CN111226789A - 一种用于多花黄精组培的芽增殖培养基和多花黄精的育苗方法 - Google Patents

一种用于多花黄精组培的芽增殖培养基和多花黄精的育苗方法 Download PDF

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厉月桥
曾满生
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武晓玉
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Abstract

本发明提供了一种用于多花黄精组培的芽增殖培养基和多花黄精的育苗方法，涉及植物组织培养技术领域。本发明提供的芽增殖培养基，以MS培养基为基本培养基，包括以下质量浓度的组分：NAA 0.5～2.0mg/L、KT 0～2.0mg/L、蔗糖28～32g/L和卡拉胶6.8～7.2g/L；所述芽增殖培养基的pH值为6.1～6.3。利用本发明提供的芽增殖培养基，使得芽增殖系数达2.5以上，移栽成活率高达95％以上。

Description

一种用于多花黄精组培的芽增殖培养基和多花黄精的育苗 方法
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种用于多花黄精组培的芽增殖培养基和多花黄精的育苗方法。
背景技术
多花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua)隶属百合科(Liliaceae)黄精属(Polygonatum)，多年生草本植物，其根茎是《中国药典》中收录的药食同源类大宗药材具有补气养阴、健脾、润肺、益肾等功效，是重要的林下经济植物，也是规模化、工厂化生产药品、保健品的重要原料。因其植株形态优美，根茎含有黄精多糖、甾体皂苷、蒽醌类化合物、生物碱、木脂素、维生素和多种对人体有用的氨基酸等化合物，是同时具备食用、药用和观赏价值的林下经济植物，具有广阔的开发利用前景。多花黄精天然分布于我国亚热带南方省份，海拔500～2100m，主产地集中在四川、贵州、湖南、湖北、江西、安徽、浙江等省份，广东、福建、河南、河北等省份也见分布。
多花黄精具有根状茎肥厚、生长迅速、药用成分含量高、经济效益高等优良特性。其根状茎通常连珠状或结块，稀圆柱形，直径1～2cm。茎高50～100cm。叶互生，卵状披针形或椭圆形，叶长10～19cm，顶端尖至渐尖。花序腋生，呈伞性状，具2～7花，总花梗长1～4cm，花0.5～1.5cm，苍片微小或不存在；花被黄绿色，合生呈筒状，全长18～25mm，裂片6，长约3mm。雄蕊6枚，花丝着生近花被筒上部1/3处或中部，具乳头状突起；子房长3～6mm，花柱长12～15mm。浆果直径约1cm，熟时黑色，直径7～10mm。种子圆球形。多花黄精根茎富含多糖和皂苷，对提高人体免疫力、抗肿瘤、调节血脂、控制血压具有显著功效，可开发成具有保健治疗作用的重要药材。多花黄精的植株形态优美，4～9月份地上部分生长旺盛，9～4月份地上部分凋零枯萎，适合小区庭院地下草本绿化使用，具有推广应用前景。
目前多花黄精人工栽培所用苗木多采用挖取野生多花黄精根茎或采用种子育苗，导致苗木及栽培后的多花黄精个体分化大，参差不齐，影响到了人工栽培后的药材质量、产量和经济效益。现有技术中虽然多花黄精可以利用组织培养的方式进行繁殖，但组织培养所繁育出来的苗在实际种植栽培种存在不同程度的苗木死亡现象，移栽成活率低。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种用于多花黄精组培芽增殖培养基和多花黄精育苗方法。利用本发明提供的芽增殖培养基，使得芽增殖系数达6.6。利用本发明提供的多花黄精育苗方法，使得移栽成活率高达95％以上。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种用于多花黄精组培的芽增殖培养基，以MS培养基为基本培养基，包括以下质量浓度的组分：NAA 0.5～2.0mg/L、KT 0～2.0mg/L、蔗糖28～32g/L和卡拉胶6.8～7.2g/L；所述芽增殖培养基的pH值为6.1～6.3。
本发明还提供了一种多花黄精的育苗方法，包括以下步骤：
(1)选取多花黄精带芽根茎进行消毒，得到消毒后的多花黄精带芽根茎；
(2)将所述步骤(1)得到的消毒后的多花黄精带芽根茎接种于芽诱导培养基中进行芽诱导培养，得到腋芽；
(3)将所述步骤(2)得到的腋芽转接至所述的芽增殖培养基中进行分化培养，得到丛芽；
(4)将所述步骤(3)得到的丛芽转接至生根培养基中进行生根培养，得到生根苗。
优选地，所述得到生根苗后，还包括：将所述生根苗进行炼苗和移栽。
优选地，所述步骤(1)中的消毒方法包括：将所述的多花黄精带芽根茎用质量浓度为70％～75％的乙醇溶液浸泡20～30s后，再用质量浓度为0.08％～0.12％的升汞溶液浸泡6～10min。
优选地，所述步骤(2)中芽诱导培养基以MS培养基为基本培养基，包括以下质量浓度的组分：NAA 0.5～2.0mg/L、KT 0～2.0mg/L、蔗糖28～32g/L和卡拉胶6.8～7.2g/L；所述芽诱导培养基的pH值为6.1～6.3。
优选地，所述步骤(2)中芽诱导培养的条件包括：温度为22℃～26℃，环境湿度为65％～75％，光照强度为1500lx～2000lx，光照时间为10～14h/d，培养时间为28d～32d。
优选地，所述步骤(3)中分化培养的条件包括：温度为22℃～26℃，环境湿度为65％～75％，光照强度为1500lx～2000lx，光照时间为10～14h/d，培养时间为33d～37d。
优选地，所述步骤(4)中生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基，包括以下质量浓度的组分：NAA 0.1～1.5mg/L、蔗糖28～32g/L和琼脂6.0～6.2g/L；所述生根培养基的pH值为5.9～6.1。
优选地，所述步骤(4)中生根培养的条件包括：温度为22℃～26℃，环境湿度为65％～75％，光照强度为1500lx～2000lx，光照时间为10～14h/d，培养时间为20d～35d。
优选地，所述移栽的基质包括泥炭、稻壳和米糠，所述泥炭、稻壳和米糠的体积比为(4.5～5.5):(2～3):(2～3)。
本发明提供了一种用于多花黄精组培的芽增殖培养基和多花黄精育苗方法。本发明以多花黄精带芽根茎作为外植体材料，具有生长快、药用有效成分高的特点。本发明提供的培养基，为多花黄精芽的分化与生长提供了最适的外源激素配比、营养和生长环境。本发明提供的诱导芽增殖培养基，使得芽增殖系数达到6.6。利用本发明的育苗方法使得多花黄精的移栽成活率高达95％以上。
具体实施方式
本发明提供了一种用于多花黄精的芽增殖培养基，以MS培养基为基本培养基，包括以下质量浓度的组分：NAA 0.5～2.0mg/L、KT 0～2.0mg/L、蔗糖28～32g/L和卡拉胶6.8～7.2g/L；所述芽诱导培养基的pH值为6.1～6.3。
在本发明中，所述MS培养基优选包括以下质量浓度的组分：1900mg/L硝酸钾、1650mg/L硝酸铵、370mg/L七水硫酸镁、170mg/L磷酸二氢钾、440mg/L二水氯化钙、0.83mg/L碘化钾、6.2mg/L硼酸、22.3mg/L四水硫酸锰、8.6mg/L七水硫酸锌、0.25mg/L二水钼酸钠、0.025mg/L五水硫酸铜、0.025mg/L六水氯化钴、37.25mg/L乙二胺四乙酸二钠、27.85mg/L七水硫酸亚铁、100mg/L肌醇、2.0mg/L甘氨酸、0.1mg/L维生素B1、0.5mg/L维生素B6、0.2mg/L烟酸和蔗糖30g/L；所述MS培养基的pH值为5.8。
在本发明中，所述多花黄精组培芽增殖培养基，以MS培养基为基本培养基，优选包括：NAA 1mg/L、KT 1mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶7.0g/L；所芽诱导培养基的pH值优选为6.2。
在本发明中，所述芽诱导培养基中的NAA具有促进细胞分裂、促进非分化组织分化、促进生物体内物质的积累和防止老化等作用，配合激动素KT一起使用，进一步强化、稳定和完善细胞分裂素在芽增殖中的作用。本发明对所述NAA和KT的来源没有特殊限定，采用本领域常规市售产品即可。
在本发明中，所述芽诱导培养基中的蔗糖可作为培养基中的碳源，同时还有效调节培养基内的渗透压。本发明对所述蔗糖的来源没有特殊限定，采用常规市售产品即可。
在本发明中，所述芽诱导培养基中的卡拉胶用来凝固培养基。本发明对所述卡拉胶的来源没有特殊限定，采用常规市售产品即可。
本发明还提供了一种多花黄精组培方法，包括以下步骤：
(1)选取多花黄精带芽根茎进行消毒，得到消毒后的多花黄精带芽根茎；
(2)将所述步骤(1)得到的消毒后的多花黄精带芽根茎接种于芽诱导培养基中进行芽诱导培养，得到腋芽；
(3)将所述步骤(2)得到的腋芽转接至所述的芽增殖培养基中进行分化培养，得到丛芽；
(4)将所述步骤(3)得到的丛芽转接至生根培养基中进行生根培养，得到生根苗。
本发明选取多花黄精带芽根茎进行消毒，得到消毒后的多花黄精带芽根茎。在本发明中，所述多花黄精带芽根茎优选为3～4月份从土中挖出，洗去泥土，通风晒干后切取的带芽根茎。本发明优选对多花黄精带芽根茎进行清洗，所述清洗优选将带芽根茎浸泡于洗洁精水溶液中，浸泡5～15min，再用水冲洗45min以上。在本发明中，所述洗洁精水溶液浸泡的时间优选为10min。在本发明中，所述洗洁精水溶液的质量浓度优选为0.3％。
在本发明中，所述消毒方法优选包括：将所述的多花黄精带芽根茎用质量浓度为70％～75％的乙醇溶液浸泡20～30s后，再用质量浓度为0.08％～0.12％的升汞溶液浸泡6～10min。在本发明中，所述乙醇溶液的质量浓度优选为73％，所述乙醇溶液浸泡的时间优选为25s。在本发明中，所述升汞溶液的质量浓度优选为0.1％，所述升汞溶液浸泡的时间优选为8min。在本发明中，每次消毒后优选用水冲洗，所述冲洗的次数独立的优选为5～7次，更优选为6次。在本发明中，所述多花黄精带芽根茎用升汞溶液浸泡及浸泡后用水冲洗过程中优选不断摇动，本发明对所述摇动的方式没有特殊限定，摇动的目的是为了洗涤的更彻底。
本发明将所述的消毒后的多花黄精带芽根茎接种于芽诱导培养基中进行芽诱导培养。在本发明中，所述芽诱导培养基以MS培养基为基本培养基，优选包括：NAA 0.5～2.0mg/L、KT 0～2.0mg/L、蔗糖28～32g/L和卡拉胶6.8～7.2g/L；所述芽诱导培养基的pH值为6.1～6.3。在本发明中，所述多花黄精带芽根茎优选将芽外2层剥去后，再接种于芽诱导培养基中进行芽诱导培养。
在本发明中，所述芽诱导培养基中的NAA质量浓度优选为0.5～2.0mg/L，更优选为0.8～1.5mg/L，最优选为1mg/L。在本发明中，所述NAA具有促进细胞分裂、促进非分化组织分化、促进生物体内物质的积累和防止老化等作用，配合激动素KT一起使用，进一步强化、稳定和完善细胞分裂素在芽诱导中的作用。本发明对所述NAA的来源没有特殊限定，采用常规市售产品即可。
在本发明中，所述芽诱导培养基中的KT质量浓度优选为0～2.0mg/L，更优选为0.5～1.5mg/L，最优选为1mg/L。在本发明中，所述KT具有促进细胞分裂的作用。本发明对所述KT的来源没有特殊限定，采用常规市售产品即可。
在本发明中，所述芽诱导培养基中的蔗糖质量浓度优选为28～32mg/L，更优选为30mg/L。在本发明中，所述芽诱导培养基中的蔗糖可作为培养基中的碳源，同时还有效调节培养基内的渗透压。本发明对所述蔗糖的来源没有特殊限定，采用常规市售产品即可。
在本发明中，所述芽诱导培养基中的卡拉胶的质量浓度优选为6.8～7.2mg/L，更优选为7.0mg/L。所述芽诱导培养基中的卡拉胶用来凝固培养基。本发明对所述卡拉胶的来源没有特殊限定，采用常规市售产品即可。
在本发明中，所述芽诱导培养基的pH值优选为6.1～6.3，更优选为6.2。
本发明将所述腋芽转接至芽增殖培养基中进行分化培养，得到丛芽。在本发明中，优选将多花黄精带芽根茎在芽诱导培养基中培养30d的腋芽切下，转接至芽增殖培养基中进行分化培养。在本发明中，所述分化培养的时间优选为35d。
在本发明中，所述分化培养的条件包括：温度为22℃～26℃，环境湿度为65％～75％，光照强度为1500lx～2000lx，光照时间为10～14h/d，培养时间为33d～37d。在本发明中，所述温度优选为22℃～26℃，更优选为24℃；所述湿度优选为65％～75％，更优选为70％；所述光照优选为10～14h/d，更优选为12h/d；所述培养时间优选为33d～37d，更优选为35d。
本发明将所述得到的丛芽转接至生根培养基中进行生根培养，得到生根苗。在本发明中，所述生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基，包括以下质量浓度的组分：NAA 0.1～1.5mg/L、蔗糖28～32g/L和琼脂6.0～6.2g/L；所述生根培养基的pH值为5.9～6.1。在本发明中，所述生根培养基中的NAA质量浓度优选为0.1～1.5mg/L，更优选为0.5～1.3mg/L，最优选为1mg/L。在本发明中，所述NAA具有促进细胞分裂、促进非分化组织分化的作用。本发明对所述NAA的来源没有特殊限定，采用常规市售产品即可。
在本发明中，所述生根培养基中的蔗糖质量浓度优选为28～32g/L，更优选为30g/L。在本发明中，所述蔗糖可作为培养基中的碳源，同时还有效调节培养基内的渗透压。本发明对所述蔗糖的来源没有特殊限定，采用常规市售产品即可。
在本发明中，所述生根培养基中的琼脂质量浓度优选为6.0～6.2g/L，更优选为6.1g/L。在本发明中，所述琼脂用来凝固培养基。本发明对所述琼脂的来源没有特殊限定，采用常规市售产品即可。
在本发明中，所述生根培养基的pH值优选为5.9～6.1，更优选为6.0。
在本发明中，所述生根培养的条件包括：温度为22℃～26℃，环境湿度为65％～75％，光照强度为1500lx～2000lx，光照时间为10～14h/d，培养时间为20d～35d。
在本发明中，所述温度优选为22℃～26℃，更优选为24℃；所述湿度优选为65％～75％，更优选为70％；所述光照时间优选为10～14h/d，更优选为12h/d；所述培养时间优选为20d～35d，更优选为25d。
本发明优选将得到的生根苗进行炼苗和移栽。本发明优选使用组培瓶进行育苗。在本发明中，所述炼苗优选将组培瓶中的多花黄精生根瓶苗移到组培室门外，然后将组培瓶盖全部打开炼苗。在本发明中，所述移栽优选将炼苗后的带根小苗从瓶中取出，用自来水冲洗掉粘在苗上的培养基后移植到填满基质的容器袋中，移栽深度以基质覆盖全部带根茎块为好，压紧基质，移栽完后及时浇透定根水。在本发明中，所述基质包括泥炭、稻壳和米糠，所述泥炭、稻壳和米糠的体积比优选为(4.5～5.5):(2～3):(2～3)，更优选为5:2.5:2.5。在本发明中，所述容器袋的规格优选为6×10cm。
本发明优选将容器袋中培养的多花黄精苗移栽至大田中进行种植。在本发明中，移栽后的管理优选包括温度、湿度、光照强度的控制，病害的防治和施肥。在本发明中，移栽后的第一周优选采用盖膜保湿，然后揭开薄膜，保持基质湿润，空气湿度在95％以上，温度控制在15～25℃，阴棚用75％的遮阳网遮光。在本发明中，移栽的当天优选用质量浓度为0.1％的多菌灵溶液喷施消毒，之后每周喷雾消毒一次，连续4周之后，可将薄膜去除。在本发明中，移栽后待多花黄精生长稳定，优选将遮阳网换成50％透光度，优选喷施质量分数为0.1％的复合肥溶液，优选每10～15d喷施一次。本发明对所述复合肥没有特殊限定，优选N-P-K＝15-15-15的市售产品即可。
下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
多花黄精组培芽增殖培养基，以MS培养基为基本培养基，含有NAA0.5mg/L、KT0.5mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶7.0g/L；芽增殖培养基的pH值为6.2。
实施例2
多花黄精组培芽增殖培养基，以MS培养基为基本培养基，含有NAA1.0mg/L、KT1.0mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶7.0g/L，芽增殖培养基的pH值为6.2。
实施例3
多花黄精组培芽增殖培养基，以MS培养基为基本培养基，含有NAA1.5mg/L、KT1.5mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶7.0g/L，芽增殖培养基的pH值为6.2。
实施例4
多花黄精组培芽增殖培养基，以MS培养基为基本培养基，含有NAA2.0mg/L、KT2.0mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶7.0g/L，芽增殖培养基的pH值为6.2。
对比例1
多花黄精组培芽增殖培养基，以MS培养基为基本培养基，含有NAA0mg/L、KT 0mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶7.0g/L，芽增殖培养基的pH值为6.2。
表1 实施例1～4和对比例1的芽增殖培养结果
Figure BDA0002177314560000081
实施例5
多花黄精组培育苗方法
外植体准备与处理：
于2017年3月份将多花黄精根茎从土中挖出，洗去泥土，移至通风处晾干，然后将带芽根茎切取下来，用洗洁精水溶液浸泡10min，再用自来水冲洗45min以上，准备完后转置到超净工作台进行下一步灭菌操作。
外植体灭菌消毒
在超净工作台上，将准备好的外植体先用体积百分比浓度为70％的酒精浸泡消毒25s，立即倒掉酒精后用无菌水冲洗6次，然后加入质量浓度为0.1％的升汞溶液，浸泡8min，期间要不断摇动，倒掉升汞溶液用无菌水冲洗6次，冲洗时要不断摇动。
外植体芽诱导
将灭菌消毒好的多花黄精带芽根茎，将芽外2层剥去，灭菌伤口切去后接入配置好的外植体芽诱导培养基中进行培养；所述芽诱导培养基是在MS基本培养基中添加NAA0.5mg/L、KT 0.5mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶7.0g/L配置而成，其pH值为6.2。
培养条件：培养温度控制在(24±2)℃，光照强度控制在1500lx，每天光照时间12h，湿度控制在70％。
芽增殖培养
将外植体芽诱导培养30d的腋芽切下转接到芽增殖培养基中进行增殖培养；增殖培养时间为35d，分化形成新的芽丛，将芽丛中的新芽切下，接入新的增殖培养基中，增殖倍数为2.5倍；经过反复继代增殖培养扩大繁殖；所述芽增殖培养基是在MS基本培养基中添加NAA 0.5g/L、KT 0.5mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶7.0g/L配置而成，其pH值为6.2。
培养条件：培养温度控制在(24±2)℃，光照强度控制在1500lx，每天光照时间12h，湿度控制在70％。
生根培养
将在增殖培养基中形成的丛芽切下，接入生根培养基中进行培养，25d后生根率达95％；所述生根培养基时在1/2MS基本培养基中添加NAA0.1mg/L、蔗糖30g/L、琼脂6.1g/L制备而成，其pH值为6.0。
培养条件：组培室培养条件为：温度控制在(24±2)℃，光照强度控制在1500lx，每天光照时间12h，湿度控制在70％。
移栽及轻基质容器育苗
生根培养35d后，将多花黄精生根瓶苗移到组培室门外炼苗7d，然后将组培瓶盖全部打开炼苗24h，再将带根小苗从瓶中取出，用自来水冲洗掉粘在苗上的培养基，移植到填满基质、规格为6×10cm的容器袋中，移栽深度以基质覆盖全部带根茎块为好，压紧基质，移栽完后及时浇透定根水；所述基质由泥炭、稻壳和米糠按5:2.5:2.5的体积混合而成。
移栽后的管理
a.移栽后的第一周采用盖膜保湿，然后揭开薄膜，保持基质湿润，空气湿度在95％以上，温度控制在15～25℃，阴棚用75％的遮阳网遮光。
b.移栽的当天用质量浓度为0.1％的多菌灵溶液喷施消毒，之后每周喷雾消毒一次，连续4周之后，将薄膜去除。
c.移栽后待多花黄精生长稳定，将遮阳网换成50％透光度的，喷施质量分数为0.1％的复合肥溶液，每10d喷施一次。
d.做好日常管理，一年后可将成活多花黄精用于人工种植，成活率达到91.4％。
实施例4
多花黄精组培育苗方法
外植体准备与处理：
于2017年4月份将多花黄精根茎从土中挖出，洗去泥土，移至通风处晾干，然后将带芽根茎切取下来，用洗洁精水溶液浸泡10min，再用自来水冲洗45min以上，准备完后转置到超净工作台进行下一步灭菌操作。
外植体灭菌消毒
在超净工作台上，将准备好的外植体先用体积百分比浓度为75％的酒精浸泡消毒25s，立即倒掉酒精后用无菌水冲洗6次，然后加入质量浓度为0.1％的升汞溶液，浸泡8min，期间要不断摇动，倒掉升汞溶液用无菌水冲洗6次，冲洗时要不断摇动。
外植体芽诱导
将灭菌消毒好的多花黄精带芽根茎，将芽外2层剥去，灭菌伤口切去后接入配置好的外植体芽诱导培养基中进行培养；所述芽诱导培养基是在MS基本培养基中添加NAA1.5mg/L、KT 1.5mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶7.0g/L配置而成，其pH值为6.2。
培养条件：培养温度控制在(24±2)℃，光照强度控制在2000lx，每天光照时间12h，湿度控制在70％。
芽增殖培养
将外植体芽诱导培养30d的腋芽切下转接到芽增殖培养基中进行增殖培养；增殖培养时间为35d，分化形成新的芽丛，将芽丛中的新芽切下，接入新的增殖培养基中，增殖倍数为6.6倍；经过反复继代增殖培养扩大繁殖；所述芽增殖培养基是在MS基本培养基中添加NAA 1.5g/L、KT 1.5mg/L、蔗糖30g/L和卡拉胶7.0g/L配置而成，其pH值为6.2。
培养条件：培养温度控制在(24±2)℃，光照强度控制在2000lx，每天光照时间12h，湿度控制在70％。
生根培养
将在增殖培养基中形成的丛芽切下，接入生根培养基中进行培养，25d后生根率达95％；所述生根培养基时在1/2MS基本培养基中添加NAA1.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂6.1g/L制备而成，其pH值为6.0。
培养条件：组培室培养条件为：温度控制在(24±2)℃，光照强度控制在2000lx，每天光照时间12h，湿度控制在70％。
移栽及轻基质容器育苗
生根培养35d后，将多花黄精生根瓶苗移到组培室门外炼苗7d，然后将组培瓶盖全部打开炼苗24h，再将带根小苗从瓶中取出，用自来水冲洗掉粘在苗上的培养基，移植到填满基质、规格为6×10cm的容器袋中，移栽深度以基质覆盖全部带根茎块为好，压紧基质，移栽完后及时浇透定根水；所述基质由泥炭、稻壳和米糠按5:2.5:2.5的体积混合而成。
移栽后的管理
a.移栽后的第一周采用盖膜保湿，然后揭开薄膜，保持基质湿润，空气湿度在95％以上，温度控制在15～25℃，阴棚用75％的遮阳网遮光。
b.移栽的当天用质量浓度为0.1％的多菌灵溶液喷施消毒，之后每周喷雾消毒一次，连续4周之后，可将薄膜去除。
c.移栽后待多花黄精生长稳定，将遮阳网换成50％透光度的，喷施质量分数为0.1％的复合肥溶液，每10d喷施一次。
d.做好日常管理，一年后可将成活多花黄精用于人工种植，成活率达到95％。
本发明实施例提供的育苗方法，使得多花黄精外植体的芽增殖系数达2.5以上；根系发达，平均根数为24.3根/株；移栽成活率高，可达95％以上。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种用于多花黄精组培的芽增殖培养基，其特征在于，以MS培养基为基本培养基，包括以下质量浓度的组分：NAA 0.5～2.0mg/L、KT0～2.0mg/L、蔗糖28～32g/L和卡拉胶6.8～7.2g/L；所述芽增殖培养基的pH值为6.1～6.3。
2.一种多花黄精的育苗方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)选取多花黄精带芽根茎进行消毒，得到消毒后的多花黄精带芽根茎；
(2)将所述步骤(1)得到的消毒后的多花黄精带芽根茎接种于芽诱导培养基中进行芽诱导培养，得到腋芽；
(3)将所述步骤(2)得到的腋芽转接至权利要求1所述的芽增殖培养基中进行分化培养，得到丛芽；
(4)将所述步骤(3)得到的丛芽转接至生根培养基中进行生根培养，得到生根苗。
3.根据权利要求2所述的育苗方法，其特征在于，得到生根苗后，还包括：将所述生根苗进行炼苗和移栽。
4.根据权利要求2所述的育苗方法，其特征在于，所述步骤(1)中的消毒方法包括：将所述的多花黄精带芽根茎用质量浓度为70％～75％的乙醇溶液浸泡20～30s后，再用质量浓度为0.08％～0.12％的升汞溶液浸泡6～10min。
5.根据权利要求2所述的育苗方法，其特征在于，所述步骤(2)中芽诱导培养基以MS培养基为基本培养基，包括以下质量浓度的组分：NAA0.5～2.0mg/L、KT 0～2.0mg/L、蔗糖28～32g/L和卡拉胶6.8～7.2g/L；所述芽诱导培养基的pH值为6.1～6.3。
6.根据权利要求2所述的育苗方法，其特征在于，所述步骤(2)中芽诱导培养的条件包括：温度为22℃～26℃，环境湿度为65％～75％，光照强度为1500lx～2000lx，光照时间为10～14h/d，培养时间为28d～32d。
7.根据权利要求2所述的育苗方法，其特征在于，所述步骤(3)中分化培养的条件包括：温度为22℃～26℃，环境湿度为65％～75％，光照强度为1500lx～2000lx，光照时间为10～14h/d，培养时间为33d～37d。
8.根据权利要求2所述的育苗方法，其特征在于，所述步骤(4)中生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基，包括以下质量浓度的组分：NAA0.1～1.5mg/L、蔗糖28～32g/L和琼脂6.0～6.2g/L；所述生根培养基的pH值为5.9～6.1。
9.根据权利要求2所述的育苗方法，其特征在于，所述步骤(4)中生根培养的条件包括：温度为22℃～26℃，环境湿度为65％～75％，光照强度为1500lx～2000lx，光照时间为10～14h/d，培养时间为20d～35d。
10.根据权利要求3所述的育苗方法，其特征在于，所述移栽的基质包括泥炭、稻壳和米糠，所述泥炭、稻壳和米糠的体积比为(4.5～5.5):(2～3):(2～3)。
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