细胞/ml、42,000个细胞/ml、43,000个细胞/ml、44,000个细胞/ml、45,000个细胞/ml、46,000个细胞/ml、47,000个细胞/ml、48,000个细胞/ml、49,000个细胞/ml、50,000个细胞/ml、51,000个细胞/ml、52,000个细胞/ml、53,000个细胞/ml、54,000个细胞/ml、55,000个细胞/ml、56,000个细胞/ml、57,000个细胞/ml、58,000个细胞/ml、59,000个细胞/ml、60,000个细胞/ml、61,000个细胞/ml、62,000个细胞/ml、63,000个细胞/ml、64,000个细胞/ml、65,000个细胞/ml、66,000个细胞/ml、67,000个细胞/ml、68,000个细胞/ml、69,000个细胞/ml、70,000个细胞/ml、71,000个细胞/ml、72,000个细胞/ml、73,000个细胞/ml、74,000个细胞/ml、75,000个细胞/ml、76,000个细胞/ml、77,000个细胞/ml、78,000个细胞/ml、79,000个细胞/ml、80,000个细胞/ml、81,000个细胞/ml、82,000个细胞/ml、83,000个细胞/ml、84,000个细胞/ml、85,000个细胞/ml、86,000个细胞/ml、87,000个细胞/ml、88,000个细胞/ml、89,000个细胞/ml、90,000个细胞/ml、91,000个细胞/ml、92,000个细胞/ml、93,000个细胞/ml、94,000个细胞/ml、95,000个细胞/ml、96,000个细胞/ml、97,000个细胞/ml、98,000个细胞/ml、99,000个细胞/ml、100,000个细胞/ml或更多)的CD34+细胞密度，并且具有不多于约2.4×107个细胞/ml的淋巴细胞密度，诸如约1×107个细胞/ml至约2.3×107个细胞/ml、约1.3×107个细胞/ml至约2.1×107个细胞/ml或1.5×107个细胞/ml至约1.9×107个细胞/ml(例如，约2.4×107个细胞/ml、2.3×107个细胞/ml、2.2×107个细胞/ml、2.1×107个细胞/ml、2×107个细胞/ml、1.9×107个细胞/ml、1.8×107个细胞/ml、1.7×107个细胞/ml、1.6×107个细胞/ml、1.5×107个细胞/ml、1.4×107个细胞/ml、1.3×107个细胞/ml、1.2×107个细胞/ml、1.1×107个细胞/ml、1×107个细胞/ml或更少、0.9×107个细胞/ml、0.8×107个细胞/ml或更少)的淋巴细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约38,000个细胞/ml至约100,000个细胞/ml的CD34+细胞密度并且具有从约1×107个细胞/ml至约2.3×107个细胞/ml的淋巴细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约40,000个细胞/ml至约80,000个细胞/ml的CD34+细胞密度并且具有从约1.3×107个细胞/ml至约2.3×107个细胞/ml的淋巴细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约50,000个细胞/ml至约90,000个细胞/ml的CD34+细胞密度并且具有从约1.5×107个细胞/ml至约2×107个细胞/ml的淋巴细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用CXCR2激动剂后在供体的外周血样品中产生具有从约0.0071至约0.0174的CD34+细胞与单核细胞的比率的细胞群体。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与单核细胞的比率可以为约0.00710、0.00711、0.00712、0.00713、0.00714、0.00715、0.00716、0.00717、0.00718、0.00719、0.00720、0.00721、0.00722、0.00723、0.00724、0.00725、0.00726、0.00727、0.00728、0.00729、0.00730、0.00731、0.00732、0.00733、0.00734、0.00735、0.00736、0.00737、0.00738、0.00739、0.00740、0.00741、0.00742、0.00743、0.00744、0.00745、0.00746、0.00747、0.00748、0.00749、0.00750、0.00751、0.00752、0.00753、0.00754、0.00755、0.00756、0.00757、0.00758、0.00759、0.00760、0.00761、0.00762、0.00763、0.00764、0.00765、0.00766、0.00767、0.00768、0.00769、0.00770、0.00771、0.00772、0.00773、0.00774、0.00775、0.00776、0.00777、0.00778、0.00779、0.00780、0.00781、0.00782、0.00783、0.00784、0.00785、0.00786、0.00787、0.00788、0.00789、0.00790、0.00791、0.00792、0.00793、0.00794、0.00795、0.00796、0.00797、0.00798、0.00799、0.00800、0.00801、0.00802、0.00803、0.00804、0.00805、0.00806、0.00807、0.00808、0.00809、0.00810、0.00811、0.00812、0.00813、0.00814、0.00815、0.00816、0.00817、0.00818、0.00819、0.00820、0.00821、0.00822、0.00823、0.00824、0.00825、0.00826、0.00827、0.00828、0.00829、0.00830、0.00831、0.00832、0.00833、0.00834、0.00835、0.00836、0.00837、0.00838、0.00839、0.00840、0.00841、0.00842、0.00843、0.00844、0.00845、0.00846、0.00847、0.00848、0.00849、0.00850、0.00851、0.00852、0.00853、0.00854、0.00855、0.00856、0.00857、0.00858、0.00859、0.00860、0.00861、0.00862、0.00863、0.00864、0.00865、0.00866、0.00867、0.00868、0.00869、0.00870、0.00871、0.00872、0.00873、0.00874、0.00875、0.00876、0.00877、0.00878、0.00879、0.00880、0.00881、0.00882、0.00883、0.00884、0.00885、0.00886、0.00887、0.00888、0.00889、0.00890、0.00891、0.00892、0.00893、0.00894、0.00895、0.00896、0.00897、0.00898、0.00899、0.00900、0.00901、0.00902、0.00903、0.00904、0.00905、0.00906、0.00907、0.00908、0.00909、0.00910、0.00911、0.00912、0.00913、0.00914、0.00915、0.00916、0.00917、0.00918、0.00919、0.00920、0.00921、0.00922、0.00923、0.00924、0.00925、0.00926、0.00927、0.00928、0.00929、0.00930、0.00931、0.00932、0.00933、0.00934、0.00935、0.00936、0.00937、0.00938、0.00939、0.00940、0.00941、0.00942、0.00943、0.00944、0.00945、0.00946、0.00947、0.00948、0.00949、0.00950、0.00951、0.00952、0.00953、0.00954、0.00955、0.00956、0.00957、0.00958、0.00959、0.00960、0.00961、0.00962、0.00963、0.00964、0.00965、0.00966、0.00967、0.00968、0.00969、0.00970、0.00971、0.00972、0.00973、0.00974、0.00975、0.00976、0.00977、0.00978、0.00979、0.00980、0.00981、0.00982、0.00983、0.00984、0.00985、0.00986、0.00987、0.00988、0.00989、0.00990、0.00991、0.00992、0.00993、0.00994、0.00995、0.00996、0.00997、0.00998、0.00999、0.0100、0.0101、0.0103、0.0104、0.0105、0.0106、0.0107、0.0108、0.0109、0.0110、0.0111、0.0112、0.0113、0.0114、0.0115、0.0116、0.0117、0.0118、0.0119、0.0120、0.0121、0.0122、0.0123、0.0124、0.0125、0.0126、0.0127、0.0128、0.0129、0.0130、0.0131、0.0132、0.0133、0.0134、0.0135、0.0136、0.0137、0.0138、0.0139、0.0140、0.0141、0.0142、0.0143、0.0144、0.0145、0.0146、0.0147、0.0148、0.0149、0.0150、0.0151、0.0152、0.0153、0.0154、0.0155、0.0156、0.0157、0.0158、0.0159、0.0160、0.0161、0.0162、0.0163、0.0164、0.0165、0.0166、0.0167、0.0168、0.0169、0.0170、0.0171、0.0172、0.0173或0.0174。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与单核细胞的比率为从0.008至约0.016、约0.009至约0.015、约0.01至约0.014或约0.011至约0.013。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与单核细胞的比率为从约0.0100至约0.0140，诸如样品中CD34+细胞与单核细胞的比率为约0.0100、0.0101、0.0103、0.0104、0.0105、0.0106、0.0107、0.0108、0.0109、0.0110、0.0111、0.0112、0.0113、0.0114、0.0115、0.0116、0.0117、0.0118、0.0119、0.0120、0.0121、0.0122、0.0123、0.0124、0.0125、0.0126、0.0127、0.0128、0.0129、0.0130、0.0131、0.0132、0.0133、0.0134、0.0135、0.0136、0.0137、0.0138、0.0139或0.0140。在一些实施方案中，样品中CD34+细胞与单核细胞的比率为约0.0118。
在另外的方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用足以产生具有至少约38,000个细胞/ml的CD34+细胞密度，诸如从约38,000个细胞/ml至约100,000个细胞/ml、约40,000个细胞/ml至约90,000个细胞/ml、约50,000个细胞/ml至约80,000个细胞/ml或约60,000个细胞/ml至约70,000个细胞/ml(例如，约38,00个细胞/ml、39,000个细胞/ml、40,000个细胞/ml、41,000个细胞/ml、42,000个细胞/ml、43,000个细胞/ml、44,000个细胞/ml、45,000个细胞/ml、46,000个细胞/ml、47,000个细胞/ml、48,000个细胞/ml、49,000个细胞/ml、50,000个细胞/ml、51,000个细胞/ml、52,000个细胞/ml、53,000个细胞/ml、54,000个细胞/ml、55,000个细胞/ml、56,000个细胞/ml、57,000个细胞/ml、58,000个细胞/ml、59,000个细胞/ml、60,000个细胞/ml、61,000个细胞/ml、62,000个细胞/ml、63,000个细胞/ml、64,000个细胞/ml、65,000个细胞/ml、66,000个细胞/ml、67,000个细胞/ml、68,000个细胞/ml、69,000个细胞/ml、70,000个细胞/ml、71,000个细胞/ml、72,000个细胞/ml、73,000个细胞/ml、74,000个细胞/ml、75,000个细胞/ml、76,000个细胞/ml、77,000个细胞/ml、78,000个细胞/ml、79,000个细胞/ml、80,000个细胞/ml、81,000个细胞/ml、82,000个细胞/ml、83,000个细胞/ml、84,000个细胞/ml、85,000个细胞/ml、86,000个细胞/ml、87,000个细胞/ml、88,000个细胞/ml、89,000个细胞/ml、90,000个细胞/ml、91,000个细胞/ml、92,000个细胞/ml、93,000个细胞/ml、94,000个细胞/ml、95,000个细胞/ml、96,000个细胞/ml、97,000个细胞/ml、98,000个细胞/ml、99,000个细胞/ml、100,000个细胞/ml或更多)的CD34+细胞密度，并且具有不多于约6×106个细胞/ml的单核细胞密度，诸如从3.4×106个细胞/ml至约5.9×106个细胞/ml、约3.5×106个细胞/ml至约5.7×106个细胞/ml或约4×106个细胞/ml至约5×106个细胞/ml(例如，5.9×106个细胞/ml、5.8×106个细胞/ml、5.7×106个细胞/ml、5.6×106个细胞/ml、5.5×106个细胞/ml、5.4×106个细胞/ml、5.3×106个细胞/ml、5.2×106个细胞/ml、5.1×106个细胞/ml、5×106个细胞/ml、4.9×106个细胞/ml、4.8×106个细胞/ml、4.7×106个细胞/ml、4.6×106个细胞/ml、4.5×106个细胞/ml、4.4×106个细胞/ml、4.3×106个细胞/ml、4.2×106个细胞/ml、4.1×106个细胞/ml、4×106个细胞/ml、3.9×106个细胞/ml、3.8×106个细胞/ml、3.7×106个细胞/ml、3.6×106个细胞/ml、3.5×106个细胞/ml、3.4×106个细胞/ml或更少)的单核细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约38,000个细胞/ml至约100,000个细胞/ml的CD34+细胞密度并且具有从约3.4×106个细胞/ml至约6×106个细胞/ml的单核细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约40,000个细胞/ml至约80,000个细胞/ml的CD34+细胞密度并且具有从约4×106个细胞/ml至约5.5×106个细胞/ml的单核细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约50,000个细胞/ml至约90,000个细胞/ml的CD34+细胞密度并且具有从约4×106个细胞/ml至约5×106个细胞/ml的单核细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，如通过将施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后供体的外周血样品与施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂前供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使供体的外周血以从约1.1:1至2.3:1的比例相对于单核细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血可以以约1.10:1、1.15:1、1.20:1、1.25:1、1.30:1、1.35:1、1.40:1、1.45:1、1.50:1、1.55:1、1.60:1、1.65:1、1.70:1、1.75:1、1.80:1、1.85:1、1.90:1、1.95:1、2.00:1、2.05:1、2.10:1、2.15:1、2.20:1、2.25:1或2.30:1的比例相对于单核细胞富集CD34+细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以从约1.3:1至约1.9:1的比例，诸如约1.30:1、1.35:1、1.40:1、1.45:1、1.50:1、1.55:1、1.60:1、1.65:1、1.70:1、1.75:1、1.80:1、1.85:1或1.90:1的比例相对于单核细胞富集CD34+细胞。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后在供体的外周血样品中产生具有从约0.051％至约0.140％的CD34+细胞的频率的细胞群体。在一些实施方案中，细胞群体可以具有约0.051％、0.052％、0.053％、0.054％、0.055％、0.056％、0.057％、0.058％、0.059％、0.060％、0.061％、0.062％、0.063％、0.064％、0.065％、0.066％、0.067％、0.068％、0.069％、0.070％、0.071％、0.072％、0.073％、0.074％、0.075％、0.076％、0.077％、0.078％、0.079％、0.080％、0.081％、0.082％、0.083％、0.084％、0.085％、0.086％、0.087％、0.088％、0.089％、0.090％、0.091％、0.092％、0.093％、0.094％、0.095％、0.096％、0.097％、0.098％、0.099％、0.100％、0.101％、0.102％、0.103％、0.104％、0.105％、0.106％、0.107％、0.108％、0.109％、0.110％、0.111％、0.112％、0.113％、0.114％、0.115％、0.116％、0.117％、0.118％、0.119％、0.120％、0.121％、0.122％、0.123％、0.124％、0.125％、0.126％、0.127％、0.128％、0.129％、0.130％、0.131％、0.132％、0.133％、0.134％、0.135％、0.136％、0.137％、0.138％、0.139％或0.140％的CD34+细胞的频率。在一些实施方案中，细胞群体具有从约0.050％至约0.120％、约0.060％至约0.110％或约0.080％至约0.100％的CD34+细胞的频率。在一些实施方案中，细胞群体具有从约0.080％至约0.120％的CD34+细胞的频率，诸如约0.080％、0.081％、0.082％、0.083％、0.084％、0.085％、0.086％、0.087％、0.088％、0.089％、0.090％、0.091％、0.092％、0.093％、0.094％、0.095％、0.096％、0.097％、0.098％、0.099％、0.100％、0.101％、0.102％、0.103％、0.104％、0.105％、0.106％、0.107％、0.108％、0.109％、0.110％、0.111％、0.112％、0.113％、0.114％、0.115％、0.116％、0.117％、0.118％、0.119％或0.120％的造血干细胞的频率。在一些实施方案中，细胞群体具有约0.097％的CD34+细胞的频率。
在另外的方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，如通过将施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后供体的外周血样品与施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂前供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以诱导供体的外周血中CD34+细胞的频率增加至少3倍(例如，从约3.4倍至约7.1倍，诸如约3.4倍、3.5倍、3.6倍、3.7倍、3.8倍、3.9倍、4.0倍、4.1倍、4.2倍、4.3倍、4.4倍、4.5倍、4.6倍、4.7倍、4.8倍、4.9倍、5.0倍、5.1倍、5.2倍、5.3倍、5.4倍、5.5倍、5.6倍、5.7倍、5.8倍、5.9倍、6.0倍、6.1倍、6.2倍、6.3倍、6.4倍、6.5倍、6.6倍、6.7倍、6.8倍、6.9倍、7.0倍或7.1倍)。在一些实施方案中，供体的外周血中CD34+细胞的频率在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后增加约4倍至约7倍、约4.5倍至约6.5倍或约5倍至约6倍。在一些实施方案中，供体的外周血中CD34+细胞的频率在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后增加约4倍至约6倍，诸如约4.0倍、4.1倍、4.2倍、4.3倍、4.4倍、4.5倍、4.6倍、4.7倍、4.8倍、4.9倍、5.0倍、5.1倍、5.2倍、5.3倍、5.4倍、5.5倍、5.6倍、5.7倍、5.8倍、5.9倍或6.0倍。在一些实施方案中，供体的外周血中CD34+细胞的频率增加约4.8倍。
在另外的方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后在供体的外周血样品中产生具有从约0.0003至约0.0016的CD34+CD90+CD45RA-细胞与白细胞的比率的细胞群体。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与白细胞的比率可以为约0.00030、0.00031、0.00032、0.00033、0.00034、0.00035、0.00036、0.00037、0.00038、0.00039、0.00040、0.00041、0.00042、0.00043、0.00044、0.00045、0.00046、0.00047、0.00048、0.00049、0.00050、0.00051、0.00052、0.00053、0.00054、0.00055、0.00056、0.00057、0.00058、0.00059、0.00060、0.00061、0.00062、0.00063、0.00064、0.00065、0.00066、0.00067、0.00068、0.00069、0.00070、0.00071、0.00072、0.00073、0.00074、0.00075、0.00076、0.00077、0.00078、0.00079、0.00080、0.00081、0.00082、0.00083、0.00084、0.00085、0.00086、0.00087、0.00088、0.00089、0.00090、0.00091、0.00092、0.00093、0.00094、0.00095、0.00096、0.00097、0.00098、0.00099、0.00100、0.00101、0.00102、0.00103、0.00104、0.00105、0.00106、0.00107、0.00108、0.00109、0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119、0.00120、0.00121、0.00122、0.00123、0.00124、0.00125、0.00126、0.00127、0.00128、0.00129、0.00130、0.00131、0.00132、0.00133、0.00134、0.00135、0.00136、0.00137、0.00138、0.00139、0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159或0.00160。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与白细胞的比率为从约0.0008至约0.0010。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与白细胞的比率为从约0.0006至约0.0012，例如样品中造血干细胞与白细胞的比率为约0.00060、0.00061、0.00062、0.00063、0.00064、0.00065、0.00066、0.00067、0.00068、0.00069、0.00070、0.00071、0.00072、0.00073、0.00074、0.00075、0.00076、0.00077、0.00078、0.00079、0.00080、0.00081、0.00082、0.00083、0.00084、0.00085、0.00086、0.00087、0.00088、0.00089、0.00090、0.00091、0.00092、0.00093、0.00094、0.00095、0.00096、0.00097、0.00098、0.00099、0.00100、0.00101、0.00102、0.00103、0.00104、0.00105、0.00106、0.00107、0.00108、0.00109、0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119或0.00120。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与白细胞的比率为约0.0009。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，如通过将施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后供体的外周血样品与施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂前供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使供体的外周血以从约5.5:1至26.9:1的比例相对于白细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血可以以约5.50:1、5.55:1、5.60:1、5.65:1、5.70:1、5.75:1、5.80:1、5.85:1、5.90:1、5.95:1、6.00:1、6.05:1、6.10:1、6.15:1、6.20:1、6.25:1、6.30:1、6.35:1、6.40:1、6.45:1、6.50:1、6.55:1、6.60:1、6.65:1、6.70:1、6.75:1、6.80:1、6.85:1、6.90:1、6.95:1、7.00:1、7.05:1、7.10:1、7.15:1、7.20:1、7.25:1、7.30:1、7.35:1、7.40:1、7.45:1、7.50:1、7.55:1、7.60:1、7.65:1、7.70:1、7.75:1、7.80:1、7.85:1、7.90:1、7.95:1、8.00:1、8.05:1、8.10:1、8.15:1、8.20:1、8.25:1、8.30:1、8.35:1、8.40:1、8.45:1、8.50:1、8.55:1、8.60:1、8.65:1、8.70:1、8.75:1、8.80:1、8.85:1、8.90:1、8.95:1、9.00:1、9.05:1、9.10:1、9.15:1、9.20:1、9.25:1、9.30:1、9.35:1、9.40:1、9.45:1、9.50:1、9.55:1、9.60:1、9.65:1、9.70:1、9.75:1、9.80:1、9.85:1、9.90:1、9.95:1、10.00:1、10.05:1、10.10:1、10.15:1、10.20:1、10.25:1、10.30:1、10.35:1、10.40:1、10.45:1、10.50:1、10.55:1、10.60:1、10.65:1、10.70:1、10.75:1、10.80:1、10.85:1、10.90:1、10.95:1、11.00:1、11.05:1、11.10:1、11.15:1、11.20:1、11.25:1、11.30:1、11.35:1、11.40:1、11.45:1、11.50:1、11.55:1、11.60:1、11.65:1、11.70:1、11.75:1、11.80:1、11.85:1、11.90:1、11.95:1、12.00:1、12.05:1、12.10:1、12.15:1、12.20:1、12.25:1、12.30:1、12.35:1、12.40:1、12.45:1、12.50:1、12.55:1、12.60:1、12.65:1、12.70:1、12.75:1、12.80:1、12.85:1、12.90:1、12.95:1、13.00:1、13.05:1、13.10:1、13.15:1、13.20:1、13.25:1、13.30:1、13.35:1、13.40:1、13.45:1、13.50:1、13.55:1、13.60:1、13.65:1、13.70:1、13.75:1、13.80:1、13.85:1、13.90:1、13.95:1、14.00:1、14.05:1、14.10:1、14.15:1、14.20:1、14.25:1、14.30:1、14.35:1、14.40:1、14.45:1、14.50:1、14.55:1、14.60:1、14.65:1、14.70:1、14.75:1、14.80:1、14.85:1、14.90:1、14.95:1、15.00:1、15.05:1、15.10:1、15.15:1、15.20:1、15.25:1、15.30:1、15.35:1、15.40:1、15.45:1、15.50:1、15.55:1、15.60:1、15.65:1、15.70:1、15.75:1、15.80:1、15.85:1、15.90:1、15.95:1、16.00:1、16.05:1、16.10:1、16.15:1、16.20:1、16.25:1、16.30:1、16.35:1、16.40:1、16.45:1、16.50:1、16.55:1、16.60:1、16.65:1、16.70:1、16.75:1、16.80:1、16.85:1、16.90:1、16.95:1、17.00:1、17.05:1、17.10:1、17.15:1、17.20:1、17.25:1、17.30:1、17.35:1、17.40:1、17.45:1、17.50:1、17.55:1、17.60:1、17.65:1、17.70:1、17.75:1、17.80:1、17.85:1、17.90:1、17.95:1、18.00:1、18.05:1、18.10:1、18.15:1、18.20:1、18.25:1、18.30:1、18.35:1、18.40:1、18.45:1、18.50:1、18.55:1、18.60:1、18.65:1、18.70:1、18.75:1、18.80:1、18.85:1、18.90:1、18.95:1、19.00:1、19.05:1、19.10:1、19.15:1、19.20:1、19.25:1、19.30:1、19.35:1、19.40:1、19.45:1、19.50:1、19.55:1、19.60:1、19.65:1、19.70:1、19.75:1、19.80:1、19.85:1、19.90:1、19.95:1、20.00:1、20.05:1、20.10:1、20.15:1、20.20:1、20.25:1、20.30:1、20.35:1、20.40:1、20.45:1、20.50:1、20.55:1、20.60:1、20.65:1、20.70:1、20.75:1、20.80:1、20.85:1、20.90:1、20.95:1、21.00:1、21.05:1、21.10:1、21.15:1、21.20:1、21.25:1、21.30:1、21.35:1、21.40:1、21.45:1、21.50:1、21.55:1、21.60:1、21.65:1、21.70:1、21.75:1、21.80:1、21.85:1、21.90:1、21.95:1、22.00:1、22.05:1、22.10:1、22.15:1、22.20:1、22.25:1、22.30:1、22.35:1、22.40:1、22.45:1、22.50:1、22.55:1、22.60:1、22.65:1、22.70:1、22.75:1、22.80:1、22.85:1、22.90:1、22.95:1、23.00、23.05:1、23.10:1、23.15:1、23.20:1、23.25:1、23.30:1、23.35:1、23.40:1、23.45:1、23.50:1、23.55:1、23.60:1、23.65:1、23.70:1、23.75:1、23.80:1、23.85:1、23.90:1、23.95:1、24.00:1、24.05:1、24.10:1、24.15:1、24.20:1、24.25:1、24.30:1、24.35:1、24.40:1、24.45:1、24.50:1、24.55:1、24.60:1、24.65:1、24.70:1、24.75:1、24.80:1、24.85:1、24.90:1、24.95:1、25.05:1、25.10:1、25.15:1、25.20:1、25.25:1、25.30:1、25.35:1、25.40:1、25.45:1、25.50:1、25.55:1、25.60:1、25.65:1、25.70:1、25.75:1、25.80:1、25.85:1、25.90:1、25.95:1、26.00:1、26.05:1、26.10:1、26.15:1、26.20:1、26.25:1、26.30:1、26.35:1、26.40:1、26.45:1、26.50:1、26.55:1、26.60:1、26.65:1、26.70:1、26.75:1、26.80:1、26.85:1、26.90:1或26.95:1的比例相对于白细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以从约5.5:1至约6.5:1的比例，诸如约5.50:1、5.55:1、5.60:1、5.65:1、5.70:1、5.75:1、5.80:1、5.85:1、5.90:1、5.95:1、6.00:1、6.05:1、6.10:1、6.15:1、6.20:1、6.25:1、6.30:1、6.35:1、6.40:1、6.45:1或6.50:1的比例相对于白细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以约6.0:1的比例相对于白细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用足以产生具有至少约16,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度，诸如从约20,000个细胞/ml至约75,000个细胞/ml、约25,000个细胞/ml至约70,000个细胞/ml、约30,000个细胞/ml至约65,000个细胞/ml、约35,000个细胞/ml至约60,000个细胞/ml、约40,000个细胞/ml至约55,000个细胞/ml或约45,000个细胞/ml至约50,000个细胞/ml(例如，约16,000个细胞/ml、17,000个细胞/ml、18,000个细胞/ml、19,000个细胞/ml、20,000个细胞/ml、21,000个细胞/ml、22,000个细胞/ml、23,000个细胞/ml、24,000个细胞/ml、25,000个细胞/ml、26,000个细胞/ml、27,000个细胞/ml、28,000个细胞/ml、29,000个细胞/ml、30,000个细胞/ml、31,000个细胞/ml、32,000个细胞/ml、33,000个细胞/ml、34,000个细胞/ml、35,000个细胞/ml、36,000个细胞/ml、37,000个细胞/ml、38,000个细胞/ml、39,000个细胞/ml、40,000个细胞/ml、41,000个细胞/ml、42,000个细胞/ml、43,000个细胞/ml、44,000个细胞/ml、45,000个细胞/ml、46,000个细胞/ml、47,000个细胞/ml、48,000个细胞/ml、49,000个细胞/ml、50,000个细胞/ml、51,000个细胞/ml、52,000个细胞/ml、53,000个细胞/ml、54,000个细胞/ml、55,000个细胞/ml、56,000个细胞/ml、57,000个细胞/ml、58,000个细胞/ml、59,000个细胞/ml、60,000个细胞/ml、61,000个细胞/ml、62,000个细胞/ml、63,000个细胞/ml、64,000个细胞/ml、65,000个细胞/ml、66,000个细胞/ml、67,000个细胞/ml、68,000个细胞/ml、69,000个细胞/ml、70,000个细胞/ml、71,000个细胞/ml、72,000个细胞/ml、73,000个细胞/ml、74,000个细胞/ml、75,000个细胞/ml、76,000个细胞/ml、77,000个细胞/ml或更多)的密度，并且具有不多于约5.3×107个细胞/ml的白细胞密度，诸如从约2.3×107个细胞/ml至约5.3×107个细胞/ml、约2.5×107个细胞/ml至约5.1×107个细胞/ml、2.9×107个细胞/ml至约4.5×107个细胞/ml、约3×107个细胞/ml至约4×107个细胞/ml(例如，5.3×107个细胞/ml、5.2×107个细胞/ml、5.1×107个细胞/ml、5×107个细胞/ml、4.9×107个细胞/ml、4.8×107个细胞/ml、4.7×107个细胞/ml、4.6×107个细胞/ml、4.5×107个细胞/ml、4.4×107个细胞/ml、4.3×107个细胞/ml、4.2×107个细胞/ml、4.1×107个细胞/ml、4×107个细胞/ml、3.9×107个细胞/ml、3.8×107个细胞/ml、3.7×107个细胞/ml、3.6×107个细胞/ml、3.5×107个细胞/ml、3.4×107个细胞/ml、3.3×107个细胞/ml、3.2×107个细胞/ml、3.1×107个细胞/ml、3×107个细胞/ml、2.9×107个细胞/ml、2.8×107个细胞/ml、2.7×107个细胞/ml、2.6×107个细胞/ml、2.5×107个细胞/ml、2.4×107个细胞/ml、2.3×107个细胞/ml或更少)的白细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约20,000个细胞/ml至约75,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度并且具有从约2.3×107个细胞/ml至约5.3×107个细胞/ml的白细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约30,000个细胞/ml至约60,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度并且具有从约2.5×107个细胞/ml至约5×107个细胞/ml的白细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约40,000个细胞/ml至约50,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度并且具有从约3×107个细胞/ml至约4×107个细胞/ml的白细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。
在另外的方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后在供体的外周血样品中产生具有从约0.0007至约0.0043的CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率的细胞群体。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率可以为约0.00070、0.00071、0.00072、0.00073、0.00074、0.00075、0.00076、0.00077、0.00078、0.00079、0.00080、0.00081、0.00082、0.00083、0.00084、0.00085、0.00086、0.00087、0.00088、0.00089、0.00090、0.00091、0.00092、0.00093、0.00094、0.00095、0.00096、0.00097、0.00098、0.00099、0.00100、0.00101、0.00102、0.00103、0.00104、0.00105、0.00106、0.00107、0.00108、0.00109、0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119、0.00120、0.00121、0.00122、0.00123、0.00124、0.00125、0.00126、0.00127、0.00128、0.00129、0.00130、0.00131、0.00132、0.00133、0.00134、0.00135、0.00136、0.00137、0.00138、0.00139、0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159、0.00160、0.00161、0.00162、0.00163、0.00164、0.00165、0.00166、0.00167、0.00168、0.00169、0.00170、0.00171、0.00172、0.00173、0.00174、0.00175、0.00176、0.00177、0.00178、0.00179、0.00180、0.00181、0.00182、0.00183、0.00184、0.00185、0.00186、0.00187、0.00188、0.00189、0.00190、0.00191、0.00192、0.00193、0.00194、0.00195、0.00196、0.00197、0.00198、0.00199、0.00200、0.00201、0.00202、0.00203、0.00204、0.00205、0.00206、0.00207、0.00208、0.00209、0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224、0.00225、0.00226、0.00227、0.00228、0.00229、0.00230、0.00231、0.00232、0.00233、0.00234、0.00235、0.00236、0.00237、0.00238、0.00239、0.00240、0.00241、0.00242、0.00243、0.00244、0.00245、0.00246、0.00247、0.00248、0.00249、0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00277、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349、0.00350、0.00351、0.00352、0.00353、0.00354、0.00355、0.00356、0.00357、0.00358、0.00359、0.00360、0.00361、0.00362、0.00363、0.00364、0.00365、0.00366、0.00367、0.00368、0.00369、0.00370、0.00371、0.00372、0.00373、0.00374、0.00375、0.00376、0.00377、0.00378、0.00379、0.00380、0.00381、0.00382、0.00383、0.00384、0.00385、0.00386、0.00387、0.00388、0.00389、0.00390、0.00391、0.00392、0.00393、0.00394、0.00395、0.00396、0.00397、0.00398、0.00399、0.00400、0.00401、0.00402、0.00403、0.00404、0.00405、0.00406、0.00407、0.00408、0.00409、0.00410、0.00411、0.00412、0.00413、0.00414、0.00415、0.00416、0.00417、0.00418、0.00419、0.00420、0.00421、0.00422、0.00423、0.00424、0.00425、0.00426、0.00427、0.00428、0.00429或0.00430。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.002至约0.003。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.0014至约0.0034，例如样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率为约0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159、0.00160、0.00161、0.00162、0.00163、0.00164、0.00165、0.00166、0.00167、0.00168、0.00169、0.00170、0.00171、0.00172、0.00173、0.00174、0.00175、0.00176、0.00177、0.00178、0.00179、0.00180、0.00181、0.00182、0.00183、0.00184、0.00185、0.00186、0.00187、0.00188、0.00189、0.00190、0.00191、0.00192、0.00193、0.00194、0.00195、0.00196、0.00197、0.00198、0.00199、0.00200、0.00201、0.00202、0.00203、0.00204、0.00205、0.00206、0.00207、0.00208、0.00209、0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224、0.00225、0.00226、0.00227、0.00228、0.00229、0.00230、0.00231、0.00232、0.00233、0.00234、0.00235、0.00236、0.00237、0.00238、0.00239、0.00240、0.00241、0.00242、0.00243、0.00244、0.00245、0.00246、0.00247、0.00248、0.00249、0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00277、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339或0.00340。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率为约0.0024。
在另外的方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，如通过将施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后供体的外周血样品与施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂前供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使供体的外周血以从约3.5:1至22.0:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血可以以约3.50:1、3.55:1、3.60:1、3.65:1、3.70:1、3.75:1、3.80:1、3.85:1、3.90:1、3.95:1、4.00:1、4.05:1、4.10:1、4.15:1、4.20:1、4.25:1、4.30:1、4.35:1、4.40:1、4.45:1、4.50:1、4.55:1、4.60:1、4.65:1、4.70:1、4.75:1、4.80:1、4.85:1、4.90:1、4.95:1、5.00:1、5.05:1、5.10:1、5.15:1、5.20:1、5.25:1、5.30:1、5.35:1、5.40:1、5.45:1、5.50:1、5.55:1、5.60:1、5.65:1、5.70:1、5.75:1、5.80:1、5.85:1、5.90:1、5.95:1、6.00:1、6.05:1、6.10:1、6.15:1、6.20:1、6.25:1、6.30:1、6.35:1、6.40:1、6.45:1、6.50:1、6.55:1、6.60:1、6.65:1、6.70:1、6.75:1、6.80:1、6.85:1、6.90:1、6.95:1、7.00:1、7.05:1、7.10:1、7.15:1、7.20:1、7.25:1、7.30:1、7.35:1、7.40:1、7.45:1、7.50:1、7.55:1、7.60:1、7.65:1、7.70:1、7.75:1、7.80:1、7.85:1、7.90:1、7.95:1、8.00:1、8.05:1、8.10:1、8.15:1、8.20:1、8.25:1、8.30:1、8.35:1、8.40:1、8.45:1、8.50:1、8.55:1、8.60:1、8.65:1、8.70:1、8.75:1、8.80:1、8.85:1、8.90:1、8.95:1、9.00:1、9.05:1、9.10:1、9.15:1、9.20:1、9.25:1、9.30:1、9.35:1、9.40:1、9.45:1、9.50:1、9.55:1、9.60:1、9.65:1、9.70:1、9.75:1、9.80:1、9.85:1、9.90:1、9.95:1、10.00:1、10.05:1、10.10:1、10.15:1、10.20:1、10.25:1、10.30:1、10.35:1、10.40:1、10.45:1、10.50:1、10.55:1、10.60:1、10.65:1、10.70:1、10.75:1、10.80:1、10.85:1、10.90:1、10.95:1、11.00:1、11.05:1、11.10:1、11.15:1、11.20:1、11.25:1、11.30:1、11.35:1、11.40:1、11.45:1、11.50:1、11.55:1、11.60:1、11.65:1、11.70:1、11.75:1、11.80:1、11.85:1、11.90:1、11.95:1、12.00:1、12.05:1、12.10:1、12.15:1、12.20:1、12.25:1、12.30:1、12.35:1、12.40:1、12.45:1、12.50:1、12.55:1、12.60:1、12.65:1、12.70:1、12.75:1、12.80:1、12.85:1、12.90:1、12.95:1、13.00:1、13.05:1、13.10:1、13.15:1、13.20:1、13.25:1、13.30:1、13.35:1、13.40:1、13.45:1、13.50:1、13.55:1、13.60:1、13.65:1、13.70:1、13.75:1、13.80:1、13.85:1、13.90:1、13.95:1、14.00:1、14.05:1、14.10:1、14.15:1、14.20:1、14.25:1、14.30:1、14.35:1、14.40:1、14.45:1、14.50:1、14.55:1、14.60:1、14.65:1、14.70:1、14.75:1、14.80:1、14.85:1、14.90:1、14.95:1、15.00:1、15.05:1、15.10:1、15.15:1、15.20:1、15.25:1、15.30:1、15.35:1、15.40:1、15.45:1、15.50:1、15.55:1、15.60:1、15.65:1、15.70:1、15.75:1、15.80:1、15.85:1、15.90:1、15.95:1、16.00:1、16.05:1、16.10:1、16.15:1、16.20:1、16.25:1、16.30:1、16.35:1、16.40:1、16.45:1、16.50:1、16.55:1、16.60:1、16.65:1、16.70:1、16.75:1、16.80:1、16.85:1、16.90:1、16.95:1、17.00:1、17.05:1、17.10:1、17.15:1、17.20:1、17.25:1、17.30:1、17.35:1、17.40:1、17.45:1、17.50:1、17.55:1、17.60:1、17.65:1、17.70:1、17.75:1、17.80:1、17.85:1、17.90:1、17.95:1、18.00:1、18.05:1、18.10:1、18.15:1、18.20:1、18.25:1、18.30:1、18.35:1、18.40:1、18.45:1、18.50:1、18.55:1、18.60:1、18.65:1、18.70:1、18.75:1、18.80:1、18.85:1、18.90:1、18.95:1、19.00:1、19.05:1、19.10:1、19.15:1、19.20:1、19.25:1、19.30:1、19.35:1、19.40:1、19.45:1、19.50:1、19.55:1、19.60:1、19.65:1、19.70:1、19.75:1、19.80:1、19.85:1、19.90:1、19.95:1、20.00:1、20.05:1、20.10:1、20.15:1、20.20:1、20.25:1、20.30:1、20.35:1、20.40:1、20.45:1、20.50:1、20.55:1、20.60:1、20.65:1、20.70:1、20.75:1、20.80:1、20.85:1、20.90:1、20.95:1、21.00:1、21.05:1、21.10:1、21.15:1、21.20:1、21.25:1、21.30:1、21.35:1、21.40:1、21.45:1、21.50:1、21.55:1、21.60:1、21.65:1、21.70:1、21.75:1、21.80:1、21.85:1、21.90:1、21.95:1或22.00:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以从约7.0:1至约10:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以从约7.00:1至约9.00:1的比例，诸如约7.00:1、7.05:1、7.10:1、7.15:1、7.20:1、7.25:1、7.30:1、7.35:1、7.40:1、7.45:1、7.50:1、7.55:1、7.60:1、7.65:1、7.70:1、7.75:1、7.80:1、7.85:1、7.90:1、7.95:1、8.00:1、8.05:1、8.10:1、8.15:1、8.20:1、8.25:1、8.30:1、8.35:1、8.40:1、8.45:1、8.50:1、8.55:1、8.60:1、8.65:1、8.70:1、8.75:1、8.80:1、8.85:1、8.90:1、8.95:1或9.00:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以约8.2:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用足以产生具有至少约16,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度，诸如从约20,000个细胞/ml至约75,000个细胞/ml、约25,000个细胞/ml至约70,000个细胞/ml、约30,000个细胞/ml至约65,000个细胞/ml、约35,000个细胞/ml至约60,000细胞/ml、约40,000个细胞/ml至约55,000个细胞/ml或约45,000个细胞/ml至约50,000个细胞/ml(例如，约16,000个细胞/ml、17,000个细胞/ml、18,000个细胞/ml、19,000个细胞/ml、20,000个细胞/ml、21,000个细胞/ml、22,000个细胞/ml、23,000个细胞/ml、24,000个细胞/ml、25,000个细胞/ml、26,000个细胞/ml、27,000个细胞/ml、28,000个细胞/ml、29,000个细胞/ml、30,000个细胞/ml、31,000个细胞/ml、32,000个细胞/ml、33,000个细胞/ml、34,000个细胞/ml、35,000个细胞/ml、36,000个细胞/ml、37,000个细胞/ml、38,000个细胞/ml、39,000个细胞/ml、40,000个细胞/ml、41,000个细胞/ml、42,000个细胞/ml、43,000个细胞/ml、44,000个细胞/ml、45,000个细胞/ml、46,000个细胞/ml、47,000个细胞/ml、48,000个细胞/ml、49,000个细胞/ml、50,000个细胞/ml、51,000个细胞/ml、52,000个细胞/ml、53,000个细胞/ml、54,000个细胞/ml、55,000个细胞/ml、56,000个细胞/ml、57,000个细胞/ml、58,000个细胞/ml、59,000个细胞/ml、60,000个细胞/ml、61,000个细胞/ml、62,000个细胞/ml、63,000个细胞/ml、64,000个细胞/ml、65,000个细胞/ml、66,000个细胞/ml、67,000个细胞/ml、68,000个细胞/ml、69,000个细胞/ml、70,000个细胞/ml、71,000个细胞/ml、72,000个细胞/ml、73,000个细胞/ml、74,000个细胞/ml、75,000个细胞/ml、76,000个细胞/ml、77,000个细胞/ml或更多)的密度，并且具有不多于约2.5×107个细胞/ml的嗜中性粒细胞密度，诸如从约1×107个细胞/ml至约2.5×107个细胞/ml、约1.3×107个细胞/ml至约2×107个细胞/ml或1.5×107个细胞/ml至约1.9×107个细胞/ml(例如，约2.5×107个细胞/ml、2.4×107个细胞/ml、2.3×107个细胞/ml、2.2×107个细胞/ml、2.1×107个细胞/ml、2×107个细胞/ml、1.9×107个细胞/ml、1.8×107个细胞/ml、1.7×107个细胞/ml、1.6×107个细胞/ml、1.5×107个细胞/ml、1.4×107个细胞/ml、1.3×107个细胞/ml、1.2×107个细胞/ml、1.1×107个细胞/ml、1×107个细胞/ml或更少)的嗜中性粒细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约20,000个细胞/ml至约75,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度并且具有从约1×107个细胞/ml至约2.5×107个细胞/ml的嗜中性粒细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约30,000个细胞/ml至约60,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度并且具有从约1.3×107个细胞/ml至约2.3×107个细胞/ml的嗜中性粒细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约40,000个细胞/ml至约50,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度并且具有从约1.5×107个细胞/ml至约2×107个细胞/ml的嗜中性粒细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。
在又另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后在供体的外周血样品中产生具有从约0.0008至约0.0069的CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率的细胞群体。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率可以为约0.00080、0.00081、0.00082、0.00083、0.00084、0.00085、0.00086、0.00087、0.00088、0.00089、0.00090、0.00091、0.00092、0.00093、0.00094、0.00095、0.00096、0.00097、0.00098、0.00099、0.00100、0.00101、0.00102、0.00103、0.00104、0.00105、0.00106、0.00107、0.00108、0.00109、0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119、0.00120、0.00121、0.00122、0.00123、0.00124、0.00125、0.00126、0.00127、0.00128、0.00129、0.00130、0.00131、0.00132、0.00133、0.00134、0.00135、0.00136、0.00137、0.00138、0.00139、0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159、0.00160、0.00161、0.00162、0.00163、0.00164、0.00165、0.00166、0.00167、0.00168、0.00169、0.00170、0.00171、0.00172、0.00173、0.00174、0.00175、0.00176、0.00178、0.00179、0.00180、0.00181、0.00182、0.00183、0.00184、0.00185、0.00186、0.00187、0.00188、0.00189、0.00190、0.00191、0.00192、0.00193、0.00194、0.00195、0.00196、0.00197、0.00198、0.00199、0.00200、0.00201、0.00202、0.00203、0.00204、0.00205、0.00206、0.00207、0.00208、0.00209、0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224、0.00225、0.00226、0.00227、0.00228、0.00229、0.00230、0.00231、0.00232、0.00233、0.00234、0.00235、0.00236、0.00237、0.00238、0.00239、0.00240、0.00241、0.00242、0.00243、0.00244、0.00245、0.00246、0.00247、0.00248、0.00249、0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349、0.00350、0.00351、0.00352、0.00353、0.00354、0.00355、0.00356、0.00357、0.00358、0.00359、0.00360、0.00361、0.00362、0.00363、0.00364、0.00365、0.00366、0.00367、0.00368、0.00369、0.00370、0.00371、0.00372、0.00373、0.00374、0.00375、0.00376、0.00378、0.00379、0.00380、0.00381、0.00382、0.00383、0.00384、0.00385、0.00386、0.00387、0.00388、0.00389、0.00390、0.00391、0.00392、0.00393、0.00394、0.00395、0.00396、0.00397、0.00398、0.00399、0.00401、0.00402、0.00403、0.00404、0.00405、0.00406、0.00407、0.00408、0.00409、0.00410、0.00411、0.00412、0.00413、0.00414、0.00415、0.00416、0.00417、0.00418、0.00419、0.00420、0.00421、0.00422、0.00423、0.00424、0.00425、0.00426、0.00427、0.00428、0.00429、0.00430、0.00431、0.00432、0.00433、0.00434、0.00435、0.00436、0.00437、0.00438、0.00439、0.00440、0.00441、0.00442、0.00443、0.00444、0.00445、0.00446、0.00447、0.00448、0.00449、0.00450、0.00451、0.00452、0.00453、0.00454、0.00455、0.00456、0.00457、0.00458、0.00459、0.00460、0.00461、0.00462、0.00463、0.00464、0.00465、0.00466、0.00467、0.00468、0.00469、0.00470、0.00471、0.00472、0.00473、0.00474、0.00475、0.00476、0.00478、0.00479、0.00480、0.00481、0.00482、0.00483、0.00484、0.00485、0.00486、0.00487、0.00488、0.00489、0.00490、0.00491、0.00492、0.00493、0.00494、0.00495、0.00496、0.00497、0.00498、0.00499、0.00500、0.00501、0.00502、0.00503、0.00504、0.00505、0.00506、0.00507、0.00508、0.00509、0.00510、0.00511、0.00512、0.00513、0.00514、0.00515、0.00516、0.00517、0.00518、0.00519、0.00520、0.00521、0.00522、0.00523、0.00524、0.00525、0.00526、0.00527、0.00528、0.00529、0.00530、0.00531、0.00532、0.00533、0.00534、0.00535、0.00536、0.00537、0.00538、0.00539、0.00540、0.00541、0.00542、0.00543、0.00544、0.00545、0.00546、0.00547、0.00548、0.00549、0.00550、0.00551、0.00552、0.00553、0.00554、0.00555、0.00556、0.00557、0.00558、0.00559、0.00560、0.00561、0.00562、0.00563、0.00564、0.00565、0.00566、0.00567、0.00568、0.00569、0.00570、0.00571、0.00572、0.00573、0.00574、0.00575、0.00576、0.00578、0.00579、0.00580、0.00581、0.00582、0.00583、0.00584、0.00585、0.00586、0.00587、0.00588、0.00589、0.00590、0.00591、0.00592、0.00593、0.00594、0.00595、0.00596、0.00597、0.00598、0.00599、0.00600、0.00601、0.00602、0.00603、0.00604、0.00605、0.00606、0.00607、0.00608、0.00609、0.00610、0.00611、0.00612、0.00613、0.00614、0.00615、0.00616、0.00617、0.00618、0.00619、0.00620、0.00621、0.00622、0.00623、0.00624、0.00625、0.00626、0.00627、0.00628、0.00629、0.00630、0.00631、0.00632、0.00633、0.00634、0.00635、0.00636、0.00637、0.00638、0.00639、0.00640、0.00641、0.00642、0.00643、0.00644、0.00645、0.00646、0.00647、0.00648、0.00649、0.00650、0.00651、0.00652、0.00653、0.00654、0.00655、0.00656、0.00657、0.00658、0.00659、0.00660、0.00661、0.00662、0.00663、0.00664、0.00665、0.00666、0.00667、0.00668、0.00669、0.00670、0.00671、0.00672、0.00673、0.00674、0.00675、0.00676、0.00678、0.00679、0.00680、0.00681、0.00682、0.00683、0.00684、0.00685、0.00686、0.00687、0.00688、0.00689或0.00690。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率为从约0.0011至约0.0031，例如样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率为约0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119、0.00120、0.00121、0.00122、0.00123、0.00124、0.00125、0.00126、0.00127、0.00128、0.00129、0.00130、0.00131、0.00132、0.00133、0.00134、0.00135、0.00136、0.00137、0.00138、0.00139、0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159、0.00160、0.00161、0.00162、0.00163、0.00164、0.00165、0.00166、0.00167、0.00168、0.00169、0.00170、0.00171、0.00172、0.00173、0.00174、0.00175、0.00176、0.00178、0.00179、0.00180、0.00181、0.00182、0.00183、0.00184、0.00185、0.00186、0.00187、0.00188、0.00189、0.00190、0.00191、0.00192、0.00193、0.00194、0.00195、0.00196、0.00197、0.00198、0.00199、0.00200、0.00201、0.00202、0.00203、0.00204、0.00205、0.00206、0.00207、0.00208、0.00209、0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224、0.00225、0.00226、0.00227、0.00228、0.00229、0.00230、0.00231、0.00232、0.00233、0.00234、0.00235、0.00236、0.00237、0.00238、0.00239、0.00240、0.00241、0.00242、0.00243、0.00244、0.00245、0.00246、0.00247、0.00248、0.00249、0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309或0.00310。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率为约0.0021。
在另外的方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，如通过将施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后供体的外周血样品与施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂前供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使供体的外周血以从约5.6:1至约37.0:1的比例相对于淋巴细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血可以以约5.60:1、5.65:1、5.70:1、5.75:1、5.80:1、5.85:1、5.90:1、5.95:1、6.00:1、6.05:1、6.10:1、6.15:1、6.20:1、6.25:1、6.30:1、6.35:1、6.40:1、6.45:1、6.50:1、6.55:1、6.60:1、6.65:1、6.70:1、6.75:1、6.80:1、6.85:1、6.90:1、6.95:1、7.00:1、7.05:1、7.10:1、7.15:1、7.20:1、7.25:1、7.30:1、7.35:1、7.40:1、7.45:1、7.50:1、7.55:1、7.60:1、7.65:1、7.70:1、7.75:1、7.80:1、7.85:1、7.90:1、7.95:1、8.00:1、8.05:1、8.10:1、8.15:1、8.20:1、8.25:1、8.30:1、8.35:1、8.40:1、8.45:1、8.50:1、8.55:1、8.60:1、8.65:1、8.70:1、8.75:1、8.80:1、8.85:1、8.90:1、8.95:1、9.00:1、9.05:1、9.10:1、9.15:1、9.20:1、9.25:1、9.30:1、9.35:1、9.40:1、9.45:1、9.50:1、9.55:1、9.60:1、9.65:1、9.70:1、9.75:1、9.80:1、9.85:1、9.90:1、9.95:1、10.00:1、10.05:1、10.10:1、10.15:1、10.20:1、10.25:1、10.30:1、10.35:1、10.40:1、10.45:1、10.50:1、10.55:1、10.60:1、10.65:1、10.70:1、10.75:1、10.80:1、10.85:1、10.90:1、10.95:1、11.00:1、11.05:1、11.10:1、11.15:1、11.20:1、11.25:1、11.30:1、11.35:1、11.40:1、11.45:1、11.50:1、11.55:1、11.60:1、11.65:1、11.70:1、11.75:1、11.80:1、11.85:1、11.90:1、11.95:1、12.00:1、12.05:1、12.10:1、12.15:1、12.20:1、12.25:1、12.30:1、12.35:1、12.40:1、12.45:1、12.50:1、12.55:1、12.60:1、12.65:1、12.70:1、12.75:1、12.80:1、12.85:1、12.90:1、12.95:1、13.00:1、13.05:1、13.10:1、13.15:1、13.20:1、13.25:1、13.30:1、13.35:1、13.40:1、13.45:1、13.50:1、13.55:1、13.60:1、13.65:1、13.70:1、13.75:1、13.80:1、13.85:1、13.90:1、13.95:1、14.00:1、14.05:1、14.10:1、14.15:1、14.20:1、14.25:1、14.30:1、14.35:1、14.40:1、14.45:1、14.50:1、14.55:1、14.60:1、14.65:1、14.70:1、14.75:1、14.80:1、14.85:1、14.90:1、14.95:1、15.00:1、15.05:1、15.10:1、15.15:1、15.20:1、15.25:1、15.30:1、15.35:1、15.40:1、15.45:1、15.50:1、15.55:1、15.60:1、15.65:1、15.70:1、15.75:1、15.80:1、15.85:1、15.90:1、15.95:1、16.00:1、16.05:1、16.10:1、16.15:1、16.20:1、16.25:1、16.30:1、16.35:1、16.40:1、16.45:1、16.50:1、16.55:1、16.60:1、16.65:1、16.70:1、16.75:1、16.80:1、16.85:1、16.90:1、16.95:1、17.00:1、17.05:1、17.10:1、17.15:1、17.20:1、17.25:1、17.30:1、17.35:1、17.40:1、17.45:1、17.50:1、17.55:1、17.60:1、17.65:1、17.70:1、17.75:1、17.80:1、17.85:1、17.90:1、17.95:1、18.00:1、18.05:1、18.10:1、18.15:1、18.20:1、18.25:1、18.30:1、18.35:1、18.40:1、18.45:1、18.50:1、18.55:1、18.60:1、18.65:1、18.70:1、18.75:1、18.80:1、18.85:1、18.90:1、18.95:1、19.00:1、19.05:1、19.10:1、19.15:1、19.20:1、19.25:1、19.30:1、19.35:1、19.40:1、19.45:1、19.50:1、19.55:1、19.60:1、19.65:1、19.70:1、19.75:1、19.80:1、19.85:1、19.90:1、19.95:1、20.00:1、20.05:1、20.10:1、20.15:1、20.20:1、20.25:1、20.30:1、20.35:1、20.40:1、20.45:1、20.50:1、20.55:1、20.60:1、20.65:1、20.70:1、20.75:1、20.80:1、20.85:1、20.90:1、20.95:1、21.00:1、21.05:1、21.10:1、21.15:1、21.20:1、21.25:1、21.30:1、21.35:1、21.40:1、21.45:1、21.50:1、21.55:1、21.60:1、21.65:1、21.70:1、21.75:1、21.80:1、21.85:1、21.90:1、21.95:1、22.00:1、22.05:1、22.10:1、22.15:1、22.20:1、22.25:1、22.30:1、22.35:1、22.40:1、22.45:1、22.50:1、22.55:1、22.60:1、22.65:1、22.70:1、22.75:1、22.80:1、22.85:1、22.90:1、22.95:1、23.00、23.05:1、23.10:1、23.15:1、23.20:1、23.25:1、23.30:1、23.35:1、23.40:1、23.45:1、23.50:1、23.55:1、23.60:1、23.65:1、23.70:1、23.75:1、23.80:1、23.85:1、23.90:1、23.95:1、24.00:1、24.05:1、24.10:1、24.15:1、24.20:1、24.25:1、24.30:1、24.35:1、24.40:1、24.45:1、24.50:1、24.55:1、24.60:1、24.65:1、24.70:1、24.75:1、24.80:1、24.85:1、24.90:1、24.95:1、25.05:1、25.10:1、25.15:1、25.20:1、25.25:1、25.30:1、25.35:1、25.40:1、25.45:1、25.50:1、25.55:1、25.60:1、25.65:1、25.70:1、25.75:1、25.80:1、25.85:1、25.90:1、25.95:1、26.00:1、26.05:1、26.10:1、26.15:1、26.20:1、26.25:1、26.30:1、26.35:1、26.40:1、26.45:1、26.50:1、26.55:1、26.60:1、26.65:1、26.70:1、26.75:1、26.80:1、26.85:1、26.90:1、26.95:1、27.00:1、27.05:1、27.10:1、27.15:1、27.20:1、27.25:1、27.30:1、27.35:1、27.40:1、27.45:1、27.50:1、27.55:1、27.60:1、27.65:1、27.70:1、27.75:1、27.80:1、27.85:1、27.90:1、27.95:1、28.00:1、28.05:1、28.10:1、28.15:1、28.20:1、28.25:1、28.30:1、28.35:1、28.40:1、28.45:1、28.50:1、28.55:1、28.60:1、28.65:1、28.70:1、28.75:1、28.80:1、28.85:1、28.90:1、28.95:1、29.00:1、29.05:1、29.10:1、29.15:1、29.20:1、29.25:1、29.30:1、29.35:1、29.40:1、29.45:1、29.50:1、29.55:1、29.60:1、29.65:1、29.70:1、29.75:1、29.80:1、29.85:1、29.90:1、29.95:1、30.00:1、30.05:1、30.10:1、30.15:1、30.20:1、30.25:1、30.30:1、30.35:1、30.40:1、30.45:1、30.50:1、30.55:1、30.60:1、30.65:1、30.70:1、30.75:1、30.80:1、30.85:1、30.90:1、30.95:1、31.00:1、31.05:1、31.10:1、31.15:1、31.20:1、31.25:1、31.30:1、31.35:1、31.40:1、31.45:1、31.50:1、31.55:1、31.60:1、31.65:1、31.70:1、31.75:1、31.80:1、31.85:1、31.90:1、31.95:1、32.00:1、32.05:1、32.10:1、32.15:1、32.20:1、32.25:1、32.30:1、32.35:1、32.40:1、32.45:1、32.50:1、32.55:1、32.60:1、32.65:1、32.70:1、32.75:1、32.80:1、32.85:1、32.90:1、32.95:1、33.00:1、33.05:1、33.10:1、33.15:1、33.20:1、33.25:1、33.30:1、33.35:1、33.40:1、33.45:1、33.50:1、33.55:1、33.60:1、33.65:1、33.70:1、33.75:1、33.80:1、33.85:1、33.90:1、33.95:1、34.00:1、34.05:1、34.10:1、34.15:1、34.20:1、34.25:1、34.30:1、34.35:1、34.40:1、34.45:1、34.50:1、34.55:1、34.60:1、34.65:1、34.70:1、34.75:1、34.80:1、34.85:1、34.90:1、34.95:1、35.00:1、35.05:1、35.10:1、35.15:1、35.20:1、35.25:1、35.30:1、35.35:1、35.40:1、35.45:1、35.50:1、35.55:1、35.60:1、35.65:1、35.70:1、35.75:1、35.80:1、35.85:1、35.90:1、35.95:1、36.00:1、36.05:1、36.10:1、36.15:1、36.20:1、36.25:1、36.30:1、36.35:1、36.40:1、36.45:1、36.50:1、36.55:1、36.60:1、36.65:1、36.70:1、36.75:1、36.80:1、36.85:1、36.90:1、36.95:1或37.00的比例相对于淋巴细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以从约8.0:1至约10.0:1的比例，诸如约8.00:1、8.05:1、8.10:1、8.15:1、8.20:1、8.25:1、8.30:1、8.35:1、8.40:1、8.45:1、8.50:1、8.55:1、8.60:1、8.65:1、8.70:1、8.75:1、8.80:1、8.85:1、8.90:1、8.95:1、9.00:1、9.05:1、9.10:1、9.15:1、9.20:1、9.25:1、9.30:1、9.35:1、9.40:1、9.45:1、9.50:1、9.55:1、9.60:1、9.65:1、9.70:1、9.75:1、9.80:1、9.85:1、9.90:1、9.95:1或10.00:1的比例相对于淋巴细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以约9.3:1的比例相对于淋巴细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用足以产生具有至少约16,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度，诸如从约20,000个细胞/ml至约75,000个细胞/ml、约25,000个细胞/ml至约70,000个细胞/ml、约30,000个细胞/ml至约65,000个细胞/ml、约35,000个细胞/ml至约60,000细胞/ml、约40,000个细胞/ml至约55,000个细胞/ml或约45,000个细胞/ml至约50,000个细胞/ml(例如，约16,000个细胞/ml、17,000个细胞/ml、18,000个细胞/ml、19,000个细胞/ml、20,000个细胞/ml、21,000个细胞/ml、22,000个细胞/ml、23,000个细胞/ml、24,000个细胞/ml、25,000个细胞/ml、26,000个细胞/ml、27,000个细胞/ml、28,000个细胞/ml、29,000个细胞/ml、30,000个细胞/ml、31,000个细胞/ml、32,000个细胞/ml、33,000个细胞/ml、34,000个细胞/ml、35,000个细胞/ml、36,000个细胞/ml、37,000个细胞/ml、38,000个细胞/ml、39,000个细胞/ml、40,000个细胞/ml、41,000个细胞/ml、42,000个细胞/ml、43,000个细胞/ml、44,000个细胞/ml、45,000个细胞/ml、46,000个细胞/ml、47,000个细胞/ml、48,000个细胞/ml、49,000个细胞/ml、50,000个细胞/ml、51,000个细胞/ml、52,000个细胞/ml、53,000个细胞/ml、54,000个细胞/ml、55,000个细胞/ml、56,000个细胞/ml、57,000个细胞/ml、58,000个细胞/ml、59,000个细胞/ml、60,000个细胞/ml、61,000个细胞/ml、62,000个细胞/ml、63,000个细胞/ml、64,000个细胞/ml、65,000个细胞/ml、66,000个细胞/ml、67,000个细胞/ml、68,000个细胞/ml、69,000个细胞/ml、70,000个细胞/ml、71,000个细胞/ml、72,000个细胞/ml、73,000个细胞/ml、74,000个细胞/ml、75,000个细胞/ml、76,000个细胞/ml、77,000个细胞/ml或更多)的密度，并且具有不多于约2.4×107个细胞/ml的淋巴细胞密度，诸如从约1×107个细胞/ml至约2.3×107个细胞/ml、约1.3×107个细胞/ml至约2.1×107个细胞/ml或约1.5×107个细胞/ml至约1.9×107个细胞/ml(例如，约2.4×107个细胞/ml、2.3×107个细胞/ml、2.2×107个细胞/ml、2.1×107个细胞/ml、2×107个细胞/ml、1.9×107个细胞/ml、1.8×107个细胞/ml、1.7×107个细胞/ml、1.6×107个细胞/ml、1.5×107个细胞/ml、1.4×107个细胞/ml、1.3×107个细胞/ml、1.2×107个细胞/ml、1.1×107个细胞/ml、1×107个细胞/ml或更少、0.9×107个细胞/ml、0.8×107个细胞/ml或更少)的淋巴细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约20,000个细胞/ml至约75,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度并且具有从约1×107个细胞/ml至约2.3×107个细胞/ml的淋巴细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约30,000个细胞/ml至约60,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度并且具有从约1.3×107个细胞/ml至约2.3×107个细胞/ml的淋巴细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约40,000个细胞/ml至约50,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度并且具有从约1.5×107个细胞/ml至约2×107个细胞/ml的淋巴细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用CXCR2激动剂后在供体的外周血样品中产生具有从约0.0028至约0.0130的CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率的细胞群体。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率可以为约0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349、0.00350、0.00351、0.00352、0.00353、0.00354、0.00355、0.00356、0.00357、0.00358、0.00359、0.00360、0.00361、0.00362、0.00363、0.00364、0.00365、0.00366、0.00367、0.00368、0.00369、0.00370、0.00371、0.00372、0.00373、0.00374、0.00375、0.00376、0.00378、0.00379、0.00380、0.00381、0.00382、0.00383、0.00384、0.00385、0.00386、0.00387、0.00388、0.00389、0.00390、0.00391、0.00392、0.00393、0.00394、0.00395、0.00396、0.00397、0.00398、0.00399、0.00401、0.00402、0.00403、0.00404、0.00405、0.00406、0.00407、0.00408、0.00409、0.00410、0.00411、0.00412、0.00413、0.00414、0.00415、0.00416、0.00417、0.00418、0.00419、0.00420、0.00421、0.00422、0.00423、0.00424、0.00425、0.00426、0.00427、0.00428、0.00429、0.00430、0.00431、0.00432、0.00433、0.00434、0.00435、0.00436、0.00437、0.00438、0.00439、0.00440、0.00441、0.00442、0.00443、0.00444、0.00445、0.00446、0.00447、0.00448、0.00449、0.00450、0.00451、0.00452、0.00453、0.00454、0.00455、0.00456、0.00457、0.00458、0.00459、0.00460、0.00461、0.00462、0.00463、0.00464、0.00465、0.00466、0.00467、0.00468、0.00469、0.00470、0.00471、0.00472、0.00473、0.00474、0.00475、0.00476、0.00478、0.00479、0.00480、0.00481、0.00482、0.00483、0.00484、0.00485、0.00486、0.00487、0.00488、0.00489、0.00490、0.00491、0.00492、0.00493、0.00494、0.00495、0.00496、0.00497、0.00498、0.00499、0.00500、0.00501、0.00502、0.00503、0.00504、0.00505、0.00506、0.00507、0.00508、0.00509、0.00510、0.00511、0.00512、0.00513、0.00514、0.00515、0.00516、0.00517、0.00518、0.00519、0.00520、0.00521、0.00522、0.00523、0.00524、0.00525、0.00526、0.00527、0.00528、0.00529、0.00530、0.00531、0.00532、0.00533、0.00534、0.00535、0.00536、0.00537、0.00538、0.00539、0.00540、0.00541、0.00542、0.00543、0.00544、0.00545、0.00546、0.00547、0.00548、0.00549、0.00550、0.00551、0.00552、0.00553、0.00554、0.00555、0.00556、0.00557、0.00558、0.00559、0.00560、0.00561、0.00562、0.00563、0.00564、0.00565、0.00566、0.00567、0.00568、0.00569、0.00570、0.00571、0.00572、0.00573、0.00574、0.00575、0.00576、0.00578、0.00579、0.00580、0.00581、0.00582、0.00583、0.00584、0.00585、0.00586、0.00587、0.00588、0.00589、0.00590、0.00591、0.00592、0.00593、0.00594、0.00595、0.00596、0.00597、0.00598、0.00599、0.00600、0.00601、0.00602、0.00603、0.00604、0.00605、0.00606、0.00607、0.00608、0.00609、0.00610、0.00611、0.00612、0.00613、0.00614、0.00615、0.00616、0.00617、0.00618、0.00619、0.00620、0.00621、0.00622、0.00623、0.00624、0.00625、0.00626、0.00627、0.00628、0.00629、0.00630、0.00631、0.00632、0.00633、0.00634、0.00635、0.00636、0.00637、0.00638、0.00639、0.00640、0.00641、0.00642、0.00643、0.00644、0.00645、0.00646、0.00647、0.00648、0.00649、0.00650、0.00651、0.00652、0.00653、0.00654、0.00655、0.00656、0.00657、0.00658、0.00659、0.00660、0.00661、0.00662、0.00663、0.00664、0.00665、0.00666、0.00667、0.00668、0.00669、0.00670、0.00671、0.00672、0.00673、0.00674、0.00675、0.00676、0.00678、0.00679、0.00680、0.00681、0.00682、0.00683、0.00684、0.00685、0.00686、0.00687、0.00688、0.00689、0.00690、0.00691、0.00692、0.00693、0.00694、0.00695、0.00696、0.00697、0.00698、0.00699、0.00700、0.00701、0.00702、0.00703、0.00704、0.00705、0.00706、0.00707、0.00708、0.00709、0.00710、0.00711、0.00712、0.00713、0.00714、0.00715、0.00716、0.00717、0.00718、0.00719、0.00720、0.00721、0.00722、0.00723、0.00724、0.00725、0.00726、0.00727、0.00728、0.00729、0.00730、0.00731、0.00732、0.00733、0.00734、0.00735、0.00736、0.00737、0.00738、0.00739、0.00740、0.00741、0.00742、0.00743、0.00744、0.00745、0.00746、0.00747、0.00748、0.00749、0.00750、0.00751、0.00752、0.00753、0.00754、0.00755、0.00756、0.00757、0.00758、0.00759、0.00760、0.00761、0.00762、0.00763、0.00764、0.00765、0.00766、0.00767、0.00768、0.00769、0.00770、0.00771、0.00772、0.00773、0.00774、0.00775、0.00776、0.00777、0.00778、0.00779、0.00780、0.00781、0.00782、0.00783、0.00784、0.00785、0.00786、0.00787、0.00788、0.00789、0.00790、0.00791、0.00792、0.00793、0.00794、0.00795、0.00796、0.00797、0.00798、0.00799、0.00800、0.00801、0.00802、0.00803、0.00804、0.00805、0.00806、0.00807、0.00808、0.00809、0.00810、0.00811、0.00812、0.00813、0.00814、0.00815、0.00816、0.00817、0.00818、0.00819、0.00820、0.00821、0.00822、0.00823、0.00824、0.00825、0.00826、0.00827、0.00828、0.00829、0.00830、0.00831、0.00832、0.00833、0.00834、0.00835、0.00836、0.00837、0.00838、0.00839、0.00840、0.00841、0.00842、0.00843、0.00844、0.00845、0.00846、0.00847、0.00848、0.00849、0.00850、0.00851、0.00852、0.00853、0.00854、0.00855、0.00856、0.00857、0.00858、0.00859、0.00860、0.00861、0.00862、0.00863、0.00864、0.00865、0.00866、0.00867、0.00868、0.00869、0.00870、0.00871、0.00872、0.00873、0.00874、0.00875、0.00876、0.00877、0.00878、0.00879、0.00880、0.00881、0.00882、0.00883、0.00884、0.00885、0.00886、0.00887、0.00888、0.00889、0.00890、0.00891、0.00892、0.00893、0.00894、0.00895、0.00896、0.00897、0.00898、0.00899、0.00900、0.00901、0.00902、0.00903、0.00904、0.00905、0.00906、0.00907、0.00908、0.00909、0.00910、0.00911、0.00912、0.00913、0.00914、0.00915、0.00916、0.00917、0.00918、0.00919、0.00920、0.00921、0.00922、0.00923、0.00924、0.00925、0.00926、0.00927、0.00928、0.00929、0.00930、0.00931、0.00932、0.00933、0.00934、0.00935、0.00936、0.00937、0.00938、0.00939、0.00940、0.00941、0.00942、0.00943、0.00944、0.00945、0.00946、0.00947、0.00948、0.00949、0.00950、0.00951、0.00952、0.00953、0.00954、0.00955、0.00956、0.00957、0.00958、0.00959、0.00960、0.00961、0.00962、0.00963、0.00964、0.00965、0.00966、0.00967、0.00968、0.00969、0.00970、0.00971、0.00972、0.00973、0.00974、0.00975、0.00976、0.00977、0.00978、0.00979、0.00980、0.00981、0.00982、0.00983、0.00984、0.00985、0.00986、0.00987、0.00988、0.00989、0.00990、0.00991、0.00992、0.00993、0.00994、0.00995、0.00996、0.00997、0.00998、0.00999、0.0100、0.0101、0.0103、0.0104、0.0105、0.0106、0.0107、0.0108、0.0109、0.0110、0.0111、0.0112、0.0113、0.0114、0.0115、0.0116、0.0117、0.0118、0.0119、0.0120、0.0121、0.0122、0.0123、0.0124、0.0125、0.0126、0.0127、0.0128、0.0129或0.0130。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率为从约0.0063至约0.0083，例如样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率为约0.00630、0.00631、0.00632、0.00633、0.00634、0.00635、0.00636、0.00637、0.00638、0.00639、0.00640、0.00641、0.00642、0.00643、0.00644、0.00645、0.00646、0.00647、0.00648、0.00649、0.00650、0.00651、0.00652、0.00653、0.00654、0.00655、0.00656、0.00657、0.00658、0.00659、0.00660、0.00661、0.00662、0.00663、0.00664、0.00665、0.00666、0.00667、0.00668、0.00669、0.00670、0.00671、0.00672、0.00673、0.00674、0.00675、0.00676、0.00678、0.00679、0.00680、0.00681、0.00682、0.00683、0.00684、0.00685、0.00686、0.00687、0.00688、0.00689、0.00690、0.00691、0.00692、0.00693、0.00694、0.00695、0.00696、0.00697、0.00698、0.00699、0.00700、0.00701、0.00702、0.00703、0.00704、0.00705、0.00706、0.00707、0.00708、0.00709、0.00710、0.00711、0.00712、0.00713、0.00714、0.00715、0.00716、0.00717、0.00718、0.00719、0.00720、0.00721、0.00722、0.00723、0.00724、0.00725、0.00726、0.00727、0.00728、0.00729、0.00730、0.00731、0.00732、0.00733、0.00734、0.00735、0.00736、0.00737、0.00738、0.00739、0.00740、0.00741、0.00742、0.00743、0.00744、0.00745、0.00746、0.00747、0.00748、0.00749、0.00750、0.00751、0.00752、0.00753、0.00754、0.00755、0.00756、0.00757、0.00758、0.00759、0.00760、0.00761、0.00762、0.00763、0.00764、0.00765、0.00766、0.00767、0.00768、0.00769、0.00770、0.00771、0.00772、0.00773、0.00774、0.00775、0.00776、0.00777、0.00778、0.00779、0.00780、0.00781、0.00782、0.00783、0.00784、0.00785、0.00786、0.00787、0.00788、0.00789、0.00790、0.00791、0.00792、0.00793、0.00794、0.00795、0.00796、0.00797、0.00798、0.00799、0.00800、0.00801、0.00802、0.00803、0.00804、0.00805、0.00806、0.00807、0.00808、0.00809、0.00810、0.00811、0.00812、0.00813、0.00814、0.00815、0.00816、0.00817、0.00818、0.00819、0.00820、0.00821、0.00822、0.00823、0.00824、0.00825、0.00826、0.00827、0.00828、0.00829、0.00830。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率为约0.0073。
在另外的方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，如通过将施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后供体的外周血样品与施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂前供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使供体的外周血以从约1.5:1至约8.5:1的比例相对于单核细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血可以以约1.50:1、1.55:1、1.60:1、1.65:1、1.70:1、1.75:1、1.80:1、1.85:1、1.90:1、1.95:1、2.00:1、2.05:1、2.10:1、2.15:1、2.20:1、2.25:1、2.30:1、2.35:1、2.40:1、2.45:1、2.50:1、2.55:1、2.60:1、2.65:1、2.70:1、2.75:1、2.80:1、2.85:1、2.90:1、2.95:1、3.00:1、3.05:1、3.10:1、3.15:1、3.20:1、3.25:1、3.30:1、3.35:1、3.40:1、3.45:1、3.50:1、3.55:1、3.60:1、3.65:1、3.70:1、3.75:1、3.80:1、3.85:1、3.90:1、3.95:1、4.00:1、4.05:1、4.10:1、4.15:1、4.20:1、4.25:1、4.30:1、4.35:1、4.40:1、4.45:1、4.50:1、4.55:1、4.60:1、4.65:1、4.70:1、4.75:1、4.80:1、4.85:1、4.90:1、4.95:1、5.00:1、5.05:1、5.10:1、5.15:1、5.20:1、5.25:1、5.30:1、5.35:1、5.40:1、5.45:1、5.50:1、5.55:1、5.60:1、5.65:1、5.70:1、5.75:1、5.80:1、5.85:1、5.90:1、5.95:1、6.00:1、6.05:1、6.10:1、6.15:1、6.20:1、6.25:1、6.30:1、6.35:1、6.40:1、6.45:1、6.50:1、6.55:1、6.60:1、6.65:1、6.70:1、6.75:1、6.80:1、6.85:1、6.90:1、6.95:1、7.00:1、7.05:1、7.10:1、7.15:1、7.20:1、7.25:1、7.30:1、7.35:1、7.40:1、7.45:1、7.50:1、7.55:1、7.60:1、7.65:1、7.70:1、7.75:1、7.80:1、7.85:1、7.90:1、7.95:1、8.00:1、8.05:1、8.10:1、8.15:1、8.20:1、8.25:1、8.30:1、8.35:1、8.40:1、8.45:1或8.50:1的比例相对于单核细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以约1.9:1的比例相对于单核细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用足以产生具有至少约16,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度，诸如从约20,000个细胞/ml至约75,000个细胞/ml、约25,000个细胞/ml至约70,000个细胞/ml、约30,000个细胞/ml至约65,000个细胞/ml、约35,000个细胞/ml至约60,000个细胞/ml、约40,000个细胞/ml至约55,000个细胞/ml或约45,000个细胞/ml至约50,000个细胞/ml(例如，约16,000个细胞/ml、17,000个细胞/ml、18,000个细胞/ml、19,000个细胞/ml、20,000个细胞/ml、21,000个细胞/ml、22,000个细胞/ml、23,000个细胞/ml、24,000个细胞/ml、25,000个细胞/ml、26,000个细胞/ml、27,000个细胞/ml、28,000个细胞/ml、29,000个细胞/ml、30,000个细胞/ml、31,000个细胞/ml、32,000个细胞/ml、33,000个细胞/ml、34,000个细胞/ml、35,000个细胞/ml、36,000个细胞/ml、37,000个细胞/ml、38,000个细胞/ml、39,000个细胞/ml、40,000个细胞/ml、41,000个细胞/ml、42,000个细胞/ml、43,000个细胞/ml、44,000个细胞/ml、45,000个细胞/ml、46,000个细胞/ml、47,000个细胞/ml、48,000个细胞/ml、49,000个细胞/ml、50,000个细胞/ml、51,000个细胞/ml、52,000个细胞/ml、53,000个细胞/ml、54,000个细胞/ml、55,000个细胞/ml、56,000个细胞/ml、57,000个细胞/ml、58,000个细胞/ml、59,000个细胞/ml、60,000个细胞/ml、61,000个细胞/ml、62,000个细胞/ml、63,000个细胞/ml、64,000个细胞/ml、65,000个细胞/ml、66,000个细胞/ml、67,000个细胞/ml、68,000个细胞/ml、69,000个细胞/ml、70,000个细胞/ml、71,000个细胞/ml、72,000个细胞/ml、73,000个细胞/ml、74,000个细胞/ml、75,000个细胞/ml、76,000个细胞/ml、77,000个细胞/ml或更多)的密度，并且具有不多于约6×106个细胞/ml的单核细胞密度，诸如从3.4×106个细胞/ml至约5.9×106个细胞/ml、约3.5×106个细胞/ml至约5.7×106个细胞/ml或约4×106个细胞/ml至约5×106个细胞/ml(例如，5.9×106个细胞/ml、5.8×106个细胞/ml、5.7×106个细胞/ml、5.6×106个细胞/ml、5.5×106个细胞/ml、5.4×106个细胞/ml、5.3×106个细胞/ml、5.2×106个细胞/ml、5.1×106个细胞/ml、5×106个细胞/ml、4.9×106个细胞/ml、4.8×106个细胞/ml、4.7×106个细胞/ml、4.6×106个细胞/ml、4.5×106个细胞/ml、4.4×106个细胞/ml、4.3×106个细胞/ml、4.2×106个细胞/ml、4.1×106个细胞/ml、4×106个细胞/ml、3.9×106个细胞/ml、3.8×106个细胞/ml、3.7×106个细胞/ml、3.6×106个细胞/ml、3.5×106个细胞/ml、3.4×106个细胞/ml或更少)的单核细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约20,000个细胞/ml至约75,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度并且具有从约3.4×106个细胞/ml至约6×106个细胞/ml的单核细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约30,000个细胞/ml至约60,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度并且具有从约4×106个细胞/ml至约5.5×106个细胞/ml的单核细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。在一些实施方案中，该方法包括向供体施用足以产生具有从约40,000个细胞/ml至约50,000个细胞/ml的CD34+CD90+CD45RA-细胞密度并且具有从约4×106个细胞/ml至约5×106个细胞/ml的单核细胞密度的细胞群体的量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用CXCR2激动剂后在供体的外周血样品中产生具有从约0.393至约0.745的CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率的细胞群体。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率可以为约0.393、0.394、0.395、0.396、0.397、0.398、0.399、0.401、0.402、0.403、0.404、0.405、0.406、0.407、0.408、0.409、0.410、0.411、0.412、0.413、0.414、0.415、0.416、0.417、0.418、0.419、0.420、0.421、0.422、0.423、0.424、0.425、0.426、0.427、0.428、0.429、0.430、0.431、0.432、0.433、0.434、0.435、0.436、0.437、0.438、0.439、0.440、0.441、0.442、0.443、0.444、0.445、0.446、0.447、0.448、0.449、0.450、0.451、0.452、0.453、0.454、0.455、0.456、0.457、0.458、0.459、0.460、0.461、0.462、0.463、0.464、0.465、0.466、0.467、0.468、0.469、0.470、0.471、0.472、0.473、0.474、0.475、0.476、0.478、0.479、0.480、0.481、0.482、0.483、0.484、0.485、0.486、0.487、0.488、0.489、0.490、0.491、0.492、0.493、0.494、0.495、0.496、0.497、0.498、0.499、0.500、0.501、0.502、0.503、0.504、0.505、0.506、0.507、0.508、0.509、0.510、0.511、0.512、0.513、0.514、0.515、0.516、0.517、0.518、0.519、0.520、0.521、0.522、0.523、0.524、0.525、0.526、0.527、0.528、0.529、0.530、0.531、0.532、0.533、0.534、0.535、0.536、0.537、0.538、0.539、0.540、0.541、0.542、0.543、0.544、0.545、0.546、0.547、0.548、0.549、0.550、0.551、0.552、0.553、0.554、0.555、0.556、0.557、0.558、0.559、0.560、0.561、0.562、0.563、0.564、0.565、0.566、0.567、0.568、0.569、0.570、0.571、0.572、0.573、0.574、0.575、0.576、0.578、0.579、0.580、0.581、0.582、0.583、0.584、0.585、0.586、0.587、0.588、0.589、0.590、0.591、0.592、0.593、0.594、0.595、0.596、0.597、0.598、0.599、0.600、0.601、0.602、0.603、0.604、0.605、0.606、0.607、0.608、0.609、0.610、0.611、0.612、0.613、0.614、0.615、0.616、0.617、0.618、0.619、0.620、0.621、0.622、0.623、0.624、0.625、0.626、0.627、0.628、0.629、0.630、0.631、0.632、0.633、0.634、0.635、0.636、0.637、0.638、0.639、0.640、0.641、0.642、0.643、0.644、0.645、0.646、0.647、0.648、0.649、0.650、0.651、0.652、0.653、0.654、0.655、0.656、0.657、0.658、0.659、0.660、0.661、0.662、0.663、0.664、0.665、0.666、0.667、0.668、0.669、0.670、0.671、0.672、0.673、0.674、0.675、0.676、0.678、0.679、0.680、0.681、0.682、0.683、0.684、0.685、0.686、0.687、0.688、0.689、0.690、0.691、0.692、0.693、0.694、0.695、0.696、0.697、0.698、0.699、0.700、0.701、0.702、0.703、0.704、0.705、0.706、0.707、0.708、0.709、0.710、0.711、0.712、0.713、0.714、0.715、0.716、0.717、0.718、0.719、0.720、0.721、0.722、0.723、0.724、0.725、0.726、0.727、0.728、0.729、0.730、0.731、0.732、0.733、0.734、0.735、0.736、0.737、0.738、0.739、0.740、0.741、0.742、0.743、0.744或0.745。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率为从约0.625至约0.725，例如样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率为约0.625、0.626、0.627、0.628、0.629、0.630、0.631、0.632、0.633、0.634、0.635、0.636、0.637、0.638、0.639、0.640、0.641、0.642、0.643、0.644、0.645、0.646、0.647、0.648、0.649、0.650、0.651、0.652、0.653、0.654、0.655、0.656、0.657、0.658、0.659、0.660、0.661、0.662、0.663、0.664、0.665、0.666、0.667、0.668、0.669、0.670、0.671、0.672、0.673、0.674、0.675、0.676、0.678、0.679、0.680、0.681、0.682、0.683、0.684、0.685、0.686、0.687、0.688、0.689、0.690、0.691、0.692、0.693、0.694、0.695、0.696、0.697、0.698、0.699、0.700、0.701、0.702、0.703、0.704、0.705、0.706、0.707、0.708、0.709、0.710、0.711、0.712、0.713、0.714、0.715、0.716、0.717、0.718、0.719、0.720、0.721、0.722、0.723、0.724或0.725。在一些实施方案中，样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率为约0.676。
在另外的方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，如通过将施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后供体的外周血样品与施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂前供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使供体的外周血以从约1.1:1至约4.8:1的比例相对于CD34+细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血可以以约1.10:1、1.15:1、1.20:1、1.25:1、1.30:1、1.35:1、1.40:1、1.45:1、1.50:1、1.55:1、1.60:1、1.65:1、1.70:1、1.75:1、1.80:1、1.85:1、1.90:1、1.95:1、2.00:1、2.05:1、2.10:1、2.15:1、2.20:1、2.25:1、2.30:1、2.35:1、2.40:1、2.45:1、2.50:1、2.55:1、2.60:1、2.65:1、2.70:1、2.75:1、2.80:1、2.85:1、2.90:1、2.95:1、3.00:1、3.05:1、3.10:1、3.15:1、3.20:1、3.25:1、3.30:1、3.35:1、3.40:1、3.45:1、3.50:1、3.55:1、3.60:1、3.65:1、3.70:1、3.75:1、3.80:1、3.85:1、3.90:1、3.95:1、4.00:1、4.05:1、4.10:1、4.15:1、4.20:1、4.25:1、4.30:1、4.35:1、4.40:1、4.45:1、4.50:1、4.55:1、4.60:1、4.65:1、4.70:1、4.75:1或4.80:1的比例相对于单核细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。在一些实施方案中，供体的外周血以约1.2:1的比例相对于CD34+细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后在供体的外周血样品中产生具有从约0.020％至约0.110％的CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率的细胞群体。在一些实施方案中，细胞群体可以具有约0.020％、0.021％、0.022％、0.023％、0.024％、0.025％、0.026％、0.027％、0.028％、0.029％、0.030％、0.031％、0.032％、0.033％、0.034％、0.035％、0.036％、0.037％、0.038％、0.039％、0.040％、0.041％、0.042％、0.043％、0.044％、0.045％、0.046％、0.047％、0.048％、0.049％、0.050％、0.051％、0.052％、0.053％、0.054％、0.055％、0.056％、0.057％、0.058％、0.059％、0.060％、0.061％、0.062％、0.063％、0.064％、0.065％、0.066％、0.067％、0.068％、0.069％、0.070％、0.071％、0.072％、0.073％、0.074％、0.075％、0.076％、0.077％、0.078％、0.079％、0.080％、0.081％、0.082％、0.083％、0.084％、0.085％、0.086％、0.087％、0.088％、0.089％、0.090％、0.091％、0.092％、0.093％、0.094％、0.095％、0.096％、0.097％、0.098％、0.099％、0.100％、0.101％、0.102％、0.103％、0.104％、0.105％、0.106％、0.107％、0.108％、0.109％或0.110％的CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率。在一些实施方案中，细胞群体具有从约0.046％至约0.086％的CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率，诸如约0.046％、0.047％、0.048％、0.049％、0.050％、0.051％、0.052％、0.053％、0.054％、0.055％、0.056％、0.057％、0.058％、0.059％、0.060％、0.061％、0.062％、0.063％、0.064％、0.065％、0.066％、0.067％、0.068％、0.069％、0.070％、0.071％、0.072％、0.073％、0.074％、0.075％、0.076％、0.077％、0.078％、0.079％、0.080％、0.081％、0.082％、0.083％、0.084％、0.085％或0.086％的造血干细胞的频率。在一些实施方案中，细胞群体具有约0.066％的CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率。
在另外的方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，如通过将施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后供体的外周血样品与施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂前供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以诱导供体的外周血中CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率增加至少3倍(例如，从约5.1倍至约25.7倍、诸如约5.1倍、5.2倍、5.3倍、5.4倍、5.5倍、5.6倍、5.7倍、5.8倍、5.9倍、6.0倍、6.1倍、6.2倍、6.3倍、6.4倍、6.5倍、6.6倍、6.7倍、6.8倍、6.9倍、7.0倍、7.1倍、7.2倍、7.3倍、7.4倍、7.5倍、7.6倍、7.7倍、7.8倍、7.9倍、8.0倍、8.1倍、8.2倍、8.3倍、8.4倍、8.5倍、8.6倍、8.7倍、8.8倍、8.9倍、9.0倍、9.1倍、9.2倍、9.3倍、9.4倍、9.5倍、9.6倍、9.7倍、9.8倍、9.9倍、10.0倍、10.1倍、10.2倍、10.3倍、10.4倍、10.5倍、10.6倍、10.7倍、10.8倍、10.9倍、11.0倍、11.1倍、11.2倍、11.3倍、11.4倍、11.5倍、11.6倍、11.7倍、11.8倍、11.9倍、12.0倍、12.1倍、12.2倍、12.3倍、12.4倍、12.5倍、12.6倍、12.7倍、12.8倍、12.9倍、13.0倍、13.1倍、13.2倍、13.3倍、13.4倍、13.5倍、13.6倍、13.7倍、13.8倍、13.9倍、14.0倍、14.1倍、14.2倍、14.3倍、14.4倍、14.5倍、14.6倍、14.7倍、14.8倍、14.9倍、15.0倍、15.1倍、15.2倍、15.3倍、15.4倍、15.5倍、15.6倍、15.7倍、15.8倍、15.9倍、16.0倍、16.1倍、16.2倍、16.3倍、16.4倍、16.5倍、16.6倍、16.7倍、16.8倍、16.9倍、17.0倍、17.1倍、17.2倍、17.3倍、17.4倍、17.5倍、17.6倍、17.7倍、17.8倍、17.9倍、18.0倍、18.1倍、18.2倍、18.3倍、18.4倍、18.5倍、18.6倍、18.7倍、18.8倍、18.9倍、19.0倍、19.1倍、19.2倍、19.3倍、19.4倍、19.5倍、19.6倍、19.7倍、19.8倍、19.9倍、20.0倍、20.1倍、20.2倍、20.3倍、20.4倍、20.5倍、20.6倍、20.7倍、20.8倍、20.9倍、21.0倍、21.1倍、21.2倍、21.3倍、21.4倍、21.5倍、21.6倍、21.7倍、21.8倍、21.9倍、22.0倍、22.1倍、22.2倍、22.3倍、22.4倍、22.5倍、22.6倍、22.7倍、22.8倍、22.9倍、23.0倍、23.1倍、23.2倍、23.3倍、23.4倍、23.5倍、23.6倍、23.7倍、23.8倍、23.9倍、24.0倍、24.1倍、24.2倍、24.3倍、24.4倍、24.5倍、24.6倍、24.7倍、24.8倍、24.9倍、25.0倍、25.1倍、25.2倍、25.3倍、25.4倍、25.5倍、25.6倍或25.7倍)。在一些实施方案中，供体的外周血中CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后增加从约5.1倍至约7.1倍，诸如约5.1倍、5.2倍、5.3倍、5.4倍、5.5倍、5.6倍、5.7倍、5.8倍、5.9倍、6.0倍、6.1倍、6.2倍、6.3倍、6.4倍、6.5倍、6.6倍、6.7倍、6.8倍、6.9倍、7.0倍或7.1倍。在一些实施方案中，供体的外周血中CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率增加约5.8倍。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用动员量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂；获得表2中表征供体的外周血样品的一个或更多个参数中的每一个的输入值，并且如果一个或更多个参数中的每一个的输入值满足一个或更多个参数中的每一个的对应参考标准，则释放该样品用于造血干细胞的离体扩增或用于治疗哺乳动物患者的一种或更多种干细胞紊乱。在一些实施方案中，一个或更多个参考参数是本文表3-6的任一个中列出的一组参数。
在本发明上述方面中的任一个方面的一些实施方案中，在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后约3小时至约5小时(例如，在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后约3小时、3.1小时、3.2小时、3.3小时、3.4小时、3.5小时、3.6小时、3.7小时、3.8小时、3.9小时、4.0小时、4.1小时、4.2小时、4.3小时、4.4小时、4.5小时、4.6小时、4.7小时、4.8小时、4.9小时或5.0小时)，从供体分离样品。在一些实施方案中，在施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后约4小时，从供体分离样品。
在本发明上述方面中的任一个方面的一些实施方案中，CXCR2激动剂是Gro-βT或其变体。在一些实施方案中，CXCR2激动剂可以是与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有至少约85％(例如，至少约85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或更多)序列同一性的肽。在一些实施方案中，CXCR2激动剂是与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有从约85％至100％序列同一性的肽，诸如与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有从约86％至约100％、从约87％至约99％、约88％至约98％、约89％至约97％、约90％至约96％或约91％至约95％序列同一性的肽。在一些实施方案中，CXCR2激动剂是具有仅通过一个或更多个保守氨基酸取代(例如，仅通过1至10个保守氨基酸取代、1至5个保守氨基酸取代或1至3个保守氨基酸取代，诸如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个保守氨基酸取代)而不同于SEQ ID NO:2的氨基酸序列的氨基酸序列的肽。在一些实施方案中，CXCR2激动剂是Gro-βT。在一些实施方案中，Gro-βT未被共价修饰。在一些实施方案中，Gro-βT未被聚亚烷基二醇部分诸如聚乙二醇部分共价修饰。
在本发明上述方面中的任一个方面的一些实施方案中，CXCR2激动剂是Gro-β或其变体。在一些实施方案中，CXCR2激动剂可以是与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少约85％(例如，约85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或更多)序列同一性的肽。在一些实施方案中，CXCR2激动剂是与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有从约85％至100％序列同一性的肽，诸如与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有从约86％至约100％、从约87％至约99％、约88％至约98％、约89％至约97％、约90％至约96％或约91％至约95％序列同一性的肽。在一些实施方案中，CXCR2激动剂是具有仅通过一个或更多个保守氨基酸取代(例如，仅通过1至10个保守氨基酸取代、1至5个保守氨基酸取代或1至3个保守氨基酸取代，诸如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个或10个保守氨基酸取代)而不同于SEQ ID NO:1的氨基酸序列的氨基酸序列的肽。在一些实施方案中，CXCR2激动剂是Gro-β。在一些实施方案中，Gro-βT未被共价修饰。在一些实施方案中，Gro-β未被聚亚烷基二醇部分诸如聚乙二醇部分共价修饰。
在一些实施方案中，CXCR2激动剂(例如，Gro-β或Gro-βT，诸如未修饰的Gro-β或Gro-βT)以从约50μg/kg至约1mg/kg的剂量，诸如以下的剂量被施用至供体：约50μg/kg、55μg/kg、60μg/kg、65μg/kg、70μg/kg、75μg/kg、80μg/kg、85μg/kg、90μg/kg、95μg/kg、100μg/kg、105μg/kg、110μg/kg、115μg/kg、120μg/kg、125μg/kg、130μg/kg、135μg/kg、140μg/kg、145μg/kg、150μg/kg、155μg/kg、160μg/kg、165μg/kg、170μg/kg、175μg/kg、180μg/kg、185μg/kg、190μg/kg、195μg/kg、200μg/kg、205μg/kg、210μg/kg、215μg/kg、220μg/kg、225μg/kg、230μg/kg、235μg/kg、240μg/kg、245μg/kg、250μg/kg、255μg/kg、260μg/kg、265μg/kg、270μg/kg、275μg/kg、280μg/kg、285μg/kg、290μg/kg、295μg/kg、300μg/kg、305μg/kg、310μg/kg、315μg/kg、320μg/kg、325μg/kg、330μg/kg、335μg/kg、340μg/kg、345μg/kg、350μg/kg、355μg/kg、360μg/kg、365μg/kg、370μg/kg、375μg/kg、380μg/kg、400μg/kg、405μg/kg、410μg/kg、415μg/kg、425μg/kg、430μg/kg、435μg/kg、440μg/kg、445μg/kg、450μg/kg、210μg/kg、300μg/kg、400μg/kg、405μg/kg、410μg/kg、415μg/kg、420μg/kg、425μg/kg、430μg/kg、435μg/kg、440μg/kg、445μg/kg、450μg/kg、455μg/kg、460μg/kg、465μg/kg、470μg/kg、475μg/kg、480μg/kg、485μg/kg、490μg/kg、495μg/kg、500μg/kg、505μg/kg、510μg/kg、505μg/kg、515μg/kg、520μg/kg、525μg/kg、530μg/kg、545μg/kg、550μg/kg、555μg/kg、560μg/kg、565μg/kg、570μg/kg、575μg/kg、580μg/kg、585μg/kg、590μg/kg、595μg/kg、600μg/kg、605μg/kg、610μg/kg、615μg/kg、620μg/kg、625μg/kg、630μg/kg、635μg/kg、640μg/kg、645μg/kg、650μg/kg、655μg/kg、660μg/kg、665μg/kg、670μg/kg、675μg/kg、680μg/kg、685μg/kg、690μg/kg、695μg/kg、700μg/kg、705μg/kg、710μg/kg、715μg/kg、720μg/kg、725μg/kg、730μg/kg、735μg/kg、740μg/kg、745μg/kg、750μg/kg、755μg/kg、760μg/kg、765μg/kg、770μg/kg、775μg/kg、780μg/kg、785μg/kg、790μg/kg、795μg/kg、800μg/kg、805μg/kg、810μg/kg、815μg/kg、820μg/kg、825μg/kg、830μg/kg、835μg/kg、840μg/kg、845μg/kg、850μg/kg、855μg/kg、860μg/kg、865μg/kg、870μg/kg、875μg/kg、880μg/kg、885μg/kg、890μg/kg、895μg/kg、900μg/kg、905μg/kg、910μg/kg、915μg/kg、920μg/kg、925μg/kg、930μg/kg、935μg/kg、940μg/kg、945μg/kg、950μg/kg、955μg/kg、960μg/kg、965μg/kg、970μg/kg、975μg/kg、980μg/kg、985μg/kg、990μg/kg、995μg/kg或1,000μg/kg。在一些实施方案中，CXCR2激动剂(例如，Gro-β或Gro-βT，诸如未修饰的Gro-β或Gro-βT)以从约50μg/kg至约300μg/kg的剂量，诸如从约100μg/kg至约250μg/kg或从约125μg/kg至约225μg/kg的剂量被施用至供体。在一些实施方案中，CXCR2激动剂(例如，Gro-β或Gro-βT，诸如未修饰的Gro-β或Gro-βT)以约150μg/kg的剂量被施用至供体。
在另一方面，本发明的特征在于一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体(例如，人类供体)的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用以从约50μg/kg至约1mg/kg的剂量(例如，50μg/kg、55μg/kg、60μg/kg、65μg/kg、70μg/kg、75μg/kg、80μg/kg、85μg/kg、90μg/kg、95μg/kg、100μg/kg、105μg/kg、110μg/kg、115μg/kg、120μg/kg、125μg/kg、130μg/kg、135μg/kg、140μg/kg、145μg/kg、150μg/kg、155μg/kg、160μg/kg、165μg/kg、170μg/kg、175μg/kg、180μg/kg、185μg/kg、190μg/kg、195μg/kg、200μg/kg、205μg/kg、210μg/kg、215μg/kg、220μg/kg、225μg/kg、230μg/kg、235μg/kg、240μg/kg、245μg/kg、250μg/kg、255μg/kg、260μg/kg、265μg/kg、270μg/kg、275μg/kg、280μg/kg、285μg/kg、290μg/kg、295μg/kg、300μg/kg、305μg/kg、310μg/kg、315μg/kg、320μg/kg、325μg/kg、330μg/kg、335μg/kg、340μg/kg、345μg/kg、350μg/kg、355μg/kg、360μg/kg、365μg/kg、370μg/kg、375μg/kg、380μg/kg、400μg/kg、405μg/kg、410μg/kg、415μg/kg、425μg/kg、430μg/kg、435μg/kg、440μg/kg、445μg/kg、450μg/kg、210μg/kg、300μg/kg、400μg/kg、405μg/kg、410μg/kg、415μg/kg、420μg/kg、425μg/kg、430μg/kg、435μg/kg、440μg/kg、445μg/kg、450μg/kg、455μg/kg、460μg/kg、465μg/kg、470μg/kg、475μg/kg、480μg/kg、485μg/kg、490μg/kg、495μg/kg、500μg/kg、505μg/kg、510μg/kg、505μg/kg、515μg/kg、520μg/kg、525μg/kg、530μg/kg、545μg/kg、550μg/kg、555μg/kg、560μg/kg、565μg/kg、570μg/kg、575μg/kg、580μg/kg、585μg/kg、590μg/kg、595μg/kg、600μg/kg、605μg/kg、610μg/kg、615μg/kg、620μg/kg、625μg/kg、630μg/kg、635μg/kg、640μg/kg、645μg/kg、650μg/kg、655μg/kg、660μg/kg、665μg/kg、670μg/kg、675μg/kg、680μg/kg、685μg/kg、690μg/kg、695μg/kg、700μg/kg、705μg/kg、710μg/kg、715μg/kg、720μg/kg、725μg/kg、730μg/kg、735μg/kg、740μg/kg、745μg/kg、750μg/kg、755μg/kg、760μg/kg、765μg/kg、770μg/kg、775μg/kg、780μg/kg、785μg/kg、790μg/kg、795μg/kg、800μg/kg、805μg/kg、810μg/kg、815μg/kg、820μg/kg、825μg/kg、830μg/kg、835μg/kg、840μg/kg、845μg/kg、850μg/kg、855μg/kg、860μg/kg、865μg/kg、870μg/kg、875μg/kg、880μg/kg、885μg/kg、890μg/kg、895μg/kg、900μg/kg、905μg/kg、910μg/kg、915μg/kg、920μg/kg、925μg/kg、930μg/kg、935μg/kg、940μg/kg、945μg/kg、950μg/kg、955μg/kg、960μg/kg、965μg/kg、970μg/kg、975μg/kg、980μg/kg、985μg/kg、990μg/kg、995μg/kg或1,000μg/kg的剂量)的选自由Gro-β、Gro-βT及其变体组成的组的CXCR2激动剂。在一些实施方案中，该方法还包括向供体施用CXCR4拮抗剂。
在本发明上述方面中的任一个方面的一些实施方案中，CXCR2激动剂(例如，Gro-β或Gro-βT，诸如未修饰的Gro-β或Gro-βT)以从约50μg/kg至约300μg/kg的剂量，诸如约50μg/kg、55μg/kg、60μg/kg、65μg/kg、70μg/kg、75μg/kg、80μg/kg、85μg/kg、90μg/kg、95μg/kg、100μg/kg、105μg/kg、110μg/kg、115μg/kg、120μg/kg、125μg/kg、130μg/kg、135μg/kg、140μg/kg、145μg/kg、150μg/kg、155μg/kg、160μg/kg、165μg/kg、170μg/kg、175μg/kg、180μg/kg、185μg/kg、190μg/kg、195μg/kg、200μg/kg、205μg/kg、210μg/kg、215μg/kg、220μg/kg、225μg/kg、230μg/kg、235μg/kg、240μg/kg、245μg/kg、250μg/kg、255μg/kg、260μg/kg、265μg/kg、270μg/kg、275μg/kg、280μg/kg、285μg/kg、290μg/kg、295μg/kg或300μg/kg的剂量被施用至供体。
在本发明上述方面中的任一个方面的一些实施方案中，CXCR2激动剂(例如，Gro-β或Gro-βT，诸如未修饰的Gro-β或Gro-βT)以从约100μg/kg至约250μg/kg的剂量，诸如约100μg/kg、105μg/kg、110μg/kg、115μg/kg、120μg/kg、125μg/kg、130μg/kg、135μg/kg、140μg/kg、145μg/kg、150μg/kg、155μg/kg、160μg/kg、165μg/kg、170μg/kg、175μg/kg、180μg/kg、185μg/kg、190μg/kg、195μg/kg、200μg/kg、205μg/kg、210μg/kg、215μg/kg、220μg/kg、225μg/kg、230μg/kg、235μg/kg、240μg/kg、245μg/kg或250μg/kg的剂量被施用至供体。
在本发明上述方面中的任一个方面的一些实施方案中，CXCR2激动剂(例如，Gro-β或Gro-βT，诸如未修饰的Gro-β或Gro-βT)以约150μg/kg的剂量被施用至供体。例如，在一些实施方案中，CXCR2激动剂(例如，Gro-β或Gro-βT，诸如未修饰的Gro-β或Gro-βT)以从约50μg/kg/天至约1mg/kg/天的剂量，诸如约50μg/kg/天、55μg/kg/天、60μg/kg/天、65μg/kg/天、70μg/kg/天、75μg/kg/天、80μg/kg/天、85μg/kg/天、90μg/kg/天、95μg/kg/天、100μg/kg/天、105μg/kg/天、110μg/kg/天、115μg/kg/天、120μg/kg/天、125μg/kg/天、130μg/kg/天、135μg/kg/天、140μg/kg/天、145μg/kg/天、150μg/kg/天、155μg/kg/天、160μg/kg/天、165μg/kg/天、170μg/kg/天、175μg/kg/天、180μg/kg/天、185μg/kg/天、190μg/kg/天、195μg/kg/天、200μg/kg/天、205μg/kg/天、210μg/kg/天、215μg/kg/天、220μg/kg/天、225μg/kg/天、230μg/kg/天、235μg/kg/天、240μg/kg/天、245μg/kg/天、250μg/kg/天、255μg/kg/天、260μg/kg/天、265μg/kg/天、270μg/kg/天、275μg/kg/天、280μg/kg/天、285μg/kg/天、290μg/kg/天、295μg/kg/天、300μg/kg/天、305μg/kg/天、310μg/kg/天、315μg/kg/天、320μg/kg/天、325μg/kg/天、330μg/kg/天、335μg/kg/天、340μg/kg/天、345μg/kg/天、350μg/kg/天、355μg/kg/天、360μg/kg/天、365μg/kg/天、370μg/kg/天、375μg/kg/天、380μg/kg/天、400μg/kg/天、405μg/kg/天、410μg/kg/天、415μg/kg/天、425μg/kg/天、430μg/kg/天、435μg/kg/天、440μg/kg/天、445μg/kg/天、450μg/kg/天、210μg/kg/天、300μg/kg/天、400μg/kg/天、405μg/kg/天、410μg/kg/天、415μg/kg/天、420μg/kg/天、425μg/kg/天、430μg/kg/天、435μg/kg/天、440μg/kg/天、445μg/kg/天、450μg/kg/天、455μg/kg/天、460μg/kg/天、465μg/kg/天、470μg/kg/天、475μg/kg/天、480μg/kg/天、485μg/kg/天、490μg/kg/天、495μg/kg/天、500μg/kg/天、505μg/kg/天、510μg/kg/天、505μg/kg/天、515μg/kg/天、520μg/kg/天、525μg/kg/天、530μg/kg/天、545μg/kg/天、550μg/kg/天、555μg/kg/天、560μg/kg/天、565μg/kg/天、570μg/kg/天、575μg/kg/天、580μg/kg/天、585μg/kg/天、590μg/kg/天、595μg/kg/天、600μg/kg/天、605μg/kg/天、610μg/kg/天、615μg/kg/天、620μg/kg/天、625μg/kg/天、630μg/kg/天、635μg/kg/天、640μg/kg/天、645μg/kg/天、650μg/kg/天、655μg/kg/天、660μg/kg/天、665μg/kg/天、670μg/kg/天、675μg/kg/天、680μg/kg/天、685μg/kg/天、690μg/kg/天、695μg/kg/天、700μg/kg/天、705μg/kg/天、710μg/kg/天、715μg/kg/天、720μg/kg/天、725μg/kg/天、730μg/kg/天、735μg/kg/天、740μg/kg/天、745μg/kg/天、750μg/kg/天、755μg/kg/天、760μg/kg/天、765μg/kg/天、770μg/kg/天、775μg/kg/天、780μg/kg/天、785μg/kg/天、790μg/kg/天、795μg/kg/天、800μg/kg/天、805μg/kg/天、810μg/kg/天、815μg/kg/天、820μg/kg/天、825μg/kg/天、830μg/kg/天、835μg/kg/天、840μg/kg/天、845μg/kg/天、850μg/kg/天、855μg/kg/天、860μg/kg/天、865μg/kg/天、870μg/kg/天、875μg/kg/天、880μg/kg/天、885μg/kg/天、890μg/kg/天、895μg/kg/天、900μg/kg/天、905μg/kg/天、910μg/kg/天、915μg/kg/天、920μg/kg/天、925μg/kg/天、930μg/kg/天、935μg/kg/天、940μg/kg/天、945μg/kg/天、950μg/kg/天、955μg/kg/天、960μg/kg/天、965μg/kg/天、970μg/kg/天、975μg/kg/天、980μg/kg/天、985μg/kg/天、990μg/kg/天、995μg/kg/天或1,000μg/kg/天的剂量被施用至供体。在一些实施方案中，CXCR2激动剂(例如，Gro-β或Gro-βT，诸如未修饰的Gro-β或Gro-βT)以从约50μg/kg/天至约300μg/kg/天的剂量，诸如从约100μg/kg/天至约250μg/kg/天或从约125μg/kg/天至约225μg/kg/天或从约125μg/kg/天至约175μg/kg/天的剂量被施用至供体。在一些实施方案中，CXCR2激动剂(例如，Gro-β或Gro-βT，诸如未修饰的Gro-β或Gro-βT)以约150μg/kg/天的剂量被施用至供体。在一些实施方案中，CXCR2激动剂可以作为单剂量被施用。在其他实施方案中，CXCR2激动剂可以作为两个或更多个剂量被施用。
在一些实施方案中，人类等效剂量(HED)可以使用转换因子从动物剂量数据导出。例如，Nair和Jacob,J.Basic Clin.Pharma.(2016)7:27-31公开了物种间剂量外推的方法。例如，在一个非限制性实例中，HED可以通过将恒河猴(rhesus monkey)剂量乘以约0.324而从恒河猴剂量导出。
在本发明上述方面中的任一个方面的一些实施方案中，CXCR2激动剂(例如，Gro-β或Gro-βT，诸如未修饰的Gro-β或Gro-βT)被静脉内施用至供体。
在本发明上述方面中的任一个方面的一些实施方案中，CXCR4拮抗剂是由式(I)表示的化合物
Z–接头–Z’ (I)
或其药学上可接受的盐，其中Z是：
(i)含有9至32个环成员的环状聚胺，其中2至8个环成员是彼此被2个或更多个碳原子分开的氮原子；或者
(ii)由式(IA)表示的胺
Figure BDA0002621915340000611
其中A包括含有至少一个氮原子的单环或双环稠环体系，并且B是H或具有1至20个原子的取代基；
并且其中Z’是：
(i)含有9至32个环成员的环状聚胺，其中2至8个环成员是彼此被2个或更多个碳原子分开的氮原子；
(ii)由式(IB)表示的胺
Figure BDA0002621915340000612
其中A’包括含有至少一个氮原子的单环或双环稠环体系，并且B’是H或具有1至20个原子的取代基；或者
(iii)由式(IC)表示的取代基
–N(R)–(CR2)n–X (IC)
其中每个R独立地是H或C1-C6烷基，n是1或2，并且X是芳基基团或杂芳基基团或硫醇；
其中接头是键、任选地被取代的C1-C6亚烷基(alkylene)、任选地被取代的C1-C6杂亚烷基、任选地被取代的C2-C6亚烯基(alkenylene)、任选地被取代的C2-C6杂亚烯基、任选地被取代的C2-C6亚炔基(alkynylene)、任选地被取代的C2-C6杂亚炔基、任选地被取代的环亚烷基、任选地被取代的杂环亚烷基、任选地被取代的亚芳基或任选地被取代的杂亚芳基。
在一些实施方案中，Z和Z’各自独立地是含有9至32个环成员的环状聚胺，其中2至8个环成员是彼此被2个或更多个碳原子分开的氮原子。Z和Z’可以是相同的取代基。在一些实施方案中，Z和/或Z’是含有10至24个环成员的环状聚胺，诸如含有14个环成员的环状聚胺。在一些实施方案中，Z包括4个氮原子。Z和/或Z’可以是例如，1,4,8,11-四氮杂环十四烷。
在一些实施方案中，接头由式(ID)表示
Figure BDA0002621915340000621
其中环D是任选地被取代的芳基基团、任选地被取代的杂芳基基团、任选地被取代的环烷基基团或任选地被取代的杂环烷基基团；并且
X和Y各自独立地是任选地被取代的C1-C6亚烷基、任选地被取代的C1-C6杂亚烷基、任选地被取代的C2-C6亚烯基、任选地被取代的C2-C6杂亚烯基、任选地被取代的C2-C6亚炔基或任选地被取代的C2-C6杂亚炔基。
在一些实施方案中，接头由式(IE)表示
Figure BDA0002621915340000622
其中环D是任选地被取代的芳基基团、任选地被取代的杂芳基基团、任选地被取代的环烷基基团或任选地被取代的杂环烷基基团；并且
X和Y各自独立地是任选地被取代的C1-C6亚烷基、任选地被取代的C1-C6杂亚烷基、任选地被取代的C2-C6亚烯基、任选地被取代的C2-C6杂亚烯基、任选地被取代的C2-C6亚炔基或任选地被取代的C2-C6杂亚炔基。
在一些实施方案中，X和Y各自独立地是任选地被取代的C1-C6亚烷基。在一些实施方案中，X和Y是相同的取代基，诸如相同的亚烷基取代基(例如，亚甲基取代基、亚乙基取代基、亚丙基取代基或亚丁基取代基)。
在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂是普乐沙福(plerixafor)或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂(例如，普乐沙福或其药学上可接受的盐)被皮下施用至供体。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂(例如，普乐沙福或其药学上可接受的盐)以从约50μg/kg至约500μg/kg的剂量，诸如约50μg/kg、55μg/kg、60μg/kg、65μg/kg、70μg/kg、75μg/kg、80μg/kg、85μg/kg、90μg/kg、95μg/kg、100μg/kg、105μg/kg、110μg/kg、115μg/kg、120μg/kg、125μg/kg、130μg/kg、135μg/kg、140μg/kg、145μg/kg、150μg/kg、155μg/kg、160μg/kg、165μg/kg、170μg/kg、175μg/kg、180μg/kg、185μg/kg、190μg/kg、195μg/kg、200μg/kg、205μg/kg、210μg/kg、215μg/kg、220μg/kg、225μg/kg、230μg/kg、235μg/kg、240μg/kg、245μg/kg、250μg/kg、255μg/kg、260μg/kg、265μg/kg、270μg/kg、275μg/kg、280μg/kg、285μg/kg、290μg/kg、295μg/kg、300μg/kg、305μg/kg、310μg/kg、315μg/kg、320μg/kg、325μg/kg、330μg/kg、335μg/kg、340μg/kg、345μg/kg、350μg/kg、355μg/kg、360μg/kg、365μg/kg、370μg/kg、375μg/kg、380μg/kg、385μg/kg、390μg/kg、395μg/kg、400μg/kg、405μg/kg、410μg/kg、415μg/kg、420μg/kg、425μg/kg、430μg/kg、435μg/kg、440μg/kg、445μg/kg、450μg/kg、455μg/kg、460μg/kg、465μg/kg、470μg/kg、475μg/kg、480μg/kg、485μg/kg、490μg/kg、495μg/kg或500μg/kg的剂量被施用至供体。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂(例如，普乐沙福或其药学上可接受的盐)以从约200μg/kg至约300μg/kg的剂量，诸如约240μg/kg的剂量被施用至供体。
例如，在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂(例如，普乐沙福或其药学上可接受的盐)以从约50μg/kg/天至约500μg/kg/天的剂量，诸如约50μg/kg/天、55μg/kg/天、60μg/kg/天、65μg/kg/天、70μg/kg/天、75μg/kg/天、80μg/kg/天、85μg/kg/天、90μg/kg/天、95μg/kg/天、100μg/kg/天、105μg/kg/天、110μg/kg/天、115μg/kg/天、120μg/kg/天、125μg/kg/天、130μg/kg/天、135μg/kg/天、140μg/kg/天、145μg/kg/天、150μg/kg/天、155μg/kg/天、160μg/kg/天、165μg/kg/天、170μg/kg/天、175μg/kg/天、180μg/kg/天、185μg/kg/天、190μg/kg/天、195μg/kg/天、200μg/kg/天、205μg/kg/天、210μg/kg/天、215μg/kg/天、220μg/kg/天、225μg/kg/天、230μg/kg/天、235μg/kg/天、240μg/kg/天、245μg/kg/天、250μg/kg/天、255μg/kg/天、260μg/kg/天、265μg/kg/天、270μg/kg/天、275μg/kg/天、280μg/kg/天、285μg/kg/天、290μg/kg/天、295μg/kg/天、300μg/kg/天、305μg/kg/天、310μg/kg/天、315μg/kg/天、320μg/kg/天、325μg/kg/天、330μg/kg/天、335μg/kg/天、340μg/kg/天、345μg/kg/天、350μg/kg/天、355μg/kg/天、360μg/kg/天、365μg/kg/天、370μg/kg/天、375μg/kg/天、380μg/kg/天、385μg/kg/天、390μg/kg/天、395μg/kg/天、400μg/kg/天、405μg/kg/天、410μg/kg/天、415μg/kg/天、420μg/kg/天、425μg/kg/天、430μg/kg/天、435μg/kg/天、440μg/kg/天、445μg/kg/天、450μg/kg/天、455μg/kg/天、460μg/kg/天、465μg/kg/天、470μg/kg/天、475μg/kg/天、480μg/kg/天、485μg/kg/天、490μg/kg/天、495μg/kg/天或500μg/kg/天的剂量被施用至供体。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂(例如，普乐沙福或其药学上可接受的盐)以从约200μg/kg/天至约300μg/kg/天的剂量，诸如约240μg/kg/天的剂量被施用至供体。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂可以作为单剂量被施用。在其他实施方案中，CXCR4拮抗剂可以作为两个或更多个剂量被施用。
在本发明上述方面中的任一个方面的一些实施方案中，CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂被并行施用至供体。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂在CXCR2激动剂的施用之前被施用至供体。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂可以在CXCR2激动剂的施用之前约1分钟至约180分钟，诸如约15分钟至约180分钟、约30分钟至约180分钟、约40分钟至约160分钟、约50分钟至约150分钟、约60分钟至约140分钟、约70分钟至约130分钟、约60分钟至约120分钟、约70分钟至约110分钟或约80分钟至约100分钟(例如，在CXCR2激动剂的施用之前约30分钟、约35分钟、约40分钟、约45分钟、约50分钟、约55分钟、约60分钟、约65分钟、约70分钟、约75分钟、约80分钟、约85分钟、约90分钟、约95分钟、约100分钟、约105分钟、约110分钟、约115分钟、约120分钟、约125分钟、约130分钟、约135分钟、约140分钟、约145分钟、约150分钟、约155分钟、约160分钟、约165分钟、约170分钟、约175分钟或约180分钟)被施用至供体。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂在CXCR2激动剂的施用之前约30分钟至约60分钟(例如，在CXCR2激动剂的施用之前约30分钟、约35分钟、约40分钟、约45分钟、约50分钟、约55分钟或约60分钟)被施用至供体。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂可以在CXCR2激动剂的施用之前约45分钟被施用至供体。
在另外的方面，本发明的特征在于一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体(例如，人类供体)分离的造血干细胞或其后代的群体，其中群体中CD34+细胞与白细胞的比率为从约0.0008至约0.0021。在一些实施方案中，CD34+细胞与白细胞的比率可以为约0.00080、0.00081、0.00082、0.00083、0.00084、0.00085、0.00086、0.00087、0.00088、0.00089、0.00090、0.00091、0.00092、0.00093、0.00094、0.00095、0.00096、0.00097、0.00098、0.00099、0.00100、0.00101、0.00102、0.00103、0.00104、0.00105、0.00106、0.00107、0.00108、0.00109、0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119、0.00120、0.00121、0.00122、0.00123、0.00124、0.00125、0.00126、0.00127、0.00128、0.00129、0.00130、0.00131、0.00132、0.00133、0.00134、0.00135、0.00136、0.00137、0.00138、0.00139、0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159、0.00160、0.00161、0.00162、0.00163、0.00164、0.00165、0.00166、0.00167、0.00168、0.00169、0.00170、0.00171、0.00172、0.00173、0.00174、0.00175、0.00176、0.00178、0.00179、0.00180、0.00181、0.00182、0.00183、0.00184、0.00185、0.00186、0.00187、0.00188、0.00189、0.00190、0.00191、0.00192、0.00193、0.00194、0.00195、0.00196、0.00197、0.00198、0.00199、0.00200、0.00201、0.00202、0.00203、0.00204、0.00205、0.00206、0.00207、0.00208、0.00209、0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224或0.00225。在一些实施方案中，CD34+细胞与白细胞的比率为从约0.0010至约0.0018，例如CD34+细胞与白细胞的比率为约0.00100、0.00101、0.00102、0.00103、0.00104、0.00105、0.00106、0.00107、0.00108、0.00109、0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119、0.00120、0.00121、0.00122、0.00123、0.00124、0.00125、0.00126、0.00127、0.00128、0.00129、0.00130、0.00131、0.00132、0.00133、0.00134、0.00135、0.00136、0.00137、0.00138、0.00139、0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159、0.00160、0.00161、0.00162、0.00163、0.00164、0.00165、0.00166、0.00167、0.00168、0.00169、0.00170、0.00171、0.00172、0.00173、0.00174、0.00175、0.00176、0.00178、0.00179或0.00180。在一些实施方案中，CD34+细胞与白细胞的比率为约0.0014。
在另外的方面，本发明的特征在于一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体(例如，人类供体)分离的造血干细胞或其后代的群体，其中群体中CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.0018至约0.0058。在一些实施方案中，CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率可以为约0.00180、0.00181、0.00182、0.00183、0.00184、0.00185、0.00186、0.00187、0.00188、0.00189、0.00190、0.00191、0.00192、0.00193、0.00194、0.00195、0.00196、0.00197、0.00198、0.00199、0.00200、0.00201、0.00202、0.00203、0.00204、0.00205、0.00206、0.00207、0.00208、0.00209、0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224、0.00225、0.00226、0.00227、0.00228、0.00229、0.00230、0.00231、0.00232、0.00233、0.00234、0.00235、0.00236、0.00237、0.00238、0.00239、0.00240、0.00241、0.00242、0.00243、0.00244、0.00245、0.00246、0.00247、0.00248、0.00249、0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00277、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349、0.00350、0.00351、0.00352、0.00353、0.00354、0.00355、0.00356、0.00357、0.00358、0.00359、0.00360、0.00361、0.00362、0.00363、0.00364、0.00365、0.00366、0.00367、0.00368、0.00369、0.00370、0.00371、0.00372、0.00373、0.00374、0.00375、0.00376、0.00377、0.00378、0.00379、0.00380、0.00381、0.00382、0.00383、0.00384、0.00385、0.00386、0.00387、0.00388、0.00389、0.00390、0.00391、0.00392、0.00393、0.00394、0.00395、0.00396、0.00397、0.00398、0.00399、0.00400、0.00401、0.00402、0.00403、0.00404、0.00405、0.00406、0.00407、0.00408、0.00409、0.00410、0.00411、0.00412、0.00413、0.00414、0.00415、0.00416、0.00417、0.00418、0.00419、0.00420、0.00421、0.00422、0.00423、0.00424、0.00425、0.00426、0.00427、0.00428、0.00429、0.00430、0.00431、0.00432、0.00433、0.00434、0.00435、0.00436、0.00437、0.00438、0.00439、0.00440、0.00441、0.00442、0.00443、0.00444、0.00445、0.00446、0.00447、0.00448、0.00449、0.00450、0.00451、0.00452、0.00453、0.00454、0.00455、0.00456、0.00457、0.00458、0.00459、0.00460、0.00461、0.00462、0.00463、0.00464、0.00465、0.00466、0.00467、0.00468、0.00469、0.00470、0.00471、0.00472、0.00473、0.00474、0.00475、0.00476、0.00477、0.00478、0.00479、0.00480、0.00481、0.00482、0.00483、0.00484、0.00485、0.00486、0.00487、0.00488、0.00489、0.00490、0.00491、0.00492、0.00493、0.00494、0.00495、0.00496、0.00497、0.00498、0.00499、0.00500、0.00501、0.00502、0.00503、0.00504、0.00505、0.00506、0.00507、0.00508、0.00509、0.00510、0.00511、0.00512、0.00513、0.00514、0.00515、0.00516、0.00517、0.00518、0.00519、0.00520、0.00521、0.00522、0.00523、0.00524、0.00525、0.00526、0.00527、0.00528、0.00529、0.00530、0.00531、0.00532、0.00533、0.00534、0.00535、0.00536、0.00537、0.00538、0.00539、0.00540、0.00541、0.00542、0.00543、0.00544、0.00545、0.00546、0.00547、0.00548、0.00549、0.00550、0.00551、0.00552、0.00553、0.00554、0.00555、0.00556、0.00557、0.00558、0.00559、0.00560、0.00561、0.00562、0.00563、0.00564、0.00565、0.00566、0.00567、0.00568、0.00569、0.00570、0.00571、0.00572、0.00573、0.00574、0.00575、0.00576、0.00577、0.00578、0.00579或0.00580。在一些实施方案中，CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.0026至约0.0046，例如CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率为约0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00277、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349、0.00350、0.00351、0.00352、0.00353、0.00354、0.00355、0.00356、0.00357、0.00358、0.00359、0.00360、0.00361、0.00362、0.00363、0.00364、0.00365、0.00366、0.00367、0.00368、0.00369、0.00370、0.00371、0.00372、0.00373、0.00374、0.00375、0.00376、0.00377、0.00378、0.00379、0.00380、0.00381、0.00382、0.00383、0.00384、0.00385、0.00386、0.00387、0.00388、0.00389、0.00390、0.00391、0.00392、0.00393、0.00394、0.00395、0.00396、0.00397、0.00398、0.00399、0.00400、0.00401、0.00402、0.00403、0.00404、0.00405、0.00406、0.00407、0.00408、0.00409、0.00410、0.00411、0.00412、0.00413、0.00414、0.00415、0.00416、0.00417、0.00418、0.00419、0.00420、0.00421、0.00422、0.00423、0.00424、0.00425、0.00426、0.00427、0.00428、0.00429、0.00430、0.00431、0.00432、0.00433、0.00434、0.00435、0.00436、0.00437、0.00438、0.00439、0.00440、0.00441、0.00442、0.00443、0.00444、0.00445、0.00446、0.00447、0.00448、0.00449、0.00450、0.00451、0.00452、0.00453、0.00454、0.00455、0.00456、0.00457、0.00458、0.00459或0.00460。在一些实施方案中，CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率为约0.0036。
在另一方面，本发明的特征在于一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体(例如，人类供体)分离的造血干细胞或其后代的群体，其中群体中CD34+细胞与淋巴细胞的比率为从约0.0021至约0.0094。在一些实施方案中，CD34+细胞与淋巴细胞的比率可以为约0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224、0.00225、0.00226、0.00227、0.00228、0.00229、0.00230、0.00231、0.00232、0.00233、0.00234、0.00235、0.00236、0.00237、0.00238、0.00239、0.00240、0.00241、0.00242、0.00243、0.00244、0.00245、0.00246、0.00247、0.00248、0.00249、0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00277、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349、0.00350、0.00351、0.00352、0.00353、0.00354、0.00355、0.00356、0.00357、0.00358、0.00359、0.00360、0.00361、0.00362、0.00363、0.00364、0.00365、0.00366、0.00367、0.00368、0.00369、0.00370、0.00371、0.00372、0.00373、0.00374、0.00375、0.00376、0.00377、0.00378、0.00379、0.00380、0.00381、0.00382、0.00383、0.00384、0.00385、0.00386、0.00387、0.00388、0.00389、0.00390、0.00391、0.00392、0.00393、0.00394、0.00395、0.00396、0.00397、0.00398、0.00399、0.00400、0.00401、0.00402、0.00403、0.00404、0.00405、0.00406、0.00407、0.00408、0.00409、0.00410、0.00411、0.00412、0.00413、0.00414、0.00415、0.00416、0.00417、0.00418、0.00419、0.00420、0.00421、0.00422、0.00423、0.00424、0.00425、0.00426、0.00427、0.00428、0.00429、0.00430、0.00431、0.00432、0.00433、0.00434、0.00435、0.00436、0.00437、0.00438、0.00439、0.00440、0.00441、0.00442、0.00443、0.00444、0.00445、0.00446、0.00447、0.00448、0.00449、0.00450、0.00451、0.00452、0.00453、0.00454、0.00455、0.00456、0.00457、0.00458、0.00459、0.00460、0.00461、0.00462、0.00463、0.00464、0.00465、0.00466、0.00467、0.00468、0.00469、0.00470、0.00471、0.00472、0.00473、0.00474、0.00475、0.00476、0.00477、0.00478、0.00479、0.00480、0.00481、0.00482、0.00483、0.00484、0.00485、0.00486、0.00487、0.00488、0.00489、0.00490、0.00491、0.00492、0.00493、0.00494、0.00495、0.00496、0.00497、0.00498、0.00499、0.00500、0.00501、0.00502、0.00503、0.00504、0.00505、0.00506、0.00507、0.00508、0.00509、0.00510、0.00511、0.00512、0.00513、0.00514、0.00515、0.00516、0.00517、0.00518、0.00519、0.00520、0.00521、0.00522、0.00523、0.00524、0.00525、0.00526、0.00527、0.00528、0.00529、0.00530、0.00531、0.00532、0.00533、0.00534、0.00535、0.00536、0.00537、0.00538、0.00539、0.00540、0.00541、0.00542、0.00543、0.00544、0.00545、0.00546、0.00547、0.00548、0.00549、0.00550、0.00551、0.00552、0.00553、0.00554、0.00555、0.00556、0.00557、0.00558、0.00559、0.00560、0.00561、0.00562、0.00563、0.00564、0.00565、0.00566、0.00567、0.00568、0.00569、0.00570、0.00571、0.00572、0.00573、0.00574、0.00575、0.00576、0.00577、0.00578、0.00579、0.00580、0.00581、0.00582、0.00583、0.00584、0.00585、0.00586、0.00587、0.00588、0.00589、0.00590、0.00591、0.00592、0.00593、0.00594、0.00595、0.00596、0.00597、0.00598、0.00599、0.00600、0.00601、0.00602、0.00603、0.00604、0.00605、0.00606、0.00607、0.00608、0.00609、0.00610、0.00611、0.00612、0.00613、0.00614、0.00615、0.00616、0.00617、0.00618、0.00619、0.00620、0.00621、0.00622、0.00623、0.00624、0.00625、0.00626、0.00627、0.00628、0.00629、0.00630、0.00631、0.00632、0.00633、0.00634、0.00635、0.00636、0.00637、0.00638、0.00639、0.00640、0.00641、0.00642、0.00643、0.00644、0.00645、0.00646、0.00647、0.00648、0.00649、0.00650、0.00651、0.00652、0.00653、0.00654、0.00655、0.00656、0.00657、0.00658、0.00659、0.00660、0.00661、0.00662、0.00663、0.00664、0.00665、0.00666、0.00667、0.00668、0.00669、0.00670、0.00671、0.00672、0.00673、0.00674、0.00675、0.00676、0.00677、0.00678、0.00679、0.00680、0.00681、0.00682、0.00683、0.00684、0.00685、0.00686、0.00687、0.00688、0.00689、0.00690、0.00691、0.00692、0.00693、0.00694、0.00695、0.00696、0.00697、0.00698、0.00699、0.00700、0.00701、0.00702、0.00703、0.00704、0.00705、0.00706、0.00707、0.00708、0.00709、0.00710、0.00711、0.00712、0.00713、0.00714、0.00715、0.00716、0.00717、0.00718、0.00719、0.00720、0.00721、0.00722、0.00723、0.00724、0.00725、0.00726、0.00727、0.00728、0.00729、0.00730、0.00731、0.00732、0.00733、0.00734、0.00735、0.00736、0.00737、0.00738、0.00739、0.00740、0.00741、0.00742、0.00743、0.00744、0.00745、0.00746、0.00747、0.00748、0.00749、0.00750、0.00751、0.00752、0.00753、0.00754、0.00755、0.00756、0.00757、0.00758、0.00759、0.00760、0.00761、0.00762、0.00763、0.00764、0.00765、0.00766、0.00767、0.00768、0.00769、0.00770、0.00771、0.00772、0.00773、0.00774、0.00775、0.00776、0.00777、0.00778、0.00779、0.00780、0.00781、0.00782、0.00783、0.00784、0.00785、0.00786、0.00787、0.00788、0.00789、0.00790、0.00791、0.00792、0.00793、0.00794、0.00795、0.00796、0.00797、0.00798、0.00799、0.00800、0.00801、0.00802、0.00803、0.00804、0.00805、0.00806、0.00807、0.00808、0.00809、0.00810、0.00811、0.00812、0.00813、0.00814、0.00815、0.00816、0.00817、0.00818、0.00819、0.00820、0.00821、0.00822、0.00823、0.00824、0.00825、0.00826、0.00827、0.00828、0.00829、0.00830、0.00831、0.00832、0.00833、0.00834、0.00835、0.00836、0.00837、0.00838、0.00839、0.00840、0.00841、0.00842、0.00843、0.00844、0.00845、0.00846、0.00847、0.00848、0.00849、0.00850、0.00851、0.00852、0.00853、0.00854、0.00855、0.00856、0.00857、0.00858、0.00859、0.00860、0.00861、0.00862、0.00863、0.00864、0.00865、0.00866、0.00867、0.00868、0.00869、0.00870、0.00871、0.00872、0.00873、0.00874、0.00875、0.00876、0.00877、0.00878、0.00879、0.00880、0.00881、0.00882、0.00883、0.00884、0.00885、0.00886、0.00887、0.00888、0.00889、0.00890、0.00891、0.00892、0.00893、0.00894、0.00895、0.00896、0.00897、0.00898、0.00899、0.00900、0.00901、0.00902、0.00903、0.00904、0.00905、0.00906、0.00907、0.00908、0.00909、0.00910、0.00911、0.00912、0.00913、0.00914、0.00915、0.00916、0.00917、0.00918、0.00919、0.00920、0.00921、0.00922、0.00923、0.00924、0.00925、0.00926、0.00927、0.00928、0.00929、0.00930、0.00931、0.00932、0.00933、0.00934、0.00935、0.00936、0.00937、0.00938、0.00939或0.00940。在一些实施方案中，CD34+细胞与淋巴细胞的比率为从约0.0025至约0.0035，例如CD34+细胞与淋巴细胞的比率为约0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00277、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349或0.00350。在一些实施方案中，CD34+细胞与淋巴细胞的比率为约0.0031。
在另外的方面，本发明的特征在于一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体(例如，人类供体)分离的造血干细胞或其后代的群体，其中群体中CD34+细胞与单核细胞的比率为从约0.0071至约0.0174。在一些实施方案中，CD34+细胞与单核细胞的比率可以为约0.00710、0.00711、0.00712、0.00713、0.00714、0.00715、0.00716、0.00717、0.00718、0.00719、0.00720、0.00721、0.00722、0.00723、0.00724、0.00725、0.00726、0.00727、0.00728、0.00729、0.00730、0.00731、0.00732、0.00733、0.00734、0.00735、0.00736、0.00737、0.00738、0.00739、0.00740、0.00741、0.00742、0.00743、0.00744、0.00745、0.00746、0.00747、0.00748、0.00749、0.00750、0.00751、0.00752、0.00753、0.00754、0.00755、0.00756、0.00757、0.00758、0.00759、0.00760、0.00761、0.00762、0.00763、0.00764、0.00765、0.00766、0.00767、0.00768、0.00769、0.00770、0.00771、0.00772、0.00773、0.00774、0.00775、0.00776、0.00777、0.00778、0.00779、0.00780、0.00781、0.00782、0.00783、0.00784、0.00785、0.00786、0.00787、0.00788、0.00789、0.00790、0.00791、0.00792、0.00793、0.00794、0.00795、0.00796、0.00797、0.00798、0.00799、0.00800、0.00801、0.00802、0.00803、0.00804、0.00805、0.00806、0.00807、0.00808、0.00809、0.00810、0.00811、0.00812、0.00813、0.00814、0.00815、0.00816、0.00817、0.00818、0.00819、0.00820、0.00821、0.00822、0.00823、0.00824、0.00825、0.00826、0.00827、0.00828、0.00829、0.00830、0.00831、0.00832、0.00833、0.00834、0.00835、0.00836、0.00837、0.00838、0.00839、0.00840、0.00841、0.00842、0.00843、0.00844、0.00845、0.00846、0.00847、0.00848、0.00849、0.00850、0.00851、0.00852、0.00853、0.00854、0.00855、0.00856、0.00857、0.00858、0.00859、0.00860、0.00861、0.00862、0.00863、0.00864、0.00865、0.00866、0.00867、0.00868、0.00869、0.00870、0.00871、0.00872、0.00873、0.00874、0.00875、0.00876、0.00877、0.00878、0.00879、0.00880、0.00881、0.00882、0.00883、0.00884、0.00885、0.00886、0.00887、0.00888、0.00889、0.00890、0.00891、0.00892、0.00893、0.00894、0.00895、0.00896、0.00897、0.00898、0.00899、0.00900、0.00901、0.00902、0.00903、0.00904、0.00905、0.00906、0.00907、0.00908、0.00909、0.00910、0.00911、0.00912、0.00913、0.00914、0.00915、0.00916、0.00917、0.00918、0.00919、0.00920、0.00921、0.00922、0.00923、0.00924、0.00925、0.00926、0.00927、0.00928、0.00929、0.00930、0.00931、0.00932、0.00933、0.00934、0.00935、0.00936、0.00937、0.00938、0.00939、0.00940、0.00941、0.00942、0.00943、0.00944、0.00945、0.00946、0.00947、0.00948、0.00949、0.00950、0.00951、0.00952、0.00953、0.00954、0.00955、0.00956、0.00957、0.00958、0.00959、0.00960、0.00961、0.00962、0.00963、0.00964、0.00965、0.00966、0.00967、0.00968、0.00969、0.00970、0.00971、0.00972、0.00973、0.00974、0.00975、0.00976、0.00977、0.00978、0.00979、0.00980、0.00981、0.00982、0.00983、0.00984、0.00985、0.00986、0.00987、0.00988、0.00989、0.00990、0.00991、0.00992、0.00993、0.00994、0.00995、0.00996、0.00997、0.00998、0.00999、0.0100、0.0101、0.0103、0.0104、0.0105、0.0106、0.0107、0.0108、0.0109、0.0110、0.0111、0.0112、0.0113、0.0114、0.0115、0.0116、0.0117、0.0118、0.0119、0.0120、0.0121、0.0122、0.0123、0.0124、0.0125、0.0126、0.0127、0.0128、0.0129、0.0130、0.0131、0.0132、0.0133、0.0134、0.0135、0.0136、0.0137、0.0138、0.0139、0.0140、0.0141、0.0142、0.0143、0.0144、0.0145、0.0146、0.0147、0.0148、0.0149、0.0150、0.0151、0.0152、0.0153、0.0154、0.0155、0.0156、0.0157、0.0158、0.0159、0.0160、0.0161、0.0162、0.0163、0.0164、0.0165、0.0166、0.0167、0.0168、0.0169、0.0170、0.0171、0.0172、0.0173或0.0174。在一些实施方案中，CD34+细胞与单核细胞的比率为从约0.0100至约0.0140，例如CD34+细胞与单核细胞的比率为约0.0100、0.0101、0.0103、0.0104、0.0105、0.0106、0.0107、0.0108、0.0109、0.0110、0.0111、0.0112、0.0113、0.0114、0.0115、0.0116、0.0117、0.0118、0.0119、0.0120、0.0121、0.0122、0.0123、0.0124、0.0125、0.0126、0.0127、0.0128、0.0129、0.0130、0.0131、0.0132、0.0133、0.0134、0.0135、0.0136、0.0137、0.0138、0.0139或0.0140。在一些实施方案中，CD34+细胞与单核细胞的比率为约0.0118。
在另外的方面，本发明的特征在于一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体(例如，人类供体)分离的造血干细胞或其后代的群体，其中群体中CD34+细胞的频率为从约0.051％至约0.140％。在一些实施方案中，细胞的群体可以具有约0.051％、0.052％、0.053％、0.054％、0.055％、0.056％、0.057％、0.058％、0.059％、0.060％、0.061％、0.062％、0.063％、0.064％、0.065％、0.066％、0.067％、0.068％、0.069％、0.070％、0.071％、0.072％、0.073％、0.074％、0.075％、0.076％、0.077％、0.078％、0.079％、0.080％、0.081％、0.082％、0.083％、0.084％、0.085％、0.086％、0.087％、0.088％、0.089％、0.090％、0.091％、0.092％、0.093％、0.094％、0.095％、0.096％、0.097％、0.098％、0.099％、0.100％、0.101％、0.102％、0.103％、0.104％、0.105％、0.106％、0.107％、0.108％、0.109％、0.110％、0.111％、0.112％、0.113％、0.114％、0.115％、0.116％、0.117％、0.118％、0.119％、0.120％、0.121％、0.122％、0.123％、0.124％、0.125％、0.126％、0.127％、0.128％、0.129％、0.130％、0.131％、0.132％、0.133％、0.134％、0.135％、0.136％、0.137％、0.138％、0.139％或0.140％的CD34+细胞的频率。在一些实施方案中，细胞的群体具有从约0.080％至约0.120％的CD34+细胞的频率，诸如约0.080％、0.081％、0.082％、0.083％、0.084％、0.085％、0.086％、0.087％、0.088％、0.089％、0.090％、0.091％、0.092％、0.093％、0.094％、0.095％、0.096％、0.097％、0.098％、0.099％、0.100％、0.101％、0.102％、0.103％、0.104％、0.105％、0.106％、0.107％、0.108％、0.109％、0.110％、0.111％、0.112％、0.113％、0.114％、0.115％、0.116％、0.117％、0.118％、0.119％或0.120％的CD34+细胞的频率。在一些实施方案中，细胞的群体具有约0.097％的CD34+细胞的频率。
在另外的方面，本发明的特征在于一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体(例如，人类供体)分离的造血干细胞或其后代的群体，其中群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与白细胞的比率为从约0.0003至约0.0016。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与白细胞的比率可以为约0.00030、0.00031、0.00032、0.00033、0.00034、0.00035、0.00036、0.00037、0.00038、0.00039、0.00040、0.00041、0.00042、0.00043、0.00044、0.00045、0.00046、0.00047、0.00048、0.00049、0.00050、0.00051、0.00052、0.00053、0.00054、0.00055、0.00056、0.00057、0.00058、0.00059、0.00060、0.00061、0.00062、0.00063、0.00064、0.00065、0.00066、0.00067、0.00068、0.00069、0.00070、0.00071、0.00072、0.00073、0.00074、0.00075、0.00076、0.00077、0.00078、0.00079、0.00080、0.00081、0.00082、0.00083、0.00084、0.00085、0.00086、0.00087、0.00088、0.00089、0.00090、0.00091、0.00092、0.00093、0.00094、0.00095、0.00096、0.00097、0.00098、0.00099、0.00100、0.00101、0.00102、0.00103、0.00104、0.00105、0.00106、0.00107、0.00108、0.00109、0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119、0.00120、0.00121、0.00122、0.00123、0.00124、0.00125、0.00126、0.00127、0.00128、0.00129、0.00130、0.00131、0.00132、0.00133、0.00134、0.00135、0.00136、0.00137、0.00138、0.00139、0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159或0.00160。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与白细胞的比率为从约0.0006至约0.0012，例如CD34+CD90+CD45RA-细胞与白细胞的比率为约0.00060、0.00061、0.00062、0.00063、0.00064、0.00065、0.00066、0.00067、0.00068、0.00069、0.00070、0.00071、0.00072、0.00073、0.00074、0.00075、0.00076、0.00077、0.00078、0.00079、0.00080、0.00081、0.00082、0.00083、0.00084、0.00085、0.00086、0.00087、0.00088、0.00089、0.00090、0.00091、0.00092、0.00093、0.00094、0.00095、0.00096、0.00097、0.00098、0.00099、0.00100、0.00101、0.00102、0.00103、0.00104、0.00105、0.00106、0.00107、0.00108、0.00109、0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119或0.00120。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与白细胞的比率为约0.0009。
在另外的方面，本发明的特征在于一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体(例如，人类供体)分离的造血干细胞或其后代的群体，其中群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.0007至约0.0043。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率可以为约0.00070、0.00071、0.00072、0.00073、0.00074、0.00075、0.00076、0.00077、0.00078、0.00079、0.00080、0.00081、0.00082、0.00083、0.00084、0.00085、0.00086、0.00087、0.00088、0.00089、0.00090、0.00091、0.00092、0.00093、0.00094、0.00095、0.00096、0.00097、0.00098、0.00099、0.00100、0.00101、0.00102、0.00103、0.00104、0.00105、0.00106、0.00107、0.00108、0.00109、0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119、0.00120、0.00121、0.00122、0.00123、0.00124、0.00125、0.00126、0.00127、0.00128、0.00129、0.00130、0.00131、0.00132、0.00133、0.00134、0.00135、0.00136、0.00137、0.00138、0.00139、0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159、0.00160、0.00161、0.00162、0.00163、0.00164、0.00165、0.00166、0.00167、0.00168、0.00169、0.00170、0.00171、0.00172、0.00173、0.00174、0.00175、0.00176、0.00177、0.00178、0.00179、0.00180、0.00181、0.00182、0.00183、0.00184、0.00185、0.00186、0.00187、0.00188、0.00189、0.00190、0.00191、0.00192、0.00193、0.00194、0.00195、0.00196、0.00197、0.00198、0.00199、0.00200、0.00201、0.00202、0.00203、0.00204、0.00205、0.00206、0.00207、0.00208、0.00209、0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224、0.00225、0.00226、0.00227、0.00228、0.00229、0.00230、0.00231、0.00232、0.00233、0.00234、0.00235、0.00236、0.00237、0.00238、0.00239、0.00240、0.00241、0.00242、0.00243、0.00244、0.00245、0.00246、0.00247、0.00248、0.00249、0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00277、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349、0.00350、0.00351、0.00352、0.00353、0.00354、0.00355、0.00356、0.00357、0.00358、0.00359、0.00360、0.00361、0.00362、0.00363、0.00364、0.00365、0.00366、0.00367、0.00368、0.00369、0.00370、0.00371、0.00372、0.00373、0.00374、0.00375、0.00376、0.00377、0.00378、0.00379、0.00380、0.00381、0.00382、0.00383、0.00384、0.00385、0.00386、0.00387、0.00388、0.00389、0.00390、0.00391、0.00392、0.00393、0.00394、0.00395、0.00396、0.00397、0.00398、0.00399、0.00400、0.00401、0.00402、0.00403、0.00404、0.00405、0.00406、0.00407、0.00408、0.00409、0.00410、0.00411、0.00412、0.00413、0.00414、0.00415、0.00416、0.00417、0.00418、0.00419、0.00420、0.00421、0.00422、0.00423、0.00424、0.00425、0.00426、0.00427、0.00428、0.00429或0.00430。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.0014至约0.0034，例如CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率为约0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159、0.00160、0.00161、0.00162、0.00163、0.00164、0.00165、0.00166、0.00167、0.00168、0.00169、0.00170、0.00171、0.00172、0.00173、0.00174、0.00175、0.00176、0.00177、0.00178、0.00179、0.00180、0.00181、0.00182、0.00183、0.00184、0.00185、0.00186、0.00187、0.00188、0.00189、0.00190、0.00191、0.00192、0.00193、0.00194、0.00195、0.00196、0.00197、0.00198、0.00199、0.00200、0.00201、0.00202、0.00203、0.00204、0.00205、0.00206、0.00207、0.00208、0.00209、0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224、0.00225、0.00226、0.00227、0.00228、0.00229、0.00230、0.00231、0.00232、0.00233、0.00234、0.00235、0.00236、0.00237、0.00238、0.00239、0.00240、0.00241、0.00242、0.00243、0.00244、0.00245、0.00246、0.00247、0.00248、0.00249、0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00277、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339或0.00340。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率为约0.0024。
在另一方面，本发明的特征在于一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体(例如，人类供体)分离的造血干细胞或其后代的群体，其中群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率为从约0.0008至约0.0069。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率可以为约0.00080、0.00081、0.00082、0.00083、0.00084、0.00085、0.00086、0.00087、0.00088、0.00089、0.00090、0.00091、0.00092、0.00093、0.00094、0.00095、0.00096、0.00097、0.00098、0.00099、0.00100、0.00101、0.00102、0.00103、0.00104、0.00105、0.00106、0.00107、0.00108、0.00109、0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119、0.00120、0.00121、0.00122、0.00123、0.00124、0.00125、0.00126、0.00127、0.00128、0.00129、0.00130、0.00131、0.00132、0.00133、0.00134、0.00135、0.00136、0.00137、0.00138、0.00139、0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159、0.00160、0.00161、0.00162、0.00163、0.00164、0.00165、0.00166、0.00167、0.00168、0.00169、0.00170、0.00171、0.00172、0.00173、0.00174、0.00175、0.00176、0.00178、0.00179、0.00180、0.00181、0.00182、0.00183、0.00184、0.00185、0.00186、0.00187、0.00188、0.00189、0.00190、0.00191、0.00192、0.00193、0.00194、0.00195、0.00196、0.00197、0.00198、0.00199、0.00200、0.00201、0.00202、0.00203、0.00204、0.00205、0.00206、0.00207、0.00208、0.00209、0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224、0.00225、0.00226、0.00227、0.00228、0.00229、0.00230、0.00231、0.00232、0.00233、0.00234、0.00235、0.00236、0.00237、0.00238、0.00239、0.00240、0.00241、0.00242、0.00243、0.00244、0.00245、0.00246、0.00247、0.00248、0.00249、0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349、0.00350、0.00351、0.00352、0.00353、0.00354、0.00355、0.00356、0.00357、0.00358、0.00359、0.00360、0.00361、0.00362、0.00363、0.00364、0.00365、0.00366、0.00367、0.00368、0.00369、0.00370、0.00371、0.00372、0.00373、0.00374、0.00375、0.00376、0.00378、0.00379、0.00380、0.00381、0.00382、0.00383、0.00384、0.00385、0.00386、0.00387、0.00388、0.00389、0.00390、0.00391、0.00392、0.00393、0.00394、0.00395、0.00396、0.00397、0.00398、0.00399、0.00401、0.00402、0.00403、0.00404、0.00405、0.00406、0.00407、0.00408、0.00409、0.00410、0.00411、0.00412、0.00413、0.00414、0.00415、0.00416、0.00417、0.00418、0.00419、0.00420、0.00421、0.00422、0.00423、0.00424、0.00425、0.00426、0.00427、0.00428、0.00429、0.00430、0.00431、0.00432、0.00433、0.00434、0.00435、0.00436、0.00437、0.00438、0.00439、0.00440、0.00441、0.00442、0.00443、0.00444、0.00445、0.00446、0.00447、0.00448、0.00449、0.00450、0.00451、0.00452、0.00453、0.00454、0.00455、0.00456、0.00457、0.00458、0.00459、0.00460、0.00461、0.00462、0.00463、0.00464、0.00465、0.00466、0.00467、0.00468、0.00469、0.00470、0.00471、0.00472、0.00473、0.00474、0.00475、0.00476、0.00478、0.00479、0.00480、0.00481、0.00482、0.00483、0.00484、0.00485、0.00486、0.00487、0.00488、0.00489、0.00490、0.00491、0.00492、0.00493、0.00494、0.00495、0.00496、0.00497、0.00498、0.00499、0.00500、0.00501、0.00502、0.00503、0.00504、0.00505、0.00506、0.00507、0.00508、0.00509、0.00510、0.00511、0.00512、0.00513、0.00514、0.00515、0.00516、0.00517、0.00518、0.00519、0.00520、0.00521、0.00522、0.00523、0.00524、0.00525、0.00526、0.00527、0.00528、0.00529、0.00530、0.00531、0.00532、0.00533、0.00534、0.00535、0.00536、0.00537、0.00538、0.00539、0.00540、0.00541、0.00542、0.00543、0.00544、0.00545、0.00546、0.00547、0.00548、0.00549、0.00550、0.00551、0.00552、0.00553、0.00554、0.00555、0.00556、0.00557、0.00558、0.00559、0.00560、0.00561、0.00562、0.00563、0.00564、0.00565、0.00566、0.00567、0.00568、0.00569、0.00570、0.00571、0.00572、0.00573、0.00574、0.00575、0.00576、0.00578、0.00579、0.00580、0.00581、0.00582、0.00583、0.00584、0.00585、0.00586、0.00587、0.00588、0.00589、0.00590、0.00591、0.00592、0.00593、0.00594、0.00595、0.00596、0.00597、0.00598、0.00599、0.00600、0.00601、0.00602、0.00603、0.00604、0.00605、0.00606、0.00607、0.00608、0.00609、0.00610、0.00611、0.00612、0.00613、0.00614、0.00615、0.00616、0.00617、0.00618、0.00619、0.00620、0.00621、0.00622、0.00623、0.00624、0.00625、0.00626、0.00627、0.00628、0.00629、0.00630、0.00631、0.00632、0.00633、0.00634、0.00635、0.00636、0.00637、0.00638、0.00639、0.00640、0.00641、0.00642、0.00643、0.00644、0.00645、0.00646、0.00647、0.00648、0.00649、0.00650、0.00651、0.00652、0.00653、0.00654、0.00655、0.00656、0.00657、0.00658、0.00659、0.00660、0.00661、0.00662、0.00663、0.00664、0.00665、0.00666、0.00667、0.00668、0.00669、0.00670、0.00671、0.00672、0.00673、0.00674、0.00675、0.00676、0.00678、0.00679、0.00680、0.00681、0.00682、0.00683、0.00684、0.00685、0.00686、0.00687、0.00688、0.00689或0.00690。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率为从约0.0011至约0.0031，例如CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率为约0.00110、0.00111、0.00112、0.00113、0.00114、0.00115、0.00116、0.00117、0.00118、0.00119、0.00120、0.00121、0.00122、0.00123、0.00124、0.00125、0.00126、0.00127、0.00128、0.00129、0.00130、0.00131、0.00132、0.00133、0.00134、0.00135、0.00136、0.00137、0.00138、0.00139、0.00140、0.00141、0.00142、0.00143、0.00144、0.00145、0.00146、0.00147、0.00148、0.00149、0.00150、0.00151、0.00152、0.00153、0.00154、0.00155、0.00156、0.00157、0.00158、0.00159、0.00160、0.00161、0.00162、0.00163、0.00164、0.00165、0.00166、0.00167、0.00168、0.00169、0.00170、0.00171、0.00172、0.00173、0.00174、0.00175、0.00176、0.00178、0.00179、0.00180、0.00181、0.00182、0.00183、0.00184、0.00185、0.00186、0.00187、0.00188、0.00189、0.00190、0.00191、0.00192、0.00193、0.00194、0.00195、0.00196、0.00197、0.00198、0.00199、0.00200、0.00201、0.00202、0.00203、0.00204、0.00205、0.00206、0.00207、0.00208、0.00209、0.00210、0.00211、0.00212、0.00213、0.00214、0.00215、0.00216、0.00217、0.00218、0.00219、0.00220、0.00221、0.00222、0.00223、0.00224、0.00225、0.00226、0.00227、0.00228、0.00229、0.00230、0.00231、0.00232、0.00233、0.00234、0.00235、0.00236、0.00237、0.00238、0.00239、0.00240、0.00241、0.00242、0.00243、0.00244、0.00245、0.00246、0.00247、0.00248、0.00249、0.00250、0.00251、0.00252、0.00253、0.00254、0.00255、0.00256、0.00257、0.00258、0.00259、0.00260、0.00261、0.00262、0.00263、0.00264、0.00265、0.00266、0.00267、0.00268、0.00269、0.00270、0.00271、0.00272、0.00273、0.00274、0.00275、0.00276、0.00278、0.00279、0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309或0.00310。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率为约0.0021。
在另外的方面，本发明的特征在于一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体(例如，人类供体)分离的造血干细胞或其后代的群体，其中群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率为从约0.0028至约0.0130。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率可以为约0.00280、0.00281、0.00282、0.00283、0.00284、0.00285、0.00286、0.00287、0.00288、0.00289、0.00290、0.00291、0.00292、0.00293、0.00294、0.00295、0.00296、0.00297、0.00298、0.00299、0.00300、0.00301、0.00302、0.00303、0.00304、0.00305、0.00306、0.00307、0.00308、0.00309、0.00310、0.00311、0.00312、0.00313、0.00314、0.00315、0.00316、0.00317、0.00318、0.00319、0.00320、0.00321、0.00322、0.00323、0.00324、0.00325、0.00326、0.00327、0.00328、0.00329、0.00330、0.00331、0.00332、0.00333、0.00334、0.00335、0.00336、0.00337、0.00338、0.00339、0.00340、0.00341、0.00342、0.00343、0.00344、0.00345、0.00346、0.00347、0.00348、0.00349、0.00350、0.00351、0.00352、0.00353、0.00354、0.00355、0.00356、0.00357、0.00358、0.00359、0.00360、0.00361、0.00362、0.00363、0.00364、0.00365、0.00366、0.00367、0.00368、0.00369、0.00370、0.00371、0.00372、0.00373、0.00374、0.00375、0.00376、0.00378、0.00379、0.00380、0.00381、0.00382、0.00383、0.00384、0.00385、0.00386、0.00387、0.00388、0.00389、0.00390、0.00391、0.00392、0.00393、0.00394、0.00395、0.00396、0.00397、0.00398、0.00399、0.00401、0.00402、0.00403、0.00404、0.00405、0.00406、0.00407、0.00408、0.00409、0.00410、0.00411、0.00412、0.00413、0.00414、0.00415、0.00416、0.00417、0.00418、0.00419、0.00420、0.00421、0.00422、0.00423、0.00424、0.00425、0.00426、0.00427、0.00428、0.00429、0.00430、0.00431、0.00432、0.00433、0.00434、0.00435、0.00436、0.00437、0.00438、0.00439、0.00440、0.00441、0.00442、0.00443、0.00444、0.00445、0.00446、0.00447、0.00448、0.00449、0.00450、0.00451、0.00452、0.00453、0.00454、0.00455、0.00456、0.00457、0.00458、0.00459、0.00460、0.00461、0.00462、0.00463、0.00464、0.00465、0.00466、0.00467、0.00468、0.00469、0.00470、0.00471、0.00472、0.00473、0.00474、0.00475、0.00476、0.00478、0.00479、0.00480、0.00481、0.00482、0.00483、0.00484、0.00485、0.00486、0.00487、0.00488、0.00489、0.00490、0.00491、0.00492、0.00493、0.00494、0.00495、0.00496、0.00497、0.00498、0.00499、0.00500、0.00501、0.00502、0.00503、0.00504、0.00505、0.00506、0.00507、0.00508、0.00509、0.00510、0.00511、0.00512、0.00513、0.00514、0.00515、0.00516、0.00517、0.00518、0.00519、0.00520、0.00521、0.00522、0.00523、0.00524、0.00525、0.00526、0.00527、0.00528、0.00529、0.00530、0.00531、0.00532、0.00533、0.00534、0.00535、0.00536、0.00537、0.00538、0.00539、0.00540、0.00541、0.00542、0.00543、0.00544、0.00545、0.00546、0.00547、0.00548、0.00549、0.00550、0.00551、0.00552、0.00553、0.00554、0.00555、0.00556、0.00557、0.00558、0.00559、0.00560、0.00561、0.00562、0.00563、0.00564、0.00565、0.00566、0.00567、0.00568、0.00569、0.00570、0.00571、0.00572、0.00573、0.00574、0.00575、0.00576、0.00578、0.00579、0.00580、0.00581、0.00582、0.00583、0.00584、0.00585、0.00586、0.00587、0.00588、0.00589、0.00590、0.00591、0.00592、0.00593、0.00594、0.00595、0.00596、0.00597、0.00598、0.00599、0.00600、0.00601、0.00602、0.00603、0.00604、0.00605、0.00606、0.00607、0.00608、0.00609、0.00610、0.00611、0.00612、0.00613、0.00614、0.00615、0.00616、0.00617、0.00618、0.00619、0.00620、0.00621、0.00622、0.00623、0.00624、0.00625、0.00626、0.00627、0.00628、0.00629、0.00630、0.00631、0.00632、0.00633、0.00634、0.00635、0.00636、0.00637、0.00638、0.00639、0.00640、0.00641、0.00642、0.00643、0.00644、0.00645、0.00646、0.00647、0.00648、0.00649、0.00650、0.00651、0.00652、0.00653、0.00654、0.00655、0.00656、0.00657、0.00658、0.00659、0.00660、0.00661、0.00662、0.00663、0.00664、0.00665、0.00666、0.00667、0.00668、0.00669、0.00670、0.00671、0.00672、0.00673、0.00674、0.00675、0.00676、0.00678、0.00679、0.00680、0.00681、0.00682、0.00683、0.00684、0.00685、0.00686、0.00687、0.00688、0.00689、0.00690、0.00691、0.00692、0.00693、0.00694、0.00695、0.00696、0.00697、0.00698、0.00699、0.00700、0.00701、0.00702、0.00703、0.00704、0.00705、0.00706、0.00707、0.00708、0.00709、0.00710、0.00711、0.00712、0.00713、0.00714、0.00715、0.00716、0.00717、0.00718、0.00719、0.00720、0.00721、0.00722、0.00723、0.00724、0.00725、0.00726、0.00727、0.00728、0.00729、0.00730、0.00731、0.00732、0.00733、0.00734、0.00735、0.00736、0.00737、0.00738、0.00739、0.00740、0.00741、0.00742、0.00743、0.00744、0.00745、0.00746、0.00747、0.00748、0.00749、0.00750、0.00751、0.00752、0.00753、0.00754、0.00755、0.00756、0.00757、0.00758、0.00759、0.00760、0.00761、0.00762、0.00763、0.00764、0.00765、0.00766、0.00767、0.00768、0.00769、0.00770、0.00771、0.00772、0.00773、0.00774、0.00775、0.00776、0.00777、0.00778、0.00779、0.00780、0.00781、0.00782、0.00783、0.00784、0.00785、0.00786、0.00787、0.00788、0.00789、0.00790、0.00791、0.00792、0.00793、0.00794、0.00795、0.00796、0.00797、0.00798、0.00799、0.00800、0.00801、0.00802、0.00803、0.00804、0.00805、0.00806、0.00807、0.00808、0.00809、0.00810、0.00811、0.00812、0.00813、0.00814、0.00815、0.00816、0.00817、0.00818、0.00819、0.00820、0.00821、0.00822、0.00823、0.00824、0.00825、0.00826、0.00827、0.00828、0.00829、0.00830、0.00831、0.00832、0.00833、0.00834、0.00835、0.00836、0.00837、0.00838、0.00839、0.00840、0.00841、0.00842、0.00843、0.00844、0.00845、0.00846、0.00847、0.00848、0.00849、0.00850、0.00851、0.00852、0.00853、0.00854、0.00855、0.00856、0.00857、0.00858、0.00859、0.00860、0.00861、0.00862、0.00863、0.00864、0.00865、0.00866、0.00867、0.00868、0.00869、0.00870、0.00871、0.00872、0.00873、0.00874、0.00875、0.00876、0.00877、0.00878、0.00879、0.00880、0.00881、0.00882、0.00883、0.00884、0.00885、0.00886、0.00887、0.00888、0.00889、0.00890、0.00891、0.00892、0.00893、0.00894、0.00895、0.00896、0.00897、0.00898、0.00899、0.00900、0.00901、0.00902、0.00903、0.00904、0.00905、0.00906、0.00907、0.00908、0.00909、0.00910、0.00911、0.00912、0.00913、0.00914、0.00915、0.00916、0.00917、0.00918、0.00919、0.00920、0.00921、0.00922、0.00923、0.00924、0.00925、0.00926、0.00927、0.00928、0.00929、0.00930、0.00931、0.00932、0.00933、0.00934、0.00935、0.00936、0.00937、0.00938、0.00939、0.00940、0.00941、0.00942、0.00943、0.00944、0.00945、0.00946、0.00947、0.00948、0.00949、0.00950、0.00951、0.00952、0.00953、0.00954、0.00955、0.00956、0.00957、0.00958、0.00959、0.00960、0.00961、0.00962、0.00963、0.00964、0.00965、0.00966、0.00967、0.00968、0.00969、0.00970、0.00971、0.00972、0.00973、0.00974、0.00975、0.00976、0.00977、0.00978、0.00979、0.00980、0.00981、0.00982、0.00983、0.00984、0.00985、0.00986、0.00987、0.00988、0.00989、0.00990、0.00991、0.00992、0.00993、0.00994、0.00995、0.00996、0.00997、0.00998、0.00999、0.0100、0.0101、0.0103、0.0104、0.0105、0.0106、0.0107、0.0108、0.0109、0.0110、0.0111、0.0112、0.0113、0.0114、0.0115、0.0116、0.0117、0.0118、0.0119、0.0120、0.0121、0.0122、0.0123、0.0124、0.0125、0.0126、0.0127、0.0128、0.0129或0.0130。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率为从约0.0063至约0.0083，例如CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率为约0.00630、0.00631、0.00632、0.00633、0.00634、0.00635、0.00636、0.00637、0.00638、0.00639、0.00640、0.00641、0.00642、0.00643、0.00644、0.00645、0.00646、0.00647、0.00648、0.00649、0.00650、0.00651、0.00652、0.00653、0.00654、0.00655、0.00656、0.00657、0.00658、0.00659、0.00660、0.00661、0.00662、0.00663、0.00664、0.00665、0.00666、0.00667、0.00668、0.00669、0.00670、0.00671、0.00672、0.00673、0.00674、0.00675、0.00676、0.00678、0.00679、0.00680、0.00681、0.00682、0.00683、0.00684、0.00685、0.00686、0.00687、0.00688、0.00689、0.00690、0.00691、0.00692、0.00693、0.00694、0.00695、0.00696、0.00697、0.00698、0.00699、0.00700、0.00701、0.00702、0.00703、0.00704、0.00705、0.00706、0.00707、0.00708、0.00709、0.00710、0.00711、0.00712、0.00713、0.00714、0.00715、0.00716、0.00717、0.00718、0.00719、0.00720、0.00721、0.00722、0.00723、0.00724、0.00725、0.00726、0.00727、0.00728、0.00729、0.00730、0.00731、0.00732、0.00733、0.00734、0.00735、0.00736、0.00737、0.00738、0.00739、0.00740、0.00741、0.00742、0.00743、0.00744、0.00745、0.00746、0.00747、0.00748、0.00749、0.00750、0.00751、0.00752、0.00753、0.00754、0.00755、0.00756、0.00757、0.00758、0.00759、0.00760、0.00761、0.00762、0.00763、0.00764、0.00765、0.00766、0.00767、0.00768、0.00769、0.00770、0.00771、0.00772、0.00773、0.00774、0.00775、0.00776、0.00777、0.00778、0.00779、0.00780、0.00781、0.00782、0.00783、0.00784、0.00785、0.00786、0.00787、0.00788、0.00789、0.00790、0.00791、0.00792、0.00793、0.00794、0.00795、0.00796、0.00797、0.00798、0.00799、0.00800、0.00801、0.00802、0.00803、0.00804、0.00805、0.00806、0.00807、0.00808、0.00809、0.00810、0.00811、0.00812、0.00813、0.00814、0.00815、0.00816、0.00817、0.00818、0.00819、0.00820、0.00821、0.00822、0.00823、0.00824、0.00825、0.00826、0.00827、0.00828、0.00829或0.00830。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率为约0.0073。
在另外的方面，本发明的特征在于一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体(例如，人类供体)分离的造血干细胞或其后代的群体，其中群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率为从约0.393至约0.745。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率可以为约0.393、0.394、0.395、0.396、0.397、0.398、0.399、0.401、0.402、0.403、0.404、0.405、0.406、0.407、0.408、0.409、0.410、0.411、0.412、0.413、0.414、0.415、0.416、0.417、0.418、0.419、0.420、0.421、0.422、0.423、0.424、0.425、0.426、0.427、0.428、0.429、0.430、0.431、0.432、0.433、0.434、0.435、0.436、0.437、0.438、0.439、0.440、0.441、0.442、0.443、0.444、0.445、0.446、0.447、0.448、0.449、0.450、0.451、0.452、0.453、0.454、0.455、0.456、0.457、0.458、0.459、0.460、0.461、0.462、0.463、0.464、0.465、0.466、0.467、0.468、0.469、0.470、0.471、0.472、0.473、0.474、0.475、0.476、0.478、0.479、0.480、0.481、0.482、0.483、0.484、0.485、0.486、0.487、0.488、0.489、0.490、0.491、0.492、0.493、0.494、0.495、0.496、0.497、0.498、0.499、0.500、0.501、0.502、0.503、0.504、0.505、0.506、0.507、0.508、0.509、0.510、0.511、0.512、0.513、0.514、0.515、0.516、0.517、0.518、0.519、0.520、0.521、0.522、0.523、0.524、0.525、0.526、0.527、0.528、0.529、0.530、0.531、0.532、0.533、0.534、0.535、0.536、0.537、0.538、0.539、0.540、0.541、0.542、0.543、0.544、0.545、0.546、0.547、0.548、0.549、0.550、0.551、0.552、0.553、0.554、0.555、0.556、0.557、0.558、0.559、0.560、0.561、0.562、0.563、0.564、0.565、0.566、0.567、0.568、0.569、0.570、0.571、0.572、0.573、0.574、0.575、0.576、0.578、0.579、0.580、0.581、0.582、0.583、0.584、0.585、0.586、0.587、0.588、0.589、0.590、0.591、0.592、0.593、0.594、0.595、0.596、0.597、0.598、0.599、0.600、0.601、0.602、0.603、0.604、0.605、0.606、0.607、0.608、0.609、0.610、0.611、0.612、0.613、0.614、0.615、0.616、0.617、0.618、0.619、0.620、0.621、0.622、0.623、0.624、0.625、0.626、0.627、0.628、0.629、0.630、0.631、0.632、0.633、0.634、0.635、0.636、0.637、0.638、0.639、0.640、0.641、0.642、0.643、0.644、0.645、0.646、0.647、0.648、0.649、0.650、0.651、0.652、0.653、0.654、0.655、0.656、0.657、0.658、0.659、0.660、0.661、0.662、0.663、0.664、0.665、0.666、0.667、0.668、0.669、0.670、0.671、0.672、0.673、0.674、0.675、0.676、0.678、0.679、0.680、0.681、0.682、0.683、0.684、0.685、0.686、0.687、0.688、0.689、0.690、0.691、0.692、0.693、0.694、0.695、0.696、0.697、0.698、0.699、0.700、0.701、0.702、0.703、0.704、0.705、0.706、0.707、0.708、0.709、0.710、0.711、0.712、0.713、0.714、0.715、0.716、0.717、0.718、0.719、0.720、0.721、0.722、0.723、0.724、0.725、0.726、0.727、0.728、0.729、0.730、0.731、0.732、0.733、0.734、0.735、0.736、0.737、0.738、0.739、0.740、0.741、0.742、0.743、0.744或0.745。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率为从约0.625至约0.725，例如CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率为约0.625、0.626、0.627、0.628、0.629、0.630、0.631、0.632、0.633、0.634、0.635、0.636、0.637、0.638、0.639、0.640、0.641、0.642、0.643、0.644、0.645、0.646、0.647、0.648、0.649、0.650、0.651、0.652、0.653、0.654、0.655、0.656、0.657、0.658、0.659、0.660、0.661、0.662、0.663、0.664、0.665、0.666、0.667、0.668、0.669、0.670、0.671、0.672、0.673、0.674、0.675、0.676、0.678、0.679、0.680、0.681、0.682、0.683、0.684、0.685、0.686、0.687、0.688、0.689、0.690、0.691、0.692、0.693、0.694、0.695、0.696、0.697、0.698、0.699、0.700、0.701、0.702、0.703、0.704、0.705、0.706、0.707、0.708、0.709、0.710、0.711、0.712、0.713、0.714、0.715、0.716、0.717、0.718、0.719、0.720、0.721、0.722、0.723、0.724或0.725。在一些实施方案中，CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率为约0.676。
在另外的方面，本发明的特征在于一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体(例如，人类供体)分离的造血干细胞或其后代的群体，其中群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率为从约0.020％至约0.110％。在一些实施方案中，细胞的群体可以具有约0.020％、0.021％、0.022％、0.023％、0.024％、0.025％、0.026％、0.027％、0.028％、0.029％、0.030％、0.031％、0.032％、0.033％、0.034％、0.035％、0.036％、0.037％、0.038％、0.039％、0.040％、0.041％、0.042％、0.043％、0.044％、0.045％、0.046％、0.047％、0.048％、0.049％、0.050％、0.051％、0.052％、0.053％、0.054％、0.055％、0.056％、0.057％、0.058％、0.059％、0.060％、0.061％、0.062％、0.063％、0.064％、0.065％、0.066％、0.067％、0.068％、0.069％、0.070％、0.071％、0.072％、0.073％、0.074％、0.075％、0.076％、0.077％、0.078％、0.079％、0.080％、0.081％、0.082％、0.083％、0.084％、0.085％、0.086％、0.087％、0.088％、0.089％、0.090％、0.091％、0.092％、0.093％、0.094％、0.095％、0.096％、0.097％、0.098％、0.099％、0.100％、0.101％、0.102％、0.103％、0.104％、0.105％、0.106％、0.107％、0.108％、0.109％或0.110％的CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率。在一些实施方案中，细胞的群体具有从约0.046％至约0.086％的CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率，例如约0.046％、0.047％、0.048％、0.049％、0.050％、0.051％、0.052％、0.053％、0.054％、0.055％、0.056％、0.057％、0.058％、0.059％、0.060％、0.061％、0.062％、0.063％、0.064％、0.065％、0.066％、0.067％、0.068％、0.069％、0.070％、0.071％、0.072％、0.073％、0.074％、0.075％、0.076％、0.077％、0.078％、0.079％、0.080％、0.081％、0.082％、0.083％、0.084％、0.085％或0.086％的造血干细胞的频率。在一些实施方案中，细胞的群体具有约0.066％的CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率。
在另一个方面，本发明的特征在于一种治疗哺乳动物患者(例如，人类患者)的干细胞紊乱的方法，该方法包括根据任何上述方法动员哺乳动物供体(例如，人类供体)中的造血干细胞的群体，并且将治疗有效量的造血干细胞或其后代输注到患者中。
在另外的方面，本发明的特征在于一种治疗哺乳动物患者(例如，人类患者)的干细胞紊乱的方法，该方法包括将治疗有效量的通过任何上述方法动员的造血干细胞或其后代输注到患者中。
在另一方面，本发明的特征在于一种治疗哺乳动物患者(例如，人类患者)的干细胞紊乱的方法，该方法包括向患者施用任一种或更多种上述药物组合物。
在前述三个方面中的任一个方面的一些实施方案中，干细胞紊乱是血红蛋白病紊乱(hemoglobinopathy disorder)，诸如镰状细胞性贫血、地中海贫血、范可尼贫血、再生障碍性贫血和威斯科特-奥尔德里奇综合征。在一些实施方案中，干细胞紊乱是骨髓增生异常性紊乱。干细胞紊乱可以是免疫缺陷性紊乱，诸如先天性免疫缺陷或获得性免疫缺陷，例如，人类免疫缺陷病毒或获得性免疫缺陷综合征。在一些实施方案中，干细胞紊乱是代谢紊乱，诸如选自以下的代谢紊乱：糖原贮积病、黏多糖贮积病、高歇氏病(Gaucher'sDisease)、赫尔勒病(Hurlers Disease)、鞘脂贮积病和异染性脑白质营养不良。
在一些实施方案中，干细胞紊乱是癌症。癌症可以是例如白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤和神经母细胞瘤。在一些实施方案中，癌症是血液学癌症。在一些实施方案中，癌症是急性骨髓性白血病、急性淋巴性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴性白血病、多发性骨髓瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤。
在一些实施方案中，干细胞紊乱是选自由以下组成的组的紊乱：腺苷脱氨酶缺乏和重症联合免疫缺陷、高免疫球蛋白M综合征、切东病(Chediak-Higashi disease)、遗传性淋巴组织细胞增多症、骨硬化病、成骨不全症、贮积病、重型地中海贫血、系统性硬化、系统性红斑狼疮、多发性硬化和青少年类风湿性关节炎。
在一些实施方案中，干细胞紊乱是自身免疫性紊乱，诸如选自以下的自身免疫性紊乱：多发性硬化、人类系统性狼疮、类风湿性关节炎、炎性肠病、治疗银屑病、1型糖尿病、急性播散性脑脊髓炎、艾迪生氏病(Addison's disease)、普秃、强直性脊柱炎、抗磷脂抗体综合征、再生障碍性贫血、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、自身免疫性内耳病、自身免疫性淋巴增生性综合征、自身免疫性卵巢炎、巴洛病(Balo disease)、白塞氏病(Behcet's disease)、大疱性类天疱疮、心肌病、恰加斯氏病(Chagas'disease)、慢性疲劳免疫功能障碍综合征、慢性炎性脱髓鞘性多发性神经病、克罗恩氏病(Crohn's disease)、瘢痕性类天疱疮、乳糜泻-疱疹样皮炎、冷凝集素病、CREST综合征、恶性萎缩性丘疹病(Degos disease)、盘状狼疮、自主神经功能障碍、子宫内膜异位、原发性混合型冷球蛋白血症、纤维肌痛-纤维肌炎、肺出血肾炎综合征(Goodpasture's syndrome)、格雷夫斯病(Grave's disease)、格林-巴利综合征(Guillain-Barre syndrome)、桥本氏甲状腺炎(Hashimoto's thyroiditis)、化脓性汗腺炎、特发性和/或急性血小板减少性紫癜、特发性肺纤维化、IgA神经病变、间质性膀胱炎、青少年关节炎、川崎病(Kawasaki's disease)、扁平苔癣、莱姆病(Lyme disease)、梅尼埃病(Meniere disease)、混合性结缔组织病、重症肌无力、神经性肌强直、斜视性眼阵挛肌阵挛综合征、视神经炎、奥德氏甲状腺炎(Ord'sthyroiditis)、寻常型天疱疮、恶性贫血、多软骨炎、多肌炎和皮肌炎、原发性胆汁性肝硬化、结节性多动脉炎、多腺体综合征、风湿性多肌痛、原发性无丙种球蛋白血症、雷诺现象(Raynaud phenomenon)、莱特尔综合征(Reiter's syndrome)、风湿热、结节病、硬皮病、干燥综合征
Figure BDA0002621915340000901
僵人综合征、大动脉炎(Takayasu's arteritis)、颞动脉炎、溃疡性结肠炎、葡萄膜炎、血管炎、白癜风、外阴痛和韦格纳肉芽肿病(Wegener'sgranulomatosis)。
在一些实施方案中，造血干细胞对于患者是自体的。在一些实施方案中，造血干细胞对于患者是同种异体的，并且可以例如对于患者是HLA匹配的。
在一些实施方案中，造血干细胞已经被遗传修饰以破坏内源基因，诸如编码主要组织相容性复合体蛋白的基因。造血干细胞可以通过例如CRISPR相关蛋白(诸如胱天蛋白酶9)或本文描述的另一种核酸酶(诸如转录激活因子样效应物核酸酶、兆核酸酶或锌指核酸酶)进行遗传修饰以破坏内源基因。
在一些实施方案中，造血干细胞或其后代在所述造血干细胞或其后代输注到患者中后两天或更多天之后维持造血干细胞功能潜力。在一些实施方案中，造血干细胞或其后代在所述造血干细胞或其后代输注到患者中后定位至(localize to)造血组织和/或重建血细胞生成。在一些实施方案中，在输注到患者中后，造血干细胞或其后代引起选自由以下组成的组的细胞的群体的恢复：巨核细胞、凝血细胞、血小板、红细胞、肥大细胞、原粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、小胶质细胞、粒细胞、单核细胞、破骨细胞、抗原呈递细胞。
在另一方面，本公开内容涉及一种将CD34dim细胞从人类供体的骨髓动员到外周血中的方法，该方法包括向供体施用(i)以从约50μg/kg至约1,000μg/kg的剂量的选自由Gro-β、Gro-βT及其变体组成的组的CXCR2激动剂和(ii)CXCR4拮抗剂。
在另一方面，本公开内容涉及一种在有相应需要的患者中进行同种异体造血干细胞移植的方法，该方法包括将治疗有效量的同种异体造血干细胞输注到患者中，其中造血干细胞通过包括以下的方法从人类供体的骨髓动员到人类供体的外周血中：向供体施用(i)以从约50μg/kg至约1,000μg/kg的剂量的选自由Gro-β、Gro-βT及其变体组成的组的CXCR2激动剂和(ii)CXCR4拮抗剂。
在另一方面，本公开内容涉及一种预防有相应需要的患者的移植后感染、降低有相应需要的患者发展移植后感染的风险或降低有相应需要的患者的移植后感染的严重程度的方法，该方法包括将治疗有效量的造血干细胞输注到患者中，其中造血干细胞通过包括以下的方法从人类供体的骨髓动员到人类供体的外周血中：向人类供体施用(i)以从约50μg/kg至约1,000μg/kg的剂量的选自由Gro-β、Gro-βT及其变体组成的组的CXCR2激动剂和(ii)CXCR4拮抗剂。
在另一方面，本公开内容涉及一种预防有相应需要的患者的移植物抗宿主病(GVHD)、降低有相应需要的患者发展移植物抗宿主病(GVHD)的风险或降低有相应需要的患者的移植物抗宿主病(GVHD)的严重程度的方法，该方法包括将治疗有效量的造血干细胞输注到患者中，其中造血干细胞通过包括以下的方法从人类供体的骨髓动员到人类供体的外周血中：向人类供体施用(i)以从约50μg/kg至约1,000μg/kg的剂量的选自由Gro-β、Gro-βT及其变体组成的组的CXCR2激动剂和(ii)CXCR4拮抗剂。
在某些实施方案中，CD34dim细胞以比如果使用单独的CXCR4拮抗剂动员造血干细胞高的量存在于外周血中。在某些实施方案中，CD34dim细胞当被施用至接受者时能够抑制同种异体反应性T淋巴细胞增殖。
在某些实施方案中，CXCR2激动剂是Gro-βT。在某些实施方案中，CXCR2激动剂以从约100μg/kg至约250μg/kg的剂量被施用至供体。在某些实施方案中，CXCR2激动剂以从约125μg/kg至约225μg/kg的剂量被施用至供体。在某些实施方案中，CXCR2激动剂以约150μg/kg的剂量被施用至供体。在某些实施方案中，CXCR2激动剂被静脉内施用至供体。
在某些实施方案中，CXCR4拮抗剂被皮下施用至供体。在某些实施方案中，CXCR4拮抗剂是普乐沙福或其药学上可接受的盐。在某些实施方案中，普乐沙福或其药学上可接受的盐以从约50μg/kg至约500μg/kg的剂量被施用至供体。在某些实施方案中，普乐沙福或其药学上可接受的盐以从约200μg/kg至约300μg/kg的剂量被施用至供体。在某些实施方案中，普乐沙福或其药学上可接受的盐以约240μg/kg的剂量被施用至供体。
在某些实施方案中，该方法还包括测试外周血样品中CD34dim细胞的存在，并释放样品用于CD34dim细胞的离体扩增。
在某些实施方案中，本公开内容涉及来源于上述方法中任一种方法的CD34dim细胞的群体、或包含所述CD34dim细胞的群体的组合物。
附图简述
图1A提供了这样的图，所述图显示当Gro-βT与普乐沙福(AMD3100)在小鼠中共施用时，动员结果协同增加，并且移植物富含高度可植入的长期造血干细胞(LT-HSC＝Lin-c-kit+Sca-1+CD150+CD48+)。图1B提供了这样的图，所述显示含有由Gro-βT和普乐沙福动员的细胞的移植物在第16周时导致比含有由单独的G-CSF动员的细胞的移植物高的相对数目的竞争性再填充单位(competitive repopulating unit；CRU)。
图2A是显示当向恒河猴静脉内施用时不同剂量的Gro-βT的药代动力学谱的图。图2B是显示当向恒河猴皮下施用时不同剂量的Gro-βT的药代动力学谱的图。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
图3A示出了显示在向恒河猴静脉内施用后，白细胞(leukocyte)(白细胞(whiteblood cell)，“WBC”)对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。白细胞响应显示为被动员的细胞的数量(上图)和白细胞密度相对于施用前基线白细胞密度的改变倍数(下图)两个方面。图3B示出了显示在向恒河猴皮下施用后，白细胞(leukocyte)(白细胞(whiteblood cell)，“WBC”)对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。白细胞响应显示为被动员的细胞的数量(上图)和白细胞密度相对于施用前基线白细胞密度的改变倍数(下图)两个方面。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
图4A示出了显示在向恒河猴静脉内施用后，嗜中性粒细胞对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。嗜中性粒细胞响应显示为被动员的细胞的数量(上图)和嗜中性粒细胞密度相对于施用前基线嗜中性粒细胞密度的改变倍数(下图)两个方面。图4B示出了显示在向恒河猴皮下施用后，嗜中性粒细胞对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。嗜中性粒细胞响应显示为被动员的细胞的数量(上图)和嗜中性粒细胞密度相对于施用前基线嗜中性粒细胞密度的改变倍数(下图)两个方面。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
图5A示出了显示在向恒河猴静脉内施用后，淋巴细胞对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。淋巴细胞响应显示为被动员的细胞的数量(上图)和淋巴细胞密度相对于施用前基线淋巴细胞密度的改变倍数(下图)两个方面。图5B示出了显示在向恒河猴皮下施用后，淋巴细胞对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。淋巴细胞响应显示为被动员的细胞的数量(上图)和淋巴细胞密度相对于施用前基线淋巴细胞密度的改变倍数(下图)两个方面。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
图6A示出了显示在向恒河猴静脉内施用后，单核细胞对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。单核细胞响应显示为被动员的细胞的数量(上图)和单核细胞密度相对于施用前基线单核细胞密度的改变倍数(下图)两个方面。图6B示出了显示在向恒河猴皮下施用后，单核细胞对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。单核细胞响应显示为被动员的细胞的数量(上图)和单核细胞密度相对于施用前基线单核细胞密度的改变倍数(下图)两个方面。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
图7A示出了显示在向恒河猴静脉内施用后，CD34+细胞对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。CD34+细胞响应显示为从受试者的外周血获得的样品中CD34+细胞的频率(上图)和CD34+细胞频率相对于施用前基线CD34+细胞频率的改变倍数(下图)两个方面。图7B示出了显示在向恒河猴皮下施用后，CD34+细胞对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。CD34+细胞响应显示为从受试者的外周血获得的样品中CD34+细胞的频率(上图)和CD34+细胞频率相对于施用前基线CD34+细胞频率的改变倍数(下图)两个方面。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
图8A示出了显示在向恒河猴静脉内施用后，CD34+细胞对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。CD34+细胞响应显示为被动员的细胞的数量(上图)和CD34+细胞密度相对于施用前基线CD34+细胞密度的改变倍数(下图)两个方面。图8B示出了显示在向恒河猴皮下施用后，CD34+细胞对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。CD34+细胞响应显示为被动员的细胞的数量(上图)和CD34+细胞密度相对于施用前基线CD34+细胞密度的改变倍数(下图)两个方面。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
图9A示出了显示在向恒河猴静脉内施用后，造血干细胞(CD34+CD90+CD45RA-细胞)对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。CD34+CD90+CD45RA-细胞响应显示为从受试者的外周血获得的样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率(上图)和CD34+CD90+CD45RA-细胞频率相对于施用前基线CD34+CD90+CD45RA-细胞频率的改变倍数(下图)两个方面。图9B示出了显示在向恒河猴皮下施用后，造血干细胞(CD34+CD90+CD45RA-细胞)对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。CD34+CD90+CD45RA-细胞响应显示为从受试者的外周血获得的样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率(上图)和CD34+CD90+CD45RA-细胞频率相对于施用前基线CD34+CD90+CD45RA-细胞频率的改变倍数(下图)两个方面。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
图10A示出了显示在向恒河猴静脉内施用后，造血干细胞(CD34+CD90+CD45RA-细胞)对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。CD34+CD90+CD45RA-细胞响应显示为被动员的细胞的数量(上图)和CD34+CD90+CD45RA-细胞密度相对于施用前基线CD34+CD90+CD45RA-细胞密度的改变倍数(下图)两个方面。图10B示出了显示在向恒河猴皮下施用后，造血干细胞(CD34+CD90+CD45RA-细胞)对不同剂量的Gro-βT的动员响应的一系列图。CD34+细胞响应显示为被动员的细胞的数量(上图)和CD34+CD90+CD45RA-细胞密度相对于施用前基线CD34+CD90+CD45RA-细胞密度的改变倍数(下图)两个方面。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
图11示出了显示通过向恒河猴静脉内施用不同剂量的Gro-βT实现的造血干细胞的集落形成单位(CFU)的量增加的一系列图。CFU响应显示为CFU的浓度(上图)和CFU浓度相对于施用前基线CFU浓度的改变倍数(下图)两个方面。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
图12A示出了显示在向恒河猴静脉内施用后，血浆基质金属蛋白酶9(MMP9)对不同剂量的Gro-βT的响应的一系列图。血浆MMP9响应显示为绝对浓度(上图)和血浆MMP9浓度相对于施用前基线MMP9浓度的改变倍数(下图)两个方面。图12B示出了显示在向恒河猴皮下施用后，血浆MMP9对不同剂量的Gro-βT的响应的一系列图。血浆MMP9响应显示为绝对浓度(上图)和血浆MMP9浓度相对于施用前基线MMP9浓度的改变倍数(下图)两个方面。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
图13A示出了显示在向恒河猴静脉内施用后，血浆基质金属蛋白酶1的组织抑制剂(TIMP-1)对不同剂量的Gro-βT的响应的一系列图。血浆TIMP-1响应显示为绝对浓度(上图)和血浆TIMP-1浓度相对于施用前基线TIMP-1浓度的改变倍数(下图)两个方面。图13B示出了显示在向恒河猴皮下施用后，血浆TIMP-1对不同剂量的Gro-βT的响应的一系列图。血浆TIMP-1响应显示为绝对浓度(上图)和血浆TIMP-1浓度相对于施用前基线TIMP-1浓度的改变倍数(下图)两个方面。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
图14A是显示在向恒河猴静脉内施用后，血浆MMP9与血浆TIMP-1的摩尔比对不同剂量的Gro-βT的响应的图。图14B是显示在向恒河猴皮下施用后，血浆MMP9与血浆TIMP-1的摩尔比对不同剂量的Gro-βT的响应的图。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
图15提供了来自动员后4小时从恒河猴采集的血液样品的代表性流式图。静脉内施用450μg/kg Gro-βT和皮下施用1mg/kg普乐沙福(AMD3100)导致CD34dim细胞群体的动员。
图16提供了来自在基线以及在动员后4小时从恒河猴采集的血液样品的代表性流式图。通过(1)静脉内施用450μg/kg Gro-βT和皮下施用1mg/kg普乐沙福(AMD3100)或(2)皮下施用1mg/kg普乐沙福(AMD3100)诱导动员。Gro-βT和普乐沙福的组合(与单独的普乐沙福相比)导致CD34dim细胞的动员增强。
图17是对来自未处理的恒河猴(“未动员的”)、用静脉内施用450μg/kg Gro-βT且皮下施用1mg/kg普乐沙福处理的恒河猴(“Gro-βT+普乐沙福”)、用皮下施用1mg/kg普乐沙福处理的恒河猴(“普乐沙福”)和用皮下施用50μg/kg(q.d.x 5)G-CSF处理的恒河猴(“G-CSF”)的外周血中CD34dim细胞的浓度进行定量的图。在使用Gro-βT加普乐沙福动员的血液中CD34dim细胞以显著更高的浓度存在。
图18是描绘了未动员的细胞和由G-CSF动员的移植物、Gro-βT和AMD3100动员的移植物以及单独的AMD3100动员的移植物的组成的图。如示出的，与使用G-CSF动员的移植物相比，用Gro-βT和AMD3100动员的移植物显示出CD34dim细胞的3倍增加，且T细胞的3倍增加。
图19提供了这样的图，所述图显示在培养4天后，如通过羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色测量的，Gro-βT和AMD3100动员的CD34dim细胞抑制T细胞增殖。“珠”指示使用抗CD2/CD3/CD28包被的微珠刺激T细胞。
图20提供了存活曲线，该存活曲线显示到第24天，与移植了AMD3100动员的外周血的5/16小鼠死于aGVHD、移植了G-CSF动员的PBMC的3/16小鼠死于aGVHD以及移植了Gro-βT和AMD3100动员的PBMC的没有一只小鼠死于aGVHD相比，所有移植了未动员的PBMC的小鼠(13/13)都死于aGVHD。在移植后第60天，移植了Gro-βT和AMD3100的15/16小鼠仍然存活，而移植了AMD3100动员的PBMC的仅10/16小鼠以及移植了G-CSF动员的PBMC的仅11/16小鼠仍然存活。p<0.0001(将Gro-βT和AMD3100与未动员的进行比较)和p<0.05(将Gro-βT和AMD3100与单独的AMD3100进行比较)。
图21A示出了移植了未动员的PBMC、用Gro-βT和普乐沙福(即，AMD3100)动员的PBMC、用单独的普乐沙福动员的PBMC和用单独的G-CSF动员的PBMC后第14天小鼠中的恒河猴(rhesus)CD45+CD3+ T细胞数目。图21B示出了移植了未动员的PBMC、Gro-βT和普乐沙福(即，AMD3100)动员的PBMC以及Gro-βT和普乐沙福动员的已经耗尽CD34dim细胞的PBMC后第14天小鼠中的T细胞数目。图21C提供了移植了未动员的PBMC、Gro-βT和AMD3100动员的PBMC以及Gro-βT和AMD3100动员的已经耗尽CD34dim细胞的PBMC的小鼠的存活曲线。
详细描述
本发明提供了用于动员受试者中的造血干细胞和祖细胞的组合物和方法。例如，受试者可以是造血干细胞和祖细胞供体(即供体)，诸如哺乳动物供体(例如，人类供体)。本文描述的组合物和方法另外地可以用于治疗患者(诸如人类患者)的一种或更多种干细胞紊乱。使用本文描述的组合物和方法，如本文描述的C-X-C趋化因子受体2型(CXCR2)激动剂，诸如Gro-β或其变体，诸如截短形式的Gro-β(例如，Gro-βT)，任选地与C-X-C趋化因子受体4型(CXCR4)拮抗剂，诸如1,1′-[1,4-亚苯基双(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷或其变体组合，可以以足以动员造血干细胞和祖细胞的量施用至如本文描述的供体。本文描述的组合物和方法能够将造血干细胞和祖细胞从供体内的干细胞小生境动员到循环外周血中，同时降低造血谱系的其他细胞(诸如白细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞)的动员。因此，本文描述的组合物和方法使得能够选择性动员供体中的造血干细胞和祖细胞，所述造血干细胞和祖细胞然后可以从供体分离用于治疗用途。
本发明部分地基于这样的发现，即以特定剂量施用CXCR2激动剂，诸如Gro-β、Gro-βT或其变体，任选地与CXCR4拮抗剂，诸如普乐沙福或其药学上可接受的盐组合，可以提供重要临床益处，即，动员相对于其他细胞类型(诸如白细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞)富含造血干细胞的细胞群体。这种能力是有利的，因为这些其他细胞类型对于向经历造血干细胞移植疗法的人类患者施用可能是不期望的。因此，使用本文描述的组合物和方法产生的动员的造血干细胞和祖细胞的群体特别适于造血干细胞移植疗法。
动员后，可以分离造血干细胞或祖细胞用于离体扩增和/或治疗用途。在一些实施方案中，在收集动员的造血干细胞和/或祖细胞后，抽取的细胞可以被输注到患者，诸如供体或另一受试者(例如，与供体HLA匹配的受试者)中，用于治疗造血系统的一种或更多种病理。另外地或可选地，可以抽取动员的细胞，并且然后进行离体扩增，诸如通过使细胞与芳香烃受体拮抗剂接触来进行，以便产生具有足够用于移植的数量的细胞的造血干细胞的群体。
如本文描述的，造血干细胞能够分化成造血谱系中的众多细胞类型，并且因此可以被施用至患者以便填充或再填充患者中有缺陷或缺乏的细胞类型。患者可以是例如罹患一种或更多种血液紊乱诸如自身免疫性疾病、癌症、血红蛋白病或其他造血系统病理并且因此需要造血干细胞移植的患者。因此，本发明提供了治疗多种造血系统状况的方法，所述造血系统状况诸如尤其是镰状细胞性贫血症、地中海贫血、范可尼贫血、威斯科特-奥尔德里奇综合征、腺苷脱氨酶缺乏-重症联合免疫缺陷、异染性脑白质营养不良症、Diamond-Blackfan贫血和Schwachman-Diamond综合征、人类免疫缺陷病毒感染和获得性免疫缺陷综合征，以及癌症和自身免疫性疾病。
接下来的部分提供了对CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂的描述，所述CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂可以被施用至供体，以便诱导造血干细胞或祖细胞的群体从干细胞小生境向外周血中的动员，随后可以从外周血分离细胞并将其输注到患者中，用于治疗例如本文描述的一种或更多种干细胞紊乱，诸如癌症、自身免疫性疾病或代谢紊乱。以下部分另外地描述了确定用CXCR2激动剂和/或CXCR拮抗剂动员的细胞的群体是否适于释放用于离体扩增和/或治疗应用的方法。
定义
如本文使用的，术语“约”是指高于或低于所描述的值的10％以内的值。例如，术语“约5nM”指示从4.5nM至5.5nM的范围。
如本文使用的，术语“获得(acquire)”和“获得(acquiring)”意指获得对物理实体或值诸如数值的占有，直接获得或间接获得物理实体或值。“直接获得”意指进行获得物理实体或值的过程(例如，对样品进行测定或测试或者分析样品)。“间接获得”是指从另一方或来源(例如，直接获得物理实体或值的第三方实验室)接收物理实体或值。直接获得物理实体包括进行例如，分析样品，诸如从已经经历或正在经历本文描述的造血干细胞动员方案的供体分离的造血细胞的样品的过程。直接获得值包括对样品或另一种物质进行诸如测定的过程，例如，进行分析过程，该分析过程包括确定样品中造血干细胞的数量、造血干细胞与造血谱系中另一种类型细胞的比率、或造血干细胞在样品中细胞总数中的频率。
如本文使用的，术语“亲和力”是指两种或更多种分子，诸如两种或更多种蛋白(例如，如本文描述的金属蛋白酶及其内源抑制剂)之间的非共价相互作用的强度。亲和力可以定量表示为，例如，平衡解离常数(Kd)，或者，在结合配偶体之一是酶的情况下，表示为抑制常数(Ki)。结合亲和力可以使用标准技术来确定，诸如尤其是酶联免疫吸附测定(ELISA)、表面等离子体共振测定和等温滴定量热测定(isothermal titration calorimetryassays)。
如本文使用的，术语“抗体”是指与特定抗原特异性结合或与特定抗原免疫反应的免疫球蛋白分子，并且包括多克隆、单克隆、遗传工程和其他方式修饰形式的抗体，包括但不限于嵌合抗体、人源化抗体、异源缀合抗体(例如，双特异性抗体、三特异性抗体和四特异性抗体、双体、三体和四体(tetrabody))和抗体的抗原结合片段，包括例如Fab'、F(ab')2、Fab、Fv、rlgG和scFv片段。除非另外指示，否则术语“单克隆抗体”(mAb)意在包括能够与靶蛋白特异性结合的完整分子以及抗体片段(包括，例如，Fab和F(ab')2片段)二者。如本文使用的，Fab和F(ab')2片段是指缺乏完整抗体的Fc片段的抗体片段。本文描述了这些抗体片段的实例。
如本文使用的术语“抗原结合片段”是指抗体的一个或更多个片段，其保留与靶抗原特异性结合的能力。抗体的抗原结合功能可以通过全长抗体的片段进行。抗体片段可以是，例如，Fab、F(ab')2、scFv、双体、三体、亲和体(affibody)、纳米抗体、适配体或结构域抗体。术语抗体的“抗原结合片段”所涵盖的结合片段的实例包括但不限于：(i)Fab片段，由VL结构域、VH结构域、CL结构域和CH1结构域组成的单价片段；(ii)F(ab’)2片段，含有通过在铰链区的二硫桥连接的两个Fab片段的二价片段；(iii)由VH结构域和CH1结构域组成的Fd片段；(iv)由抗体的单臂的VL结构域和VH结构域组成的Fv片段，(v)包括VH结构域和VL结构域的dAb；(vi)由VH结构域组成的dAb片段(参见，例如，Ward等人(1989)Nature 341:544-546)；(vii)由VH结构域或VL结构域组成的dAb；(viii)分离的互补决定区(CDR)；和(ix)两种或更多种(例如，两种、三种、四种、五种或六种)分离的CDR的组合，所述分离的CDR可以任选地通过合成的接头连接。此外，尽管Fv片段的两个结构域VL和VH由单独的基因编码，但它们可以使用重组方法通过接头连接，该接头使得它们能够成为单个蛋白链，其中VL区和VH区配对形成单价分子(称为单链Fv(scFv)；参见，例如，Bird等人(1988)Science 242:423-426和Huston等人(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85:5879-5883)。这些抗体片段可以使用本领域技术人员已知的常规技术获得，并且可以以与完整抗体相同的方式筛选这些片段的效用。抗原结合片段可以通过重组DNA技术、完整免疫球蛋白的酶促或化学裂解，或在某些情况下，通过本领域已知的化学肽合成程序产生。
如本文使用的，术语“双特异性抗体”是指例如能够结合至少两种不同抗原的单克隆抗体，通常是人类或人源化抗体。
如本文使用的，术语“CD34dim细胞”是指细胞的一种群体，其中群体的至少一部分表达标志物CD34、CD11b和CD45，且基本上不表达标志物CD3、CD8或CD20，其中CD34和CD45以相对低的水平表达。这种细胞群体表现出单核细胞的特征，例如，抑制同种异体反应性T淋巴细胞增殖的能力。(D’Aveni等人(2015)Science Translational Medicine 7(281):1-12。在一些实施方案中，CD34dim细胞的群体可以是CD14+。
当观察流式细胞术图时，本领域技术人员可以容易地将CD34dim细胞群识别为是CD34+，但具有介于被检查的细胞群体中荧光(例如自发荧光)的基本水平和CD34+亮细胞(例如造血干细胞和/或CD34+CD90+细胞)群体的亮度之间的亮度的细胞的群体。例如，在某些实施方案中，CD34dim细胞群体表现出介于CD34+亮细胞(例如造血干细胞)群体的5％和95％之间的亮度，但比CD34-细胞群体更亮。
在某些实施方案中，CD34dim细胞表现出介于CD34+亮细胞(例如造血干细胞)的10％和90％、10％和80％、10％和70％、10％和60％、10％和50％、10％和40％、10％和30％、10％和20％、20％和90％、20％和80％、20％和70％、20％和60％、20％和50％、20％和40％、20％和30％、30％和90％、30％和80％、30％和70％、30％和60％、30％和50％、30％和40％、40％和90％、40％和80％、40％和70％、40％和60％、40％和50％、50％和90％、50％和80％、50％和70％、50％和60％、60％和90％、60％和80％、60％和70％、70％和90％、70％和80％或80％和90％之间的亮度，但比CD34-细胞更亮。在某些实施方案中，CD34dim细胞比CD34-细胞亮至少5％、亮至少10％、亮至少20％或亮至少30％，但不如CD34+亮细胞(例如造血干细胞)亮。
在某些实施方案中，通过使用磁珠而不是荧光的流式细胞术来鉴定细胞样品中的CD34dim细胞。磁珠将选择性地拉低(pull down)CD34+亮细胞，在细胞样品中留下CD34dim细胞。
在某些实施方案中，通过测量由细胞表达的CD34的拷贝数来鉴定CD34dim细胞。例如，CD34dim细胞可以表现出与CD34+亮细胞(例如，造血干细胞)相比介于CD34的拷贝数的5％至95％之间，或与CD34+亮细胞(例如，造血干细胞)相比介于CD34的拷贝数的10％和90％、10％和80％、10％和70％、10％和60％、10％和50％、10％和40％、10％和30％、10％和20％、20％和90％、20％和80％、20％和70％、20％和60％、20％和50％、20％和40％、20％和30％、30％和90％、30％和80％、30％和70％、30％和60％、30％和50％、30％和40％、40％和90％、40％和80％、40％和70％、40％和60％、40％和50％、50％和90％、50％和80％、50％和70％、50％和60％、60％和90％、60％和80％、60％和70％、70％和90％、70％和80％或80％和90％之间。
如本文使用的，术语“互补决定区”(CDR)是指在抗体的轻链和重链可变结构域中均发现的高变区。可变结构域的更高度保守的部分称为框架区(FR)。描绘抗体的高变区的氨基酸位置可以根据背景和本领域已知的各种定义而变化。可变结构域内的一些位置可以被视为混合高变位置，因为这些位置可以根据一组标准被认为是在高变区内，而根据不同组标准被认为是在高变区外。这些位置中的一个或更多个也可以见于扩展的高变区中。本文描述的抗体可以在这些混合高变位置中含有修饰。天然重链和轻链的可变结构域各自含有通过三个CDR连接的四个框架区，其主要采用β-折叠构型，该CDR形成连接β-折叠结构的环，并且在一些情况下形成β-折叠结构的一部分。每个链中的CDR通过框架区以FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4的顺序紧密靠近在一起，并且与来自其他抗体链的CDR一起促成抗体的靶结合位点的形成(参见Kabat等人,Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest,National Institute of Health,Bethesda,MD.,1987)。如本文使用的，除非另外指示，否则根据Kabat等人的免疫球蛋白氨基酸残基编号系统进行免疫球蛋白氨基酸残基的编号。
如本文在向受试者施用一种或更多种剂的上下文中使用的，术语“施用完成”是指向受试者整体(in their entirety)施用一种或更多种剂的时间点。在一些实施方案中，可以在一段时间内，通过例如静脉内注射或皮下注射，向受试者施用如本文描述的剂，诸如CXCR4拮抗剂(例如，普乐沙福或其变体)和/或CXCR2激动剂(例如，Gro-β或其变体或截短物(truncation)，诸如Gro-βT)。在向受试者整体施用处方剂量的剂后，认为该剂已经“完成施用”。在向受试者施用多种剂，诸如CXCR4拮抗剂(例如，普乐沙福或其变体)和CXCR2激动剂(例如，Gro-β或其变体或截短物，诸如Gro-βT)二者的情况下，在特定方案中向受试者整体施用处方剂量的所有剂后，认为这些剂已经“完成施用”。
如本文使用的，术语“保守突变”、“保守取代”或“保守氨基酸取代”是指将一个或更多个氨基酸取代为一个或更多个表现出类似的物理化学特性(诸如极性、静电荷和空间体积)的不同氨基酸。下表1总结了20种天然存在的氨基酸中的每一种的这些特性。
表1.天然存在的氨基酸的代表性物理化学特性
Figure BDA0002621915340001031
Figure BDA0002621915340001041
Figure BDA0002621915340001042
基于A3中的体积：50-100是小的，100-150是中等的，150-200是大的，并且>200是庞大的
从该表应认识到，保守氨基酸家族包括，例如，(i)G、A、V、L、I、P和M；(ii)D和E；(iii)C、S和T；(iv)H、K和R；(v)N和Q；以及(vi)F、Y和W。因此，保守突变或取代是将一个氨基酸取代为同一氨基酸家族的成员的突变或取代(例如，Ser取代Thr或Lys取代Arg)。
如本文使用的，“CRU(竞争性再填充单位(competitive repopulating unit))”是指在体内移植后可被检测到的长期植入的干细胞的测量单位。
如本文使用的，术语“供体”是指在将一种或更多种细胞或其后代施用到接受者之前从其分离细胞的受试者，诸如哺乳动物受试者(例如，人类受试者)。一种或更多种细胞可以是例如造血干细胞或祖细胞的群体。
如本文使用的，术语“双体”是指含有两条多肽链的二价抗体，其中每条多肽链包含通过接头连接的VH结构域和VL结构域，该接头太短(例如，包含五个氨基酸的接头)而不允许同一肽链上的VH结构域和VL结构域的分子内缔合。该构型迫使每个结构域与另一条多肽链上的互补结构域配对，以便形成同二聚体结构。因此，术语“三体”是指含有三条肽链的三价抗体，肽链中每个含有通过接头连接的一个VH结构域和一个VL结构域，该接头是极短的(例如，包含1-2个氨基酸的接头)而不允许在同一肽链内VH结构域和VL结构域的分子内缔合。为了折叠成它们的天然结构，以这种方式配置的肽通常是三聚化的，以便将相邻肽链的VH结构域和VL结构域定位成在空间上彼此接近(参见，例如，Holliger等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:6444-48)。
如本文使用的，关于基因的术语“破坏”是指防止功能基因产物的形成。基因产物仅在其履行其正常(野生型)功能时才是功能的。基因的破坏阻止了由该基因编码的功能因子的表达，并且包括对由该基因和/或该基因在动物中表达所必需的启动子和/或操纵基因编码的序列中的一个或更多个碱基的插入、缺失或取代。被破坏的基因可以通过例如从动物基因组中去除基因的至少一部分、改变基因以阻止由基因编码的功能因子的表达、干扰RNA或外源基因显性负效因子的表达来破坏。US 8,518,701；US 2010/0251395；和US 2012/0222143中详细描述了遗传修饰造血干/祖细胞的材料和方法，其每一个的公开内容通过引用以其整体并入本文(在冲突的情况下，以本说明书为准)。
本领域已知的多种技术可以用于使基因失活以制造敲除动物和/或将核酸构建体引入动物中以产生创建者动物(founder animals)和制造动物品系，在该动物中敲除或核酸构建体被整合到基因组中。这些技术包括但不限于原核显微注射(美国专利第4,873,191号)、到生殖细胞系(germ lines)的逆转录病毒介导的基因转移(Van der Putten等人(1985)Proc.Natl.Acad.Sci.USA,82:6148-6152)、基因靶向胚胎干细胞(Thompson等人(1989)Cell,56:313-321)、胚胎电穿孔(Lo(1983)Mol.Cell.Biol.,3:1803-1814)、精子介导的基因转移(Lavitrano等人(2002)Proc.Natl.Acad.Sci.USA,99:14230-14235；Lavitrano等人(2006)Reprod.Fert.Develop.,18:19-23)、以及体细胞，诸如卵丘细胞或乳腺细胞、或成人、胎儿或胚胎干细胞的体外转化，随后进行核移植(Wilmut等人(1997)Nature,385:810-813；和Wakayama等人(1998)Nature,394:369-374)。原核显微注射、精子介导的基因转移和体细胞核转移是特别有用的技术。基因组修饰的动物是其所有细胞包括其生殖细胞系都经过遗传修饰的动物。当使用产生在其遗传修饰呈嵌合体(mosaic)的动物的方法时，动物可以是近交的，并且可以选择基因组修饰的后代(progeny)。例如，如果其细胞在胚泡状态被修饰，克隆可以用来制造嵌合体动物，或者当单细胞被修饰时，基因组修饰可以发生。根据使用的具体方法，被修饰使其没有性成熟的动物可以是纯合的或杂合的。如果通过敲除修饰使特定基因失活，则通常将要求纯合性。如果通过RNA干扰或显性负效策略使特定基因失活，则杂合性通常就足够了。
如本文使用的，“双重可变结构域免疫球蛋白”(“DVD-Ig”)是指经由接头组合两种单克隆抗体的靶结合可变结构域以产生四价双重靶向单一剂的抗体(参见，例如，Gu等人(2012)Meth.Enzymol.,502:25-41)。
如本文使用的，术语“内源性”描述在特定生物体诸如人类患者中天然存在的物质，诸如分子、细胞、组织或器官(例如，造血干细胞或造血谱系细胞，诸如巨核细胞、凝血细胞、血小板、红细胞、肥大细胞、原粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、小胶质细胞、粒细胞、单核细胞、破骨细胞、抗原呈递细胞、巨噬细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞、T淋巴细胞或B淋巴细胞)。
如本文使用的，术语“植入潜力”用于指造血干细胞和祖细胞再填充到组织中的能力，无论这样的细胞是天然循环的还是通过移植提供。该术语涵盖围绕或导致植入的所有事件，诸如细胞的组织归巢和细胞在感兴趣组织内的定植。使用如本领域技术人员已知的任何临床上可接受的参数或通过疾病进展、造血干细胞和祖细胞的存活或接受者的存活来评价受试者的进展，植入效率或植入率可被评价或定量，并且可以包括例如评估竞争性再填充单位(CRU)、标志物在干细胞归巢至、定植于或变成植入到其中的一个或更多个组织(tissue(s))中的掺入或表达。植入也可以通过测量移植后期期间外周血中的白细胞计数来确定。植入还可以通过测量骨髓抽出物样品中供体细胞对骨髓细胞的恢复来评估。
如本文使用的，术语“外源性”描述在特定生物体诸如人类患者中并不天然存在的物质，诸如分子、细胞、组织或器官(例如，造血干细胞或造血谱系细胞，诸如巨核细胞、凝血细胞、血小板、红细胞、肥大细胞、原粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、小胶质细胞、粒细胞、单核细胞、破骨细胞、抗原呈递细胞、巨噬细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞、T淋巴细胞或B淋巴细胞)。外源性物质包括从外部来源提供至生物体的那些物质或从外部来源提取的经培养的物质。
如本文使用的，术语“框架区”或“FW区”包括与抗体或其抗原结合片段的CDR相邻的氨基酸残基。FW区残基可以存在于，例如尤其是人类抗体、人源化抗体、单克隆抗体、抗体片段、Fab片段、单链抗体片段、scFv片段、抗体结构域和双特异性抗体中。
如本文使用的，术语“造血祖细胞”包括能够分化成造血系统的几种细胞类型(包括但不限于尤其是粒细胞、单核细胞、红细胞、巨核细胞、B细胞和T细胞)的多能(pluripotent)细胞。造血祖细胞属于造血细胞谱系，并且通常不自我更新。造血祖细胞可以通过例如细胞表面抗原的表达模式来鉴定，并且包括具有以下免疫表型的细胞：Lin-KLS+Flk2-CD34+。造血祖细胞包括短期造血干细胞、专能(multi-potent)祖细胞、常见髓样祖细胞、粒细胞-单核细胞祖细胞和巨核细胞-红细胞祖细胞。造血祖细胞的存在可以在功能上确定，例如，通过例如在完整的甲基纤维素测定中检测集落形成单位细胞，或者通过使用本文描述和本领域已知的流式细胞术和细胞分选测定来检测细胞表面标志物在表型上确定。
如本文使用的，术语“造血干细胞”(“HSC”)是指具有自我更新和分化成含有不同谱系细胞的成熟血细胞的能力的未成熟的血细胞，所述谱系细胞包括但不限于粒细胞(例如，早幼粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞)、红细胞(例如，网织红细胞、红细胞)、凝血细胞(例如，原巨核细胞、产生血小板的巨核细胞、血小板)、单核细胞(例如，单核细胞、巨噬细胞)、树突状细胞、小胶质细胞、破骨细胞和淋巴细胞(例如，NK细胞、B细胞和T细胞)。这样的细胞可以包括CD34+细胞。CD34+细胞是表达CD34细胞表面标志物的未成熟细胞。在人类中，CD34+细胞被认为包括具有上述定义的干细胞特性的细胞的亚群，而在小鼠中，HSC是CD34-。此外，HSC还指长期再填充的HSC(LT-HSC)和短期再填充的HSC(ST-HSC)。基于功能潜力和细胞表面标志物表达，LT-HSC和ST-HSC是分化的。例如，人类HSC是CD34+、CD38-、CD45RA-、CD90+、CD49F+和lin-(对于成熟谱系标志物(包括CD2、CD3、CD4、CD7、CD8、CD10、CD11B、CD19、CD20、CD56、CD235A)呈阴性)。在小鼠中，骨髓LT-HSC是CD34-、SCA-1+、C-kit+、CD135-、Slamfl/CD150+、CD48-和lin-(对于成熟谱系标志物(包括Ter119、CD11b、Gr1、CD3、CD4、CD8、B220、IL7ra)呈阴性)，而ST-HSC是CD34+、SCA-1+、C-kit+、CD135-、Slamfl/CD150+和lin-(对于成熟谱系标志物(包括Ter119、CD11b、Gr1、CD3、CD4、CD8、B220、IL7ra)呈阴性)。此外，在内稳态条件下，ST-HSC比LT-HSC更少地静止且更多地增殖。然而，LT-HSC具有更大的自我更新潜力(即，它们在整个成年期存活，并且可以通过连续接受者连续移植)，而ST-HSC具有有限的自我更新(即，它们在仅有限的时间段内存活，并且不具备连续移植潜力)。这些HSC中的任一种都可以用于本文所描述的方法中。ST-HSC特别有用，因为它们是高度增殖性的，并且因此可以更快地产生分化的后代。
如本文使用的，术语“造血干细胞功能潜力”是指造血干细胞的功能特性，其包括1)专能性(multi-potency)(其是指分化成多种不同血液谱系细胞的能力，该血液谱系细胞包括但不限于粒细胞(例如，早幼粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞)、红细胞(例如，网织红细胞、红细胞)、凝血细胞(例如，原巨核细胞、产生血小板的巨核细胞、血小板)、单核细胞(例如，单核细胞、巨噬细胞)、树突状细胞、小胶质细胞、破骨细胞和淋巴细胞(例如，NK细胞、B细胞和T细胞))，2)自我更新(其是指造血干细胞产生与母细胞具有等同潜力的子代细胞的能力，并且此外该能力可以在个体的整个寿命中反复发生而不会衰竭)，以及3)造血干细胞或其后代被重新引入到移植物接受者的能力，届时它们归巢至造血干细胞小生境，并且重建富有成效的和持续的血细胞生成。
如本文使用的，术语“主要组织相容性复合体抗原”(“MHC”，在人类上下文中也称为“人类白细胞抗原”(“HLA”))是指在细胞表面上表达的赋予细胞独特抗原性身份(identity)的蛋白。MHC/HLA抗原是被T细胞和NK细胞识别为来源于与免疫效应细胞相同的造血干细胞来源(“自身”)或来源于另一种造血重建细胞来源(“非自身”)的靶分子。HLA抗原分为两大类：HLA I类和HLA II类。HLA I类抗原(人类中的A、B和C)使每个细胞都可被识别为“自身”，而HLA II类抗原(人类中的DR、DP和DQ)参与淋巴细胞和抗原呈递细胞之间的反应。二者都与移植器官的排斥有关。HLA基因系统的一个重要方面是其多态性。每个基因，MHC I类(A、B和C)和MHC II类(DP、DQ和DR)存在于不同的等位基因中。例如，两个不相关的个体可能分别携带I类HLA-B基因B5和Bw41。等位基因产物在α结构域和/或β结构域的一个或更多个氨基酸上不同。使用表达I类分子和II类分子的白细胞，使用大量的特异性抗体或核酸试剂对个体的HLA单体型进行分型。通常用于HLA分型的基因是六种MHC I类和II类蛋白，HLA-A、HLA-B和HLA-DR的每一种有两种等位基因。HLA基因聚簇在染色体位置6p21上存在的“超级基因座”中，该基因座编码6个经典的移植HLA基因和至少132种蛋白编码基因，这些基因在免疫系统的调节以及其他一些基本的分子和细胞过程中具有重要作用。完整基因座测量为约3.6Mb，具有至少224个基因的基因座。这种聚簇的一个效果是“单体型”，即存在于单个染色体上的从一个亲本遗传的等位基因组倾向于作为一个群组(group)被遗传。从每个亲本遗传的等位基因组形成单体型，其中一些等位基因倾向于缔合在一起。鉴定患者的单体型可以有助于预测找到匹配供体的概率，并有助于开发检索策略，因为一些等位基因和单体型比其他等位基因和单体型更常见，并且它们在不同种族和民族群体中的分布频率不同。
如本文使用的，术语“HLA匹配的”是指这样的供体-接受者配对，其中供体和接受者之间没有HLA抗原不匹配，诸如供体向需要造血干细胞移植疗法的接受者提供造血干细胞移植物。由于内源性T细胞和NK细胞不太可能将进入的移植物识别为外来的，并且因此不太可能针对移植物产生免疫应答，因此，HLA匹配(即所有6种等位基因都匹配)的供体-接受者对具有降低的移植物排斥风险。
如本文使用的，术语“HLA-不匹配的”是指这样的供体-接受者对，其中供体和接受者之间至少一种HLA抗原，特别是关于HLA-A、HLA-B和HLA-DR的抗原是错配的，诸如供体向需要造血干细胞移植疗法的接受者提供造血干细胞移植物。在一些实施方案中，一种单体型是匹配的而另一种是不匹配的。HLA不匹配的供体-接受者对相对于HLA匹配的供体-接受者对可能具有增加的移植物排斥风险，因为在HLA不匹配的供体-接受者对的情况下，内源性T细胞和NK细胞更有可能将进入的移植物识别为外来的，并且因此这样的T细胞和NK细胞更有可能针对移植物产生免疫应答。
如本文使用的，术语“人类抗体”是指这样的抗体，其中蛋白的基本上每个部分(例如，所有CDR、框架区、CL结构域、CH结构域(例如，CH1、CH2、CH3)、铰链和VL结构域和VH结构域)在人类中基本上是非免疫原性的，具有仅很小的序列改变或变异。人类抗体可以在人类细胞中产生(例如，通过重组表达)或由能够表达功能重排的人类免疫球蛋白(诸如重链和/或轻链)基因的非人类的动物或原核或真核细胞产生。当人类抗体是单链抗体时，它可以包括在天然人类抗体中不存在的接头肽。例如，Fv可以含有连接重链的可变区和轻链的可变区的接头肽，诸如二至约八个甘氨酸或其他氨基酸残基。这样的接头肽被认为是人类来源的。人类抗体可以通过本领域已知的多种方法制备，所述方法包括使用来源于人类免疫球蛋白序列的抗体文库的噬菌体展示方法。人类抗体还可以使用不能表达功能性内源免疫球蛋白但可表达人类免疫球蛋白基因的转基因小鼠来产生(参见，例如，PCT公布第WO 1998/24893号；第WO 1992/01047号；第WO 1996/34096号；第WO 1996/33735号；美国专利第5,413,923号；第5,625,126号；第5,633,425；第5,569,825号；第5,661,016号；第5,545,806号；第5,814,318号；第5,885,793号；第5,916,771号；和第5,939,598号)。
如本文使用的，术语“人源化”抗体是指含有来源于非人类免疫球蛋白的最小序列的非人类抗体。通常，人源化抗体含有至少一个并且通常是两个可变结构域的基本上全部，其中全部或基本上全部CDR区对应于非人类免疫球蛋白的那些。全部或基本上全部FW区也可为人类免疫球蛋白序列的那些。人源化抗体还可以含有至少一部分免疫球蛋白恒定区(Fc)，通常是人类免疫球蛋白共有序列的恒定区。抗体人源化的方法是本领域已知的，并且已经在以下中描述：例如，Riechmann等人(1988)Nature 332:323-7；美国专利第5,530,101号；第5,585,089号；第5,693,761号；第5,693,762号；和第6,180,370号。
如本文使用的，“需要”造血干细胞移植物的患者包括在一种或更多种血细胞类型方面表现缺乏或有缺陷的患者，以及患有干细胞紊乱、自身免疫性疾病、癌症或本文描述的其他病理的患者。造血干细胞通常表现出：1)专能性，并且因此可以分化成多种不同的血液谱系细胞，包括但不限于粒细胞(例如，早幼粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞)、红细胞(例如，网织红细胞、红细胞)、凝血细胞(例如，原巨核细胞、产生血小板的巨核细胞、血小板)、单核细胞(例如，单核细胞、巨噬细胞)、树突状细胞、小胶质细胞、破骨细胞和淋巴细胞(例如，NK细胞、B细胞和T细胞)，2)自我更新并且因此可以产生与母细胞具有等同潜力的子代细胞，以及3)被重新引入移植物接受者的能力，届时它们归巢至造血干细胞小生境并且重建富有成效的和持续的血细胞生成。因此，造血干细胞可以被施用至在造血谱系的一种或更多种细胞类型方面有缺陷或缺乏造血谱系的一种或更多种细胞类型的患者，以便在体内重构有缺陷或缺乏的细胞的群体。例如，患者可以罹患癌症，并且缺陷可以由施用选择性或非特异性地耗尽癌性细胞群体的化学治疗剂或其他药物而引起。另外地或可选地，患者可能罹患血红蛋白病(例如，非恶性血红蛋白病)，诸如镰状细胞性贫血、地中海贫血、范可尼贫血、再生障碍性贫血和威斯科特-奥尔德里奇综合征。受试者可以是罹患以下的受试者：腺苷脱氨酶症重症联合免疫缺陷(ADA SCID)、HIV/AIDS、异染性脑白质营养不良、Diamond-Blackfan贫血和Schwachman-Diamond综合征。受试者可以患有或受以下影响：遗传性血液紊乱(例如，镰状细胞性贫血)或自身免疫性紊乱。另外地或可选地，受试者可以患有或受以下影响：恶性肿瘤，诸如神经母细胞瘤或血液学癌症。在一些实施方案中，受试者可以患有白血病、淋巴瘤或骨髓瘤。在一些实施方案中，受试者患有急性骨髓性白血病、急性淋巴性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴性白血病、多发性骨髓瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤。在一些实施方案中，受试者患有骨髓增生异常综合征。在一些实施方案中，受试者患有自身免疫性疾病，诸如硬皮病、多发性硬化、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、1型糖尿病或本文所描述的另一种自身免疫性病理。在一些实施方案中，受试者需要嵌合抗原受体T细胞(CART)疗法。在一些实施方案中，受试者患有或以其他方式受代谢贮积紊乱影响。受试者可以罹患或者以其他方式受选自由以下组成的组的代谢紊乱的影响：糖原贮积病、黏多糖贮积病、高歇氏病、赫尔勒病、鞘脂贮积病、异染性脑白质营养不良，或可以受益于本文所公开的治疗和疗法的任何其他疾病或紊乱，所述其他疾病或紊乱包括但不限于重症联合免疫缺陷、Wiscott-Aldrich综合征、高免疫球蛋白M(IgM)综合征、切东病、遗传性淋巴组织细胞增多症、骨硬化病、成骨不全症、贮积病、重型地中海贫血、镰状细胞病、系统性硬化、系统性红斑狼疮、多发性硬化、青少年类风湿性关节炎和在"BoneMarrow Transplantation for Non-Malignant Disease,"ASH Education Book,1:319-338(2000)”中描述的疾病或紊乱，其公开内容在其涉及可以通过施用造血干细胞移植疗法来治疗的病理时通过引用以其整体并入本文。另外地或可选地，“需要”造血干细胞移植的患者可以是罹患或未罹患前述病理之一但是仍然表现出以下的患者：造血谱系内一种或更多种内源性细胞类型，诸如巨核细胞、凝血细胞、血小板、红细胞、肥大细胞、原粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、小胶质细胞、粒细胞、单核细胞、破骨细胞、抗原呈递细胞、巨噬细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞的降低的水平(例如，与其他健康受试者的水平相比)。例如，除其他程序以外，通过本领域已知的流式细胞术和荧光激活细胞分选(FACS)方法，本领域技术人员可以容易地确定一个人的一种或更多种前述细胞类型或其他血细胞类型的水平相对于其他健康受试者是否降低。
如本文使用的，术语“白细胞”是指一组异质的有核血细胞类型，并且不包括红细胞和血小板。白细胞可以分为两大类：多形核细胞，其包括嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞，以及单核细胞，其包括淋巴细胞和单核细胞。多形核细胞含有许多胞质颗粒和多叶核(multilobed nucleus)且包括以下几种：嗜中性粒细胞，其通常为变形虫状，吞噬作用的，并且被碱性染料和酸性染料二者染色；以及嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞，其分别含有被酸性染料和碱性染料染色的胞质颗粒。
如本文使用的，术语“淋巴细胞”是指参与免疫应答产生的单核白细胞。通常，淋巴细胞包括B淋巴细胞、T淋巴细胞和NK细胞。
如本文使用的，术语“动员(mobilize)”和“动员(mobilization)”是指造血干细胞或祖细胞的群体从干细胞小生境(诸如受试者骨髓)释放到外周血循环中的过程。造血干细胞和祖细胞的动员可以通过，例如，评估从受试者分离的外周血样品中造血干细胞或祖细胞的数量或浓度来监测。例如，在向受试者施用造血干细胞或祖细胞动员方案后，可以从受试者抽取外周血样品，并随后可以评估外周血样品中造血干细胞或祖细胞的数量或浓度。动员方案可以包括，例如，CXCR4拮抗剂，诸如本文描述的CXCR4拮抗剂(例如，普乐沙福或其变体)，和CXCR2激动剂，诸如本文描述的CXCR2激动剂(例如，Gro-β或其变体，诸如Gro-β的截短物，例如，Gro-βT)。可以将施用动员方案后从受试者分离的外周血样品中造血干细胞或祖细胞的数量或浓度与施用动员方案前从受试者分离的外周血样品中造血干细胞或祖细胞的数量或浓度进行比较。施用动员方案后受试者外周血中造血干细胞或祖细胞的数量或浓度增加的观察，是受试者对动员方案有响应并且造血干细胞和祖细胞已经从一个或更多个干细胞小生境诸如骨髓释放到外周血液循环中的指示。在一些实施方案中，施用动员方案后受试者的外周血中造血干细胞或祖细胞的数量或浓度增加1％、100％、1,000％或更多(例如，1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、100％、200％、300％、400％、500％、600％、700％、800％、900％、1,000％或更多)的观察结果是受试者对动员方案有响应并且造血干细胞和祖细胞已经从一个或更多个干细胞小生境诸如骨髓释放到外周血液循环中的指示。用于确定造血干细胞或祖细胞的数量或浓度的方法在本文中描述，并且是本领域已知的，并且包括，例如，流式细胞术技术，该技术基于这样的细胞的抗原表达谱来定量造血干细胞或祖细胞，这在本文中描述。例如，人类HSC是CD34+、CD38-、CD45RA-、CD90+、CD49F+和lin-(对于成熟谱系标志物(包括CD2、CD3、CD4、CD7、CD8、CD10、CD11B、CD19、CD20、CD56、CD235A)呈阴性)。用于确定从受试者分离的外周血样品中造血干细胞或祖细胞的数量或浓度的另外的方法包括对样品中集落形成单位(CFU)的数目定量的测定，集落形成单位(CFU)是对活的造血干细胞或祖细胞(与适当的培养基一起孵育后产生造血干细胞或祖细胞的个体群体)的数量的量度。
如本文使用的，术语“动员量”是指在向受试者诸如哺乳动物受试者(例如，人类受试者)施用后动员造血干细胞或祖细胞的群体的一种或更多种剂的量，诸如本文描述的CXCR4拮抗剂和/或CXCR2激动剂的量(在一些实施方案中，普乐沙福或其变体，和/或Gro-β或其变体，诸如Gro-β的截短物例如Gro-βT的量)。这些剂的示例性动员量包括足以实现释放以下的群体的量：例如，从约20至约40个CD34+细胞/μL外周血，诸如从约21至约39个CD34+细胞/μL外周血、约22至约38个CD34+细胞/μL外周血、约23至约37个CD34+细胞/μL外周血、约24至约36个CD34+细胞/μL外周血、约25至约35个CD34+细胞/μL外周血、约26至约34个CD34+细胞/μL外周血、约27至约33个CD34+细胞/μL外周血、约28至约32个CD34+细胞/μL外周血或约29至约31个CD34+细胞/μL外周血(例如，约20个CD34+细胞/μL外周血、21个CD34+细胞/μL外周血、22个CD34+细胞/μL外周血、23个CD34+细胞/μL外周血、24个CD34+细胞/μL外周血、25个CD34+细胞/μL外周血、26个CD34+细胞/μL外周血、27个CD34+细胞/μL外周血、28个CD34+细胞/μL外周血、29个CD34+细胞/μL外周血、30个CD34+细胞/μL外周血、31个CD34+细胞/μL外周血、32个CD34+细胞/μL外周血、33个CD34+细胞/μL外周血、34个CD34+细胞/μL外周血、35个CD34+细胞/μL外周血、36个CD34+细胞/μL外周血、37个CD34+细胞/μL外周血、38个CD34+细胞/μL外周血、39个CD34+细胞/μL外周血、40个CD34+细胞/μL外周血或更多)。例如，CXCR2激动剂，诸如Gro-βT的动员量，包括从约50μg/kg接受者至约1mg/kg接受者，诸如从约50μg/kg至约300μg/kg、100μg/kg至约250μg/kg或约150μg/kg。CXCR4拮抗剂，诸如普乐沙福或其药学上可接受的盐的动员量，包括从约50μg/kg接受者至约500μg/kg接受者，诸如从约200μg/kg至约300μg/kg或约240μg/kg。
如本文使用的，术语“单克隆抗体”是指来源于单个克隆(包括任何真核、原核或噬菌体克隆)的抗体，而不是产生抗体的方法。
如本文使用的，术语“单核细胞”是指CD14+和CD34-外周血单核细胞(PBMC)，其通常能够在被一种或更多种外来物质诸如微生物产物活化后分化成巨噬细胞和/或树突状细胞。特别地，单核细胞可以表达升高水平的CD14表面抗原标志物，并且可以表达至少一种选自CD64、CD93、CD180、CD328(也称为唾液酸结合Ig样凝集素7或Siglec7)和CD329(唾液酸结合Ig样凝集素9或Siglec9)以及花生凝集素蛋白(PNA)的生物标志物。
如本文使用的，“肽”是指含有通过酰胺键连续结合的多于一个氨基酸残基，诸如天然存在和/或非天然氨基酸残基的单链聚酰胺。肽的实例包括全长蛋白，诸如全长天然存在的蛋白的较短片段。
如本文使用的，术语“接受者”是指接受移植物(诸如含有造血干细胞的群体的移植物)的患者。向接受者施用的移植的细胞可以是例如自体细胞、同基因细胞或同种异体细胞。
如本文使用的，术语“样品”是指从受试者采集的样本(例如，血液、血液组分(例如血清或血浆)、尿液、唾液、羊水、脑脊液、组织(例如胎盘或真皮)、胰液、绒毛膜绒毛样品和细胞)。例如，样品可以是从正在进行或已经进行本文描述的造血干细胞或祖细胞动员方案的供体抽取的外周血。
如本文使用的，术语“scFv”是指其中来自抗体的重链和轻链的可变结构域已经结合形成一条链的单链Fv抗体。scFv片段含有包括由接头间隔的抗体轻链可变区(VL)(例如，CDR-L1、CDR-L2和/或CDR-L3)和抗体重链可变区(VH)(例如，CDR-H1、CDR-H2和/或CDR-H3)的单个多肽链。连接scFv片段的VL区和VH区的接头可以是包含蛋白原(proteinogenic)氨基酸的肽接头。可以使用替代的接头以便增加scFv片段对蛋白水解降解的耐受性(例如，含有D-氨基酸的接头)，以增强scFv片段的溶解度(例如，亲水接头诸如含有聚乙二醇的接头或含有重复甘氨酸和丝氨酸残基的多肽)，以改进分子的生物物理稳定性(例如，含有形成分子内或分子间二硫键的半胱氨酸残基的接头)，或以减弱scFv片段的免疫原性(例如，含有糖基化位点的接头)。本领域普通技术人员还将理解，本文描述的scFv分子的可变区可以被修饰，使得它们的氨基酸序列与它们来源于的抗体分子的氨基酸序列不同。例如，可以在氨基酸残基处(例如，在CDR和/或框架残基中)进行导致保守取代或改变的核苷酸或氨基酸取代，以便保存或增强scFv与被对应抗体识别的抗原结合的能力。
如本文使用的，短语“干细胞紊乱”广义地指可通过将造血干细胞或祖细胞的群体植入或移植到患者体内的目标组织中来治疗或治愈的任何疾病、紊乱或状况。例如，1型糖尿病以及其他多种紊乱已被证明可以通过造血干细胞移植治愈。可以通过将造血干细胞或祖细胞输注到患者中来治疗的示例性疾病是镰状细胞性贫血、地中海贫血、范可尼贫血、再生障碍性贫血、威斯科特-奥尔德里奇综合征、ADA SCID、HIV/AIDS、异染性脑白质营养不良、Diamond-Blackfan贫血和Schwachman-Diamond综合征。可以通过移植如本文描述的造血干细胞和祖细胞治疗的另外的疾病包括血液紊乱(例如，镰状细胞性贫血)和自身免疫性紊乱，诸如硬皮病、多发性硬化、溃疡性结肠炎和克罗恩氏病。可以使用造血干细胞和祖细胞移植疗法治疗的另外的疾病包括癌症，诸如本文描述的癌症。示例性干细胞紊乱是恶性肿瘤，诸如神经母细胞瘤或血液学癌症，诸如白血病、淋巴瘤和骨髓瘤。在一些实施方案中，癌症可以是急性骨髓性白血病、急性淋巴性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴性白血病、多发性骨髓瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤。使用造血干细胞或祖细胞移植疗法可治疗的另外的疾病包括骨髓增生异常综合征。在一些实施方案中，患者患有或以其他方式受代谢贮积紊乱影响。例如，患者可以罹患或者以其他方式受选自由以下组成的组的代谢紊乱的影响：糖原贮积病、黏多糖贮积病、高歇氏病、赫尔勒病、鞘脂贮积病、异染性脑白质营养不良，或可以受益于本文公开的治疗和疗法的任何其他疾病或紊乱，并且所述其他疾病或紊乱包括但不限于重症联合免疫缺陷、Wiscott-Aldrich综合征、高免疫球蛋白M(IgM)综合征、切东病、遗传性淋巴组织细胞增多症、骨硬化病、成骨不全症、贮积病、重型地中海贫血、镰状细胞病、系统性硬化、系统性红斑狼疮、多发性硬化、青少年类风湿性关节炎和在"Bone Marrow Transplantation for Non-Malignant Disease,"ASH EducationBook,1:319-338(2000)中描述的那些疾病或紊乱，其公开内容在其涉及可以通过施用造血干细胞或祖细胞移植疗法来治疗的病理时通过引用以其整体并入本文。
如本文在造血干细胞动员的上下文中使用的，术语“干细胞小生境”是指供体诸如哺乳动物供体(例如，人类供体)内、内源造血干细胞或祖细胞存在于其中的微环境。示例性的干细胞小生境是骨髓组织。
如本文使用的，术语“受试者”和“患者”是指接受如本文描述的对特定疾病或状况的治疗的生物体，诸如人类。在一些实施方案中，需要造血干细胞移植的患者，诸如人类患者，可以接受包括造血干细胞的群体的治疗，以便治疗干细胞紊乱，诸如本文描述的癌症、自身免疫性疾病或代谢紊乱。向患者移植的造血干细胞可以是，例如，根据本文描述的组合物和方法从供体动员和抽取的造血干细胞的群体。在一些实施方案中，向患者移植的造血干细胞可以通过向供体施用CXCR4拮抗剂和/或CXCR2激动剂而在供体内动员。
如本文使用的，术语“转染”是指通常用于将外源DNA引入到原核或真核宿主细胞中的多种技术中的任一种，诸如电穿孔、脂质转染、磷酸钙沉淀、DEAE-右旋糖酐转染等。
如本文使用的，术语“治疗(treat)”或“治疗(treatment)”是指治疗性治疗，其中目的是在所治疗患者中预防或减缓(减轻)不期望的生理改变或紊乱，或者促进有益表型。有益或期望的临床结果包括但不限于在造血干细胞或祖细胞移植疗法后促进患者中外源性造血细胞的植入。在某些实施方案中，益处包括更快速地植入移植的细胞，例如，嗜中性粒细胞和血小板。例如，在某些实施方案中，使用本文描述的方法，嗜中性粒细胞恢复发生在移植后约5-20天内、移植后约5-15天内、移植后约5-10天内、移植后约7-12天内、移植后约8-12天内、移植后约9-15天内、移植后约10-15天内或移植后约10天内。在某些实施方案中，使用本文描述的方法，血小板恢复发生在移植后约10-20天内、移植后约10-15天内、移植后约15-20天内、移植后约12-18天内、移植后约12-17天内、移植后约13-18天内、移植后约12-17天内或移植后约15天内。另外的有益结果包括在向需要造血干细胞或祖细胞移植的患者施用外源造血干细胞或祖细胞移植物后患者中造血干细胞的细胞计数或相对浓度的增加。本文描述的疗法的有益结果还可以包括在随后的造血干细胞移植疗法后造血谱系细胞中的一种或更多种细胞的细胞计数或相对浓度的增加，所述造血谱系细胞诸如巨核细胞、凝血细胞、血小板、红细胞、肥大细胞、原粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、小胶质细胞、粒细胞、单核细胞、破骨细胞、抗原呈递细胞、巨噬细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞、T淋巴细胞或B淋巴细胞。另外的有益结果可以包括致病细胞群体，诸如癌细胞或自身免疫细胞的群体的数量的降低。
如本文使用的，术语“变体”和“衍生物”可互换使用，并且是指本文描述的化合物、肽、蛋白或其他物质的天然存在的、合成的和半合成的类似物。本文描述的化合物、肽、蛋白或其他物质的变体或衍生物可以保留或改进原始材料的生物活性。
如本文使用的，术语“载体”包括核酸载体，诸如质粒、DNA载体、质粒、RNA载体、病毒或其他合适的复制子。本文描述的表达载体可以含有多核苷酸序列以及例如用于表达蛋白和/或将这些多核苷酸序列整合到哺乳动物细胞基因组中的另外的序列元件。可以用于表达肽和蛋白，诸如本文描述的那些的某些载体包括含有指导基因转录的调节序列(诸如启动子和增强子区)的质粒。用于表达本文描述的肽和蛋白的其他有用的载体含有增强这些基因的翻译速率或改进由基因转录产生的mRNA的稳定性或核输出的多核苷酸序列。这些序列元件可以包括例如5'和3'非翻译区和多腺苷酸化信号位点，以便指导表达载体上携带的基因的有效转录。本文所描述的表达载体还可以含有编码用于选择含有这样的载体的细胞的标志物的多核苷酸。合适的标志物的实例包括编码对抗生素(诸如氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素和诺尔丝菌素)的抗性的基因。
如本文使用的，术语“烷基”是指在链中具有例如1至20个碳原子的直链或支链烷基基团。烷基基团的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、叔戊基、己基、异己基等。
如本文使用的，术语“亚烷基”是指直链或支链二价烷基基团。二价位置可在烷基链内的相同或不同原子上。亚烷基的实例包括亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚异丙基等。
如本文使用的，术语“杂烷基”是指在链中具有例如1至20个碳原子并且在链中还含有一个或更多个杂原子(例如尤其是氧原子、氮原子或硫原子)的直链或支链烷基基团。
如本文使用的，术语“杂亚烷基”是指直链或支链二价杂烷基基团。二价位置可以在杂烷基链内的相同或不同原子上。二价位置可以是一个或更多个杂原子。
如本文使用的，术语“烯基”是指在链中具有例如2至20个碳原子的直链或支链烯基基团。烯基基团的实例包括乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基、叔丁烯基、己烯基等。
如本文使用的，术语“亚烯基”是指直链或支链二价烯基基团。二价位置可以在烯基链内的相同或不同原子上。亚烯基的实例包括亚乙烯基、亚丙烯基、异亚丙烯基、亚丁烯基等。
如本文使用的，术语“杂烯基”是指在链中具有例如2至20个碳原子并且在链中还含有一个或更多个杂原子(例如尤其是，氧原子、氮原子或硫原子)的直链或支链烯基基团。
如本文使用的，术语“杂亚烯基”是指直链或支链二价杂烯基基团。二价位置可以在杂烯基链内的相同或不同原子上。二价位置可以是一个或更多个杂原子。
如本文使用的，术语“炔基”是指在链中具有例如2至20个碳原子的直链或支链炔基基团。炔基基团的实例包括炔丙基、丁炔基、戊炔基、己炔基等。
如本文使用的，术语“亚炔基”是指直链或支链二价炔基基团。二价位置可以在炔基链内的相同或不同原子上。
如本文使用的，术语“杂炔基”是指在链中具有例如2至20个碳原子并且还在链中含有一个或更多个杂原子(例如尤其是，氧原子、氮原子或硫原子)的直链或支链炔基基团。
如本文使用的，术语“杂亚炔基”是指直链或支链二价杂炔基基团。二价位置可以在杂炔基链内的相同或不同原子上。二价位置可以是一个或更多个杂原子。
如本文使用的，术语“环烷基”是指是饱和的并且具有例如3至12个碳环原子的单环、或稠合、桥连、或螺多环环结构。环烷基基团的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、双环[3.1.0]己烷等。
如本文使用的，术语“环亚烷基”是指二价环烷基基团。二价位置可以在环结构内的相同或不同原子上。环亚烷基的实例包括亚环丙基、亚环丁基、亚环戊基、亚环己基等。
如本文使用的，术语“杂环烷基”是指是饱和的并且每个环结构具有例如3至12个选自碳原子和选自例如尤其是氮原子、氧原子和硫原子的杂原子的环原子的单环、或稠合、桥连或螺多环环结构。环结构可以例如在碳、氮或硫环成员上含有一个或更多个氧代基团。
如本文使用的，术语“杂环亚烷基”是指二价杂环烷基基团。二价位置可以在环结构内的相同或不同原子上。
如本文使用的，术语“芳基”是指含有例如6至19个碳原子的单环或多环芳族环体系。芳基基团包括但不限于苯基、芴基、萘基等。二价位置可以是一个或更多个杂原子。
如本文使用的，术语“亚芳基”是指二价芳基基团。二价位置可以在相同或不同的原子上。
如本文使用的，术语“杂芳基”是指单环杂芳族或双环或三环稠环杂芳族基团。杂芳基基团包括吡啶基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、1,3,4-三嗪基、1,2,3-三嗪基、苯并呋喃基、[2,3-二氢]苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并三唑基、异苯并噻吩基、吲哚基、异吲哚基、3H-吲哚基、苯并咪唑基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹嗪基、喹唑啉基、酞嗪基、喹喔啉基、噌啉基、萘啶基、吡啶并[3,4-b]吡啶基、吡啶并[3,2-b]吡啶基、吡啶并[4,3-b]吡啶基、喹啉基、异喹啉基、四唑基、5,6,7,8-四氢喹啉基、5,6,7,8-四氢异喹啉基、嘌呤基、蝶啶基、咔唑基、呫吨基、苯并喹啉基等。
如本文使用的，术语“杂亚芳基”是指二价杂芳基基团。二价位置可以在相同或不同的原子上。二价位置可以是一个或更多个杂原子。
除非另外受到单独取代基的定义的限制，否则前述化学部分，诸如“烷基”、“亚烷基”、“杂烷基”、“杂亚烷基”、“烯基”、“亚烯基”、“杂烯基”、“杂亚烯基”、“炔基”、“亚炔基”、“杂炔基”、“杂亚炔基”、“环烷基”、“环亚烷基”、“杂环烷基”、“杂环亚烷基”、“芳基”、“亚芳基”、“杂芳基”和“杂亚芳基”基团可以任选地被取代。如本文使用的，术语“任选地被取代的”是指化合物或部分含有如该化合物或部分或其位置的化合价允许的一个或更多个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个或更多个)取代基，诸如选自由以下组成的组的取代基：烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、烷基芳基、烷基杂芳基、烷基环烷基、烷基杂环烷基、氨基、铵、酰基、酰氧基、酰氨基、氨基羰基、烷氧基羰基、脲基、氨基甲酸酯、芳基、杂芳基、亚磺酰基、磺酰基、烷氧基、硫烷基、卤素、羧基、三卤代甲基、氰基、羟基、巯基、硝基等。取代可以包括邻近取代基经历环闭合的情况，诸如邻位官能取代基的环闭合，以形成通过例如环闭合形成的内酰胺、内酯、环酐、缩醛、半缩醛、硫代缩醛、缩醛胺和半缩醛胺以例如提供保护基团。
动员造血干细胞和祖细胞和释放细胞用于扩增和治疗用途的方法
本发明部分地基于这样的发现，即通过向哺乳动物供体(例如，人类供体)施用特定剂量的CXCR2激动剂，诸如Gro-β、Gro-βT或其变体，任选地与CXCR4拮抗剂组合，可以动员造血干细胞和祖细胞，同时降低其他细胞类型，诸如白细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞的动员。这种特性在造血干细胞移植疗法的背景下特别有益，因为使用本文描述的组合物和方法从供体动员和分离的造血干细胞具有降低数量的对于向罹患干细胞紊乱的人类患者的施用是不期望的细胞类型。
特别地，已经发现，CXCR2激动剂诸如Gro-β、Gro-βT或其变体当以从约50μg/kg至约1mg/kg、优选地从约100μg/kg至约250μg/kg的剂量，并且甚至更优选地约150μg/kg的剂量静脉内施用时表现出快速动员供体(例如，哺乳动物供体，诸如人类供体)中的造血干细胞和祖细胞，同时降低对向正在经历造血干细胞移植疗法的患者(例如，哺乳动物患者，诸如人类患者)的输注可能是不期望的造血谱系的其他细胞的动员的能力。CXCR2激动剂诸如Gro-β、Gro-βT或其变体当以上述剂量向供体施用时表现出选择性地动员造血干细胞的能力，如下文实施例1中详细描述的。
当确定通过施用CXCR2激动剂(诸如Gro-β、Gro-βT或其变体)和任选地CXCR4拮抗剂(诸如普乐沙福或其药学上可接受的盐)在供体中动员的造血干细胞是否适于释放用于离体扩增和/或治疗用途时，人们可以获得表2中列出的表征供体的外周血样品的一个或更多个参数中的每一个的输入值。可以将一个或更多个参数与每一个参数的对应参考标准进行比较，并且如果造血干细胞的样品满足参考标准，则可以释放从供体分离的细胞用于离体扩增和/或输注到患者中用于治疗用途(例如，用于治疗本文描述的一种或更多种干细胞紊乱)。
可与本文描述的组合物和方法结合使用的示例性造血干细胞参数和对应参考标准列于以下表2中。
表2.造血干细胞群体参数及对应参考标准
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Figure BDA0002621915340001231
在选择用于确定从供体(例如，哺乳动物供体，诸如人类供体)获得的造血干细胞的群体是否适于释放用于离体扩增或治疗用途的参数时，人们可以选择表2中列出的一个或更多个输入参数。在一些实施方案中，人们可以从参数编号1-21中选择单独的参数。可选地，人们可以选择参数的组合，诸如CD34+细胞比率参数(例如，表2中的参数编号1-17中的一个或更多个)和频率参数(例如，表2中列出的参数编号18-21中的一个或更多个)的组合。在一些实施方案中，用于确定从供体(例如，哺乳动物供体，诸如人类供体)获得的造血干细胞的群体是否适于释放用于离体扩增或治疗用途的参数是如下表3-6的任一个中列出的参数的组合。
表3.用于评估的造血干细胞群体参数的双向组合
Figure BDA0002621915340001241
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表4.用于评估的造血干细胞群体参数的三向组合
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Figure BDA0002621915340001441
表5.用于评估的造血干细胞群体参数的四向组合
Figure BDA0002621915340001442
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表6.用于评估的造血干细胞群体参数的五向组合
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CXCR2激动剂
Gro-β、Gro-βT及其变体
可以与本文描述的组合物和方法一起使用的示例性CXCR2激动剂是Gro-β及其变体。Gro-β(也称为生长调节蛋白β、趋化因子(C-X-C基序)配体2(CXCL2)和巨噬细胞炎性蛋白2-α(MIP2-α))是一种能够通过例如刺激从外周嗜中性粒细胞释放蛋白酶并且特别是MMP9而动员造血干细胞和祖细胞的细胞因子。不受机制限制，MMP9可以通过刺激蛋白诸如干细胞因子，其对应的受体CD117和CXCL12(所有这些通常维持造血干细胞和祖细胞固定在骨髓中)的降解而诱导造血干细胞和祖细胞从干细胞小生境诸如骨髓动员到循环外周血。
除了Gro-β之外，可以与本文描述的组合物和方法一起使用的示例性CXCR2激动剂是Gro-β的截短形式，诸如特征在于在Gro-β的N-末端缺失1至8个氨基酸的那些(例如，特征在于N-末端缺失1个氨基酸、2个氨基酸、3个氨基酸、4个氨基酸、5个氨基酸、6个氨基酸、7个氨基酸或8个氨基酸的肽)。在一些实施方案中，可以与本文描述的组合物和方法一起使用的CXCR2激动剂包括Gro-βT，其特征在于从Gro-β的N-末端缺失前四个氨基酸。Gro-βT表现出特别有利的生物学特性，诸如诱导造血干细胞和祖细胞动员的能力，其功效比Gro-β的功效高几个数量级。Gro-β和Gro-βT在例如美国专利第6,080,398号中描述，其公开内容通过引用以其整体并入本文。
此外，可以与本文描述的组合物和方法一起使用的示例性CXCR2激动剂是含有天冬氨酸残基代替SEQ ID NO:1的位置69处的天冬酰胺残基的Gro-β变体。这种肽在本文称为Gro-βN69D，保留了Gro-β的造血干细胞和祖细胞动员功能，但以优异的功效诱导这种作用。类似地，可以与本文描述的组合物和方法一起使用的CXCR2激动剂包括含有天冬氨酸残基代替SEQ ID NO:2的位置65处的天冬酰胺残基的Gro-βT变体。这种肽在本文称为Gro-βTN65D，不仅保留造血干细胞和祖细胞动员能力，而且表现出比Gro-βT大得多的功效。Gro-βN69D和Gro-βT N65D在例如美国专利第6,447,766号中描述，其公开内容通过引用以其整体并入本文。
Gro-β、Gro-βT、Gro-βN69D和Gro-βT N65D的氨基酸序列列于下表7中。
表7.Gro-β及其选择变体的氨基酸序列
Figure BDA0002621915340002071
可以与本文描述的组合物和方法一起使用的另外的CXCR2激动剂包括Gro-β的其他变体，诸如相对于Gro-β具有一个或更多个氨基酸取代、插入和/或缺失的肽。在一些实施方案中，可以与本文描述的组合物和方法一起使用的CXCR2激动剂包括与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的肽(例如，与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％或100％序列同一性的肽)。在一些实施方案中，CXCR2激动剂的氨基酸序列仅通过一个或更多个保守氨基酸取代而不同于SEQ IDNO:1的氨基酸序列。在一些实施方案中，CXCR2激动剂的氨基酸序列通过不多于20个、不多于15个、不多于10个、不多于5个或不多于1个非保守氨基酸取代而不同于SEQ ID NO:1的氨基酸序列。
可与本文描述的组合物和方法一起使用的CXCR2激动剂的另外的实例是Gro-βT的变体，诸如相对于Gro-βT具有一个或更多个氨基酸取代、插入和/或缺失的肽。在一些实施方案中，CXCR2激动剂可以是与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的肽(例如，与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有至少85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％或100％序列同一性的肽)。在一些实施方案中，CXCR2激动剂的氨基酸序列仅通过一个或更多个保守氨基酸取代而不同于SEQ ID NO:2的氨基酸序列。在一些实施方案中，CXCR2激动剂的氨基酸序列通过不多于20个、不多于15个、不多于10个、不多于5个或不多于1个非保守氨基酸取代而不同于SEQ ID NO:2的氨基酸序列。
可与本文描述的组合物和方法一起使用的CXCR2激动剂的另外的实例是Gro-βN69D的变体，诸如相对于Gro-βN69D具有一个或更多个氨基酸取代、插入和/或缺失的肽。在一些实施方案中，CXCR2激动剂可以是与SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的肽(例如，与SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％、99.％或100％序列同一性的肽)。在一些实施方案中，CXCR2激动剂的氨基酸序列仅通过一个或更多个保守氨基酸取代而不同于SEQ ID NO:3的氨基酸序列。在一些实施方案中，CXCR2激动剂的氨基酸序列通过不多于20个、不多于15个、不多于10个、不多于5个或不多于1个非保守氨基酸取代而不同于SEQ ID NO:3的氨基酸序列。
可与本文描述的组合物和方法一起使用的CXCR2激动剂的另外的实例是Gro-βTN65D的变体，诸如相对于Gro-βT N65D具有一个或更多个氨基酸取代、插入和/或缺失的肽。在一些实施方案中，CXCR2激动剂可以是与SEQ ID NO:4的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的肽(例如，与SEQ ID NO:4的氨基酸序列具有至少85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％、99.％或100％序列同一性的肽)。在一些实施方案中，CXCR2激动剂的氨基酸序列仅通过一个或更多个保守氨基酸取代而不同于SEQ ID NO:4的氨基酸序列。在一些实施方案中，CXCR2激动剂的氨基酸序列通过不多于20个、不多于15个、不多于10个、不多于5个或不多于1个非保守氨基酸取代而不同于SEQ ID NO:4的氨基酸序列。
激动性抗CXCR2抗体及其抗原结合片段
在一些实施方案中，CXCR2激动剂是结合CXCR2并活化CXCR2信号转导的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，CXCR2激动剂可以是与Gro-β或其变体或截短物诸如Gro-βT结合CXCR2上相同的表位(例如通过竞争性CXCR2结合测定评估的)的抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，CXCR2激动剂是与Gro-β或其变体或截短物诸如Gro-βT竞争结合CXCR2的抗体或其抗原结合片段。
在上述方面中任一个的一些实施方案中，抗体或其抗原结合片段选自由以下组成的组：单克隆抗体或其抗原结合片段、多克隆抗体或其抗原结合片段、人源化抗体或其抗原结合片段、双特异性抗体或其抗原结合片段、双重可变免疫球蛋白结构域、单链Fv分子(scFv)、双体、三体、纳米抗体、抗体样蛋白支架、Fv片段、Fab片段、F(ab′)2分子和串联二-scFv(tandem di-scFv)。在一些实施方案中，抗体具有选自由以下组成的组的同种型：IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。
合成的CXCR2激动剂
本文描述的肽类CXCR2激动剂，诸如Gro-β、Gro-βT及其变体，可以合成制备，例如，使用固相肽合成技术。用于进行固相肽合成的系统和方法包括本领域已知的系统和方法，并且已经在例如尤其是美国专利第9,169,287号；第9,388,212号；第9,206,222号；第6,028,172号和第5,233,044号中描述，其每一个的公开内容在其涉及用于在固体支持物上合成肽的方案和技术时通过引用以其整体并入本文。固相肽合成是一种向固定在固体支持物诸如聚合物树脂(例如，亲水性树脂，诸如含聚乙二醇的树脂，或者疏水性树脂，诸如基于聚苯乙烯的树脂)上的肽添加氨基酸残基的过程。
肽，诸如那些在尤其是氨基、羟基、硫醇和羧基取代基处含有保护基团的肽，可以与固体支持物结合，使得肽有效地固定在固体支持物上。例如，肽可以经由它们的C末端与固体支持物结合，从而固定肽用于随后在树脂-液体界面处的反应。
向固定的肽添加氨基酸残基的过程可以包括将去保护试剂暴露于固定的肽，以从固定的肽的至少一部分去除保护基团的至少一部分。去保护试剂暴露步骤可以被配置，例如，使得侧链保护基团被保留，而N-末端保护基团被去除。例如，示例性氨基保护含有芴基甲氧基羰基(Fmoc)取代基。可以将含有强碱性物质诸如哌啶(例如，在适当的有机溶剂诸如二甲基甲酰胺(DMF)中的哌啶溶液)的去保护试剂暴露于固定的肽，使得从固定的肽的至少一部分去除Fmoc保护基团。适于保护氨基取代基的其他保护基团包括，例如，叔丁氧基羰基(Boc)部分。可以将包含强酸诸如三氟乙酸(TFA)的去保护试剂暴露于含有Boc保护的氨基取代基的固定的肽，以便通过离子化过程去除Boc保护基团。以这种方式，肽可以在特定位点处，诸如在固定的肽的一个或更多个侧链处或在N-末端或C-末端处被保护和去保护，以便在这些位置的一个或更多个处区域选择性地附加化学官能度。这可以用于例如使固定的肽的侧链衍生化，或者例如从C-末端至N-末端合成肽。
向固定的肽添加氨基酸残基的过程可以包括，例如，将受保护的活化的氨基酸暴露于固定的肽，使得至少一部分活化的氨基酸与固定的肽键合以形成新键合的氨基酸残基。例如，可以将肽暴露于与肽的去保护的N-末端反应的活化的氨基酸，以便使肽链延长一个氨基酸。通过氨基酸与增强氨基酸的骨架羰基碳的亲电性的剂的反应，可以活化氨基酸用于与去保护的肽的反应。例如，在叔碱(例如，尤其是二异丙基乙胺(DIPEA)和三乙胺(TEA))的存在下，鏻盐和脲盐可以将受保护的氨基酸转化为活化的物质(例如，BOP、PyBOP、HBTU和TBTU都生成HOBt酯)。可以使用其他试剂以有助于防止在碱存在下可能诱导的外消旋化。这些试剂包括添加了辅助性亲核试剂(例如，1-羟基-苯并三唑(HOBt)、1-羟基-氮杂苯并三唑(HOAt)或HOSu)的碳二亚胺(例如，DCC或WSCDI)或其衍生物。另一种可用于防止外消旋化的试剂是TBTU。也可以使用混合酸酐法(使用添加或不添加辅助性亲核试剂的氯甲酸异丁酯)，以及叠氮化物法，由于与该试剂相关的外消旋化低。这些类型的化合物还可以增加碳二亚胺介导的偶联速率，以及防止Asn和Gln残基脱水。典型的另外的试剂还包括，碱诸如N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)、三乙胺(TEA)或N-甲基吗啉(NMM)。这些试剂在例如美国专利第8,546,350号中详细描述，其公开内容以其整体并入本文。
在Gro-β和Gro-βT在水性溶液中的重组表达和折叠期间，特定的C-末端天冬酰胺残基(在Gro-β内的Asn69和在Gro-βT内的Asn65)易于脱酰胺。该过程导致天冬酰胺残基向天冬氨酸的转化。不希望受任何理论束缚，Gro-β和Gro-βT的化学合成可以克服该问题，通过例如提供降低该天冬酰胺残基暴露于亲核溶剂的条件。当合成制备(即化学合成)，例如，使用例如上述固相肽合成技术合成制备时，可以与本文描述的组合物和方法一起使用的合成的Gro-β、Gro-βT及其变体可以具有相对于这些肽的脱酰胺形式例如至少约95％的纯度(即，含有少于5％的对应的脱酰胺的肽)。例如，可以与本文描述的组合物和方法一起使用的合成的Gro-β、Gro-βT及其变体可以具有相对于这些肽的脱酰胺形式(例如SEQ ID NO:1的Asn69脱酰胺形式或SEQ ID NO:2的Asn65脱酰胺形式)约95％、95.5％、96％、96.5％、97％、97.5％、98％、98.5％、99％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％、99.9％、99.99％或更高的纯度。例如，合成的Gro-β、Gro-βT及其变体可以具有相对于这些肽的脱酰胺形式(例如SEQ ID NO:1的Asn69脱酰胺形式或SEQ ID NO:2的Asn65脱酰胺形式)例如从约95％至约99.99％的纯度，诸如从约95％至约99.99％、约96％至约99.99％、约97％至约99.99％、约98％至约99.99％、约99％至约99.99％、约99.9％至约99.99％、约95％至约99.5％、约96％至约99.5％、约95％至约99％或约97％至约99％的纯度。
CXCR4拮抗剂
与本文描述的组合物和方法一起使用的示例性CXCR4拮抗剂是由式(I)表示的化合物
Z–接头–Z’ (I)
或其药学上可接受的盐，其中Z是：
(i)含有9至32个环成员的环状聚胺，其中2至8个环成员是彼此被2个或更多个碳原子分开的氮原子；或者
(ii)由式(IA)表示的胺
Figure BDA0002621915340002121
其中A包括含有至少一个氮原子的单环或双环稠环体系，并且B是H或具有1至20个原子的取代基；
并且其中Z’是：
(i)含有9至32个环成员的环状聚胺，其中2至8个环成员是彼此被2个或更多个碳原子分开的氮原子；
(ii)由式(IB)表示的胺
Figure BDA0002621915340002122
其中A’包括含有至少一个氮原子的单环或双环稠环体系，并且B’是H或具有1至20个原子的取代基；或者
(iii)由式(IC)表示的取代基
–N(R)–(CR2)n–X (IC)
其中每个R独立地是H或C1-C6烷基，n是1或2，并且X是芳基基团或杂芳基基团或硫醇；
其中接头是键，任选地被取代的亚烷基(例如，任选地被取代的C1-C6亚烷基)、任选地被取代的杂亚烷基(例如，任选地被取代的C1-C6杂亚烷基)、任选地被取代的亚烯基(例如，任选地被取代的C2-C6亚烯基)、任选地被取代的杂亚烯基(例如，任选地被取代的C2-C6杂亚烯基)、任选地被取代的亚炔基(例如，任选地被取代的C2-C6亚炔基)、任选地被取代的杂亚炔基(例如，任选地被取代的C2-C6杂亚炔基)、任选地被取代的环亚烷基、任选地被取代的杂环亚烷基、任选地被取代的亚芳基或任选地被取代的杂亚芳基。
在一些实施方案中，Z和Z’可以各自独立地是含有9至32个环成员的环状聚胺，其中2至8个环成员是彼此被2个或更多个碳原子分开的氮原子。在一些实施方案中，Z和Z’是相同的取代基。作为示例，Z可以是含有10至24个环成员的环状聚胺。在一些实施方案中，Z可以是含有14个环成员的环状聚胺。在一些实施方案中，Z包括4个氮原子。在一些实施方案中，Z是1,4,8,11-四氮杂环十四烷。
在一些实施方案中，接头由式(ID)表示
Figure BDA0002621915340002131
其中环D是任选地被取代的芳基基团、任选地被取代的杂芳基基团、任选地被取代的环烷基基团或任选地被取代的杂环烷基基团；并且
X和Y各自独立地是任选地被取代的亚烷基(例如，任选地被取代的C1-C6亚烷基)、任选地被取代的杂亚烷基(例如，任选地被取代的C1-C6杂亚烷基)、任选地被取代的亚烯基(例如，任选地被取代的C2-C6亚烯基)、任选地被取代的杂亚烯基(例如，任选地被取代的C2-C6杂亚烯基)、任选地被取代的亚炔基(例如，任选地被取代的C2-C6亚炔基)或任选地被取代的杂亚炔基(例如，任选地被取代的C2-C6杂亚炔基)。
作为示例，接头可以由式(IE)表示
Figure BDA0002621915340002132
其中环D是任选地被取代的芳基基团、任选地被取代的杂芳基基团、任选地被取代的环烷基基团或任选地被取代的杂环烷基基团；并且
X和Y各自独立地是任选地被取代的亚烷基(例如，任选地被取代的C1-C6亚烷基)、任选地被取代的杂亚烷基(例如，任选地被取代的C1-C6杂亚烷基)、任选地被取代的C2-C6亚烯基(例如，任选地被取代的C2-C6亚烯基)、任选地被取代的杂亚烯基(例如，任选地被取代的C2-C6杂亚烯基)、任选地被取代的亚炔基(例如，任选地被取代的C2-C6亚炔基)或任选地被取代的杂亚炔基(例如，任选地被取代的C2-C6杂亚炔基)。在一些实施方案中，X和Y各自独立地是任选地被取代的C1-C6亚烷基。在一些实施方案中，X和Y是相同的取代基。在一些实施方案中，X和Y可以各自是亚甲基基团、亚乙基基团、正亚丙基基团、正亚丁基基团、正亚戊基基团或正亚己基基团。在一些实施方案中，X和Y各自是亚甲基基团。
接头可以是例如1,3-亚苯基、2,6-吡啶、3,5-吡啶、2,5-噻吩、4,4′-(2,2′-联嘧啶)、2,9-(1,10-菲咯啉)等。在一些实施方案中，接头是1,4-亚苯基-双-(亚甲基)。
可与本文描述的组合物和方法一起使用的CXCR4拮抗剂包括普乐沙福(本文也称为“AMD3100”和“Mozibil”)或其药学上可接受的盐，由式(II)表示，1,1′-[1,4-亚苯基双(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷。
Figure BDA0002621915340002141
可以与本文描述的组合物和方法一起使用的另外的CXCR4拮抗剂包括普乐沙福的变体，诸如美国专利第5,583,131号中描述的化合物，其公开内容在其涉及CXCR4拮抗剂时通过引用并入本文。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂可以是选自由以下组成的组的化合物：1,1′-[1,3-亚苯基双(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1,1′-[1,4-亚苯基-双-(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1,1′-[1,4-亚苯基-双-(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷的双-锌或双-铜配合物；1,1′-[3,3′-亚联苯基-双-(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；11,11′-[1,4-亚苯基-双-(亚甲基)]-双-1,4,7,11-四氮杂环十四烷；1,11′-[1,4-亚苯基-双-(亚甲基)]-1,4,8,11-四氮杂环十四烷-1,4,7,11-四氮杂环十四烷；1,1′-[2,6-吡啶-双-(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1,1-[3,5-吡啶-双-(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1,1′-[2,5-噻吩-双-(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1,1′-[4,4′-(2,2′-联吡啶)-双-(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1,1′-[2,9-(1,10-菲咯啉)-双-(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1,1′-[1,3-亚苯基-双-(亚甲基)]-双-1,4,7,10-四氮杂环十四烷；1,1′-[1,4-亚苯基-双-(亚甲基)]-双-1,4,7,10-四氮杂环十四烷；1′-[5-硝基-1,3-亚苯基双(亚甲基)]双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1′,1′-[2,4,5,6-四氯-1,3-亚苯基双(亚甲基)]双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1,1′-[2,3,5,6-四-氟-1,4-亚苯基双(亚甲基)]双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1,1′-[1,4-亚萘基-双-(亚甲基)]双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1,1′-[1,3-亚苯基双-(亚甲基)]双-1,5,9-三氮杂环十二烷；1,1′-[1,4-亚苯基-双-(亚甲基)]-1,5,9-三氮杂环十二烷；1,1′-[2,5-二甲基-1,4-亚苯基双-(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1,1′-[2,5-二氯-1,4-亚苯基双-(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1,1′-[2-溴-1,4-亚苯基双-(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；和1,1′-[6-苯基-2,4-吡啶双-(亚甲基)]-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷。
在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂是US 2006/0035829中描述的化合物，其公开内容在其涉及CXCR4拮抗剂时通过引用并入本文。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂可以是选自由以下组成的组的化合物：3,7,11,17-四氮杂双环(13.3.1)十七-1(17),13,15-三烯；4,7,10,17-四氮杂双环(13.3.1)十七-1(17),13,15-三烯；1,4,7,10-四氮杂环十四烷；1,4,7-三氮杂环十四烷；和4,7,10-三氮杂双环(13.3.1)十七-1(17),13,15-三烯。
CXCR4拮抗剂可以是WO 2001/044229中描述的化合物，其公开内容在其涉及CXCR4拮抗剂时通过引用并入本文。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂可以是选自由以下组成的组的化合物：N-[4-(11-氟-1,4,7-三氮杂环十四烷基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11,11-二氟-1,4,7-三氮杂环十四烷基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(1,4,7-三氮杂环十四烷-2-酰基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[12-(5-氧-1,9-二氮杂环十四烷基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11-氧-1,4,7-三氮杂环十四烷基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11-硫杂-1,4,7-三氮杂环十四烷基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11-硫杂(sulfoxo)-1,4,7-三氮杂环十四烷基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-(11-磺酰-1,4,7-三氮杂环十四烷基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；和N-[4-(3-羧杂(carboxo)-1,4,7-三氮杂环十四烷基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶。
可与本文描述的组合物和方法结合使用的另外的CXCR4拮抗剂包括WO 2000/002870中描述的化合物，其公开内容在其涉及CXCR4拮抗剂时通过引用并入本文。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂可以是选自由以下组成的组的化合物：N-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双-(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-N-甲基-2-(氨基甲基)吡啶；N-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-4-(氨基甲基)吡啶；N-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-3-(氨基甲基)吡啶；N-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-(2-氨基甲基-5-甲基)吡嗪；N-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基乙基)吡啶；N-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)噻吩；N-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)硫醇；N-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-氨基苄胺；N-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-4-氨基苄胺；N-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-4-(氨基乙基)咪唑；N-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-苄胺；N-[4-(1,4,7-三氮杂环十四烷基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[7-(4,7,10,17-四氮杂双环[13.3.1]十七-1(17),13,15-三烯基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[7-(4,7,10-三氮杂双环[13.3.1]十七-1(17),13,15-三烯基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[1-(1,4,7-三氮杂环十四烷基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-[4,7,10,17-四氮杂双环[13.3.1]十七-1(17),13,15-三烯基]-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[4-[4,7,10-三氮杂双环[13.3.1]十七-1(17),13,15-三烯基]-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；N-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-嘌呤；1-[1,4,8,11-四氮杂环十四烷基-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-4-苯基哌嗪；N-[4-(1,7-二氮杂环十四烷基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶；和N-[7-(4,10-二氮杂双环[13.3.1]十七-1(17),13,15-三烯基)-1,4-亚苯基双(亚甲基)]-2-(氨基甲基)吡啶。
在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂是选自由以下组成的组的化合物：1-[2,6-二甲氧基吡啶-4-基(亚甲基)]-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1-[2-氯吡啶-4-基(亚甲基)]-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1-[2,6-二甲基吡啶-4-基(亚甲基)]-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1-[2-甲基吡啶-4-基(亚甲基)]-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1-[2,6-二氯吡啶-4-基(亚甲基)]-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；1-[2-氯吡啶-5-基(亚甲基)]-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；和7-[4-甲基苯基(亚甲基)]-4,7,10,17-四氮杂双环[13.3.1]十七-1(17),13,15-三烯。
在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂是美国专利第5,698,546号中描述的化合物，其公开内容在其涉及CXCR4拮抗剂时通过引用并入本文。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂可以是选自由以下组成的组的化合物：7,7′-[1,4-亚苯基-双(亚甲基)]双-3,7,11,17-四氮杂双环[13.3.1]十七-1(17),13,15-三烯；7,7′-[1,4-亚苯基-双(亚甲基)]双[15-氯-3,7,11,17-四氮杂双环[13.3.1]十七-1(17),13,15-三烯]；7,7′-[1,4-亚苯基-双(亚甲基)]双[15-甲氧基-3,7,11,17-四氮杂双环[13.3.1]十七-1(17),13,15-三烯]；7,7′-[1,4-亚苯基-双(亚甲基)]双-3,7,11,17-四氮杂双环[13.3.1]-十七-13,16-三烯-15-酮；7,7′-[1,4-亚苯基-双(亚甲基)]双-4,7,10,17-四氮杂双环[13.3.1]-十七-1(17),13,15-三烯；8,8′-[1,4-亚苯基-双(亚甲基)]双-4,8,12,19-四氮杂双环[15.3.1]十九-1(19),15,17-三烯；6,6′-[1,4-亚苯基-双(亚甲基)]双-3,6,9,15-四氮杂双环[11.3.1]十五-1(15),11,13-三烯；6,6′-[1,3-亚苯基-双(亚甲基)]双-3,6,9,15-四氮杂双环[11.3.1]十五-1(15),11,13-三烯；和17,17′-[1,4-亚苯基-双(亚甲基)]双-3,6,14,17,23,24-六氮杂三环[17.3.1.18,12]二十四-1(23),8,10,12(24),19,21-己烯。
在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂是美国专利第5,021,409号中描述的化合物，其公开内容在其涉及CXCR4拮抗剂时通过引用并入本文。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂可以是选自由以下组成的组的化合物：2,2′-双环拉胺(bicyclam)、6,6′-双环拉胺；3,3′-(双-1,5,9,13-四氮杂环十六烷)；3,3′-(双-1,5,8,11,14-戊氮杂环十六烷)；亚甲基(或聚亚甲基)二-1-N-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；3,3′-双-1,5,9,13-四氮杂环十六烷；3,3′-双-1,5,8,11,14-戊氮杂环十六烷；5,5′-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；2,5′-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；2,6′-双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；11,11′-(1,2-乙烷二基)双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；11,11′-(1,2-丙烷二基)双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；11,11′-(1,2-丁烷二基)双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；11,11′-(1,2-戊烷二基)双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷；和11,11′-(1,2-己烷二基)双-1,4,8,11-四氮杂环十四烷。
在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂是WO 2000/056729中描述的化合物，其公开内容在其涉及CXCR4拮抗剂时通过引用并入本文。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂可以是选自由以下组成的组的化合物：N-(2-吡啶基甲基)-N′-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(6,7-二氢-5H-环戊[b]吡啶-7-基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(1,2,3,4-四氢-1-萘基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(1-萘基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-[(2-吡啶基甲基)氨基]乙基]-N′-1-甲基-1,2,3,4-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-[(1H-咪唑-2-基甲基)氨基]乙基]-N′-(1-甲基-1,2,3,4-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(1,2,3,4-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-[(1H-咪唑-2-基甲基)氨基]乙基]-N′-(1,2,3,4-四氢-1-萘基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(2-苯基-5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N,N′-双(2-吡啶基甲基)-N′-(2-苯基-5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-5-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(1H-咪唑-2-基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-5-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(1H-咪唑-2-基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[(2-氨基-3-苯基)丙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(1H-咪唑-4-基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(2-喹啉基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(2-(2-萘甲酰基)氨基乙基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[(S)-(2-乙酰氨基-3-苯基)丙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[(S)-(2-乙酰氨基-3-苯基)丙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[3-((2-萘基甲基)氨基)丙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-(S)-吡咯烷基甲基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-(R)-吡咯烷基甲基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[3-吡唑基甲基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-吡咯基甲基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-噻吩基甲基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-噻唑基甲基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-呋喃基甲基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-[(苯基甲基)氨基]乙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(2-氨基乙基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-3-吡咯烷基-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-4-哌啶基-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-[(苯基)氨基]乙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(7-甲氧基-1,2,3,4-四氢-2-萘基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(6-甲氧基-1,2,3,4-四氢-2-萘基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(1-甲基-1,2,3,4-四氢-2-萘基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(7-甲氧基-3,4-二氢萘基)-1-(氨基甲基)-4-苯甲酰胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(6-甲氧基-3,4-二氢萘基)-1-(氨基甲基)-4-苯甲酰胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(1H-咪唑-2-基甲基)-N′-(7-甲氧基-1,2,3,4-四氢-2-萘基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(8-羟基-1,2,3,4-四氢-2-萘基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(1H-咪唑-2-基甲基)-N′-(8-羟基-1,2,3,4-四氢-2-萘基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(8-氟-1,2,3,4-四氢-2-萘基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(1H-咪唑-2-基甲基)-N′-(8-氟-1,2,3,4-四氢-2-萘基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-7-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(1H-咪唑-2-基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-7-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-[(2-萘基甲基)氨基]乙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-(异丁基氨基)乙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-[(2-吡啶基甲基)氨基]乙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-[(2-呋喃基甲基)氨基]乙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(2-胍基乙基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-[双-[(2-甲氧基)苯基甲基]氨基]乙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-[(1H-咪唑-4-基甲基)氨基]乙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-[(1H-咪唑-2-基甲基)氨基]乙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-(苯基脲基)乙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[[N″-(正丁基)甲酰氨基]甲基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(甲酰氨基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[(N″-苯基)甲酰氨基甲基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(羧基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(苯基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(5,6-二甲基-1H-苯并咪唑-2-基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺(氢溴酸盐)；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[(1H)-5-氮杂苯并咪唑-2-基甲基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N-(4-苯基-1H-咪唑-2-基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-[2-(2-吡啶基)乙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(2-苯并噁唑基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(反式-2-氨基环己基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(2-苯基乙基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(3-苯基丙基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N′-(反式-2-氨基环戊基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-甘氨酰胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-(L)-丙氨酰胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-(L)-天冬酰胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-吡嗪酰胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-(L)-脯氨酰胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-(L)-赖氨酰胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-苯甲酰胺；N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-吡啶甲酰胺；N′-苄基-N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-脲；N′-苯基-N-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-脲；N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[细菌吡啶-9-基)-4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯甲酰胺；N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯甲酰胺；N,N′-双(2-吡啶基甲基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N,N′-双(2-吡啶基甲基)-N′-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[细菌吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N,N′-双(2-吡啶基甲基)-N′-(6,7-二氢-5H-环戊[细菌吡啶-7-基)-1,4-苯二甲胺；N,N′-双(2-吡啶基甲基)-N′-(1,2,3,4-四氢-1-萘基)-1,4-苯二甲胺；N,N′-双(2-吡啶基甲基)-N′-[(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)甲基]-1,4-苯二甲胺；N,N′-双(2-吡啶基甲基)-N′[(6,7-二氢-5H-环戊[细菌吡啶-7-基)甲基]-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N-(2-甲氧基乙基)-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-吡啶基甲基)-N-[2-(4-甲氧基苯基)乙基]-N′-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)苯二甲胺；N-[(2,3-二甲氧基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N,N′-双(2-吡啶基甲基)-N-[1-(N″-苯基-N″-甲基脲基)-4-哌啶基]-1,3-苯二甲胺；N,N′-双(2-吡啶基甲基)-N-[N″-对甲苯磺酰苯丙氨酰基)-4-哌啶基]-1,3-苯二甲胺；N,N′-双(2-吡啶基甲基)-N-[1-[3-(2-氯苯基)-5-甲基-异噁唑-4-酰基]-4-哌啶基]-1,3-苯二甲胺；N-[(2-羟基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[细菌吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[(4-氰基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[细菌吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[(4-氰基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[(4-乙酰胺基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[(4-苯氧基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[细菌吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[(1-甲基-2-甲酰氨基)乙基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[(4-苄氧基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[细菌吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[(噻吩-2-基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[细菌吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-(苄基)-3-吡咯烷基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[[1-甲基-3-(吡唑-3-基)]丙基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[1-(苯基)乙基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[(3,4-亚甲二氧基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-苄基-3-羧甲基-4-哌啶基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[(3,4-亚甲二氧基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(3-吡啶基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[[1-甲基-2-(2-甲苯基)甲酰氨基]乙基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[(1,5-二甲基-2-苯基-3-吡唑啉酮-4-基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[(4-丙氧基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-(1-苯基-3,5-二甲基吡唑啉-4-基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[H-咪唑-4-基甲基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[(3-甲氧基-4,5-亚甲二氧基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[(3-氰基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[(3-氰基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(5-乙基噻吩-2-基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-(5-乙基噻吩-2-基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[(2,6-二氟苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[(2,6-二氟苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[(2-二氟甲氧基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-二氟甲氧基苯基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(1,4-苯并二氧六环-6-基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N,N′-双(2-吡啶基甲基)-N-[1-(N″-苯基-N″-甲基脲基)-4-哌啶基]-1,4-苯二甲胺；N,N′-双(2-吡啶基甲基)-N-[N″-对甲苯磺酰基苯丙氨酰基)-4-哌啶基]-1,4-苯二甲胺；N-[1-(3-吡啶甲酰氨基)-4-哌啶基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-(环丙基甲酰氨基)-4-哌啶基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-(1-苯基环丙基甲酰氨基)-4-哌啶基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-(1,4-苯并二氧六环-6-基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-[3-(2-氯苯基)-5-甲基-异噁唑-4-甲酰氨基]-4-哌啶基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-(2-硫代甲基吡啶-3-甲酰氨基)-4-哌啶基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[(2,4-二氟苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(1-甲基吡咯-2-基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[(2-羟基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[(3-甲氧基-4,5-亚甲二氧基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(3-吡啶基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[2-(N″-吗啉甲基)-1-环戊基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[(1-甲基-3-哌啶基)丙基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-(1-甲基苯并咪唑-2-基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-(苄基)-3-吡咯烷基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[[(1-苯基-3-(N″-吗啉)]丙基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-(异-丙基)-4-哌啶基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-(乙氧基羰基)-4-哌啶基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[(1-甲基-3-吡唑基)丙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-甲基-2-(N″,N″-二乙基甲酰氨基)乙基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[(1-甲基-2-苯磺酰基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[(2-氯-4,5-亚甲二氧基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-甲基-2-[N″-(4-氯苯基)甲酰氨基]乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(1-乙酰氧基吲哚-3-基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[(3-苄氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-(3-喹啉基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-[(8-羟基)-2-喹啉基甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-喹啉基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[(4-乙酰胺基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[1H-咪唑-2-基甲基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-(3-喹啉基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-(2-噻唑基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-(4-吡啶基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[(5-苄氧基)苯并[b]吡咯-3-基甲基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-(1-甲基吡唑-2-基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[(4-甲基)-1H-咪唑-5-基甲基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[[(4-二甲基氨基)-1-萘基]甲基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[1,5-二甲基-2-苯基-3-吡唑啉酮-4-基甲基]-N,N′-双(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-[(1-乙酰基-2-(R)-脯氨酰基]-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[1-[2-乙酰胺基苯甲酰基-4-哌啶基]-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[(2-氰基-2-苯基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[(N″-乙酰色氨酰基)-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[(N″-苯甲酰基缬氨酰)-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[(4-二甲基氨基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-(4-吡啶基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(1-甲基苯并咪唑-2-基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-丁基-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[1-苯甲酰基-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[1-(苄基)-3-吡咯烷基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[(1-甲基)苯并[b]吡咯-3-基甲基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[1H-咪唑-4-基甲基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-1,3-苯二甲胺；N-[1-(苄基)-4-哌啶基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[1-甲基苯并咪唑-2-基甲基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[(2-苯基)苯并[b]吡咯-3-基甲基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]-N′-(2-吡啶基甲基)-1,4-苯二甲胺；N-[(6-甲基吡啶-2-基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,4-苯二甲胺；N-(3-甲基-1H-吡唑-5-基甲基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,3-苯二甲胺；N-[(2-甲氧基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,3-苯二甲胺；N-[(2-乙氧基苯基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(6,7,8,9-四氢-5H-环庚[b]吡啶-9-基)-1,3-苯二甲胺；N-(苄氧基乙基)-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,3-苯二甲胺；N-[(2-乙氧基-1-萘基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,3-苯二甲胺；N-[(6-甲基吡啶-2-基)甲基]-N′-(2-吡啶基甲基)-N-(5,6,7,8-四氢-8-喹啉基)-1,3-苯二甲胺；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]胍；N-(2-吡啶基甲基)-N-(8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-1,4-苯二甲胺；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]高哌嗪；1-[[3-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]高哌嗪；反式和顺式-1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-3,5-哌啶二胺；N,N′-[1,4-亚苯基双(亚甲基)]双-4-(2-嘧啶基)哌嗪；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-1-(2-吡啶基)甲基胺；2-(2-吡啶基)-5-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]-1,2,3,4-四氢异喹啉；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-3,4-二氨基吡咯烷；1-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-3,4-二乙酰基氨基吡咯烷；8-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-2,5,8-三氮杂-3-氧杂双环[4.3.0]壬烷；和8-[[4-[[(2-吡啶基甲基)氨基]甲基]苯基]甲基]-2,5,8-三氮杂双环[4.3.0]壬烷。
可以用于与本文描述的组合物和方法一起使用的另外的CXCR4拮抗剂包括WO2001/085196、WO 1999/050461、WO 2001/094420和WO2003/090512中描述的那些，其每一个的公开内容在其涉及抑制CXCR4活性或表达的化合物时通过引用并入本文。
造血干细胞和祖细胞的扩增
在输注到患者中之前，造血细胞和祖细胞可以进行离体扩增，例如通过使细胞与芳香烃受体拮抗剂接触来进行。可与本文描述的组合物和方法一起使用的芳香烃受体拮抗剂包括美国专利第9,580,426号中描述的那些，其公开内容通过引用以其整体并入本文。
在一些实施方案中，芳香烃受体拮抗剂包括由式(III)表示的那些或其盐
Figure BDA0002621915340002261
其中：
L选自-NR5a(CH2)2-3-、-NR5a(CH2)2NR5b-、-NR5a(CH2)2S-、-NR5aCH2CH(OH)-和-NR5aCH(CH3)CH2-；其中R5a和R5b独立地选自氢和C1-4烷基；
R1选自苯硫基、1H-苯并咪唑基、异喹啉基、1H-咪唑并吡啶基、苯并苯硫基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基和噻唑基；在一些实施方案中，其中R1的苯硫基、1H-苯并咪唑基、异喹啉基、1H-咪唑并吡啶基、苯并苯硫基、嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基或噻唑基可以任选地被1至3个独立地选自以下的基团取代：氰基、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤素、卤素取代的-C1-4烷基、卤素取代的-C1-4烷氧基、氨基、-C(O)R8a、-S(O)0-2R8a、-C(O)OR8a和-C(O)NR8aR8b；其中R8a和R8b独立地选自氢和C1-4烷基；
R2选自-S(O)2NR6aR6b-、-NR6aC(O)R6b-、-NR6aC(O)NR6bR6c、苯基、1H-吡咯并吡啶-3-基、1H-吡咯并吡啶-5-基、1H-吲哚基噻吩基、吡啶基、1H-1,2,4-三唑基、2-氧代咪唑烷基、1H-吡唑基、2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并咪唑基和1H-吲唑基；其中R6a、R6b和R6c独立地选自氢和C1-4烷基；并且R2的苯基、1H-吡咯并吡啶-3-基、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基、1H-吲哚基、苯硫基、吡啶基、1H-1,2,4-三唑基、2-氧代咪唑烷基、1H-吡唑基、2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并咪唑基或1H-吲唑基任选地被1至3个独立地选自以下的基团取代：羟基、卤素、甲基、甲氧基、氨基、-O(CH2)2NR7aR7b、-S(O)2NR7aR7b、-OS(O)2NR7aR7b和-NR7aS(O)2R7b；其中R7a和R7b独立地选自氢和C1-4烷基；
R3选自氢、C1-4烷基和联苯基；并且
R4选自C1-10烷基、丙-1-烯-2-基、环己基、环丙基、2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙基、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、二苯甲基、四氢-2H-吡喃-2-基、四氢-2H-吡喃-3-基、苯基、四氢呋喃-3-基和苄基、(4-戊基苯基)(苯基)甲基和1-(1-(2-氧代-6,9,12-三氧杂-3-氮杂十四烷-14-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)乙基，其中所述烷基、环丙基、环己基、2-(2-氧代吡咯烷-1-基)乙基、氧杂环丁烷-3-基、氧杂环丁烷-2-基、二苯甲基、四氢-2H-吡喃-2-基、四氢-2H-吡喃-3-基、苯基、四氢呋喃-3-基、苄基、(4-戊基苯基)(苯基)甲基或1-(1-(2-氧代-6,9,12-三氧杂-3-氮杂十四烷-14-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)乙基可以任选地被1至3个独立地选自以下的基团取代：羟基、C1-4烷基和卤素取代的C1-4烷基。
在一些实施方案中，可与本文描述的组合物和方法一起使用的芳香烃受体拮抗剂包括由下式(1)表示的SR-1。
Figure BDA0002621915340002271
用于肽和蛋白的重组表达的方法
本文描述的肽和蛋白(例如，CXCR2激动剂，诸如Gro-β、Gro-βT、Gro-βN69D、Gro-βTN65D及其变体)可以通过例如，向宿主细胞递送编码对应肽或蛋白的核酸在宿主细胞中表达。以下部分描述了多种技术，这些技术可以出于将编码本文描述的肽和蛋白的核酸引入宿主细胞的目的而使用，以用于重组表达的目的。
转染技术
可以用于将多核苷酸(诸如编码CXCR2激动剂(诸如Gro-β、Gro-βT、Gro-βN69D、Gro-βT N65D或其变体)的核酸)引入细胞(例如，哺乳动物细胞，诸如人类细胞)的技术是本领域已知的。在一些实施方案中，可以使用电穿孔通过向感兴趣的细胞施加静电势来使哺乳动物细胞(例如，人类细胞)透化。以这种方式经历外部电场作用的哺乳动物细胞，例如人类细胞，随后易于摄取外源性核酸。哺乳动物细胞的电穿孔例如在Chu等人(1987)NucleicAcids Research 15:1311中详细描述，其公开内容通过引用并入本文。一种类似的技术，NucleofectionTM，利用施加电场来刺激外源多核苷酸到真核细胞的细胞核的摄取。NucleofectionTM和可用于进行该技术的方案在例如Distler等人(2005)ExperimentalDermatology 14:315，以及US2010/0317114中详细描述，其每一个的公开内容通过引用并入。
可用于转染宿主细胞用于重组肽和蛋白表达目的的另外的技术包括挤压穿孔法(squeeze-poration methodology)。这种技术诱导细胞的快速机械变形，以刺激外源DNA通过响应于施加的压力而形成的膜孔的摄取。这种技术的优点在于不需要载体将核酸递送到细胞，诸如人类细胞中。挤压穿孔例如，在Sharei等人(2013)Journal of VisualizedExperiments 81:e50980中详细描述，其公开内容通过引用并入本文。
脂质体转染代表另一种可用于细胞转染的技术。该方法包括将核酸装载到脂质体中，脂质体通常向脂质体外部展示阳离子官能团，诸如季铵或质子化胺。由于细胞膜的阴离子性质，这促进脂质体和细胞之间的静电相互作用，这最终导致外源核酸的摄取，通过例如脂质体与细胞膜的直接融合或复合体的胞吞。脂质体转染在例如美国专利第7,442,386号中详细描述，其公开内容通过引用并入本文。利用与细胞膜的离子相互作用来促进外来核酸摄取的类似技术包括使细胞与阳离子聚合物-核酸复合体接触。与多核苷酸缔合以便赋予有利于与细胞膜相互作用的正电荷的示例性阳离子分子是活化的树枝状大分子(例如，在Dennig(2003)Topics in Current Chemistry 228:227中描述的，其公开内容通过引用并入本文)和二乙基氨基乙基(DEAE)-右旋糖酐，其作为转染剂的用途在例如Gulick等人(1997)Current Protocols in Molecular Biology 40:I:9.2:9.2.1中详细描述，其公开内容通过引用并入本文。磁珠是另一种可以温和且有效的方式用于转染细胞的工具，因为这种方法利用施加的磁场来引导核酸的摄取。该技术在例如US 2010/0227406中详细描述，其公开内容通过引用并入本文。
诱导细胞摄取外源核酸的另一种有用工具是激光转染，这种技术包括将细胞暴露于特定波长的电磁辐射，以便温和地使细胞透化并允许多核苷酸穿透细胞膜。这种技术在Rhodes等人(2007)Methods in Cell Biology82:309中详细描述，其公开内容通过引用并入本文。
微囊泡代表另一种潜在的媒介物，其可以用于出于重组表达的目的将编码本文描述的肽或蛋白的核酸引入宿主细胞中。在一些实施方案中，由糖蛋白VSV-G与例如基因组修饰蛋白诸如核酸酶的共过表达诱导的微囊泡可以用于有效地将蛋白递送到细胞中，所述蛋白随后催化内源性多核苷酸序列的位点特异性裂解，以便为感兴趣的多核苷酸诸如基因或调节序列的共价掺入准备细胞基因组。这样的囊泡(也称为Gesicles)用于真核细胞遗传修饰的用途在Quinn等人Genetic Modification of Target Cells by Direct Delivery ofActive Protein[摘要]中，于:Methylation changes in early embryonic genes incancer[摘要]中,于:Proceedings of the 18th Annual Meeting of the AmericanSociety of Gene and Cell Therapy；2015May 13,摘要第122号中详细描述。
用于核酸递送的病毒载体
病毒基因组提供丰富的载体来源，其可以用于出于重组表达的目的将编码本文描述的肽和蛋白，诸如CXCR2激动剂，包括Gro-β、Gro-βT、Gro-βN69D、Gro-βT N65D及其变体的外源核酸，有效递送到宿主细胞中。病毒基因组是用于基因递送的特别有用的载体，因为被包含在这样的基因组中的多核苷酸可以通过例如广义的或专门的转导被掺入到细胞的基因组中。这些过程可能作为病毒载体自然复制周期的一部分发生，并且可能不需要添加诱导基因整合的蛋白或试剂。可以用于将编码本文描述的肽或蛋白的核酸分子引入宿主细胞进行重组表达的病毒载体的实例包括细小病毒(parvovirus)诸如腺相关病毒(AAV)、逆转录病毒、腺病毒(例如，Ad5、Ad26、Ad34、Ad35和Ad48)、冠状病毒(coronavirus)、负链RNA病毒诸如正粘病毒(orthomyxovirus)(诸如流感病毒)、弹状病毒(rhabdovirus)(例如狂犬病病毒和水泡性口炎病毒)、副粘病毒(paramyxovirus)(例如麻疹病毒和仙台病毒)、正链RNA病毒诸如小核糖核酸病毒(picornavirus)和甲病毒(alphaviru)以及双链DNA病毒，包括腺病毒、疱疹病毒(例如，1型和2型单纯疱疹病毒、EB病毒、巨细胞病毒)和痘病毒(例如，痘苗病毒、改良的安卡拉痘苗病毒(MVA)、鸡痘病毒和金丝雀痘病毒(canarypox))。可用于将编码本文描述的肽和蛋白的多核苷酸递送至宿主细胞用于重组表达目的的其他病毒包括，例如，诺沃克病毒、披膜病毒(togavirus)、黄病毒(flavivirus)、呼肠孤病毒、乳多空病毒、嗜肝DNA病毒和肝炎病毒。逆转录病毒的实例包括禽白血病肉瘤病毒、哺乳动物C型病毒、B型病毒、D型病毒、HTLV-BLV群、慢病毒、泡沫病毒(spumavirus)(Coffin,J.M.,Retroviridae:The viruses and their replication,In Fundamental Virology,第三版,B.N.Fields,等人编著，Lippincott-Raven Publishers,Philadelphia,1996)。其他实例包括鼠科(murine)白血病病毒、鼠科肉瘤病毒、小鼠乳腺肿瘤病毒、牛科(bovine)白血病病毒、猫科(feline)白血病病毒、猫科肉瘤病毒、禽白血病病毒、人类T细胞白血病病毒、狒狒(baboon)内源病毒、长臂猿(Gibbon ape)白血病病毒、Mason Pfizer猴病毒、猿猴(simian)免疫缺陷病毒、猿猴肉瘤病毒、劳斯肉瘤病毒和慢病毒。载体的其他实例在例如美国专利第5,801,030号中描述，其公开内容在其涉及用于基因递送以及重组蛋白和肽表达的病毒载体时通过引用并入本文。
治疗方法
如本文描述的，造血干细胞移植疗法可以被施用至需要治疗的受试者，以便填充或再填充一种或更多种血细胞类型(诸如罹患干细胞紊乱的患者中缺乏或有缺陷的血细胞谱系)。造血干细胞和祖细胞表现出专能性，并且因此可以分化成多种不同的血液谱系，包括但不限于粒细胞(例如，早幼粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞)、红细胞(例如，网织红细胞、红细胞)、凝血细胞(例如，原巨核细胞、血小板产生巨核细胞、血小板)、单核细胞(例如，单核细胞、巨噬细胞)、树突状细胞、小胶质细胞、破骨细胞和淋巴细胞(例如，NK细胞、B细胞和T细胞)。另外地，造血干细胞能够自我更新并且因此可以产生与母细胞具有等同潜力的子代细胞，并且还具有被重新引入移植物接受者的能力的特征，届时它们归巢至造血干细胞小生境并且重建富有成效的和持续的血细胞生成。因此，造血干细胞和祖细胞代表一种用于治疗广泛紊乱的有用治疗方式，其中患者具有造血谱系的细胞类型的缺陷或缺乏造血谱系的细胞类型。缺陷或缺乏可能由例如由于施用化疗剂(例如，在患者罹患癌症，诸如本文描述的血液学癌症的情况下)而导致的造血系统内源细胞的群体的耗尽而引起。缺陷或缺乏可能由，例如，由于自身反应性免疫细胞(诸如与自身抗原交叉反应的T淋巴细胞或B淋巴细胞的活性(例如，在患者罹患自身免疫性紊乱(诸如本文描述的自身免疫性紊乱)的情况下))而导致的内源造血细胞的群体的耗尽而引起。另外地或可选地，细胞活性的缺陷或缺乏可能由酶的异常表达(例如，在患者罹患多种代谢紊乱，诸如本文描述的代谢紊乱的情况下)而引起。
因此，造血干细胞可以被施用至在造血谱系的一种或更多种细胞类型方面有缺陷或缺乏造血谱系的一种或更多种细胞类型的患者，以便在体内重构有缺陷或缺乏的细胞的群体，从而治疗与内源性血细胞群体的缺乏或耗尽相关的病理。造血干细胞和祖细胞可以用于治疗例如非恶性血红蛋白病(例如，选自由以下组成的组的血红蛋白病：镰状细胞性贫血、地中海贫血、范可尼贫血、再生障碍性贫血和威斯科特-奥尔德里奇综合征)。在这些情况下，例如，可以将CXCR4拮抗剂和/或CXCR2激动剂施用至供体，诸如被鉴定为可能响应于这样的治疗而表现出造血干细胞和祖细胞的群体从干细胞小生境诸如骨髓释放到循环外周血中的供体。然后，如此动员的造血干细胞和祖细胞可以从供体抽取并施用至患者，在所述患者中，细胞可以归巢至造血干细胞小生境并重构患者中受损或缺乏的细胞的群体。
另外地或可选地，造血干细胞和祖细胞可以用于治疗免疫缺陷，诸如先天性免疫缺陷。另外地或可选地，本文描述的组合物和方法可以用于治疗获得性免疫缺陷(例如，选自由以下组成的组的获得性免疫缺陷：HIV和AIDS)。在这些情况下，例如，可以将CXCR4拮抗剂和/或CXCR2激动剂施用至供体，诸如被鉴定为可能响应于这样的治疗而表现出造血干细胞和祖细胞的群体从干细胞小生境诸如骨髓释放到循环外周血中的供体。然后，如此动员的造血干细胞和祖细胞可以从供体抽取并施用至患者，在所述患者中，细胞可以归巢至造血干细胞小生境并重构患者中受损或缺乏的细胞(例如，T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞或其他免疫细胞)的群体。
造血干细胞和祖细胞还可以用于治疗代谢紊乱(例如，选自由以下组成的组的代谢紊乱：糖原贮积病、黏多糖贮积病、高歇氏病、赫尔勒病、鞘脂贮积病和异染性脑白质营养不良)。在这些情况下，例如，可以将CXCR4拮抗剂和/或CXCR2激动剂施用至供体，诸如被鉴定为可能响应于这样的治疗而表现出造血干细胞和祖细胞的群体从干细胞小生境诸如骨髓释放到循环外周血中的供体。然后，如此动员的造血干细胞和祖细胞可以从供体抽取并施用至患者，在所述患者中，细胞可以归巢至造血干细胞小生境并重构患者中受损或缺乏的造血细胞的群体。
另外地或可选地，造血干细胞或祖细胞可以用于治疗恶性肿瘤或增生性紊乱，诸如血液学癌症或骨髓增生性疾病。在癌症治疗的情况下，例如，可以将CXCR4拮抗剂和/或CXCR2激动剂施用至供体，诸如被鉴定为可能响应于这样的治疗而表现出造血干细胞和祖细胞的群体从干细胞小生境诸如骨髓释放到循环外周血中的供体。然后，如此动员的造血干细胞和祖细胞可以从供体抽取并施用至患者，在所述患者中，细胞可以归巢至造血干细胞小生境并重构患者中受损或缺乏的细胞的群体，诸如由于向患者施用一种或更多种化学治疗剂而受损或缺乏的造血细胞的群体。在一些实施方案中，可以将造血干细胞或祖细胞输注到患者中，以便再填充在癌细胞消除期间，诸如在全身化学疗法期间耗尽的细胞的群体。可以根据本文描述的组合物和方法通过施用造血干细胞和祖细胞进行治疗的示例性血液学癌症是急性骨髓性白血病、急性淋巴性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴性白血病、多发性骨髓瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤，以及其他癌性状况，包括神经母细胞瘤。
被动员到受试者外周血中的造血干细胞或祖细胞可以通过任何合适的技术从受试者体内抽取(例如，收获或收集)。例如，造血干细胞或祖细胞可以通过抽血来抽取。在一些实施方案中，如本文所设想的，被动员到受试者外周血中的造血干细胞或祖细胞可以使用单采术(apheresis)收获(即收集)。在一些实施方案中，可以使用单采术来富集供体的血液中被动员的造血干细胞或祖细胞。
可以通过向患者施用造血干细胞和祖细胞进行治疗的另外的疾病包括但不限于腺苷脱氨酶缺乏和重症联合免疫缺陷、高免疫球蛋白M综合征、切东病、遗传性淋巴组织细胞增多症、骨硬化病、成骨不全症、贮积病、重型地中海贫血、系统性硬化、系统性红斑狼疮、多发性硬化和青少年类风湿性关节炎。
此外，造血干细胞和祖细胞的施用可以用于治疗自身免疫性紊乱。在一些实施方案中，在输注到患者中之后，移植的造血干细胞和祖细胞可以归巢至干细胞小生境诸如骨髓并且建立富有成效的血细胞生成。这继而可以重构在自身免疫性细胞消除期间耗尽的细胞的群体，这可能由于自身反应性淋巴细胞(例如，自身反应性T淋巴细胞和/或自身反应性B淋巴细胞)的活性而发生。可以通过向患者施用造血干细胞和祖细胞进行治疗的自身免疫性疾病包括但不限于银屑病、银屑病性关节炎、1型糖尿病(Type 1diabetes mellitus)(1型糖尿病(Type 1diabetes))、类风湿性关节炎(RA)、人类系统性红斑狼疮(SLE)、多发性硬化(MS)、炎性肠病(IBD)、淋巴细胞性结肠炎、急性播散性脑脊髓炎(ADEM)、艾迪生氏病、普秃、强直性脊柱炎、抗磷脂抗体综合征(APS)、再生障碍性贫血、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、自身免疫性内耳病(AIED)、自身免疫性淋巴增生性综合征(ALPS)、自身免疫性卵巢炎、巴洛病、白塞氏病、大疱性类天疱疮、心肌病、恰加斯氏病、慢性疲劳免疫功能障碍综合征(CFIDS)、慢性炎性脱髓鞘性多发性神经病、克罗恩氏病、瘢痕性类天疱疮、乳糜泻-疱疹样皮炎，冷凝集素病、CREST综合征、恶性萎缩性丘疹病、盘状狼疮、自主神经功能障碍、子宫内膜异位、原发性混合型冷球蛋白血症、纤维肌痛-纤维肌炎、肺出血肾炎综合征、格雷夫斯病、格林-巴利综合征(GBS)、桥本氏甲状腺炎、化脓性汗腺炎、特发性和/或急性血小板减少性紫癜、特发性肺纤维化、IgA神经病变、间质性膀胱炎、青少年关节炎、川崎病、扁平苔癣、莱姆病、梅尼埃病、混合性结缔组织病(MCTD)、重症肌无力、神经性肌强直、斜视性眼阵挛肌阵挛综合征(OMS)、视神经炎、奥德氏甲状腺炎、寻常型天疱疮、恶性贫血、多软骨炎、多肌炎和皮肌炎、原发性胆汁性肝硬化、结节性多动脉炎、多腺体综合征、风湿性多肌痛、原发性无丙种球蛋白血症、雷诺现象、莱特尔综合征、风湿热、结节病、硬皮病、干燥综合征、僵人综合征、大动脉炎、颞动脉炎(又称“巨细胞动脉炎”)、溃疡性结肠炎、胶原性结肠炎、葡萄膜炎、血管炎、白癜风、外阴痛(“外阴前庭炎”)和韦格纳肉芽肿病。
在一些实施方案中，提供了一种从人类受试者收获造血干细胞的方法。该方法包括向人类受试者施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，并从人类受试者的外周血收获造血干细胞。
在一些实施方案中，提供了一种将造血干细胞移植到有相应需要的人类患者中的方法。该方法包括向造血干细胞供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，从供体的外周血收获造血干细胞，并将收获的造血干细胞移植到患者中。
供体和患者的选择
在一些实施方案中，患者是供体。在这样的情况下，抽取的造血干细胞或祖细胞可以被再输注到患者中，使得这些细胞可以随后归巢到造血组织并建立富有成效的血细胞生成，从而填充或再填充患者中有缺陷或缺乏的细胞系(例如，巨核细胞、凝血细胞、血小板、红细胞、肥大细胞、原粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、小胶质细胞、粒细胞、单核细胞、破骨细胞、抗原呈递细胞、巨噬细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞的群体)。在这种情况下，移植的造血干细胞或祖细胞最不可能经历移植物排斥，因为输注的细胞来源于患者并表达与患者表达的相同的HLA I类和HLA II类抗原。
可选地，患者和供体可以是不同的。在一些实施方案中，患者和供体是相关的，并且可以例如是HLA匹配的。如本文描述的，由于移植物接受者中的内源性T细胞和NK细胞不太可能将进入的造血干细胞或祖细胞移植物识别为外来的，并且因此不太可能针对移植产生免疫应答，因此，HLA匹配的供体-接受者对具有减少的移植物排斥风险。示例性HLA匹配的供体-接受者对是遗传相关的供体和接受者，诸如家族性供体-接受者对(例如同胞供体-接受者对)。
在一些实施方案中，患者和供体是HLA不匹配的，这发生在供体和接受者之间至少一种HLA抗原，特别是关于HLA-A、HLA-B和HLA-DR的抗原不匹配时。例如，为了降低移植排斥的可能性，在供体和接受者之间一个单体型可能匹配，而另一个单体型可能不匹配。
CD34dim细胞
当供体和患者不同时，使用包含CD34dim细胞的造血干细胞的治疗方法特别有用，这部分地因为CD34dim细胞在施用至接受者时能够抑制同种异体反应性T淋巴细胞增殖，从而降低移植物抗宿主病(GVHD)的风险。(D’Aveni等人(2015年)，同上)。在某些实施方案中，根据本文公开的方法，施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂将包含CD34dim细胞的造血干细胞从供体的骨髓动员到外周血中。与来自未动员的哺乳动物的外周血相比，CD34dim细胞在外周血中以更高的量存在。在某些实施方案中，CD34dim细胞以比如果使用单独的CXCR4拮抗剂动员造血干细胞更高的量存在于外周血中。
因此，本文公开的方法可用于对有相应需要的患者进行同种异体造血干细胞移植。例如，该方法可以包括将治疗有效量的同种异体造血干细胞输注到患者中，其中使用本文的方法将造血干细胞从人类供体的骨髓动员到人类供体的外周血中。在某些实施方案中，该方法包括向供体施用(i)以从约50μg/kg至约1,000μg/kg的剂量的选自由Gro-β、Gro-βT及其变体组成的组的CXCR2激动剂和(ii)CXCR4拮抗剂。
此外，在接受同种异体造血细胞移植的患有标准风险疾病的患者中，CD34dim细胞已被证明增加总存活率(OS)，降低非复发死亡率(NRM，即无复发(relapse)/复发(recurrence)的死亡时间)，并降低感染风险(例如巨细胞病毒(CMV)感染)。(Nakasone等人“CD34+monocytes mobilized by G-CSF in donor PB and clinical outcomes afterall-HCT from related donors,”Poster presented at 44th Annual Meeting of theEuropean Society for Blood and Marrow Transplantation,March 18-21,2018,Lisbon,Portugal.)。
因此，在某些实施方案中，本文公开的治疗人类患者的干细胞紊乱的方法可以包括将治疗有效量的通过本文公开的任一种方法动员的造血干细胞输注到患者中，其中动员的造血干细胞包含CD34dim细胞，并且其中治疗导致OS增加、NRM降低和/或感染(例如，CMV感染)风险降低。
此外，本文描述的方法可以用于预防有相应需要的患者的移植后感染、降低有相应需要的患者发展移植后感染的风险或降低有相应需要的患者的移植后感染的严重程度。该方法可以包括将治疗有效量的造血干细胞输注到患者中，其中根据本文描述的方法将造血干细胞从人类供体的骨髓动员到人类供体的外周血中，例如，向人类供体施用(i)以从约50μg/kg至约1,000μg/kg的剂量的选自由Gro-β、Gro-βT及其变体组成的组的CXCR2激动剂和(ii)CXCR4拮抗剂。在某些实施方案中，感染是CMV感染。
此外，本公开内容涉及一种预防有相应需要的患者的移植物抗宿主病(GVHD)、降低有相应需要的患者发展移植物抗宿主病(GVHD)的风险或降低有相应需要的患者的移植物抗宿主病(GVHD)的严重程度的方法，其中该方法包括将治疗有效量的造血干细胞输注到患者中，其中通过本文描述的方法将造血干细胞从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中，例如包括向哺乳动物供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂。
在某些实施方案中，与来自未动员的哺乳动物的外周血相比，从供体的骨髓动员到外周血中的造血干细胞和祖细胞包含至少1％、至少2％、至少5％、至少10％、至少15％、至少20％或至少20％或更多的CD34dim细胞。在某些实施方案中，与来自未动员的哺乳动物的外周血相比，从供体的骨髓动员到外周血中的造血干细胞和祖细胞包含从约1％至约5％、从约1％至约10％、从约1％至约15％、从约1％至约20％、从约2％至约25％、2％至约5％、从约2％至约10％、从约2％至约15％、从约2％至约20％、从约2％至约25％、从约5％至约10％、从约5％至约15％、从约5％至约20％、从约5％至约25％、从约10％至约15％、从约10％至约20％、从约10％至约25％、从约15％至约20％、从约15％至约25％的CD34dim细胞。
在某些实施方案中，与来自未动员的哺乳动物的外周血相比，从供体的骨髓动员到外周血中的造血干细胞和祖细胞包含至少1.5倍、至少2倍、至少3倍、至少4倍、至少5倍、至少6倍、至少7倍、至少8倍、至少9倍、至少10倍、至少11倍、至少12倍、至少13倍、至少14倍、至少15倍、至少20倍、至少30倍、至少50倍更多的CD34dim细胞。在某些实施方案中，与来自未动员的哺乳动物的外周血相比，从供体的骨髓动员到外周血中的造血干细胞和祖细胞包含介于约1.5倍和30倍之间、介于约5倍和约25倍之间、介于约10倍和约20倍之间、或介于约12倍和约17倍之间更多的CD34dim细胞。
在某些实施方案中，与如果使用单独的CXCR4拮抗剂动员的造血干细胞相比，从供体的骨髓动员到外周血中的造血干细胞和祖细胞包含至少1％、至少2％、至少5％、至少10％、至少15％、至少20％或至少20％或更多的CD34dim细胞。在某些实施方案中，与如果使用单独的CXCR4拮抗剂动员的造血干细胞相比，从供体的骨髓动员到外周血中的造血干细胞和祖细胞包含从约1％至约5％、从约1％至约10％、从约1％至约15％、从约1％至约20％、从约2％至约25％、2％至约5％、从约2％至约10％、从约2％至约15％、从约2％至约20％、从约2％至约25％、从约5％至约10％、从约5％至约15％、从约5％至约20％、从约5％至约25％、从约10％至约15％、从约10％至约20％、从约10％至约25％、从约15％至约20％、从约15％至约25％的CD34dim细胞。
在某些实施方案中，与如果使用单独的CXCR4拮抗剂动员的造血干细胞相比，从供体的骨髓动员到外周血中的造血干细胞和祖细胞包含至少1.5倍、至少2倍、至少3倍、至少4倍、至少5倍、至少6倍、至少7倍、至少8倍、至少9倍、至少10倍、至少11倍、至少12倍、至少13倍、至少14倍、至少15倍、至少20倍、至少30倍、至少50倍更多的CD34dim细胞。在某些实施方案中，与如果使用单独的CXCR4拮抗剂动员的造血干细胞相比，从供体的骨髓动员到外周血中的造血干细胞和祖细胞包含介于约1.5倍和30倍之间、介于约5倍和约25倍之间、介于约10倍和约20倍之间或介于约12倍和约17倍之间更多的CD34dim细胞。
造血干细胞和祖细胞的遗传修饰的方法
在输注到患者，诸如患有本文描述的一种或更多种干细胞紊乱的患者中之前，从供体获得的造血干细胞(或其后代)可以通过例如破坏内源基因进行遗传修饰。例如，该策略可以用于使对于患者是同种异体的造血干细胞中一种或更多种主要组织相容性复合体基因的表达沉默，从而降低移植后移植物排斥的可能性。
已经建立了广泛多种用于破坏细胞群体中的靶基因的方法。在一些实施方案中，一种这样的方法是通过使用成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)/Cas系统，该系统最初在细菌和古细菌中演化为针对病毒感染的适应性防御机制。CRISPR/Cas系统包括质粒DNA内的回文重复序列和相关的Cas9核酸酶。这种DNA和蛋白的集成通过首先将外来的DNA掺入CRISPR基因座来指导对靶序列的位点特异性DNA裂解。含有这些外来的序列和CRISPR基因座重复间隔元件的多核苷酸继而在宿主细胞中被转录，以产生指导RNA，该指导RNA随后可以与靶序列退火并将Cas9核酸酶定位于该位点。以这种方式，在外来的多核苷酸中可以产生高度位点特异性的cas9介导的DNA裂解，因为使cas9与靶DNA分子非常接近的相互作用是由RNA:DNA杂交控制的。因此，理论上人们可以设计裂解任何感兴趣的靶DNA分子的CRISPR/Cas系统。这种技术已经被用来编辑真核生物的基因组(Hwang等人(2013)NatureBiotechnology 31:227，其公开内容通过引用并入本文)，并且可以用作位点特异性地编辑造血干细胞基因组的有效手段，以便例如在掺入编码靶蛋白的基因前裂解DNA。CRISPR/Cas用于调节基因表达的用途已在例如US 8,697,359中描述，其公开内容通过引用并入本文。在将感兴趣的基因掺入造血干细胞前，用于位点特异性地裂解基因组DNA的替代方法包括使用锌指核酸酶(ZFN)和转录激活因子样效应物核酸酶(TALEN)。与CRISPR/Cas系统不同，这些酶不含有定位至特定靶序列的指导多核苷酸。而是，靶特异性由这些酶内的DNA结合结构域控制。ZFN和TALEN在基因组编辑应用中的用途在例如Urnov等人(2010)NatureReviews Genetics 11:636；和在Joung等人(2013)Nature Reviews Molecular CellBiology 14:49中描述，这二者的公开内容通过引用并入本文。
可以用于将编码靶基因的多核苷酸掺入造血干细胞基因组的另外的基因组编辑技术包括使用ARCUSTM兆核酸酶，其可以被合理设计以便位点特异性地裂解基因组DNA。考虑到已经为这样的酶建立的确定的结构-活性关系，使用这些酶将编码靶基因的基因掺入到哺乳动物细胞的基因组中是有利的。单链兆核酸酶可以在某些氨基酸位置处被修饰，以便产生在期望位置处选择性地裂解DNA的核酸酶，从而使得能够将靶基因位点特异性地掺入到造血干细胞的核DNA中。这些单链核酸酶已经在例如US8,021,867和US 8,445,251中广泛描述，其每一个的公开内容通过引用并入本文。
CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂给药的动力学
对于其中将CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂二者施用至供体的情况，这两种剂可以被并行施用至供体。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂可以彼此共配制并以同一药物组合物施用。可选地，CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂可以被配制成不同的药物组合物，并被分别但同时施用至供体。
在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂在CXCR2激动剂的施用前被施用至供体。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂可以在CXCR2激动剂的施用之前约30分钟至约180分钟，诸如约40分钟至约160分钟、约50分钟至约150分钟、约60分钟至约140分钟、约70分钟至约130分钟、约60分钟至约120分钟、约70分钟至约110分钟或约80分钟至约100分钟(例如，在CXCR2激动剂的施用之前约30分钟、约35分钟、约40分钟、约45分钟、约50分钟、约55分钟、约60分钟、约65分钟、约70分钟、约75分钟、约80分钟、约85分钟、约90分钟、约95分钟、约100分钟、约105分钟、约110分钟、约115分钟、约120分钟、约125分钟、约130分钟、约135分钟、约140分钟、约145分钟、约150分钟、约155分钟、约160分钟、约165分钟、约170分钟、约175分钟或约180分钟)被施用至供体。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂在CXCR2激动剂的施用之前约30分钟至约60分钟(例如，在CXCR2激动剂的施用之前约30分钟、约35分钟、约40分钟、约45分钟、约50分钟、约55分钟或约60分钟)被施用至供体。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂可以在CXCR2激动剂的施用之前约45分钟被施用至供体。
造血干细胞或祖细胞的群体的分离可以在CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂的施用完成后约10分钟至约60分钟(例如，约10分钟至约1.9小时、约20分钟至约1.8小时、约25分钟至约1.7小时、约30分钟至约1.6小时、约40分钟至约1.5小时(例如，在CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂的施用完成后约10分钟、约15分钟、约20分钟、约25分钟、约30分钟、约35分钟、约40分钟、约45分钟、约50分钟、约55分钟、约60分钟或约120分钟)开始。在一些实施方案中，造血干细胞或祖细胞的群体的分离可以在CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂施用完成后约10分钟至约20分钟(例如，在CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂施用完成后约10分钟、约11分钟、约12分钟、约13分钟、约14分钟、约15分钟、约16分钟、约17分钟、约18分钟、约19分钟或约20分钟)开始。在一些实施方案中，造血干细胞或祖细胞的群体的分离在CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂施用完成后约15分钟开始。
在一些实施方案中，造血干细胞或祖细胞的群体在从约15分钟至约6小时，诸如从约20分钟至约4.5小时、约30分钟至约4小时、约40分钟至约3.5小时、约50分钟至约3小时或约1小时至约2小时的时间段内(例如，在约15分钟、约20分钟、约30分钟、约35分钟、约40分钟、约45分钟、约50分钟、约55分钟、约60分钟、约65分钟、约70分钟、约75分钟、约80分钟、约85分钟、约90分钟、约95分钟、约100分钟、约105分钟、约110分钟、约115分钟、约120分钟、约180分钟、约240分钟、约300分钟或约360分钟的时间段内)从供体分离。在一些实施方案中，造血干细胞和祖细胞的群体可以在从约30分钟至约1小时的时间段内(例如，在约30分钟、约35分钟、约40分钟、约45分钟、约50分钟、约55分钟或约60分钟的时间段内)从供体分离。
在一些实施方案中，造血干细胞或祖细胞可以通过单采术收获。在一些实施方案中，造血干细胞或祖细胞可以通过从供体(即受试者)抽取外周血来收获。
CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的施用途径
本文描述的CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂可以通过多种途径，诸如静脉内、皮下、肌内或胃肠外施用至患者。在任何给定情况下，最合适的施用途径将取决于所施用的特定剂、患者、药物配制方法、施用方法(例如，施用时间和施用途径)、患者的年龄、体重、性别、所治疗疾病的严重程度、患者的饮食和患者的排泄率。优选地，CXCR2激动剂(例如，Gro-β、Gro-βT或其变体)可以被静脉内施用至供体。在这些条件下，CXCR2激动剂，诸如本文描述的那些激动剂，快速产生富含CD34+CD90+CD45RA-细胞(造血干细胞)的细胞群体，并降低其他细胞类型，诸如白细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞的动员。该特性在下文实施例1中进一步详细描述。
药物组合物
本文设想的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂可以各自配制成药物组合物，用于施用至受试者，诸如哺乳动物受试者(例如人类受试者)。例如，本文设想了包含CXCR2激动剂和/或CXCR4拮抗剂以及混合了一种或更多种合适的稀释剂、运载体和/或赋形剂的药物组合物。药物组合物可以包括无菌水悬浮液。用于选择和制备合适制剂的常规程序和成分在例如Remington:The Science and Practice of Pharmacy(2012,第22版)和在The UnitedStates Pharmacopeia:The National Formulary(2015,USP 38NF 33)中描述，其公开内容通过引用以其整体并入本文。
药物组合物可以单独的或与药学上可接受的运载体组合(其比例可以由活性药物成分(即CXCR2激动剂和/或CXCR4拮抗剂)的量、选择的施用途径和标准药物实践来确定)施用至受试者，诸如人类受试者。
CXCR2激动剂和/或CXCR4拮抗剂的施用和给药
设想的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂可以通过一种或更多种施用途径施用至受试者，诸如哺乳动物受试者(例如人类受试者)。例如，设想的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂可以通过尤其是静脉内输注、腹膜内输注、肌内输注、动脉内输注或皮下输注施用至受试者。
设想的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂可以以一种或更多种剂量被施用至受试者。例如，CXCR2激动剂和/或CXCR4拮抗剂可以以单剂量或以两个、三个、四个、五个或更多个剂量被施用。当施用多个剂量时，可以在初始剂量后的同一天或一天或更多天、几周、几月或几年期间提供随后剂量。例如，根据诸如例如受试者的年龄、体重、性别、受试者的饮食和受试者的排泄率等因素，本文描述的设想的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂可以每天、每周、每月或每年一次或更多次被施用至受试者，诸如人类受试者。在某些实施方案中，设想的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂各自以每天一次的单剂量被施用。
本文描述的造血干细胞或祖细胞和药物组合物可以以一个或更多个剂量被施用至受试者。当施用多个剂量时，可以在初始剂量后的一天或更多天、几周、几月或几年提供随后剂量。例如，根据诸如例如受试者的年龄、体重、性别、所治疗疾病的严重程度、受试者的饮食和受试者的排泄率等因素，本文描述的造血干细胞和药物组合物可以每天、每周、每月或每年一次或更多次被施用至受试者，诸如罹患本文描述的一种或更多种疾病、状况或紊乱的人类受试者。
实施例
提出以下实施例以便向本领域普通技术人员提供可以如何使用、制备和评价本文描述的组合物和方法的描述，并且意图对本发明仅仅是示例性的，并且不意图限制本发明人视为是其发明的范围。
实施例1.Gro-βT对小鼠和恒河猴中的造血干细胞动员的影响
被动员的外周血移植物目前是自体和同种异体移植二者的造血干细胞和祖细胞(HSPC)的主要来源。最常见的临床造血干细胞动员方案是五天的非格司亭(G-CSF)。这种方案需要每天注射，与骨痛相关，并且经常导致不可预测地低的产率。快速动员方法将是对目前护理标准的重大改进，所述快速动员方法理想地仅需要单次处理并具有稳健和可预测的动力学。在小鼠中，独特的CXCR2激动剂Gro-βT在单次注射后15分钟诱导干细胞和祖细胞的快速动员。当与CXCR4的抑制剂普乐沙福(AMD3100)共施用时，动员结果协同增加，并且移植物富含高度可植入的长期造血干细胞(参见，例如，图1A；LT-HSC＝Lin-c-kit+Sca-1+CD150+CD48+)。含有由Gro-βT和普乐沙福动员的细胞的移植物在第16周时导致比含有由单独的G-CSF动员的细胞的移植物高的相对数目的竞争性再填充单位(CRU)(图1B)。
在该实施例中，提供的数据表明，与单独的AMD3100在非人类灵长类动物(NHP)中实现的CD34+细胞的动员和集落形成单位(CFU)相比，用Gro-βT和AMD3100的组合处理导致CD34+细胞的动员和集落形成单位(CFU)显著增强。
如下文描述的，使用Gro-βT和普乐沙福(也称为AMD3100)在恒河猴(rhesusmacaques)中研究造血干细胞的动员。
方法
将雄性恒河猴用单独的AMD3100或AMD3100与Gro-βT的组合进行处理。在处理前和处理后0.5小时、1小时、2小时、4小时和24小时立即收集血液，并且通过多色流式细胞术进行分析，以定量HSPC数目。将另外等分试样的经动员的血液铺板于甲基纤维素中，并且7天后计数CFU。
结果
图2A示出了当向恒河猴静脉内施用时不同剂量的Gro-βT的药代动力学谱。图2B示出了当向恒河猴皮下施用时不同剂量的Gro-βT的药代动力学谱。在所有实验中，将Gro-βT与普乐沙福并行施用至受试者。
如图3-图6中示出的，Gro-βT和AMD3100将白细胞动员到外周血中。将动物用单独的AMD3100或AMD3100与Gro-βT的组合进行动员。在显示的时间点收集外周血，并在HESKA血细胞分析仪上对白细胞进行计数。确定每μL外周血中白细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞的总数。图2-图5中示出的数据被表示为平均值±SEM，并且代表每组5只动物。统计显著性基于双因素ANOVA与事后Dunnett多重比较检验确定(**p<0.01)。
重要的是，如图7和图8中示出的，Gro-βT和AMD3100诱导CD34+细胞到外周血中的稳健动员。图7和图8中示出的数据包括每个处理组中CD34+造血干细胞和祖细胞占全血的百分比。对每μL外周血中CD34+细胞的绝对数目和改变倍数用单一平台定量方法进行定量。图7和图8中示出的数据被表示为平均值±SEM，并且代表每组5只动物。统计显著性基于双因素ANOVA与事后Dunnett多重比较检验确定(*p<0.05，**p<0.01，****p<0.0001)。
另外地，如图9和图10中示出的，响应于Gro-βT+AMD3100而被动员的CD34+细胞富集原始CD34+CD90+CD45RA-干细胞和祖细胞。图9和图10中示出的数据包括每个处理组中CD34+CD90+CD45RA-造血干细胞和祖细胞占全血的百分比。显示了每μL外周血中CD34+CD90+CD45RA-细胞的绝对数目和改变倍数。图9和图10中示出的数据被表示为平均值±SEM，并且代表每组5只动物。统计显著性基于双因素ANOVA与事后Dunnett多重比较检验确定(*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001)。
此外，如图11中示出的，Gro-βT和AMD3100动员具有集落形成潜力的造血干细胞和祖细胞。在甲基纤维素中培养7天后，对每mL外周血的CFU数目进行计数。图11中示出的数据被表示为平均值±SEM，并且代表每组3-5只动物。统计显著性基于双因素ANOVA与事后Dunnett多重比较检验确定(*p<0.05)。MMP-9与TIMP-1的比率在用Gro-βT和AMD3100处理后进一步升高(图12-图14)。
总结使用不同剂量的Gro-βT和AMD3100在恒河猴中动员CD34+细胞(例如，CD34+CD90+CD45RA-细胞)的另外数据在以下表8-11中报告。表8-11中使用以下表示法报告数量：“中值(观察到的最小值-观察到的最大值)。”
表8.在恒河猴中观察到的施用普乐沙福(1mg/kg，皮下)后的动员响应
Figure BDA0002621915340002441
表9.在恒河猴中观察到的施用Gro-βT(450μg/kg，静脉内)和普乐沙福(1mg/kg，皮下)后的动员响应
Figure BDA0002621915340002451
表10.在恒河猴中观察到的施用Gro-βT(450μg/kg，皮下)和普乐沙福(1mg/kg，皮下)后的动员响应
Figure BDA0002621915340002452
表11.在恒河猴中观察到的施用Gro-βT(1.2mg/kg，皮下)和普乐沙福(1mg/kg，皮下)后的动员响应
Figure BDA0002621915340002461
结论
在非人类灵长类动物中，Gro-βT与AMD3100组合的单次处理在施用后4小时内诱导干细胞和祖细胞的稳健动员。另外地，Gro-βT与AMD3100组合导致相对于单独的AMD3100的2-3倍更多的CD34+CD90+CD45RA-干细胞和祖细胞，表明移植物质量显著提高。
此外，如由这些数据所证明的，在自体移植和同种异体移植(包括其中G-CSF被忌用或与不良事件相关的疾病诸如镰状细胞病(SCD)和多发性硬化(MS))中，Gro-βT与AMD3100组合可以提供一种更稳健且更安全的对G-CSF的替代选择。
实施例2.确定用CXCR2激动剂和/或CXCR4拮抗剂动员的造血干细胞的群体是否适于体外扩增和/或治疗用途
使用本文描述的组合物和方法，本领域技术从业者可以动员哺乳动物供体诸如人类供体中的造血干细胞或祖细胞的群体。在一些实施方案中，从业者可以施用CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂，所施用的CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂的量足以引起造血干细胞的群体释放到循环外周血中同时减少造血谱系的其他细胞诸如白细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞的动员。
当将CXCR4拮抗剂与CXCR2激动剂组合施用时，医生可以同时或在不同时间向供体施用这两种剂。在一些实施方案中，CXCR4拮抗剂可以在CXCR2激动剂的施用之前约30分钟至约180分钟，诸如约40分钟至约160分钟、约50分钟至约150分钟、约60分钟至约140分钟、约70分钟至约130分钟、约60分钟至约120分钟、约70分钟至约110分钟或约80分钟至约100分钟(例如，在CXCR2激动剂的施用之前约30分钟、约35分钟、约40分钟、约45分钟、约50分钟、约55分钟、约60分钟、约65分钟、约70分钟、约75分钟、约80分钟、约85分钟、约90分钟、约95分钟、约100分钟、约105分钟、约110分钟、约115分钟、约120分钟、约125分钟、约130分钟、约135分钟、约140分钟、约145分钟、约150分钟、约155分钟、约160分钟、约165分钟、约170分钟、约175分钟或约180分钟)被施用至供体。
为了评价动员方案的功效，可以在施用CXCR2激动剂和/或CXCR4拮抗剂后从受试者分离外周血样品。然后，样品可以通过例如获得样品的一个或更多个参数(诸如表2中列出的参数)中的每一个的输入值来表征。可以用于评估造血干细胞动员方案的功效的示例性参数是样品中造血干细胞与其他类型细胞(诸如白细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞)的比率以及造血干细胞的相对频率。这些参数的输入值可以例如使用本领域已知的免疫分型方法，诸如流式细胞术和荧光激活细胞分选(FACS)技术获得。
当获得和分析表2中列出的多于一个参数的输入值时，人们可以分析参数的组合。在一些实施方案中，人们可以分析施用CXCR2激动剂和/或CXCR4拮抗剂后从供体的外周血获得的样品中造血干细胞与白细胞的比率、造血干细胞与嗜中性粒细胞的比率、造血干细胞与淋巴细胞的比率、造血干细胞与单核细胞的比率和/或造血干细胞的相对频率。例如，人们可以分析表3-6的任何一个中列出的参数的组合。
在获得一个或更多个参数中的每一个的输入值后，人们可以将输入值与每个参数的参考标准进行比较。如果满足参考标准(例如，如果从供体的外周血获得的样品中造血干细胞与另一种造血细胞类型的比率足够高，或者如果造血干细胞的相对频率足够高)，则可以释放细胞用于离体扩增和/或用于治疗用途。
实施例3.通过施用造血干细胞或祖细胞移植物治疗血液学紊乱
使用本文描述的组合物和方法，本领域技术从业者可以通过向患者施用造血干细胞或祖细胞移植物来治疗干细胞紊乱，诸如本文描述的血液学病理。例如，从业者可以鉴定可能对如实施例1中概述的动员方案有响应的造血干细胞或祖细胞的人类供体，并且因此随后可以例如，如实施例2中陈述的动员造血干细胞或祖细胞的群体。动员后，医生可以从供体分离造血干细胞或祖细胞的群体。细胞的分离可以在CXCR4拮抗剂和/或CXCR2激动剂施用完成后例如约10分钟至约60分钟，诸如在这些剂施用完成后约15分钟至约55分钟、约20分钟至约50分钟、约25分钟至约45分钟、或约30分钟至约40分钟(例如，在CXCR4拮抗剂和CXCR2激动剂施用完成后约10分钟、约15分钟、约20分钟、约25分钟、约30分钟、约35分钟、约40分钟、约45分钟、约50分钟、约55分钟或约60分钟)开始。
分离程序可以在从约15分钟至约6小时，诸如从约20分钟至约4.5小时、约30分钟至约4小时、约40分钟至约3.5小时、约50分钟至约3小时或约1小时至约2小时的时间段内(例如，在约15分钟、约20分钟、约30分钟、约35分钟、约40分钟、约45分钟、约50分钟、约55分钟、约60分钟、约65分钟、约70分钟、约75分钟、约80分钟、约85分钟、约90分钟、约95分钟、约100分钟、约105分钟、约110分钟、约115分钟或约120分钟的时间段内)进行。在一些实施方案中，造血干细胞和祖细胞的群体可以在从约30分钟至约1小时的时间段内(例如，在约30分钟、约35分钟、约40分钟、约45分钟、约50分钟、约55分钟或约60分钟的时间段内)从供体分离。
在分离过程之后，患者然后可以接受经动员的且分离的造血干细胞或祖细胞的输注(例如，静脉内输注)。患者可以是供体，或可以是对于供体是HLA匹配的患者，从而降低移植物排斥的可能性。患者可以是罹患例如癌症，诸如本文描述的血液学癌症的患者。另外地或可选地，患者可以是罹患本文描述的自身免疫性疾病或代谢紊乱的患者。取决于多种因素，诸如患者的年龄、体重和所治疗疾病的严重程度，医生可以向患者施用例如以1×103至1×109个造血干细胞/kg(例如，约1×105个CD34+细胞/kg至约1×107个CD34+细胞/kg、约2×105个CD34+细胞/kg至约9×106个CD34+细胞/kg、约3×105个CD34+细胞/kg至约8×106个CD34+细胞/kg、约4×105个CD34+细胞/kg至约7×106个CD34+细胞/kg)剂量的经动员的且分离的造血干细胞或祖细胞。
医生可以通过例如在施用移植物后从患者抽取血液样品并确定造血干细胞或造血谱系细胞(诸如巨核细胞、凝血细胞、血小板、红细胞、肥大细胞、原粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、小胶质细胞，粒细胞、单核细胞、破骨细胞、抗原呈递细胞、巨噬细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞、T淋巴细胞和B淋巴细胞)的浓度的增加来监测造血干细胞移植物的植入。该分析可以在造血干细胞移植疗法后例如约1小时至约6个月、从约2小时至约5个月、从约3小时至约4个月、从约4小时至约3个月、从约10小时至约7天、从约24小时至约96小时或更长时间(例如，1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时、12小时、13小时、14小时、15小时、16小时、17小时、18小时、19小时、20小时、21小时、22小时、23小时、24小时、2天、3天、4天、5天、6天、7天、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、13周、14周、15周、16周、17周、18周、19周、20周、21周、22周、23周、24周或更长时间)进行。在移植疗法后造血干细胞或造血谱系细胞的浓度相对于在移植疗法前对应的细胞类型的浓度的增加(例如，增加1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、200％、500％或更多)的发现，提供了造血干细胞或祖细胞移植疗法在治疗干细胞紊乱方面是有效的一种指示。
实施例4：使用CXCR2激动剂和/或CXCR4拮抗剂对CD34dim细胞的动员
在该实施例中，提供的数据表明，与单独的AMD3100在非人类灵长类动物(NHP)中实现的CD34dim细胞的动员相比，用Gro-βT和AMD3100(普乐沙福)的组合处理导致CD34dim细胞的动员显著增强。
根据实施例1的方法动员细胞。使用流式细胞仪测试外周血样品的标志物CD34、CD11b、CD14、CD16、CD45和SSC。
如图15中示出的，静脉内施用450μg/kg Gro-βT和皮下施用1mg/kg AMD3100令人惊讶地导致为CD34dim CD11b+的细胞的群体的动员。该群体中的亚群是CD14+CD16+、CD14-CD16-及其组合。图16示出了，与单独的AMD3100相比，在施用Gro-βT和AMD3100的组合后，CD34dim细胞的动员被显著增强。
实施例5：Gro-βT与AMD3100的组合动员抑制移植物抗宿主病的免疫抑制性单核细胞
该实施例表明，与移植具有较低浓度CD34dim细胞的外周血单核细胞相比，用Gro-βT和AMD3100(普乐沙福)的组合处理导致具有免疫抑制特性的CD34dim细胞的动员显著增强，并且表明移植该细胞的群体导致异种移植GVHD小鼠模型中急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生率显著降低。
将恒河猴用Gro-βT、AMD3100、Gro-βT和AMD3100或单独的G-CSF进行处理。使用流式细胞术测试外周血样品。用Gro-βT和AMD3100动员的动物显示出在处理后4小时CD34dim细胞的数目比基线增加多于15倍(p<0.0001，n＝13，图17)。相比之下，用单独的G-CSF动员的动物显示出在最后剂量的G-CSF后4小时CD34dim细胞的数目比基线增加仅约9倍(p<0.0001，n＝3，图17)。
此外，在图18中提供了未动员的细胞和由G-CSF、Gro-βT和AMD3100以及单独的AMD3100动员的移植物的组成。如示出的，与使用G-CSF动员的移植物相比，用Gro-βT和AMD3100动员的移植物显示出CD34dim细胞的3倍增加，且T细胞的3倍增加。
为了确定CD34dim细胞是否具有免疫抑制特性，将它们从用Gro-βT和AMD3100处理的恒河猴的外周血中分选出来。将CD34dim细胞与在体外用抗CD2/CD3/CD28包被的珠刺激的羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记的自体T细胞共培养。如图19中示出的，四天后如通过CFSE染色测量的，Gro-βT和AMD3100动员的CD34dim细胞抑制T细胞增殖。
为了评估这些免疫抑制性细胞是否可以预防GVHD，我们在免疫缺陷小鼠NOD scidgamma(NSG)小鼠中建立了异种移植GVHD模型。将Gro-βT和AMD3100动员的含有高百分比的CD34dim细胞的外周血(6×106个PBMC)注射到亚致死地(sublethally)辐照的NSG小鼠中。将这与未动员的含有相对低数目的CD34dim细胞的灵长类动物PBMC(6×106个PBMC)和G-CSF动员的灵长类动物PBMC(6×106个PBMC)相比较。如图20中的存活曲线示出的，在第24天，与移植了AMD3100动员的PBMC的5/16小鼠死于aGVHD、移植了G-CSF动员的PBMC的3/16小鼠死于aGVHD以及移植了Gro-βT和AMD3100动员的PBMC的没有一只小鼠死于aGVHD相比，所有移植了未动员的PBMC的小鼠(13/13)都死于aGVHD。在移植后第60天，移植了Gro-βT和AMD3100的15/16小鼠仍然存活，而移植了AMD3100动员的外周血的仅10/16小鼠以及移植了G-CSF动员的外周血的仅11/16小鼠仍然存活(参见图20)。如图21A中示出的，在移植后第14天，移植了未动员的PBMC的小鼠(“未动员的”)与移植了Gro-βT和AMD3100动员的PBMC的小鼠(“Gro-βT+普乐沙福”)相比还显示出更高数目的供体T细胞(约160倍更高，参见图21A)(*p<0.01，n＝6-8)。另外地，同样如图21A中示出的，移植了用单独的AMD3100(即，普乐沙福)动员的PBMC的小鼠(“普乐沙福”)或移植了用单独的G-CSF动员的PBMC的小鼠(“G-CSF”)与移植了Gro-βT和AMD3100动员的PBMC的小鼠相比显示出更高数目的T细胞(分别约60倍更高(p<0.05)和约10倍更高(p<0.01))。
为了确认在图20中示出的NSG小鼠异种移植模型中，Gro-βT和AMD3100动员的移植物中的CD34dim细胞负责针对aGvHD的保护，用来自Gro-βT和AMD3100动员的恒河猴的6×106个PBMC移植另外的小鼠群组，其中CD34dim细胞首先通过荧光激活细胞分选而耗尽，并且将T细胞数目和存活率与移植了用Gro-βT和AMD3100动员的PBMC的群组和移植了未动员的PBMC的群组进行比较。如图21B中示出的，在移植后第14天，与移植了未动员的PBMC的小鼠(“未动员的”)相比，移植了Gro-βT和AMD 3100动员的PBMC的小鼠(“Gro-βT+普乐沙福”)的外周血中恒河猴CD45+CD3+ T细胞的数目显著降低(p<0.001，n＝10/组)。相比之下，在移植后第14天(n＝10)，移植了Gro-βT和AMD3100动员的耗尽CD34dim细胞的PBMC的小鼠与移植了未动员的PBMC的小鼠(“未动员的”)相比，显示在T细胞数目方面没有显著差异(参见图21B)。如图21C中示出的，到移植后第44天，与移植了Gro-βT和AMD3100动员的PBMC的8/10小鼠存活(“Gro-βT+普乐沙福”)(p<0.05)以及移植了Gro-βT和AMD3100动员的耗尽CD34dim细胞的PBMC的仅4/10小鼠存活(“Gro-βT+普乐沙福CD34dim-耗尽”)(相比于未动员的没有显著差异)相比，移植了未动员的PBMC的0/10小鼠(“未动员的”)存活。
因此，这些数据表明，Gro-βT和AMD3100的共施用与单独的AMD3100或目前护理标准G-CSF相比，不仅导致高度富集的HSC的快速且有效的动员而且这些HSC富含具有强有力的免疫抑制活性的CD34dim的细胞群体，并且表明移植该CD34dim细胞群体能够导致aGVHD的发生率或风险降低。
其他实施方案
本说明书中提及的所有出版物、专利和专利申请均通过引用并入本文，其程度如同每个单独的出版物或专利申请被具体和单独地指示通过引用并入的相同程度。
虽然已经结合本发明的具体实施方案描述了本发明，但是应该理解，本发明能够具有进一步的修改，并且本申请意图覆盖本发明的任何变化、用途或修改，所述本发明的任何变化、用途或修改在总体上遵循本发明的原则，并且包括在本发明所属的领域内是已知或惯用实践之内的并且可以被应用于在上文中陈述的必要特征且落入权利要求范围的此类偏离。
其他实施方案在权利要求中。

Claims (167)

1.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用(i)以从约50μg/kg至约300mg/kg的剂量的选自由Gro-β、Gro-βT及其变体组成的组的CXCR2激动剂和(ii)CXCR4拮抗剂。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述CXCR2激动剂是Gro-βT。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述CXCR2激动剂以从约100μg/kg至约250μg/kg的剂量被施用至所述供体。
4.根据权利要求3所述的方法，其中所述CXCR2激动剂以从约125μg/kg至约225μg/kg的剂量被施用至所述供体。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述CXCR2激动剂以约150μg/kg的剂量被施用至所述供体。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述CXCR2激动剂被静脉内施用至所述供体。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述CXCR4拮抗剂被皮下施用至所述供体。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述CXCR4拮抗剂是普乐沙福或其药学上可接受的盐。
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述普乐沙福或其药学上可接受的盐以从约50μg/kg至约500μg/kg的剂量被施用至所述供体。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述普乐沙福或其药学上可接受的盐以从约200μg/kg至约300μg/kg的剂量被施用至所述供体。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述普乐沙福或其药学上可接受的盐以约240μg/kg的剂量被施用至所述供体。
12.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后在所述供体的外周血样品中产生具有从约0.0008至约0.0021的CD34+细胞与白细胞的比率的细胞群体。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述样品中CD34+干细胞与白细胞的比率为从约0.0010至约0.0018。
14.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，按照通过将施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后所述供体的外周血样品与施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂前所述供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使所述供体的外周血以从约3.4:1至约6.9:1的比例相对于白细胞富集CD34+细胞。
15.根据权利要求14所述的方法，其中所述供体的外周血以从约4.0:1至约6.0:1的比例相对于白细胞富集CD34+细胞。
16.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后在所述供体的外周血样品中产生具有从约0.0018至约0.0058的CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率的细胞群体。
17.根据权利要求16所述的方法，其中所述样品中CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.0026至约0.0046。
18.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，按照通过将施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后所述供体的外周血样品与施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂前所述供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使所述供体的外周血以从约2.1:1至约8.1:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+细胞。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述供体的外周血以从约5.4:1至约7.4:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+细胞。
20.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后在所述供体的外周血样品中产生具有从约0.0021至约0.0094的CD34+细胞与淋巴细胞的比率的细胞群体。
21.根据权利要求20所述的方法，其中所述样品中CD34+细胞与淋巴细胞的比率为从约0.0025至约0.0035。
22.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，按照通过将施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后所述供体的外周血样品与施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂前所述供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使所述供体的外周血以从约4.8:1至约8.4的比例相对于淋巴细胞富集CD34+细胞。
23.根据权利要求22所述的方法，其中所述供体的外周血以从约5.0:1至约6.5:1的比例相对于淋巴细胞富集CD34+细胞。
24.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用所述CXCR2激动剂后在所述供体的外周血样品中产生具有从约0.0071至约0.0174的CD34+细胞与单核细胞的比率的细胞群体。
25.根据权利要求24所述的方法，其中所述样品中CD34+细胞与单核细胞的比率为从约0.0100至约0.0140。
26.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，按照通过将施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后所述供体的外周血样品与施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂前所述供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使所述供体的外周血以从约1.1:1至约2.3:1的比例相对于单核细胞富集CD34+细胞。
27.根据权利要求26所述的方法，其中所述供体的外周血以从约1.3:1至约1.9:1的比例相对于单核细胞富集CD34+细胞。
28.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后在所述供体的外周血样品中产生具有从约0.051％至约0.140％的CD34+细胞的频率的细胞群体。
29.根据权利要求28所述的方法，其中所述样品中CD34+细胞的频率为从约0.080％至约0.120％。
30.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，按照通过将施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后所述供体的外周血样品与施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂前所述供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以诱导所述供体的外周血中CD34+细胞的频率增加从约3.4倍至约7.1倍。
31.根据权利要求30所述的方法，其中所述供体的外周血中CD34+细胞的频率在施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后增加从约4.0倍至约6.0倍。
32.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后在所述供体的外周血样品中产生具有从约0.0003至约0.0016的CD34+CD90+CD45RA-细胞与白细胞的比率的细胞群体。
33.根据权利要求32所述的方法，其中所述样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与白细胞的比率为从约0.0006至约0.0012。
34.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，按照通过将施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后所述供体的外周血样品与施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂前所述供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使所述供体的外周血以从约5.5:1至约26.9:1的比例相对于白细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
35.根据权利要求34所述的方法，其中所述供体的外周血以从约5.5:1至约6.5:1的比例相对于白细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
36.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后在所述供体的外周血样品中产生具有从约0.0007至约0.0043的CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率的细胞群体。
37.根据权利要求36所述的方法，其中所述样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.0014至约0.0034。
38.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，按照通过将施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后所述供体的外周血样品与施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂前所述供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使所述供体的外周血以从约3.5:1至约22.0:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
39.根据权利要求38所述的方法，其中所述供体的外周血以从约7.0:1至约9.0:1的比例相对于嗜中性粒细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
40.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后在所述供体的外周血样品中产生具有从约0.0008至约0.0069的CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率的细胞群体。
41.根据权利要求40所述的方法，其中所述样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率为从约0.0011至约0.0031。
42.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，按照通过将施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后所述供体的外周血样品与施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂前所述供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使所述供体的外周血以从约5.6:1至约37.0:1的比例相对于淋巴细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
43.根据权利要求42所述的方法，其中所述供体的外周血以从约8.0:1至约10.0:1的比例相对于淋巴细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
44.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用所述CXCR2激动剂后在所述供体的外周血样品中产生具有从约0.0028至约0.0130的CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率的细胞群体。
45.根据权利要求44所述的方法，其中所述样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率为从约0.0063至约0.0083。
46.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，按照通过将施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后所述供体的外周血样品与施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂前所述供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使所述供体的外周血以从约1.5:1至约8.5:1的比例相对于单核细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
47.根据权利要求46所述的方法，其中所述供体的外周血以从约1.3:1至约2.5:1的比率相对于单核细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
48.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用所述CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂后在所述供体的外周血样品中产生具有从约0.393至约0.745的CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率的细胞群体。
49.根据权利要求48所述的方法，其中所述样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率为从约0.625至约0.725。
50.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，按照通过将施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后所述供体的外周血样品与施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂前所述供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以使所述供体的外周血以从约1.1:1至约4.8:1的比例相对于CD34+细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
51.根据权利要求50所述的方法，其中所述供体的外周血以从约1.1:1至约1.5:1的比例相对于CD34+细胞富集CD34+CD90+CD45RA-细胞。
52.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以在施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后在所述供体的外周血样品中产生具有从约0.020％至约0.110％的CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率的细胞群体。
53.根据权利要求52所述的方法，其中所述样品中CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率为从约0.046％至约0.086％。
54.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂，按照通过将施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后所述供体的外周血样品与施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂前所述供体的外周血样品进行比较评估的，所施用的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂的量足以诱导所述供体的外周血中CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率增加从约5.1倍至约25.7倍。
55.根据权利要求54所述的方法，其中所述供体的外周血中CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率在施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后增加从约5.1倍至约7.1倍。
56.一种将造血干细胞的群体从哺乳动物供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括：
a.向所述供体施用动员量的CXCR2激动剂和CXCR4拮抗剂；
b.获得表2中列出的表征所述供体的外周血样品的一个或更多个参数中的每一个的输入值；和
c.如果所述一个或更多个参数中的每一个的输入值满足所述一个或更多个参数中的每一个的对应参考标准，则释放所述样品用于离体扩增所述造血干细胞或用于治疗哺乳动物患者的一种或更多种干细胞紊乱。
57.根据权利要求56所述的方法，其中所述一个或更多个参考参数是表3-6的任一个中列出的一组参数。
58.根据权利要求56或57所述的方法，所述方法还包括如果所述样品被释放用于离体扩增，则离体扩增所述造血干细胞。
59.根据权利要求56-58中任一项所述的方法，所述方法还包括如果所述样品被释放用于治疗罹患一种或更多种干细胞紊乱的哺乳动物患者，则将所述造血干细胞或其后代输注到所述哺乳动物患者中。
60.根据权利要求12-59中任一项所述的方法，其中在施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后约3小时至约5小时，从所述供体分离所述样品。
61.根据权利要求60所述的方法，其中在施用所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂后约4小时，从所述供体分离所述样品。
62.根据权利要求12-61中任一项所述的方法，其中所述CXCR2激动剂是Gro-βT或其变体。
63.根据权利要求62所述的方法，其中所述CXCR2激动剂是与SEQ ID NO:2的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的肽。
64.根据权利要求63所述的方法，其中所述CXCR2激动剂的氨基酸序列仅通过一个或更多个保守氨基酸取代而不同于SEQ ID NO:2的氨基酸序列。
65.根据权利要求63所述的方法，其中所述CXCR2激动剂是Gro-βT。
66.根据权利要求12-61中任一项所述的方法，其中所述CXCR2激动剂是Gro-β或其变体。
67.根据权利要求66所述的方法，其中所述CXCR2激动剂是与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少85％序列同一性的肽。
68.根据权利要求67所述的方法，其中所述CXCR2激动剂的氨基酸序列仅通过一个或更多个保守氨基酸取代而不同于SEQ ID NO:1的氨基酸序列。
69.根据权利要求67所述的方法，其中所述CXCR2激动剂是Gro-β。
70.根据权利要求12-69中任一项所述的方法，其中所述CXCR2激动剂以从约50μg/kg至约1mg/kg的剂量被施用至所述供体。
71.根据权利要求70所述的方法，其中所述CXCR2激动剂以从约50μg/kg至约300μg/kg的剂量被施用至所述供体。
72.根据权利要求71所述的方法，其中所述CXCR2激动剂以从约100μg/kg至约250μg/kg的剂量被施用至所述供体。
73.根据权利要求72所述的方法，其中所述CXCR2激动剂以约150μg/kg的剂量被施用至所述供体。
74.根据权利要求1-73中任一项所述的方法，其中所述CXCR2激动剂被静脉内施用至所述供体。
75.根据权利要求12-74中任一项所述的方法，其中所述CXCR2激动剂和所述CXCR4拮抗剂被并行施用至所述供体。
76.根据权利要求12-75中任一项所述的方法，其中所述CXCR4拮抗剂是由式(I)表示的化合物
Z–接头–Z’ (I)
或其药学上可接受的盐，其中Z是：
(i)含有9至32个环成员的环状聚胺，其中2至8个所述环成员是彼此被2个或更多个碳原子分开的氮原子；或者
(ii)由式(IA)表示的胺
Figure FDA0002621915330000101
其中A包括含有至少一个氮原子的单环或双环稠环体系，并且B是H或具有1至20个原子的取代基；
并且其中Z’是：
(i)含有9至32个环成员的环状聚胺，其中2至8个所述环成员是彼此被2个或更多个碳原子分开的氮原子；
(ii)由式(IB)表示的胺
Figure FDA0002621915330000102
其中A’包括含有至少一个氮原子的单环或双环稠环体系，并且B’是H或具有1至20个原子的取代基；或者
(iii)由式(IC)表示的取代基
–N(R)–(CR2)n–X (IC)
其中每个R独立地是H或C1-C6烷基，n是1或2，并且X是芳基基团或杂芳基基团或硫醇；
其中所述接头是键、任选地被取代的C1-C6亚烷基、任选地被取代的C1-C6杂亚烷基、任选地被取代的C2-C6亚烯基、任选地被取代的C2-C6杂亚烯基、任选地被取代的C2-C6亚炔基、任选地被取代的C2-C6杂亚炔基、任选地被取代的环亚烷基、任选地被取代的杂环亚烷基、任选地被取代的亚芳基或任选地被取代的杂亚芳基。
77.根据权利要求76所述的方法，其中Z和Z’各自独立地是含有9至32个环成员的环状聚胺，其中2至8个所述环成员是彼此被2个或更多个碳原子分开的氮原子。
78.根据权利要求76或77所述的方法，其中Z和Z’是相同的取代基。
79.根据权利要求76-78中任一项所述的方法，其中Z是含有10至24个环成员的环状聚胺。
80.根据权利要求79所述的方法，其中Z是含有14个环成员的环状聚胺。
81.根据权利要求76-80中任一项所述的方法，其中Z包含4个氮原子。
82.根据权利要求76-81中任一项所述的方法，其中Z是1,4,8,11-四氮杂环十四烷。
83.根据权利要求76-82中任一项所述的方法，其中所述接头由式(ID)表示
Figure FDA0002621915330000111
其中环D是任选地被取代的芳基基团、任选地被取代的杂芳基基团、任选地被取代的环烷基基团或任选地被取代的杂环烷基基团；并且
X和Y各自独立地是任选地被取代的C1-C6亚烷基、任选地被取代的C1-C6杂亚烷基、任选地被取代的C2-C6亚烯基、任选地被取代的C2-C6杂亚烯基、任选地被取代的C2-C6亚炔基或任选地被取代的C2-C6杂亚炔基。
84.根据权利要求83所述的方法，其中所述接头由式(IE)表示
Figure FDA0002621915330000121
其中环D是任选地被取代的芳基基团、任选地被取代的杂芳基基团、任选地被取代的环烷基基团或任选地被取代的杂环烷基基团；并且
X和Y各自独立地是任选地被取代的C1-C6亚烷基、任选地被取代的C1-C6杂亚烷基、任选地被取代的C2-C6亚烯基、任选地被取代的C2-C6杂亚烯基、任选地被取代的C2-C6亚炔基或任选地被取代的C2-C6杂亚炔基。
85.根据权利要求83或84所述的方法，其中X和Y各自独立地是任选地被取代的C1-C6亚烷基。
86.根据权利要求83-85中任一项所述的方法，其中X和Y是相同的取代基。
87.根据权利要求86所述的方法，其中X和Y各自是亚甲基基团。
88.根据权利要求76-87中任一项所述的方法，其中所述CXCR4拮抗剂是普乐沙福或其药学上可接受的盐。
89.根据权利要求88所述的方法，其中所述普乐沙福或其药学上可接受的盐被皮下施用至所述供体。
90.根据权利要求88或89所述的方法，其中所述普乐沙福或其药学上可接受的盐以从约50μg/kg至约500μg/kg的剂量被施用至所述供体。
91.根据权利要求90所述的方法，其中所述普乐沙福或其药学上可接受的盐以从约200μg/kg至约300μg/kg的剂量被施用至所述供体。
92.根据权利要求91所述的方法，其中所述普乐沙福或其药学上可接受的盐以约240μg/kg的剂量被施用至所述供体。
93.一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体分离的造血干细胞或其后代的群体，其中所述群体中CD34+细胞与白细胞的比率为从约0.0008至约0.0021。
94.根据权利要求93所述的药物组合物，其中所述群体中CD34+细胞与白细胞的比率为从约0.0010至约0.0018。
95.一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体分离的造血干细胞或其后代的群体，其中所述群体中CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.0018至约0.0058。
96.根据权利要求95所述的药物组合物，其中所述群体中CD34+细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.0026至约0.0046。
97.一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体分离的造血干细胞或其后代的群体，其中所述群体中CD34+细胞与淋巴细胞的比率为从约0.0021至约0.0094。
98.根据权利要求97所述的药物组合物，其中所述群体中CD34+细胞与淋巴细胞的比率为从约0.0025至约0.0035。
99.一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体分离的造血干细胞或其后代的群体，其中所述群体中CD34+细胞与单核细胞的比率为从约0.0071至约0.0174。
100.根据权利要求99所述的药物组合物，其中所述群体中CD34+细胞与单核细胞的比率为从约0.0100至约0.0140。
101.一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体分离的造血干细胞或其后代的群体，其中所述群体中CD34+细胞的频率为从约0.051％至约0.140％。
102.根据权利要求101所述的药物组合物，其中所述群体中CD34+细胞的频率为从约0.080％至约0.120％。
103.一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体分离的造血干细胞或其后代的群体，其中所述群体中CD34+细胞与白细胞的比率为从约0.0003至约0.0016。
104.根据权利要求103所述的药物组合物，其中所述群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与白细胞的比率为从约0.0006至约0.0012。
105.一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体分离的造血干细胞或其后代的群体，其中所述群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.0007至约0.0043。
106.根据权利要求105所述的药物组合物，其中所述群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.0014至约0.0034。
107.一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体分离的造血干细胞或其后代的群体，其中所述群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率为从约0.0008至约0.0069。
108.根据权利要求107所述的药物组合物，其中所述群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与淋巴细胞的比率为从约0.0011至约0.0031。
109.一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体分离的造血干细胞或其后代的群体，其中所述群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率为从约0.0028至约0.0130。
110.根据权利要求109所述的药物组合物，其中所述群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与单核细胞的比率为从约0.0063至约0.0083。
111.一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体分离的造血干细胞或其后代的群体，其中所述群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率为从约0.393至约0.745。
112.根据权利要求111所述的药物组合物，其中所述群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与CD34+细胞的比率为从约0.625至约0.725。
113.一种药物组合物，所述药物组合物包含从哺乳动物供体分离的造血干细胞或其后代的群体，其中所述群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率为从约0.020％至约0.110％。
114.根据权利要求113所述的药物组合物，其中所述群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞的频率为从约0.046％至约0.086％。
115.一种治疗哺乳动物患者的干细胞紊乱的方法，所述方法包括：
a.根据权利要求1-92中任一项所述的方法动员哺乳动物供体中的造血干细胞的群体；和
b.将治疗有效量的所述造血干细胞或其后代输注到所述患者中。
116.一种治疗哺乳动物患者的干细胞紊乱的方法，所述方法包括将治疗有效量的通过权利要求1-92中任一项所述的方法动员的造血干细胞或其后代输注到所述患者中。
117.一种治疗哺乳动物患者的干细胞紊乱的方法，所述方法包括将根据权利要求93-114中任一项所述的药物组合物施用至所述患者。
118.根据权利要求115-117中任一项所述的方法，其中所述干细胞紊乱是血红蛋白病紊乱。
119.根据权利要求118所述的方法，其中所述血红蛋白病紊乱选自由以下组成的组：镰状细胞性贫血、地中海贫血、范可尼贫血、再生障碍性贫血和威斯科特-奥尔德里奇综合征。
120.根据权利要求115-117中任一项所述的方法，其中所述干细胞紊乱是骨髓增生异常性紊乱。
121.根据权利要求115-117中任一项所述的方法，其中所述干细胞紊乱是免疫缺陷性紊乱。
122.根据权利要求121所述的方法，其中所述免疫缺陷性紊乱是先天性免疫缺陷。
123.根据权利要求121所述的方法，其中所述免疫缺陷性紊乱是获得性免疫缺陷。
124.根据权利要求123所述的方法，其中所述获得性免疫缺陷是人类免疫缺陷病毒或获得性免疫缺陷综合征。
125.根据权利要求115-117中任一项所述的方法，其中所述干细胞紊乱是代谢紊乱。
126.根据权利要求125所述的方法，其中所述代谢紊乱选自由以下组成的组：糖原贮积病、黏多糖贮积病、高歇氏病、赫尔勒病、鞘脂贮积病和异染性脑白质营养不良。
127.根据权利要求115-117中任一项所述的方法，其中所述干细胞紊乱是癌症。
128.根据权利要求127所述的方法，其中所述癌症选自由以下组成的组：白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤和神经母细胞瘤。
129.根据权利要求123所述的方法，其中所述癌症是血液学癌症。
130.根据权利要求127所述的方法，其中所述癌症是急性骨髓性白血病、急性淋巴性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴性白血病、多发性骨髓瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或非霍奇金淋巴瘤。
131.根据权利要求115-117中任一项所述的方法，其中所述干细胞紊乱是选自由以下组成的组的紊乱：腺苷脱氨酶缺乏和重症联合免疫缺陷、高免疫球蛋白M综合征、切东病、遗传性淋巴组织细胞增多症、骨硬化病、成骨不全症、贮积病、重型地中海贫血、系统性硬化、系统性红斑狼疮、多发性硬化和青少年类风湿性关节炎。
132.根据权利要求115-117中任一项所述的方法，其中所述干细胞紊乱是自身免疫性紊乱。
133.根据权利要求132所述的方法，其中所述自身免疫性紊乱选自由以下组成的组：多发性硬化、人类系统性狼疮、类风湿性关节炎、炎性肠病、治疗银屑病、1型糖尿病、急性播散性脑脊髓炎、艾迪生氏病、普秃、强直性脊柱炎、抗磷脂抗体综合征、再生障碍性贫血、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性肝炎、自身免疫性内耳病、自身免疫性淋巴增生性综合征、自身免疫性卵巢炎、巴洛病、白塞氏病、大疱性类天疱疮、心肌病、恰加斯氏病、慢性疲劳免疫功能障碍综合征、慢性炎性脱髓鞘性多发性神经病、克罗恩氏病、瘢痕性类天疱疮、乳糜泻-疱疹样皮炎、冷凝集素病、CREST综合征、恶性萎缩性丘疹病、盘状狼疮、自主神经功能障碍、子宫内膜异位、原发性混合型冷球蛋白血症、纤维肌痛-纤维肌炎、肺出血肾炎综合征、格雷夫斯病、格林-巴利综合征、桥本氏甲状腺炎、化脓性汗腺炎、特发性和/或急性血小板减少性紫癜、特发性肺纤维化、IgA神经病变、间质性膀胱炎、青少年关节炎、川崎病、扁平苔癣、莱姆病、梅尼埃病、混合性结缔组织病、重症肌无力、神经性肌强直、斜视性眼阵挛肌阵挛综合征、视神经炎、奥德氏甲状腺炎、寻常型天疱疮、恶性贫血、多软骨炎、多肌炎和皮肌炎、原发性胆汁性肝硬化、结节性多动脉炎、多腺体综合征、风湿性多肌痛、原发性无丙种球蛋白血症、雷诺现象、莱特尔综合征、风湿热、结节病、硬皮病、干燥综合征、僵人综合征、大动脉炎、颞动脉炎、溃疡性结肠炎、葡萄膜炎、血管炎、白癜风、外阴痛和韦格纳肉芽肿病。
134.根据权利要求115-133中任一项所述的方法，其中所述造血干细胞对于所述患者是自体的。
135.根据权利要求115-133中任一项所述的方法，其中所述造血干细胞对于所述患者是同种异体的。
136.根据权利要求135所述的方法，其中所述造血干细胞对于所述患者是HLA匹配的。
137.根据权利要求115-136中任一项所述的方法，其中所述造血干细胞已经被遗传修饰以破坏内源基因。
138.根据权利要求137所述的方法，其中所述内源基因编码主要组织相容性复合体蛋白。
139.根据权利要求115-138中任一项所述的方法，其中所述造血干细胞或其后代在所述造血干细胞或其后代输注到所述患者中后两天或更多天之后维持造血干细胞功能潜力。
140.根据权利要求115-139中任一项所述的方法，其中所述造血干细胞或其后代在所述造血干细胞或其后代输注到所述患者中后定位至造血组织和/或重建血细胞生成。
141.根据权利要求115-140中任一项所述的方法，其中在输注到所述患者中后，所述造血干细胞或其后代引起选自由以下组成的组的细胞的群体的恢复：巨核细胞、凝血细胞、血小板、红细胞、肥大细胞、原粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、小胶质细胞、粒细胞、单核细胞、破骨细胞、抗原呈递细胞。
142.根据权利要求1-92中任一项所述的方法，其中所述哺乳动物供体是人类供体。
143.根据权利要求93-114中任一项所述的药物组合物，其中所述哺乳动物供体是人类供体。
144.根据权利要求115-141中任一项所述的方法，其中所述哺乳动物供体是人类供体，并且所述哺乳动物患者是人类患者。
145.根据上述权利要求中任一项所述的方法，所述方法还包括通过从所述供体抽取外周血来分离所述造血干细胞或其后代。
146.根据上述权利要求中任一项所述的方法，所述方法还包括使用单采术从所述供体收集所述造血干细胞或其后代。
147.根据上述权利要求中任一项所述的方法，其中所述Gro-β、Gro-βT及其变体相对于这些肽的脱酰胺形式具有至少约95％的纯度。
148.一种富集的人类血细胞制品，所述富集的人类血细胞制品包含造血干细胞或其后代的群体，其中所述制品中CD34+细胞与白细胞的比率为从约0.0008至约0.0021。
149.一种富集的人类血细胞制品，所述富集的人类血细胞制品包含造血干细胞或其后代的群体，其中所述群体中CD34+CD90+CD45RA-细胞与嗜中性粒细胞的比率为从约0.0007至约0.0043。
150.一种人类血细胞制品，所述人类血细胞制品包含使用根据权利要求1-92中任一项所述的方法制备的造血干细胞或其后代。
151.一种将CD34dim细胞从人类供体的骨髓动员到外周血中的方法，所述方法包括向所述供体施用(i)以从约50μg/kg至约1,000μg/kg的剂量的选自由Gro-β、Gro-βT及其变体组成的组的CXCR2激动剂和(ii)CXCR4拮抗剂。
152.一种在有相应需要的患者中进行同种异体造血干细胞移植的方法，所述方法包括将治疗有效量的同种异体造血干细胞输注到所述患者中，其中所述造血干细胞通过包括以下的方法从人类供体的骨髓动员到所述人类供体的外周血中：向所述供体施用(i)以从约50μg/kg至约1,000μg/kg的剂量的选自由Gro-β、Gro-βT及其变体组成的组的CXCR2激动剂和(ii)CXCR4拮抗剂。
153.一种预防有相应需要的患者的移植后感染、降低有相应需要的患者发展移植后感染的风险或降低有相应需要的患者的移植后感染的严重程度的方法，所述方法包括将治疗有效量的造血干细胞输注到所述患者中，其中所述造血干细胞通过包括以下的方法从人类供体的骨髓动员到所述人类供体的外周血中：向所述人类供体施用(i)以从约50μg/kg至约1,000μg/kg的剂量的选自由Gro-β、Gro-βT及其变体组成的组的CXCR2激动剂和(ii)CXCR4拮抗剂。
154.一种预防有相应需要的患者的移植物抗宿主病(GVHD)、降低有相应需要的患者发展移植物抗宿主病(GVHD)的风险或降低有相应需要的患者的移植物抗宿主病(GVHD)的严重程度的方法，所述方法包括将治疗有效量的造血干细胞输注到所述患者中，其中所述造血干细胞通过包括以下的方法从人类供体的骨髓动员到所述人类供体的外周血中：向所述人类供体施用(i)以从约50μg/kg至约1,000μg/kg的剂量的选自由Gro-β、Gro-βT及其变体组成的组的CXCR2激动剂和(ii)CXCR4拮抗剂。
155.根据权利要求151-154中任一项所述的方法，其中所述CD34dim细胞以如果使用单独的所述CXCR4拮抗剂动员所述造血干细胞的至少2倍至10倍的量存在于所述外周血中。
156.根据权利要求151-155中任一项所述的方法，其中所述CD34dim细胞当被施用至接受者时能够抑制同种异体反应性T淋巴细胞增殖。
157.根据权利要求151-156中任一项所述的方法，其中所述CXCR2激动剂是Gro-βT。
158.根据权利要求151-157中任一项所述的方法，其中所述CXCR2激动剂以从约100μg/kg至约250μg/kg的剂量被施用至所述供体。
159.根据权利要求158所述的方法，其中所述CXCR2激动剂以从约125μg/kg至约225μg/kg的剂量被施用至所述供体。
160.根据权利要求159所述的方法，其中所述CXCR2激动剂以约150μg/kg的剂量被施用至所述供体。
161.根据权利要求151-160中任一项所述的方法，其中所述CXCR2激动剂被静脉内施用至所述供体。
162.根据权利要求151-161中任一项所述的方法，其中所述CXCR4拮抗剂被皮下施用至所述供体。
163.根据权利要求151-162中任一项所述的方法，其中所述CXCR4拮抗剂是普乐沙福或其药学上可接受的盐。
164.根据权利要求163所述的方法，其中所述普乐沙福或其药学上可接受的盐以从约50μg/kg至约500μg/kg的剂量被施用至所述供体。
165.根据权利要求164所述的方法，其中所述普乐沙福或其药学上可接受的盐以从约200μg/kg至约300μg/kg的剂量被施用至所述供体。
166.根据权利要求165所述的方法，其中所述普乐沙福或其药学上可接受的盐以约240μg/kg的剂量被施用至所述供体。
167.CD34dim细胞的群体，所述CD34dim细胞的群体来源于根据权利要求151-165中任一项所述的方法。
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