CN111670751B - 一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基 - Google Patents

一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基 Download PDF

Info

Publication number
CN111670751B
CN111670751B CN202010608254.7A CN202010608254A CN111670751B CN 111670751 B CN111670751 B CN 111670751B CN 202010608254 A CN202010608254 A CN 202010608254A CN 111670751 B CN111670751 B CN 111670751B
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture medium
wild
parts
petiole
strain
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010608254.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111670751A (zh
Inventor
努尔孜亚·亚力买买提
贾培松
罗影
贾文婕
魏鹏
郝敬喆
高海峰
宋博
关永强
丁丽丽
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute Of Plant Protection Of Xinjiang Academy Of Agricultural Sciences
Original Assignee
Institute Of Plant Protection Of Xinjiang Academy Of Agricultural Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute Of Plant Protection Of Xinjiang Academy Of Agricultural Sciences filed Critical Institute Of Plant Protection Of Xinjiang Academy Of Agricultural Sciences
Priority to CN202010608254.7A priority Critical patent/CN111670751B/zh
Publication of CN111670751A publication Critical patent/CN111670751A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111670751B publication Critical patent/CN111670751B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G18/00—Cultivation of mushrooms
    • A01G18/20—Culture media, e.g. compost
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G18/00—Cultivation of mushrooms
    • A01G18/40—Cultivation of spawn
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种适用于野生毛柄钉灰包的培养基及培养方法。通过菌株分离、基础培养基、母种培养基和培养条件筛选试验，得到适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基及培养方法。本发明所述的培养基按照质量体积比计，包括：胰蛋白胨5‑15，酵母粉4‑6，NaCl 8‑12，营养土20‑30，芦苇基质20‑30，琼脂粉10‑30，蒸馏水800‑1500。利用该培养基培养的毛柄钉灰包菇菌丝体生长速度可达0.51‑0.64mm/d，菌丝长势强，本发明提供的技术方案解决了现有技术未见报道有关野生毛柄钉灰包菌株适合的培养基的技术问题，本发明提供的适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基及其培养方法，能够满足开展生物学研究的要求，为其人工驯化栽培方面具有现实的实用价值和应用推广价值。

Description

一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基
技术领域
本发明涉及野生食用菌菌株的培养技术领域，具体涉及一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基。
背景技术
食用菌普遍富含蛋白质、多糖和维生素，而脂肪含量低，通常具有提高人体免疫力、改善人体机能、治疗心血管疾病的生理功效，被誉为21世纪的健康食品。随着人民生活水平的提高，人们对新型食用菌品种的需求逐渐增大，因此，新的野生食用菌品种开发成为形势发展的需要。
钉灰包属(Battarrea.)建立于1801年，以内包被在与菌柄的连接处环裂以及孢体具有独特的弹丝区别于其它真菌，全世界记载有3种。钉灰包属的成员均具有大型的担子果，且外形特征变化较大，部分鉴别特征有时难于获得，导致种的概念的混乱，以致于一度认为毛柄钉灰包是鬼笔状钉灰包的一种形态。刘虹和范黎等认为钉灰包属(Battarrea)的毛柄钉灰包(B.stevenii)和鬼笔状钉灰包(B.phalloides)是两个独立的种。
毛柄钉灰包(B.stevenii)担子果大型，最初埋生于地下，球形，可食用，包被与柄的帽状顶端相连，成熟后地上生，包被在与柄的连接处环裂。当前并未有毛柄钉灰包驯化栽培的报道，现有技术研究表明，野生毛柄钉灰包菌株在普通马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上基本不生长，现有技术也未见报道有关野生毛柄钉灰包菌株适合的培养基，难以满足开展生物学研究的要求，也不便于作为菌种进行人工驯化栽培研究，因此，亟待开发野生毛柄钉灰包菌株的分离培养方法。
发明内容
针对现有技术中未见报道有关野生毛柄钉灰包菌株适合的培养基，以及野生毛柄钉灰包菌株在普通马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基上基本不生长，难以满足开展生物学研究的要求，不便于作为菌种进行人工驯化栽培研究的技术现状，本发明旨在提供一种适用于野生毛柄钉灰包的培养基及野生毛柄钉灰包菌株的培养方法。通过菌种分离、基础培养基、母种培养基和培养条件的筛选试验，得到野生毛柄钉灰包菌适用的培养基，利用该培养基培养的野生毛柄钉灰包菌丝体生长速度较快，菌丝长势强，能够满足开展生物学研究的要求，便于开展毛柄钉灰包菌种的人工驯化栽培研究，为其人工驯化栽培奠定了技术基础。
为了达到以上技术目的，本发明采用的技术方案包括为：
本发明具体提供的一种适用于野生毛柄钉灰包菌的培养基，按照质量体积比计，所述培养基包括：胰蛋白胨5-15，酵母粉4-6，NaCl 8-12，营养土20-30，芦苇基质20-30，琼脂粉10-30，蒸馏水800-1500。
优选的，一种适用于野生毛柄钉灰包菌的培养基，按照质量体积比计，所述培养基包括：胰蛋白胨10，酵母粉5，NaCl 10，营养土25，芦苇基质25，琼脂粉20，蒸馏水1000。
本发明中，所述芦苇基质使用前需晒干粉碎，过40目筛。
本发明中，所述的营养土使用前需晒干粉碎，过40目筛。
同时，本发明提供一种适用于野生毛柄钉灰包菌的培养方法，采用上述提供的培养基，具体野生毛柄钉灰包菌株的培养方法包括如下步骤：
(1)培养基的制备：在去离子水中加入胰蛋白胨、酵母粉和NaCl，搅拌直至各溶质溶解，摩尔浓度为1.0mol/L的NaOH溶液调节pH值至6.0，然后加入营养土、芦苇基质和琼脂粉，最后用去离子水定容至1000mL，将已制备好的培养基趁热分装于试管内，每支10ml，用硅胶塞塞紧试管口，按每10支为一捆，用报纸或牛皮纸包紧有硅胶塞的一端，放入高压灭菌锅内灭菌，压力为1.0-1.5kg/cm2，温度为115-120℃，时间为20-30min，取出试管摆斜面，冷却凝固后为母种培养基；
(2)野生毛柄钉灰包子实体组织分离：在野生毛柄钉灰包分布区采集其幼嫩子实体，以未开伞为宜，用报纸或透气袋包裹子实体，带回实验室进行菌种分离，用刷子将子实体表面杂质清理干净，用75％酒精仔细擦拭子实体表面进行消毒，在无菌条件下，将子实体纵向掰开，用灼烧杀菌的镊子或手术刀在掰开的新鲜子实体截面上取出黄豆粒大小的子实体菌肉组织，接种至步骤(1)所得专用母种培养基斜面上；
(3)将接种好的菌种放置于22-28℃恒温培养箱暗培养，待菌丝体长好后备用，取生长快，无杂菌污染的菌丝块再次移入另一斜面培养基表面，22-28℃培养，菌丝长满斜面且无杂菌，即为野生毛柄钉灰包菇母种，制备获得野生毛柄钉灰包的培养。
本发明通过以上技术方案，最终形成一种适用于野生毛柄钉灰包菌的培养基及培养方法，具有以下技术效果：
(1)本发明提供一种适用于野生毛柄钉灰包的培养基及野生毛柄钉灰包菌株的培养方法，野生毛柄钉灰包菌以LB为基础培养基时，菌丝体的生长速度为0.23mm/d，长势最佳，在常用的PDA培养基上基本不吃料，进而以LB为基础培养基，设置不同的母种培养基配方，野生毛柄钉灰包菌菌丝体的生长速度为0.23-0.61mm/d，其中在本发明提供的培养基及培养条件下菌丝体的生长速度达0.51-0.64mm/d，且菌丝长势强。
(2)本发明提供的一种适用于野生毛柄钉灰包的培养基及野生毛柄钉灰包菌株的培养方法，克服了现有技术未见报道有关野生毛柄钉灰包菌株适合的培养基，结合本发明培养基及野生毛柄钉灰包菌株的培养方法，能够满足开展生物学研究的要求，便于开展毛柄钉灰包菇菌种的人工驯化栽培研究，为其人工驯化栽培方面具有现实的实用价值和应用推广价值。
附图说明
无
具体实施方式
下面举实施例说明本发明，但是本发明并不限于下述的实施例。
本发明中野生毛柄钉灰包的分离培养中选用的营养土、芦苇基质、胰蛋白胨、琼脂粉、酵母粉、蒸馏水等均可通过公共渠道购买，工艺中所采用的设备和仪器均为本领域常见的设备。
实施例1：适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基
适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基按照质量体积比计，所述培养基包括：胰蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，NaCl 10g/L，营养土25g/L，芦苇基质25g/L，琼脂粉20g/L，蒸馏水1000g/L。
实施例2：适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基
适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基按照质量体积比计，所述培养基包括：胰蛋白胨5g/L，酵母粉6g/L，NaCl 12g/L，营养土20g/L，芦苇基质30g/L，琼脂粉10g/L，蒸馏水1000g/L。
实施例3：适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基
适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基按照质量体积比计，所述培养基包括：胰蛋白胨15g/L，酵母粉4g/L，NaCl 8g/L，营养土25g/L，芦苇基质20g/L，琼脂粉20g/L，蒸馏水800g/L。
实施例4：适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基
适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基按照质量体积比计，所述培养基包括：胰蛋白胨10g/L，酵母粉5g/L，NaCl 10g/L，营养土30g/L，芦苇基质30g/L，琼脂粉25g/L，蒸馏水1200g/L。
实施例5：适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基
适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基按照质量体积比计，所述培养基包括：胰蛋白胨12g/L，酵母粉6g/L，NaCl 10g/L，营养土30g/L，芦苇基质25g/L，琼脂粉30g/L，蒸馏水1500g/L。
实施例6：野生毛柄钉灰包菌株的培养方法
在实施上述实施例一提供的适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基为基础，具体的野生毛柄钉灰包菌株的培养方法包括以下步骤：
(1)培养基的制备：在去离子水中加入胰蛋白胨、酵母粉和NaCl，搅拌直至各溶质溶解，摩尔浓度为1.0mol/L的NaOH溶液调节pH值至6.0，然后加入营养土、芦苇基质和琼脂粉，最后用去离子水定容至1000mL，将已制备好的培养基趁热分装于试管内，每支10ml，用硅胶塞塞紧试管口，按每10支为一捆，用报纸或牛皮纸包紧有硅胶塞的一端，放入高压灭菌锅内灭菌，压力1.3kg/cm2，温度116℃，时间25min，取出试管摆斜面，冷却凝固后为母种培养基。
(2)野生毛柄钉灰包子实体组织分离：在野生毛柄钉灰包分布区采集其幼嫩子实体，以未开伞为宜，用报纸或透气袋包裹子实体，带回实验室进行菌种分离，用刷子将子实体表面杂质清理干净，用75％酒精仔细擦拭子实体表面进行消毒，在无菌条件下，将子实体纵向掰开，用灼烧杀菌的镊子或手术刀在掰开的新鲜子实体截面上取出黄豆粒大小的子实体菌肉组织，接种至步骤(1)所得专用母种培养基斜面上。
(3)将接种好的菌种放置于26℃恒温培养箱暗培养，待菌丝体长好后备用，取生长快，无杂菌污染的菌丝块再次移入另一斜面培养基表面，24℃培养，菌丝长满斜面且无杂菌，即为野生毛柄钉灰包菇母种，制备获得野生毛柄钉灰包的培养。
实施例7：野生毛柄钉灰包菌株的培养方法工艺参数的优化
在实施上述实施例一提供的适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基为基础，具体的野生毛柄钉灰包菌株的培养方法包括以下步骤：
(1)培养基的制备：在去离子水中加入胰蛋白胨、酵母粉和NaCl，搅拌直至各溶质溶解，摩尔浓度为1.0mol/L的NaOH溶液调节pH值至6.0，然后加入营养土、芦苇基质和琼脂粉，最后用去离子水定容至1000mL，将已制备好的培养基趁热分装于试管内，每支10ml，用硅胶塞塞紧试管口，按每10支为一捆，用报纸或牛皮纸包紧有硅胶塞的一端，放入高压灭菌锅内灭菌，压力1.0kg/cm2，温度115℃，时间30min，取出试管摆斜面，冷却凝固后为母种培养基。
(2)野生毛柄钉灰包子实体组织分离：在野生毛柄钉灰包分布区采集其幼嫩子实体，以未开伞为宜，用报纸或透气袋包裹子实体，带回实验室进行菌种分离，用刷子将子实体表面杂质清理干净，用75％酒精仔细擦拭子实体表面进行消毒，在无菌条件下，将子实体纵向掰开，用灼烧杀菌的镊子或手术刀在掰开的新鲜子实体截面上取出黄豆粒大小的子实体菌肉组织，接种至步骤(1)所得专用母种培养基斜面上。
(3)将接种好的菌种放置于28℃恒温培养箱暗培养，待菌丝体长好后备用，取生长快，无杂菌污染的菌丝块再次移入另一斜面培养基表面，22℃培养，菌丝长满斜面且无杂菌，即为野生毛柄钉灰包菇母种，制备获得野生毛柄钉灰包的培养方法。
实施例8：野生毛柄钉灰包菌株的培养方法工艺参数的优化
在实施上述实施例一提供的适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基为基础，具体的野生毛柄钉灰包菌株的培养方法包括以下步骤：
(1)培养基的制备：在去离子水中加入胰蛋白胨、酵母粉和NaCl，搅拌直至各溶质溶解，摩尔浓度为1.0mol/L的NaOH溶液调节pH值至6.0，然后加入营养土、芦苇基质和琼脂粉，最后用去离子水定容至1000mL，将已制备好的培养基趁热分装于试管内，每支10ml，用硅胶塞塞紧试管口，按每10支为一捆，用报纸或牛皮纸包紧有硅胶塞的一端，放入高压灭菌锅内灭菌，压力1.5kg/cm2，温度120℃，时间20min，取出试管摆斜面，冷却凝固后为母种培养基；
(2)野生毛柄钉灰包子实体组织分离：在野生毛柄钉灰包分布区采集其幼嫩子实体，以未开伞为宜，用报纸或透气袋包裹子实体，带回实验室进行菌种分离，用刷子将子实体表面杂质清理干净，用75％酒精仔细擦拭子实体表面进行消毒，在无菌条件下，将子实体纵向掰开，用灼烧杀菌的镊子或手术刀在掰开的新鲜子实体截面上取出黄豆粒大小的子实体菌肉组织，接种至步骤(1)所得专用母种培养基斜面上；
(3)将接种好的菌种放置于22℃恒温培养箱暗培养，待菌丝体长好后备用，取生长快，无杂菌污染的菌丝块再次移入另一斜面培养基表面，28℃培养，菌丝长满斜面且无杂菌，即为野生毛柄钉灰包菇母种，制备获得野生毛柄钉灰包的培养方法。
实施例9：野生毛柄钉灰包菌株的培养方法工艺参数的优化
在实施上述实施例一提供的适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基为基础，具体的野生毛柄钉灰包菌株的培养方法包括以下步骤：
(1)培养基的制备：在每950mL去离子水中加入胰蛋白胨、酵母粉和NaCl，搅拌直至各溶质溶解，摩尔浓度为1.0mol/L的NaOH溶液调节pH值至7.0，然后加入营养土、芦苇基质和琼脂粉，最后用去离子水定容至1000mL，将已制备好的培养基趁热分装于试管内，每支10ml，用硅胶塞塞紧试管口，按每10支为一捆，用报纸或牛皮纸包紧有硅胶塞的一端，放入高压灭菌锅内灭菌，压力1.3kg/cm2，温度118℃，时间26min，取出试管摆斜面，冷却凝固后为母种培养基。
(2)野生毛柄钉灰包子实体组织分离：在野生毛柄钉灰包分布区采集其幼嫩子实体，以未开伞为宜，用报纸或透气袋包裹子实体，带回实验室进行菌种分离，用刷子将子实体表面杂质清理干净，用75％酒精仔细擦拭子实体表面进行消毒，在无菌条件下，将子实体纵向掰开，用灼烧杀菌的镊子或手术刀在掰开的新鲜子实体截面上取出黄豆粒大小的子实体菌肉组织，接种至步骤(1)所得专用母种培养基斜面上。
(3)将接种好的菌种放置于26℃恒温培养箱暗培养，待菌丝体长好后备用，取生长快，无杂菌污染的菌丝块再次移入另一斜面培养基表面，25℃培养，菌丝长满斜面且无杂菌，即为野生毛柄钉灰包菇母种，制备获得野生毛柄钉灰包的培养方法。
实施例10：野生毛柄钉灰包菌的培养基优化筛选
本实施例在实施例1至实施例5培养基的配方和实施例6野生毛柄钉灰包菌株的培养方法的基础上进行，通过对本发明基础培养基、母种培养基和培养条件的筛选，最终确定本发明适用于野生毛柄钉灰包的培养基，并与常用的培养基培养进行了对比，具体如下：
基础培养基筛选
采用平板试验法对基础培养基进行筛选，每个平皿中央定量接种直径5mm的野生毛柄钉灰包菌菌丝块，25℃恒温黑暗培养，测定不同外源因子对野生毛柄钉灰包菌菌丝生长的影响，主要以菌丝生长速度为指标，同时观察菌落的形态特征、菌丝长势、菌落色泽等，所有试验均采用90mm的培养皿，培养基用量20mL/皿，具体培养基配方基菌丝生长情况见附表1-2。
表1：毛柄钉灰包基础培养基配方
Figure BDA0002559954130000101
表2：不同基础培养基对毛柄钉灰包菌生长的影响
Figure BDA0002559954130000102
Figure BDA0002559954130000111
注：1.生长速度后面的小写字母代表显著性差异(P＝0.05)；2.菌丝长势：“+”弱，“++”一般，“+++”强；
由表2试验结果可知，采用平板实验法，选择实验室常用的4种培养基，PDA、综合PDA、LB和YPD，及分别加20mg/LVB1的培养基。结果表明，野生毛柄钉灰包的菌丝体在LB基础培养基上生长最好，YPD次之，在PDA和综合PDA上基本不吃料，且加入VB1对野生毛柄钉灰包菌丝体影响不显著，基础培养基以LB培养基最佳，野生毛柄钉灰包菌在LB培养基上菌丝的生长速度为0.23±0.02mm/d，菌丝长势较好。
母种培养基筛选
以LB为基础培养基，在本发明实施例1-9的基础上，设置新型培养基配方见附表3，通过菌丝体培养实验，对比分析了野生毛柄钉灰包菌丝体在各培养基上及不同培养条件下的生长速度和菌丝长势情况，结果见附表4。
表3：毛柄钉灰包母种培养基配方
Figure BDA0002559954130000112
Figure BDA0002559954130000121
表4：不同母种培养基培养毛柄钉灰包菌对其菌丝生长情况的影响
Figure BDA0002559954130000122
Figure BDA0002559954130000131
注：1.生长速度后面的小写字母代表显著性差异(P＝0.05)；2.菌丝长势：“+”弱，“++”一般，“+++”强；
由附表4数据可知，以LB培养基为基础培养基，毛柄钉灰包菌在母种培养基上培养均能生长，生长速度为0.23～0.64mm/d，其中在LB培养基+草原土/芦苇基质培养基上生长速度最佳，菌丝生长速度为0.62-0.64mm/d，显著高于其他处理；在菌丝长势方面，毛柄钉灰包菌菌丝体在LB+燕麦粉、LB+小麦粉/草原土、LB+高粱粉/燕麦粉培养基上的长势均较强，在其他培养基上长势均较弱或一般。同时本实施例在LB培养基+草原土/芦苇基质培养基的基础上，对培养基配方及培养条件进行优化，由附表4的数据可知，本发明培养基配方范围内，菌丝体的生长速度在0.51-0.64mm/d的范围内，比其他以LB为基础配方的培养基的生长速度更快，菌丝长势上看，实施例1、实施例3、实施例6及实施例9的长势较强，这表明，本发明以LB培养基+草原土/芦苇基质作为野生毛柄钉灰包的培养基，可以满足开展生物学研究的要求，便于开展毛柄钉灰包菇菌种的人工驯化栽培研究。
综上数据可知，以LB为基础培养基，设置不同的母种培养基配方，野生毛柄钉灰包菌菌丝体均可以生长，生长速度为0.23-0.64mm/d，其中在本发明提供的培养基及培养方法中野生毛柄钉灰包菌菌丝体的生长速度达0.51-0.64mm/d，且菌丝长势强。由此可见，本发明提供的一种适用于野生毛柄钉灰包的培养基及野生毛柄钉灰包菌株的培养方法，克服了现有技术未见报道有关适用于野生毛柄钉灰包菌株的培养基，结合本发明提供的野生毛柄钉灰包的培养基和野生毛柄钉灰包菌株的培养方法，能够满足开展生物学研究的要求，便于开展毛柄钉灰包菇菌种的人工驯化栽培研究，为其人工驯化栽培方面具有现实的实用价值和应用推广价值。
上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所延伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之中。

Claims (4)

1.一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基，其特征在于，按照质量体积比计，培养基包括：胰蛋白胨5-15，酵母粉4-6，Na Cl 8-12，营养土20-30，芦苇基质20-30，琼脂粉10-30，蒸馏水800-1500；采用该培养基培养野生毛柄钉灰包菌株的培养方法，包括以下步骤：
(1)培养基的制备：在去离子水中加入胰蛋白胨、酵母粉和NaCl，搅拌直至各溶质溶解用，摩尔浓度为1mol/L的NaOH溶液调节pH值至6.0，然后加入营养土、芦苇基质和琼脂粉，最后用去离子水定容至1000 mL，将已制备好的培养基趁热分装于试管内，每支10 mL，用硅胶塞塞紧试管口，按每10支为一捆，用报纸或牛皮纸包紧有硅胶塞的一端，放入高压灭菌锅内灭菌，压力1.0-1.5 kg/cm2，温度115-121 ℃，时间20-30 min，取出试管摆斜面，冷却凝固后为母种培养基；
(2)野生毛柄钉灰包子实体组织分离：在野生毛柄钉灰包分布区采集其幼嫩子实体，未开伞，用报纸或透气袋包裹子实体，带回实验室进行菌种分离，用刷子将子实体表面杂质清理干净，用75％酒精仔细擦拭子实体表面进行消毒，在无菌条件下，将子实体纵向掰开，用灼烧杀菌的镊子或手术刀在掰开的新鲜子实体截面上取出黄豆粒大小的子实体菌肉组织，接种至步骤(1)所得专用母种培养基斜面上；
(3)将接种好的菌种放置于22-28℃恒温培养箱暗培养，待菌丝体长好后备用，取生长快，无杂菌污染的菌丝块再次移入另一斜面培养基表面，22-28℃培养20-30d，菌丝长满斜面且无杂菌，即为野生毛柄钉灰包母种，获得野生毛柄钉灰包。
2.根据权利要求1所述的一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基，按照质量体积比计，其特征在于，培养基包括：胰蛋白胨10，酵母粉5，Na Cl 10，营养土25，芦苇基质25，琼脂粉20，蒸馏水1000。
3.根据权利要求1所述的一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基，其特征在于，所述芦苇基质使用前需晒干粉碎，过40目筛。
4.根据权利要求1所述的一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基，其特征在于，所述的营养土使用前需晒干粉碎，过40目筛。
CN202010608254.7A 2020-06-29 2020-06-29 一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基 Active CN111670751B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010608254.7A CN111670751B (zh) 2020-06-29 2020-06-29 一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010608254.7A CN111670751B (zh) 2020-06-29 2020-06-29 一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111670751A CN111670751A (zh) 2020-09-18
CN111670751B true CN111670751B (zh) 2022-03-22

Family

ID=72437507

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010608254.7A Active CN111670751B (zh) 2020-06-29 2020-06-29 一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111670751B (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105474995A (zh) * 2015-12-21 2016-04-13 镇江盛弘景观植物有限公司 一种野生鸡枞菌的栽培驯化方法
CN107125028A (zh) * 2017-06-05 2017-09-05 吉林省生物研究所 一种野生黄环鳞伞菌驯化及人工培育方法
CN109566271A (zh) * 2019-01-22 2019-04-05 长江师范学院 一种用于培养野生卷边网褶菌母种的培养基

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103664319A (zh) * 2012-09-21 2014-03-26 青岛道合生物科技有限公司 食用菌无菌消化物培养基
CA2939259C (en) * 2013-02-11 2021-01-26 Glycanova As Basidiomycete-derived cream for treatment of skin diseases
CN110024622A (zh) * 2019-04-23 2019-07-19 北京林业大学 一种由大型真菌子实体转接菌种的制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105474995A (zh) * 2015-12-21 2016-04-13 镇江盛弘景观植物有限公司 一种野生鸡枞菌的栽培驯化方法
CN107125028A (zh) * 2017-06-05 2017-09-05 吉林省生物研究所 一种野生黄环鳞伞菌驯化及人工培育方法
CN109566271A (zh) * 2019-01-22 2019-04-05 长江师范学院 一种用于培养野生卷边网褶菌母种的培养基

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
中国钉灰包属Battarrea Pers.;范黎;《菌物系统》;20031231;第22卷;第464页 *
中国钉灰包属的研究;刘虹等;《云南植物研究》;20061231;第28卷(第1期);第19-21页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111670751A (zh) 2020-09-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103396956B (zh) 一种酿酒酵母及其筛选培养方法和用于豆粕发酵的方法
CN112021067B (zh) 一种通过金耳无性芽孢与毛韧革菌组合选育金耳新品种的方法
CN106978353B (zh) 特氏炭角菌及其栽培方法
WO2017219394A1 (zh) 食用菌栽培种的制种方法及所制备的栽培种和食用菌栽培方法
CN107629967B (zh) 用于天麻种植的萌发菌的液体培养基和天麻种植方法
CN111670751B (zh) 一种适用于野生毛柄钉灰包菌株培养的培养基
CN104620855B (zh) 长柄侧耳菌株及其培养基、培养方法与应用
CN111471600B (zh) 用于制备绿僵菌孢子粉的培养基及绿僵菌高孢粉的制备方法
CN111727810B (zh) 一种野生毛柄钉灰包菌株的专用培养基及培养方法
CN112442449B (zh) 枝瑚菌原种培养基及其应用以及枝瑚菌原种及其培养方法
CN109498744A (zh) 一种复合菌种发酵复方杜仲叶散的制备方法
CN111647512B (zh) 一种野生稠李蘑菇菌株的分离培养方法
CN108142359B (zh) 一种提高母猪繁殖性能的方法
CN116515641A (zh) 一株珊瑚状猴头菌及其应用
KR100723068B1 (ko) 인삼 사포닌 성분이 함유된 팽이 버섯의 재배방법
CN107012100B (zh) 一种雪峰虫草子座及其人工培育方法
CN110892847B (zh) 一种漏斗大孔菌的人工栽培方法
JP2001017158A (ja) 桑黄菌糸体培養用培地組成物及びこれを用いる桑黄菌糸体の培養方法
CN104099256B (zh) 一株红曲霉菌株及其应用
CN107723249B (zh) 用于天麻种植的蜜环菌液体培养基
CN1021119C (zh) 中华被毛孢及其完成有性阶段冬虫夏草的技术
CN105036908A (zh) 一种白灵菇母种培养基
CN115316196B (zh) 野生刺槐范氏孔菌的诱变、栽培方法、刺槐范氏孔菌及应用
CN114711087B (zh) 一种利用农作物秸秆栽培食用菌的方法及用途
CN113403218B (zh) 一种生防菌株及其在防治浙贝母软腐病和促进浙贝母生长中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CB03 Change of inventor or designer information
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: Nurzia Alimaimaiti

Inventor after: Ding Lili

Inventor after: Jia Peisong

Inventor after: Luo Ying

Inventor after: Jia Wenjie

Inventor after: Wei Peng

Inventor after: Hao Jingzhe

Inventor after: Gao Haifeng

Inventor after: Song Bo

Inventor after: Guan Yongqiang

Inventor before: Nurzia Alimaimaiti

Inventor before: Ding Lili

Inventor before: Jia Peisong

Inventor before: Luo Ying

Inventor before: Jia Wenjie

Inventor before: Wei Peng

Inventor before: Hao Jingzhe

Inventor before: Gao Haifeng

Inventor before: Song Bo

Inventor before: Guan Yongqiang