CN111358755A - 一种提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法 - Google Patents
一种提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111358755A CN111358755A CN202010384964.6A CN202010384964A CN111358755A CN 111358755 A CN111358755 A CN 111358755A CN 202010384964 A CN202010384964 A CN 202010384964A CN 111358755 A CN111358755 A CN 111358755A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- emulsion
- probiotics
- preparation
- survival rate
- oil phase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 title claims abstract description 98
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 title claims abstract description 65
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 title claims abstract description 65
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 title claims abstract description 21
- 239000002131 composite material Substances 0.000 title claims description 24
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 claims abstract description 40
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims abstract description 35
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 34
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 25
- NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N Sorbitan monooleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O NWGKJDSIEKMTRX-AAZCQSIUSA-N 0.000 claims abstract description 20
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 235000008524 evening primrose extract Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- 229940089020 evening primrose oil Drugs 0.000 claims abstract description 18
- 239000010475 evening primrose oil Substances 0.000 claims abstract description 18
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 239000001116 FEMA 4028 Substances 0.000 claims description 21
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 claims description 21
- 235000011175 beta-cyclodextrine Nutrition 0.000 claims description 21
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 claims description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 11
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 8
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 8
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 7
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 claims description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 6
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 claims description 5
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 14
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 13
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 12
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 6
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 5
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 5
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 5
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 5
- 240000002605 Lactobacillus helveticus Species 0.000 description 4
- 235000013967 Lactobacillus helveticus Nutrition 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 4
- 229940054346 lactobacillus helveticus Drugs 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 101710178392 Angiotensin-converting enzyme inhibitory peptide Proteins 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 241000235342 Saccharomycetes Species 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007236 host immunity Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000007413 intestinal health Effects 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
- A61K9/113—Multiple emulsions, e.g. oil-in-water-in-oil
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/03—Organic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/10—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing emulsifiers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/30—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols, e.g. xylitol; containing starch hydrolysates, e.g. dextrin
- A23L29/37—Sugar alcohols
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
- A61K47/40—Cyclodextrins; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/44—Oils, fats or waxes according to two or more groups of A61K47/02-A61K47/42; Natural or modified natural oils, fats or waxes, e.g. castor oil, polyethoxylated castor oil, montan wax, lignite, shellac, rosin, beeswax or lanolin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明属于益生菌制备技术领域，涉及一种提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法。将司盘‑80加入到月见草油中搅拌均匀，制得油相后加入洗涤后的益生菌溶液，均质得到A；环糊精水溶液与A混合后，得到复合乳液。本发明采用双层乳化体系，首先高内相加工工艺可以保证内层水相益生菌的高含量，其次月见草油相的抗氧化活性可以避免益生菌在储藏和服用后被氧化破坏，另外外层β‑环糊精形成的纳米级皮克林乳液壁层具有非常稳定的保护作用，可以保护益生菌在经过胃和小肠不受破坏，提高益生菌的存活率，使益生菌顺利抵达大肠发挥作用。本发明可以用于新型益生菌类食品、药品及保健品的开发。
Description
技术领域
本发明属于益生菌制备技术领域，涉及一种提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法。
背景技术
益生菌是指对宿主有益的活性微生物，益生菌通过调节肠道内菌群平衡或通过调节宿主粘膜与免疫系统功能，从而发挥促进营养物质的消化吸收、提高宿主免疫力和保持肠道健康的作用。常见的益生菌主要有酵母菌、乳杆菌、益生芽孢菌、放线菌等。其中，瑞士乳杆菌为乳杆菌的一种，是一种呈长杆状、无鞭毛、无芽孢、菌落乳白色、边缘整齐、兼性厌氧的革兰氏阳性细菌。与其它益生菌相比，瑞士乳杆菌具有更强的蛋白水解活性，发酵的乳制品中多肽含量更高，具有产生生物活性肽的潜力。已有研究证实，瑞士乳杆菌水解乳蛋白能产生血管紧张素转化酶抑制肽,具有降低血压的作用。然而，尽管益生菌具有各种对人类健康有益的功能，但益生菌在消化过程中到达肠道的低存活率是我们在利用益生菌道路上的一大阻碍。因此，找到合适的方法来提高益生菌的存活率就显得尤为重要。
发明内容
本发明针对传统益生菌在消化过程中到达肠道的低存活率的问题提出一种新型的提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法。
为了达到上述目的，本发明是采用下述的技术方案实现的：
一种提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法，将司盘-80加入到月见草油中搅拌均匀，制得油相后加入洗涤后的益生菌溶液，均质得到A；环糊精水溶液与A混合后，得到复合乳液。
作为优选，提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法,包括如下步骤：
（1）乳液油相制备：将司盘-80加入到月见草油中搅拌均匀，得到油相；
（2）初级乳液制备：将洗涤后的益生菌作为内相溶液(W1)分散到由月见草油和亲脂乳化剂司盘-80组成的油相(O)中，得到初级乳液；
（3）β-环糊精水溶液制备：β-环糊精加入去离子水中，水浴磁力搅拌处理后冷却至室温，得到β-环糊精水溶液作为外相溶液（W2）；
（4）复合乳液制备：将初级乳液加入β-环糊精水溶液中均质处理，得到复合乳液产品。
作为优选，步骤（1）中司盘-80体积百分比为2-10（v/v%）。
作为优选，步骤（2）制备的初级乳液W1/O中油相所占的体积百分比为50-90%，搅拌速率为200-400rpm,搅拌时间为5-8min，均质处理的搅拌速率为4000-6000rpm，均质时间为3-5min，乳化15-20s，间歇10-15s。
作为优选，步骤（3）中β-环糊精水溶液中溶质的质量浓度为2.5-5.0%，加热处理温度为70-80℃，处理时间为10-15min。
作为优选，步骤（4）中初级乳液与环糊精溶液的体积比为3:2，均质机速率为6000-8000rpm，时间为3-5min，乳化15-20s，间歇10-15s。
与现有技术相比，本发明的优点和积极效果在于：
1.本发明制得的皮克林乳液是一种由纳米级环糊精固体粒子代替传统乳化剂稳定的新型W/O/W双层乳化高内相乳液体系，高含量益生菌水溶液在内层，月见草油在中层，纳米级环糊精固体外壁在月见草油和外层水相之间，乳液无泡、无毒，益生菌含量高，稳定性大大提高。
2. 本发明采用双层乳化体系，首先高内相加工工艺可以保证内层水相益生菌的高含量，其次月见草油相的抗氧化活性可以避免益生菌在储藏和服用后被氧化破坏，另外外层β-环糊精形成的纳米级皮克林乳液壁层具有非常稳定的保护作用，可以保护益生菌在经过胃和小肠不受破坏，提高益生菌的存活率，使益生菌顺利抵达大肠发挥作用。
3. 本发明使用β-环糊精作为次级稳定剂制备的含有益生菌的复合型皮克林乳液中，在室温存放3h条件下，益生菌活菌数几乎没有下降，而作为对照使用吐温-80制备的普通乳液中益生菌活菌数下降约30%。本发明可以用于新型益生菌类食品、药品及保健品的开发。
附图说明
图1为乳液的扫描电镜图，由图中可以看出本发明形成了稳定的皮克林颗粒，颗粒直径10μm左右，大量纳米级环糊精形成乳液外壳，使乳化颗粒具有很好的稳定性。
具体实施方式
为了能够更清楚地理解本发明的上述目的、特征和优点，下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是，本发明还可以采用不同于在此描述的其他方式来实施，因此，本发明并不限于下面公开说明书的具体实施例的限制。
实施例1
油相的制备：将体积比2%的司盘-80作为初级乳化剂，加入到月见草油中，搅拌均匀后得到初级乳液的油相；
W1/O初级乳液的制备：将洗涤后的益生菌悬液作为内相溶液(W1)分散到由月见草油和亲脂乳化剂司盘-80组成的油相(O)中，油相所占的体积百分比为50%，混合物在200rpm条件下磁力搅拌5min，然后再在4000rpm条件下使用均质机均质3min，乳化15s，间歇10s，制备出初级乳液W1/O；
β-环糊精水溶液的制备：准确称取2.5gβ-环糊精，加入到97.5g去离子水中，使β-环糊精的质量浓度为2.5%，在70℃下水浴磁力搅拌处理持续10min，冷却至室温；
W1/O/W2复合乳液的制备：将初级乳液W1/O加入到β-环糊精溶液中，初级乳液与环糊精溶液的体积比为3:2，在6000rpm条件下使用均质机均质3min，乳化15s，间歇10s，制备得到包埋有益生菌的皮克林复合乳液。
实施例2
油相的制备：将体积比4%的司盘-80作为初级乳化剂，加入到月见草油中，搅拌均匀后得到初级乳液的油相；
W1/O初级乳液的制备：将洗涤后的益生菌悬液作为内相溶液(W1)分散到由月见草油和亲脂乳化剂司盘-80组成的油相(O)中，油相所占的体积百分比为60%，混合物在300rpm条件下磁力搅拌6min，然后再在4500rpm条件下使用均质机均质4min，乳化15s，间歇10s，制备出初级乳液W1/O；
β-环糊精水溶液的制备：准确称取3gβ-环糊精，加入到97g去离子水中，使β-环糊精的质量浓度为3%，在70℃下水浴磁力搅拌处理持续12min，冷却至室温；
W1/O/W2复合乳液的制备：将初级乳液W1/O加入到β-环糊精溶液中，初级乳液与环糊精溶液的体积比为3:2，在7000rpm条件下使用均质机均质4min，乳化15s，间歇10s，制备得到包埋有益生菌的皮克林复合乳液。
实施例3
油相的制备：将体积比6%的司盘-80作为初级乳化剂，加入到月见草油中，搅拌均匀后得到初级乳液的油相；
W1/O初级乳液的制备：将洗涤后的益生菌悬液作为内相溶液(W1)分散到由月见草油和亲脂乳化剂司盘-80组成的油相(O)中，油相所占的体积百分比为70%，混合物在300rpm条件下磁力搅拌7min，然后再在5000rpm条件下使用均质机均质4min，乳化15s，间歇10s，制备出初级乳液W1/O；
β-环糊精水溶液的制备：准确称取3.5gβ-环糊精，加入到96.5g去离子水中，使β-环糊精的质量浓度为3.5%，在70℃下水浴磁力搅拌处理持续13min，冷却至室温；
W1/O/W2复合乳液的制备：将初级乳液W1/O加入到β-环糊精溶液中，初级乳液与环糊精溶液的体积比为3:2，在7000rpm条件下使用均质机均质4min，乳化20s，间歇15s，制备得到包埋有益生菌的皮克林复合乳液。
实施例4
油相的制备：将体积比8%的司盘-80作为初级乳化剂，加入到月见草油中，搅拌均匀后得到初级乳液的油相；
W1/O初级乳液的制备：将洗涤后的益生菌悬液作为内相溶液(W1)分散到由月见草油和亲脂乳化剂司盘-80组成的油相(O)中，油相所占的体积百分比为80%，混合物在300rpm条件下磁力搅拌7min，然后再在5500rpm条件下使用均质机均质4min，乳化20s，间歇15s，制备出初级乳液W1/O；
β-环糊精水溶液的制备：准确称取4gβ-环糊精，加入到96g去离子水中，使β-环糊精的质量浓度为4%，在70℃下水浴磁力搅拌处理持续14min，冷却至室温；
W1/O/W2复合乳液的制备：将初级乳液W1/O加入到β-环糊精溶液中，初级乳液与环糊精溶液的体积比为3:2，在7500rpm条件下使用均质机均质4min，乳化20s，间歇15s，制备得到包埋有益生菌的皮克林复合乳液。
实施例5
油相的制备：将体积比10%的司盘-80作为初级乳化剂，加入到月见草油中，搅拌均匀后得到初级乳液的油相；
W1/O初级乳液的制备：将洗涤后的细菌作为内相溶液(W1)分散到由月见草油和亲脂乳化剂司盘-80组成的油相(O)中，油相所占的体积百分比为90%，混合物在400rpm条件下磁力搅拌8min，然后再在6000rpm条件下使用均质机均质5min，乳化20s，间歇15s，制备出初级乳液W1/O；
β-环糊精水溶液的制备：准确称取5gβ-环糊精，加入到95g去离子水中，使β-环糊精的质量浓度为5%，在70℃下水浴磁力搅拌处理持续15min，冷却至室温；
W1/O/W2复合乳液的制备：将初级乳液W1/O加入到β-环糊精溶液中，初级乳液与环糊精溶液的体积比为3:2，在8000rpm条件下使用均质机均质5min，乳化20s，间歇15s，制备得到包埋有益生菌的皮克林复合乳液。
对照例
油相的制备：将体积比10%的司盘-80作为初级乳化剂，加入到月见草油中，搅拌均匀后得到初级乳液的油相；
W1/O初级乳液的制备：将洗涤后的细菌作为内相溶液(W1)分散到由月见草油和亲脂乳化剂司盘-80组成的油相(O)中，油水比为7:3，混合物在300rpm条件下磁力搅拌5min，然后再在6000rpm条件下使用均质机均质4min，乳化15s，间歇15s，制备出初级乳液W1/O；
吐温-80溶液的制备：准确量取吐温-80溶液5g，加入到100mL去离子水中，室温条件下混匀；
W1/O/W2复合乳液的制备：将一定量初级乳液W1/O加入到吐温-80溶液中，初级乳液占总体积的60%，在8000rpm条件下使用均质机均质4min，乳化15s，间歇1s，制备得到两种不同的包埋有益生菌的复合乳液。
益生菌生存能力测试
将含有包埋细胞的双乳液在4000rpm下离心5min，将包裹细胞释放。将1毫升破碎乳剂加入到9毫升0.2M磷酸盐缓冲液中。在厌氧培养瓶中37℃培养48小时后，用MRS琼脂平板计数法测定活细胞数。
测试结果如表1所示。
表1储存过程中益生菌的存活能力变化
双乳状液中初始细胞数为8.27 log CFU/mL。从表1可以看出采用本方法制备的皮克林乳液，在室温存放3d条件下，益生菌活菌数只有轻微下降，而使用吐温-80制备的对照乳液中益生菌活菌数由8.27±0.03 log CFU/mL下降到5.75±0.23 log CFU/mL。用本方法制备的皮克林双乳液包封的益生菌的存活率明显优于对照例双乳液。
体外模拟消化实验
人工胃液的配制：质量分数9-10%的盐酸16.4mL，加水稀释,使pH值分别达到1、1.5、2；然后在每100 mL液体中加1g胃蛋白酶,充分溶解后用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌后待用。
人工肠液的配制：磷酸二氢钾6.8g,加500mL蒸馏水溶解，用质量分数0.4%的氢氧化钠溶液调pH值至6.8，加水稀释至1000mL，每100mL液体中加人1g胰蛋白酶，充分溶解后用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌后待用。
人工胃液耐受性试验
将制备的含有益生菌的皮克林乳液和对照乳液在MRS液体培养基中活化2次，按10%接种量,接种于不同pH值(1、1.5、2)的人工胃液中，混匀，37℃培养，分别于0.5、1.5、2.5h取样,以无菌水进行10倍系列稀释，从适当梯度的稀释液中，吸取20μL点种在MRS固体培养基上放置20min，送入37℃培养箱中适当培养后，进行活菌计数。
测试结果如表2所示。
表2 人工胃液耐受性实验中益生菌的存活情况（log CFU/mL）
与对照组相比，在各种不同的pH条件下按实施例3制备的乳液益生菌活菌数都远远大于对照组。随着pH值得升高，对照组和实施例组中的益生菌活菌数都有一定程度的提升，但实验组活菌数仍然远高于对照组。表明在模拟胃液酸性条件下本方法工艺制备的双乳化皮克林乳液相比与对照例，对益生菌起到了更好的保护效果。
人工肠液耐受性试验
将按实施例3制备的含有益生菌的皮克林乳液和对照乳液活化2次，按10%接种量，接种于人工肠液中，混匀，37℃培养，分别于1、2h取样，以无菌水进行10倍系列稀释，从适当梯度的稀释液中，吸取20μL点种在MRS固体培养基上放置20min，送入37℃培养箱中适当培养后，进行活菌计数。
测试结果如表3所示。
表3 人工肠液耐受性实验中益生菌的存活情况（log CFU/mL）
实施例组与对照例组在人工肠液中经过不同时间的作用后，在较短时间点检测到得活菌数均明显高于在较长时间点检测到的活菌数。与模拟胃液实验相比二者活菌数存活率升高，表明益生菌在肠道环境中更易生存。在模拟肠液耐受性实验中，与对照组相比，实施例组益生菌的活菌数仍有很大提高，表明在肠道环境中本方法工艺制备的双乳化皮克林乳液的使用对益生菌起到了很好的保护效果。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例应用于其它领域，但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (6)
1.一种提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法，其特征在于，将司盘-80加入到月见草油中搅拌均匀，制得油相后加入洗涤后的益生菌悬液，均质得到A；环糊精水溶液与A混合后，得到复合乳液。
2.根据权利要求1所述提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）乳液油相制备：将司盘-80加入到月见草油中搅拌均匀，得到油相；
（2）初级乳液制备：将洗涤后的益生菌悬液分散到油相中，搅拌后均质，得到初级乳液；
（3）β-环糊精水溶液制备：β-环糊精加入去离子水中，水浴磁力搅拌后冷却至室温，得到外相溶液；
（4）复合乳液制备：将初级乳液加入外相溶液中均质处理，得到复合乳液产品。
3.根据权利要求2所述提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法，其特征在于，步骤（1）中司盘-80占油相的体积百分比为2-10%。
4.根据权利要求2所述提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法，其特征在于，步骤（2）制备的初级乳液中油相所占的体积百分比为50-90%，搅拌速率为200-400rpm，搅拌时间为5-8min；均质处理的搅拌速率为4000-6000rpm，均质时间为3-5min，乳化15-20s，间歇10-15s。
5.根据权利要求2所述提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法，其特征在于，步骤（3）中外相溶液中溶质的质量浓度为2.5-5.0%，水浴处理温度为70-80℃，处理时间为10-15min。
6.根据权利要求2所述提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法，其特征在于，步骤（4）中初级乳液与外相溶液的体积比为3:2，均质机速率为6000-8000rpm，时间为3-5min，乳化15-20s，间歇10-15s。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010384964.6A CN111358755A (zh) | 2020-05-09 | 2020-05-09 | 一种提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010384964.6A CN111358755A (zh) | 2020-05-09 | 2020-05-09 | 一种提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111358755A true CN111358755A (zh) | 2020-07-03 |
Family
ID=71199903
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010384964.6A Pending CN111358755A (zh) | 2020-05-09 | 2020-05-09 | 一种提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111358755A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113397151A (zh) * | 2021-06-24 | 2021-09-17 | 华南理工大学 | 一种含有鼠李糖乳杆菌活菌的沙拉酱及其制备方法 |
| CN113519822A (zh) * | 2021-06-07 | 2021-10-22 | 齐鲁工业大学 | 一种温度响应型环糊精纳米颗粒皮克林乳液的制备方法 |
| CN114698847A (zh) * | 2022-03-25 | 2022-07-05 | 湖北工业大学 | 一种含益生菌的冻干皮克林乳剂及其制备方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108853021A (zh) * | 2018-08-08 | 2018-11-23 | 华南农业大学 | 一种基于双乳液结构的益生菌液态制剂及其制备方法 |
| CN109288931A (zh) * | 2018-11-16 | 2019-02-01 | 上海松皓生物科技有限公司 | 一种治疗婴幼儿湿疹的组合物，制剂及制备方法和应用 |
-
2020
- 2020-05-09 CN CN202010384964.6A patent/CN111358755A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108853021A (zh) * | 2018-08-08 | 2018-11-23 | 华南农业大学 | 一种基于双乳液结构的益生菌液态制剂及其制备方法 |
| CN109288931A (zh) * | 2018-11-16 | 2019-02-01 | 上海松皓生物科技有限公司 | 一种治疗婴幼儿湿疹的组合物，制剂及制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| PARISA ESLAMI ET AL.: "Encapsulating role of b-cyclodextrin in formation of pickering waterin-oil-in-water (W1/O/W2) double emulsions containing Lactobacillus dellbrueckii", 《FOOD HYDROCOLLOIDS》 * |
| 付冬文等: "食品级 W/O/W双重乳液的稳定性及应用研究进展", 《食品工业科技》 * |
| 南朝君: "《食疗、营养与烹调》", 31 January 2014, 中国医药科技出版社 * |
| 周茂金等: "《心血管药物手册》", 30 October 2013, 中国医药科技出版 * |
| 袁继凤等: "基于β-环糊精稳定的Pickering乳液微观结构与流变性质研究", 《食品与生物技术学报》 * |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113519822A (zh) * | 2021-06-07 | 2021-10-22 | 齐鲁工业大学 | 一种温度响应型环糊精纳米颗粒皮克林乳液的制备方法 |
| CN113519822B (zh) * | 2021-06-07 | 2023-08-08 | 齐鲁工业大学 | 一种温度响应型环糊精纳米颗粒皮克林乳液的制备方法 |
| CN113397151A (zh) * | 2021-06-24 | 2021-09-17 | 华南理工大学 | 一种含有鼠李糖乳杆菌活菌的沙拉酱及其制备方法 |
| CN113397151B (zh) * | 2021-06-24 | 2022-09-20 | 华南理工大学 | 一种含有鼠李糖乳杆菌活菌的沙拉酱及其制备方法 |
| CN114698847A (zh) * | 2022-03-25 | 2022-07-05 | 湖北工业大学 | 一种含益生菌的冻干皮克林乳剂及其制备方法 |
| CN114698847B (zh) * | 2022-03-25 | 2023-08-25 | 湖北工业大学 | 一种含益生菌的冻干皮克林乳剂及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111358755A (zh) | 一种提高益生菌存活率的复合型皮克林乳液制备方法 | |
| CN105567669B (zh) | 益生菌微胶囊制剂及其制备方法 | |
| CN101328470B (zh) | 具有降胆固醇及抑菌能力的鼠李糖乳杆菌grx10及其用途 | |
| CN102056489B (zh) | 新型发酵乳及其应用 | |
| CN101328469B (zh) | 具有酒精性肝损伤保护功能的嗜热链球菌grx02及其用途 | |
| CN114874951B (zh) | 一种新型鼠李糖乳杆菌菌株及其应用 | |
| CN111534435B (zh) | 一种可提高双歧杆菌耐酸性的冻干保护剂及其应用 | |
| Gauffin Cano et al. | Adjuvant effects of Lactobacillus casei added to a renutrition diet in a malnourished mouse model | |
| CN111500483B (zh) | 鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、其益生菌组方及该组方的制备方法和应用 | |
| CN108048349B (zh) | 副干酪乳杆菌n1115包埋菌粉的制备方法及其应用 | |
| CN111635873A (zh) | 一株植物乳杆菌、其微生态制剂及其制备方法和应用 | |
| CN101153316B (zh) | 一种益生菌乳制品中干酪乳杆菌的检测方法 | |
| JP4489315B2 (ja) | 抗ヘリコバクターピロリ抗体を含有する卵黄液を用いた発酵乳の製造方法 | |
| WO2021208966A1 (zh) | 一种含免疫调节肽功能成分的lgg发酵产物的制备方法及其应用 | |
| RU2441907C1 (ru) | Способ приготовления лечебно-профилактического препарата из живых штаммов микроорганизмов лакто- и бифидобактерий "lb-комплекс л" | |
| CN108902982B (zh) | 一种益生菌微胶囊冻干粉及其制备方法 | |
| CN115786175B (zh) | 一株粘膜乳杆菌及其用途 | |
| CN115011517B (zh) | 一种乳剂及其制备方法和在益生菌制剂中的应用 | |
| CN114747769B (zh) | 一种益生菌制品及其制备方法 | |
| CN107034159B (zh) | 一种致病菌拮抗剂及其应用 | |
| CN107083342B (zh) | 一种益生菌共生体、培养方法及应用 | |
| CN111944729B (zh) | 一种耐高温植物乳杆菌菌剂及其制备方法与应用 | |
| CN107043715A (zh) | 一种活性益生菌冻干粉及其制备方法 | |
| CN106318892B (zh) | 一株寡养单胞菌及其应用 | |
| CN105925645A (zh) | 一种活性乳酸菌素的制备方法及其在生物饲料中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20200703 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |