CN111269264A - 用于治疗癌症的尿苷的二氧戊环类似物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了式(I)的化合物，其中，R1是OR11或NR5R5'；R2是H或F；R5是H、C1‑C6烷基、OH、C(＝O)R6、O(C＝O)R6或O(C＝O)OR6；R5'是H或C1‑C6烷基；R6是C1‑C6烷基或C3‑C7环烷基；R13是H、苯基、吡啶基、苄基、吲哚基或萘基，其中，所述苯基、吡啶基、苄基、吲哚基和萘基任选被1、2或3个R22取代；其它变量如权利要求所定义，所述化合物用于治疗癌症和相关的方面。

Description

用于治疗癌症的尿苷的二氧戊环类似物
本申请是2015年8月24日申请的PCT国际申请PCT/EP2015/069370于2017年4月18日进入中国国家阶段的、申请号为201580056640.7且发明名称为“用于治疗癌症的尿苷的二氧戊环类似物”的发明专利申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及用于治疗癌症的曲沙他滨(troxacitabine)的磷前体药物和它们的衍生物，所述癌症尤其是肝癌如肝细胞癌(HCC)和继发性肝癌。本发明进一步涉及包含这些化合物的组合物和组合，以及它们在癌症治疗中的使用方法，所述癌症尤其是肝癌如HCC。
发明背景
原发性肝癌是世界上第六种最常见的癌症，并且是癌症死亡的第二个主要原因。在所有原发性恶性肝癌当中占大约85％的最常见的、并且发病率继续上升的肝癌是肝细胞癌(HCC)，它由变成恶性的肝细胞形成。由肝细胞形成的另一个类型的癌症是肝胚细胞瘤，它是罕有的恶性肿瘤，主要出现在儿童中，并且在所有儿童癌症当中占大约1％，在年龄15岁以下的所有原发性肝癌当中占大约79％。继发性肝癌或肝转移是在身体的其它地方起始、随后蔓延到肝的癌症。继发性肝癌的实例包括许多通常类型的癌症，例如，结肠、直肠、肺和乳腺癌。肝癌还可以由肝内的其它结构形成，例如，胆管、血管和免疫细胞。胆管癌(胆管细胞癌和胆管细胞囊腺癌)占原发性肝癌的大约6％。
尽管手术切除和肝移植是早期HCC的潜在治疗方法，但20％以上的患者最终复发或遇到其它问题，并且大部分HCC诊断在这些治疗的过迟阶段进行。局部治疗，例如，射频消蚀，响应率超过60％，但它们只适合于一定比例的患者，并且并不总是有疗效。至今使用的化学治疗对于HCC的效果非常有限，迄今为止，响应率不超过25％。目前，索拉非尼(sorafenib)是治疗晚期或不可切除的HCC的唯一有效的上市药物，因此，为了降低复发率并且提高总体存活率，还非常需要HCC的其它治疗方法。
已经发现，许多核苷类似物具有抗癌活性，并且它们构成了治疗癌症患者所广泛使用的化学治疗剂的主要类别。被称为抗代谢物的这类药剂包括具有细胞毒性活性的各种嘧啶和嘌呤核苷衍生物。
细胞核苷酸激酶使核苷磷酸化成它们的相应的5'-单磷酸酯，并且进一步转变为它们的二磷酸酯，随后转变为药理学活性的三磷酸酯。已知一些核苷的活性很弱，这是由于它们不能有效地被激酶磷酸化，或者根本不是激酶的底物。在磷酸化顺序中，核苷类似物的第一次磷酸化是速率限制性的磷酸化，而第二和第三次磷酸化对核苷修饰敏感程度更低。核苷单磷酸酯(核苷酸)本身通常在血液中不稳定，并且显示较差的膜渗透性，因此不适合用作药物。由于核苷以及核苷类似物的三磷酸酯的高度不稳定性和差的细胞渗透性，所以，它们不能被视为可能的药物候选物。
曲沙他滨(β-L-二氧戊环胞苷)是细胞毒性的脱氧胞苷类似物，该脱氧胞苷类似物具有非天然的L-构型，针对实体和造血恶性肿瘤显示广泛的体外和体内活性。特别地，已经观察到针对人癌细胞系以及肝细胞、前列腺和肾源的异种移植物的可观的活性(CancerRes.,55,3008-3011,1995)。已经显示的是，曲沙他滨引起通常负责核苷的第一个磷酸化步骤的激酶脱氧胞苷激酶(dCK)的突变，不产生或产生极低水平的曲沙他滨单磷酸酯，由此导致耐受性。
在2008年，曲沙他滨进入急性髓性白血病适应症的III期临床试验，但没有继续注册。曲沙他滨的终止的II期试验包括乳腺癌、结肠直肠癌、胰腺癌、黑素瘤、NSCLC、肾肿瘤、前列腺肿瘤和卵巢肿瘤。通常静脉内输注给予曲沙他滨，由此，与癌症的位点无关，使许多组织暴露于药物。
已经显示，尽管它的亲水性，曲沙他滨通过被动扩散而运输到细胞中，但与其它载体运输的核苷相比，它仅仅非常慢地在癌细胞中积累。
WO2008/030373中公开了在胞嘧啶碱基部分上携带前体药物基团的曲沙他滨的衍生物，并且评价了前体药物的亲脂性和它们的抗肿瘤活性之间的关系。该专利认为，碱基修饰是期望的，以避免具有5'-OH修饰的酯酶困难。
在D-核苷的5'羟基官能团上的氨基磷酸酯前体药物已经成功地应用于抗病毒药物，例如，用于治疗HCV感染的索非布韦(sofosbuvir)。在细胞内将索非布韦前体药物去掩蔽以露出单磷酸酯是一种以特定顺序的、涉及若干水解酶的复杂的多步过程。
氨基磷酸酯前体药物在癌症核苷上的应用还不太成功。Nucana正在研发Acelerin(Nuc-1031)，它是用于治疗胰腺癌的D-核苷吉西他滨的氨基磷酸酯前体药物(结构参见WO2005012327的71页)。然而，即使认为氨基磷酸酯会增强所述化合物的亲脂性和细胞渗透性，Acelarin前体药物还必须以IV输注形式给予，由此使许多健康组织暴露于细胞毒性代谢物。
对于L-核苷的单磷酸酯前体药物(例如，曲沙他滨)的经验甚至更少。WO2008048128公开了少数曲沙他滨单磷酸酯前体药物，包括实施例14的化合物：
Figure BDA0002418896420000031
对于任何所述化合物，在WO2008048128说明书或该学术文献的其它地方，都没有公开癌症或其它生物活性。也没有这种前体药物进入临床试验的报告。然而，WO2008048128的发明人已经公开了与D-核苷吉西他滨宽泛地相似的前体药物(Baraniak等人，Biorg MedChem 2014，2133-2040)，其中，所述前体药物方法似乎在某些组织中起作用，以及D-核苷叠氮胸苷(azidothymidine)(Kulic等人，Antivir Chem Chemother 2011，21(3)143-150)，其中，所述前体药物比相应的母体核苷的效果低2-20倍。Kulic推测，叠氮胸苷前体药物倾向于首先对核苷进行脱磷酸化，然后磷酸化成为活性的三磷酸酯种类。由于前体药物方法对吉西他滨(由于它的取代的2'官能团，其类似于RNA)起作用，而对叠氮胸苷(它是2'-脱氧的，由此类似于DNA)不起作用，所以WO2008048128假设曲沙他滨的(其是DNA类似物，虽然是L-DNA)前体药物很可能是非活性的，类似于叠氮胸苷前体药物。
Balzarini等人在Biochem Biophys Res Comm 225，363-369(1996)中描述了CF1109的HIV和HBV活性，其是L-核苷拉夫米定/3TC的氨基磷酸酯前体药物，具有下列结构∶
Figure BDA0002418896420000032
Balzarini认为，这种氨基磷酸酯前体药物针对HIV的活性比其母体核苷3TC低～250倍，但是，这种前体药物“在Hep G2.2.15细胞中针对HBV几乎同样有效”。换句话说，加入这种大的氨基磷酸甲酯前体药物基团不会在肝细胞系中提高抗病毒效能。Balzarini没有检验该前体药物在磷酸化成为活性三磷酸酯之前是否代谢为3TC。
本发明提供了适合于口服给药的曲沙他滨的磷前体药物(phosphorus prodrug)，尤其是靶向肝的前体药物，例如氨基磷酸酯。这些前体药物具有改善的细胞渗透性的优点，这是由于，与曲沙他滨本身相比，它们的亲脂性提高，并且由于避开速率限制的第一个磷酸化步骤，可以更有效地形成活性的三磷酸酯。进一步地，本发明的化合物在肝脏中主要代谢成为活性的三磷酸酯，从而在靶器官中提供高浓度的活性化合物，同时在其它器官中保持由毒性引起的副作用的最小化。
发明描述
一方面，本发明提供了由式(I)表示的化合物或其药学上可接受的盐和/或溶剂化物：
Figure BDA0002418896420000041
其中：
R1是OR11或NR5R5’；
R2是H或F；
R5是H、C1-C6烷基、OH、C(＝O)R6、O(C＝O)R6或O(C＝O)OR6；
R5'是H或C1-C6烷基；
R6是C1-C22烷基或C3-C7环烷基；
R11是H或C1-C6烷基；
R13是H、苯基、吡啶基、苄基、吲哚基或萘基，其中，所述苯基、吡啶基、苄基、吲哚基和萘基任选被1、2或3个R22取代；
R15是H、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基C1-C3烷基、苯基、苄基或吲哚基；
R15'是H或C1-C6烷基；或
R15和R15'与它们连接的碳原子一起形成C3-C7亚环烷基基团，其中，每个C1-C6烷基任选被选自卤素、OR18和SR18的基团取代，每个C3-C7环烷基、C3-C7亚环烷基、苯基和苄基任选被一或两个独立地选自C1-C3烷基、卤素和OR18的基团取代；
R16是H、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基C1-C3烷基、苄基或苯基，其中的任何一个基团任选被1、2或3个各自独立地选自卤素、OR18和N(R18)2的基团取代；
每个R18独立地是H、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基或C3-C7环烷基；
每个R22独立地选自卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、苯基、羟基C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6烷基羰基、C3-C6环烷基羰基、羧基C1-C6烷基、羟基、氨基CN和NO2，或与相邻的环碳原子连接的任何两个R22基团可以组合形成-O-(CR23R23')1-6-O-；
R23和R23'独立地是H或C1-C3烷基。
在一个实施方案中，本发明提供了由式I表示的化合物或其药学上可接受的盐和/或溶剂化物：
Figure BDA0002418896420000051
其中：
R1是OR11或NR5R5'；
R2是H或F；
R5是H、C1-C6烷基、OH、C(＝O)R6、OC(＝O)R6或OC(＝O)OR6；
R5'是H或C1-C6烷基；
R6是C1-C22烷基或C3-C7环烷基；
R11是H或C1-C6烷基；
R13是H、苯基、吡啶基、苄基、吲哚基或萘基，其中，所述苯基、吡啶基、苄基、吲哚基和萘基任选被1、2或3个R22取代；
R15是H、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基C1-C3烷基、苯基、苄基或吲哚基；
R15'是H或C1-C6烷基；或
R15和R15'与它们相连接的碳原子一起形成C3-C7亚环烷基基团，其中，每个C1-C6烷基任选被选自卤素、OR18和SR18的基团取代，每个C3-C7环烷基、C3-C7亚环烷基、苯基和苄基任选被一或两个独立地选自C1-C3烷基、卤素和OR18的基团取代；
R16是H、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基C1-C3烷基、苄基或苯基，其中的任何一个基团任选被1、2或3个各自独立地选自卤素、OR18和N(R18)2的基团取代；
每个R18独立地是H、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基或C3-C7环烷基；
每个R22独立地选自卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、苯基、羟基C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6烷基羰基、C3-C6环烷基羰基、羧基C1-C6烷基、羟基、氨基CN、NO2和三甲基甲硅烷基，或与相邻的环碳原子连接的任何两个R22基团可以组合形成-O-(CR23R23')1-6-O-；R23和R23'独立地是H或C1-C3烷基。
式(I)的化合物可以任选以药学上可接受的盐和/或溶剂化物形式提供。在一个实施方案中，提供了药学上可接受的盐形式的本发明的化合物。在第二个实施方案中，提供了药学上可接受的溶剂化物形式的本发明的化合物。在第三个实施方案中，提供了游离形式的本发明的化合物。
在本发明的一般实施方案中，R1是NR5R5'，例如，NH2或NHC(＝O)C1-C6烷基。
R2通常是H。
在优选实施方案中，R1是NH2，R2是H。
在供选择的实施方案中，R1是NH2，R2是F。
通常，在式(I)的化合物中，部分-NHC(R15)(R15')-C(＝O)OR16形成氨基酸酯残基，包括天然和非天然的氨基酸残基。特别感兴趣的是氨基酸残基，其中，R15'是氢，R15是甲基、异丙基、异丁基或苄基。在一般构型中，R15'是H，R15是C1-C3烷基，例如，甲基、乙基、丙基、异丙基。
在R15'是氢、R15不是氢的化合物中，不对称碳原子的构型通常是L-氨基酸的构型，从而提供具有式(Ia)所示的立体化学的化合物：
Figure BDA0002418896420000061
在优选的式Ia化合物的构型中，R15是甲基。
在式Ia化合物的进一步的构型中，R15是苄基。
在式Ia化合物的代表性的构型中，
R1是NH2；
R2是H；
R13是苯基、萘基或吲哚基，其中的任何一个基团任选被卤素如溴或C3-C4环烷基如环丙基取代；
R15是C1-C3烷基；
R16是C1-C8烷基。
在式Ia化合物的进一步的代表性的构型中，
R1是NH2；
R2是H；
R13是萘基；
R15是C1-C3烷基；
R16是C1-C8烷基或苄基。
在式Ia化合物的进一步的代表性的构型中，
R1是NH2；
R2是H；
R13是苯基，它在4位任选被卤素如溴或C3-C4环烷基如环丙基取代；
R15是甲基；
R16是C3-C8烷基。
在式Ia化合物的进一步的代表性的构型中，
R1是NH2；
R2是H；
R13是苯基；
R15是甲基；
R16是C3-C8烷基。
在式Ia化合物的进一步的代表性的构型中，
R1是NH2；
R2是F；
R13是苯基、萘基或吲哚基，其中的任何一个基团任选被卤素如溴或C3-C4环烷基如环丙基取代；
R15是C1-C3烷基；
R16是C1-C8烷基。
在式Ia化合物的进一步的代表性的构型中，
R1是NH2；
R2是F；
R13是萘基；
R15是C1-C3烷基；
R16是C1-C8烷基或苄基。
在式Ia化合物的进一步的代表性的构型中，
R1是NH2；
R2是F；
R13是苯基，它在4位任选被卤素如溴或C3-C4环烷基如环丙基取代；
R15是甲基；
R16是C3-C8烷基。
在式Ia化合物的进一步的代表性的构型中，
R1是NH2；
R2是F；
R13是苯基；
R15是甲基；
R16是C3-C8烷基。
在进一步的构型中，R15和R15'与它们连接的碳原子一起形成C3-C7环烷基，例如，环丙基或环丁基。
R16通常是C1-C10烷基或C3-C7环烷基。
R16的代表性实例(value)包括C1-C3烷基，例如，甲基、乙基、丙基、异丙基。R16的优选实例是甲基，R16的进一步优选实例是异丙基。
在一个实施方案中，R16是C3-C10烷基。
根据该实施方案，R16的代表性实例包括支链C5-C8烷基。在一个实施方案中，R16的分支点在C1位。在供选择的实施方案中，R16的分支点在C2位。通常，根据这些实施方案，R15'是H，R15连接的碳原子的立体化学是L-氨基酸的立体化学，从而提供下列通式的化合物：
Figure BDA0002418896420000081
其中，R161和R162是相同或不同的C1-C3烷基，R163和R164是相同或不同的C1-C3烷基。
通常，在式(Ia')的化合物中，R16是2-戊基，即，R161是丙基，R162是甲基。
在式(Ia')化合物的进一步的典型构型中，R16是2-丁基，即，R161是乙基，R162是甲基。
通常，在式(Ia")的化合物中，R16是2-丙基戊基或2-乙基丁基，即，R163和R164二者分别都是丙基或乙基。
R16的进一步的代表性实例包括C3-C7环烷基，例如，环己基。
R16的进一步的代表性实例是环戊基。
R16的进一步的代表性实例是苄基。
R13通常是苯基、萘基或吲哚基，其中的任何一个基团任选被1或2个R22取代。
在本发明的一个实施方案中，R13是苯基或萘基，其中任何一个基团任选被取代。
在本发明的一个实施方案中，R13是萘基。
在本发明的一个优选实施方案中，R13是苯基。
R13的代表性的实例包括任选被一个、两个或三个R22取代的苯基，从而提供式(II-aa)的化合物：
Figure BDA0002418896420000091
其中，当R22存在时，每个R22独立地选自卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基和C1-C6烷氧基。通常，苯环是未取代的或被一个R22取代。
在式(II-aa)化合物的一个构型中，苯环是未取代的。
在式(II-aa)化合物的进一步的构型中，苯环被一个R22取代。通常，在该构型中，取代基R22位于苯环的4位。
在本发明化合物的一个实施方案中，R13是在4位被卤素(例如，溴)或C3-C4环烷基(例如，环丙基)取代的苯基。
在式(II-aa)化合物的一个构型中，苯环被羧基C1-C6烷基取代。该构型的一个代表性实例是下式举例说明的构型：
Figure BDA0002418896420000092
在式(II-aa)化合物的一个进一步的构型中，苯环被位于相邻碳原子上的两个R22取代，并且两个R22组合形成-O-CH2-O-，从而形成下列部分的结构：
Figure BDA0002418896420000101
R13的进一步的代表性实例包括任选取代的吡啶基。通常，吡啶基部分是未取代的，或被一或两个各自独立地选自卤素、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C1-C6烷氧基、羟基、氨基的取代基取代。
在式(I)化合物的典型实施方案中，
R1是NH2或NHC(＝O)C1-C6烷基；
R13是苯基、萘基或吲哚基，其中任何一个基团任选被卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C3-C6环烷基或C1-C3卤代烷基取代；
R15'是H，R15是C1-C3烷基或苄基；
R16是C1-C10烷基或C3-C7环烷基。
在式(I)或(Ia)化合物的典型实施方案中，
R1是NH2或NHC(＝O)C1-C6烷基；
R13是苯基或萘基，其中任何一个基团任选被卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、C3-C6环烷基或C1-C3卤代烷基取代；
R15'是H，R15是C1-C3烷基或苄基；
R16是C2-C10烷基或C3-C7环烷基。
在式(I)化合物的进一步的典型实施方案中，
R1是NH2；
R2是H；
R13是苯基；
R15'是H，R15是C1-C3烷基；
R16是C1-C3烷基或环己基。
在式(I)或(Ia)化合物的进一步的典型实施方案中，
R1是NH2；
R2是H；
R13是苯基；
R15'是H，R15是C1-C3烷基或苄基；
R16是C3-C8烷基、环戊基或环己基。
本发明的化合物显示了抗癌活性，尤其是抗肝癌如HCC的活性，并且可以用作治疗患有癌症的温血动物尤其是人的药物。特别地，所述化合物可以用作治疗患有肝癌如HCC的人的药物。
为了避免不希望的副作用，尤其是在其它器官中的毒性，关键的是，将药物递送至肿瘤位点，同时减少暴露于正常组织。本发明的化合物在胃液中是稳定的，但容易被肝酶代谢，因此，它们可以在胃中被吸收，并作为掩蔽的细胞毒性药剂转移到肝中，在肝中吸收、代谢和形成活性的细胞毒性的三磷酸酯形式。因此，本发明提供了主要在肝中吸收和处理，从而使暴露于身体中的其它器官和毒性副作用最小的化合物。
不受理论束缚，本发明化合物的抗致癌活性可以直接针对癌症的快速起作用的致瘤细胞的细胞过程起作用，但可以另外地或者供选择地通过调节肿瘤的微环境来发挥它们的作用，例如，抑制血管生成，从而使得到营养的肿瘤处于饥饿状态，导致肿瘤生长的抑制。
本发明的化合物还用于治疗继发性的肝癌、肝转移，肝转移即来源于体内其它器官如结肠、肺或乳腺并转移至肝脏的癌症。
本发明还涉及治疗患有癌症，尤其是肝癌如HCC，的温血动物尤其是人的方法，所述方法包括：给予有效量的式(I)的化合物或其任何子组。
本发明还涉及治疗患有继发性肝癌的温血动物，尤其是人，的方法，所述方法包括：给予有效量的式(I)的化合物或其任何子组。
所述作为药物的用途或治疗方法包括全身性给予患有癌症的受试者有效量的式(I)的化合物。
在一方面，本发明提供了药物组合物，其包含式(I)的化合物以及药学上可接受的佐剂、稀释剂、赋形剂或载体。
在进一步的方面，本发明提供了用于治疗癌症的药物组合物，其包含式(I)的化合物以及药学上可接受的佐剂、稀释剂、赋形剂或载体。
在进一步的方面，本发明提供了用于治疗肝癌如HCC的药物组合物，其包含式(I)的化合物以及药学上可接受的佐剂、稀释剂、赋形剂或载体。
在进一步的方面，本发明提供了用于治疗继发性肝癌的药物组合物，其包含式(I)的化合物以及药学上可接受的佐剂、稀释剂、赋形剂或载体。
在进一步的方面，本发明涉及制备本文所列举的药物组合物的方法，所述方法包括：使药学上可接受的佐剂、稀释剂、赋形剂和/或载体与治疗有效量的式(I)的化合物密切地混合。
在进一步的方面，本发明提供了用于上述治疗或抑制的药物组合物，所述药物组合物进一步包含一或多种额外的治疗剂。
上述药物组合物将通常包含有效量(例如，用于人)的式(I)的化合物，不过，当与其它药剂联用或以多剂量使用时，可以使用式(I)化合物的子治疗剂量。
在该上下文中，治疗有效量是足以产生预期结果的量。治疗有效量将根据每种具体情况的个体要求而变化。影响剂量的原因是，例如，所治疗的疾病的严重程度，所治疗的受试者的年龄、体重、一般健康状况，等等。就抗癌作用而论，这种作用可以抑制肿瘤进一步生长、降低转移的可能性或消除转移，或使肿瘤细胞死亡，导致肿瘤缩小，或在患者的肿瘤消退之后，防止肿瘤再生长。
在进一步的方面，本发明提供了用作药物的式(I)化合物。
在进一步的方面，本发明提供了用于治疗癌症的式(I)化合物。
在进一步的方面，本发明提供了用于治疗肝癌(例如，HCC)的式(I)化合物。
在进一步的方面，本发明提供了用于治疗继发性肝癌的式(I)化合物。
在进一步的方面，本发明提供了用于上述治疗的式(I)化合物，所述化合物与一或多种另外的癌症治疗联用，例如，其它抗癌症药物、手术、免疫治疗和/或局部治疗，例如，射频消蚀。
在进一步的实施方案中，另外的抗癌治疗是放疗。
在一个实施方案中，另外的抗癌治疗是显示有效的抗肿瘤活性的一或多种其它核苷类似物。
在一方面，本发明提供了药物组合，其包含治疗有效量的式(I)的化合物和一或多种另外的治疗剂，所述另外的治疗剂选自化学治疗剂、多耐药性逆转剂和生物反应调节剂。
在该方面的一个实施方案中，另外的治疗剂是化学治疗剂。
在进一步的方面，本发明提供了用于制备药物的式(I)化合物。
在进一步的方面，本发明提供了用于制备药物的式(I)化合物，所述药物用于治疗癌症。
在进一步的方面，本发明提供了用于制备药物的式(I)化合物，所述药物用于治疗肝癌，例如，HCC。
在进一步的方面，本发明提供了用于制备药物的式(I)化合物，所述药物用于治疗继发性的肝癌。
在进一步的方面，本发明提供了用于治疗癌症的方法，所述方法包括给予受试者(例如，需要其的人)治疗有效量的式(I)的化合物。
在进一步的方面，本发明提供了用于治疗肝癌(例如，HCC)的方法，所述方法包括给予受试者(例如，需要其的人)治疗有效量的式(I)的化合物。
在进一步的方面，本发明提供了用于治疗继发性肝癌的方法，所述方法包括：给予受试者(例如，需要其的人)治疗有效量的式(I)的化合物。
在进一步的方面，本发明提供了用于上述治疗的方法，所述方法与一或多种另外的癌症治疗联用，例如，其它抗癌症药物、手术、免疫治疗和/或局部治疗，例如，射频消蚀。
在一方面，本发明提供了治疗原发性或继发性肝癌的方法，所述方法包括给予药物组合，所述药物组合包含治疗有效量的式I化合物，进一步包含一或多种选自化学治疗剂、多耐药性逆转剂和生物反应调节剂的其它治疗剂。
在该方面的一个实施方案中，其它治疗剂是化学治疗剂。在一方面，本发明提供了式(I)的化合物，其选自下面描述的化合物或其药学上可接受的盐：
Figure BDA0002418896420000131
Figure BDA0002418896420000141
此外，本发明涉及制备式(I)化合物的方法、用于制备式(I)化合物的新的中间体以及这种中间体的制备方法。
上文和下文使用的术语“式(I)的化合物”、“该发明的化合物”、“本发明的化合物”或类似的术语，旨在包括式(I)化合物和式(I)化合物的任何子组，包括所有可能的立体化学异构形式、它们的药学上可接受的盐、溶剂化物、季铵和金属络合物。
可以出于给药目的将本发明的化合物配制为各种药物形式。作为合适的组合物，可以列举药物的口服给药通常使用的所有组合物。为了制备本发明的药物组合物，将有效量的作为活性成分的具体化合物(任选加成盐形式或溶剂化物)与药学上可接受的载体紧密混合，所述载体根据希望给药的制剂形式，可以采用多种形式。这些药物组合物在适合于口服给药的单位剂型中是希望的。例如，在制备口服剂型的组合物过程中，在口服液体制剂(例如混悬剂、糖浆剂、酏剂、乳剂和溶液剂)的情况下，可以使用任何常规的药物介质，例如，水、二醇、油、醇，等等；或在粉剂、丸剂、胶囊剂和片剂的情况下，可以使用固体载体，例如，淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂，等等。因为片剂和胶囊剂容易给药，所以，它们代表最有利的口服剂量单位形式，在这样的情况下，显然使用固体药物载体。还包括的是固体形式制剂，可以在使用之前不久，将其转变为液体形式制剂。
为了容易给药和剂量的均匀性，配制单位剂型的上述药物组合物是特别有利的。本文使用的单位剂型是指适合作为单位剂量的物理离散单位，每个单位含有预定量的、适于产生希望的治疗效果的活性组分，以及所需的药物载体。这种单位剂型的实例是片剂(包括刻痕或包衣片剂)、胶囊剂、丸剂、粉剂小包装、薄片，等等，以及其分开的多份。
通常，认为抗癌有效日剂量为大约0.01至大约700mg/kg，或大约0.5至大约400mg/kg，或大约1至大约250mg/kg，或大约2至大约200mg/kg，或大约10至大约150mg/kg体重。合适的是，每天以合适的时间间隔，以两个、三个、四个或更多的子剂量形式给予所需剂量。可以将所述子剂量配制为单位剂型，例如，每个单位剂型含有大约1至大约5000mg，或大约50至大约3000mg，或大约100至大约1000mg，或大约200至大约600mg，或大约100至大约400mg活性成分。
本发明的化合物可以单独显示出抗癌作用和/或提高另一种抗癌剂显示抗癌作用的能力。
本发明的化合物可以表示为所定义的立体异构体。这种化合物的绝对构型可以使用本领域已知的方法，例如，X射线衍射或NMR测定，和/或由已知立体化学的起始原料的本质来确定。优选地，根据本发明的药物组合物将包括基本上立体异构纯的指定立体异构体的制剂。
本文所述的化合物和中间体的纯的立体异构形式定义为：基本上不含所述化合物或中间体的相同基本分子结构的其它对映异构体或非对映异构体形式的异构体。具体地，术语“立体异构纯”涉及至少80％立体异构过量(即，最少90％的一种异构体，以及最多10％的其它可能的异构体)直至100％立体异构过量(即，100％的一种异构体，没有其它异构体)的化合物或中间体，更具体地，90％直至100％的立体异构过量的化合物或中间体，甚至更具体地，94％直至100％的立体异构过量的化合物或中间体，最具体地，97％直至100％的立体异构过量的化合物或中间体。应该按同样的方式理解术语“对映异构纯”和“非对映异构纯”，不过应该分别考虑所讨论的混合物的对映异构体过量和非对映异构体过量。
通过使用本领域已知的方法，可以获得本发明的化合物和中间体的纯的立体异构形式。例如，使用旋光性的酸或碱，通过选择性地结晶它们的非对映异构体盐，可以将对映异构体彼此分离。其实例是酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二甲苯酰基酒石酸和樟脑磺酸。供选择地，使用手性固定相，通过色谱技术，可以分离对映异构体。所述纯的立体化学异构形式还可以衍生自相应的合适起始原料的纯立体化学异构形式，条件是，反应是立体专一反应。
优选地，如果需要特定的立体异构体，则通过立体特异性的制备方法来合成所述化合物。这些方法将有利地使用对映异构纯的起始原料。
通过常规方法，可以单独地获得本发明化合物的非对映异构的外消旋体。可以有利地使用的合适的物理分离方法是，例如，选择性结晶和色谱，例如，柱色谱。
当磷原子存在于本发明的化合物中时，磷原子可以表示手性中心。按照Cahn-Ingold-Prelog优先规则，该中心的手性表示为“R”或“S”。当没有表示手性时，认为包括R-和S-两种异构体，以及两者的混合物，即，非对映异构体混合物。
在本发明的优选实施方案中，包括磷原子具有S-构型的立体异构体。这些立体异构体表示为SP。
在本发明的其它实施方案中，包括磷原子具有R-构型的立体异构体。这些立体异构体表示为RP。
在本发明的其它实施方案中，包括非对映异构体的混合物，即，磷原子具有R-或S-构型的化合物的混合物。
本发明还包括同位素标记的式(I)化合物，其中，一个或多个原子被该原子的同位素替代，该原子的同位素即，具有相同原子序数但原子量不同于自然界通常发现的原子量的原子。可以掺入式(I)化合物中的同位素的实例包括但不限于：氢的同位素，例如，2H和3H(对于氘和氚，还分别表示为D和T)，碳的同位素，例如，11C、13C和14C，氮的同位素，例如，13N和15N，氧的同位素，例如，15O、17O和18O，磷的同位素，例如，31P和32P，硫的同位素，例如，35S，氟的同位素，例如，18F，氯的同位素，例如，36Cl，溴的同位素，例如，75Br、76Br、77Br和82Br，以及碘的同位素，例如，123I、124I、125I和131I。同位素标记的化合物所包括的同位素的选择将取决于所述化合物的具体应用。例如，对于药物或底物组织分布试验，最常使用的化合物是其中掺入放射性同位素(例如，3H或14C)的化合物。对于放射成像应用，例如，正电子发射层析成像(PET)，使用正电子发射同位素，例如，11C、18F、13N或15O。式(I)的化合物中引入重同位素，例如，氘，即，2H，可以提供更大的代谢稳定性，例如，可以导致该化合物的体内半衰期增加，或减少剂量需要。
利用类似于本文下面反应路线和/或实施例所描述的方法，使用合适的同位素标记的试剂或起始原料来代替相应的非同位素标记的试剂或起始原料，或利用本领域技术人员已知的常规方法，可以制备同位素标记的本发明的化合物。
药学上可接受的加成盐包括式(I)化合物的治疗活性的酸和碱加成盐形式。所关注的是游离形式，即，式(I)化合物或其任何子组的非盐形式。
通过用这种合适的酸处理碱形式，可以便利地地获得药学上可接受的酸加成盐。合适的酸包括，例如，无机酸，例如，氢卤酸，例如，盐酸或氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等酸；或有机酸，例如，乙酸、丙酸、羟乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(即，乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(即，丁二酸)、马来酸、富马酸、苹果酸(即，羟基丁二酸)、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环己氨基磺酸、水杨酸、对氨基水杨酸、双羟萘酸等酸。反之，通过用合适的碱处理，所述盐形式可以转变为游离碱形式。
通过用合适的有机和无机碱处理含有酸性质子的式(I)化合物，它们还可以转变为它们的无毒的金属或胺加成盐形式。合适的碱盐形式包括，例如，铵盐、碱金属和碱土金属盐，例如，锂、钠、钾、镁、钙盐，等等，与有机碱形成的盐，例如，苯乍生、N-甲基-D-葡糖胺、海巴明(hydrabamine)盐，以及与氨基酸形成的盐，所述氨基酸例如，精氨酸、赖氨酸，等等。
一些式(I)的化合物还可以以它们的互变异构形式存在。例如，酰胺基(-C(＝O)-NH-)的互变异构形式是亚氨基醇(-C(OH)＝N-)，其可以在具有芳族特征的环中变得稳定。虽然没有在本文提供的结构式中明确地表明，但这种形式包括在本发明范围内。
本文的说明书摘要、说明书和权利要求所使用的术语和表述应该按照下文的定义来解释，除非另外说明。每个术语在每次出现时的含义是独立的。不管是否单独使用术语或与其它术语组合使用，都适用这些定义，除非另有说明。没有明确定义的本文使用的术语或表述，应解释为具有本领域使用的通常含义。为了描述相同结构，化学名称、通用名称和化学结构可以互换使用。如果使用化学结构和化学名称两者来提及化学化合物，并且在结构和名称之间存在歧义，则以结构为主。
“Cm-Cn烷基”其本身或在组合术语中，例如，Cm-Cn卤代烷基、Cm-Cn烷基羰基、Cm-Cn烷基胺，等等，表示具有指定碳原子数目的直链或支链脂族烃基团，例如，C1-C4烷基是指具有1至4个碳原子的烷基。C1-C6烷基具有相应的含义，还包括戊基和己基的所有的直链和支链异构体。用于本发明的优选的烷基是C1-C6烷基，包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和正己基，尤其是C1-C4烷基，例如，甲基、乙基、正丙基、异丙基、叔丁基、正丁基和异丁基。通常优选甲基和异丙基。烷基可以是未取代的烷基，或被一个或多个可以相同或不同的取代基取代，每个取代基独立地选自卤素、烯基、炔基、芳基、环烷基、氰基、羟基、-O-烷基、-O-芳基、-亚烷基-O-烷基、烷硫基、-NH2、-NH(烷基)、-N(烷基)2、-NH(环烷基)、-O-C(＝O)-烷基、-O-C(＝O)-芳基、-O-C(＝O)-环烷基、-C(＝O)OH和-C(＝O)O-烷基。通常优选地，烷基是未取代的烷基，除非另外说明。
“C2-Cn烯基”表示含有至少一个碳-碳双键并且具有指定碳原子数目的直链或支链脂族烃基团，例如，C2-C4烯基是指具有2至4个碳原子的烯基；C2-C6烯基是指具有2至6个碳原子的烯基。非限制性的烯基包括乙烯基、丙烯基、正丁烯基、3-甲基丁-2-烯基、正戊烯基和己烯基。烯基可以是未取代的烯基，或被一个或多个可以相同或不同的取代基取代，每个取代基独立地选自：卤素、烯基、炔基、芳基、环烷基、氰基、羟基、-O-烷基、-O-芳基、-亚烷基-O-烷基、烷硫基、-NH2、-NH(烷基)、-N(烷基)2、-NH(环烷基)、-O-C(＝O)-烷基、-O-C(＝O)-芳基、-O-C(＝O)-环烷基、-C(＝O)OH和-C(＝O)O-烷基。通常优选地，烯基是未取代的烯基，除非另外说明。
“C2-Cn炔基”表示含有至少一个碳-碳三键并且具有指定碳原子数目的直链或支链脂族烃基团，例如，C2-C4炔基是指具有2至4个碳原子的炔基；C2-C6炔基是指具有2至6个碳原子的炔基。非限制性的烯基包括乙炔基、丙炔基、2-丁炔基、3-甲基丁炔基、戊炔基和己炔基。炔基可以是未取代的炔基，或被一个或多个可以相同或不同的取代基取代，每个取代基独立地选自：卤素、烯基、炔基、芳基、环烷基、氰基、羟基、-O-烷基、-O-芳基、-亚烷基-O-烷基、烷硫基、-NH2、-NH(烷基)、-N(烷基)2、-NH(环烷基)、-O-C(＝O)-烷基、-O-C(＝O)-芳基、-O-C(＝O)-环烷基、-C(O)OH和-C(O)O-烷基。通常优选地，炔基是未取代的炔基，除非另外说明。
本文使用的术语“Cm-Cn卤代烷基”表示Cm-Cn烷基，其中，至少一个C原子被卤素取代(例如，Cm-Cn卤代烷基可以含有一个至三个卤素原子)，优选氯或氟。典型的卤代烷基是C1-C2卤代烷基，其中，卤素合适地是氟。示例性的卤代烷基包括氟甲基、二氟甲基和三氟甲基。
本文使用的术语“Cm-Cn羟烷基”表示Cm-Cn烷基，其中，至少一个C原子被一个羟基取代。典型的Cm-Cn羟烷基是其中一个C原子被一个羟基取代的Cm-Cn烷基。示例性的羟烷基包括羟甲基和羟乙基。
本文使用的术语“Cm-Cn氨基烷基”表示Cm-Cn烷基，其中，至少一个C原子被一个氨基取代。典型的Cm-Cn氨基烷基是其中一个C原子被一个氨基取代的Cm-Cn烷基。示例性的氨基烷基包括氨甲基和氨乙基。
本文使用的术语“Cm-Cn亚烷基”表示具有指定碳原子数目的直链或支链的二价烷基。用于本发明的优选的Cm-Cn亚烷基是C1-C3亚烷基。亚烷基的非限制性的实例包括：-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH(CH3)CH2CH2-、-CH(CH3)-和-CH(CH(CH3)2)-。
术语“Me”是指甲基，“MeO”是指甲氧基。
术语“Cm-Cn烷基羰基”表示式Cm-Cn烷基-C(＝O)-的基团，其中，Cm-Cn烷基部分如上所述。通常,“Cm-Cn烷基羰基”是C1-C6烷基-C(＝O)-。“Cm-Cn烷氧基”表示基团Cm-Cn烷基-O-，其中，Cm-Cn烷基如上所述。具体关注的是C1-C4烷氧基，包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、正丁氧基和异丁氧基。通常优选甲氧基和异丙氧基。C1-C6烷氧基具有相应的含义，包括戊氧基和己氧基的所有的直链和支链异构体。
术语“Cm-Cn烷氧基羰基”表示式Cm-Cn烷氧基-C(＝O)-的基团，其中，Cm-Cn烷氧基部分如上所述。通常，“Cm-Cn烷氧基羰基”是C1-C6烷氧基-C(＝O)-。
术语“氨基”表示基团-NH2。
术语“卤素”表示卤素基团，例如，氟、氯、溴或碘。通常，卤素基团是氟或氯。
术语“芳基”是指苯基、联苯基或萘基。
术语“杂环烷基”表示稳定的饱和单环3-7元环，其含有1-3个独立地选自O、S和N的杂原子。在一个实施方案中，稳定的饱和单环3-7元环含有1个选自O、S和N的杂原子。在第二个实施方案中，稳定的饱和单环3-7元环含有2个独立地选自O、S和N的杂原子。在第三个实施方案中，稳定的饱和单环3-7元环含有3个独立地选自O、S和N的杂原子。含有1-3个独立地选自O、S和N的杂原子的稳定的饱和单环3-7元环通常可以是5-7元环，例如，5或6元环。杂环烷基可以是未取代的，或被一个或多个可以相同或不同的取代基取代，每个取代基独立地选自：卤素、烯基、炔基、芳基、环烷基、氰基、羟基、-O-烷基、-O-芳基、-亚烷基-O-烷基、烷硫基、-NH2、-NH(烷基)、-N(烷基)2、-NH(环烷基)、-O-C(＝O)-烷基、-O-C(＝O)-芳基、-O-C(＝O)-环烷基、-C(＝O)OH和-C(＝O)O-烷基。通常优选地，杂环烷基是未取代的杂环烷基，除非另外说明。
术语“杂芳基”表示稳定的单或二环芳族环系统，其含有1-4个独立地选自O、S和N的杂原子，每个环具有5或6个环原子。在本发明的一个实施方案中，稳定的单或二环芳族环系统含有一个选自O、S和N的杂原子，每个环具有5或6个环原子。在本发明的第二个实施方案中，稳定的单或二环芳族环系统含有两个独立地选自O、S和N的杂原子，每个环具有5或6个环原子。在本发明的第三个实施方案中，稳定的单或二环芳族环系统含有三个独立地选自O、S和N的杂原子，每个环具有5或6个环原子。在本发明的第四个实施方案中，稳定的单或二环芳族环系统含有四个独立地选自O、S和N的杂原子，每个环具有5或6个环原子。
杂芳基的一个实施方案包括黄酮。
术语“C3-Cn环烷基”表示具有指定碳原子数目的环状的单价烷基，例如，C3-C7环烷基是指具有3至7个碳原子的环状的单价烷基。用于本发明的优选的环烷基是C3-C4烷基，即，环丙基和环丁基。环烷基可以是未取代的，或被一个或多个可以相同或不同的取代基取代，每个取代基独立地选自：卤素、烯基、炔基、芳基、环烷基、氰基、羟基、-O-烷基、-O-芳基、-亚烷基-O-烷基、烷硫基、-NH2、-NH(烷基)、-N(烷基)2、-NH(环烷基)、-O-C(＝O)-烷基、-O-C(＝O)-芳基、-O-C(＝O)-环烷基、-C(＝O)OH和-C(＝O)O-烷基。通常优选地，环烷基是未取代的环烷基，除非另外说明。
术语“氨基Cm-Cn烷基”表示被氨基取代的上述Cm-Cn烷基，即，所述烷基部分的一个氢原子被NH2-基团替代。通常，“氨基Cm-Cn烷基”是氨基C1-C6烷基。
术语“氨基Cm-Cn烷基羰基”表示上述Cm-Cn烷基羰基，其中，所述烷基部分的一个氢原子被NH2-基团替代。通常，“氨基Cm-Cn烷基羰基”是氨基C1-C6烷基羰基。氨基Cm-Cn烷基羰基的实例包括但不限于：甘氨酰基∶C(＝O)CH2NH2，丙氨酰基∶C(＝O)CH(NH2)CH3，缬氨酰基∶C＝OCH(NH2)CH(CH3)2，亮氨酰基∶C(＝O)CH(NH2)(CH2)3CH3，异亮氨酰基∶C(＝O)CH(NH2)CH(CH3)(CH2CH3)，以及正亮氨酰基∶C(＝O)CH(NH2)(CH2)3CH3，等等。该定义不局限于天然存在的氨基酸。
当与碳原子连接时，本文使用的术语“(＝O)”形成羰基部分。应注意，当原子的化合价允许时，一个原子只可以携带一个氧代基团。
术语“单磷酸酯、二磷酸酯和三磷酸酯”是指基团∶
Figure BDA0002418896420000201
如本文所使用，定义中使用的任何分子部分上的基团位置可以在该部分的任何位置上，只要它是化学上稳定的即可。当任何变量在任何部分中出现不止一次时，每个定义是独立的。
术语“溶剂化物”包括式(I)化合物以及其盐能够形成的任何药学上可接受的溶剂化物。这种溶剂化物是，例如，水合物、醇化物，例如，乙醇化物、丙醇化物，等等，尤其是水合物。
本文使用的术语“前体药物”表示作为药物前体物的化合物，当给予受试者时，它能够通过代谢和/或化学过程而容易地在体内转变为活性化合物。
本文使用的术语“靶向肝脏的前体药物”表示主要在肝中代谢为它的活性物的前体药物。
本文使用的术语“肝癌”旨在包括原发性和继发性的肝癌，即分别指起源于肝的癌症，以及其它器官的癌症的肝转移。
按照上面提供的定义和技术领域的通常用法来解释相关术语。
通常，使用ChemDraw Ultra 12.0生成本申请所使用的化合物的名称。另外，如果没有例如，用粗线或虚线表示结构或结构的部分的立体化学，则将所述结构或该结构的部分解释为包括它的所有立体异构体。
一般合成方法
利用各种方法，例如，下面所示和所描述的说明性的合成反应路线中描述的方法，可以制备本发明的化合物。使用的起始原料和试剂可以从商品供应商获得，或可以按照参考文献中列出的文献方法，使用本领域技术人员熟知的方法来制备。
反应路线1举例说明了式(I)化合物的一般途径。
Figure BDA0002418896420000211
反应路线1
在惰性溶剂，如醚，例如，乙醚或THF，或卤代烃，例如，二氯甲烷中，在碱，例如，N-甲基咪唑(NMI)，或格氏试剂，例如，叔丁基氯化镁，等等的存在下，如上所述制备的可商购的曲沙他滨衍生物(1a)与所需要的氨基磷酸酯试剂(1b)缩合，其中，Lg是合适的离去基团，例如，卤素，例如，氯化物或活化的苯酚，例如，五氯苯酚、对硝基苯酚、五氟苯酚，等等，得到氨基磷酸酯衍生物(1c)。
从三氯氧磷(POCl3)起始，利用两步反应，可以制备上述反应路线中所使用的氨基磷酸酯试剂(1b)，其中，Lg是氯，即氨基磷酸酯氯化物(phosphoramidochloridate)，如反应路线2所述。
Figure BDA0002418896420000212
反应路线2
在惰性溶剂如Et2O中，POCl3与所需要的醇R13OH缩合，提供二氯磷酸烷氧基酯或二氯磷酸芳氧基酯(2a)。随后与氨基酸衍生物(2b)反应，提供氨基磷酸酯氯化物，其中，R3是H(2c)。
如果需要的话，所获得的氨基磷酸酯氯化物(2c)可以转化为具有活化苯酚作为离去基团(例如，五氟苯酚或对-NO2-苯酚)的相应的磷酰化剂，一般如反应路线3所述。
Figure BDA0002418896420000221
反应路线3
通过在碱，例如，三乙胺或类似的碱的存在下，氯衍生物(2c)与所需要的活化苯酚的反应，可以便利地进行这种转化，由此提供磷酰化剂(3a)和(3b)。
技术人员了解上面反应路线所使用的各个保护基(PG)，并且文献中详细地描述了它们的应用和另外供选择的方案，参见，例如，Greene T.W.,Wuts P.G.M.Protectivegroups in organic synthesis,2nd ed.New York:Wiley；1995。
本文使用的术语“N-保护基”或“N-保护的”是指保护氨基酸或肽的N端的那些基团，或在合成过程期间阻止氨基进行不希望有的反应的那些基团。Greene中公开了通常使用的N-保护基。N-保护基包括酰基，例如，甲酰基、乙酰基、丙酰基、新戊酰基、叔丁基乙酰基、2-氯乙酰基、2-溴乙酰基、三氟乙酰基、三氯乙酰基、邻苯二甲酰基、邻硝基苯氧基乙酰基、α-氯丁酰基、苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-溴苯甲酰基、4-硝基苯甲酰基，等等；磺酰基，例如，苯磺酰基、对甲苯磺酰基，等等；氨基甲酸酯形成基团，例如，苄氧羰基、对氯苄氧羰基、对甲氧基苄氧羰基、对硝基苄氧羰基、2-硝基苄氧羰基、对溴苄氧羰基、3,4-二甲氧基苄氧羰基、4-甲氧基苄氧羰基、2-硝基-4,5-二甲氧基苄氧羰基、3,4,5-三甲氧基苄氧羰基、1-(对联苯基)-1-甲基乙氧羰基、α,α-二甲基-3,5-二甲氧基苄氧羰基、二苯甲氧羰基、叔丁氧羰基、二异丙基甲氧羰基、异丙氧羰基、乙氧羰基、甲氧羰基、烯丙氧基羰基、2,2,2-三氯乙氧羰基、苯氧羰基、4-硝基苯氧羰基、芴基-9-甲氧羰基、环戊基氧羰基、金刚烷基氧羰基、环己基氧羰基、苯基硫代羰基，等等；烷基，例如，苄基、三苯甲基、苄氧基甲基，等等；以及甲硅烷基，例如，三甲基甲硅烷基，等等。优选的N-保护基包括甲酰基、乙酰基、苯甲酰基、新戊酰基、叔丁基乙酰基、苯磺酰基、苄基(Bz)、叔丁氧羰基(BOC)和苄氧羰基(Cbz)。
在如上Greene中，也详细地综述了羟基和/或羧基保护基，例如，甲基、取代的甲醚，例如，甲氧基甲基、甲基硫甲基、苄氧基甲基、叔丁氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基，等等，甲硅烷基醚，例如，三甲基甲硅烷基(TMS)、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)、三苄基甲硅烷基、三苯甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基等等，取代的乙醚，例如，1-乙氧基甲基、1-甲基-1-甲氧基乙基、叔丁基、烯丙基、苄基、对甲氧苯甲基、二苯甲基、三苯甲基，等等，芳烷基，例如，三苯甲基，以及pixyl(9-羟基-9-苯基氧杂蒽衍生物，尤其是氯化物)。酯羟基保护基包括酯，例如，甲酸酯、苄基甲酸酯、氯乙酸酯、甲氧基乙酸酯、苯氧基乙酸酯、新戊酸酯、金刚烷酸酯、三甲基苯甲酸酯、苯甲酸酯，等等。碳酸酯羟基保护基包括甲基、乙烯基、烯丙基、肉桂基、苄基，等等。
实施方案的详细描述
现在，用下列实施例说明本发明的各个实施方案和中间体。这些实施例是为了进一步说明本发明，对本发明的范围没有限制性。利用ChemDraw Ultra软件，Cambridgesoft，12.0.2版生成化合物名称。
除了以上定义之外，在上面的合成反应路线和下面实施例中使用下列缩写。如果没有定义本文使用的缩写，那么它具有其公认的含义。
Bn∶苄基
BOP-Cl：双(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯
DCC：二环己基碳二亚胺
DCM：二氯甲烷
DIEA∶二异丙基乙胺
DMAP∶4-二甲基氨基吡啶
DMF∶N,N-二甲基甲酰胺
EtOAc：乙酸乙酯
Et3N：三乙胺
EtOH∶乙醇
Et2O∶乙醚
LC∶液相色谱
HOAc：乙酸
HPLC∶高效液相色谱
MeCN：乙腈
MeOH：甲醇
NT：3-硝基-1,2,4-三唑
on：过夜
Pg：保护基
Ph∶苯基
rt∶室温
TEST：双(三乙氧基甲硅烷基)丙基-四硫化物
THF：四氢呋喃
TFA∶三氟乙酸
TFAA∶三氟乙酸酐
TIPS：三异丙基甲硅烷基
曲沙他滨的制备
Figure BDA0002418896420000241
步骤1)：((2,2-二甲氧基乙氧基)甲基)苯(Tr-1)
在0℃下，向搅拌的2,2-二甲氧基乙醇(50g，0.471mol)的DMF(200mL)溶液中加入苄基溴(56.03mL，0.471mol)和NaOH(20.7g，0.518mol)，并将该反应混合物在室温下搅拌16小时。反应完毕后(TLC)，加入饱和氯化钠水溶液(500mL)，并用DCM(1L)萃取该反应混合物，干燥(Na2SO4)有机相，浓缩，将得到的粗品在60-120硅胶上用硅胶柱色谱纯化，使用4-6％EtOAc/己烷洗脱，得到标题化合物(60g，60％)，为液体。
步骤2)：(5S)-5-((4S)-2-((苄氧基)甲基)-1,3-二氧戊环-4-基)-3,4-二羟基呋喃-2(5H)-酮(Tr-2)
将L-抗坏血酸(44.9g，0.255mol)加入到化合物Tr-1(60g，0.306mol)的无水乙腈(898mL)溶液中，随后加入pTSA一水合物(15.5g，0.076mol)，并将该反应混合物在90℃下加热1小时。反应完毕后(TLC)，蒸出一半体积的乙腈，并将该过程重复两次。完全除去溶剂，获得标题化合物的立体异构体的混合物(91g)。该产物不用进一步纯化，直接用于下一步。
步骤3)：(2R)-2-((4S)-2-((苄氧基)甲基)-1,3-二氧戊环-4-基)-2-羟基乙酸(Tr-3)
在室温下，将化合物Tr-2(91.7g，0.297mol)加入到搅拌的K2CO3(86.3g，0.625mol)的水(509mL)溶液中。慢慢地加入H2O2(80mL，0.71mol，30％v/v)，并将该溶液冷却至0℃，随后搅拌24小时。减压除去溶剂，加入EtOH(100mL)，并将该混合物在回流下加热30分钟，然后过滤。将EtOH(100mL)加入到所得到的固体残余物中，并将该混合物在回流下加热30分钟(两次)。真空浓缩收集的滤液，得到标题化合物(90g)，为固体。
步骤4)：(2S,4S)-2-((苄氧基)甲基)-1,3-二氧戊环-4-甲酸(Tr-4a)和(2R,4S)-2-((苄氧基)甲基)-1,3-二氧戊环-4-甲酸(Tr-4b)
在30分钟期间内，将次氯酸钠(650mL，0.881mol，9-10％的水溶液)逐滴加入到剧烈搅拌的化合物Tr-3(90g，0.294mol)和RuCl3.xH2O(1.22g，0.0058mol)的水溶液(ml，pH＝8，室温)中。加入1M NaOH溶液，使pH值维持在8的水平上。将该反应混合物在室温下搅拌3小时，然后在35℃下加热12小时。反应完毕后(TLC)，在0℃下，将1.5N HCl加入到该反应混合物中，直到达到pH6为止，然后加入EtOAc(1L)。用盐水(2x100mL)洗涤有机相，干燥(Na2SO4)，过滤，并浓缩。将得到的粗品在230-400硅胶上用硅胶柱色谱纯化，使用20％EtOAc/石油醚洗脱，得到化合物4a+4b的异构体的混合物。然后，在硅胶230-400上用柱色谱分离该异构体，使用0.9％MeOH/DCM和0.1％AcOH作为洗脱剂，得到2R异构体(20g，28％)。
步骤5)：乙酸(2S)-2-((苄氧基)甲基)-1,3-二氧戊环-4-基酯(Tr-5)
向化合物Tr-4a(33g，0138mol)的乙腈(660mL)溶液中加入吡啶(13.2mL)和乙酸铅(79.8g，0.180mol)，并将该混合物在室温下搅拌16小时。反应完毕后(TLC)，过滤该反应混合物，浓缩滤液，并将残余物加入到EtOAc(500mL)中，用水(100mL)和饱和氯化钠水溶液(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥。除去溶剂之后，在60-120硅胶上用柱色谱纯化粗品，使用12-15％EtOAc/石油醚梯度洗脱，得到标题化合物(16g，47％)，为液体。
步骤6)：乙酸(2S)-2-(羟甲基)-1,3-二氧戊环-4-基酯(Tr-6)
向搅拌的化合物Tr-5(16g)的无水甲醇(160mL)溶液中加入Pd/C(3.2g，20％w/w)，并将该反应混合物氢化3小时。反应完毕后(TLC)，通过硅藻土过滤该反应混合物。减压浓缩滤液，所得到的粗品标题化合物(10g，97％)直接用于下一步。
步骤7)：乙酸((2S)-4-乙酰氧基-1,3-二氧戊环-2-基)甲基酯(Tr-7)
在0℃下，向搅拌的化合物Tr-6(5.74g，0.0354mol)的吡啶(107mL)溶液中加入乙酸酐(8.22mL，0.080mol)，并将该反应混合物在室温下搅拌16小时。反应完毕后(TLC)，将该反应混合物用稀HCl(10mL)淬灭，并萃取到EtOAc(100mL)中。分离有机相，干燥(Na2SO4)，过滤，并浓缩。将得到的粗品在230-400硅胶上用柱色谱纯化，使用10-15％EtOAc/石油醚的梯度洗脱，得到标题化合物(4.97g，68％)，为液体。
步骤8)：乙酸((2S,4S)-4-(4-(苄基氨基)-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-二氧戊环-2-基)甲基酯(Tr-8a)
将N-苯甲酰基胞嘧啶(12.1g，56.3mmol)、硫酸铵(催化量)和六甲基二硅氮烷(HMDS)(67.4mL，418mmol)的混合物回流1小时。在40℃下，减压除去HMDS，并将残余物加入到无水1,2-二氯乙烷(57mL)中，加入化合物Tr-7(5.7g，27.9mmol)的无水1,2-二氯乙烷(57mL)溶液，随后滴加TMSOTf(10.2mL，45.7mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌1小时，然后，加入NaHCO3水溶液，并将该混合物搅拌30分钟。通过硅藻土过滤所得到的固体，并将滤液加入到EtOAc(200mL)中，用水(50mL)洗涤，并干燥(Na2SO4)。减压除去溶剂之后，将粗品在230-400硅胶上用柱色谱纯化，使用10-15％EtOAc/石油醚的梯度洗脱，得到端基异构体的混合物，通过SFC纯化，进一步分离该混合物，得到标题化合物(3g，30％)，为白色固体。
步骤9)：4-氨基-1-((2S,4S)-2-(羟甲基)-1,3-二氧戊环-4-基)嘧啶-2(1H)-酮(Tr-9)
将化合物Tr-8a(3g)、饱和甲醇氨溶液(180mL)的混合物在室温下、在密封管中搅拌16小时。反应完毕后(TLC)，减压除去溶剂，在230-400硅胶上用柱色谱纯化粗品，用10-13％MeOH/DCM的梯度进行洗脱，得到标题化合物(1.5g，85％)，为固体。
1H NMR 400MHz DMSO-d6δ:3.63-3.65(2H),4.04-4.07(2H),4.92-4.94(1H),5.18-5.21(1H),5.72-5.74(1H),6.16-6.18(1H),7.14(1H),7.26(1H),7.80-7.82(1H).
5-F-曲沙他滨的制备
Figure BDA0002418896420000271
步骤1)：苯甲酸((2S,4R)-4-(4-苯甲酰氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-二氧戊环-2-基)甲基酯(5-F-Ta)和苯甲酸((2S,4S)-4-(4-苯甲酰氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-二氧戊环-2-基)甲基酯(5-F-Tr-1b)
将5-氟苯甲酰基胞嘧啶(9.1g，39.5mmol)、硫酸铵(催化量)和六甲基二硅氮烷(140mL)的混合物回流14小时。在40℃下，减压除去HMDS，并将残余物加入到无水1,2-二氯乙烷(50mL)中，加入化合物苯甲酸((2S)-4-乙酰氧基-1,3-二氧戊环-2-基)甲基酯(7g，26.30mmol)的无水1,2-二氯乙烷(50mL)溶液中，随后滴加TMS-OTf(11.6g，52.6mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌2小时，然后，将NaHCO3水溶液加入到该反应混合物中，并将该混合物再搅拌30分钟。通过硅藻土滤出所得到的固体，并将滤液加入到EtOAc(500mL)中，用水(50mL)洗涤，并干燥(Na2SO4)。减压除去溶剂，在230-400硅胶上用柱色谱纯化粗品，使用50-60％EtOAc/石油醚的梯度洗脱，得到纯的标题化合物(1.7g，18％)，为固体。
步骤2)：4-氨基-5-氟-1-((2S,4S)-2-(羟甲基)-1,3-二氧戊环-4-基)嘧啶-2(1H)-酮(5-F-Tr)
在密封管中，将化合物5-F-Tr-1b(1.7g)、饱和的甲醇氨溶液(34ml)的混合物搅拌16小时，然后，减压除去溶剂，并将粗品在230-400硅胶上用柱色谱纯化，使用5％MeOH/DCM的梯度洗脱，得到标题化合物(0.8g，68％)，为固体。
制备以下苯酚，并在本发明化合物的中间体的制备中使用∶
苯酚1
Figure BDA0002418896420000272
步骤a)：1-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)苯基)乙酮(Ph1-a)
将咪唑(4.46g，65.5mmol)加入到3-羟苯乙酮(4.46g，32.8mmol)的DMF(6mL)溶液中。5分钟之后，加入TBDMS-Cl(4.69g，31.1mmol)的DMF(4mL)溶液。将该反应混合物在室温下搅拌90分钟，然后倒入含有5％EtOAc(200mL)的己烷中，并用1M HCl(60mL)、水(60mL)、饱和碳酸氢钠(2x60mL)、水(60mL)和盐水(60mL)洗涤。用Na2SO4干燥有机层，过滤，浓缩，并将得到的残余物通过硅胶快速色谱纯化，用己烷/EtOAc洗脱，得到标题化合物(5.7g，69％)。
步骤b)：叔丁基二甲基(3-(丙-1-烯-2-基)苯氧基)硅烷(Ph1-b)
在氮气氛围中，溴化甲基(三苯基鏻)(10.2g，28.4mmol)悬浮在无水THF(30mL)中，并将该悬浮液冷却至0℃。将正丁基锂(17.8mL，28.4mmol)滴加到该混合物中，并将得到的溶液在室温下搅拌30分钟。将Ph1-a(5.7g，22.8mmol)加入到该混合物中，并使该反应在室温下进行60分钟。用碳酸氢钠水溶液淬灭该反应，并用乙醚(50mL)萃取。将有机层用碳酸氢钠溶液洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将得到的残余物通过硅胶塞纯化，用己烷洗脱，得到标题化合物(3.9g，69％)。
步骤c)：叔丁基二甲基(3-(1-甲基环丙基)苯氧基)硅烷(Ph1-c)
在氮气氛围中，在10分钟期间内，将二乙基锌/己烷(439.2mmol)滴加到冷却(0℃)的烯烃Ph1-b(3.9g，15.7mmol)的1,2-二氯乙烷(60mL)溶液中。滴加二碘甲烷(6.32mL，78.5mmol)，并将该得到的混合物在0℃下搅拌30分钟，随后达到室温过夜。将该混合物倒入冰冷的氯化铵溶液中，并用乙醚萃取。将有机层用饱和碳酸氢钠洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将粗品加入到己烷中，并弃去残余的二碘甲烷。浓缩己烷层，粗品不用进一步纯化，直接用于下一步。
步骤d)：3-(1-甲基环丙基)苯酚(苯酚1)
将Ph1-c(3.45g，13.1mmol)加入到1M的四丁基氟化铵的THF溶液(20mL，20mmol)中，并将所得到的溶液在室温下搅拌过夜。将该反应用1M HCl(50ml)淬灭，并用乙酸乙酯(100ml)萃取。用盐水(2x50ml)洗涤有机层，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。通过硅胶快速色谱纯化残余物，用2-丙醇、EtOAc和己烷的混合物洗脱，得到标题化合物(0.56g，29％)。MS147.1[M-H]-。
苯酚2
Figure BDA0002418896420000291
使用制备苯酚1所描述的方法，由4-羟苯乙酮(6.0g，44.1mmol)制备标题化合物。收率∶53％。
苯酚3
Figure BDA0002418896420000292
步骤a)：1-(3-(苄氧基)苯基)环戊醇(Ph3-a)
将用镁升温的碘加入到镁屑(magnesium tunings，1.29g，52.8mmol)的无水THF(50ml)悬浮液中。将该混合物回流，并加入大约5％的3-溴苯酚的溶液(13.9g，52.8mmol)。当反应开始时，滴加入溴化物的溶液，然后，将该混合物再回流一小时。将该混合物冷却至大约5℃，并滴加入环戊酮(4.44g，52.8mmol)的THF(50ml)溶液。将该混合物在室温下搅拌72小时，然后，用冷的饱和氯化铵溶液淬灭该反应，并用乙醚(x3)萃取。用盐水洗涤有机相，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。用硅胶色谱纯化产物(异己烷/EtOAc)，得到标题化合物(8.5g，54％)。
步骤b)：1-(苄氧基)-3-(环戊-1-烯-1-基)苯(Ph3-b)
将对甲苯磺酸加入到Ph3-a(8.4g，28.2mmol)的苯(100ml)溶液中。将该混合物用DMF阱回流三个小时，然后冷却至室温，用乙醚稀释，并用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤。干燥(Na2SO4)有机相，过滤并浓缩。用硅胶色谱纯化产物(异己烷/EtOAc)，得到标题化合物(6.45g，91％)。MS 249.4[M-H]-。
步骤c)：3-环戊基苯酚(苯酚3)
在Parr中，在10％Pd/碳(1.5g)的存在下，将Ph3-b(6.4g，26mmol)的EtOAc(75ml)和EtOH(75ml)溶液在22℃和40PSI下氢化过夜。滤出催化剂，用EtOAc和EtOH洗涤。减压蒸发溶剂，并用硅胶色谱分离产物(异己烷/EtOAc)，得到标题化合物(3.6g，82％)。MS 161.2[M-H]-。
苯酚4
Figure BDA0002418896420000301
步骤a)：叔丁基(3-环丙基苯氧基)二甲基硅烷(Ph4-a)
将(3-溴苯氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(5.46g，19mmol)、环丙基硼酸(2.12g，24.7mmol)、正磷酸钾(14.1g，66.5mmol)、三环己基膦(0.53g，1.9mmol)和Pd(OAc)2(0.21g，0.95mmol)的甲苯(80ml)和水(4ml)悬浮液在110℃下搅拌过夜。用乙醚稀释该浆液，并用水和盐水洗涤。干燥(MgSO4)有机相，过滤并浓缩。用快速柱色谱纯化粗品(EtOAc/己烷)，得到标题化合物(1.94g，41％)。
步骤b)：3-环丙基苯酚(苯酚4)
将1M四丁基氟化铵(10.1ml，10.1mmol)加入到Ph4-a(1,94g，7,81mmol)的THF(25ml)溶液中。将该溶液搅拌2小时，然后蒸发溶剂，将残余物溶于EtOAc中，并用浓NH4Cl(aq)洗涤两次，用盐水洗涤一次。干燥(MgSO4)有机相，过滤并浓缩。用快速柱色谱纯化粗品(己烷/乙酸乙酯，9:1，含有1％异丙醇)，得到稍微不纯的标题化合物(1.24g，119％)。
苯酚5
Figure BDA0002418896420000302
步骤a)：2-(4-溴苯氧基)四氢-2H-吡喃(Ph5-a)
将4-溴苯酚(3.75g，21.7mmol)溶于3,4-二氢-2H-吡喃(16ml，175mmol)中，加入催化量的对甲苯磺酸(15mg，0.09mmol)，并将该混合物在22℃下搅拌45分钟。将该混合物用乙醚稀释，用1M NaOH(aq，x2)、水洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩，得到标题化合物(5.57g，99％)。
步骤b)：2-(4-环丙基苯氧基)四氢-2H-吡喃(Ph5-b)
在15分钟期间内，将0.5M环丙基溴化镁的THF(6.5ml，3.25mmol)溶液加入到Ph5-a(552.5mg，2,15mmol)、ZnBr(144mg，0.64mmol)、三叔丁基膦四氟硼酸盐(35.6mg，0.12mmol)和Pd(OAc)2(29.5mg，0.13mmol)的THF(4ml)溶液中。将该混合物在22℃下搅拌90分钟，然后在冰浴上冷却，并加入冰水(10ml)。用EtOAc萃取该混合物三次，并将萃取物用盐水洗涤，随后干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。用硅胶柱色谱纯化残余物(石油醚/EtOAc)，得到标题化合物(292mg，62％)。
步骤c)：4-环丙基苯酚(苯酚5)
将对甲苯磺酸一水合物(18.9mg，0.1mmol)加入到Ph5-b(2.28g，10.45mmol)的MeOH(15ml)溶液中。将该混合物在120℃下、在微波反应器中加热5分钟，然后浓缩，用硅胶柱色谱纯化(石油醚/EtOAc)。将得到的固体用石油醚结晶，得到标题化合物(1.08g，77％)。
苯酚6
Figure BDA0002418896420000311
步骤a)：1-(3-甲氧基苯基)环丁醇(Ph6-a)
在0和10℃之间，将1M 3-甲氧基苯基溴化镁的THF溶液(2.11g，99.8mmol)逐滴加入到搅拌的环丁酮(6.66g，95mmol)的乙醚(65ml)溶液中。在0-10℃下，将该混合物搅拌三个小时，然后，将该混合物加入到冰冷的饱和NH4Cl(300ml)和水(300ml)溶液中。将该混合物搅拌10分钟，然后，用乙醚萃取三次。干燥有机相(Na2SO4)，过滤，并浓缩。将得到的粗品用硅胶色谱纯化(异己烷/EtOAc)，得到标题化合物(16.9g，86％)。
步骤b)：1-环丁基-3-甲氧基苯(Ph6-b)
将10％Pd/碳(2.5g)加入到Ph6-a(15.4g，86.1mmol)的乙醇(200ml)溶液中，并将该混合物在60psi下、在Parr中氢化。18小时之后，再加入10％Pd/碳(1.5g)，并将该混合物在60psi下进一步氢化18小时。滤出催化剂并用EtOH和EtOAc洗涤。减压浓缩该溶液，并将粗品用硅胶色谱分离(异己烷/EtOAc)，得到标题化合物(14.0g，77％)。
步骤c)：3-环丁基苯酚(苯酚6)
在0℃下，将1M三溴化硼(18.1g，72.2mmol)的DCM溶液逐滴加入到Ph6-b(10.6g，65.6mmol)的无水DCM(65ml)溶液中。将该混合物在-5℃下搅拌2.5小时，然后用冷的饱和NH4Cl溶液淬灭该反应，并用DCM萃取三次。干燥(Na2SO4)有机相，过滤并浓缩。将得到的粗品用硅胶色谱纯化(异己烷/EtOAc)，得到标题化合物(9.73g，88％)。
苯酚7
Figure BDA0002418896420000312
步骤a)：1-(4-(苄氧基)苯基)环丁醇(Ph7-a)
在≈1小时期间内，在回流下，将1-(苄氧基)-4-溴苯(2.63g，100mmol)的乙醚∶THF(1∶1，100ml)溶液逐滴加入到镁屑(2.43g)和痕量碘的乙醚(50ml)悬浮液中。当加入完成时，将该混合物回流四小时，然后冷却到≈0℃。加入无水THF(50ml)，随后缓慢的加入环丁酮(7.01g，100mmol)的乙醚(50ml)溶液，并使该混合物达到室温。搅拌两个小时之后，加入冷的饱和NH4Cl溶液(500ml)，并将该混合物搅拌15分钟，然后用EtOAc萃取两次。将有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，并减压蒸发。用硅胶柱色谱纯化产物，得到标题化合物(12.5g，42％)。
步骤b)：4-环丁基苯酚(苯酚7)
在氩气氛围中，将10％Pd/碳(2.55g，21.5mmol)加入到Ph7-a(12.4g，41.4mmol)的绝对EtOH(110ml)溶液中，并将该混合物在45psi下、在室温下氢化18小时。滤出催化剂，用乙醇洗涤，并浓缩该溶液。用硅胶色谱纯化产物(异己烷-EtOAc)。将合适的级分合并，浓缩，并将残余物用石油醚结晶，得到标题化合物(3.15g，51％)。
苯酚8
Figure BDA0002418896420000321
4-(1-甲基环戊基)苯酚(苯酚8)
在30分钟期间内，将1-甲基环戊醇(2.00g，20.0mmol)和苯酚(2.07g，22.0mmol)的戊烷(50ml)溶液逐滴加入到新的AlCl3(1.33g，10mmol)的戊烷(100ml)悬浮液。将得到的混合物在氮气氛围中、在室温下搅拌72小时，然后，将该反应混合物倒入水/冰和HCl(12M，20mmol，1.66ml)中。用水(50ml)和盐水(50ml)洗涤有机相，干燥(Na2SO4)，过滤，并浓缩。用硅胶柱色谱纯化粗品(MeOH-DCM)，得到标题化合物(426mg，12％)。
苯酚9
Figure BDA0002418896420000322
步骤a)：2-(4-溴-3-甲基苯氧基)四氢-2H-吡喃(Ph9-a)
将pTs(16mg，0.086mmol)加入到4-溴-3-甲酚(4.0g，21.4mmol)的3,4-二氢-2-H-吡喃(16ml，175mmol)溶液中。将该反应混合物在室温下搅拌1小时，然后，用乙醚稀释，并用1M NaOH(aq)和水洗涤。干燥(Na2SO4)有机相，过滤并浓缩。用硅胶柱色谱纯化粗品(EtOAc/庚烷)，得到标题化合物(3.32g，57％)。
步骤b)：2-(4-环丙基-3-甲基苯氧基)四氢-2H-吡喃(Ph9-b)
将Ph9-a(3.12g，11.5mmol)、ZnBr2(2.59g，11.5mmol)、三叔丁基膦四氟硼酸盐(0.2g，0.69mmol)和Pd(OAc)2(258mg，1.15mmol)放入烧瓶中，并将该烧瓶用氮气吹扫几次。加入THF(10ml)，同时搅拌，随后在5分钟期间内，逐滴加入0.5M环丙基溴化镁/THF(35ml，17.4mmol)。将该混合物在室温下搅拌，然后通过硅藻土塞过滤，并用MeOH洗脱。浓缩该溶液，用硅胶柱色谱纯化粗品(EtOAc/庚烷)，得到标题化合物(1.69g，57％)。
步骤c)：4-环丙基-3-甲酚(苯酚9)
将Ph9-b(1.70g，7.30mmol)溶于MeOH(20ml)中，并加入pTsxH2O(318mg，1.67mmol)。将该混合物在22℃下搅拌30分钟，然后浓缩。用柱色谱纯化粗品(EtOAc/庚烷)，得到标题化合物(704mg，65％)。
苯酚10
Figure BDA0002418896420000331
步骤a)：4-环丙基-1-甲氧基-2-甲基苯(Ph10-a)
按照Ph9的步骤b所描述的方法，使4-溴-1-甲氧基-2-甲基苯(4.39g，21.9mmol)与环丙基溴化镁反应，得到标题化合物(1.54g，43％)。
步骤b)：4-环丙基-2-甲酚(苯酚10)
在氮气氛围中，在0℃下，将BBr3(5ml，5mmol)加入到Ph10-a(1.54g，9.49mmol)的DCM(7.5ml)溶液中。将该反应搅拌2小时，然后用MeOH(3ml)淬灭，并浓缩。将粗品溶于EtOAc中，并用盐水洗涤。干燥(Na2SO4)有机相，过滤并浓缩。用硅胶柱色谱纯化粗品，得到标题化合物(826mg，59％)。MS 147.11[M-H]-。
苯酚11
Figure BDA0002418896420000341
4-环丙基-3-甲氧基苯酚(苯酚11)
按照苯酚9的制备中所描述的方法，由4-溴-3-甲氧基苯酚(1.11g，5.49mmol)制备标题化合物。收率∶40％。
苯酚12
Figure BDA0002418896420000342
步骤a)：3-(二甲基氨基)-1-(3-羟基苯基)丙-1-酮(Ph12-a)
将几滴HCl加入到3-乙酰苯酚(4.08g，30mmol)、多聚甲醛(4.05g，45mmol)和盐酸二甲胺(2.69g，33mmol)的绝对EtOH(100ml)溶液中，并将该反应混合物回流18小时。再加入盐酸二甲胺(0.55eq，1.22g)、多聚甲醛(0.5eq，1.35g)和HCl(0.5ml)，并将该反应混合物再回流4小时，然后冷却至室温。收集沉淀的白色固体，用冷的EtOH(50mL)和冷的丙酮(10mL)洗涤，随后冷冻干燥，得到标题化合物(2.59g，38％)，其不经进一步纯化，可在下一步直接使用。
步骤b)：环丙基(3-羟基苯基)甲酮(苯酚12)
在室温下，将NaH(60％矿物油分散体)(1.13g，28.2mmol)分批加入到搅拌的三甲基碘化亚砜(6.20g，28.2mmol)的DMSO(100ml)悬浮液中。1小时之后，在搅拌和冷却下，分批加入固体Ph12-a(2.59g，11.3mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌40小时，然后倒入冷水(200ml)中，并用DCM(3x100ml)萃取。用饱和NH4Cl水溶液(2x 100mL)洗涤有机相，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。用硅胶柱色谱纯化所得到的粗品(MeOH/DCM)，得到标题化合物(883mg，48％)。
苯酚13
Figure BDA0002418896420000343
步骤a)：环丙基(4-羟基苯基)甲酮(Ph13)
在大约30分钟期间内，将对羟基-γ-氯苯丁酮(4.95g)分为几部分加入到NaOH溶液(8ml，水溶液，50％w/w)中，然后加入NaOH(35ml，水溶液，25％w/w)，随后一批加入对羟基-γ-氯苯丁酮(4.95g)。将温度降低至140℃，并加入NaOH(8g)。90分钟之后，加入水(10ml)，再经过60分钟之后，将该反应混合物冷却，用水稀释，用HOAc(≈27-30ml)中和至pH≈7。过滤所形成的沉淀，用水洗涤，并真空干燥。在40℃下，将固体在CHCl3(200ml)中研磨10分钟，然后在室温下过夜。在30分钟期间内，将该浆液加热至40℃，然后过滤。干燥(MgSO4)滤液，过滤并浓缩至≈70ml。加入己烷，形成油，其最终变成晶体。过滤该浆液，用CHCl3/己烷洗涤固体，并干燥，得到标题化合物(4.15g，51％)。
苯酚14
Figure BDA0002418896420000351
步骤a)：3-(1-羟基-2,2-二甲丙基)苯酚(Ph14-a)
在30分钟期间内，将t.Bu-MgBr(1.5eq)逐滴加入到冷的(-10℃)3-羟基苯甲醛(2.00g，16.4mmol)在乙醚(20ml)中的混合物中。在加入期间，加入THF(20ml)。使该混合物达到23℃，并搅拌6小时。加入更多的t.Bu-MgBr(0.7eq)，并将该混合物搅拌过夜，然后冷却，并用饱和NH4Cl水溶液淬灭该反应。将EtOAc加入到该混合物中，随后加入1M HCl水溶液，直到获得均匀混合物为止。分离各相，用盐水洗涤有机相，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。用柱色谱纯化所得到的粗品，得到标题化合物(1.1g，37％)。
步骤b)：1-(3-羟基苯基)-2,2-二甲基丙-1-酮(Ph14)
向烘干的圆底烧瓶中加入
Figure BDA0002418896420000353
MS和氯铬酸吡啶鎓(PCC)(1.97g，9.15mmol)，随后加入无水DCM(5ml)。将该混合物在20℃下搅拌5分钟，然后慢慢地加入AA8019(1.10g，6.10mmol)在DCM(5ml)中的混合物。完全氧化之后，通过硅藻土垫过滤该混合物，用乙醚洗涤该垫。浓缩滤液。用柱色谱纯化粗品，得到标题化合物(402mg，37％)。MS 179.25[M+H]+。
苯酚15
Figure BDA0002418896420000352
1-(4-羟基苯基)-2,2-二甲基丙-1-酮(Ph15)
按照苯酚14的制备中所描述的方法，使4-羟基苯甲醛(3g，24.6mmol)反应，得到标题化合物(538mg，17％)。
氨基酸1
Figure BDA0002418896420000361
步骤a)：(S)-(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酸仲丁酯(AA1-a)
将L-Boc-丙氨酸(2.18g，11.5mmol)溶于无水DCM(40ml)中，并加入醇(R)-丁-2-醇(938mg，12.6mmol)。将该混合物冷却至大约5℃，并一批加入EDC(3.31g，17.2mmol)，随后分批加入DMAP(140mg，1.15mmol)。使该混合物达到室温，并搅拌过夜，然后用乙酸乙酯(～300ml)稀释，并将有机相用饱和碳酸氢钠溶液洗涤三次，用盐水洗涤一次。用硫酸钠干燥有机相，并减压浓缩。用硅胶色谱分离产物，用异己烷和10％乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(2.78g，98％)。
步骤b)：(S)-(S)-2-氨基丙酸仲丁酯(AA1-b)
在65℃下，将AA1-a(2.77g，11.3mmol)和对甲苯磺酸一水合物(2.15g，11.3mmol)在EtOAc(45ml)中的混合物搅拌16小时，然后减压浓缩。将得到的残余物用乙醚结晶，得到标题化合物(3.20g，89％)。
氨基酸2
Figure BDA0002418896420000362
(S)-(R)-2-氨基丙酸(戊-2-基)酯(AA2)
按照AA1的制备中所描述的方法，但使用(R)-戊-2-醇来代替(R)-丁-2-醇，得到标题化合物(4.6g)。
氨基酸3
Figure BDA0002418896420000363
(S)-(S)-2-氨基丙酸(戊-2-基)酯(AA3)
按照AA1的制备中所描述的方法，使用(S)-戊-2-醇来代替(R)-丁-2-醇，得到标题化合物(8.3g)。
制备下列中间体，并且可以在本发明化合物的制备中使用∶
中间体1
Figure BDA0002418896420000371
步骤a)：(R)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酸4-氟苄酯(I-1a)
将Boc-L-AlaOH(19.92mmol)、DMAP(1.99mmol)和(4-氟苯基)甲醇(23.9mmol)溶于CH2Cl2(100ml)中。向此溶液中加入三乙胺(23.9mmol)，随后加入EDCl(23.9mmol)，并将得到的反应混合物在室温下、在氮气氛围中搅拌过夜。将该反应混合物用CH2Cl2(100ml)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(2x50ml)、饱和NaCl水溶液(2x50ml)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。将得到的残余物用硅胶柱色谱纯化，用正己烷-EtOAc(95:5至60:40)洗脱，得到标题化合物(4.44g)，为白色蜡状固体。MS:296[M-H]-。
步骤b)：(R)-2-氨基丙酸4-氟苄酯(I-1b)
将化合物I-1a(14.93mmol)溶于4M HCl/二噁烷(40ml)中，在室温下搅拌30分钟，蒸干，得到标题化合物的盐酸盐(3.4g)，为白色粉末。MS:198[M+H]+。
步骤c)：(2R)-2-((氯(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸4-氟苄酯(I-1)
在-78℃下，将PhOPOCl2(4.28mmol)逐滴加入到化合物I-5b(4.28mmol)的CH2Cl2溶液中，随后逐滴加入三乙胺(8.56mmol)。将得到的反应混合物在-78℃下、在Ar氛围中搅拌，并达到室温过夜。在硅胶上蒸发该反应混合物，并通过色谱纯化(正己烷/EtOAc(88:12)-(0:100))。得到标题化合物(769mg)。31P-NMR(CDCI3)δ:7.85(s)和7.54(s)(RP和SP非对映异构体)。
中间体2
Figure BDA0002418896420000372
步骤a)：(S)-(R)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酸仲丁酯(I-2a)
将L-Boc-丙氨酸(2.18g，11.5mmol)溶于无水DCM(40ml)中，并加入醇(R)-丁-2-醇(938mg，12.6mmol)。将该混合物冷却至大约5℃，并一批加入EDC(3.31g，17.2mmol)，随后分批加入DMAP(140mg，1.15mmol)。使该混合物达到室温，并搅拌过夜，然后用乙酸乙酯(～300ml)稀释，并将有机相用饱和碳酸氢钠溶液洗涤三次，用盐水洗涤一次。用硫酸钠干燥有机相，并减压浓缩。用硅胶色谱分离产物，用异己烷和10％乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(2.78g，98％)。
步骤b)：(S)-(R)-2-氨基丙酸仲丁酯(I-2b)
在65℃下，将I-10a(2.77g，11.3mmol)和对甲苯磺酸一水合物(2.15g，11.3mmol)在EtOAc(45ml)中的混合物搅拌16小时，然后减压浓缩。将得到的残余物用乙醚结晶，得到标题化合物(3.20g，89％)。
步骤c)：(2S)-(R)-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸仲丁酯(I-2)
在氮气氛围中，在-30℃下，将二氯磷酸苯酯(1eq)加入到化合物I-10b(3.15g，9.92mmol)的DCM(75ml)溶液中，随后逐滴加入三乙胺(2eq)。使该混合物达到室温，并搅拌过夜，然后冷却至大约5℃，加入固体4-硝基苯酚(1eq，15mmol)，随后逐滴加入三乙胺(1eq，15mmol)，并将该混合物在室温下搅拌4小时，然后减压浓缩，用乙酸乙酯(40ml)和醚(40ml)稀释，并在室温下保持过夜。滤出三乙胺-HCl盐，并将滤液减压浓缩。将得到的残余物用硅胶柱色谱纯化，用异己烷-乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(4.19g，79％)。
按照I-2的制备中所描述的方法，使用合适的醇，制备下列化合物∶
Figure BDA0002418896420000381
中间体6，非对映异构体-1&-2
利用SFC，分离化合物I-6的两个非对映异构体，得到I-6-dia-1和I-6-dia-2。
中间体7
Figure BDA0002418896420000391
步骤a)：(S)-2-氨基丙酸环辛酯(I-7a)
向L-丙氨酸(1.7g，19.1mmol)和环辛醇(25ml，191mmol)的甲苯(100ml)浆液中加入对甲苯磺酸一水合物(3.6g，19.1mmol)。将该反应混合物在回流温度下加热25小时，并使用Dean-Stark分水器，从该反应中除去水。减压浓缩该混合物，并将残余物在真空下保持过夜。向残余物(27g)中加入乙醚(100ml)。过滤收集白色沉淀，用乙醚(3x50ml)洗涤，真空干燥，得到标题化合物(4.84g，68％)。
步骤b)：(2S)-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸环辛酯(I-7)
按照I-2的步骤c的制备中所描述的方法，使化合物I-7a反应，得到标题化合物(4.7g，76％)
中间体8
Figure BDA0002418896420000392
(2S)-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸环庚酯(I-22)
按照化合物I-7的制备所描述的方法，但使用环庚醇(27ml，224mmol)来代替环辛醇，得到标题化合物(5.72g，55％)。
中间体9
Figure BDA0002418896420000393
(2S)-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸环己酯(I-23)
按照I-2的步骤c的制备所描述的方法，但使用(S)-2-氨基丙酸环己酯来代替(S)-2-氨基丙酸3,3-二甲基丁酯，得到标题化合物(10.6g，82％)。
中间体10
Figure BDA0002418896420000401
(S)-2-((双(4-硝基苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸2-乙基丁酯(I-10)
将(S)-2-氨基丙酸-2-乙基丁酯(5g，14.49mmol)加入到双(4-硝基苯基)氯磷酸酯(6.14g，17.1mmol)的DCM(50ml)溶液中，将该混合物在冰浴中冷却，并逐滴加入Et3N(4.77ml，34.2mmol)。15分钟之后，除去冷却，并将该反应混合物在23℃下搅拌，直到根据TLC完成反应为止。然后，加入乙醚，过滤该混合物，将滤液浓缩，并用硅胶柱色谱纯化，得到标题化合物(2.05g，82％)。
中间体11
Figure BDA0002418896420000402
步骤a)：(S)-2-氨基丙酸异丙酯(I-11a)
在0℃下，将SOCl2(29ml，400mmol)逐滴加入到L-丙氨酸的HCl盐(17.8g，200mmol)的异丙醇(700ml)悬浮液中。将该悬浮液在室温下搅拌过夜，然后浓缩，得到标题化合物(29.2g，87％)。
步骤b)：(2S)-2-(((((S)-1-异丙氧基-1-氧代丙-2-基)氨基)(4-硝基苯氧基)磷酰基)-氨基)丙酸异丙酯(I-11)
在-60℃下，将二氯磷酸-4-硝基苯酯(1.8g，7mmol)的DCM溶液逐滴加入到胺I-11a(2.35g，14mmol)和三乙胺(7.7ml，56mmol)的DCM溶液中。使该反应混合物达到室温，搅拌过夜，浓缩，随后用乙酸乙酯和醚稀释，并在室温下保持过夜。滤出三乙胺-HCl盐，减压浓缩滤液，将得到的残余物用硅胶色谱纯化，用异己烷-乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(1.6g，50％)。
中间体12
Figure BDA0002418896420000411
步骤a)：(S)-2-((叔丁氧羰基)氨基)丙酸新戊酯(I-12a)
在-5℃下，将EDAC和DMAP分批加入到Boc-丙氨酸(18.9g，100mmol)和新戊醇(13.0ml，120mmol)的DCM(200ml)溶液中。使该反应混合物达到室温，并搅拌72小时。加入EtOAc(700ml)，并将有机相用饱和NaHCO3溶液洗涤三次，用盐水洗涤一次，然后浓缩。将得到的残余物用柱色谱纯化，用己烷-EtOAc(90/10至80/20)洗脱，得到标题化合物(21g，81％)。
步骤b)：(S)-2-氨基丙酸新戊酯(I-12b)
在-65℃下，将对甲苯磺酸(15.6g，82.0mmol)加入到Boc保护的胺I-12a(21.1g，82.0mmol)的EtOAc(330ml)溶液中。将该反应混合物在-65℃下搅拌8小时，然后使其达到室温过夜。然后，过滤该混合物，浓缩，得到标题化合物(21g，78％)。
(2S)-2-(((((S)-1-(新戊基氧基)-1-氧代丙-2-基)氨基)(4-硝基苯氧基)-磷酰基)氨基)丙酸新戊酯(I-12)
在1小时期间内，在-50℃下，将4-硝基苯酚二氯磷酸酯逐滴加入到胺I-12b(3.90g，24.5mmol)的DCM(100ml)溶液中。使该反应混合物达到室温，搅拌过夜，浓缩，随后用乙醚稀释，并在室温下保持过夜。过滤该混合物，减压浓缩滤液，将得到的残余物用硅胶色谱纯化，用异己烷-乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物(4.8g，77％)。
中间体32
Figure BDA0002418896420000412
(2S)-(R)-2-(((全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸仲丁酯(I-32)
在-70℃下，在氮气氛围中，在15分钟期间内，将Et3N(10.9ml，78.1mmol)逐滴加入到搅拌的(S)-(R)-2-氨基丙酸仲丁酯的pTs盐(12.0g，37.7mmol)的DCM(50ml)溶液中。在1小时期间内，向该混合物中加入二氯磷酸苯酯(5.61ml，37.7mmol)的DCM(50ml)溶液。将该反应混合物在-70℃下再搅拌30分钟，然后在2小时期间内升温至0℃，并搅拌1小时。在20分钟期间内，将五氟苯酚(6.94g，37.7mmol)和Et3N(5.73ml，41.1mmol)的DCM(30ml)溶液加入到该混合物中。将该粗品混合物在0℃下搅拌18小时，然后浓缩。将残余物加入到THF(100ml)中，滤出不溶性物质，并用THF洗涤若干次。蒸发溶剂，并将残余物与甲基叔丁基醚一起研磨。滤出不溶性物质，并用甲基叔丁基醚洗涤。将合并的滤液浓缩，并将粗品固体用正己烷/EtOAc(80:20；100ml)超声处理。滤出固体，用正己烷/EtOAc(80:20)洗涤，得到纯的标题化合物的磷立体异构体，为白色固体(2.3g，13％)。
中间体33
Figure BDA0002418896420000421
(2S)-2-(((全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸乙酯(I-33)
按照I-32所描述的方法，但从(S)-2-氨基丙酸乙酯的HCl盐(11.0g，71.1mmol)起始，制备标题化合物的纯的磷立体异构体。收率：8.56g，27％。
中间体34
Figure BDA0002418896420000422
(2S)-2-(((全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸2-乙基丁酯(I-34)
按照I-32所描述的方法，但从(S)-2-氨基丙酸2-乙基丁酯的pTs盐(18.8g，54.4mmol)起始，制备标题化合物的纯的磷立体异构体。收率：27.0g，99％。
LC-MS 496.44[M+H]+。
中间体35
Figure BDA0002418896420000423
(2S)-2-(((全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸丁酯(I-35)
将二氯磷酸苯酯(12.4ml，83.1mmol)加入到冷的(-20℃)(S)-2-氨基丙酸丁酯(26.4g，83.1mmol)的二氯甲烷(200ml)浆液中。将该混合物搅拌10分钟，然后在15分钟期间逐滴加入Et3N(25.5ml，183mmol)。将该混合物在-20℃下搅拌1小时，然后在0℃下搅拌30分钟。将该混合物在冰浴中保持冷却，加入全氟苯酚(15.3g，0.08mol)，随后逐滴加入Et3N(11.6ml，0.08mol)。将该混合物搅拌过夜，并慢慢地达到20℃。加入乙醚，并通过硅藻土过滤该混合物，浓缩，用硅胶柱色谱纯化，用石油醚/EtOAc(9:1->8:2)洗脱。将合适的级分合并，浓缩，并用石油醚-EtOAc(9:1)结晶，得到纯的标题化合物的磷立体异构体，为白色固体(2.23g，5.8％)。
中间体36
Figure BDA0002418896420000431
步骤a)：L-丙氨酸异丙酯盐酸盐(I-36a)
在冷却下，在-7至0℃下，在30分钟期间内，将亚硫酰二氯(80.2g，0.674mol,1.5eq)加入到2-丙醇(400ml)中，随后在0℃下，加入L-丙氨酸(40.0g，0.449mol)。将流量指示器和具有27.65％的氢氧化钠(228g)和水(225g)的混合物的洗涤器与出口相连接。将该反应混合物在67℃下搅拌两个小时，然后在70℃下搅拌一个小时，在20-25℃下搅拌过夜。利用60℃浴，将该反应混合物在47-50℃下减压(250-50mBar)蒸馏。当蒸馏变得非常缓慢时，将甲苯(100ml)加入到残余油中，并利用60℃浴，继续在48-51℃下减压(150-50mBar)蒸馏，直到变得非常缓慢为止，将甲基叔丁基醚(tBME)(400ml)加入到残余油中，并在有效的搅拌下，在34-35℃下，使该两相系统析晶。当观察到结晶时，将该混合物在一个小时期间内冷却至23℃，并过滤分离沉淀。用tBME(100ml)洗涤滤饼，不用加热，减压干燥至恒重，得到标题化合物(67.7g，90％)，为白色固体。
步骤b)：(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯(I-36)
在氮气氛围中，在0℃下，将二氯磷酸苯酯(62.88g，0.298mol，1.0eq)加入到L-丙氨酸异丙酯盐酸盐(50.0g，0.298mol)的DCM(310ml)溶液中，用DCM(39ml)洗涤，完成加入。将该混合物冷却，并在冷却下，在70分钟期间内加入三乙胺(63.35g，0.626mol，2.1eq)，保持温度不高于-14℃，用DCM(39ml)洗涤，完成加入。将该混合物在-15至-20℃下搅拌一个小时，然后加热到-8℃，在42分钟期间内，在冷却下，加入五氟苯酚(60.38g，0.328mol，1.1eq)和三乙胺(33.19g，0.328mol，1.1eq)的DCM(78ml)溶液，保持温度不高于0℃，用DCM(39ml)洗涤，完成加入。将该混合物在0℃下搅拌一个小时，随后在+5℃下搅拌过夜。过滤取出形成的沉淀，用DCM(95ml)洗涤滤饼。将合并的滤液在5℃下用水(2x190ml)洗涤。在32-38℃下，减压(650-600mBar)蒸馏有机相，继续蒸馏，直到残余体积大约170ml为止，获得部分结晶的物质。加入乙酸乙酯(385ml)，并将得到的透明溶液在43-45℃下减压(300-250mBar)蒸馏。继续蒸馏，直到获得大约345ml的残余体积为止。将该透明溶液冷却至36℃，加入(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯(20mg)的晶种(按照J.Org.Chem.，2011，76，8311-8319中描述的的方法制备)，诱导结晶。将该混合物在一个小时期间内冷却至27℃，然后在47分钟期间内加入正庚烷(770ml)，并将该混合物再搅拌37分钟。加入三乙胺(6.03g，0.2eq)，并将该混合物在23-25℃下搅拌过夜。过滤分离沉淀。用乙酸乙酯∶正庚烷(1:9，80ml)洗涤滤饼，不用加热，减压(低于0.1mBar)干燥至恒重，得到标题化合物(75.64g，56％)，为白色结晶物质。
1H NMR(CDCl3,300MHz)δ7.38-7.32(m,2H),7.27-7.24(m,2H),7.23-7.19(m,1H),5.10-4.98(m,1H),4.20-4.08(m,1H),4.03-3.96(m,1H),1.46(dd,7.2,0.6Hz,3H),1.26-1.23(2xd,6H)；
13CNMR(CDCl3,100MHz)δ172.7(d,J＝8.8Hz),150.4(d,J＝7.1Hz),143.4-143.0(m),141.0-140.2(m),140.0-139.8(m),137.6-137.2(m),136.8-136.2(m),130.0(d,J＝0.82Hz),125.8(d,J＝1.4Hz),120.3(d,J＝5.0Hz),69.8,50.6,(d,J＝1.9Hz),21.8(d,J＝1.9Hz),21.2(d,J＝4.4Hz)；
标题化合物的结晶性能和NMR光谱数据与公开的数据(J.Org.Chem.，2011，76，8311-8319)一致，由此证明了标题化合物的磷原子的S立体化学。
中间体37
Figure BDA0002418896420000441
步骤a)：(S)-2-氨基丙酸环己酯(I-37a)
将乙酰氯(4.2ml，59.3mmol)滴加到搅拌的环己醇的溶液(50ml)中，随后加入L-苯丙氨酸(4.0g，24.2mmol)。将该反应混合物加热至100℃，保持16小时，然后减压浓缩，与乙醚/己烷(1:1)一起研磨，干燥，得到标题化合物(6g，88％)，为白色固体，不用进一步纯化，直接在下一步中使用。
步骤b)：(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸环己酯(I-37)
在-70℃下，在30分钟内向搅拌的化合物I-37a(7.0g，24.6mmol)的无水DCM(42ml)溶液中逐滴加入三乙胺(7.17ml，51.5mmol)，随后在1小时内加入二氯磷酸苯酯(5.15g，34.5mmol)的无水DCM(21ml)溶液。将该反应混合物在-70℃下再搅拌30分钟，然后在2小时内升温至0℃，并搅拌1小时。在1小时内向该混合物中加入五氟苯酚(4.94g，26.8mmol)和三乙胺(3.74ml，26.8mmol)的无水DCM(28ml)溶液。将该混合物在0℃下搅拌4小时，然后在5℃下保持16小时。过滤反应混合物，并将滤液减压浓缩。将粗品固体溶于EtOAc(300ml)中，用水(50ml)洗涤，干燥，并减压除去溶剂。将获得的固体与20％EtOAc/己烷一起研磨，过滤，用己烷洗涤，干燥，得到标题化合物的单一非对映异构体(3.0g，21％)，为固体。
中间体38
Figure BDA0002418896420000451
(2S)-2-(((4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯(I-38)
在-78℃下，在30分钟期间内，向搅拌的二氯磷酸-4-硝基苯酯(5g，19.8mmol)的无水DCM(40ml)溶液中加入苯酚(1.86g，19.8mmol)和三乙胺(3ml，21.8mmol)的无水DCM(50ml)溶液。将该混合物在此温度下搅拌60分钟，然后在-5℃下，在15分钟期间内，转移到含有化合物(S)-2-氨基丙酸异丙酯(3.3g，19.8mmol)的无水DCM(40ml)溶液的另一个烧瓶中。在-5℃下，在20分钟期间内，向该混合物中加入第二批TEA(6ml，43.3mmol)。将该混合物在0℃下搅拌3小时，然后减压除去溶剂。将残余物加入到EtOAc(200mL)中，用水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，减压除去溶剂，得到油状粗品，用柱色谱纯化，使用0-20％EtOAc/己烷梯度和230-400目硅胶，得到比例为约1:1的非对映异构体的混合物。利用SFC分离两个非对映异构体，得到标题化合物，异构体1(1.5g，20％)和异构体2(1.5g，18％)，为固体。
按照中间体I-38的制备中所描述的方法，使用合适的氨基酸酯和苯酚，制备表1所列的化合物，并分离非对映异构体。
表1
Figure BDA0002418896420000461
实施例1
Figure BDA0002418896420000471
步骤a)：乙酸((2S,4S)-4-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-1,3-二氧戊环-2-基)甲基酯(1a)
在密封管中，将化合物Tr-8(0.15g，0.41mmol)、1,2-二甲氧基乙烷(1.5ml)和水(0.96ml)的混合物在125℃下加热48小时。反应完毕后(TLC)，将该反应混合物冷却至室温，并减压除去溶剂。在230-400硅胶上用柱色谱纯化粗品残余物，使用3-7％的MeOH/DCM的梯度，得到呈固体的化合物1a(0.08g，80％)和呈固体的化合物1b(0.02g)。
步骤b)：1-((2S,4S)-2-(羟甲基)-1,3-二氧戊环-4-基)嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(1b)
在密封管中，将NH3的MeOH的饱和溶液(1.6mL)中的化合物1a(0.08g，0.31mmol)在室温下搅拌4小时。反应完毕后(TLC)，减压除去溶剂，在60-120硅胶上用柱色谱纯化残余物，使用5-7％的MeOH/DCM，得到标题化合物(0.06g，90％)，为固体。
步骤c)：(2S)-2-(((((2S,4S)-4-(2,4-二氧代-3,4-二氢嘧啶-1(2H)-基)-1,3-二氧戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯(1c)
在-5℃下，向搅拌的化合物1b(60mg，0.28mmol)的DMPU(0.6ml)溶液中滴加入叔丁基氯化镁(0.57ml，0.98mmol，1.7M，在THF中)。将该混合物在-5℃下搅拌30分钟，然后在室温下搅拌30分钟。在-5℃下，加入((全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸异丙酯(0.25g，0.56mmol)的无水THF(2.5ml)溶液，并将该反应混合物在室温下搅拌8小时。反应完毕后(TLC)，加入水(15mL)，并用EtOAc(30mL)萃取该混合物。用饱和氯化钠水溶液(10mL)洗涤有机相，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，将得到的粗品在230-400硅胶上用柱色谱纯化，使用4-5％的MeOH/DCM梯度，得到标题化合物(55mg，38％)，为固体。MS(ES+)[484.0]+。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ1.15-1.20(10H),3.73-3.75(1H),4.11-4.27(4H),4.84-4.90(1H),5.14(1H),5.51-5.53(1H),6.06-6.12(1H),6.26-6.27(1H),7.17-7.23(3H),7.36-7.40(2H),7.57-7.60(1H),11.37(1H)。
实施例2
Figure BDA0002418896420000481
(2S)-2-(((((2S,4S)-4-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-二氧戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯(2)
按照实施例1的步骤c所描述的方法，使曲沙他滨(TR-9)(50mg，0.23mmol)与磷酰化剂I-36(0.26g，0.58mmol)反应，得到标题化合物(30mg，26％)，为固体。MS(ES+)483.34[M+H]+。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ1.14-1.24(9H),3.32-3.38(1H),4.05-4.21(4H),4.84-4.26(1H),5.14(1H),5.68-5.70(1H),6.07-6.13(1H),6.23-6.25(1H),7.16-7.24(5H),7.34-7.39(2H),7.59-7.61(1H)。
实施例3
Figure BDA0002418896420000482
(2S)-2-(((((2S,4S)-4-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-二氧戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯(3)
按照实施例1的步骤c所描述的方法，使曲沙他滨(50mg，0.23mmol)与磷酰化剂I-38(0.24g，0.58mmol)反应，得到标题化合物(40mg，35％)，为固体。MS(APCI)481.0[M-H]-。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ1.14-1.20(9H),3.76-3.77(1H),4.1 0-4.18(2H),4.22-4.25(2H),4.84-4.87(1H),5.17-5.186(1H),5.69-5.70(1H),6.03-6.08(1H),6.24-6.26(1H),7.1 7-7.25(5H),7.36-7.40(2H),7.62-7.64(1H)。
实施例4
Figure BDA0002418896420000491
(2S)-2-(((((2S,4S)-4-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-二氧戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯(4)
按照实施例1的步骤c所描述的方法，使曲沙他滨(50mg，0.23mmol)与磷酰化剂I-37(0.33g，0.58mmol)反应，得到标题化合物(30mg，22％)，为固体。MS(APCI)599.47[M+H]+。
按照实施例1的步骤c所描述的方法，使用合适的中间体I-#dia-1或I-#dia-2，制备表2所列的化合物的纯的非对映异构体。
表2
Figure BDA0002418896420000492
类似地，按照实施例1的步骤c所描述的方法，使用合适的中间体，制备表3所列的化合物的纯的非对映异构体。
表3
Figure BDA0002418896420000501
记录了所有举例说明的化合物的证明其结构的NMR和MS数据。
实施例35
Figure BDA0002418896420000511
(2S)-2-(((((2S,4S)-4-(2-氧代-4-棕榈酸酰胺基嘧啶-1(2H)-基)-1,3-二氧戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯(35dia-1和35dia-2)
按照WO2008/030373所描述的方法，用棕榈酸酐酰化化合物2和3，得到标题化合物。
实施例36
Figure BDA0002418896420000512
(2S)-2-(((((2S,4S)-4-(2-氧代-4-棕榈酸酰胺基嘧啶-1(2H)-基)-1,3-二氧戊环-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸甲酯(36)
按照WO2008/030373所描述的方法，用棕榈酸酐酰化化合物27dia-2，得到标题化合物。
对比例
Figure BDA0002418896420000513
步骤a)：(2S)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲基)氨基)-N-(2-氧代-1,3,2-氧杂硫杂磷杂环戊烷-2-基)丙酰胺
在氮气氛围中，向冰冷的(S)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲基)氨基)丙酰胺(1.40g，3.58mmol)和三乙胺(0.60ml，4.30mol)的二氯甲烷(8ml)溶液中逐滴加入2-氯-1,3,2-氧杂硫杂磷杂环戊烷(0.542g，3.80mmol)的溶液。使该反应达到室温，并搅拌过周末。将该溶液冷却至0℃，并慢慢地加入(叔丁基过氧)三甲硅烷(1.16g，7.17mmol)的庚烷溶液。将该反应混合物搅拌90分钟，然后真空浓缩。将残余物悬浮在乙酸乙酯(10ml)中，过滤除去盐酸盐，并真空除去溶剂。将残余物溶于无水乙腈(10ml)中，所得到的溶液不用进一步纯化，可在下面的步骤中直接使用。假定得到定量的产率，和基于31P-NMR的80％纯度。
步骤b)：((S)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲基)氨基)丙酰基)氨基磷酸((2S,4S)-4-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-二氧戊环-2-基)甲基氢酯
在氮气氛围中，将DMAP(229mg，1.88mmol)加入到化合物Tr-9(100mg，0.469mmol)的无水吡啶(5ml)溶液中，随后缓慢的加入(2S)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲基)氨基)-N-(2-氧代-1,3,2-氧杂硫杂磷杂环戊烷基)丙酰胺(361mg，0.563mmol)的无水乙腈(2ml)溶液。将得到的溶液在室温下、在氮气氛围中搅拌46小时，然后浓缩。在Gemini-NX 5mC18(100x30mm)上用制备HPLC纯化残余物，使用20％B至80％B的梯度，经过17分钟，流速35mL/min。溶剂A∶95％水，5％乙腈(10mM，在乙酸铵中)；溶剂B∶10％水，90％乙腈(10mM，在乙酸铵中)。将含有产物的级分合并，冷冻干燥，得到标题化合物(80mg，26％)。MS(ES+)664.26[M+H]+。
步骤c)：((S)-2-氨基丙酰基)氨基磷酸((2S,4S)-4-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-1,3-二氧戊环-2-基)甲基氢酯
将水(50ml)加入到前述步骤的化合物(80.5mg，0.121mmol)的二氯甲烷溶液中，随后加入乙酸(500ml)。将该溶液在室温下搅拌12分钟，然后加入TFA(75ml)，并将得到的溶液在室温下搅拌5分钟，用甲苯(10ml)稀释，浓缩至干，并真空干燥。将残余物加入到含有10％乙腈的水(10ml)中，并用含有10％己烷的甲基叔丁基醚(2x10mL)洗涤。收集水层，冷冻干燥过夜，得到目标产物的双-TFA盐(80mg)，按照LC-MS的纯度为～75％。利用制备HPLC，在Hypercarb(21.2x100mm，I＝271nm)上进一步纯化所获得的残余物，使用0％至35％乙腈/水的梯度。将含有产物的级分合并，并冷冻干燥。MS(ES+)364.10[M+H]+。利用1H和13C NMR来确定结构。
所选择的示例性化合物的NMR数据∶
化合物8dia-1
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ0.81-0.84(6H),1.20-1.22(11H),1.59(1H),3.82-3.97(3H),4.08-4.16(2H),4.22-4.23(2H),5.16(1H),5.67-5.69(1H),6.05-6.10(1H),6.23-6.24(1H),7.16-7.23(m,5H),7.34-7.38(m,2H),7.60-7.62(m,1H)。
化合物8dia-2
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ0.81-0.84(6H),1.22-1.27(11H),1.57(1H),3.81-3.89(2H),3.95-3.98(1H),4.05-4.07(1H),4.10-4.20(3H),5.128(1H),5.68-5.69(1H),6.13-6.14(1H),6.22-6.24(1H),7.16-7.21(5H),7.34-7.38(2H),7.58-7.60(1H)。
化合物9dia-1
31P NMR(DMSO-d6)δ4.354。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ1.24-1.26(3H),3.98-4.01(1H),4.12-4.14(2H),4.27-4.29(2H),5.00-5.08(2H),5.16-5.18(1H),5.64-5.66(2H),6.25-6.27(1H),6.34(1H),7.17-7.22(2H),7.31-7.33(5H),7.45-7.46(2H),7.55-7.59(2H),7.63-7.64(1H),7.74-7.77(1H),7.95-7.97(1H),8.08-8.11(1H)。
化合物9dia-2
31PNMR(DMSO-d6)64.159。
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ1.25-1.26(3H),3.97-4.01(1H),4.08-4.16(2H),4.23-4.29(2H),5.04-5.16(3H),5.65-5.66(1H),6.26(1H),6.36-6.42(1H),7.17-7.24(2H),7.326(5H),7.41-7.49(2H),7.57-7.64(3H),7.74-7.76(1H),7.95-7.97(1H),8.10-8.12(1H)。
化合物11-dia-1
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ0.23(9H),0.78-0.82(3H),1.08-1.12(3H),1.20-1.22(3H),1.44-1.49(2H),3.77-3.79(1H),4.09-4.23(4H),4.67-4.72(1H),5.16-5.16(1H),5.69-5.70(1H),6.04-6.10(1H),6.23-6.25(1H),7.15-7.24(4H),7.48-7.50(2H),7.61-7.63(1H)。
化合物11dia-2
1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ0.22-0.24(9H),0.78-0.82(3H),1.10-1.11(3H),1.22-1.24(3H),1.46-1.50(2H),4.05-4.07(1H),4.11-4.22(4H),4.70-4.71(1H),5.14(1H),5.69-5.71(1H),6.07-6.11(1H),6.23-6.25(1H),7.16-7.24(4H),7.49-7.51(2H),7.60-7.62(1H)。
对于靶向肝脏的前体药物，重要的是，恰当地处理前体药物。前体药物应该在小肠液中稳定，在首过代谢过程中，在肝中被肝酶处理，形成单磷酸酯。然后，所形成的单磷酸酯在肝细胞中被细胞激酶合成代谢(anabolized)为活性的三磷酸酯。另外，抗癌症药物应该对于增殖细胞具有毒性。例如，下面列出了评价化合物的这些性能的合适方法。
在人肠S9部分((HIS9)和人肝S9部分((HLS9)中的稳定性
在DMSO中，制备每个试验化合物的储备溶液(10mM)，并在-20℃下储存。在开始实验之前，在50％乙腈/水中，将试验化合物稀释至500μΜ。在50mM磷酸钾缓冲液(pH7.4)中，制备反应混合物，其含有5mM MgCl2、1mM NADPH和5μΜ试验化合物，总体积250μl。加入人类肝或肠S9部分(0.4mg蛋白/mL的最终浓度，Xeno Tech)，使反应开始。在37℃，在定轨振荡器上，培养该反应混合物。在目标时间点(0、10、30和60分钟)，获取50μl的等分样品，并通过与含有内标的150μl乙腈混合，使反应终止。利用500μΜ溶液，通过在沸腾的人类S9(0.4mg蛋白/mL)、5mM MgCl2和50mM磷酸钾缓冲液(pH7.4)中，将该溶液稀释到5μΜ的最终浓度，来制备每个试验化合物的标准溶液。将标准品和样品保持在冰上30分钟，然后在3000g下、在10℃下离心20分钟，然后，将10μl上清液与200μl的50％乙腈/水混合。将0.5μΜ的每个试验化合物(在50％乙腈/水中)注入到LC/MS-MS中，测定子离子、去簇电压(declusteringpotential)(DP)、碰撞能量(CE)和碰撞室出口电压(CXP)，以便形成LC/MS-MS方法。使用带有QTRAP5500系统的C18柱分离所述化合物。流动相由溶剂A(98％水、2％乙腈、0.1％乙酸或10mM乙酸铵)和溶剂B(80％乙腈、20％水、0.1％乙酸或10mM乙酸铵)组成。使用0％至100％的溶剂B的梯度，洗脱所述化合物。注射5μl的标准点和样品，用QTRAP5500分析。
基于每个时间点的峰面积，相对于设置为5μΜ的标准物，测定母体化合物的数量。使用Excel软件，由试验化合物的消失曲线，测定内在清除率(CLint)和半衰期(t1/2)。
细胞毒性试验
在加入化合物之前24小时，接种细胞。将每个试验化合物(从100μΜ连续稀释)加入到Huh7(1.5x 104个细胞/孔)或HepG2(1.5x 104个细胞/孔)中，并在37℃下培养5天。只有培养基的对照物用于测定最小吸收值和未经处理的细胞值。在生长期的最后，将Polysciences Europe GmbH的XTT染料加入到每个孔中。使用只有培养基的对照孔作为空白，利用Sunrise(Tecan)，读出在450nm下的吸光度(参考波长600nm)。通过比较(与细胞对照物相比)抑制程度相对于化合物浓度绘图，测定50％抑制值(CC50)。将稀释系列的结果拟合成S形的剂量反应曲线。
为了检验在人类肠S9部分(HIS9)和人类肝S9部分(HLS9)中的稳定性，以及在HUH7、HEP3B和HEPG2细胞中的细胞毒性，在这些试验中，评价本发明的化合物。表B1概括了这些结果。
表B1
Figure BDA0002418896420000551
Figure BDA0002418896420000561
Figure BDA0002418896420000571
na＝未获得
三磷酸酯形成试验
在该试验中，一式三份地检验每个化合物。
使用在12孔板中接种的新的人类肝细胞(Biopredic，France)。每个孔接种0.76x106个细胞，并在CO2培养箱中，在37℃下，在1mL培养基中用10μΜ化合物的DMSO溶液(0.1％DMSO)培养8小时。将生长在DMEM(含有抗生素和10％胎牛血清)中的Huh7细胞接种在12孔板中，2x105个细胞/孔。24小时之后，加入1mL的10μΜ化合物(在培养基中)，并将细胞再培养6-8小时。
通过用1ml冰冷的Hank's平衡溶液(pH7.2)洗涤每个孔两次使培养终止，随后加入0.5ml冰冷的70％甲醇。加入甲醇之后，立即利用细胞刮棒，使细胞层从孔底部脱离，并用自动吸管上下地吸取5-6次。将细胞悬液转入玻璃瓶中，并在-20℃下储存过夜。
然后，在10℃下，在14000rpm下，在Eppendorf离心机5417R中，将样品(每个样品包含各个水平的前体药物、游离核苷以及单、二和三磷酸酯)旋转和离心10分钟。利用插套(insert)，将上清液转入2ml玻璃瓶中，并如下进行生物分析∶
将内标(茚地那韦)加入到每个样品中，并在两个柱系统(与QTRAP 5000质谱仪偶联)上分析所述样品(注射体积10μl)。两个柱系统由两个二元泵X和Y、两个开关阀和自动进样器组成。使用的两个HPLC柱是Synergy POLAR-RP 50*4.6mm，4μm颗粒，以及BioBasic AX50*2.1mm，5μm颗粒。LC流速是0.4-0.6ml/min(在重建条件的步骤中，使用更高的流速)。POLAR-RP柱的HPLC流动相由10mmol/L乙酸铵/2％乙腈(流动相A)和10mmol/L乙酸铵/90％乙腈(流动相B)组成，BioBasic AX柱的HPLC流动相由10mmol/L乙酸铵/2％乙腈(流动相C)和1％氢氧化铵/2％乙腈(流动相D)组成。泵Y的HPLC梯度起始于0％流动相B，并且保持2分钟。在载样阶段，使流动相通过POLAR-RP和BioBasic AX柱，前体药物、核苷和内标保留在POLAR-RP柱上；而核苷(单、二和三磷酸酯)洗脱到BioBasic AX柱上，并保留在那里。
在下一步，将液流从POLAR-RP柱切换至MS，流动相C从泵X切换至BioBasic AX柱。用0％B至100％B的梯度，经过大约两分钟，洗脱POLAR-RP柱上的化合物，并使用多反应监控模式(MRM)，利用阳性或阴性模式进行分析。在最后的步骤中，将BioBasic AX柱的液流切换至MS，用50％D的梯度，经过大约7分钟，洗脱磷酸酯，并使用MRM，利用阳性或阴性模式进行分析。在最后步骤期间，将两个柱重建条件。
然后，通过与标准曲线(通过分析已知浓度的三磷酸酯的标准样品来制备)对比，测定每个化合物的三磷酸酯浓度。在与试验样品相同的基质中，操作标准样品。由于肝细胞供体之间的磷酸化水平的变化，试验的每个操作需要内标化合物，以便能够将彼此不同的操作的结果分级。
在整个说明书和后面的权利要求中，除非上下文另外需要，否则，单词“包括”以及其变体，例如，“包含”和“含有”，意味着包括所表明的整数、步骤、整数组或步骤组，但不排除任何其它整数、步骤、整数组或步骤组。
本文提到的所有文献，包括专利和专利申请，其全部内容均引入本文作为参考。

Claims (22)

1.一种由式I表示的化合物或其药学上可接受的盐和/或溶剂化物：
Figure FDA0002418896410000011
其中：
R1是OR11或NR5R5'；
R2是H或F；
R5是H、C1-C6烷基、OH、C(＝O)R6、OC(＝O)R6或OC(＝O)OR6；
R5'是H或C1-C6烷基；
R6是C1-C22烷基或C3-C7环烷基；
R11是H或C1-C6烷基；
R13是H、苯基、吡啶基、苄基、吲哚基或萘基，其中，所述苯基、吡啶基、苄基、吲哚基和萘基任选被1、2或3个R22取代；
R15是H、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基C1-C3烷基、苯基、苄基或吲哚基；
R15'是H或C1-C6烷基；或
R15和R15'与它们相连接的碳原子一起形成C3-C7亚环烷基基团，其中，每个C1-C6烷基任选被选自卤素、OR18和SR18的基团取代，每个C3-C7环烷基、C3-C7亚环烷基、苯基和苄基任选被一个或两个独立地选自C1-C3烷基、卤素和OR18的基团取代；
R16是H、C1-C10烷基、C2-C10烯基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基C1-C3烷基、苄基或苯基，其中的任何一个基团任选被1、2或3个各自独立地选自卤素、OR18和N(R18)2的基团取代；
每个R18独立地是H、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基或C3-C7环烷基；
每个R22独立地选自卤素、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、苯基、羟基C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C6烷基羰基、C3-C6环烷基羰基、羧基C1-C6烷基、羟基、氨基CN和NO2，或与相邻的环碳原子连接的任何两个R22基团可以组合形成-O-(CR23R23')1-6-O-；
R23和R23'独立地是H或C1-C3烷基。
2.根据权利要求1的化合物，其中，R1是NH2或NHC(＝O)C1-C6烷基。
3.根据权利要求1的化合物，其中，R1是NH2，R2是H。
4.根据权利要求1至3中任一项的化合物，其中，R15'是H，R15是C1-C3烷基。
5.根据权利要求4的化合物，其中，R15是甲基。
6.根据权利要求1至5中任一项的化合物，其中，R16是C3-C10烷基。
7.根据权利要求1至6中任一项的化合物，其中，R16是2-丙基戊基或2-乙基丁基。
8.根据权利要求1至5中任一项的化合物，其中，R16是苄基。
9.根据权利要求1至5中任一项的化合物，其中，R16是C3-C7环烷基。
10.根据权利要求1-9中任一项的化合物，其中，R13是苯基或萘基，其中任何一个基团任选被一个或两个R22取代。
11.根据权利要求1-10中任一项的化合物，其中，R13是苯基。
12.根据权利要求1至11中任一项的化合物，其用作药物。
13.根据权利要求1至11中任一项的化合物，其用于治疗癌症。
14.根据权利要求1至11中任一项的化合物，其用于治疗肝癌。
15.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据权利要求1至11中任一项的化合物以及药学上可接受的佐剂、稀释剂或载体。
16.根据权利要求15的药物组合物，其用于治疗癌症。
17.根据权利要求15的用途，其中，所述癌症是肝癌。
18.根据权利要求15的用途，其中，所述癌症是肝细胞癌。
19.一种药物组合，其包含治疗有效量的根据权利要求1至11中任一项的化合物，还包含一或多种选自化学治疗剂、多耐药性逆转剂和生物反应调节剂的另外的治疗剂。
20.根据权利要求19的药物组合，其中，所述另外的治疗剂是化学治疗剂。
21.一种治疗癌症的方法，所述方法包括：给予根据权利要求1至11中任一项的化合物。
22.根据权利要求1至11中任一项的化合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
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