CN111518200A - 一种抗体或抗体组合物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于生物制品技术领域，具体的说是一种抗体或抗体组合物的制备方法；该方法包括如下步骤：S1：血清提取；S2：初步沉淀；S3：二次沉淀；S4：IgG抗体分离：分离罐内部设置有上层沉淀锅和下层沉淀锅；上层沉淀锅通过密封圈滑动设置在分离罐内；下层沉淀锅通过密封圈固定设置在分离罐内；分离罐设置有搅拌进料装置，且搅拌进料装置用于对上层沉淀锅内的血清进行高速搅拌；下层沉淀锅内设置有沉淀分离机构，且沉淀分离机构通过连接轴与搅拌进料装置连接；下层沉淀锅与上层沉淀锅之间连接有吸液管，且吸液管上安装有抽吸泵；下层沉淀锅上连接有进液管，且进液管端部伸出分离罐；本发明提高了血清中的抗体能够通过酒精沉淀法进行高效制备。

Description

一种抗体或抗体组合物的制备方法

技术领域

本发明属于生物制品技术领域，具体的说是一种抗体或抗体组合物的制备方法。

背景技术

血清抗体属于抗体药物中的最初级产品，仅在实验室小规模制备以用于科学研究较常见。纤维蛋白原是血浆与血清区别的主要组分之一，由a、β和γ链通过29对二硫键连接而成的分子量为340kDa的六聚体，作为血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa的受体参与血小板的活化聚集和在凝血酶及动物机体其他组分的作用下参与第三阶段的凝血。

随着养殖业集约化的快速发展，免疫失败、动物重大疫病的散发性暴发、抗病毒药物在兽医临床的禁用及以原发性病毒性疾病所至的混合感染，为动物各种疫病特异性的血清、免疫球蛋白及白蛋白等提供了市场空间。目前，提取制备血清抗体最常见的方法是冻融法、冷酒精沉淀法、自然沉析法，前两种成本低。

现有的冷酒精沉淀法虽然成本低，但是由于酒精沉淀法需要对血清溶液进行多次沉淀作业，且需要控制酒精的温度、浓度和混合溶液Ph，大多采用多个沉淀装置通过导流管和转移装置进行相互转移转换沉淀，进而容易导致血清溶液中抗体提取的速度和提取的质量较差的现象。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，本发明提出的一种抗体或抗体组合物的制备方法，本发明主要用于解决而现有的冷酒精沉淀法虽然成本低，但是由于酒精沉淀法需要对血清溶液进行多次沉淀作业，且需要控制酒精的温度、浓度和混合溶液Ph，大多采用多个沉淀装置通过导流管和转移装置进行相互转移转换沉淀，进而容易导致血清溶液中抗体提取的速度和提取的质量较差的现象。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：本发明所述的一种抗体或抗体组合物的制备方法，该方法包括如下步骤：

S1：血清提取：将畜牧中抽取的血液立即存放到离心管中进行密封，转入低温室，将离心管通过离心试管架存放到离心机的样品仓内，设置离心机的参数，转速设置在3500～4500转/分钟，离心时间设置4～8分钟；离心机停止工作后，将离心管从样品仓内取出，离心管的下层沉淀的为血细胞层，上层为血清层；通过离心机度离心管进行高度离心作业，可以使得离心管内的血液充分打散，进而便于血液中的血细胞和血清进行静止分层作业，进而获得的血清的产量、效率和质量都比较高；

S2：初步沉淀：将S1步骤中提取的血清液通过分离罐上设置导流管注入到上层沉淀锅内，在搅拌进料装置的锥形搅拌管的圆周方向高速搅拌下加入3倍体积的蒸馏水，调节pH至7.7冷却到0℃；然后加预冷的-25℃酒精，在高速的搅拌下酒精到最终浓度为20％，保持在-5℃；使之上层沉淀锅内产生A沉淀物；通过上层沉淀锅对提取的血清进行初步沉淀，使得血清中多数种类的免疫球蛋白能够在温度为-20℃的酒精中进行高速搅拌分离，使得血清中大多数种类的免疫球蛋白能够产生沉淀，因血清和酒精均为溶液混合组成，通过锥形搅拌管沿着上层沉淀锅的圆周方向高速搅拌，使得血清和酒精混合溶液能够在上层沉淀锅的中心位置产生旋涡状，进而增大酒精溶液和血清的混合效果，进而增大免疫球蛋白的沉降效果；

S3：二次沉淀：将上层沉淀锅内上清溶液通过搅拌进料装置吸出，剩余A沉淀物；通过进液管向下层沉淀锅内充入25倍体积的0.15～20mol/L NaCl冷溶液，然后将上层沉淀锅内沉淀的A沉淀物导入到下层沉淀锅内，使A沉淀物悬浮在14mol/L NaCl冷溶液中，然后通过进液管向下层沉淀锅内加入0.06mol/L醋酸调节pH到5.1，静置产生B沉淀物和上清溶液；将上层沉淀锅内沉淀后的溶液导入到下层沉淀锅内，使得沉淀后的A沉淀物质直接在分离罐进行转移下层沉淀锅内再次沉淀，通过下层沉淀锅内添加的冷的NaCl溶液和0.06mol/L醋酸调节pH到5.1，通过下层沉淀锅度A沉淀物进行再次沉淀作业，使得上清溶液中包括大部分的IgA和IgM，IgG；

S4：IgG抗体分离：将下层沉淀锅内的上清溶液通过吸液吸入到上层沉淀锅内，调节上清液的pH到7.4，加冷-25℃酒精到最终浓度为25％，维持在-5℃,然后静置所得C沉淀物，且C沉淀物中含有90％～98％IgG抗体；然后通过凝胶过滤的方法对C沉淀物中的IgG抗体进行纯化；将下层沉淀锅内的上清溶液通过吸液管吸入到清理后的上层沉淀锅内，因S1步骤中的上清溶液中含有大量的酒精和蒸馏水，进而对S1步骤中上清液中的酒精进行浓度和温度调节，且对S1步骤中上清液内的其他杂质进行分离提纯；将分离提纯后的酒精添加到通过吸液管吸入的上层沉淀锅内S3步骤产生的上清溶液，进而对S3步骤中产生的上清溶液通过搅拌进料装置进行高度搅拌，使之产生C沉淀物，对C沉淀物通过通过凝胶过滤的方式进行纯化，进而形成IgG抗体；

其中，所述分离罐内部设置有上层沉淀锅和下层沉淀锅；所述上层沉淀锅通过密封圈滑动设置在分离罐内；所述下层沉淀锅通过密封圈固定设置在分离罐内；所述分离罐设置有搅拌进料装置，且搅拌进料装置用于对上层沉淀锅内的血清进行高速搅拌；所述下层沉淀锅内设置有沉淀分离机构，且沉淀分离机构通过连接轴与搅拌进料装置连接；所述下层沉淀锅与上层沉淀锅之间连接有吸液管，且吸液管上安装有抽吸泵；所述下层沉淀锅上连接有进液管，且进液管端部伸出分离罐；

工作时，当需要对血清中的抗体进行制备时，先将血清通过搅拌进料装置放入到上层沉淀锅内，然后将蒸馏水通过搅拌进料装置与上层沉淀锅内的血清进行混合，搅拌进料装置在对上层沉淀锅内的血清和蒸馏水进行高速搅拌时，操作人员将温度为-℃的酒精通过搅拌进料装置转动投放到上层沉淀锅内，使得酒精、血清和蒸馏水在高速搅拌下产生混合，当酒精浓度为％后，将上层沉淀锅内的溶液进行静置沉淀，A沉淀物进入到下层沉淀锅内，通过进液管向下层沉淀锅内添加的NaCl溶液和醋酸对下层沉淀锅内的A沉淀物进行Ph调节，使之产生B沉淀物和上清溶液；将上清溶液通过吸液泵吸入到上层沉淀锅内，使上层沉淀锅内添加的上清溶液通过酒精进行搅拌沉淀，进而形成C沉淀物，C沉淀物中含有90％～98％IgG抗体；通过分离罐内设置的上层沉淀锅和下层沉淀锅的配合，上层沉淀锅可以对血清溶液进行沉淀产生多数种类的免疫球蛋白，且可以对二次沉淀后产生的上清溶液进行再次沉淀形成％～％IgG抗体；下层沉淀锅可以对初次沉淀后的A沉淀物进行再次沉淀，使得A沉淀物中的IgA和IgM与IgG抗体进行分离；进而血清中含有的多种类抗体可以通过上层沉淀锅和下层沉淀锅进行沉淀分离作业，使得血清溶液中的抗体能够在分离罐中进行密封制备作业；不需要将操作人员将血清溶液初步沉淀后的沉淀物转移到另外一个沉淀装置中，进而减小沉淀物在转移后温度和Ph产生大范围变化的现象，进而提高了血清中的抗体能够通过酒精沉淀法进行高效制备作业；现有血清中的抗体采用酒精沉淀法进行提取时，由于酒精沉淀法需要对血清溶液进行多次沉淀作业，且需要控制酒精的温度、浓度和混合溶液Ph，大多采用多个沉淀装置通过导流管和转移装置进行相互转移转换沉淀，进而影响血清溶液中抗体提取的速度和提取的质量。

优选的，所述搅拌进料装置包括转动空腔轴、主动齿轮、从动齿轮、驱动电机、导流管、空腔转动盘和锥形搅拌管；所述转动空腔轴转动安装在分离罐内，且转动空腔轴的底端位于上层沉淀锅内；所述转动空腔轴的顶端安装有从动齿轮；所述主动齿轮通过转动柱转动安装在分离罐的顶端，且主动齿轮与从动齿轮相互啮合；所述驱动电机的输出端与主动齿轮连接，且驱动电机固定设置分离罐的上方；所述转动空腔轴的外壁上开设有安装孔，且转动空腔轴内通过安装有导流管，且导流管的顶端通过轴承与注入管连通；所述转动空腔轴的底端固定安装有空腔转动盘，且空腔转动盘底端圆周方向均匀开设有多个导液孔；所述导流管的底端连通到空腔转动盘内；每个所述导液孔内均安装有锥形搅拌管，且锥形搅拌管上设置有液控阀；所述上层沉淀锅的底端内部开设有转动腔，且转动腔内通过转动连轴机构转动设置有密封板；所述上层沉淀锅底端和密封板上均开设有多个导流孔，且上层沉淀锅内设置的导流孔与密封板上的导流孔转动错位设置；

工作时，当需要对上层沉淀锅内的血清溶液进行高速搅拌时，操作人员可以先将血清溶液通过注入管注入到导流管内，导流管内的血清溶液会通过空腔转动盘流入到设置的多个锥形搅拌管内，进而进入到上层沉淀锅内，然后通过上述方式将蒸馏水注入到上层沉淀锅内，控制单元控制驱动电机转动，驱动电机会带转动空腔轴转动，转动空腔轴的转动会带动空腔转动盘和设置在空腔转动盘圆周方向的锥形搅拌管在上层沉淀锅内高速搅拌作业，在空腔转动盘高速转动时操作人员可以将酒精通过注入管注入到导流管内，然后通过高速转动的锥形搅拌管注入到高速搅拌的血清混合液中，当血清溶液和酒精混合完成后，上层沉淀锅会将血清混合液形成沉淀，使得形成A沉淀物和上清溶液；操作人员将分离罐外部的抽气机连接到注入管内，然后将上清溶液通过锥形搅拌管吸入到空腔转动盘内，然后通过液控阀将锥形搅拌管进行密封；通过转动连轴机构转动密封板，使得密封板上导流孔与上层沉淀锅内的导流孔对齐，使得上层沉淀锅内的A沉淀物通过导流孔流入到下层沉淀锅内，进而通过下层沉淀锅进行再次沉淀作业；通过锥形搅拌管沿着上层沉淀锅的圆周方向高速搅拌，使得血清和酒精混合溶液能够在上层沉淀锅的中心位置产生旋涡状，进而增大酒精溶液和血清的混合效果，进而增大免疫球蛋白的沉降效果；现有的搅拌装置对液体溶液进行搅拌时，大多是沿着搅拌轴的中心位置进行搅拌，使得液体混合物在混合搅拌时，液体混合物的外圈内的液体溶液难以高效充分混合，进行影响血清溶液的充分混合沉淀。

优选的，所述转动连轴机构包括连轴柱、十字插接块和电动伸缩杆；所述连轴柱固定连接到密封板上，且连轴柱与上层沉淀锅转动连接；所述连轴柱上端面开设有十字插接槽；所述电动伸缩杆固定安装在转动空腔轴内，且电动伸缩杆的伸缩端固定有十字插接块；所述十字插接块与十字插接槽相互插接配合；工作时，当上层沉淀锅内的上清溶液抽入到空腔转动盘内上，驱动电机停止工作，控制单元控制电动伸缩杆伸出，电动伸缩杆带动十字插接块插入到十字插接槽内，然后驱动电机转动，会通过转动空腔轴带动连接轴转动，使得密封板上开设的导流孔与上层沉淀锅上开设的导流孔对齐，进而上层沉淀锅内的A沉淀物通过导流孔流入到下层沉淀锅内；当上层沉淀锅内A沉淀物排出后，驱动电机转动带动密封板上的导流孔与上层沉淀锅上的导流孔错位，进而对上层沉淀锅进行密封作业，电动伸缩杆收缩，使得十字插接块与十字插接槽脱离。

优选的，所述沉淀分离机构包括连接轴、转动弧形罩和导流罩；所述连接轴的顶端固定连接到连轴柱的顶端，且连接轴的底端转动连接到下层沉淀锅内；所述连接轴上固定安装有转动弧形罩，且转动弧形罩转动设置在下层沉淀锅内；所述导流罩固定安装到上层沉淀锅的底端，且导流罩的底端位于转动弧形罩的上方；工作时，当A沉淀物通过导流孔落入到下层沉淀锅内后，操作人员通过进液管向下层沉淀锅内添加的NaCl溶液和醋酸对下层沉淀锅内的A沉淀物进行Ph调节，然后控制单元控制电动伸缩杆伸出，十字插接块插入到十字插接槽内，驱动电机转动会通过转动空腔轴带动连轴柱转动，连轴柱会通过连接轴带动转动弧形罩转动，因转动弧形罩设置在下层沉淀锅内，进而A沉淀物会落入到转动弧形罩内，高速转动的转动弧形罩的转动离心力会带动A沉淀物、NaCl溶液和醋酸混合溶液沿着转动弧形罩的内壁向上形成弧形翻滚，使得转动弧形罩圆周上的混合溶液能够翻滚到转动弧形罩的中心位置，进而增大下层沉淀锅内A沉淀物与NaCl溶液和醋酸混合作业，能够快速降低A沉淀物的Ph，且能够快速形成B沉淀物；设置的导流罩能够便于下层沉淀物内流出到A沉淀物迅速通过导流罩落入到下层沉淀锅中。

优选的，所述连接轴上固定设置多个弧形导流板，且弧形导流板的两侧壁设置有多个玻璃搅拌条；所述弧形导流板位于转动弧形罩内；工作时，当连接轴在转动时，转动弧形罩的转动离心力带动混合溶液翻转时，会落入到弧形导流板的上表面，使得弧形导流板能够对翻转后的混合溶液起到导流的作用，且落入到弧形导流板上表面的混合溶液在弧形导流板的高速转动下会离心甩入到转动弧形罩内，进而增大液体混合溶液的高效混合接触效果；玻璃搅拌条在弧形导流板的转动下可以对转动弧形罩内混合溶液进行混合搅动；该发明设置的弧形导流板能够适用于液体混合溶液之间的快速混合溶解，同时在转动弧形罩的配合下，能够对混合溶液进行翻滚混合作业。

优选的，所述吸液管位于转动弧形罩的内侧壁，且吸液管的侧壁上设置弹性刮条；所述弹性刮条与转动弧形罩转动摩擦接触；工作时，当转动弧形罩转动时，固定设置的吸液管内部内壁设置的吸液管会沿着转动弧形罩的内壁进行转动刮取，可以有效防止当混合溶液在转动弧形罩的高速转动离心力下，混合溶液沿着转动弧形罩的内部翻滚时，混合溶液中的免疫球蛋白粘结在转动弧形罩的内壁上，进而影响转动弧形罩对A沉淀物中的抗体进行高质量提取作业。

本发明的有益效果如下：

1.本发明下层沉淀锅可以对初次沉淀后的A沉淀物进行再次沉淀，使得A沉淀物中的IgA和IgM与IgG抗体进行分离；进而血清中含有的多种类抗体可以通过上层沉淀锅和下层沉淀锅进行沉淀分离作业，使得血清溶液中的抗体能够在分离罐中进行密封制备作业；进而减小沉淀物在转移后温度和Ph产生大范围变化的现象，进而提高了血清中的抗体能够通过酒精沉淀法进行高效制备作业。

2.本发明通过过锥形搅拌管沿着上层沉淀锅的圆周方向高速搅拌，使得血清和酒精混合溶液能够在上层沉淀锅的中心位置产生旋涡状，进而增大酒精溶液和血清的混合效果，进而增大免疫球蛋白的沉降效果。

附图说明

下面结合附图对本发明作进一步说明。

图1是本发明的制备方法流程图；

图2是本发明的分离罐的剖视图；

图3是本发明图2中局部放大图；

图4是本发明图2中A处放大图；

图中：分离罐1、上层沉淀锅2、下层沉淀锅3、密封圈4、搅拌进料装置5、转动空腔轴51、安装孔511、主动齿轮52、从动齿轮53、驱动电机54、导流管55、空腔转动盘56、导液孔561、锥形搅拌管57、沉淀分离机构6、连接轴61、转动弧形罩62、导流罩63、吸液管64、进液管65、密封板7、导流孔71、转动连轴机构8、连轴柱81、十字插接槽811、十字插接块82、电动伸缩杆83、弧形导流板9、玻璃搅拌条10、弹性刮条11。

具体实施方式

使用图1-图4对本发明一实施方式的一种抗体或抗体组合物的制备方法进行如下说明。

如图1-图4所示，本发明所述的一种抗体或抗体组合物的制备方法，该方法包括如下步骤：

S1：血清提取：将畜牧中抽取的血液立即存放到离心管中进行密封，转入低温室，将离心管通过离心试管架存放到离心机的样品仓内，设置离心机的参数，转速设置在3500～4500转/分钟，离心时间设置4～8分钟；离心机停止工作后，将离心管从样品仓内取出，离心管的下层沉淀的为血细胞层，上层为血清层；通过离心机度离心管进行高度离心作业，可以使得离心管内的血液充分打散，进而便于血液中的血细胞和血清进行静止分层作业，进而获得的血清的产量、效率和质量都比较高；

S2：初步沉淀：将S1步骤中提取的血清液通过分离罐1上设置导流管55注入到上层沉淀锅2内，在搅拌进料装置5的锥形搅拌管57的圆周方向高速搅拌下加入3倍体积的蒸馏水，调节pH至7.7冷却到0℃；然后加预冷的-25℃酒精，在高速的搅拌下酒精到最终浓度为20％，保持在-5℃；使之上层沉淀锅2内产生A沉淀物；通过上层沉淀锅2对提取的血清进行初步沉淀，使得血清中多数种类的免疫球蛋白能够在温度为-20℃的酒精中进行高速搅拌分离，使得血清中大多数种类的免疫球蛋白能够产生沉淀，因血清和酒精均为溶液混合组成，通过锥形搅拌管57沿着上层沉淀锅2的圆周方向高速搅拌，使得血清和酒精混合溶液能够在上层沉淀锅2的中心位置产生旋涡状，进而增大酒精溶液和血清的混合效果，进而增大免疫球蛋白的沉降效果；

S3：二次沉淀：将上层沉淀锅2内上清溶液通过搅拌进料装置5吸出，剩余A沉淀物；通过进液管65向下层沉淀锅3内充入25倍体积的0.15～20mol/L NaCl冷溶液，然后将上层沉淀锅2内沉淀的A沉淀物导入到下层沉淀锅3内，使A沉淀物悬浮在14mol/L NaCl冷溶液中，然后通过进液管65向下层沉淀锅3内加入0.06mol/L醋酸调节pH到5.1，静置产生B沉淀物和上清溶液；将上层沉淀锅2内沉淀后的溶液导入到下层沉淀锅3内，使得沉淀后的A沉淀物质直接在分离罐1进行转移下层沉淀锅3内再次沉淀，通过下层沉淀锅3内添加的冷的NaCl溶液和0.06mol/L醋酸调节pH到5.1，通过下层沉淀锅3度A沉淀物进行再次沉淀作业，使得上清溶液中包括大部分的IgA和IgM，IgG；

S4：IgG抗体分离：将下层沉淀锅3内的上清溶液通过吸液管64吸入到上层沉淀锅2内，调节上清液的pH到7.4，加冷-25℃酒精到最终浓度为25％，维持在-5℃,然后静置所得C沉淀物，且C沉淀物中含有90％～98％IgG抗体；然后通过凝胶过滤的方法对C沉淀物中的IgG抗体进行纯化；将下层沉淀锅3内的上清溶液通过吸液管64吸入到清理后的上层沉淀锅2内，因S1步骤中的上清溶液中含有大量的酒精和蒸馏水，进而对S1步骤中上清液中的酒精进行浓度和温度调节，且对S1步骤中上清液内的其他杂质进行分离提纯；将分离提纯后的酒精添加到通过吸液管64吸入的上层沉淀锅2内S3步骤产生的上清溶液，进而对S3步骤中产生的上清溶液通过搅拌进料装置5进行高度搅拌，使之产生C沉淀物，对C沉淀物通过通过凝胶过滤的方式进行纯化，进而形成IgG抗体；

其中，所述分离罐1内部设置有上层沉淀锅2和下层沉淀锅3；所述上层沉淀锅2通过密封圈4滑动设置在分离罐1内；所述下层沉淀锅3通过密封圈4固定设置在分离罐1内；所述分离罐1设置有搅拌进料装置5，且搅拌进料装置5用于对上层沉淀锅2内的血清进行高速搅拌；所述下层沉淀锅3内设置有沉淀分离机构6，且沉淀分离机构6通过连接轴61与搅拌进料装置5连接；所述下层沉淀锅3与上层沉淀锅2之间连接有吸液管64，且吸液管64上安装有抽吸泵；所述下层沉淀锅3上连接有进液管65，且进液管65端部伸出分离罐1；

工作时，当需要对血清中的抗体进行制备时，先将血清通过搅拌进料装置5放入到上层沉淀锅2内，然后将蒸馏水通过搅拌进料装置5与上层沉淀锅2内的血清进行混合，搅拌进料装置5在对上层沉淀锅2内的血清和蒸馏水进行高速搅拌时，操作人员将温度为-20℃的酒精通过搅拌进料装置5转动投放到上层沉淀锅2内，使得酒精、血清和蒸馏水在高速搅拌下产生混合，当酒精浓度为20％后，将上层沉淀锅2内的溶液进行静置沉淀，A沉淀物进入到下层沉淀锅3内，通过进液管65向下层沉淀锅3内添加的NaCl溶液和醋酸对下层沉淀锅3内的A沉淀物进行Ph调节，使之产生B沉淀物和上清溶液；将上清溶液通过吸液泵吸入到上层沉淀锅2内，使上层沉淀锅2内添加的上清溶液通过酒精进行搅拌沉淀，进而形成C沉淀物，C沉淀物中含有90％～98％IgG抗体；通过分离罐1内设置的上层沉淀锅2和下层沉淀锅3的配合，上层沉淀锅2可以对血清溶液进行沉淀产生多数种类的免疫球蛋白，且可以对二次沉淀后产生的上清溶液进行再次沉淀形成90％～98％IgG抗体；下层沉淀锅3可以对初次沉淀后的A沉淀物进行再次沉淀，使得A沉淀物中的IgA和IgM与IgG抗体进行分离；进而血清中含有的多种类抗体可以通过上层沉淀锅2和下层沉淀锅3进行沉淀分离作业，使得血清溶液中的抗体能够在分离罐1中进行密封制备作业；不需要将操作人员将血清溶液初步沉淀后的沉淀物转移到另外一个沉淀装置中，进而减小沉淀物在转移后温度和Ph产生大范围变化的现象，进而提高了血清中的抗体能够通过酒精沉淀法进行高效制备作业；现有血清中的抗体采用酒精沉淀法进行提取时，由于酒精沉淀法需要对血清溶液进行多次沉淀作业，且需要控制酒精的温度、浓度和混合溶液Ph，大多采用多个沉淀装置通过导流管55和转移装置进行相互转移转换沉淀，进而影响血清溶液中抗体提取的速度和提取的质量。

作为本发明的一种实施方式，所述搅拌进料装置5包括转动空腔轴51、主动齿轮52、从动齿轮53、驱动电机54、导流管55、空腔转动盘56和锥形搅拌管57；所述转动空腔轴51转动安装在分离罐1内，且转动空腔轴51的底端位于上层沉淀锅2内；所述转动空腔轴51的顶端安装有从动齿轮53；所述主动齿轮52通过转动柱转动安装在分离罐1的顶端，且主动齿轮52与从动齿轮53相互啮合；所述驱动电机54的输出端与主动齿轮52连接，且驱动电机54固定设置分离罐1的上方；所述转动空腔轴51的外壁上开设有安装孔511，且转动空腔轴51内通过安装有导流管55，且导流管55的顶端通过轴承与注入管连通；所述转动空腔轴51的底端固定安装有空腔转动盘56，且空腔转动盘56底端圆周方向均匀开设有多个导液孔561；所述导流管55的底端连通到空腔转动盘56内；每个所述导液孔561内均安装有锥形搅拌管57，且锥形搅拌管57上设置有液控阀；所述上层沉淀锅2的底端内部开设有转动腔，且转动腔内通过转动连轴机构8转动设置有密封板7；所述上层沉淀锅2底端和密封板7上均开设有多个导流孔71，且上层沉淀锅2内设置的导流孔71与密封板7上的导流孔71转动错位设置；

工作时，当需要对上层沉淀锅2内的血清溶液进行高速搅拌时，操作人员可以先将血清溶液通过注入管注入到导流管55内，导流管55内的血清溶液会通过空腔转动盘56流入到设置的多个锥形搅拌管57内，进而进入到上层沉淀锅2内，然后通过上述方式将蒸馏水注入到上层沉淀锅2内，控制单元控制驱动电机54转动，驱动电机54会带转动空腔轴51转动，转动空腔轴51的转动会带动空腔转动盘56和设置在空腔转动盘56圆周方向的锥形搅拌管57在上层沉淀锅2内高速搅拌作业，在空腔转动盘56高速转动时操作人员可以将酒精通过注入管注入到导流管55内，然后通过高速转动的锥形搅拌管57注入到高速搅拌的血清混合液中，当血清溶液和酒精混合完成后，上层沉淀锅2会将血清混合液形成沉淀，使得形成A沉淀物和上清溶液；操作人员将分离罐1外部的抽气机连接到注入管内，然后将上清溶液通过锥形搅拌管57吸入到空腔转动盘56内，然后通过液控阀将锥形搅拌管57进行密封；通过转动连轴机构8转动密封板7，使得密封板7上导流孔71与上层沉淀锅2内的导流孔71对齐，使得上层沉淀锅2内的A沉淀物通过导流孔71流入到下层沉淀锅3内，进而通过下层沉淀锅3进行再次沉淀作业；通过锥形搅拌管57沿着上层沉淀锅2的圆周方向高速搅拌，使得血清和酒精混合溶液能够在上层沉淀锅2的中心位置产生旋涡状，进而增大酒精溶液和血清的混合效果，进而增大免疫球蛋白的沉降效果；现有的搅拌装置对液体溶液进行搅拌时，大多是沿着搅拌轴的中心位置进行搅拌，使得液体混合物在混合搅拌时，液体混合物的外圈内的液体溶液难以高效充分混合，进行影响血清溶液的充分混合沉淀。

作为本发明的一种实施方式，所述转动连轴机构8包括连轴柱81、十字插接块82和电动伸缩杆83；所述连轴柱81固定连接到密封板7上，且连轴柱81与上层沉淀锅2转动连接；所述连轴柱81上端面开设有十字插接槽811；所述电动伸缩杆83固定安装在转动空腔轴51内，且电动伸缩杆83的伸缩端固定有十字插接块82；所述十字插接块82与十字插接槽811相互插接配合；工作时，当上层沉淀锅2内的上清溶液抽入到空腔转动盘56内上，驱动电机54停止工作，控制单元控制电动伸缩杆83伸出，电动伸缩杆83带动十字插接块82插入到十字插接槽811内，然后驱动电机54转动，会通过转动空腔轴51带动连接轴61转动，使得密封板7上开设的导流孔71与上层沉淀锅2上开设的导流孔71对齐，进而上层沉淀锅2内的A沉淀物通过导流孔71流入到下层沉淀锅3内；当上层沉淀锅2内A沉淀物排出后，驱动电机54转动带动密封板7上的导流孔71与上层沉淀锅2上的导流孔71错位，进而对上层沉淀锅2进行密封作业，电动伸缩杆83收缩，使得十字插接块82与十字插接槽811脱离。

作为本发明的一种实施方式，所述沉淀分离机构6包括连接轴61、转动弧形罩62和导流罩63；所述连接轴61的顶端固定连接到连轴柱81的顶端，且连接轴61的底端转动连接到下层沉淀锅3内；所述连接轴61上固定安装有转动弧形罩62，且转动弧形罩62转动设置在下层沉淀锅3内；所述导流罩63固定安装到上层沉淀锅2的底端，且导流罩63的底端位于转动弧形罩62的上方；工作时，当A沉淀物通过导流孔71落入到下层沉淀锅3内后，操作人员通过进液管65向下层沉淀锅3内添加的NaCl溶液和醋酸对下层沉淀锅3内的A沉淀物进行Ph调节，然后控制单元控制电动伸缩杆83伸出，十字插接块82插入到十字插接槽811内，驱动电机54转动会通过转动空腔轴51带动连轴柱81转动，连轴柱81会通过连接轴61带动转动弧形罩62转动，因转动弧形罩62设置在下层沉淀锅3内，进而A沉淀物会落入到转动弧形罩62内，高速转动的转动弧形罩62的转动离心力会带动A沉淀物、NaCl溶液和醋酸混合溶液沿着转动弧形罩62的内壁向上形成弧形翻滚，使得转动弧形罩62圆周上的混合溶液能够翻滚到转动弧形罩62的中心位置，进而增大下层沉淀锅3内A沉淀物与NaCl溶液和醋酸混合作业，能够快速降低A沉淀物的Ph，且能够快速形成B沉淀物；设置的导流罩63能够便于下层沉淀物内流出到A沉淀物迅速通过导流罩63落入到下层沉淀锅3中。

作为本发明的一种实施方式，所述连接轴61上固定设置多个弧形导流板9，且弧形导流板9的两侧壁设置有多个玻璃搅拌条10；所述弧形导流板9位于转动弧形罩62内；工作时，当连接轴61在转动时，转动弧形罩62的转动离心力带动混合溶液翻转时，会落入到弧形导流板9的上表面，使得弧形导流板9能够对翻转后的混合溶液起到导流的作用，且落入到弧形导流板9上表面的混合溶液在弧形导流板9的高速转动下会离心甩入到转动弧形罩62内，进而增大液体混合溶液的高效混合接触效果；玻璃搅拌条10在弧形导流板9的转动下可以对转动弧形罩62内混合溶液进行混合搅动；该发明设置的弧形导流板9能够适用于液体混合溶液之间的快速混合溶解，同时在转动弧形罩62的配合下，能够对混合溶液进行翻滚混合作业。

作为本发明的一种实施方式，所述吸液管64位于转动弧形罩62的内侧壁，且吸液管64的侧壁上设置弹性刮条11；所述弹性刮条11与转动弧形罩62转动摩擦接触；工作时，当转动弧形罩62转动时，固定设置的吸液管64内部内壁设置的吸液管64会沿着转动弧形罩62的内壁进行转动刮取，可以有效防止当混合溶液在转动弧形罩62的高速转动离心力下，混合溶液沿着转动弧形罩62的内部翻滚时，混合溶液中的免疫球蛋白粘结在转动弧形罩62的内壁上，进而影响转动弧形罩62对A沉淀物中的抗体进行高质量提取作业。

具体工作流程如下：

工作时，当需要对血清中的抗体进行制备时，先将血清通过搅拌进料装置5放入到上层沉淀锅2内，然后将蒸馏水通过搅拌进料装置5与上层沉淀锅2内的血清进行混合，搅拌进料装置5在对上层沉淀锅2内的血清和蒸馏水进行高速搅拌时，操作人员将温度为-20℃的酒精通过搅拌进料装置5转动投放到上层沉淀锅2内，使得酒精、血清和蒸馏水在高速搅拌下产生混合，当酒精浓度为20％后，将上层沉淀锅2内的溶液进行静置沉淀，A沉淀物进入到下层沉淀锅3内，通过进液管65向下层沉淀锅3内添加的NaCl溶液和醋酸对下层沉淀锅3内的A沉淀物进行Ph调节，使之产生B沉淀物和上清溶液；将上清溶液通过吸液泵吸入到上层沉淀锅2内，使上层沉淀锅2内添加的上清溶液通过酒精进行搅拌沉淀，进而形成C沉淀物，C沉淀物中含有90％～98％IgG抗体；通过分离罐1内设置的上层沉淀锅2和下层沉淀锅3的配合，上层沉淀锅2可以对血清溶液进行沉淀产生多数种类的免疫球蛋白，且可以对二次沉淀后产生的上清溶液进行再次沉淀形成90％～98％IgG抗体；下层沉淀锅3可以对初次沉淀后的A沉淀物进行再次沉淀，使得A沉淀物中的IgA和IgM与IgG抗体进行分离。

在本发明的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“前”、“后”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明保护范围的限制。

虽然本发明是通过具体实施例进行说明的，本领域技术人员应当明白，在不脱离本发明范围的情况下，还可以对本发明进行各种变换及等同替代。另外，针对特定情形或材料，可以对本发明做各种修改，而不脱离本发明的范围。因此，本发明不局限于所公开的具体实施例，而应当包括落入本发明权利要求范围内的全部实施方式。

Claims (6)

1.一种抗体或抗体组合物的制备方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

S1：血清提取：将畜牧中抽取的血液立即存放到离心管中进行密封，转入低温室，将离心管通过离心试管架存放到离心机的样品仓内，设置离心机的参数，转速设置在3500～4500转/分钟，离心时间设置4～8分钟；离心机停止工作后，将离心管从样品仓内取出，离心管的下层沉淀的为血细胞层，上层为血清层；

S2：初步沉淀：将S1步骤中提取的血清液通过分离罐(1)上设置导流管(55)注入到上层沉淀锅(2)内，在搅拌进料装置(5)的锥形搅拌管(57)的圆周方向高速搅拌下加入3倍体积的蒸馏水，调节pH至7.7冷却到0℃；然后加预冷的-25℃酒精，在高速的搅拌下酒精到最终浓度为20％，保持在-5℃；使之上层沉淀锅(2)内产生A沉淀物；

S3：二次沉淀：将上层沉淀锅(2)内上清溶液通过搅拌进料装置(5)吸出，剩余A沉淀物；通过进液管(65)向下层沉淀锅(3)内充入25倍体积的0.15～20mol/L NaCl冷溶液，然后将上层沉淀锅(2)内沉淀的A沉淀物导入到下层沉淀锅(3)内，使A沉淀物悬浮在14mol/L NaCl冷溶液中，然后通过进液管(65)向下层沉淀锅(3)内加入0.06mol/L醋酸调节pH到5.1，静置产生B沉淀物和上清溶液；

S4：IgG抗体分离：将下层沉淀锅(3)内的上清溶液通过吸液管(64)吸入到上层沉淀锅(2)内，调节上清液的pH到7.4，加冷-25℃酒精到最终浓度为25％，维持在-5℃,然后静置所得C沉淀物，且C沉淀物中含有90％～98％IgG抗体；然后通过凝胶过滤的方法对C沉淀物中的IgG抗体进行纯化；

其中，所述分离罐(1)内部设置有上层沉淀锅(2)和下层沉淀锅(3)；所述上层沉淀锅(2)通过密封圈(4)滑动设置在分离罐(1)内；所述下层沉淀锅(3)通过密封圈(4)固定设置在分离罐(1)内；所述分离罐(1)设置有搅拌进料装置(5)，且搅拌进料装置(5)用于对上层沉淀锅(2)内的血清进行高速搅拌；所述下层沉淀锅(3)内设置有沉淀分离机构(6)，且沉淀分离机构(6)通过连接轴(61)与搅拌进料装置(5)连接；所述下层沉淀锅(3)与上层沉淀锅(2)之间连接有吸液管(64)，且吸液管(64)上安装有抽吸泵；所述下层沉淀锅(3)上连接有进液管(65)，且进液管(65)端部伸出分离罐(1)。

2.根据权利要求1所述的一种抗体或抗体组合物的制备方法，其特征在于：所述搅拌进料装置(5)包括转动空腔轴(51)、主动齿轮(52)、从动齿轮(53)、驱动电机(54)、导流管(55)、空腔转动盘(56)和锥形搅拌管(57)；所述转动空腔轴(51)转动安装在分离罐(1)内，且转动空腔轴(51)的底端位于上层沉淀锅(2)内；所述转动空腔轴(51)的顶端安装有从动齿轮(53)；所述主动齿轮(52)通过转动柱转动安装在分离罐(1)的顶端，且主动齿轮(52)与从动齿轮(53)相互啮合；所述驱动电机(54)的输出端与主动齿轮(52)连接，且驱动电机(54)固定设置分离罐(1)的上方；所述转动空腔轴(51)的外壁上开设有安装孔(511)，且转动空腔轴(51)内通过安装有导流管(55)，且导流管(55)的顶端通过轴承与注入管连通；所述转动空腔轴(51)的底端固定安装有空腔转动盘(56)，且空腔转动盘(56)底端圆周方向均匀开设有多个导液孔(561)；所述导流管(55)的底端连通到空腔转动盘(56)内；每个所述导液孔(561)内均安装有锥形搅拌管(57)，且锥形搅拌管(57)上设置有液控阀；所述上层沉淀锅(2)的底端内部开设有转动腔，且转动腔内通过转动连轴机构(8)转动设置有密封板(7)；所述上层沉淀锅(2)底端和密封板(7)上均开设有多个导流孔(71)，且上层沉淀锅(2)内设置的导流孔(71)与密封板(7)上的导流孔(71)转动错位设置。

3.根据权利要求2所述的一种抗体或抗体组合物的制备方法，其特征在于：所述转动连轴机构(8)包括连轴柱(81)、十字插接块(82)和电动伸缩杆(83)；所述连轴柱(81)固定连接到密封板(7)上，且连轴柱(81)与上层沉淀锅(2)转动连接；所述连轴柱(81)上端面开设有十字插接槽(811)；所述电动伸缩杆(83)固定安装在转动空腔轴(51)内，且电动伸缩杆(83)的伸缩端固定有十字插接块(82)；所述十字插接块(82)与十字插接槽(811)相互插接配合。

4.根据权利要求3所述的一种抗体或抗体组合物的制备方法，其特征在于：所述沉淀分离机构(6)包括连接轴(61)、转动弧形罩(62)和导流罩(63)；所述连接轴(61)的顶端固定连接到连轴柱(81)的顶端，且连接轴(61)的底端转动连接到下层沉淀锅(3)内；所述连接轴(61)上固定安装有转动弧形罩(62)，且转动弧形罩(62)转动设置在下层沉淀锅(3)内；所述导流罩(63)固定安装到上层沉淀锅(2)的底端，且导流罩(63)的底端位于转动弧形罩(62)的上方。

5.根据权利要求4所述的一种抗体或抗体组合物的制备方法，其特征在于：所述连接轴(61)上固定设置多个弧形导流板(9)，且弧形导流板(9)的两侧壁设置有多个玻璃搅拌条(10)；所述弧形导流板(9)位于转动弧形罩(62)内。

6.根据权利要求5所述的一种抗体或抗体组合物的制备方法，其特征在于：所述吸液管(64)位于转动弧形罩(62)的内侧壁，且吸液管(64)的侧壁上设置弹性刮条(11)；所述弹性刮条(11)与转动弧形罩(62)转动摩擦接触。

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