CN111175292A - 一种检测乳酸的试纸条及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种检测乳酸的试纸条及其制备方法，试纸条包括：乳酸反应体系，形成于乳酸反应体系上的第一固定层，覆盖在第一固定层上的亲水膜；乳酸反应体系包括：形成于U形胶之间的扩散膜，设置于扩散膜下的滤血膜，设置于滤血膜下的反应膜，设置于第一固定层下并用于固定滤血膜和反应膜的第二固定层，设置于第二固定层下的底板，设置于底板上并位于反应膜下的检测孔；运用本发明的制备方法制备出的试纸条配合干式生化分析仪使用能快速定量检测人或动物体内体液中乳酸的含量，检测出来的结果与医院检验结果匹配性好。

Description

一种检测乳酸的试纸条及其制备方法

技术领域

本发明涉及检测领域，特别是一种检测乳酸的试纸条及其制备方法。

背景技术

乳酸是人体代谢过程中的一种产物，其英文缩写为Lac，机体各组织由于功能或器质性病变引起的血液灌流量降低，或由于低氧血症导致的组织缺氧均可引起血液乳酸升高。测定乳酸应注意：在空腹及休息状态下抽血；抽血时不用止血带，不可用力握拳。乳酸升高可见于以下疾病：1.休克、心失代偿、血液病、肺功能不全。2.肝硬化、肝癌晚期。3.重症肌无力。4.无酮中毒的糖尿病昏迷，各种疾病终末期，乳酸可达到25mmol/L，甚至更高，此时即使酸中毒和低氧血症已得到处理，高乳酸血症常不可逆转。

血清乳酸水平代表患者的循环功能是否存在异常。通常血清乳酸的正常值在2.0毫摩尔每升以下。如果血清乳酸水平超过2.0毫摩尔每升，则提示血管内血容量绝对不足或相对不足。此时应给患者适当增加补液量或经口进水，以维持循环容量稳定。如果患者血清乳酸水平迅速升高，超过4.0毫摩尔每升则提示已经出现乳酸酸中毒，应尽快启动静脉补液治疗，并密切监测血清乳酸水平，直至降到2.0毫摩尔每升以下。

乳酸可作为反映组织缺氧一个较为敏感、可靠的指标，并有估价病人的预后，有一定的实用价值；正常人动脉血乳酸浓度为0.1-1mmol/L,此浓度反映乳酸产生速率与移除速率间的平衡，参考范围为0.5～1.7mmol/L(5-15mg/dl)。由于机体乳酸的升高，当乳酸浓度过超过去时1.5-2.0mmol/L,应当考虑组织氧合不中。特别是乳酸测量电极的成功研制，你快速、简便测量血内乳酸成为可能，大大推动了乳酸监测在临床的应用。

乳酸的测试方法有化学法、电化学法、液体试剂酶反应法。化学法操作系复杂、时间长、准确性差；电化学法灵敏度高，线性范围宽，快速，但设备偏大，价格贵，操作复杂，不适用于常规试验室和户外等的检测。液体试剂酶反应法采用酶催化法，灵敏度高，线性范围宽，用于自动生化仪或血气分析仪的检测，但操作也比较复杂，而且试剂耗材比较贵，也不适用于基层或户外检测。所以市场急需一种方便，简捷，快速检测的方法检测乳酸，本发明解决了这个问题。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于检测乳酸的试纸条及其制备方法，本试纸条配合干式生化分析仪使用能快速定量检测人或动物体内体液中乳酸的含量，检测出来的结果与医院检验结果匹配性好。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

一种检测乳酸的试纸条，包括：乳酸反应体系，形成于乳酸反应体系上的第一固定层，覆盖在第一固定层上的亲水膜；乳酸反应体系包括：形成于U形胶之间的扩散膜，设置于扩散膜下的滤血膜，设置于滤血膜下的反应膜，设置于第一固定层下并用于固定滤血膜和反应膜的第二固定层，设置于第二固定层下的底板，设置于底板上并位于反应膜下的检测孔。

前述的一种检测乳酸的试纸条，第一固定层为U型胶。

前述的一种检测乳酸的试纸条，第二固定层为双面胶。

前述的一种检测乳酸的试纸条，亲水膜上设置有气孔。

前述的一种检测乳酸的试纸条，亲水膜上设置有观察窗。

前述的一种检测乳酸的试纸条，反应膜上的反应试剂的配方按照质量份数包括：5-50KU/L的乳酸氧化酶，5-50KU/L的丙酮酸氧化酶，5-50KU/L辣根过氧化物酶，5-50KU/L的抗坏血酸氧化酶，1-4份成膜剂，2.6-7.5份稳定剂，0.1-0.5份表面活性剂，1.02-4份显色物质。

前述的一种检测乳酸的试纸条，成膜剂包括：羟乙基纤维素，羟甲基纤维素，羟丙基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮，聚乙烯醇，壳聚糖，环糊精。

前述的一种检测乳酸的试纸条，稳定剂包括：蛋白类稳定剂，蔗糖，海藻糖，多糖类稳定剂，聚乙二醇稳定剂，氯化镁，Proclin300。

前述的一种检测乳酸的试纸条，反应膜上的反应试剂的配方按照质量份数包括：10KU/L乳酸氧化酶，25KU/L丙酮酸氧化酶，25KU/L抗坏血酸氧化酶，25KU/L辣根过氧化物酶，2份聚乙烯吡咯烷酮，2份牛血清白蛋白，3份海藻糖，2份氯化镁，0.5份Proclin300，0.1份tween-20，0.5份N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-贰甲基苯胺钠盐，2份4-氨基安替比林。

一种检测乳酸的试纸条的制备方法，包括如下步骤：

步骤一，按照如下配方准备材料，制作反应液：

配方包括：5-50KU/L的乳酸氧化酶，5-50KU/L的丙酮酸氧化酶，5-50KU/L辣根过氧化物酶，5-50KU/L的抗坏血酸氧化酶，1-4份成膜剂，2.6-7.5份稳定剂，0.1-0.5份表面活性剂，1.02-4份显色物质；将这些材料加入到缓冲液中搅拌后得到反应液待用；

步骤二，反应膜制作：

将反应膜浸泡在反应液中后取出，干燥待用；

步骤三，分别将底板，处理好的反应膜，滤血膜，双面胶，扩散膜，U型胶，亲水膜压紧后得到试纸条成品。

本发明的有益之处在于：

乳酸反应体系与U型胶，以及覆盖在U型胶上的亲水膜构成一个自动加样结构，当样本靠近加样口时，通过虹吸原理进行自动加样；

试纸条配合干式生化分析仪检测出来的结果与医院检验结果匹配性非常好；

本发明使用简单，无需专业人士操作，并能快速检测出人或动物体内体液中乳酸的含量，适合各个药店，门诊，研究所，社区医院，宠物医院，检验中心或其他政府普查性检查；

本发明只需要采集15ul左右的手指血，配合干式生化分析仪直接检测，2分钟之内出结果，方便用户户外或在家以及基层医疗的即使检测，并根据结果进行及时就诊或采取自救措施。

附图说明

图1是本发明的一种实施例的结构爆炸图；

图2是本发明的一种实施例的截面图；

图3是本发明的成品1与医院测试值的线性关系图；

图4是本发明的成品2与医院测试值的线性关系图；

图5是本发明的成品3与医院测试值的线性关系图；

图中附图标记的含义：

100底板，101检测孔，201反应膜，202滤血膜，200双面胶，300扩散膜，400U型胶，500亲水膜，501气孔，502观察窗。

具体实施方式

以下结合附图和具体实施例对本发明作具体的介绍。

一种检测乳酸的试纸条，包括：乳酸反应体系，形成于乳酸反应体系上的第一固定层，覆盖在第一固定层上的亲水膜500；乳酸反应体系包括：形成于U形胶之间的扩散膜300，设置于扩散膜300下的滤血膜202，设置于滤血膜202下的反应膜201，设置于第一固定层下并用于固定滤血膜202和反应膜201的第二固定层，设置于第二固定层下的底板100，设置于底板100上并位于反应膜201下的检测孔101。作为一种实施例，第一固定层为U型胶400；第二固定层为双面胶200。作为一种实施例，底板100为PET材质或PVC材质的单面胶；反应膜201为纤维素膜或尼绒膜；滤血膜202为不对称聚砜膜或尼绒膜；扩散膜300为尼绒膜；U形胶为PET材质或PVC材质的单面胶；亲水膜500为PET材质或PVC材质，亲水膜500的一边为亲水涂层。乳酸反应体系与U型胶400，亲水膜500构了一个自动加样结构，当样本靠近加样口时，通过虹吸原理进行自动加样，样本通过滤血膜202去除红细胞后到达反应膜201，通过反应膜201上的反应物质可以定量检测样本中乳酸的含量。

如图1所示，亲水膜500上设置有气孔501，亲水膜500上设置有观察窗502。

反应膜201上的反应试剂的配方按照质量份数包括：5-50KU/L的乳酸氧化酶，5-50KU/L的丙酮酸氧化酶，5-50KU/L辣根过氧化物酶，5-50KU/L的抗坏血酸氧化酶，1-4份成膜剂，2.6-7.5份稳定剂，0.1-0.5份表面活性剂，1.02-4份显色物质。

作为一种实施例，成膜剂包括：羟乙基纤维素，羟甲基纤维素，羟丙基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮，聚乙烯醇，壳聚糖，环糊精。稳定剂包括：蛋白类稳定剂，蔗糖，海藻糖，多糖类稳定剂，聚乙二醇稳定剂，氯化镁，Proclin300；蛋白类稳定剂包括：牛血清白蛋白，酪蛋白，多糖类稳定剂包括：蔗糖、海藻糖、甘露醇；聚乙二醇稳定剂包括：聚乙二醇10000，聚乙二醇6000，聚乙二醇1000；表面活性剂包括：tween-20，tween-80，tritonX-100，triton X-405，Emulgen B66，OP-10；显色物质包括：3,3',5,5'-四甲基联苯胺，N,N-双(4-磺丁基)-3-甲基苯胺二钠盐，N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-贰甲基苯胺钠盐，N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3'5-二甲氧基苯胺钠盐，苯醌，N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐。缓冲液包括：磷酸缓冲液，TRIS缓冲液，MES缓冲液。需要说明的是：这里的举例并非穷举，只要是能够适用于乳酸检测的都适用于本发明。

反应膜201上的反应试剂的配方按照质量份数包括：10KU/L乳酸氧化酶，25KU/L丙酮酸氧化酶，25KU/L抗坏血酸氧化酶，25KU/L辣根过氧化物酶，2份聚乙烯吡咯烷酮，2份牛血清白蛋白，3份海藻糖，2份氯化镁，0.5份Proclin300，0.1份tween-20，0.5份N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-贰甲基苯胺钠盐，2份4-氨基安替比林。

一种检测乳酸的试纸条的制备方法，包括如下步骤：

步骤一，按照如下配方准备材料，制作反应液：

配方包括：5-50KU/L的乳酸氧化酶，5-50KU/L的丙酮酸氧化酶，5-50KU/L辣根过氧化物酶，5-50KU/L的抗坏血酸氧化酶，1-4份成膜剂，2.6-7.5份稳定剂，0.1-0.5份表面活性剂，1.02-4份显色物质；将这些材料加入到缓冲液中搅拌后得到反应液待用；

步骤二，反应膜201制作：

将反应膜201浸泡在反应液中后取出，干燥待用；

步骤三，分别将底板100，处理好的反应膜201，滤血膜202，双面胶200，扩散膜300，U型胶400，亲水膜500压紧后得到试纸条成品。

以下通过实验验证本发明检测出来的结果与医院检验结果的匹配性；

实施例1

一种用于检测乳酸的试纸条，其制作方法包括以下步聚

1.步聚一：配制试剂A:将10KU乳酸氧化酶，25KU丙酮酸氧化酶，25KU抗坏血酸氧化酶，25KU的辣根过氧化物酶，2g的聚乙烯吡咯烷酮，2g牛血清白蛋白,3g海藻糖，2g氯化镁(稳定剂)，0.5gProclin300(稳定剂)，0.1g tween-20，0.5g N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-贰甲基苯胺钠盐，2g4-氨基安替比林加入到100mL0.1M PH值为7.0的的磷酸缓冲液中搅拌一小时后待用；

2.步聚二：反应膜201制作：将反应膜201浸泡在试剂A中5min后取中，45度环境下干燥30min后待用；

3.步聚三：按附图1和附图2的方式，分别将底板100，处理好的反应膜201、滤血膜202、双面胶200、扩散膜300、U型胶400、亲水膜500压双紧后为试纸条成品1。

试纸条评价：

评价方法为与医院结果进行比对；

将以上做的试纸条成品1与自制的干式生化分析仪测试，随时抽取有梯度的15个静脉血样品进行测试，然后与医院值相比，R平方值为0.99，见图3，数据结果见附表1。

实施例2

一种用于检测乳酸的试纸条，其制作方法包括以下步聚

1.步聚一：配制试剂A:将5KU乳酸氧化酶，10KU丙酮酸氧化酶，5KU抗坏血酸氧化酶，10KU的辣根过氧化物酶，1g的聚乙烯吡咯烷酮，0.5g牛血清白蛋白,1g海藻糖，1g氯化镁，0.1gProclin300，0.1g tween-20，0.02g N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-贰甲基苯胺钠盐，1g4-氨基安替比林加入到100mL0.1M PH值为6.4的的磷酸缓冲液中搅拌一小时后待用；

2.步聚二：反应膜201制作：将反应膜201浸泡在试剂A中5min后取中，45度环境下干燥30min后待用；

3.步聚三：按附图1和附图2的方式，分别将底板100，处理好的反应膜201、滤血膜202、双面胶200、扩散膜300、U型胶400、亲水膜500压双紧后为试纸条成品2。

试纸条评价：

评价方法为与医院结果进行比对；

将以上做的试纸条成品2与自制的干式生化分析仪测试，随时抽取有梯度的15个静脉血样品进行测试，然后与医院值相比，R平方值为0.95，见图4，数据结果见附表1。

实施例3

一种用于检测乳酸的试纸条，其制作方法包括以下步聚

1.步聚一：配制试剂A:将40KU乳酸氧化酶，50KU丙酮酸氧化酶，50KU抗坏血酸氧化酶，40KU的辣根过氧化物酶，4g的聚乙烯吡咯烷酮，2g牛血清白蛋白,4g海藻糖，3g氯化镁，0.5gProclin300，0.5g tween-20，1g N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-贰甲基苯胺钠盐，3g4-氨基安替比林加入到100mL0.1M PH值为7.6的的磷酸缓冲液中搅拌一小时后待用；

2.步聚二：反应膜201制作：将反应膜201浸泡在试剂A中5min后取中，55度环境下干燥30min后待用；

3.步聚三：按附图1和附图2的方式，分别将底板100，处理好的反应膜201、滤血膜202、双面胶200、扩散膜300、U型胶400、亲水膜500压双紧后为试纸条成品3。

试纸条评价：

评价方法为与医院结果进行比对

将以上做的试纸条成品3与自制的干式生化分析仪测试，随时抽取有梯度的15个静脉血样品进行测试，然后与医院值相比，R平方值为0.95，见图5，数据结果见附表1成品1和成品2和成品3与医院测试值的数据。

表1

由表1的结果可知，采用本发明的结构和试剂配方制成的试纸条均与医院结果具有优秀的匹配性；实施例1的配方为最优配方，匹配性最好。

本试纸条检测出来的结果与医院检验结果匹配性非常好；本发明使用简单，无需专业人士操作，并能快速检测出人或动物体内体液中乳酸的含量，适合各个药店，门诊，研究所，社区医院，宠物医院，检验中心或其他政府普查性检查；本发明只需要采集15ul左右的手指血，配合干式生化分析仪直接检测，2分钟之内出结果，方便用户户外或在家以及基层医疗的即使检测，并根据结果进行及时就诊或采取自救措施。

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，上述实施例不以任何形式限制本发明，凡采用等同替换或等效变换的方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种检测乳酸的试纸条，其特征在于，包括：乳酸反应体系，形成于所述乳酸反应体系上的第一固定层，覆盖在第一固定层上的亲水膜；所述乳酸反应体系包括：形成于U形胶之间的扩散膜，设置于所述扩散膜下的滤血膜，设置于所述滤血膜下的反应膜，设置于所述第一固定层下并用于固定滤血膜和反应膜的第二固定层，设置于所述第二固定层下的底板，设置于底板上并位于反应膜下的检测孔。

2.根据权利要求1所述的一种检测乳酸的试纸条，其特征在于，所述第一固定层为U型胶。

3.根据权利要求1所述的一种检测乳酸的试纸条，其特征在于，所述第二固定层为双面胶。

4.根据权利要求1所述的一种检测乳酸的试纸条，其特征在于，所述亲水膜上设置有气孔。

5.根据权利要求1所述的一种检测乳酸的试纸条，其特征在于，所述亲水膜上设置有观察窗。

6.根据权利要求1所述的一种检测乳酸的试纸条，其特征在于，所述反应膜上的反应试剂的配方按照质量份数包括：5-50KU/L的乳酸氧化酶，5-50KU/L的丙酮酸氧化酶，5-50KU/L辣根过氧化物酶，5-50KU/L的抗坏血酸氧化酶，1-4份成膜剂，2.6-7.5份稳定剂，0.1-0.5份表面活性剂，1.02-4份显色物质。

7.根据权利要求6所述的一种检测乳酸的试纸条，其特征在于，所述成膜剂包括：羟乙基纤维素，羟甲基纤维素，羟丙基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮，聚乙烯醇，壳聚糖，环糊精。

8.根据权利要求6所述的一种检测乳酸的试纸条，其特征在于，所述稳定剂包括：蛋白类稳定剂，蔗糖，海藻糖，多糖类稳定剂，聚乙二醇稳定剂，氯化镁，Proclin300。

9.根据权利要求6所述的一种检测乳酸的试纸条，其特征在于，所述反应膜上的反应试剂的配方按照质量份数包括：10KU/L乳酸氧化酶，25KU/L丙酮酸氧化酶，25KU/L抗坏血酸氧化酶，25KU/L辣根过氧化物酶，2份聚乙烯吡咯烷酮，2份牛血清白蛋白，3份海藻糖，2份氯化镁，0.5份Proclin300，0.1份tween-20，0.5份N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-贰甲基苯胺钠盐，2份4-氨基安替比林。

10.一种检测乳酸的试纸条的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，按照如下配方准备材料，制作反应液：

配方包括：5-50KU/L的乳酸氧化酶，5-50KU/L的丙酮酸氧化酶，5-50KU/L辣根过氧化物酶，5-50KU/L的抗坏血酸氧化酶，1-4份成膜剂，2.6-7.5份稳定剂，0.1-0.5份表面活性剂，1.02-4份显色物质；将这些材料加入到缓冲液中搅拌后得到反应液待用；

步骤二，反应膜制作：

将反应膜浸泡在反应液中后取出，干燥待用；

步骤三，分别将底板，处理好的反应膜，滤血膜，双面胶，扩散膜，U型胶，亲水膜压紧后得到试纸条成品。

Images