CN111424111B - 一种萝卜根肿病抗性鉴定的方法 - Google Patents

一种萝卜根肿病抗性鉴定的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111424111B
CN111424111B CN202010484886.7A CN202010484886A CN111424111B CN 111424111 B CN111424111 B CN 111424111B CN 202010484886 A CN202010484886 A CN 202010484886A CN 111424111 B CN111424111 B CN 111424111B
Authority
CN
China
Prior art keywords
clubroot
radish
resistance
rsnbs135c
detected
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010484886.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111424111A (zh
Inventor
柳李旺
孟玥
徐良
王燕
张婉婷
张晓莉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing Laifujia Agricultural Science And Technology Co ltd
Nanjing Agricultural University
Original Assignee
Nanjing Laifujia Agricultural Science And Technology Co ltd
Nanjing Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Laifujia Agricultural Science And Technology Co ltd, Nanjing Agricultural University filed Critical Nanjing Laifujia Agricultural Science And Technology Co ltd
Publication of CN111424111A publication Critical patent/CN111424111A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111424111B publication Critical patent/CN111424111B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • C12Q1/6858—Allele-specific amplification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/13—Plant traits
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种萝卜根肿病抗性鉴定的方法。萝卜根肿病抗性功能标记RsNBS135C,由上游引物RsNBS135C‑F和下游引物RsNBS135C‑R扩增萝卜基因组DNA得到。该标记在萝卜基因组DNA中扩增所得的核苷酸序列于琼脂糖凝胶电泳后呈现特异性带型，能够快速、直接鉴定萝卜种质中目标抗性基因位点，有利于高效可靠地利用抗根肿病目标基因、加快根肿病抗性遗传改良进程。

Description

一种萝卜根肿病抗性鉴定的方法
技术领域
本发明属于蔬菜作物遗传育种领域，涉及一种萝卜根肿病抗性鉴定的方法。
背景技术
萝卜(Raphanus sativus L.)是原产于我国的重要十字花科根菜类蔬菜作物，营养丰富，耐储运、食疗价值高，深受人们喜爱。萝卜在我国栽培历史悠久(贾思勰(北魏)，齐民要术今释[M].中华书局2007)，种植面积广。
根肿病(Clubroot)主要发生在十字花科植物中，是由芸薹根肿菌(Plasmodiophora brassicae)引起的土传病害。病原体侵染感病植株致使根部异常膨大，造成蔬菜产品质量和商业价值下降，严重制约了十字花科作物产业化发展。由于根肿病病原物芸薹根肿菌的强生命力和高变异速度，近年来萝卜产量品质遭受这种土传病害危害的风险剧增。选育高抗品种是防治萝卜根肿病的最有效方法之一。然而，关于萝卜根肿病抗性鉴定评价工作报道较少，尚未有抗性相关基因被分离鉴定。
迄今已分离鉴定到80多个抗病基因(Sekhwal M K et al.Disease resistancegene analogs(RGAs)in plants.International journal of molecular sciences,2015,16(8):19248-19290)。已克隆的功能性抗病基因中，含有核苷酸结合位点(NBS)和富含亮氨酸重复(LRR)结构域的基因是数量最多的一类。NBS结构域因高度保守，被广泛应用于植物抗病基因的分类和识别(Lozano R et al.Identification and distribution of theNBS-LRR gene family in the Cassava genome.BMC genomics,2015,16(1):360.)。LRR结构域是一段亮氨酸重复序列，具有病原菌识别作用并参与蛋白-蛋白之间的相互作用(Martin G B,Bogdanove A J,Sessa G.Understanding the functions of plantdisease resistance proteins[J].Annual review of plant biology,2003,54(1):23-61.)。
随着萝卜全基因组测序工作的完善(Kitashiba et al.Draft sequences of theradish(Raphanus sativus L.)genome.DNA Research,2014,21(5):481-490.)，可以从萝卜全基因组水平进行NBS-LRR类抗病候选基因序列鉴定，使得从抗病候选基因中分离鉴定出根肿病抗性相关基因成为可能。开发萝卜根肿病抗性基因相应功能标记，进而运用标记辅助选择技术可有效提高高抗性品种遗传改良效率。
发明内容
本发明的主要目的在于筛选获得萝卜根肿病抗性基因位点有效功能标记；并高效应用于种质材料根肿病抗性鉴定，以提高抗性选择与抗性遗传改良效率。
本发明的另一目的是提供萝卜根肿病抗性功能标记RsNBS135C的特异性引物。
本发明的又一目的是提供萝卜根肿病抗性功能标记RsNBS135C的特异性引物的应用。
为了实现上述目的，本发明采用了以下技术方案。
萝卜根肿病抗性功能标记RsNBS135C,由上游引物RsNBS135C-F和下游引物RsNBS135C-R扩增萝卜基因组DNA得到；所述的上游引物RsNBS135C-F的核苷酸序列如SEQID NO.1所示,下游引物RsNBS135C-R的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
本发明所述的萝卜根肿病抗性功能标记RsNBS135C在鉴别萝卜根肿病抗性中的应用。
本发明所述的萝卜根肿病抗性功能标记RsNBS135C的特异性引物，上游引物RsNBS135C-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物RsNBS135C-R的核苷酸序列如SEQID NO.2所示。
本发明所述的特异性引物在鉴别萝卜根肿病抗性中的应用。
一种萝卜根肿病抗性鉴定的方法，包含以下步骤：
(1)采用改良的CTAB-氯仿-异戊醇法提取待测材料的嫩叶的基因组DNA；
(2)用本发明所述的特异性引物对步骤(1)提取的基因组DNA进行PCR扩增；
(3)扩增产物进行电泳：3％琼脂糖凝胶电泳检测，140V电泳35min，紫外凝胶成像仪下照相，并观察扩增结果；
(4)判断：扩增结果中若检测到453bp的单条带，则待鉴定萝卜植株为抗根肿病；若检测到421bp的单条带或453bp、421bp双条带，则待鉴定萝卜植株为不抗根肿病；所述的抗根肿病由芸薹根肿病菌4号生理小种所致。
所述的PCR反应体系优选：10μL体系，包括10×PCR Buffer(含Mg2+)1.0μL，dNTPs(10μmol/L)0.2μL，RsNBS135C-F、RsNBS135C-R(10μmol/L)各0.5μL，Taq酶(5U/μL，TaKaRa)0.1μL，模板DNA(10ng/μL)1.0μL，ddH2O补足至10μL，混匀，离心。
所述的PCR扩增程序优选：94℃预变性3min；94℃变性50s，56℃退火50s，72℃延伸30s，35个循环；72℃延伸10min，最后4℃保存。
本发明与现有技术相比较具有以下有益效果：
本发明是基于萝卜根肿病抗性显著差异种质间4号染色体上RsNBS135基因序列编译所开发的基因特异性功能标记；
本发明提供的萝卜根肿病抗性主效位点分子标记在实际应用中检测方式简单便捷，对仪器设备和技术要求较低，扩增产物带型清晰简单，其稳定性和产物分离效果较好；
抗病育种是防治根肿病最经济、最高效的方法。本发明适用于萝卜种质对根肿病4号生理小种抗性鉴定，可利用本发明所述标记提高该抗性基因在抗性品种选育中的利用效率。
附图说明
图1是本发明使用的萝卜根肿病苗期鉴定分级标准。
图2是萝卜根肿病抗性显著差异种质间RsNBS135基因部分碱基序列比对结果。黑框内分别是RsNBS135C的上游引物(RsNBS135C-F)和下游引物(RsNBS135C-R)。
图3是本发明RsNBS135C标记在萝卜根肿病抗性显著差异种质间的PCR扩增，R1～R5泳道：高抗种质，电泳条带大小453bp；S1～S5泳道：高感种质，电泳单条带大小421bp，S3泳道双条带大小分别为453bp与421bp。
图4是本发明RsNBS135C标记应用于55份萝卜种质根肿病抗性鉴定中的PCR扩增结果。
具体实施方式
下面结合实施例和试验对本发明作进一步说明。
本发明实施例中所用的55份萝卜种质资源均来自南京农业大学萝卜遗传育种研究室。
供试的芸薹根肿病菌是由河南省农业科学院园艺所提供的4号生理小种‘XY-2’(原玉香等.河南省大白菜根肿病菌生理小种鉴定[J].河南农业科学,2017,46(7):71-76.)；接种和苗期管理在大棚内进行。
实施例1：萝卜种质根肿病抗性鉴定
萝卜种质种子经消毒、冲洗和催芽后，播于装有蛭石:草炭＝1:1灭菌基质的穴盘中。每份种质播6粒种子，每穴1粒，重复3次，并在受试材料的周围种上保护行防止边际效应。
播种后每穴注射2mL‘XY-2’芸薹根肿菌菌液进行接种(孢子浓度1×107个mL-1)。
接菌40天后，对供试各植株根部的发病情况进行调查鉴定分析，逐一鉴定和分级。
参照如图1中所示萝卜根肿病苗期鉴定分级标准：0级，各根系正常生长，无瘿瘤肿块；1级，主根不膨大，须根上有较小瘿瘤鼓起；3级，主根膨大，瘿瘤直径小于茎基部2倍；5级，主根膨大，瘿瘤直径在茎基部的2到4倍之间；7级，主根或须根瘿瘤聚集，异常膨大，瘿瘤直径大于茎基部的4倍。
计算各品种每个重复的病情指数(DI)。
Figure BDA0002518778850000041
注：Ai——各病级株数；i＝0,1,3,5,7；M——调查总株数。最后根据表1抗性评价标准判断种质对根肿病的抗性。
表1萝卜苗期的根肿病抗性评价标准
Figure BDA0002518778850000042
萝卜苗期的根肿病抗性评价结果如表2所示。
实施例2：基于RsNBS135基因的萝卜根肿病抗性标记开发与应用
从萝卜基因组数据库(http://radish.kazusa.or.or.jp/)下载萝卜全基因组核苷酸序列、已注释的CDS序列和氨基酸序列。根据NBS蛋白结构域(NB-ACR，PF00931)(http://pfam.xfam.org/family/PF00931)使用马尔可夫模型(HMM，Hidden MarkovModel)搜索萝卜基因组蛋白序列，E-value设定为0.01。所有序列均提交到Pfam、NCBI和SMART验证序列可靠性，去除不含NBS结构域和不完整的序列后，鉴定到的188个含NBS结构的抗病候选基因分别命名为RsNBS001-RsNBS188。通过根肿病抗感种质的序列差异分析TIR-NBS-LRR类基因RsNBS135与根肿病(4号生理小种)抗性紧密关联。使用RT-qPCR实验对RsNBS基因在不同抗、感萝卜材料中的表达情况进行分析，结果表明RsNBS135基因可能在萝卜抗根肿病(4号生理小种)机制防御信号途径中起重要作用。
因RsNBS135 gDNA较长，利用Primer Premier 5.0软件工具设计出如下所示的3对引物，便于分段克隆：1F-1R；2F-2R；3F-3R。1F:5’-AGCATTCAACTTTAGGCACA-3’，1R:5’-CTTCCAGGACCAAACCAG-3’(58℃)；2F:5’-TTTAGGAGTTGCGCCAGAC-3’，2R:5’-GCATCCCGTGAGATTCAG-3’(52℃)；3F:5’-TTGGAAATGTTCTCAGTC-3’，3R:5’-GTCATCATGTGGAAAAGTA-3’(56℃)。
采用改良的CTAB-氯仿-异戊醇法(Liu et al.Inheritance and fine mappingof fertility restoration for cytoplasmic male sterility in Gossypium hirsutumL.Theoretical and Applied Genetics,2003,106(3):461-469.)提取实施例1中已经过抗性鉴定的55份种质的叶片DNA。各选择5份高抗(DI≤10)和高感(DI≥50)种质材料(高抗种质：R1～R5，高感种质：S1～S5)，采用上述3对引物进行分离RsNBS135基因的gDNA序列。
序列测序结果使用DNAMAN进行拼接并进行NCBI基因组数据库中序列比对，确认为RsNBS135基因。
序列分析表明根肿病抗性显著差异的种质间在RsNBS135第一内含子和第三内含子处分别有9处和3处InDel位点以及在CDS部分有72处SNP位点，部分存在显著规律性序列差异，推测RsNBS135与根肿病抗性相关；序列对比分析表明RsNBS135基因与白菜中根肿病抗性基因CRa高度同源。
根据根肿病抗性显著差异种质间的序列差异，利用Primer Premier 5.0软件工具，在图2所示序列InDel差异区域设计RsNBS135C-F/-R引物，引物碱基序列如下：
RsNBS135C-F：5’-TGTGGGAAGGAAATAAAG-3’(SEQ ID NO.1)
RsNBS135C-R：5’-CATTCCCAGAAGAAGATG-3’(SEQ ID NO.2)
以高抗种质R1～R5和高感种质S1～S5为材料，利用引物RsNBS135C-F/-R进行PCR扩增，根据琼脂糖凝胶电泳检测结果建立根肿病抗性标记分析体系(图3)。
以实施例1中所述提取的55份种质的基因组DNA为模板，利用标记引物RsNBS135C-F/-R，进行功能标记分析和抗性鉴定。
反应体系总体积10μL，包括10×PCR Buffer(含Mg2+)1.0μL，dNTPs(10μmol/L)0.2μL，RsNBS135C-F、RsNBS135C-R(10μmol/L)各0.5μL，Taq酶(5U/μL，TaKaRa)0.2μL，模板DNA(10ng/μL)1.0μL，ddH2O补齐10μL，混匀，离心。
扩增反应程序为94℃预变性3min；94℃变性50s，56℃退火50s，72℃延伸30s，35个循环；72℃延伸10min，产物4℃保存。
3％琼脂糖凝胶电泳检测，140V电泳35min，紫外凝胶成像仪成像。
图3结果表明标记RsNBS135C，在高抗种质R1～R5中扩增出453bp单条带，高感种质S1、S2、S4、S5中扩增出421bp单条带，S3扩出453bp、421bp双条带。
表2结果表明，55份种质中45份的标记分析结果与苗期鉴定结果相一致，因此可以认为RsNBS135为萝卜根肿病(4号生理小种)抗性基因主效位点主效基因；RsNBS135C为萝卜根肿病抗性功能标记。
表2 55份萝卜种质根肿病抗性评定和标记分析结果
Figure BDA0002518778850000061
Figure BDA0002518778850000071
标记分析结果和表型符合率达81.82％。但有10份种质的抗性表型鉴定与分子标记分析结果不一致。可能因为这些材料的根肿病抗性可能不受InDel标记内的基因RsNBS135位点控制，而是受基因组范围内的其他位点所控制。
以上发明实施例结果表明RsNBS135C标记扩增效率高且条带清晰，可以简单、高效地从不同的萝卜种质中鉴定材料是否携有根肿病抗性。
序列表
<110> 南京农业大学
南京莱福佳农业科技有限公司
<120> 一种萝卜根肿病抗性鉴定的方法
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
tgtgggaagg aaataaag 18
<210> 2
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
cattcccaga agaagatg 18

Claims (4)

1.萝卜根肿病抗性功能标记RsNBS135C的特异性引物在鉴别萝卜根肿病抗性中的应用，其特征在于所述的特异性引物的上游引物RsNBS135C-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示， 下游引物RsNBS135C-R的核苷酸序列如SEQ ID NO. 2所示；扩增结果中若检测到453bp的单条带，则待鉴定萝卜植株为抗根肿病；若检测到421bp的单条带或453bp、421bp双条带，则待鉴定萝卜植株为不抗根肿病；所述的根肿病由芸薹根肿病菌4号生理小种所致。
2.一种萝卜根肿病抗性鉴定的方法，其特征在于包含以下步骤：
（1）提取萝卜待测材料的嫩叶的基因组DNA；
（2）用权利要求1中所述的特异性引物对步骤（1）提取的基因组DNA进行PCR扩增；
（3）扩增产物进行电泳：3%琼脂糖凝胶电泳检测，140V电泳35min，紫外凝胶成像仪下照相，并观察扩增结果；
（4）判断：扩增结果中若检测到453bp的单条带，则待鉴定萝卜植株为抗根肿病；若检测到421bp的单条带或453bp、421bp双条带，则待鉴定萝卜植株为不抗根肿病；所述的根肿病由芸薹根肿病菌4号生理小种所致。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的PCR的反应体系：10μL体系，包括含Mg2 +的10×PCR Buffer 1.0μL，10μmol/L的 dNTPs 0.2μL，10μmol/L的 RsNBS135C-F、RsNBS135C-R各0.5μL，5U/μL 的Taq酶 0.1μL，10ng/μL模板DNA 1.0μL，ddH2O补足至10μL，混匀，离心。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的PCR的扩增程序为：94℃预变性3min；94℃变性50s，56℃退火50s，72℃延伸30s， 35个循环；72℃延伸10min，最后4℃保存。
CN202010484886.7A 2020-02-19 2020-06-01 一种萝卜根肿病抗性鉴定的方法 Active CN111424111B (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2020101015654 2020-02-19
CN202010101565 2020-02-19

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111424111A CN111424111A (zh) 2020-07-17
CN111424111B true CN111424111B (zh) 2022-07-19

Family

ID=71559033

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010484886.7A Active CN111424111B (zh) 2020-02-19 2020-06-01 一种萝卜根肿病抗性鉴定的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111424111B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113201596B (zh) * 2021-01-13 2022-09-16 湖北省农业科学院经济作物研究所 一种十字花科植物抗根肿病基因CRb鉴定的InDel分子标记引物及应用
CN113186329B (zh) * 2021-04-20 2023-03-24 湖北省农业科学院经济作物研究所 一种鉴定萝卜抗根肿病的InDel分子标记及其开发方法和应用
CN113234846B (zh) * 2021-05-09 2022-02-01 湖北省农业科学院经济作物研究所 一种萝卜抗根肿病的分子标记及其应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020066106A (ko) * 2001-02-09 2002-08-14 대한민국(충남대학교) 무사마귀병 내성 식물의 효과적 선발을 위한 유전자 마커,프라이머 키트 및 무사마귀병 내성 식물의 선발 방법
KR20050087928A (ko) * 2004-02-27 2005-09-01 충남대학교산학협력단 무사마귀병 저항성 유전자에 대한 ｄｎａ 표지
JP5784194B1 (ja) * 2014-07-18 2015-09-24 みかど協和株式会社 根こぶ病抵抗性を有するブロッコリー個体の識別方法と、根こぶ病抵抗性ブロッコリーの育種方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101095220B1 (ko) * 2008-12-15 2011-12-20 주식회사 농우바이오 배추 뿌리혹병 저항성 연관 분자표지 및 이의 용도
CN106521004A (zh) * 2016-12-26 2017-03-22 山东省农作物种质资源中心 与萝卜核雄性不育基因连锁的Indel标记及其应用
CN108588261B (zh) * 2018-05-04 2020-09-29 北京市农林科学院 一种鉴定位于萝卜R02染色体上的晚抽薹QTL的InDel引物及其应用
CN109280716B (zh) * 2018-10-12 2021-05-07 湖北省农业科学院经济作物研究所 一种与萝卜抗根肿病qtl连锁的ssr分子标记及应用
CN110229924B (zh) * 2019-05-22 2022-05-20 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 一种鉴定萝卜肉质根紫皮性状的特异分子标记

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20020066106A (ko) * 2001-02-09 2002-08-14 대한민국(충남대학교) 무사마귀병 내성 식물의 효과적 선발을 위한 유전자 마커,프라이머 키트 및 무사마귀병 내성 식물의 선발 방법
KR20050087928A (ko) * 2004-02-27 2005-09-01 충남대학교산학협력단 무사마귀병 저항성 유전자에 대한 ｄｎａ 표지
JP5784194B1 (ja) * 2014-07-18 2015-09-24 みかど協和株式会社 根こぶ病抵抗性を有するブロッコリー個体の識別方法と、根こぶ病抵抗性ブロッコリーの育種方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN111424111A (zh) 2020-07-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10415101B2 (en) Methods for producing canola plants with clubroot resistance and compositions thereof
CN111424111B (zh) 一种萝卜根肿病抗性鉴定的方法
CN101801175B (zh) 鉴定大豆中的大豆蚜虫抗性数量性状基因座的方法及其组合物
US11219174B2 (en) Methods for producing corn plants with northern leaf blight resistance and compositions thereof
CN110747288A (zh) 水稻大粒基因功能标记及应用
CN106811462B (zh) 与番茄抗灰叶斑病基因Sm连锁的Indel标记及其扩增引物与应用
Guo et al. Association of molecular markers with cold tolerance and green period in zoysiagrass (Zoysia Willd.)
CN109688805B (zh) 产生灰叶斑病抗性玉蜀黍的方法
US20230068022A1 (en) Methods and compositions for producing corn plants with resistance to late wilt
CN108504772B (zh) 水稻早衰基因的分子标记及应用
EP2486155B1 (en) Methods of quantifying target organisms and creating reniform resistant cotton plants
CN106661630A (zh) 用于鉴定和选择对北方叶枯病具有抗性的玉米植株的组合物和方法
CN110358861B (zh) 与水稻广谱高抗白叶枯病基因Xa45(t)紧密连锁分子标记R13I14
Wei et al. Relationships of Aegilops tauschii revealed by DNA fingerprints: the evidence for agriculture exchange between China and the West
CN110468229B (zh) 水稻广谱高抗白叶枯病基因Xa45(t)的共分离分子标记Hxjy-1
CN109825604B (zh) 与桃抗蚜性状紧密连锁的分子标记，用于检测桃抗蚜性状的引物、试剂盒、方法及其应用
CN113278723B (zh) 合成芥菜中导入的白菜基因组片段或遗传多样性分析的组合物及应用
CN110358862B (zh) 与水稻广谱高抗白叶枯病基因Xa45(t)紧密连锁的分子标记Hxjy-14
Ananga et al. RAPD markers associated with resistance to blackleg disease in Brassica species
CN107699630B (zh) 与小麦抗病基因Pm21连锁的分子标记及其在育种上的应用
CN109722487B (zh) 抗ppo抑制剂类除草剂反枝苋的检测方法及试剂盒
KANYANGE SCREENING OF SUPA AROMATIC RICE (ORYZA SATIVA L.) F2 POPULATION FOR BLAST (MAGNAPORTHE ORYZAE) RESISTANCE AT IRRI-ESA BURUNDI
US10059999B2 (en) Molecular markers associated with soybean tolerance to low iron growth conditions
RU2524135C2 (ru) Способ идентификации стерильности/фертильности подсолнечника
CN115247218A (zh) 用于筛选无连锁累赘的抗斑萎病烟草植物的分子标记及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant