CN111588714B - 一种用于治疗肺癌的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种用于治疗肺癌的药物组合物及其制备方法。本发明的药物组合物含有新藤黄酸和西红花苷作为活性成分。将新藤黄酸和西红花苷按1:0.5‑2的重量比联合使用时，对治疗非小细胞肺癌具有协同增效作用，能够显著抑制肺癌细胞的生长以及抑制荷瘤小鼠体表肿瘤的生长。新藤黄酸和西红花苷的联合使用，在增强疗效的同时可以降低二者的单药使用剂量，具有改善耐药性和降低副作用的效果。本发明的药物组合物为研制新的抗肺癌药物提供了科学依据，临床应用前景良好。

Description

一种用于治疗肺癌的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种用于治疗肺癌的药物组合物 及其制备方法。

背景技术

大多数肺癌起源于支气管粘膜上皮，也有部分在肺泡上皮或支气管腺 上皮细胞中发生，所以又称为原发性支气管癌。肺癌是世界上最常见的恶 性肿瘤之一，且全世界肺癌发病率还在以每年0.5％的速度增长，其发病 率呈不断上升的趋势，仅有20％-30％的肺癌患者可以早期得以诊断。吸 烟是肺癌发生的主要诱因。肺癌按病理细胞组织学分为鳞状细胞癌、腺癌、 腺鳞癌、大细胞癌及小细胞癌几种主要类型，也可分为小细胞肺癌及非小细胞肺癌。其中，非小细胞肺癌(NSCLC)占所有肺癌的85％-90％，大多 病人在临床确诊时已属于中晚期，40％左右的新诊断患者己合并全身转 移。

尽管肺癌的诊断和治疗手段不断取得新的进展，但由于肿瘤转移及多 药耐药等问题，肺癌患者预后仍不佳，五年生存率仅为8-15％。目前肺癌 的综合治疗措施仍是以手术为主，化疗、放疗为辅。化疗是目前治疗中、 晚期肿瘤的主要手段，缺点是对瘤体细胞产生杀伤作用的同时，对正常组 织细胞也同样产生杀伤作用，特别是对生长迅速的血细胞、骨髓细胞等损 害更大。化疗严重的副作用对患者的生活质量有很大的影响。由于肺癌发现时多为晚期，许多病人已丧失了手术机会，同时化、放疗耐受现象又较 严重，预后很差。因此寻求新的有效的肺癌治疗药物，进一步提高临床疗 效，己成为亟待解决的临床难题之一。靶向治疗的出现，极大地延长了患 者的生存时间，同时改善了患者生活质量。表皮生长因子受体酪氨酸激酶 抑制剂(EGFR-TKI)、ALK抑制剂、抗血管生成药物、以PD-1和PD-L1 抑制剂为代表的免疫疗法被广泛应用于肺癌临床中，一些新靶点的ROS1 重排、BRAF突变等也在不断研究。

为了更好地发挥药物的协同治疗作用、提高药物疗效或为了减轻药物 的毒副作用、延迟或避免耐药性的发生，联合用药已经成为未来的新趋势。 然而，迄今为止，国内外尚无新藤黄酸和西红花苷联合用药以治疗肺癌的 相关报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种用于治疗肺 癌的药物组合物及其制备方法。

为实现上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：

一种用于治疗肺癌的药物组合物，所述药物组合物由活性成分和药学 上可接受的辅料制成，所述活性成分包括新藤黄酸和西红花苷。

优选地，所述新藤黄酸和西红花苷的重量比为1:0.5-2。

优选地，所述新藤黄酸和西红花苷的重量比为1:0.5。

优选地，所述药物组合物为口服剂或注射剂。

优选地所述的口服剂是胶囊剂、颗粒剂、粉剂、糖衣片、滴丸或口服 液。

优选地，所述的注射剂为注射液或冻干粉针剂。

进一步地，本发明还提供了新藤黄酸联合西红花苷在制备治疗肺癌的 药物中的应用。

优选地，所述肺癌为非小细胞肺癌。

进一步地，本发明还提供了用于治疗肺癌的药物组合物的制备方法， 包括如下制备步骤：分别称取新藤黄酸和西红花苷，混合均匀后加入药学 上可接受的辅料，按照药学常规制药工艺制备成口服剂或注射剂。

藤黄酸(GA)和新藤黄酸(GNA)是从藤黄科植物藤黄中分离提取 出来的两种有效活性成分。新藤黄酸是藤黄的重要成分之一，常用来衡量 藤黄药效及质量分级。新藤黄酸与藤黄酸具有相似的化学结构，只是前者 C1位上的醚键被打开，形成了羟基。藤黄酸和新藤黄酸在体外及体内均 具有广泛的抗肿瘤作用。研究表明，藤黄酸在II期临床药物研究中具有 良好的安全性，但在之后的III期临床研究中因肝脏毒性而被淘汰。新藤 黄酸(GNA)的抗肿瘤活性是藤黄酸(GA)的2倍，且具有毒性低、稳 定性好和抗癌谱广等特点，能选择性地作用于多种肿瘤细胞，而对正常动 物造血系统以及免疫系统影响较小，对肺腺癌、乳腺癌、多发性骨髓瘤等 均具有较好的抗肿瘤疗效，是一种极具开发前景的天然抗肿瘤药物。新藤 黄酸的化学结构如式1a所示。

西红花，别名藏红花、番红花，是一种鸢尾科番红花属的多年生花卉， 其药用部位为西红花的干燥柱头。其主要分布于南欧、伊朗等地，我国有 少量栽培。西红花的提取物之一西红花苷(crocin)，又称为西红花素、藏 红花素，是一类水溶性的类胡萝卜素，由西红花酸(crocetin)与二分子龙胆 二糖结合而成，属于二萜类，分子式为C₄₄H₆₄O₂₄。对于西红花苷的研究， 近年来国内外都逐步深入，尤其在中枢神经系统、心血管系统以及抗肿瘤 方面的研究非常广泛。西红花苷可以抑制肿瘤细胞的生长，其抗癌作用机 制可能与对肿瘤细胞的强烈细胞毒性及诱导肿瘤细胞凋亡有关。西红花苷 的抑制作用比西红花粗提物更强，因此西红花苷被认为是西红花成分中最 有希望的癌症治疗剂。西红花苷的化学结构如式1b所示。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：将新藤黄酸和西红花苷 按1:0.5-2的重量比联合使用时，对治疗非小细胞肺癌具有协同增效作用， 能够显著抑制体外肺癌细胞的生长以及抑制荷瘤小鼠体表肿瘤的生长。新 藤黄酸和西红花苷的联合使用，在增强疗效的同时可以降低二者的单药使 用剂量，具有改善耐药性和降低副作用的效果。本发明的药物组合物为研 制新的抗肺癌药物提供了科学依据，临床应用前景良好。

具体实施方式

为更好地说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实验 对本发明作进一步说明。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施 例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员 在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保 护的范围。

实施例1.新藤黄酸联合西红花苷对A549细胞株的增殖抑制效果

1、实验材料

(1)实验细胞：

人肺癌细胞株(A549)购自中国科学院上海细胞生物学研究所。

(2)药物试剂：

新藤黄酸购于上海研生实业有限公司；

西红花苷购自美国Sigma公司。

2、实验方法

(1)人肺癌细胞(A549)的培养和处理

人肺癌细胞(A549)培养于含10％胎牛血清和1％双抗(100U/ml青霉 素、100mg/L链霉素)的DMEM培养液中，37℃，5％CO₂培养箱中传代 培养。每周传代2次，0.25％胰蛋白酶消化贴壁细胞，实验用细胞均为对 数生长期细胞。

(2)MTT法检测不同药物对A549细胞增殖的影响

取对数生长期的人肺癌细胞(A549)，用10％胎牛血清的DMEM培养 液调整细胞数为3-5×10⁵个/ml，接种于96孔细胞培养板，每孔200μl，待 细胞贴壁70-80％时，吸弃旧培养液。空白组、对照组各组每孔加200μl 培养液，药物组每孔分别加入含不同浓度的新藤黄酸(1mg/ml、2mg/ml、 4mg/ml、8mg/ml、16mg/ml)、西红花苷(1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、 8mg/ml、16mg/ml)、新藤黄酸+西红花苷(2mg/ml+1mg/ml、 2mg/ml+2mg/ml、2mg/ml+4mg/ml)的培养液200μl，每组设5个重复。 培养48h后，每孔加入20μl MTT(5mg/ml)，继续培养4h，吸弃旧培养液， 每孔加入DMSO 150μl，37℃低速振荡15min，在490nm处测定吸光度(A 值)。

细胞生长抑制率按如下公式计算：抑制率＝1-(药物组OD值-空白组 OD值)/(对照组OD值-空白组OD值)×100％。

3、实验结果

新藤黄酸、西红花苷对A549细胞株的增殖抑制效果，实验结果如表 1-2所示。

表1.不同浓度的新藤黄酸、西红花苷对A549细胞增殖的抑制率(n＝5)

表2.新藤黄酸联合西红花苷对A549细胞增殖的抑制率(n＝5)

由表1-2的实验结果可以看出，新藤黄酸、西红花苷对人肺癌A549 细胞的体外增殖有显著抑制作用。随着药物浓度的逐渐增加，细胞增殖抑 制作用显著增强。将新藤黄酸(2mg/ml)与不同浓度的西红花苷(1mg/ml、 2mg/ml、4mg/ml)联合使用时，能够明显提升对A549细胞增殖的抑制 率，达到协同增效的抑制作用。具体来讲，单独使用新藤黄酸(2mg/ml) 时的细胞增殖抑制率为51.36％，单独使用西红花苷(1mg/ml、2mg/ml、 4mg/ml)时的细胞增殖抑制率为28.98％、46.23％、59.29％，而将新藤 黄酸(2mg/ml)与西红花苷(1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml)联合使用时， 细胞增殖抑制率可分别显著提升至87.91％、90.36％、93.28％。根据联合 用药作用评价法(金正均q值)计算，上述各联合用药组的q值分别为1.34、1.22、1.16，即在新藤黄酸和西红花苷的重量比为1:0.5-2的范围内 均可实现药物协同增效作用。

实施例2.新藤黄酸联合西红花苷对抑制A549细胞裸鼠移植瘤增长 的影响

1、A549细胞裸鼠移植瘤的接种：饲养BALB/c裸小鼠，鼠龄5-6周， 雄性，体重20g左右。采用培养细胞皮下接种移植法。取对数生长期A549 细胞，PBS液冲洗培养瓶2次，加入0.25％胰酶消化，离心弃上清，加入 不含胎牛血清的DMEM培养液10ml，吸管吹打混匀，离弃上清，重复 1次，再加入无血清的DMEM培养液，重悬细胞，调整细胞至约3×10⁷个/ml，按每只200μl接种于裸鼠右前肢腋下皮下。

2、药物对裸鼠肺癌移植瘤的抑制作用：接种2周后肿瘤长出，待肿 瘤生长至100-150mm³后，将裸鼠随机分为4组，每组8只：模型对照组 (每2天注射1次生理盐水)、新藤黄酸组(每2天尾静脉给药1次，4mg/kg 新藤黄酸)、西红花苷组(每2天尾静脉给药1次，4mg/kg西红花苷)、 联合用药组(每2天尾静脉给药1次，2mg/kg新藤黄酸+2mg/kg西红花 苷)，共给药6次。每次给药前用游标卡尺测量移植瘤最长径a和最短径 b。实验结束时以脱臼法处死所有裸鼠，取移植瘤用游标卡尺测量肿瘤最 长径a和最短径b，并称瘤重。其中，肿瘤体积V＝1/2×a×b²；抑瘤率＝(模 型对照组瘤重-用药组瘤重)/模型对照组瘤重×100％。

3、实验结果如表3所示。

表3新藤黄酸联合西红花苷对抑制A549细胞裸鼠移植瘤增长的影响

由表3的实验结果可以看出，随着时间推移，模型对照组的移植瘤进 行性增大明显，而联合用药组的移植瘤体积增长相对较慢。12d给药结束 后，模型对照组的平均肿瘤体积为(1246.5±113.9)mm³,新藤黄酸组为 (734.5±65.3)mm³,西红花苷组为(769.1±77.3)mm³；与此相对，联合用药组 仅为(420.1±39.3)mm³。此外，新藤黄酸组、西红花苷组和联合用药组的 肿瘤抑制率分别为37.8％、35.4％和62.2％，可见联合用药组的肿瘤抑制 率显著高于单药组，这说明新藤黄酸和西红花苷的联合用药在抑制人肺癌 A549细胞的增殖方面具有协同增效作用。

综上所述，在特定配比下联合使用新藤黄酸和西红花苷，在增强疗效 的同时可以降低二者的单药使用剂量，具有改善耐药性和降低副作用的效 果。本发明的药物组合物为研制新的抗肺癌药物提供了科学依据，临床应 用前景良好。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的 普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对技术方案做 出若干修改或等同替换，这些修改或等同替换也应视为本发明的保护范 围。

Claims (9)

1.一种用于治疗非小细胞肺癌的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物由活性成分和药学上可接受的辅料制成，所述活性成分包括新藤黄酸和西红花苷。

2.根据权利要求1所述的用于治疗非小细胞肺癌的药物组合物，其特征在于，所述新藤黄酸和西红花苷的重量比为1:0.5-2。

3.根据权利要求2所述的用于治疗非小细胞肺癌的药物组合物，其特征在于，所述新藤黄酸和西红花苷的重量比为1:0.5。

4.根据权利要求1-3任一项所述的用于治疗非小细胞肺癌的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物为口服剂或注射剂。

5.根据权利要求4所述的用于治疗非小细胞肺癌的药物组合物，其特征在于，所述的口服剂是胶囊剂、颗粒剂、粉剂、糖衣片、滴丸或口服液。

6.根据权利要求4所述的用于治疗非小细胞肺癌的药物组合物，其特征在于，所述的注射剂为注射液或冻干粉针剂。

7.新藤黄酸联合西红花苷在制备治疗非小细胞肺癌的药物中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述新藤黄酸和西红花苷的重量比为1:0.5。

9.根据权利要求1-6任一项所述的用于治疗非小细胞肺癌的药物组合物的制备方法，其特征在于，包括如下制备步骤：分别称取新藤黄酸和西红花苷，混合均匀后加入药学上可接受的辅料，按照药学常规制药工艺制备成口服剂或注射剂。