CN111542330B - 肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂 - Google Patents

Abstract

本发明提供肺炎链球菌感染的新的预防和/或治疗剂。发现肠球菌属的细菌可预防和/或治疗肺炎链球菌感染。一种肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其含有肠球菌属的细菌。一种肺炎链球菌感染的预防和/或治疗用药物，其含有肠球菌属的细菌。一种肺炎链球菌感染的预防和/或治疗用食品，其含有肠球菌属的细菌。

Description

肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂

技术领域

本发明涉及肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂。

背景技术

肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)为革兰氏阳性双球菌，作为上气管的常驻细菌为人所知。它是主要的呼吸器官致病菌。

在(日本)国立传染病研究所的报告中，肺炎链球菌为社区获得性肺炎(CAP)中频率最高的病原微生物(非专利文献1)，已报告在本院的CAP和医疗、护理相关性肺炎(NHCAP)的前瞻性研究中，肺炎链球菌的频率也分别为34.8％，33.9％而是最多的(非专利文献2)，进一步，呈现出发冷、战栗的患者的细菌血症的风险与完全没有的患者相比，攀升至12.1倍(95％置信区间[CI]4.1-36.2)(非专利文献3)，除了施用适当的抗菌药以外，在日本以65岁以上的老年人为对象从2014年(平成26年)10月1日起对肺炎链球菌疫苗的定期接种施用进行公费补贴。

但是，确认存在对于抗菌药而言耐药性的肺炎链球菌，而疫苗而言也有接种状况不适的报告，由于存在这样的课题，因此，期待新的对应措施。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：Bartlett JG，等，N Engl J Med 333：1618，1995

非专利文献2：Fukuyama H，等，Published online J Infect Chemother，25January 2013

非专利文献3：TokudaY，等，Am J Med 118(12)：1417,2005

发明概述

发明要解决的问题

本发明的目的在于提供新的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂。

用于解决问题的方法

本发明人通过深入研究，结果发现属于肠球菌属的乳酸菌可预防和/或治疗肺炎链球菌感染，从而完成了本发明。

本发明的要旨如下。

(1)肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，含有肠球菌属(Enterococcus)的细菌。

(2)根据(1)所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中，肠球菌属的细菌为乳球菌(Lactococcus)。

(3)根据(2)所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中，乳球菌为粪肠球菌。

(4)根据(3)所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中，粪肠球菌为EF-2001株。

(5)根据(1)～(4)中任一项所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中，肠球菌属的细菌为死菌。

(6)根据(1)～(5)中任一项所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中肠球菌属的细菌口服施用。

(7)根据(6)所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中肠球菌属的细菌以每次1亿～1,000亿CFU/kg体重口服施用。

(8)根据(7)所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中肠球菌属的细菌以1天1次以上，每次1亿～1,000亿CFU/kg体重口服施用。

(9)根据(8)所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中肠球菌属的细菌以1天1次以上5次以下的次数，每次1亿～1,000亿CFU/kg体重口服施用。

(10)根据(6)所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中肠球菌属的细菌以每次10～500亿CFU/kg体重口服施用。

(11)根据(10)所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中肠球菌属的细菌以1天1次以上，每次10～500亿CFU/kg体重口服施用。

(12)根据(11)所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中肠球菌属的细菌以1天1次以上5次以下的次数，每次10～500亿CFU/kg体重口服施用。

(13)根据(6)所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中肠球菌属的细菌以每次120亿以上的CFU/kg体重口服施用。

(14)根据(13)所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中肠球菌属的细菌以1天1次以上，每次120亿以上的CFU/kg体重口服施用。

(15)根据(14)所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中肠球菌属的细菌以1天1次以上5次以下的次数，每次120亿以上的CFU/kg体重口服施用。

(16)根据(6)～(15)中任一项所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其中肠球菌属的细菌口服施用7天以上。

(17)根据(1)～(16)中任一项所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其用于肺炎链球菌感染的预防。

(18)根据(1)～(16)中任一项所述的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其用于肺炎链球菌感染的治疗。

(19)肺炎链球菌感染的预防和/或治疗用药物，其含有肠球菌属的细菌。

(20)肺炎链球菌感染的预防和/或治疗用食品，其含有肠球菌属的细菌。

(21)肺炎链球菌感染的预防和/或治疗方法，包括将肠球菌属的细菌以药学上有效的量施用给受试者。

(22)肠球菌属的细菌的用途，用于肺炎链球菌感染的预防和/或治疗。

(23)肠球菌属的细菌，其用于肺炎链球菌感染的预防和/或治疗方法中。

发明效果

根据本发明可预防及/治疗肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)感染。

本说明书中包含在作为本申请的优先权的基础的日本专利申请，日本特愿2018-015333的说明书和/或附图中记载的内容。

附图简述

[图1]示出实施例1的测试结果(生存率(Kaplan-Meier作图的结果))。

[图2]示出实施例1的测试结果(直肠温度)。

[图3]示出实施例1的试验结果(体重)。

[图4]示出实施例1的试验结果(摄食量)。

[图5]示出实施例1的试验结果(饮水量)。

[图6]示出实施例1的试验时间表。

具体实施方式

以下，对本发明的实施方式进行更详细地说明。

本发明提供肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂，其含有肠球菌属的细菌。

对肠球菌属细菌而言，其可以为乳球菌(lactococcus)(例如：粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、鸟肠球菌(Enterococcusavium)、鹑鸡肠球菌(Enterococcus gallinarum)、铅黄肠球菌(Enterococcuscasseliflavus)等)，优选具有生物应答调节物质(Biological Response Modifier，BRM)活性(药学志112：919-9251992；药学志113：396-3991992；动物临床医学3：11-201994)的那些。粪肠球菌作为具有BRM活性的乳球菌为人所知。粪肠球菌EF-2001株可以从日本Berumu株式会社(东京都千代田区永田町2-14-3)获得。

粪肠球菌-2001株可以从正常人的粪便提取，具有下述性质。

为革兰氏阳性球菌。菌落形态(Trypto-Soya琼脂培养基，培养24小时)：直径1.0mm、光滑、正圆形、白色菌落，细菌形态：球至卵圆形(1.0×1.5μm)，在液体培养基中常形成链。不形成芽胞。兼性厌氧。发酵葡萄糖而产生乳酸(最终pH 4.3)。非产气。过氧化氢酶阴性。于10～45℃进行增殖(最适为37℃)。于pH 9.6，6.5％NaCl，40％胆汁中增殖。0.04％亚碲酸钾阳性。0.01％四唑鎓阳性。0.1％亚甲蓝乳阳性。对精氨酸进行水解。其发酵苦杏仁苷、纤维二糖、果糖、半乳糖、葡萄糖、丙三醇、乳糖、麦芽糖、甘露糖、甘露醇、核糖、水杨苷、蔗糖、松三糖、山梨糖醇而产生酸。在60℃耐性30分钟。消化酪蛋白、明胶。将酪氨酸脱羧成为酪胺。Lancefield抗原分组D。GC％350±1.0％

对于肠球菌属细菌而言，可以为活菌，也可以为死菌，也可以对菌体实施破坏处理(匀浆处理、酶处理、超声波处理等)、加热、干燥(冷冻干燥、喷雾干燥等)等处理。通过加热处理，活菌可成为死菌。对于活菌可以期待由乳酸发酵带来的作用，死菌可以期待肠道免疫活化作用。菌体的粒径可为0.05μm～50μm，优选0.08～20μm，更优选0.1～10μm。菌体可以与稀释剂混合后，添加糊料而制成颗粒状。对稀释剂、糊料而言，从作为在食品、药物中添加的物质而许可的材料中进行选择即可。

本发明的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂可以用于肺炎链球菌感染的预防和/或治疗中。本发明的肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂可以作为药物，或作为食品添加剂使用。

本发明提供含有肠球菌属的细菌肺炎链球菌感染的预防和/或治疗用药物。

在用作药物的情况下，将肠球菌属细菌单独，或与赋形剂或载体混合而制剂成为片剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂、液剂、糖浆、气溶胶、栓剂、注射剂等即可。对赋形剂或载体而言，只要为本领域中常规使用的，药学上允许的那些即可，对其种类及组成进行适当选择。例如，作为液态载体，可以使用水、植物油等。作为固体载体，可使用：乳糖、白糖、葡萄糖等糖类，马铃薯淀粉、玉米淀粉等淀粉，结晶纤维素等纤维素衍生物等。也可以添加硬脂酸镁等润滑剂，明胶、羟丙基纤维素等粘合剂，羧甲基纤维素等崩解剂等。此外，也可以添加抗氧化剂、着色剂、矫味剂、保存剂等。另外，也可以以冷冻干燥制剂形式使用。

肠球菌属细菌可通过口服、经鼻、直肠、经皮、皮下、静脉内、肌内等各种路径进行施用。

肠球菌属细菌在制剂中的含量，根据制剂的种类而不同，通常为0.001～100质量％、优选为0.01～100质量％。

肠球菌属的细菌的施用量只要是药学上有效的量即可，即，为能够确认肺炎链球菌感染的预防和/或治疗效果的量即可，根据剂型，施用路径，患者的年龄，体重，疾病的危重度等而不同，例如，在成人的情况下，每次的施用量换算成肠球菌属的细菌的量约为1亿～1,000亿CFU/kg体重、优选约为10～500亿CFU/kg体重，以1天1次至多次(例如：2次，3次，4次，5次左右)进行施用即可。

肠球菌属细菌也可以添加到食品中。本发明提供含有肠球菌属的细菌肺炎链球菌感染的预防和/或治疗用食品。

在本发明的食品中，也可以添加：蛋白质、脂质、碳水化合物、钠等一般成分，钾、钙、镁、磷等矿物质类，铁、锌、铜、硒、铬等微量元素，维生素A、β-胡萝卜素、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素C、烟酸、叶酸、维生素D3、维生素E、生物素、泛酸等维生素类，辅酶Q10、α-硫辛酸、低聚半乳糖、膳食纤维、赋形剂(水、羧甲基纤维素、乳糖等)、甜味料、矫味剂(苹果酸、柠檬酸、氨基酸等)、香料等。在将本发明的食品制成液剂时，作为将食品成分分散或溶解的液体，可以使用水、生理盐水、果汁等，出于在口服施用中改善味觉的目的，优选使用果汁。

本发明的食品也可以制成粉末、颗粒、片剂、液剂等任何形状，但为了使病人、老年人可以容易摄取，因此，优选制成果冻等凝胶态产品。

作为胶凝剂，可以使用：糊精、琼脂、黄原胶、刺槐豆胶、卡拉胶、果胶等增稠多糖类，结冷胶、洋车前子胶，塔拉胶、瓜尔胶、葡甘露聚糖、藻酸盐、罗望子籽胶、纤维素等，优选使用一种或两种以上的增稠多糖类。凝胶态产品的凝胶强度，优选在5℃的凝胶强度为7,000±2,000N/m²，另外，在凝胶强度为7,000±2,000N/m²时，更优选粘附能量为60±40J/m³、凝聚性为0.7±0.1J/m³。像这样粘附性低、凝聚性高的凝胶具有优异的适吞咽性。

凝胶强度可以如下所述测定。作为凝胶强度测定仪器，使用山电公司稠度测定仪及直径16mm的活塞，利用测定温度25℃、压缩速度(活塞按入速度)10mm/s、测定应变率(相对于试样的厚度的按入率)40.00％，活塞按入距离10.00mm，活塞按入次数2次进行测定。

对粘附能量而言，可以通过在上述凝胶强度测定中，在按入1次后，拔出活塞时的负的能量进行测定。

对凝聚性而言，可以通过在上述凝胶强度测定中，按入2次时第1次和第2次的能量的比率进行测定。

肠球菌属的细菌的摄取量只要是可确认肺炎链球菌感染的预防和/或治疗效果的量即可，根据剂型，施用路径，患者的年龄，体重，疾病的危重度等而不同，例如，在成人的情况下，每次的摄取量换算成肠球菌属的细菌的量约为1亿～1,000亿CFU/kg体重、优选为约10～500亿CFU/kg体重，以1天1次至多次(例如：2次，3次，4次，5次左右)摄取即可。

实施例

以下结合实施例对本发明进行详细的说明，但本发明并不限定于这些实施例。

[实施例1]对于肺炎链球菌感染小鼠施用经加热杀菌的乳酸菌粪肠球菌(E.faecalis)的效果

制作肺炎链球菌感染小鼠，通过将经加热杀菌的乳酸菌粪肠球菌(E.faecalis)口服施用，由此对于其预防效果及治疗效果进行了研究。

(试验时间表)

示于图6。

(材料及方法)

被测物质及介质

·被测物质

名称：乳酸菌粉末EF-2001(日本Berumu株式会社)(经加热杀菌的粪肠球菌(E.faecalis)，直径为500nm＝0.5μm)

性状：黄褐色的粉末

保管条件：室温，遮光，防湿

管理温度：18.0～28.0℃

·介质

名称：注射用水

保管条件：室温

管理温度：18.0～28.0℃

制造商：株式会社大塚制药工厂

被检物

·被测物质的制备方法

称量(电子天平：XP205DR，Mettler Toledo株式会社)乳酸菌粉末EF-200120mg，悬浊于注射用水中后，使总量为125mL，制成0.16mg/mL。由于乳酸菌粉末会沉淀，因此充分搅拌并悬浊。在用时进行制备。

病原微生物

·使用菌株

肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)(ATCC6303)

·保存条件

在超低温冰箱(管理温度：-90～-70℃，MDF-394AT，三洋电机株式会社)中冻存至使用时。

·试剂

(1)羊血液琼脂培养基(日本Becton，Dickinson and Company.)

(2)生理食盐水(株式会社大塚制药工厂)

·前培养

将保存菌株解冻，涂抹在羊血液琼脂培养基上之后，放入加入了碳酸气体培养用碳酸气体发生剂(Aneropack CO₂，三菱气体化学株式会社)的厌氧袋中，37℃设定的恒温器(ILE800，Yamato科学株式会社)培养2天，加入生理食盐水使细菌细胞游离，经过灭菌的网(100μm，细胞过滤器：FALCON(注册商标))过滤而除去细菌细胞团块及杂质，制成了接种菌液的原液。接种细菌原液在冰箱(管理温度：2.0～8.0℃，UKS-3610DHC，日本冰箱株式会社)中保管到菌液接种日。

·接种细菌原液中的活菌数确认

将接种细菌原液用生理食盐水稀释10²倍，10⁴倍及10⁶倍，将10⁴倍及10⁶倍稀释液涂抹在羊血液琼脂培养基上后，放入加入了二氧化碳气体培养用CO₂气体发生剂的厌氧袋中，在设定为37℃的恒温器中培养1天。培养后的菌落数用手动菌落计数器(CC-1，Azwan株式会社)测量，算出接种细菌原液1mL中包含的活菌数。

·接种菌液的制备

在菌液接种日将接种细菌原液用生理食盐水进行稀释，制备成1×10²CFU/mL的浓度。将制备的菌液作为接种菌液。将制备之后的接种菌液中的活菌数按照(接种细菌原液中的活菌数确认)中所示的方法进行了测定。

试验体系

·动物种类，系

动物种：小鼠(SPF)

系：BALB/c系(BALB/c Cr Slc)

·动物的性别，周龄，获取只数

雌，4周龄，44只

·获取之后1天的体重范围

13.4～17.9g

·来源

Japan SLC，Inc.

·预备饲养

对获取的动物设5天的预备饲养期。这期间1天1次进行通常状态的观察，用电子天平(PB3002-S/FACT，Mettler Toledo株式会社)测定2次体重(动物获取的次日及预备饲养期结束日)，将没有确认到体重推移及通常状态发生异常的动物用于分组。

·分组方法

在分组日使用计算机程序将体重按层别分开后，利用随机抽取法以使各组的平均体重及分散基本相等的方式进行分组。

·识别个体的方法

对于动物，组合使用了在获取日将用油性墨水在尾部的记录法及用油性墨水在四肢的染料涂布法而进行识别。分组后，通过记录使用油性墨水在尾部的动物编号而进行识别。各笼上，在预备饲养期中挂上记录有测试编号、获取年月日、预备饲养动物编号的标志，分组之后挂上记录有测试编号、组名及动物编号并按组区分颜色的标志。

·环境条件及饲养管理

在管理温度：18～28℃(实测值：20～27℃)，管理湿度：30～80％(实测值：45～73％)，保持明暗各12小时(照明：上午6时～下午6时)的饲养室(木曾三川分室饲养室1号室)中饲养动物。对动物而言，在预备饲养期中及分组后均使用不锈钢制网笼(W：100×D：160×H：80mm)进行单独饲养。

笼及饲喂器的更换为1周进行1次以上，给水瓶及托盘的更换为1周2次以上。对动物饲养室的打扫而言，每日实施用浸消毒液的拖把进行地板的擦拭消毒。

·饲料

将制造后5个月以内的固型饲料(CRF-1，Oriental Yeast株式会社)放入饲喂器中，供其自由摄取。

关于饲料的使用批次，确认了饲料中的污染物质浓度，细菌数及营养成分含量符合试验设施的允许标准。

·饮用水

将自来水作为饮用水，使用给水瓶供其自由摄取。约每6个月分析饮用水中污染物质浓度及细菌数，确认符合测试设施的允许标准。

施用

·施用路径：口服

·施用方法

用安装有小鼠用灌胃针(FUCHIGAMI)的1mL容量的一次性注射器(Terumo株式会社)，强制进行口服施用。需要说明的是，在施用时搅拌被检物而提取了必要的量。

·施用液量，施用时刻，施用次数及施用时期

施用液量：基于施用日的体重值以10mL/kg算出。

施用时刻：在上午11时从第1组依次进行。

施用次数：1天1次(第1组及第2组为合计17次，第3组为7次，第4组为10次)。

施用时期：将施用开始日作为1日起算。在第1组及第2组中为在菌液接种前7天期间，从菌液接种日起10天期间，在第3组中为在菌液接种前7天期间进行施用。在第4组中，在从菌液接种日起10天期间施用。

·组构成

将动物数及组构成示于下表。

*：施用了作为介质的注射用水。

将乳酸菌粉末EF-2001以80mg/125mL的量1天1次施用给小鼠，相当于120亿CFU/kg/天的施用量。

菌液接种方法

在分组之后7天，将接种菌液0.5mL(50CFU)-用安装有27G注射针(Terumo株式会社)的1mL容量的一次性注射器(Terumo株式会社)接种到腹膜内。需要说明的是，每次接种时搅拌接种菌液进行使用。使菌液接种时刻为被测物质施用的2小时前。

观察及检验

·通常状态的观察

对于观察而言，从分组日到菌液接种前日为1天1次，在被测物质施用前进行，从菌液接种日到接种3天后为在上午2次下午2次(上午2次为被测物质施用前)而1天计4次进行，接种4天后以后为上午、下午(上午为被测物质施用前)各1次而计2次进行。需要说明的是，菌液接种日的上午第1次的观察在菌液的接种前进行。

·直肠温的测定

在分组日以后的被测物质施用前(上午第1次确认通常状态之后)，测定直肠温(Physitemp，Model BAT-12，PHYSITEMP INSTRUMENTS INC.)。测定时，在传感器上抹凡士林，插入小鼠的肛门而测定。

·体重测定

分组日以后，每日在被测物质施用前(上午第1次确认通常状态之后)测定体重(电子天平：PB3002-S/FACT，Mettler Toledo株式会社)。

·摄食量及饮水量的测定

分组日以后，每日测定每个饲喂器及给水瓶的饲喂量及给水量(电子天平：PB3002-S/FACT，Mettler Toledo株式会社)，次日测定剩余量。根据饲喂量及给水量和各自的剩余量的差，算出每1天的摄食量及饮水量。

统计学方法

对各组算出生存率。关于直肠温，体重，摄食量及饮水量算出了各组的平均值及标准误。

对于显著的差异检验而言，关于生存率，在每个观察日在对照组与各组间进行了Fisher确切概率检验。观察时期对于全部实施了Kaplan-Meier作图，进行了Logrank检验，对于组间比较，为了进行多重性的调整而进行了Holm校正。

关于直肠温，体重，摄食量及饮水量进了多重比较检验。即，进行基于Bartlett法的等分散性的检验，在为等分散的情况下使用Tukey检验进行。另一方面，确认不到等分散时，使用Steel-Dwass检验进行。

将危险率设为5％，分别分成低于5％及低于1％进行表示。

需要说明的是，统计分析使用了市售的统计程序(SAS系统：SAS InstituteJapan)。

(测试成绩)

通常状态

将结果示于表1。对于生存率，将Kaplan-Meier作图的结果示于图1。

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观察通常状态时，在全部组中观察到被毛粗糙及自主活动的降低。另外，在全部组中，在接种2天后到3天后观察到死亡。

在对照组中，从菌液接种1天后观察到被毛粗糙，从接种2天后也观察到自主活动的降低。对于死亡，在接种2天后观察到5例，3天观察到5例，接种3天后的生存率为0％。

在全时期施用组中，从接种1天后观察到被毛粗糙，从接种2天后也观察到自主活动的降低。这些病情的发现例数少于对照组。对于死亡，在接种2天后观察到1例，3天观察到3例，接种3天后以后的生存率为60％。与对照组相比，全时期施用组的生存率在接种3天后以后观察到显著的升高(Fisher确切概率检验)，进一步在观察时期全部(Logrank检验)中确认到显著的升高。

在细菌接种前施用组中，从接种1天后观察到被毛粗糙，从接种2天后也观察到自主活动的降低。这些病情的发现例数少于对照组。对于死亡，在接种2天后观察到3例，2天观察到5例，接种3天后以后的生存率为20％。

在细菌接种后施用组中，从接种1天后观察到被毛粗糙，从接种2天后观察到自主活动的降低。与对照组相比，这些病情的发现例数基本为同程度。对于死亡，在接种2天后观察到2例，3天观察到7例，接种3天后以后的生存率为10％。

直肠温测定

将结果示于图2。

在对照组中，平均直肠温从接种2天后到3天继续下降，在2天中降低了3℃。

在全时期施用组中，平均直肠温在接种2天后下降，降低了0.6℃。接种4天后以后与接种前相比，基本以同程度进行推移。

在细菌接种前施用组中，平均直肠温在接种2天后和3天下降，2天中降低了1.2℃。接种4天后以后与接种前相比，基本以同程度进行推移。

在细菌接种后施用组中，平均直肠温在接种2天后和3天下降，2天中降低了2.0℃。接种4天后以后与接种前相比，基本以同程度进行推移。

体重

将结果示于图3。

在对照组中，平均体重在接种2天后减少0.8g，进一步在接种3天后减少1.3g。

在全时期施用组中，虽然平均体重在接种3天后减少了0.7g，但之后就顺利推移了。

在细菌接种前施用组中，平均体重在接种3天后减少了1.0g，但之后就顺利推移了。

在细菌接种后施用组中，平均体重在接种2天后减少了0.6g，在接种3天后减少了1.9g，但之后就顺利推移了。

摄食量

将结果示于图4。

在对照组中，平均摄食量在接种3天后减少了3.6g。

在全时期施用组中，几乎没有平均摄食量的变动，与对照组相比，在接种3天后确认到显著的增加。

在细菌接种前施用组中，平均摄食量在接种3天后减少了2.0g，但之后发生了恢复。与对照组相比，在接种1天后确认了显著的减少。

在细菌接种后施用组中，平均摄食量在接种3天后减少了2.2g，但之后发生了恢复。

饮水量

将结果示于图5。

对照组中，平均饮水量从接种2天后到3天继续减少，2天中减少了7.1mL。

在全时期施用组中，平均饮水量在接种2天后减少了2.8mL，但之后发生了恢复。与对照组相比，在接种3天后确认到显著的增加。

在细菌接种前施用组中，平均饮水量的变动较少，从接种2天后到3天继续减少，在2天中减少了2.2mL，之后发生了恢复。

在细菌接种后施用组中，平均饮水量从接种2天后到3天继续减少，在2天中减少了5.6mL，之后发生了恢复，与对照组，全时期施用组及细菌接种前施用组相比，在接种1天前及接种日确认到显著的增加。

(考察)

在对照组中，观察到在肺炎链球菌感染后通常状态的异常，体重，摄食量及饮水量的减少，直肠温的下降。生存率为0％。

在肺炎链球菌接种前、后全程使其摄取乳酸菌粉末的17天施用(全时期施用)组中，摄食量及饮水量的变化较小，对于通常状态，直肠温及体重的影响比对照组轻。生存率为60％，与对照组相比确认到显著的升高。

在将乳酸菌粉末仅在肺炎链球菌接种前的时期施用的7天施用(细菌接种前施用)组中，饮水量的变化较小，对于通常状态，直肠温，体重及摄食量的影响比对照组轻。生存率为20％。

在从肺炎链球菌接种日起开始施用的10天施用(细菌接种后施用)组中，对直肠温，摄食量及饮水量的影响比对照组轻，而对通常状态及体重的影响与对照组为同程度。生存率为10％。

根据以上显示，对于作为含乳酸菌的饮料的成分的乳酸菌粉末EF-2001的摄取而言，从感染肺炎链球菌前开始、在感染之后也继续进行对于感染的预防是最有效的。另一方面，与全时期施用组相比，即使为仅在感染前的摄取或感染后的摄取，也观察到了为限定性但存在的感染预防及治疗效果。

将本说明书中引用的全部出版物、专利和专利申请全文作为参考并入本说明书中。

工业实用性

本发明可以用于肺炎链球菌感染的预防和/或治疗中。

Claims (13)

1.粪肠球菌EF-2001株在制备肺炎链球菌感染的预防和/或治疗剂中的用途，其中，粪肠球菌EF-2001株为死菌。

2.根据权利要求1所述的用途，其中粪肠球菌EF-2001株为适于口服施用的形式。

3.根据权利要求2所述的用途，其中粪肠球菌EF-2001株为适于以每次1x 10⁸-1x10¹¹CFU/kg体重口服施用的形式。

4.根据权利要求3所述的用途，其中粪肠球菌EF-2001株为适于以1天1次以上，每次1x10⁸-1x 10¹¹CFU/kg体重口服施用的形式。

5.根据权利要求4所述的用途，其中粪肠球菌EF-2001株为适于以1天1次以上5次以下的次数，每次1x 10⁸-1x 10¹¹CFU/kg体重口服施用的形式。

6.根据权利要求2所述的用途，其中粪肠球菌EF-2001株为适于以每次1x 10⁹-5x10¹⁰CFU/kg体重口服施用的形式。

7.根据权利要求6所述的用途，其中粪肠球菌EF-2001株为适于以1天1次以上，每次1x10⁹-5x 10¹⁰CFU/kg体重口服施用的形式。

8.根据权利要求7所述的用途，其中粪肠球菌EF-2001株为适于以1天1次以上5次以下的次数，每次1x 10⁹-5x 10¹⁰CFU/kg体重口服施用的形式。

9.根据权利要求2所述的用途，其中粪肠球菌EF-2001株为适于以每次1.2x 10¹⁰以上的CFU/kg体重口服施用的形式。

10.根据权利要求9所述的用途，其中粪肠球菌EF-2001株为适于以1天1次以上，每次1.2x 10¹⁰以上的CFU/kg体重口服施用的形式。

11.根据权利要求10所述的用途，其中粪肠球菌EF-2001株为适于以1天1次以上5次以下的次数，每次1.2x 10¹⁰以上的CFU/kg体重口服施用的形式。

12.根据权利要求2所述的用途，其中粪肠球菌EF-2001株为适于口服施用7天以上的形式。

13.粪肠球菌EF-2001株在制备肺炎链球菌感染的预防和/或治疗用药物中的用途，其中，粪肠球菌EF-2001株为死菌。