CN111575267A - 一种人造微纳米机器人及其制备方法 - Google Patents

一种人造微纳米机器人及其制备方法 Download PDF

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Abstract

一种人造微纳米机器人及其制备方法，它涉及微纳米机器人领域，本发明以磁性微纳米颗粒、二氧化硅微球、纳米金颗粒、葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶和尿素酶等活性酶为材料，利用真空等离子体溅射技术和化学修饰的方法，将具有催化活性的酶与磁性微纳米颗粒、二氧化硅微球和纳米金颗粒融为一体，制备出具有不对称二聚体结构的人造微纳米机器人，本发明可重复性强，制备过程简单，且制备的人造微纳米机器人能够通过分解血液中的葡萄糖、膀胱中的尿素等生物介质快速运动，且不产生任何对机体有毒副作用的物质，或通过施加外源磁场，实现人造微纳米机器人运动方向的靶向运动，本发明应用于药物靶向递送、肿瘤治疗等生物医学领域。

Description

一种人造微纳米机器人及其制备方法
技术领域
本发明涉及微纳米机器人领域，具体涉及一种人造微纳米机器人及其制备方法。
背景技术
微纳米机器人是指能够将环境中的能量转换为机械运动的微纳米装置。由于具有主动运动能力和良好的携载能力，微纳米机器人在药物靶向运输、微手术、生物传感、环境修复和微纳米制造等领域具有广阔的应用前景，已经成为机器人、生物、医疗、化学等学科的研究热点。经过各国科学家近二十年来的不懈努力，微纳米机器人领域取得了长足的进步，现阶段微纳米机器人的驱动方式主要包括两类：一类是由化学能驱动；另一类是由外物理场驱动，如光能、电能、磁能、超声能。众所周知，人体内存在着诸多生物机器人，它们可以通过水解三磷酸腺苷产生能量，实现定向旋转或行走，在细胞内的能量物质转运和信号传递等生命活动中发挥着至关重要的作用。显然，第一类化学能驱动人造微纳米机器人与天然生物机器人更加相似。但目前多数的化学能驱动人造微纳米机器人以具有毒副作用的过氧化氢为燃料，不利于将其应用于生物医学领域。
公开号为CN109967123A，专利名称为一种空心纳米机器人及其制备方法与作为抗氧化剂的应用，公开了一种空心纳米机器人，主要由空心结构的介孔二氧化硅球(HMSNs)和在所述空心结构的介孔二氧化硅球表面负载的氯化血红素(hemin)组成的纳米酶(hemin-HMSNs)。本发明所述的空心纳米机器人具有类过氧化物酶(POD)、类(SOD)的性能，以H2O2、超氧自由基(O2·-)、羟基自由基(·OH)为燃料，通过hemin催化H2O2、超氧自由基(O2·-)、羟基自由基(·OH)释放的化学自由能为动力以引起其自身的运动，运动面积更大，将ROS转化成无毒害的H2O，可大幅提高细胞内ROS清除效率。虽然该专利能够通过酶产生动力，提高治疗疾病的目的。但是，该专利并不能实现对酶的负载量控制，不能实现驱动力大小的控制。
公开号CN110124047A，专利名称为一种DNA纳米机器人载药体系的制备方法以及由此得到的DNA纳米机器人载药体系，公开了包括将至少一条单链DNA和疏水性药物分子通过共价键连接形成共价连接产物；将共价连接产物和剩余的单链DNA加入含有镁离子的第一缓冲液中进行反应，组装成DNA纳米结构和疏水性药物分子的复合物，剩余的单链DNA与共价连接产物的单链DNA自组装形成具有锁的DNA纳米结构，疏水性药物分子被锁在DNA纳米结构的内侧；提供钥匙，所述钥匙与所述锁配合以使得疏水性药物分子从所述纳米结构暴露，从而提供DNA纳米机器人载药体系。本发明还提供由此得到的DNA纳米机器人载药体系。本发明用于活细胞内药物分子的靶向输送和可控释放，在重大疾病的智能诊疗中具有广阔的应用前景。该专利只是一种简单的药物载体，并没有公开如何利用生物体的物质提供动力，控制驱动力的大小内容。
公开号为CN107485779A，专利名称为纳米机器人及其制备方法，公开了纳米机器人包括：液态金属液滴，在所述液态金属液滴内设置有装载部件；所述装载部件用于装载治疗药物；所述装载部件上连接有通道，所述通道的一端与所述装载部件连通，所述通道的另一端设置有封口部件，且所述封口部件暴露在所述液态金属液滴外。通过液态金属制备纳米机器人，使纳米机器人进入生物体后不会对生物体造成伤害。在纳米机器人内设置有至少一个装载部件和与之对应的通道，使纳米机器人可以根据目标组织的性质将装载部件内的药物释放，达到治疗的目的。该专利是通过外界磁场控制液态金属运动，动力源为外界磁场，并非利用生物体内物质。
上述专利，虽然均公开了人造纳米机器人，并利用其载药应用，但是对于如何有效利用生物体内的物质，如葡萄糖、尿素等作为动力源，尤其是使动力的大小达到可控，并在没有其他标记物质，仅通过动力源的利用率多少达到纳米机器人靶向运动的作用，上述专利没有给出相关的报道。
发明内容
为解决上述技术缺陷，而提供了一种人造微纳米机器人及其制备方法。
本发明采用的技术方案在于，提供一种人造微纳米机器人，其包括二氧化硅形成的不对称二聚体骨架、位于所述骨架内部的磁性纳米颗粒、位于骨架表面的金纳米颗粒和表面修饰的活性酶。
所述的活性酶位于所述不对称二聚体结构中金纳米颗粒表面。
较佳的，所述磁性微球为内部含有四氧化三铁的二氧化硅颗粒，且所述磁性微球的粒径为200nm-5μm。
较佳的，所述的二氧化硅形成的不对称二聚体骨架表面溅射有金纳米颗粒，金纳米颗粒的粒径为20nm-1μm。
较佳的，所述活性酶包括葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶或尿素酶中的一种或多种。
较佳的，制备一种人造微纳米机器人的方法，其包括以下步骤：
步骤一、制备所述磁性微纳米颗粒；
步骤二、以步骤一所述的磁性纳米颗粒为内核制备磁性二氧化硅微球。
步骤三、通过真空等离子体溅射技术，合成内含有步骤二所述的磁性微球和金纳米颗粒的不对称二聚体结构；
步骤四、以步骤三所述的不对称二聚体结构为模板，利用化学修饰的方法将活性酶修饰到所述模板的金纳米颗粒表面上，获得人造微纳米机器人。
较佳的，步骤二中所述微球为二氧化硅颗粒，且所述微球的粒径为200 nm-5μm。
较佳的，步骤四中所述活性酶包括葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶或尿素酶中的一种或多种。
较佳的，步骤三中所述金纳米颗粒的粒径为20nm-1μm。
较佳的，制备一种人造微纳米机器人的方法，其包括以下步骤：
步骤一、制备所述磁性四氧化三铁纳米颗粒：a、将FeCl3·6H2O和醋酸钠溶解到乙二醇和乙二胺的混合溶液中；b、搅拌30分钟，将上述反应液转移至反应釜，加热至200℃；c、维持200℃的温度24小时，离心收集磁性四氧化三铁纳米颗粒，利用乙醇和去离子水清洗所述四氧化三铁颗粒3-4 次后，80℃干燥、收集四氧化三铁纳米颗粒；
其中，FeCl3·6H2O与醋酸钠的质量比为1：3～30；乙二醇与乙二胺的体积比为1～2：1；
步骤二、合成磁性二氧化硅微球：a、将步骤一所述的磁性四氧化三铁纳米颗粒分散到乙醇、去离子水和氨水的溶液中，得到混合溶液A；b、向混合溶液A中逐滴添加的正硅酸乙酯，持续搅拌48小时后离心收集，即得到含有所述磁性四氧化三铁颗粒的二氧化硅微球；
其中，磁性四氧化三铁纳米颗粒与乙醇、去离子水、氨水的质量体积比为0.1-1g：80-800mL：20-200mL：1-10mL；磁性四氧化三铁纳米颗粒与正硅酸乙酯的质量比为0.1-1：3-30；
步骤三、制备不对称二聚体微纳米机器人骨架：a、将步骤二所述的磁性二氧化硅微球平铺到石英片上；b、使用等离子体真空溅射仪向载有磁性二氧化硅微球的石英片溅射10-800nm厚度的纳米金；c、上述石英片置于马弗炉中700℃灼烧3小时后，完成所述不对称二聚体微纳米机器人骨架的制备；
步骤四、化学修饰活性酶：将步骤三所述的不对称二聚体微纳米机器人骨架加入到浓度为0.01-0.1mol/L的活性酶磷酸盐缓冲液，将活性酶修饰到不对称二聚体中金纳米颗粒的表面，30min后离心分离，弃去上清液，所得沉淀用pH 7.4的磷酸盐缓冲液清洗三次，最终得到所述人造微纳米机器人。
较佳的，使用等离子体真空溅射仪向载有磁性二氧化硅微球的石英片溅射100-500nm厚度的纳米金。
与现有技术比较，本发明的有益效果在于：本发明可重复性强，制备过程简单，且制备的人造微纳米机器人能够通过分解血液中的葡萄糖、膀胱中的尿素等生物介质快速运动，且不产生任何对机体有毒副作用的物质，或通过施加外源磁场，实现人造微纳米机器人运动方向的靶向运动，在药物靶向递送、肿瘤治疗等生物医学领域具有广泛的应用前景。
本发明最主要的特点是在磁性二氧化硅微球表面溅射有金纳米颗粒，利用金纳米颗粒载有活性酶，通过控制金纳米颗粒的粒径大小，达到控制载有活性酶量的多少，从而控制对葡萄糖、尿素等生物介质的利用率。本发明的上述技术可以实现利用控制葡萄糖、尿素等生物介质的利用率大小，使纳米机器人趋向于相对较高或者相对较低的葡萄糖、尿素等生物介质区域运动，即活性酶载有高，则利用的葡萄糖、尿素等生物介质量就大，则纳米机器人就能够在相对浓度高的生物介质内生存，相反则适宜相对浓度高的生物介质内生存。从而达到一定的靶向作用。本发明设置的不对称二聚体即体积相对较大的二氧化硅球体和相对较小的金纳米颗粒，可以是多个不对称二聚体聚集到一起(如图1所示)，共同利用某一区域相对浓度较高的生物介质，提高利用率。也可以使纳米机器人更易于聚集到一起，提高载药量，提高药物浓度。本发明的纳米金颗粒可以为10-800nm内的任意厚度的纳米金，上述厚度的纳米金均能够实现对活性酶的附载。
本发明生物相容性好，与过氧化氢为燃料机器人相比更具安全性。同时，还可以通过施加外源磁场，实现人造微纳米机器人运动方向的人为操控，在药物靶向运输、肿瘤治疗等生物医学领域具有广泛的应用前景。
附图说明
为了更清楚地说明本发明各实施例中的技术方案,下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1是本发明实施例2中人造微纳米机器人的制备步骤3和步骤4的示意图；
图2是本发明实施例2步制备的磁性纳米颗粒的透射电子显微镜照片；
图3是本发明实施例2制备的人造微纳米机器人的扫描电子显微镜照片；
图4是本发明实施例2中人造微纳米机器人运动示意图。
具体实施方式
以下结合附图，对本发明上述的和另外的技术特征和优点作更详细的说明。
实施例1
本实施例提供了一种人造微纳米机器人，其包括磁性微球和金纳米颗粒组成的不对称二聚体结构、位于所述不对称二聚体结构中金纳米颗粒表面的活性酶，其中所述磁性微球为内部含有四氧化三铁的二氧化硅颗粒，且所述磁性微球的粒径为200nm-5μm，所述所述活性酶包括葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶或尿素酶中的一种或多种。
其中利用活性酶修饰人造微纳米机器人，使人造微纳米机器人能够以人体内的葡萄糖、尿素等生物介质为燃料驱动自身运动，生物相容性好。同时，还可以通过施加外源磁场，实现人造微纳米机器人运动方向的人为操控，在药物靶向运输、肿瘤治疗等生物医学领域具有广泛的应用前景。本实施例的机器人参见图1至4所示。
实施例2
请参见图1和图2，
图1为本施例中人造微纳米机器人的制备步骤3和步骤4的示意图；
图2是本发明实施例2步制备的磁性纳米颗粒的透射电子显微镜照片；
图3是本发明实施例2制备的人造微纳米机器人的扫描电子显微镜照片。
本实施例以磁性微球、金纳米颗粒、活性酶为材料，利用真空等离子体溅射技术和化学修饰技术，将磁性微球、金纳米颗粒、以及活性酶融为一体，制备出具有不对称二聚体结构的人造微纳米机器人。具体包括以下步骤：
步骤一、制备所述磁性微纳米颗粒：
a、将1.0-10g的FeCl3·6H2O和3.0-30g的醋酸钠溶解到20-200mL乙二醇和10-100mL乙二胺的混合溶液中；b、剧烈搅拌30分钟，将上述反应液转移至反应釜，加热至200℃；c、维持该温度24小时，离心收集磁性四氧化三铁纳米颗粒，利用乙醇和去离子水清洗所述四氧化三铁颗粒3-4次后，80℃干燥、收集四氧化三铁纳米颗粒；
步骤二、合成磁性二氧化硅微球：
a、将0.1-1g的步骤一所述的磁性四氧化三铁纳米颗粒分散到80-800mL 乙醇、20-200mL去离子水和1-10mL氨水的溶液中，得到混合溶液A；b、向混合溶液A中逐滴添加3-30g的正硅酸乙酯，持续搅拌48小时后离心收集，即得到含有所述磁性四氧化三铁颗粒的二氧化硅微球；
步骤三、制备不对称二聚体微纳米机器人骨架：
a、将步骤二所述的磁性二氧化硅微球平铺到石英片上；b、使用等离子体真空溅射仪向载有磁性二氧化硅微球的石英片溅射10-800nm厚度的纳米金；c、上述石英片置于马弗炉中700℃灼烧3小时后，完成所述不对称二聚体微纳米机器人骨架的制备；
步骤四、化学修饰活性酶：将步骤三所述的不对称二聚体微纳米机器人骨架加入到浓度为0.01-0.1mol/L的葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶或尿素酶磷酸盐缓冲液，利用金对酶的物理吸附和化学共价结合作用将活性酶修饰到不对称二聚体中金纳米颗粒的表面，30min后离心分离，弃去上清液，所得沉淀用pH 7.4的磷酸盐缓冲液清洗三次，最终得到所述人造微纳米机器人。
通过图1可以清晰地看到所述步骤三肯步骤四中人造微纳米机器人的形成过程，其中
Figure RE-GDA0002553445200000081
代表含有磁性微纳米颗粒的二氧化硅微球，
Figure RE-GDA0002553445200000082
代表金纳米颗粒，
Figure RE-GDA0002553445200000083
代表磁性微纳米颗粒，
Figure RE-GDA0002553445200000084
代表活性酶；
通过图4可以清晰地看到人造微纳米机器人能够以人体内的葡萄糖、尿素等生物介质为燃料驱动下游动的原理，其中箭头代表其游动方向。本实施例多个人造微纳米机器人聚集到一起后，可以通过纳米金聚集到一起，使活性酶聚集到一起进行反应，利用反应产生的能量带动聚集在一起的机器人(如图1所示)旋转向前运动。
本实施例中所用药品均为市售产品，本实施例制备的人造微纳米机器人能够以人体内的葡萄糖、尿素等生物介质为燃料驱动自身运动。同时，还可以通过施加外源磁场，实现人造微纳米机器人运动方向的人为操控。该方法可重复性强，制备过程简单。
实施例3
本实施与实施例2的区别在于，人造微纳米机器人的靶向方式为外源磁场引导的特异性靶向。
实施例4
请参见2、图3、图4所示，
图2是本实施例制备的磁性纳米颗粒的透射电子显微镜照片；
图3是本实施例制备的人造微纳米机器人的扫描电子显微镜照片；
图4是实施例制备的人造微纳米机器人运动示意图
本实施例以磁性微球、金纳米颗粒、活性酶为材料，利用真空等离子体溅射技术和化学修饰技术，将磁性微球、金纳米颗粒、以及活性酶融为一体，制备出具有不对称二聚体结构的人造微纳米机器人。
步骤一、制备所述磁性微纳米颗粒：
a、将10g的FeCl3·6H2O和3.0g的醋酸钠溶解到20mL乙二醇和10mL 乙二胺的混合溶液中；b、剧烈搅拌30分钟，将上述反应液转移至反应釜，加热至200℃；c、维持该温度24小时，离心收集磁性四氧化三铁纳米颗粒，利用乙醇和去离子水清洗所述四氧化三铁颗粒3-4次后，80℃干燥、收集四氧化三铁纳米颗粒；
步骤二、合成磁性二氧化硅微球：
a、将1g的步骤一所述的磁性四氧化三铁纳米颗粒分散到80mL乙醇、20mL去离子水和1mL氨水的溶液中，得到混合溶液A；b、向混合溶液A 中逐滴添加30g的正硅酸乙酯，持续搅拌48小时后离心收集，即得到含有所述磁性四氧化三铁颗粒的二氧化硅微球；
步骤三、制备不对称二聚体微纳米机器人骨架：
a、将步骤二所述的磁性二氧化硅微球平铺到石英片上；b、使用等离子体真空溅射仪向载有磁性二氧化硅微球的石英片溅射800nm厚度的纳米金； c、上述石英片置于马弗炉中700℃灼烧3小时后，完成所述不对称二聚体微纳米机器人骨架的制备。
步骤四、化学修饰活性酶：将步骤三所述的不对称二聚体微纳米机器人骨架加入到浓度为0.01mol/L的葡萄糖氧化酶磷酸盐缓冲液，利用金对酶的物理吸附和化学共价结合作用将活性酶修饰到不对称二聚体中金纳米颗粒的表面，30min后离心分离，弃去上清液，所得沉淀用pH 7.4的磷酸盐缓冲液清洗三次，最终得到所述人造微纳米机器人。
本实施例中所用药品均为市售产品，本实施例制备的人造微纳米机器人能够以人体内的葡萄糖、尿素等生物介质为燃料驱动自身运动。同时，还可以通过施加外源磁场，实现人造微纳米机器人运动方向的人为操控。该方法可重复性强，制备过程简单。
从图3可以发现，本实施例得到的人造微纳米机器人具有不对称二聚体结构，直径为5μm。且磁性微球、金纳米颗粒、以及活性酶融合在一起，说明制备得到的人造微纳米机器人具有良好的稳定性。
实施例5
本实施例以磁性微球、金纳米颗粒、活性酶为材料，利用真空等离子体溅射技术和化学修饰技术，将磁性微球、金纳米颗粒、以及活性酶融为一体，制备出具有不对称二聚体结构的人造微纳米机器人。具体包括以下步骤：
步骤一、制备所述磁性微纳米颗粒：
a、将1.0g的FeCl3·6H2O和3.0g的醋酸钠溶解到200mL乙二醇和100 mL乙二胺的混合溶液中；b、剧烈搅拌30分钟，将上述反应液转移至反应釜，加热至200℃；c、维持该温度24小时，离心收集磁性四氧化三铁纳米颗粒，利用乙醇和去离子水清洗所述四氧化三铁颗粒3-4次后，80℃干燥、收集四氧化三铁纳米颗粒；
步骤二、合成合成磁性二氧化硅微球：
a、将0.1g的步骤一所述的磁性四氧化三铁纳米颗粒分散到800mL乙醇、200mL去离子水和10mL氨水的溶液中，得到混合溶液A；b、向混合溶液A中逐滴添加3g的正硅酸乙酯，持续搅拌48小时后离心收集，即得到含有所述磁性四氧化三铁颗粒的二氧化硅微球；
步骤三、制备不对称二聚体微纳米机器人骨架：
a、将步骤二所述的磁性二氧化硅微球平铺到石英片上；b、使用等离子体真空溅射仪向载有磁性二氧化硅微球的石英片溅射10nm厚度的纳米金；c、上述石英片置于马弗炉中700℃灼烧3小时后，完成所述不对称二聚体微纳米机器人骨架的制备。
步骤四、化学修饰活性酶：将步骤三所述的不对称二聚体微纳米机器人骨架加入到浓度为0.01mol/L的葡萄糖氧化酶磷酸盐缓冲液，利用金对酶的物理吸附和化学共价结合作用将活性酶修饰到不对称二聚体中金纳米颗粒的表面，30min后离心分离，弃去上清液，所得沉淀用pH 7.4的磷酸盐缓冲液清洗三次，最终得到所述人造微纳米机器人。
本实施例中所用药品均为市售产品，本实施例制备的人造微纳米机器人能够以人体内的葡萄糖、尿素等生物介质为燃料驱动自身运动。同时，还可以通过施加外源磁场，实现人造微纳米机器人运动方向的人为操控。该方法可重复性强，制备过程简单。
实施例6
本实施例与实施例5的区别之处在于，步骤一中将5g的FeCl3·6H2O和 15g的醋酸钠溶解到200mL乙二醇和100mL乙二胺的混合溶液中得到四氧化三铁颗粒悬浮液，其他与实施例5相同。
实施例7
本实施例与实施例5的区别之处在于，步骤四中0.01mol/L的葡萄糖氧化酶磷酸盐缓冲液替换为浓度为0.01mol/L的过氧化氢酶磷酸盐缓冲液。
实施例8
本实施例与实施例5的区别之处在于，步骤四中0.01mol/L的葡萄糖氧化酶磷酸盐缓冲液替换为浓度为0.01mol/L的尿素酶磷酸盐缓冲液。
实施例9
本实施例与实施例5的区别之处在于，步骤二变为：
合成磁性二氧化硅微球：a、将1g的步骤一所述的磁性四氧化三铁纳米颗粒分散到80mL乙醇、20mL去离子水和1mL氨水的溶液中，得到混合溶液A；b、向混合溶液A中逐滴添加30g的正硅酸乙酯，持续搅拌48小时后离心收集，即得到含有所述磁性四氧化三铁颗粒的二氧化硅微球，其他与实施例5相同。
实施例10
本实施例与实施例5的区别之处在于，步骤二变为：
合成磁性二氧化硅微球：a、将0.5g的步骤一所述的磁性四氧化三铁纳米颗粒分散到80mL乙醇、20mL去离子水和1mL氨水的溶液中，得到混合溶液A；b、向混合溶液A中逐滴添加15的正硅酸乙酯，持续搅拌48小时后离心收集，即得到含有所述磁性四氧化三铁颗粒的二氧化硅微球，其他与实施例5相同。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，对本发明而言仅仅是说明性的，而非限制性的。本专业技术人员理解，在本发明权利要求所限定的精神和范围内可对其进行许多改变，修改，甚至等效，但都将落入本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种人造微纳米机器人，其特征在于，其包括二氧化硅形成的不对称二聚体骨架、位于所述骨架内部的磁性纳米颗粒、位于骨架表面的金纳米颗粒和表面修饰的活性酶。
2.根据权利要求1所述的一种人造微纳米机器人，其特征在于，所述磁性微纳米颗粒为四氧化三铁颗粒，且所述四氧化三铁颗粒的粒径为5nm-200nm。
3.根据权利要求1所述的一种人造微纳米机器人，其特征在于，所述的二氧化硅形成的不对称二聚体骨架表面溅射有金纳米颗粒，金纳米颗粒的粒径为20nm-1μm。
4.根据权利要求1所述的一种人造微纳米机器人，其特征在于，所述活性酶包括葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶或尿素酶中的一种或多种。
5.制备如权利要求1-4任一项所述的一种人造微纳米机器人的方法，其特征在于，其包括以下步骤：
步骤一、制备所述磁性微纳米颗粒；
步骤二、以步骤一所述的磁性纳米颗粒为内核制备磁性二氧化硅微球；
步骤三、通过真空等离子体溅射方法，合成内含有步骤二所述的磁性微球和金纳米颗粒的不对称二聚体结构；
步骤四、以步骤三所述的不对称二聚体结构为模板，利用化学修饰的方法将活性酶修饰到所述模板的金纳米颗粒表面上，获得人造微纳米机器人。
6.根据权利要求5所述的一种人造微纳米机器人的制备方法，其特征在于，步骤二中所述微球为二氧化硅颗粒，且所述微球的粒径为200nm-5μm。
7.根据权利要求5所述的一种人造微纳米机器人的制备方法，其特征在于，步骤四中所述活性酶包括葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶或尿素酶中的一种或多种。
8.根据权利要求5所述的一种人造微纳米机器人的制备方法，其特征在于，步骤三中所述金纳米颗粒的粒径为20nm-1μm。
9.根据权利要求5所述的制备一种人造微纳米机器人的方法，其特征在于，其包括以下步骤：
步骤一、制备所述磁性四氧化三铁纳米颗粒：a、将FeCl3·6H2O和醋酸钠溶解到乙二醇和乙二胺的混合溶液中；b、搅拌30分钟，将上述反应液转移至反应釜，加热至200℃；c、维持200℃的温度24小时，离心收集磁性四氧化三铁纳米颗粒，利用乙醇和去离子水清洗所述四氧化三铁颗粒3-4次后，80℃干燥、收集四氧化三铁纳米颗粒；
其中，FeCl3·6H2O与醋酸钠的质量比为1：3～30；乙二醇与乙二胺的体积比为1～2：1；
步骤二、合成磁性二氧化硅微球：a、将步骤一所述的磁性四氧化三铁纳米颗粒分散到乙醇、去离子水和氨水的溶液中，得到混合溶液A；b、向混合溶液A中逐滴添加的正硅酸乙酯，持续搅拌48小时后离心收集，即得到含有所述磁性四氧化三铁颗粒的二氧化硅微球；
其中，磁性四氧化三铁纳米颗粒与乙醇、去离子水、氨水的质量体积比为0.1-1g：80-800mL：20-200mL：1-10mL；磁性四氧化三铁纳米颗粒与正硅酸乙酯的质量比为0.1-1：3-30；
步骤三、制备不对称二聚体微纳米机器人骨架：a、将步骤二所述的磁性二氧化硅微球平铺到石英片上；b、使用等离子体真空溅射仪向载有磁性二氧化硅微球的石英片溅射10-800nm厚度的纳米金；c、上述石英片置于马弗炉中700℃灼烧3小时后，完成所述不对称二聚体微纳米机器人骨架的制备；
步骤四、化学修饰活性酶：将步骤三所述的不对称二聚体微纳米机器人骨架加入到浓度为0.01-0.1mol/L的活性酶磷酸盐缓冲液，将活性酶修饰到不对称二聚体中金纳米颗粒的表面，30min后离心分离，弃去上清液，所得沉淀用pH 7.4的磷酸盐缓冲液清洗三次，最终得到所述人造微纳米机器人。
10.根据权利要求9所述的制备一种人造微纳米机器人的方法，其特征在于，使用等离子体真空溅射仪向载有磁性二氧化硅微球的石英片溅射100-500nm厚度的纳米金。
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