CN111574574A - 多柔比星的纯化方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种多柔比星的纯化方法。包括如下步骤：将多柔比星粗品溶解于溶剂中，得到上样液；将所述上样液上样至已装填有填料的分离柱，用以分离上样液中的目标组分和杂质组分，上样之后的填料中保留有目标组分；填料以硅胶为基质，且硅胶上键合有十八烷基硅烷和二乙烯基苯；采用洗脱液对填料中的所述目标组分进行洗脱，得到目标流出液，其中，洗脱液为有机溶剂与水的混合液或者有机溶剂；以及收集目标流出液，即得纯化后的多柔比星。经试验证明，采用本发明的多柔比星的纯化方法得到的多柔比星纯品的纯度大于99.5％，单杂小于0.1％，周期短，污染小，填料可以重复使用，能够降低成本，具有较好的可行性与实用性，非常适合工业化生产。

Description

多柔比星的纯化方法
技术领域
本发明涉及药物分离纯化技术领域，特别是涉及一种多柔比星的纯化方法。
背景技术
多柔比星(Adriamycin)，为橙黄色或橙红色粉末。多柔比星分子式为C27H29NO11，分子量为：543.52；分子结构如下：
Figure BDA0002457657200000011
多柔比星主要作用机制为抑制DNA和RNA的合成，对RNA的抑制作用最强。多柔比星对多种肿瘤均有作用，是一种广谱的抗肿瘤抗生素，属周期非特异性药物。多柔比星对各种生长周期的肿瘤细胞都有杀灭作用，主要适用于急性白血病，对粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病都具有治疗效果。对恶性淋巴瘤、肉瘤、肺癌、乳腺癌以及膀胱癌等其他各种癌症都有一定疗效。
然而，传统的多柔比星的纯化方法要么纯度不高、要么对环境污染比较严重不利于工业化放大生产，不利于应用。
发明内容
基于此，有必要针对如何提高纯度并适合工作化放大生产的问题，提供一种纯度较高且适合工作化放大生产的多柔比星的纯化方法。
一种多柔比星的纯化方法，包括如下步骤：
将多柔比星粗品溶解于溶剂中，得到上样液；
将所述上样液上样至已装填有填料的分离柱，用以分离所述上样液中的目标组分和杂质组分，上样之后的填料中保留有所述目标组分；所述填料以硅胶为基质，且硅胶上键合有十八烷基硅烷和二乙烯基苯；
采用洗脱液对所述填料中的所述目标组分进行洗脱，得到目标流出液，其中，所述洗脱液为有机溶剂与水的混合液或者有机溶剂；
收集所述目标流出液，即得纯化后的多柔比星。
应用本发明技术方案的上述多柔比星的纯化方法，只需将上样液上样至已装填有上述填料的分离柱，然后进行洗脱并保留目标流出液，收集即得纯化后的多柔比星。因此，本发明的多柔比星的纯化方法工艺简单，生产成本较低，整体有利于应用。经试验证明，采用本发明的多柔比星的纯化方法得到的多柔比星纯品的纯度大于99.5％，单杂小于0.1％，周期短，污染小，填料可以重复使用，能够降低成本，具有较好的可行性与实用性，非常适合工业化生产。
在其中一个实施例中，将多柔比星粗品溶解于溶剂中的操作中，所述溶剂为含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的甲醇水溶液、含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的乙腈水溶液、含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的乙醇水溶液中的一种或几种；所述有机酸选自三氟乙酸、甲酸与乙酸中的至少一种；所述溶剂中甲醇、乙腈或者乙醇的体积分数为55％～85％。这几类溶剂易得，成本低，不会与多柔比星反应或者产生不良影响，且后续容易去除。
在其中一个实施例中，将所述上样液上样至已装填有填料的分离柱的操作中，上样载量为0.1％～10％，上样的流速为10ml/min～400ml/min。
在其中一个实施例中，所述上样液的浓度为50mg/ml～100mg/ml。
在其中一个实施例中，所述填料中，十八烷基硅烷和二乙烯基苯的质量比为(1～10):1。
在其中一个实施例中，所述填料的粒径为10μm～50μm，所述填料的孔径为
Figure BDA0002457657200000031
在其中一个实施例中，将所述上样液上样至已装填有填料的分离柱的步骤之前，还包括以下步骤：采用洗脱液对已装填有填料的分离柱进行平衡。
在其中一个实施例中，所述洗脱液为含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的甲醇水溶液、含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的乙腈水溶液、含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的乙醇水溶液中的一种或几种；所述有机酸选自三氟乙酸、甲酸与乙酸中的至少一种；所述洗脱液中甲醇、乙腈或者乙醇的体积分数小于90％。这几类洗脱液易得，成本低，不会与多柔比星反应或者产生不良影响，且后续容易去除。
在其中一个实施例中，采用洗脱液对所述填料中的所述目标组分进行洗脱的操作中，洗脱的流速为10ml/min～400ml/min。
在其中一个实施例中，分段收集所述目标流出液的步骤之后，还包括以下步骤：对所述目标流出液进行检测，对检测后的合格样品进行冻干。
附图说明
图1为本发明一实施方式的多柔比星的纯化方法的流程图；
图2为本发明实施例1的对多柔比星粗品纯化时的制备图谱。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
请参见图1，本发明一实施方式的多柔比星的纯化方法，包括如下步骤：
S10、将多柔比星粗品溶解于溶剂中，得到上样液。
优选地，多柔比星粗品的纯度为75％～97％。也就是说，本发明的多柔比星的纯化方法能够应用于纯度为75％～97％的多柔比星粗品，且经过试验证明，纯化效果较好。
优选地，将多柔比星粗品溶解于溶剂中的操作中，溶剂为含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的甲醇水溶液、含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的乙腈水溶液、含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的乙醇水溶液中的一种或几种；有机酸选自三氟乙酸、甲酸与乙酸中的至少一种；溶剂中甲醇、乙腈或者乙醇的体积分数为55％～85％。溶剂中，甲醇、乙醇和乙腈的作用是溶解多柔比星粗品以及在洗脱过程中对多柔比星进行洗脱。有机酸的作用是在洗脱过程中增强多柔比星的保留，从而更有利于多柔比星的纯化。
这几类溶剂易得，成本低，不会与多柔比星反应或者产生不良影响，且后续容易去除。
S20、将步骤S10得到的上样液上样至已装填有填料的分离柱，用以分离上样液中的目标组分和杂质组分，上样之后的填料中保留有目标组分；填料以硅胶为基质，且硅胶上键合有十八烷基硅烷和二乙烯基苯。
其中，分离柱为制备液相色谱柱。填料为多柔比星专用填料，为赛分科技自主开发的特色填料。
优选地，填料中，十八烷基硅烷和二乙烯基苯的质量比为(1～10):1。
优选地，填料的粒径为10μm～50μm，填料的孔径为
Figure BDA0002457657200000051
更优选的，填料粒径为30um，孔径为
Figure BDA0002457657200000052
优选地，将上样液上样至已装填有填料的分离柱的操作中，上样载量为0.1％～10％，上样的流速为10ml/min～400ml/min。
优选地，上样液的浓度为50mg/ml～100mg/ml。
优选地，将上样液上样至已装填有填料的分离柱的步骤之前，还包括以下步骤：采用洗脱液对已装填有填料的分离柱进行平衡。等待基线走平后才开始上样。
S30、采用洗脱液对步骤S20填料中的目标组分进行洗脱，得到目标流出液，其中，洗脱液为有机溶剂与水的混合液或者有机溶剂。
优选地，洗脱液为含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的甲醇水溶液、含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的乙腈水溶液、含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的乙醇水溶液中的一种或几种；有机酸选自三氟乙酸、甲酸与乙酸中的至少一种；洗脱液中甲醇、乙腈或者乙醇的体积分数小于90％。其中，洗脱液中甲醇、乙腈或者乙醇的体积分数优选55％～85％。这几类洗脱液易得，成本低，不会与多柔比星反应或者产生不良影响，且后续容易去除。
优选地，采用洗脱液对填料中的目标组分进行洗脱的操作中，洗脱的流速为10ml/min～400ml/min。
S40、收集步骤S30得到的目标流出液，即得纯化后的多柔比星。
优选地，分段收集目标流出液的步骤之后，还包括以下步骤：对目标流出液进行检测，对检测后的合格样品进行冻干。其中，合格样品指的是样品的纯度高于99.5％且单杂小于0.1％。
应用本发明技术方案的上述多柔比星的纯化方法，只需将上样液上样至已装填有上述填料的分离柱，然后进行洗脱并保留目标流出液，收集即得纯化后的多柔比星。因此，本发明的多柔比星的纯化方法工艺简单，生产成本较低，整体有利于应用。经试验证明，采用本发明的多柔比星的纯化方法得到的多柔比星纯品的纯度大于99.5％，单杂小于0.1％，周期短，污染小，填料可以重复使用，能够降低成本，具有较好的可行性与实用性，非常适合工业化生产。
下面结合具体实施例和对比例对本发明的多柔比星的纯化方法进行进一步的说明。
以下实施例和对比例中所用的仪器和材料包括：高效液相色谱仪(紫外检测器)，型号为Agilent Technologies 1260Infinity，生产厂家为安捷伦科技有限公司；Sepax制备液相色谱仪，型号为Generik HP30，生产厂家为苏州赛分科技有限公司；分析色谱柱Sepax-SAP-C18-5um(4.6mm*250mm)，生产厂家为苏州赛分科技有限公司；分析天平(百分之一)一台；分析天平(万分之一)一台；1ml移液枪一支；200μl移液枪一支；磁力搅拌器一台；涡旋混合器；量筒(500ml、100ml)各一个、一次性滴管5ml一包；离心管一包；2L锥形瓶若干；保鲜膜；记号笔；标签纸等。
以下实施例和对比例中所用的原料包括：多柔比星粗品，由山东道可道医药科技有限公司提供；甲醇(分析纯)；甲酸(分析纯)；三氟乙酸(分析纯)；纯化水。本发明所提供的多柔比星纯化方法中所用的原料、辅料及试剂均为市场常见且可由市场购得。
实施例及对比例中使用的多柔比星层析柱具体为：多柔比星制备柱(100mm x250mm)，所用填料为赛分科技自主开发的特色填料，以硅胶为基质，在硅胶基质上键合十八烷基硅烷和二乙烯基苯。其中，十八烷基硅烷和二乙烯基苯的质量比为(1～10):1。实施例1～7与对比例2～4中填料质量均为0.98kg。
实施例1
流动相：A：0.1％甲酸水溶液 B：甲醇
流速：400ml/min 进样量：400ml 柱温：室温
样品：100mg/ml 压力：1.2M Pa
仪器：Sepax制备色谱仪
检测波长：UV@254nm
梯度：75％B
步骤如下：
1.样品称取：在分析天平上称取多柔比星粗品40g；
2.溶剂配制：配制75％的甲醇(含0.1％甲酸)400ml，甲醇量取300ml，纯化水量取100ml，用移液枪量取甲酸400μl。三者混在一起，并搅拌均匀，配制两份，待用；
3.样品溶解：将配好的溶剂一份加到40g多柔比星粗品中，用保鲜膜封口，加入搅拌子，在磁力搅拌器上保持搅拌状态，使其充分溶解；
4.色谱柱平衡：在LC6000仪器上，A通道为0.1％甲酸水溶液，B通道为甲醇，在接通多柔比星制备柱的条件下，以400ml/min的流速冲洗，以75％B(300ml/min)、25％A(100ml/min)平衡柱子。平衡15min；
5.样品上样：步骤4完成后停止所有泵，将A管道插入配好步骤2溶剂的另一份中，以400ml/min的速度冲洗A管道，0.5min后停泵，将A管道换到配好的多柔比星粗品中，以400ml/min的速度上样1min后停泵，换到前面步骤2剩下的溶剂中以400ml/min冲洗0.5min后停泵；
6.样品洗脱：在步骤5完成后将A泵换到0.1％甲酸水溶液中，同时开启制备工作站的在线信号记录，在400ml/min的条件下以75％B(300ml/min)冲洗柱子；
7.样品收集：在见到目标峰出现时开始收集样品。如图2所示，收集保留时间为20min～54min的组分。
8.收集样品分析：收集样品在分析柱上分析。
9.样品分析合并：取样经过HPLC检测后收集所有合格组分，合并后真空冷冻冻干，取样经过HPLC检测。
其中，实施例1的纯化过程中数据如表1所示：
表1
产品 质量(g) 液相纯度(％) 回收率(％)
粗品 40 85.32 --
纯化后样品 28.22 99.81 70.55
注：纯化后样品质量及纯度均是指冻干后取样检测的结果。
实施例2
取多柔比星粗品40g，含量85.32％(m/m)，加入含0.1％三氟乙酸的70％的甲醇(V/V)400ml，搅拌使充分溶解；上经过78％的甲醇(含0.1％三氟乙酸)平衡后的多柔比星层析柱(100mm×250mm，含填料质量约0.98kg)，上样流速200ml/min，上样后用70％的甲醇(含0.1％三氟乙酸)洗脱，洗脱流速400ml/min，共洗脱100min，HPLC检测收集多柔比星组分溶液，合并合格组分，冻干后即得实施例2的多柔比星纯品26.77g，HPLC检测纯度为99.79％，回收率66.93％。
实施例3
取多柔比星粗品40g，含量85.32％(m/m)，加入含0.1％三氟乙酸的65％的乙腈(V/V)400ml，搅拌使充分溶解；上经过65％的乙腈(含0.1％三氟乙酸)平衡后的多柔比星层析柱(100mm×250mm，含填料质量约0.98kg)，上样流速200ml/min，上样后用65％的乙腈(含0.1％三氟乙酸)洗脱，洗脱流速400ml/min，共洗脱100min，HPLC检测收集多柔比星组分溶液，合并合格组分，冻干后即得实施例3的多柔比星纯品26.08g，HPLC检测纯度为99.83％，回收率65.20％。
实施例4
取多柔比星粗品40g，含量85.32％(m/m)，加入含0.1％甲酸的70％的乙腈(V/V)400ml，搅拌使充分溶解；上经过70％的乙腈(含0.1％甲酸)平衡后的多柔比星层析柱(100mm×250mm，含填料质量约0.98kg)，上样流速200ml/min，上样后用70％的乙腈(含0.1％甲酸)洗脱，洗脱流速400ml/min，共洗脱100min，HPLC检测收集多柔比星组分溶液，合并合格组分，冻干后即得实施例4的多柔比星纯品26.86g，HPLC检测纯度为99.79％，回收率67.15％。
实施例5
取多柔比星粗品40g，含量85.32％(m/m)，加入含0.1％三氟乙酸的78％的乙醇(V/V)400ml，搅拌使充分溶解；上经过78％的乙醇(含0.1％三氟乙酸)平衡后的多柔比星层析柱(100mm×250mm，含填料质量约0.98kg)，上样流速200ml/min，上样后用78％的乙醇(含0.1％三氟乙酸)洗脱，洗脱流速400ml/min，共洗脱100min，HPLC检测收集多柔比星组分溶液，合并合格组分，冻干后即得实施例5的多柔比星纯品26.72g，HPLC检测纯度为99.80％，回收率66.80％。
实施例6
取多柔比星粗品99g(上样载量10.1％)，含量97.02％(m/m)，加入含0.1％甲酸的75％的甲醇(V/V)400ml，搅拌使充分溶解；上经过75％的甲醇(含0.1％甲酸)平衡后的多柔比星层析柱(100mm×250mm，含填料质量约0.98kg)，上样流速200ml/min，上样后用75％的甲醇(含0.1％甲酸)洗脱，洗脱流速400ml/min，共洗脱100min，HPLC检测收集多柔比星组分溶液，合并合格组分，冻干后即得对比例1的多柔比星纯品9.55g，HPLC检测纯度为99.72％，回收率9.65％。
实施例7
取多柔比星粗品40g，含量85.32％(m/m)，加入含0.1％甲酸的90％的甲醇(V/V)400ml，搅拌使充分溶解；上经过90％的甲醇(含0.1％甲酸)平衡后的多柔比星层析柱(100mm×250mm，含填料质量约0.98kg)，上样流速200ml/min，上样后用90％的甲醇(含0.1％甲酸)洗脱，洗脱流速400ml/min，共洗脱100min，HPLC检测收集多柔比星组分溶液，合并合格组分，冻干后即得对比例2的多柔比星纯品3.24g，HPLC检测纯度为99.76％，回收率8.10％。
对比例1
取多柔比星粗品40g，含量85.32％(m/m)，加入含0.1％甲酸的75％的甲醇(V/V)400ml，搅拌使充分溶解；上经过75％的甲醇(含0.1％甲酸)平衡后的层析柱(100mm×250mm，填料为苏州赛分科技有限公司的Sepax-PolyRP-30um-300A填料，该填料以聚合物为基质，基质上键合有苯基基团，质量约0.72kg)，上样流速200ml/min，上样后用75％的甲醇(含0.1％甲酸)洗脱，洗脱流速400ml/min，共洗脱100min，HPLC检测收集多柔比星组分溶液，合并合格组分，冻干后即得对比例1的多柔比星纯品2.94g，HPLC检测纯度为99.74％，回收率7.35％。
对比例2
取多柔比星粗品40g，含量85.32％(m/m)，加入75％的甲醇(V/V)400ml，搅拌使充分溶解；上经过75％的甲醇平衡后的多柔比星层析柱(100mm×250mm，含填料质量约0.98kg)，上样流速200ml/min，上样后用75％的甲醇洗脱，洗脱流速400ml/min，共洗脱100min，HPLC检测收集多柔比星组分溶液，经检测发现没有合格组分。
对比例3
取多柔比星粗品40g，含量85.32％(m/m)，加入65％乙腈(V/V)400ml，搅拌使充分溶解；上经过65％乙腈平衡后的多柔比星层析柱(100mm×250mm，含填料质量约0.98kg)，上样流速200ml/min，上样后用65％的乙腈，洗脱流速400ml/min，共洗脱100min，HPLC检测收集多柔比星组分溶液，经检测发现没有合格组分。
对比例4
取多柔比星粗品40g，含量85.32％(m/m)，加入78％乙醇(V/V)400ml，搅拌使充分溶解；上经过78％的乙醇平衡后的多柔比星层析柱(100mm×250mm，含填料质量约0.98kg)，上样流速200ml/min，上样后用78％的乙醇洗脱，洗脱流速400ml/min，共洗脱100min，HPLC检测收集多柔比星组分溶液，经检测发现并没有合格组分。
从实施例1～实施例7中可以看出，本发明提供的纯化多柔比星的方法，经过中试试验验证，工艺可行，且最终得到的多柔比星纯品纯度高，总纯度高于99.5％且单杂小于0.1％。其中，实施例1～实施例5的收率高于65％。
将实施例1与实施例6进行对比，可以看出，当上样载量超过10％时，合格样品收率下降明显，只有9.65％的收率。因此上样载量不超过10％为宜。从实施例7可以看出，洗脱时甲醇的浓度为90％时，合格样品收率下降明显，只有8.10％的收率。
从对比例2～对比例4中可以看出，不添加有机酸的溶剂和洗脱液对多柔比星的纯化效果不佳，这表明溶剂和洗脱液中添加有机酸对多柔比星的纯化效果起到重要作用。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.一种多柔比星的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：
将多柔比星粗品溶解于溶剂中，得到上样液；
将所述上样液上样至已装填有填料的分离柱，用以分离所述上样液中的目标组分和杂质组分，上样之后的填料中保留有所述目标组分；所述填料以硅胶为基质，且硅胶上键合有十八烷基硅烷和二乙烯基苯；
采用洗脱液对所述填料中的所述目标组分进行洗脱，得到目标流出液，其中，所述洗脱液为有机溶剂与水的混合液或者有机溶剂；
收集所述目标流出液，即得纯化后的多柔比星。
2.根据权利要求1所述的多柔比星的纯化方法，其特征在于，将多柔比星粗品溶解于溶剂中的操作中，所述溶剂为含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的甲醇水溶液、含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的乙腈水溶液、含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的乙醇水溶液中的一种或几种；所述有机酸选自三氟乙酸、甲酸与乙酸中的至少一种；所述溶剂中甲醇、乙腈或者乙醇的体积分数为55％～85％。
3.根据权利要求1所述的多柔比星的纯化方法，其特征在于，将所述上样液上样至已装填有填料的分离柱的操作中，上样载量为0.1％～10％，上样的流速为10ml/min～400ml/min。
4.根据权利要求1所述的多柔比星的纯化方法，其特征在于，所述上样液的浓度为50mg/ml～100mg/ml。
5.根据权利要求1所述的多柔比星的纯化方法，其特征在于，所述填料中，十八烷基硅烷和二乙烯基苯的质量比为(1～10):1。
6.根据权利要求1所述的多柔比星的纯化方法，其特征在于，所述填料的粒径为10μm～50μm，所述填料的孔径为
Figure FDA0002457657190000011
7.根据权利要求1所述的多柔比星的纯化方法，其特征在于，将所述上样液上样至已装填有填料的分离柱的步骤之前，还包括以下步骤：采用洗脱液对已装填有填料的分离柱进行平衡。
8.根据权利要求1所述的多柔比星的纯化方法，其特征在于，所述洗脱液为含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的甲醇水溶液、含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的乙腈水溶液、含有机酸体积分数为0.05％～0.5％的乙醇水溶液中的一种或几种；所述有机酸选自三氟乙酸、甲酸与乙酸中的至少一种；所述洗脱液中甲醇、乙腈或者乙醇的体积分数小于90％。
9.根据权利要求1所述的多柔比星的纯化方法，其特征在于，采用洗脱液对所述填料中的所述目标组分进行洗脱的操作中，洗脱的流速为10ml/min～400ml/min。
10.根据权利要求1所述的多柔比星的纯化方法，其特征在于，分段收集所述目标流出液的步骤之后，还包括以下步骤：对所述目标流出液进行检测，对检测后的合格样品进行冻干。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112745368A (zh) * 2021-02-02 2021-05-04 道中道（菏泽）制药有限公司 一种多柔比星提纯工艺

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR19990084654A (ko) * 1998-05-08 1999-12-06 조생현 독소루비신 및 이의 염산염의 제조 정제방법
JP2000351791A (ja) * 1999-06-08 2000-12-19 Mercian Corp ドキソルビシンの精製方法
CN109206309A (zh) * 2018-09-13 2019-01-15 山东省食品药品检验研究院 一种盐酸多柔比星杂质的分离纯化方法
CN109847407A (zh) * 2019-04-10 2019-06-07 苏州赛分科技有限公司 一种戊柔比星的纯化方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR19990084654A (ko) * 1998-05-08 1999-12-06 조생현 독소루비신 및 이의 염산염의 제조 정제방법
JP2000351791A (ja) * 1999-06-08 2000-12-19 Mercian Corp ドキソルビシンの精製方法
CN109206309A (zh) * 2018-09-13 2019-01-15 山东省食品药品检验研究院 一种盐酸多柔比星杂质的分离纯化方法
CN109847407A (zh) * 2019-04-10 2019-06-07 苏州赛分科技有限公司 一种戊柔比星的纯化方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112745368A (zh) * 2021-02-02 2021-05-04 道中道（菏泽）制药有限公司 一种多柔比星提纯工艺

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