CN111548968A - 一种凝结芽孢杆菌bc99及其筛选方法 - Google Patents

一种凝结芽孢杆菌bc99及其筛选方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111548968A
CN111548968A CN202010469207.9A CN202010469207A CN111548968A CN 111548968 A CN111548968 A CN 111548968A CN 202010469207 A CN202010469207 A CN 202010469207A CN 111548968 A CN111548968 A CN 111548968A
Authority
CN
China
Prior art keywords
bacillus coagulans
preservation
screening
cgmcc
namely
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010469207.9A
Other languages
English (en)
Inventor
方曙光
杜玮瑶
朱明明
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Wuhan Weikang Probiotics Research Institute Co ltd
Original Assignee
Wuhan Weikang Probiotics Research Institute Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wuhan Weikang Probiotics Research Institute Co ltd filed Critical Wuhan Weikang Probiotics Research Institute Co ltd
Priority to CN202010469207.9A priority Critical patent/CN111548968A/zh
Publication of CN111548968A publication Critical patent/CN111548968A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/07—Bacillus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种凝结芽孢杆菌BC99及其筛选方法，凝结芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC No.19487，保藏时间为2020年03月18日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本发明提供凝结芽孢杆菌BC99来源于婴儿粪便，具有较强的抗逆性，对高温、人工胃液、人工胆盐和人工肠液具有较高的耐受性，并且能够保存较高的存活率，适合应用在食品加工和畜牧业中。

Description

一种凝结芽孢杆菌BC99及其筛选方法
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种凝结芽孢杆菌BC99及其筛选方法。
背景技术
乳酸菌(lactic acid bacteria，LAB)在动物肠道、口腔内含量丰富。乳酸菌可以利用碳水化合物产生有机酸、特殊酶系、乳酸菌素等。乳酸菌能促进动物生长，调节胃肠道正常菌群和维持微生态平衡，从而改善胃肠道功能、提高食物消化率和生物效价、控制内毒素、抑制肠道内腐败菌生长、提高机体免疫力等，在食品工业和畜牧产业中应用广泛。
目前广泛使用的益生菌主要是双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和屎肠球菌等，但上述益生菌菌株抗逆性较差，在加工过程中的损失较大。因此，高稳定性、高耐受性的菌株具有较大的开发潜能和市场。获得新型具有高耐受性和稳定性的芽孢杆菌具有重要意义。分离和筛选耐受性高的凝结芽孢杆菌，制成的微生态制剂可以更广泛地应用于畜牧业、水产养殖业、食品以及医药等行业中，具有较大的发展前景。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供一种凝结芽孢杆菌BC99及其筛选方法，具有耐高温、耐胃酸、耐肠碱的高耐受性，同时还具有较好的稳定性。
本发明采用的技术方案如下：
本发明提供一种凝结芽孢杆菌BC99，保藏编号为CGMCC No.19487，保藏时间为2020年03月18日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
本发明还提供一种凝结芽孢杆菌BC99的筛选方法，所述筛选方法包括如下步骤：
采样，无菌条件下采集健康婴儿粪便于无菌取样管中，加入已灭菌的生理盐水，充分震荡混合均匀，得到混合液；
梯度稀释，对混合液进行梯度稀释，得到稀释液；
培养，吸取稀释液至MRS琼脂平板涂布，菌液吸收完全后，于培养箱培养，得到待纯化菌落；
纯化，对待纯化的菌落进行反复划线分离培养，得到纯菌落的凝结芽孢杆菌BC99。
上述方案的进一步方案为，稀释液的梯度稀释浓度范围为10-1-10-6。
上述方案的进一步方案为，吸取稀释液的体积为100-200μL。
上述方案的进一步方案为，所述培养箱培养温度范围为30-37℃。
上述方案的进一步方案为，所述培养时间为24-48h。
与现有技术相比，本发明的技术方案具有如下优点和有益效果：
本发明提供凝结芽孢杆菌BC99具有较强的抗逆性，对高温、模拟胃液、胆盐和肠液具有较高的耐受性，并且能够保存较高的存活率，更加适合应用在食品加工和畜牧业中。
附图说明
图1为凝结芽孢杆菌BC99在牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落形态；
图2为革兰氏染色后的凝结芽孢杆菌BC99的显微镜观察图片。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
需要说明的是，本发明的说明书和权利要求书及上述附图中的术语“包括”和“具有”以及他们的任何变形，意图在于覆盖不排他的包含，例如，包含了一系列步骤或单元的过程、方法、装置、产品或设备不必限于清楚地列出的那些步骤或单元，而是可包括没有清楚地列出的或对于这些过程、方法、产品或设备固有的其他步骤或单元。
以下实施例中使用的凝结凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)BC99保藏编号为CGMCC No.19487，保藏日期为2020年3月18日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
以下实施例中使用到的材料和方法，如无特别说明，均为本技术领域的常规材料和常规方法。
实施例1
凝结芽孢杆菌BC99筛选与鉴定
取新鲜婴儿粪便样品1.0g，装入装有9.0mL无菌水的无菌离心管中，震荡混匀，得到的菌悬液置于80℃沸水中水浴30min，取出；然后用10倍梯度稀释法依次稀释，选择适宜浓度梯度的稀释液100μL，加入0.25％碳酸钙的MRS琼脂(蛋白胨10g、牛肉浸粉10g、酵母粉5g、葡萄糖20g、KH2PO4 2g、柠檬酸氢二铵2g、无水乙酸钠5g、MgSO4 0.2g、MnSO4 0.6g、Tween80 1mL、琼脂15g、蒸馏水1000mL，pH6.0-6.2)平板中，用无菌涂布棒涂布均匀，以无菌水为空白对照，涂布均匀后置于42℃恒温培养箱倒置培养48-72h。挑取白色或米白色、有光泽、圆形、边缘整齐，菌落的菌株，在牛肉膏蛋白胨培养基上进行反复划线纯化培养，获得1株婴儿粪便细菌菌株，并在4℃下保存待用。
根据《伯杰氏鉴定细菌学手册》，对照菌株BC99的形态特征、生理生化特性及系统发育树分析鉴定BC99菌株为芽孢杆菌属菌株，并确认本发明菌株为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)BC99。
实施例2
凝结芽孢杆菌BC99菌落形态和镜检
对凝结芽孢杆菌BC99进行菌落培养，观察菌落形态，结果如图1所示；对凝结芽孢杆菌BC99进行革兰氏染色，然后进行显微镜观察，结果如图2所示。
从图1和图2中可以看出，在牛肉膏蛋白胨培养基表面生长的菌落呈米白色，菌落直径0.5-4mm，圆形，边缘整齐，微凸起，表面有光泽。在显微镜下呈现革兰氏阳性长杆状，有芽孢端生。
牛肉膏蛋白胨培养基制备方法如下：每1000mL牛肉膏蛋白胨培养基含有牛肉膏5g、蛋白胨10g、氯化钠5g、蒸馏水1000mL、琼脂15g，pH7.0-7.2，118℃，15min灭菌。
实施例3
凝结芽孢杆菌BC99菌液的制备
未形成芽孢的菌液：取-80℃保藏的凝结芽孢杆菌BC99接种于液体MRS培养基中，在摇床培养箱中于42℃，180r/min-250r/min，培养12h-16h，得到菌液，标记为菌液1。
形成芽孢的芽孢体：取-80℃保藏的凝结芽孢杆菌BC99接种于液体MRS培养基中，在摇床培养箱中42℃，180r/min-250r/min，培养24h-36h得到菌液，标记为菌液2。
实施例4
耐高温试验
将实施例3中制备的菌液1分别于80℃水浴加热和100℃水浴加热条件下进行处理，其中80℃条件下处理5h，100℃条件下处理2h，上述处理组作为实验组；未进行水浴加热处理的作为空白对照组。将水浴加热处理后菌液通过稀释涂布平板法测定其活菌总数，计算菌种存活率，存活率计算公式为：实验组菌落活菌总数/空白对照组实验总数*100％。
实验结果显示，菌液1在80℃水浴加热5h后，仍有50％的存活率；在100℃水浴加热2h后，仍有菌存活。说明凝结芽孢杆菌BC99具有较好的高温耐受性。
实施例5
耐人工胃液试验
人工胃液的配置方法如下：NaCl 0.5％、胃蛋白酶0.3％，用HCl溶液调整pH值为1～3后，用0.22μm滤膜过滤除菌，4℃保存，备用。
分别取0.5mL菌液移入装有4.5mL的模拟胃液中，于37℃培养0、2h、3h和4h，用稀释涂布平板法测定活菌总数(CFU/mL)，并以0h测定值作为空白对照，计算存活率，结果如表1和表2所示。
表1菌液1耐人工胃液结果
Figure BDA0002513720600000051
实施例6
耐人工胆盐试验
模拟人工胆盐培养基的配制：取一定量的牛胆盐于液体培养基中，使胆盐终浓度0.1～1％(w/v)，118℃灭菌15min，冷却备用。
上述液体培养基配制方法如下：葡萄糖2％、蛋白胨1％、牛肉粉1％、酵母粉0.5％、吐温-80 0.1％、柠檬酸氢二铵02.％、磷酸氢二钾0.2％、七水硫酸镁0.058％、一水硫酸锰0.019％，取一定量的牛胆盐于液体培养基中，使胆盐终浓度0.1～1％(w/v)，118℃灭菌15min，冷却备用。
取0.5mL菌液接种于5mL浓度范围为0-1％的胆盐培养基中，于37℃培养8h，用稀释涂布平板法测定活菌总数(CFU/mL)，并以0h测定值作为空白对照，计算存活率，结果如表3和表4所示。
表3菌液1耐人工胆盐结果
Figure BDA0002513720600000061
表4菌液2耐人工胆盐结果
Figure BDA0002513720600000062
实施例7
耐人工肠液试验
模拟人工肠液的配制：胰酶0.1％、NaCI 0.5％、用NaOH溶液调节pH至7～9左右，充分溶解，用0.22μm微孔滤膜除菌，转入无菌瓶中低温保藏，备用。
选取pH8.0作为耐受点：取0.5mL菌悬液移入装有4.5mL的模拟肠液中，于37℃培养0、2、3、4h，用稀释涂布平板法测定活菌总数(CFU/mL)，并以0h测定值作为空白对照，计算存活率，结果如表5和表6所示。
表5菌液1耐人工肠液结果
Figure BDA0002513720600000063
表6菌液2耐人工肠液结果
Figure BDA0002513720600000064
从实施例5-7可知，凝结芽孢杆菌BC99菌株对高温、人工胃液、人工胆盐和人工肠液具有较高的耐受性；形成孢子后的凝结芽孢杆菌BC99对人工胃液、人工胆盐和人工肠液的耐受性高于未形成孢子的凝结芽孢杆菌BC99。
实施例8
凝结芽孢杆菌BC99的抑菌实验
拮抗菌株(凝结芽孢杆菌BC99)准备：取拮抗菌株100μL接种于10mL MRS液体培养基(蛋白胨10g、牛肉浸粉10g、酵母粉5g、葡萄糖20g、KH2PO42g、柠檬酸氢二铵2g、无水乙酸钠5g、MgSO4 0.2g、MnSO4 0.6g、Tween801mL、蒸馏水1000mL，pH6.0-6.2)中，于42℃恒温摇床培养24h，转数100rpm，得到指示菌液，备用。
取致病菌株(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌、志贺氏菌、单增李斯特菌、变形杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、粪肠球菌、变异链球菌)100μL分别接种于10mL液体LB培养基(每1000mL LB培养基含有胰蛋白胨10.0g、酵母提取物5.0g、氯化钠5.0g、无菌水1000mL、pH7.2-7.4)中，于37℃恒温摇床培养24h，转数100rpm，得到致病菌菌液，备用。
将培养至对数生长期的致病菌菌液稀释至浓度为105CFU/mL的菌悬液，取菌悬液100μL均匀涂布于MRS固体培养基上，用镊子将无菌牛津杯竖于涂布有致病菌液的MRS固体培养基上，每个牛津杯中加入200μL指示菌液，以200μL无菌水作为空白对照，每个平皿上放置4个牛津杯，3个平行，一个对照，将平皿轻盖后正置于37℃恒温培养箱，培养48h后观察，并用游标卡尺测量抑菌圈直径，结果如表7所示。
表7凝结芽孢杆菌BC99对致病菌株的抑菌效果
Figure BDA0002513720600000071
Figure BDA0002513720600000081
表7结果显示，凝结芽孢杆菌BC99对多种致病菌均具有一定程度的抑制作用，其中对大肠杆菌的抑制作用最为显著。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种凝结芽孢杆菌BC99，其特征在于，凝结芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC No.19487，保藏时间为2020年03月18日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.一种凝结芽孢杆菌BC99的筛选方法，其特征在于，所述筛选方法包括如下步骤：
采样，无菌条件下采集健康婴儿粪便于无菌取样管中，加入已灭菌的生理盐水，充分震荡混合均匀，得到混合液；
梯度稀释，对混合液进行梯度稀释，得到稀释液；
培养，吸取稀释液至MRS琼脂平板涂布，菌液吸收完全后，于培养箱培养，得到待纯化菌落；
纯化，对待纯化的菌落进行反复划线分离培养，得到纯菌落的凝结芽孢杆菌BC99。
3.根据权利要求2所述的凝结芽孢杆菌BC99的筛选方法，其特征在于，稀释液的梯度稀释浓度范围为10-1-10-6。
4.根据权利要求2所述的凝结芽孢杆菌BC99的筛选方法，其特征在于，吸取稀释液的体积为100-200μL。
5.根据权利要求2所述的凝结芽孢杆菌BC99的筛选方法，其特征在于，所述培养箱培养温度范围为30-37℃。
6.根据权利要求2所述的凝结芽孢杆菌BC99的筛选方法，其特征在于，所述培养时间为24-48h。
CN202010469207.9A 2020-05-28 2020-05-28 一种凝结芽孢杆菌bc99及其筛选方法 Pending CN111548968A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010469207.9A CN111548968A (zh) 2020-05-28 2020-05-28 一种凝结芽孢杆菌bc99及其筛选方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010469207.9A CN111548968A (zh) 2020-05-28 2020-05-28 一种凝结芽孢杆菌bc99及其筛选方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111548968A true CN111548968A (zh) 2020-08-18

Family

ID=72001395

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010469207.9A Pending CN111548968A (zh) 2020-05-28 2020-05-28 一种凝结芽孢杆菌bc99及其筛选方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111548968A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112195140A (zh) * 2020-11-17 2021-01-08 安徽善和生物科技有限公司 一种凝结芽孢杆菌的筛选方法
CN112852679A (zh) * 2021-03-17 2021-05-28 武汉微康益生菌研究院有限公司 一株益生凝结芽孢杆菌及其应用
CN112941005A (zh) * 2021-01-22 2021-06-11 武汉微康益生菌研究院有限公司 一种凝结芽孢杆菌快速产孢的方法
CN113005052A (zh) * 2021-01-27 2021-06-22 武汉微康益生菌研究院有限公司 一种凝结芽孢杆菌bc99的保藏方法
CN117821343A (zh) * 2024-03-05 2024-04-05 微康益生菌(苏州)股份有限公司 一种调节血糖代谢的复合益生菌及其应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20160029653A1 (en) * 2014-09-18 2016-02-04 Zheng Li Novel lactobacillus plantarum and use thereof
CN108676755A (zh) * 2018-06-04 2018-10-19 福建省农业科学院农业工程技术研究所 一种含芽孢杆菌的微生物液体肥及其制备方法和应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20160029653A1 (en) * 2014-09-18 2016-02-04 Zheng Li Novel lactobacillus plantarum and use thereof
CN108676755A (zh) * 2018-06-04 2018-10-19 福建省农业科学院农业工程技术研究所 一种含芽孢杆菌的微生物液体肥及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
涂艳华等: "新型益生菌凝结芽孢杆菌BC99在食品中的应用", 《食品工业科技》 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112195140A (zh) * 2020-11-17 2021-01-08 安徽善和生物科技有限公司 一种凝结芽孢杆菌的筛选方法
CN112941005A (zh) * 2021-01-22 2021-06-11 武汉微康益生菌研究院有限公司 一种凝结芽孢杆菌快速产孢的方法
CN113005052A (zh) * 2021-01-27 2021-06-22 武汉微康益生菌研究院有限公司 一种凝结芽孢杆菌bc99的保藏方法
CN112852679A (zh) * 2021-03-17 2021-05-28 武汉微康益生菌研究院有限公司 一株益生凝结芽孢杆菌及其应用
CN117821343A (zh) * 2024-03-05 2024-04-05 微康益生菌(苏州)股份有限公司 一种调节血糖代谢的复合益生菌及其应用
CN117821343B (zh) * 2024-03-05 2024-05-14 微康益生菌(苏州)股份有限公司 一种调节血糖代谢的复合益生菌及其应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111548968A (zh) 一种凝结芽孢杆菌bc99及其筛选方法
CN106282072B (zh) 一种复合乳酸菌微生态制剂及其制备方法与应用
CN104531562B (zh) 一种植物乳杆菌植物亚种及其抗单增李斯特菌细菌素的制备方法
CN111394361B (zh) 一株侧孢短芽孢杆菌、其组合物及其用途
CN106754470A (zh) 一株人母乳来源的鼠李糖乳杆菌及其应用
CN108148789B (zh) 一种鼠李糖乳杆菌及其在制备细菌素中的应用
CN108707565B (zh) 一种两歧双歧杆菌及其应用
CN110157645B (zh) 一种唾液乳杆菌y4及其应用
CN113040390B (zh) 一株益生、耐盐约氏乳杆菌及其在畜禽水产养殖中防治病原菌的应用
CN112251371B (zh) 一种乳酸乳球菌及微生态制剂和应用
CN110028560B (zh) 一种凝结芽孢杆菌产的细菌素及其应用
CN110577907A (zh) 一种动物双歧杆菌及其应用
CN107937316B (zh) 空间罗伊氏乳杆菌Fullarton-9-71及应用
CN117327626A (zh) 一种植物乳杆菌ts1及其培养方法与应用
CN107828703A (zh) 空间罗伊氏乳杆菌Fullarton‑9‑35及应用
CN107974424A (zh) 空间罗伊氏乳杆菌Fullarton-9-25及应用
Diba et al. Isolation, Characterization and Determination of Antimicrobial Properties of Lactic Acid Bacteria from Human Milk.
CN113604387B (zh) 一株耐盐、耐高温罗伊氏乳杆菌及其在畜禽水产养殖中防治病原菌的应用
CN107974425B (zh) 空间罗伊氏乳杆菌Fullarton-9-79及应用
CN113881592B (zh) 一株罗伊氏乳杆菌及其应用
CN109897800A (zh) 一株富硒坚强肠球菌a8-1及其应用
Njoki et al. Probiotic potential of lactic acid bacteria isolated from coconut (Cocos Nucifera) wine (mnazi) in Kenya
CN115651860A (zh) 凝结芽孢杆菌bc-hyc株及其应用
CN113061550B (zh) 一株乳杆菌新菌株z6及其在食品中的应用
CN111100808B (zh) 一株植物乳杆菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20200818

RJ01 Rejection of invention patent application after publication