CN111471572A - 一种用于细胞检测的试剂盒 - Google Patents

Abstract

本发明属于细胞检测技术领域，具体的说是一种用于细胞检测的试剂盒，包括盒体、限位盖、密封盖和试管；所述盒体与限位盖、密封盖均通过铰接杆铰接且限位盖处于密封盖和盒体之间；所述限位盖靠近盒体一侧、密封盖靠近限位盖一侧均固连有密封条；所述密封条弹性橡胶材料制成；所述盒体靠近限位盖一侧、限位盖靠近密封盖一侧均开设有密封槽；所述盒体靠近限位盖一侧开设第一凹槽；所述第一凹槽内固连有安装板；所述安装板靠近限位盖一侧表面开设有滑动槽；本发明通过密封板和弧形板双重密封的设定可以有效地隔绝外界灰尘、细菌等对实验进程产生影响，同时通过设立的转动阀等对试管进行均匀震荡，促进试管中试剂的融合，加快实验进度。

Description

一种用于细胞检测的试剂盒

技术领域

本发明属于细胞检测技术领域，具体的说是一种用于细胞检测的试剂盒。

背景技术

细胞增殖与毒性检测是测定物质毒性、评估药物安全和细胞健康的基本方法，同时可以指示肿瘤细胞增殖活性、目的基因瞬转/稳转细胞系的细胞增殖活性，目的基因过表达或RNAi干扰的基因功能研究，在药物筛选及功能安全性研究中发挥重要作用，因此，细胞增殖与毒性检测技术已广泛应用于分子生物学、肿瘤生物学、免疫学、遗传学、药理和药代动力学等各个研究领域目前，细胞增殖检测方法主要包括DNA合成检测、细胞增殖相关抗原检测及代谢活性检测三大类，其代谢活性检测方法是最为常用的方法，早期的代谢活性检测方法包括MTT法、XTT法、MTS法及WST-1法等，即检测试剂盒中分别含有MTT、XTT、MTS及WST-1检测液，现有技术中用于检测细胞和测试细胞毒性的试剂盒中通常采用96孔细胞培养板，但是细胞测试实验中，多数情况下实验仅需制作几组或十几组对照实验，因此不需要使用完整的96孔细胞培养板，但是现有技术中的细胞培养板多数为整体式，在进行使用时不易进行拆分使用，在进行实验时经常容易导致未使用的培养孔受到污染，同时现有细胞培养板在进行实验时，由于孔径较小，在进行滴加试剂时，很容易使试剂沾附在试管壁上，由于细胞检测实验中试剂使用量较小，试剂在滴加时沾壁较为容易造成添加试剂分量不精准，从而影响实验结果的判定。

中国专利发布的一种细胞增殖与毒性检测试剂盒，专利号：2018205714196，包括盒体，所述盒体的下端四角均安装有防滑垫，所述盒体的上端安装有盒盖，所述盒体的正面安装有显示屏，所述显示屏的一端安装有控制面板，所述盒体的内部安装有培养板，所述培养板上方的盒体上设置有空调出风口，所述盒体内部一侧设置有温度传感器，所述培养板上设置有培养槽，培养板上设置有进料管道，所述进料管道的一端穿过盒体与进料口相接通，所述培养板的下方安装有试剂抽屉，所述试剂抽屉的正面上安装有拉手，所述试剂抽屉的下端安装有蓄电池，所述蓄电池的一端安装有微型空调，该方案在添加试剂时需要与进料管道之间进行接触，试剂大多沾附在进料管道上，不利于实验的精度测试。

发明内容

为了弥补现有技术的不足，解决现有技术中在细胞检测试剂盒使用不便，不利于准确的添加试剂，同时在实验后期对细胞产物与试剂之间进行震荡溶解时较为麻烦的问题，本发明提出的一种用于细胞检测的试剂盒。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：本发明所述的一种用于细胞检测的试剂盒，包括盒体、限位盖、密封盖和试管；所述盒体与限位盖、密封盖均通过铰接杆铰接且限位盖处于密封盖和盒体之间；所述限位盖靠近盒体一侧、密封盖靠近限位盖一侧均固连有密封条；所述密封条弹性橡胶材料制成；所述盒体靠近限位盖一侧、限位盖靠近密封盖一侧均开设有密封槽，用于容纳密封条；所述盒体靠近限位盖一侧开设第一凹槽；所述第一凹槽内固连有安装板；所述安装板靠近限位盖一侧表面开设有均匀分布的滑动槽；所述滑动槽内均安装有限位块；初始状态下限位块延伸至滑动槽外设置；所述限位块远离限位盖一侧通过弹簧与滑动槽远离限位盖一侧弹性连接；所述限位块表面均开设有安装孔；所述安装孔用于安装试管；所述限位盖环形设计；所述限位盖环形内壁固连有定位板；所述定位板表面开设有均匀分布的第一通槽；所述第一通槽与限位块一一对应；所述第一通槽阶梯形设计；所述第一通槽内滑动连接有定位管；所述定位管与第一通槽形状相匹配且定位管与第一通槽阶梯状拐角处通过弹簧弹性连接；所述定位管内部铰接有对称设计的密封板；所述密封板半圆形设计且初始状态下对称设计的两块密封板将定位管阶梯型开口堵塞；所述限位盖侧壁开设有对称设计的第一滑槽；所述第一滑槽内滑动连接有均匀分布的挡板；所述挡板均为透明玻璃材料制成；

使用所述试剂盒的细胞检测方法包括以下步骤：

S1：提取待检测单元新鲜细胞组织，并将细胞组织与生理盐水按照1:10的比例进行均匀震荡稀释，稀释完成后提取稀释液上清液中细胞组织与培养基一同接种于试剂盒中的多个试管内，并将试剂盒置于培养箱中，于箱温36.5℃-37.5℃下进行24h细胞培养；将细胞接种于试管中后经过长时间贴壁培养，使细胞在试管中消耗培养基进行大量繁殖，从而使细胞充分适应试管中的培养环境；

S2：向培养完成后的多个试剂盒试管中各自添加10微升不同浓度的待检测物质，添加完毕后对试管进行均匀震荡3-5min，使细胞组织与待检测物质之间均匀混合，并向试管中补充足够的培养基，添加完毕后将试管重新置于培养箱中，按照细胞种类进行0.5-1h培养；均匀的震荡可以有效的促进细胞与待检测试剂之间的混合均匀程度，有利于待检测物质对细胞的生长繁殖进行均匀干扰；

S3：使用胶头吸管提取10微升CCK-8溶液，并将胶头吸管插入试管中进行试剂添加，添加时防止试剂沾壁，添加完毕后对试管中混合溶液进行低频多次震荡，使试剂与细胞产物之间进行均匀混合，并将试剂盒重新置于培养箱中进行1-2h培养，加强显色反应；将添加完CCK-8试剂的试管再次进行细胞培养，可以有效地等比例放大实验数据，从而有效地加强实验精度；

S4：将S3中培养完毕后的试剂从培养箱中取出，并将试剂置于酶标仪中进行检测，通过针对450mm处的吸光度进行精确检测，并记录数据，检测完成后将多个试管数据之间进行比对，并根据公式进行细胞存活率计算，从而检测出细胞毒性；根据细胞在生长繁育下生成的甲臜的数量的区别，使用CCK-8试剂进行显色，再经过酶标仪进行测试，可以有效地根据吸光度计算出细胞的存活率，从而计算出待检测物质对细胞毒性的强弱。

现有技术中用于检测细胞和测试细胞毒性的试剂盒中通常采用96孔细胞培养板，但是细胞测试实验中，多数情况下实验仅需制作几组或十几组对照实验，因此不需要使用完整的96孔细胞培养板，但是现有技术中的细胞培养板多数为整体式，在进行使用时不易进行拆分使用，在进行实验时经常容易导致未使用的培养孔受到污染，同时现有细胞培养板在进行实验时，由于孔径较小，在进行滴加试剂时，很容易使试剂沾附在试管壁上，由于细胞检测实验中试剂使用量较小，试剂在滴加时沾壁较为容易造成添加试剂分量不精准，从而影响实验结果的判定，工作时，将试剂盒从冷藏冰箱中取出，将限位盖和盒体之间相对打开，将安装板上均匀安装的限位块向滑动槽底部按压，从而使安装孔内的试管凸出限位块表面，从而将多余的试管取出，继续保存在冰箱中，将限位盖和盒体之间闭合，利用密封条和密封槽的配合使第一凹槽密封处理，同时将密封盖和限位盖之间打开，在进行滴加试剂时，滑动挡板，使被挡板遮挡的定位板上的第一通槽露出，将含有试剂的胶头滴管插入定位管中，随着胶头滴管的持续深入，对密封板产生挤压力，从而使密封板进行转动，从而使定位管和试管之间导通，此时进行挤压胶头滴管，从而完成试剂的添加，设计中定位管与第一通槽的设计对胶头滴管在进行挤压、滴加时进行限位，防止胶头滴管晃动，导致试剂沾附在试管壁上，影响实验的精度，同时使用限位盖和密封盖的设计，可以有效地对试管起到固定效果的同时，还可以快速的对试管进行拆卸，同时挡板和密封板利用胶头滴管的伸入从而使定位管与试管之间导通的设计可以有效的防止对未进行使用的试管造成污染。

优选的，所述限位块内部开设有均匀分布的弧形槽；所述弧形槽于安装孔内开口设置；所述弧形槽内均滑动连接有弧形板；所述弧形板数量为四且均延伸至安装孔内设置；所述弧形板于安装孔内相互组合成圆弧形；所述弧形板与弧形槽远离安装孔一侧固连有膨胀囊；所述限位块侧壁开设有第二滑槽；所述滑动槽位于第二滑槽处固连有挤压杆；所述挤压杆延伸至第二滑槽内；所述挤压杆下表面与第二滑槽之间固连有挤压囊；所述挤压囊与膨胀囊通过导管相互导通；

现有技术中试管中的细胞在进行培养时处于导通状态，在消毒、灭菌较差的环境中，随着实验的进行，空气中的杂菌以及灰尘等落入至试管中，容易对实验的进展产生一定的影响，从而使实验精度受到很大的限制，工作时，随着胶头滴管伸入定位管中，当胶头滴管将密封板顶开后，胶头滴管对定位管产生向下的挤压力，从而使定位管向下滑动，向下滑动的定位管对限位块产生挤压作用，使限位块向下滑动，在限位块向下滑动时，挤压杆与第二滑槽之间固连的挤压囊受到的挤压力逐渐减小，从而使膨胀囊内气体通过导管回流至挤压囊内，膨胀囊内气体回流导致膨胀囊收缩，从而使与膨胀囊之间固连的弧形板逐渐向弧形槽内回收，从而使弧形板相互组合形成的圆弧形盖打开，此时试管相对于定位管上移，从而使定位管中的胶头滴管伸入试管中，设计中利用弧形板相互组合形成圆弧形盖，从而将试管开口进行堵塞，从而有效地加强对试管的密封性管理，当试剂滴加完毕后，限位块在弹簧的弹性作用力下复位，从而使挤压囊内气体重新进入膨胀囊中，使弧形板伸出弧形槽，从而有效地在细胞培养的过程中加强对试管的密封效果，避免外界灰尘、细菌等外界因素影响实验结果。

优选的，所述定位管内开设有均匀分布的移动槽；所述移动槽内通过弹簧弹性连接有移动块；所述移动块靠近挡板一侧开设有锥形滴液孔；工作时，在进行滴加试剂时使用胶头滴管推动密封板，极易使胶头滴管滴加口沾附上密封板面上的灰尘，从而使灰尘随试剂一同滴入试管中，从而使实验产生偏差，工作时，将胶头滴管插入移动块上开设的锥形滴液孔中利用胶头滴管侧面倾斜部位与移动块之间的限制作用，从而将移动块向下推动，进而打开密封板，在进行操作时，胶头滴管滴加口与试剂盒之间不进行任何接触可以有效地防止胶头滴管滴加口上沾附灰尘，从而避免对实验结果产生影响。

优选的，所述第一凹槽位于安装板下方滑动连接有支撑板；所述支撑板与第一凹槽远离限位盖一侧通过均匀分布的弹簧之间弹性连接；所述盒体位于第一凹槽远离限位盖一侧开设有第二凹槽；所述第二凹槽内转动连接有均匀分布的转动轴；所述转动轴上均套接有敲击轮；所述转动轴之间通过皮带相互传动；所述盒体外侧转动连接有转动闸；所述转动闸贯穿盒体并与盒体内的转动轴之间固连；所述盒体一侧开设有第一空腔；所述转动闸贯穿第一空腔；所述转动轴位于第一空腔内固连有弹力发条；所述弹力发条另一端固连于第一空腔侧壁上；细胞检测实验中，当细胞培养完毕后需要对试管中的试剂进行震荡，使细胞与试剂之间充分接触、反应，在现有技术中，多数使用专门使用的震荡器或者进行手动摇晃的方式行震荡作业，但是专业的震荡器在大多数实验情况下都不存在，因此多数震荡作业需要人工进行手动摇晃，不仅效率较差而且震荡程度不高，极大的影响实验的进度，工作时，当细胞培养完成，并添加入试剂后，手动转动转动闸，转动闸带动转动轴和弹力发条进行转动，从而使转动轴上套接的敲击轮对支撑板进行振动，从而使支撑板与安装板之间产生碰撞，加强对安装板中的导管的震荡效果，同时弹力发条逐渐收紧，当弹力发条收紧至一定程度后，松开转动阀，转动阀和转动轴在弹力发条的作用下逐渐进行回旋，从而有效地延长敲击轮对支撑板敲打的时间，有效地使震荡作业进行的更加快速。

优选的，所述支撑板靠近安装板一侧滑动连接有振动板；所述振动板靠近安装板一侧开设有均匀分布的弹力槽；所述弹力槽内通过弹簧弹性连接有均匀分布的弹力板；所述弹力板靠近安装板一侧表面弧形设计；所述滑动槽底部开设有第二通槽；所述第二通槽贯穿安装板设计；所述第二通槽直径大于弹力槽直径；由于安装板固连在第一凹槽内，支撑板与安装板之间的撞击对试管的震荡效果并不强烈，工作时，支撑板受到敲击轮的持续敲击，从而使与支撑板之间接触的振动板受到持续不断的振动力，振动板上开设的弹力槽内的弹力板在振动冲击力和弹簧弹性力的作用下沿第二通槽对试管进行持续不断的轻幅撞击效果，从而有效地对试管进行震荡作业，从而使试管中反应进行的速率有效地加快。

优选的，所述盒体位于转动连接有转动闸一侧开设有第三滑槽；所述第三滑槽与振动板处于同一水平面；所述振动板靠近第三滑槽一侧固连有拨动杆；所述拨动杆通过第三滑槽延伸至外界；震荡作业仅在实验后期进行，在前期进行细胞培养时，弹力板对试管产生振动效果不利于实验的进行，工作时，在不需要进行震荡作业时，通过控制拨动杆在第三滑槽内进行滑动，从而使弹力槽与第二通槽之间不导通，使弹力板受到限制，被压缩入弹力槽内，从而避免试管振动带来的不便，在需要进行震荡时仅需将拨动杆进行复位，便可以使第二通槽与弹力槽之间导通。

本发明的有益效果如下：

1.本发明所述的一种用于细胞检测的试剂盒，通过设置密封盖，盒体和限位盖，将试管安装于开设在盒体内第一凹槽中的限位块上，在利用限位盖进行压制、固定，同时通过胶头滴管伸入定位管中利用胶头滴管的形状使移动块、定位管产生一定位移，从而对限位块进行挤压，使弧形板进行相对滑动，从而使胶头滴管与试管之间导通，密封板和弧形板双重密封的设定可以有效地隔绝外界灰尘、细菌等对实验进程产生影响，从而有效地加强实验的精度。

2.本发明所述的一种用于细胞检测的试剂盒，通过设置转动轴、敲击轮和弹力发条，通过手动转动转动阀从而使转动轴上套接的敲击轮对支撑板和振动板产生均匀的振动力，并通过振动板上设立的弹力板伸入第二通槽内对试管之间进行振动处理，从而有效的加强对试管的震荡效果，使试管中的试剂与细胞之间混合的更加均匀，从而有效地加快反应的进行速率。

附图说明

下面结合附图对本发明作进一步说明。

图1是本发明的方法流程图；

图2是本发明的主视图；

图3是本发明的剖视图；

图4是图2中A-A处的局部剖视图；

图5是图3中B-B处局部放大图；

图6是图3中C处局部放大图；

图中：盒体1、限位盖2、密封盖3、试管4、密封条11、密封槽12、第一凹槽13、安装板14、滑动槽15、限位块16、安装孔17、定位板21、第一通槽22、定位管23、密封板24、第一滑槽25、挡板26、弧形槽5、弧形板51、膨胀囊52、第二滑槽53、挤压杆54、挤压囊55、移动槽6、移动块61、支撑板7、第二凹槽71、转动轴72、敲击轮73、转动闸74、第一空腔75、弹力发条76、振动板8、弹力槽81、弹力板82、第二通槽83、第三滑槽9、拨动杆91。

具体实施方式

为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。

如图1至图6所示，本发明所述的一种用于细胞检测的试剂盒，包括盒体1、限位盖2、密封盖3和试管4；所述盒体1与限位盖2、密封盖3均通过铰接杆铰接且限位盖2处于密封盖3和盒体1之间；所述限位盖2靠近盒体1一侧、密封盖3靠近限位盖2一侧均固连有密封条11；所述密封条11弹性橡胶材料制成；所述盒体1靠近限位盖2一侧、限位盖2靠近密封盖3一侧均开设有密封槽12，用于容纳密封条11；所述盒体1靠近限位盖2一侧开设第一凹槽13；所述第一凹槽13内固连有安装板14；所述安装板14靠近限位盖2一侧表面开设有均匀分布的滑动槽15；所述滑动槽15内均安装有限位块16；初始状态下限位块16延伸至滑动槽15外设置；所述限位块16远离限位盖2一侧通过弹簧与滑动槽15远离限位盖2一侧弹性连接；所述限位块16表面均开设有安装孔17；所述安装孔17用于安装试管4；所述限位盖2环形设计；所述限位盖2环形内壁固连有定位板21；所述定位板21表面开设有均匀分布的第一通槽22；所述第一通槽22与限位块16一一对应；所述第一通槽22阶梯形设计；所述第一通槽22内滑动连接有定位管23；所述定位管23与第一通槽22形状相匹配且定位管23与第一通槽22阶梯状拐角处通过弹簧弹性连接；所述定位管23内部铰接有对称设计的密封板24；所述密封板24半圆形设计且初始状态下对称设计的两块密封板24将定位管23阶梯型开口堵塞；所述限位盖2侧壁开设有对称设计的第一滑槽25；所述第一滑槽25内滑动连接有均匀分布的挡板26；所述挡板26均为透明玻璃材料制成；

使用所述试剂盒的细胞检测方法包括以下步骤：

S1：提取待检测单元新鲜细胞组织，并将细胞组织与生理盐水按照1:10的比例进行均匀震荡稀释，稀释完成后提取稀释液上清液中细胞组织与培养基一同接种于试剂盒中的多个试管4内，并将试剂盒置于培养箱中，于箱温36.5℃-37.5℃下进行24h细胞培养；将细胞接种于试管中后经过长时间贴壁培养，使细胞在试管中消耗培养基进行大量繁殖，从而使细胞充分适应试管中的培养环境；

S2：向培养完成后的多个试剂盒试管4中各自添加10微升不同浓度的待检测物质，添加完毕后对试管进行均匀震荡3-5min，使细胞组织与待检测物质之间均匀混合，并向试管中补充足够的培养基，添加完毕后将试管重新置于培养箱中，按照细胞种类进行0.5-1h培养；均匀的震荡可以有效的促进细胞与待检测试剂之间的混合均匀程度，有利于待检测物质对细胞的生长繁殖进行均匀干扰；

S3：使用胶头吸管提取10微升CCK-8溶液，并将胶头吸管插入试管4中进行试剂添加，添加时防止试剂沾壁，添加完毕后对试管4中混合溶液进行低频多次震荡，使试剂与细胞产物之间进行均匀混合，并将试剂盒重新置于培养箱中进行1-2h培养，加强显色反应；将添加完CCK-8试剂的试管再次进行细胞培养，可以有效地等比例放大实验数据，从而有效地加强实验精度；

S4：将S3中培养完毕后的试剂从培养箱中取出，并将试剂置于酶标仪中进行检测，通过针对450mm处的吸光度进行精确检测，并记录数据，检测完成后将多个试管4数据之间进行比对，并根据公式进行细胞存活率计算，从而检测出细胞毒性；根据细胞在生长繁育下生成的甲臜的数量的区别，使用CCK-8试剂进行显色，再经过酶标仪进行测试，可以有效地根据吸光度计算出细胞的存活率，从而计算出待检测物质对细胞毒性的强弱。

现有技术中用于检测细胞和测试细胞毒性的试剂盒中通常采用96孔细胞培养板，但是细胞测试实验中，多数情况下实验仅需制作几组或十几组对照实验，因此不需要使用完整的96孔细胞培养板，但是现有技术中的细胞培养板多数为整体式，在进行使用时不易进行拆分使用，在进行实验时经常容易导致未使用的培养孔受到污染，同时现有细胞培养板在进行实验时，由于孔径较小，在进行滴加试剂时，很容易使试剂沾附在试管4壁上，由于细胞检测实验中试剂使用量较小，试剂在滴加时沾壁较为容易造成添加试剂分量不精准，从而影响实验结果的判定，工作时，将试剂盒从冷藏冰箱中取出，将限位盖2和盒体1之间相对打开，将安装板14上均匀安装的限位块16向滑动槽15底部按压，从而使安装孔17内的试管4凸出限位块16表面，从而将多余的试管4取出，继续保存在冰箱中，将限位盖2和盒体1之间闭合，利用密封条11和密封槽12的配合使第一凹槽13密封处理，同时将密封盖3和限位盖2之间打开，在进行滴加试剂时，滑动挡板26，使被挡板26遮挡的定位板21上的第一通槽22露出，将含有试剂的胶头滴管插入定位管23中，随着胶头滴管的持续深入，对密封板24产生挤压力，从而使密封板24进行转动，从而使定位管23和试管4之间导通，此时进行挤压胶头滴管，从而完成试剂的添加，设计中定位管23与第一通槽22的设计对胶头滴管在进行挤压、滴加时进行限位，防止胶头滴管晃动，导致试剂沾附在试管4壁上，影响实验的精度，同时使用限位盖2和密封盖3的设计，可以有效地对试管4起到固定效果的同时，还可以快速的对试管4进行拆卸，同时挡板26和密封板24利用胶头滴管的伸入从而使定位管23与试管4之间导通的设计可以有效的防止对未进行使用的试管4造成污染。

作为本发明的一种实施方式，所述限位块16内部开设有均匀分布的弧形槽5；所述弧形槽5于安装孔17内开口设置；所述弧形槽5内均滑动连接有弧形板51；所述弧形板51数量为四且均延伸至安装孔17内设置；所述弧形板51于安装孔17内相互组合成圆弧形；所述弧形板51与弧形槽5远离安装孔17一侧固连有膨胀囊52；所述限位块16侧壁开设有第二滑槽53；所述滑动槽15位于第二滑槽53处固连有挤压杆54；所述挤压杆54延伸至第二滑槽53内；所述挤压杆54下表面与第二滑槽53之间固连有挤压囊55；所述挤压囊55与膨胀囊52通过导管相互导通；

现有技术中试管4中的细胞在进行培养时处于导通状态，在消毒、灭菌较差的环境中，随着实验的进行，空气中的杂菌以及灰尘等落入至试管4中，容易对实验的进展产生一定的影响，从而使实验精度受到很大的限制，工作时，随着胶头滴管伸入定位管23中，当胶头滴管将密封板24顶开后，胶头滴管对定位管23产生向下的挤压力，从而使定位管23向下滑动，向下滑动的定位管23对限位块16产生挤压作用，使限位块16向下滑动，在限位块16向下滑动时，挤压杆54与第二滑槽53之间固连的挤压囊55受到的挤压力逐渐减小，从而使膨胀囊52内气体通过导管回流至挤压囊55内，膨胀囊52内气体回流导致膨胀囊52收缩，从而使与膨胀囊52之间固连的弧形板51逐渐向弧形槽5内回收，从而使弧形板51相互组合形成的圆弧形盖打开，此时试管4相对于定位管23上移，从而使定位管23中的胶头滴管伸入试管4中，设计中利用弧形板51相互组合形成圆弧形盖，从而将试管4开口进行堵塞，从而有效地加强对试管4的密封性管理，当试剂滴加完毕后，限位块16在弹簧的弹性作用力下复位，从而使挤压囊55内气体重新进入膨胀囊52中，使弧形板51伸出弧形槽5，从而有效地在细胞培养的过程中加强对试管4的密封效果，避免外界灰尘、细菌等外界因素影响实验结果。

作为本发明的一种实施方式，所述定位管23内开设有均匀分布的移动槽6；所述移动槽6内通过弹簧弹性连接有移动块61；所述移动块61靠近挡板26一侧开设有锥形滴液孔；工作时，在进行滴加试剂时使用胶头滴管推动密封板24，极易使胶头滴管滴加口沾附上密封板24面上的灰尘，从而使灰尘随试剂一同滴入试管4中，从而使实验产生偏差，工作时，将胶头滴管插入移动块61上开设的锥形滴液孔中利用胶头滴管侧面倾斜部位与移动块61之间的限制作用，从而将移动块61向下推动，进而打开密封板24，在进行操作时，胶头滴管滴加口与试剂盒之间不进行任何接触可以有效地防止胶头滴管滴加口上沾附灰尘，从而避免对实验结果产生影响。

作为本发明的一种实施方式，所述第一凹槽13位于安装板14下方滑动连接有支撑板7；所述支撑板7与第一凹槽13远离限位盖2一侧通过均匀分布的弹簧之间弹性连接；所述盒体1位于第一凹槽13远离限位盖2一侧开设有第二凹槽71；所述第二凹槽71内转动连接有均匀分布的转动轴72；所述转动轴72上均套接有敲击轮73；所述转动轴72之间通过皮带相互传动；所述盒体1外侧转动连接有转动闸74；所述转动闸74贯穿盒体1并与盒体1内的转动轴72之间固连；所述盒体1一侧开设有第一空腔75；所述转动闸74贯穿第一空腔75；所述转动轴72位于第一空腔75内固连有弹力发条76；所述弹力发条76另一端固连于第一空腔75侧壁上；细胞检测实验中，当细胞培养完毕后需要对试管4中的试剂进行震荡，使细胞与试剂之间充分接触、反应，在现有技术中，多数使用专门使用的震荡器或者进行手动摇晃的方式行震荡作业，但是专业的震荡器在大多数实验情况下都不存在，因此多数震荡作业需要人工进行手动摇晃，不仅效率较差而且震荡程度不高，极大的影响实验的进度，工作时，当细胞培养完成，并添加入试剂后，手动转动转动闸74，转动闸74带动转动轴72和弹力发条76进行转动，从而使转动轴72上套接的敲击轮73对支撑板7进行振动，从而使支撑板7与安装板14之间产生碰撞，加强对安装板14中的导管的震荡效果，同时弹力发条76逐渐收紧，当弹力发条76收紧至一定程度后，松开转动阀，转动阀和转动轴72在弹力发条76的作用下逐渐进行回旋，从而有效地延长敲击轮73对支撑板7敲打的时间，有效地使震荡作业进行的更加快速。

作为本发明的一种实施方式，所述支撑板7靠近安装板14一侧滑动连接有振动板8；所述振动板8靠近安装板14一侧开设有均匀分布的弹力槽81；所述弹力槽81内通过弹簧弹性连接有均匀分布的弹力板82；所述弹力板82靠近安装板14一侧表面弧形设计；所述滑动槽15底部开设有第二通槽83；所述第二通槽83贯穿安装板14设计；所述第二通槽83直径大于弹力槽81直径；由于安装板14固连在第一凹槽13内，支撑板7与安装板14之间的撞击对试管4的震荡效果并不强烈，工作时，支撑板7受到敲击轮73的持续敲击，从而使与支撑板7之间接触的振动板8受到持续不断的振动力，振动板8上开设的弹力槽81内的弹力板82在振动冲击力和弹簧弹性力的作用下沿第二通槽83对试管4进行持续不断的轻幅撞击效果，从而有效地对试管4进行震荡作业，从而使试管4中反应进行的速率有效地加快。

作为本发明的一种实施方式，所述盒体1位于转动连接有转动闸74一侧开设有第三滑槽9；所述第三滑槽9与振动板8处于同一水平面；所述振动板8靠近第三滑槽9一侧固连有拨动杆91；所述拨动杆91通过第三滑槽9延伸至外界；震荡作业仅在实验后期进行，在前期进行细胞培养时，弹力板82对试管4产生振动效果不利于实验的进行，工作时，在不需要进行震荡作业时，通过控制拨动杆91在第三滑槽9内进行滑动，从而使弹力槽81与第二通槽83之间不导通，使弹力板82受到限制，被压缩入弹力槽81内，从而避免试管4振动带来的不便，在需要进行震荡时仅需将拨动杆91进行复位，便可以使第二通槽83与弹力槽81之间导通。

具体工作流程如下：

工作时，将试剂盒从冷藏冰箱中取出，将限位盖2和盒体1之间相对打开，将安装板14上均匀安装的限位块16向滑动槽15底部按压，从而使安装孔17内的试管4凸出限位块16表面，从而将多余的试管4取出，继续保存在冰箱中，将限位盖2和盒体1之间闭合，利用密封条11和密封槽12的配合使第一凹槽13密封处理，同时将密封盖3和限位盖2之间打开，在进行滴加试剂时，滑动挡板26，使被挡板26遮挡的定位板21上的第一通槽22露出，将含有试剂的胶头滴管插入定位管23中，随着胶头滴管的持续深入，随着胶头滴管伸入定位管23中，当胶头滴管将密封板24顶开后，胶头滴管对定位管23产生向下的挤压力，从而使定位管23向下滑动，向下滑动的定位管23对限位块16产生挤压作用，使限位块16向下滑动，在限位块16向下滑动时，挤压杆54与第二滑槽53之间固连的挤压囊55受到的挤压力逐渐减小，从而使膨胀囊52内气体通过导管回流至挤压囊55内，膨胀囊52内气体回流导致膨胀囊52收缩，从而使与膨胀囊52之间固连的弧形板51逐渐向弧形槽5内回收，从而使弧形板51相互组合形成的圆弧形盖打开，此时试管4相对于定位管23上移，从而使定位管23中的胶头滴管伸入试管4中，完成试剂的添加，当细胞培养完成，并添加入试剂后，手动转动转动闸74，转动闸74带动转动轴72和弹力发条76进行转动，从而使转动轴72上套接的敲击轮73对支撑板7进行振动，从而使支撑板7与安装板14之间产生碰撞，加强对安装板14中的导管的震荡效果，同时弹力发条76逐渐收紧，当弹力发条76收紧至一定程度后，松开转动阀，转动阀和转动轴72在弹力发条76的作用下逐渐进行回旋，从而有效地延长敲击轮73对支撑板7敲打的时间，加速试管4中试剂之间反应的进度。

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (6)

1.一种用于细胞检测的试剂盒，其特征在于：包括盒体(1)、限位盖(2)、密封盖(3)和试管(4)；所述试剂盒的细胞检测方法包括以下步骤：

S1：提取待检测单元新鲜细胞组织，并将细胞组织与生理盐水按照1:10的比例进行均匀震荡稀释，稀释完成后提取稀释液上清液中细胞组织与培养基一同接种于试剂盒中的多个试管(4)内，并将试剂盒置于培养箱中，于箱温36.5℃-37.5℃下进行24h细胞培养；

S2：向培养完成后的多个试剂盒试管(4)中各自添加10微升不同浓度的待检测物质，添加完毕后对试管进行均匀震荡3-5min，使细胞组织与待检测物质之间均匀混合，并向试管中补充足够的培养基，添加完毕后将试管重新置于培养箱中，按照细胞种类进行0.5-1h培养；

S3：使用胶头吸管提取10微升CCK-8溶液，并将胶头吸管插入试管(4)中进行试剂添加，添加时防止试剂沾壁，添加完毕后对试管(4)中混合溶液进行低频多次震荡，使试剂与细胞产物之间进行均匀混合，并将试剂盒重新置于培养箱中进行1-2h培养，加强显色反应；

S4：将S3中培养完毕后的试剂从培养箱中取出，并将试剂置于酶标仪中进行检测，通过针对450mm处的吸光度进行精确检测，并记录数据，检测完成后将多个试管(4)数据之间进行比对，并根据公式进行细胞存活率计算，从而检测出细胞毒性；

所述盒体(1)与限位盖(2)、密封盖(3)均通过铰接杆铰接且限位盖(2)处于密封盖(3)和盒体(1)之间；所述限位盖(2)靠近盒体(1)一侧、密封盖(3)靠近限位盖(2)一侧均固连有密封条(11)；所述密封条(11)弹性橡胶材料制成；所述盒体(1)靠近限位盖(2)一侧、限位盖(2)靠近密封盖(3)一侧均开设有密封槽(12)，用于容纳密封条(11)；所述盒体(1)靠近限位盖(2)一侧开设第一凹槽(13)；所述第一凹槽(13)内固连有安装板(14)；所述安装板(14)靠近限位盖(2)一侧表面开设有均匀分布的滑动槽(15)；所述滑动槽(15)内均安装有限位块(16)；初始状态下限位块(16)延伸至滑动槽(15)外设置；所述限位块(16)远离限位盖(2)一侧通过弹簧与滑动槽(15)远离限位盖(2)一侧弹性连接；所述限位块(16)表面均开设有安装孔(17)；所述安装孔(17)用于安装试管(4)；所述限位盖(2)环形设计；所述限位盖(2)环形内壁固连有定位板(21)；所述定位板(21)表面开设有均匀分布的第一通槽(22)；所述第一通槽(22)与限位块(16)一一对应；所述第一通槽(22)阶梯形设计；所述第一通槽(22)内滑动连接有定位管(23)；所述定位管(23)与第一通槽(22)形状相匹配且定位管(23)与第一通槽(22)阶梯状拐角处通过弹簧弹性连接；所述定位管(23)内部铰接有对称设计的密封板(24)；所述密封板(24)半圆形设计且初始状态下对称设计的两块密封板(24)将定位管(23)阶梯型开口堵塞；所述限位盖(2)侧壁开设有对称设计的第一滑槽(25)；所述第一滑槽(25)内滑动连接有均匀分布的挡板(26)；所述挡板(26)均为透明玻璃材料制成。

2.根据权利要求1所述的一种用于细胞检测的试剂盒，其特征在于：所述限位块(16)内部开设有均匀分布的弧形槽(5)；所述弧形槽(5)于安装孔(17)内开口设置；所述弧形槽(5)内均滑动连接有弧形板(51)；所述弧形板(51)数量为四且均延伸至安装孔(17)内设置；所述弧形板(51)于安装孔(17)内相互组合成圆弧形；所述弧形板(51)与弧形槽(5)远离安装孔(17)一侧固连有膨胀囊(52)；所述限位块(16)侧壁开设有第二滑槽(53)；所述滑动槽(15)位于第二滑槽(53)处固连有挤压杆(54)；所述挤压杆(54)延伸至第二滑槽(53)内；所述挤压杆(54)下表面与第二滑槽(53)之间固连有挤压囊(55)；所述挤压囊(55)与膨胀囊(52)通过导管相互导通。

3.根据权利要求1所述的一种用于细胞检测的试剂盒，其特征在于：所述定位管(23)内开设有均匀分布的移动槽(6)；所述移动槽(6)内通过弹簧弹性连接有移动块(61)；所述移动块(61)靠近挡板(26)一侧开设有锥形滴液孔。

4.根据权利要求1所述的一种用于细胞检测的试剂盒，其特征在于：所述第一凹槽(13)位于安装板(14)下方滑动连接有支撑板(7)；所述支撑板(7)与第一凹槽(13)远离限位盖(2)一侧通过均匀分布的弹簧之间弹性连接；所述盒体(1)位于第一凹槽(13)远离限位盖(2)一侧开设有第二凹槽(71)；所述第二凹槽(71)内转动连接有均匀分布的转动轴(72)；所述转动轴(72)上均套接有敲击轮(73)；所述转动轴(72)之间通过皮带相互传动；所述盒体(1)外侧转动连接有转动闸(74)；所述转动闸(74)贯穿盒体(1)并与盒体(1)内的转动轴(72)之间固连；所述盒体(1)一侧开设有第一空腔(75)；所述转动闸(74)贯穿第一空腔(75)；所述转动轴(72)位于第一空腔(75)内固连有弹力发条(76)；所述弹力发条(76)另一端固连于第一空腔(75)侧壁上。

5.根据权利要求4所述的一种用于细胞检测的试剂盒，其特征在于：所述支撑板(7)靠近安装板(14)一侧滑动连接有振动板(8)；所述振动板(8)靠近安装板(14)一侧开设有均匀分布的弹力槽(81)；所述弹力槽(81)内通过弹簧弹性连接有均匀分布的弹力板(82)；所述弹力板(82)靠近安装板(14)一侧表面弧形设计；所述滑动槽(15)底部开设有第二通槽(83)；所述第二通槽(83)贯穿安装板(14)设计；所述第二通槽(83)直径大于弹力槽(81)直径。

6.根据权利要求1所述的一种用于细胞检测的试剂盒，其特征在于：所述盒体(1)位于转动连接有转动闸(74)一侧开设有第三滑槽(9)；所述第三滑槽(9)与振动板(8)处于同一水平面；所述振动板(8)靠近第三滑槽(9)一侧固连有拨动杆(91)；所述拨动杆(91)通过第三滑槽(9)延伸至外界。

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