CN111164084B

CN111164084B - 可用作a2a受体拮抗剂的三唑并三嗪衍生物

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Publication number: CN111164084B
Application number: CN201880048230.1A
Authority: CN
Inventors: 孙三兴; 叶进启; 赵龙; 胡崇波; 陈正树
Original assignee: Zhejiang Chunhe Pharmaceutical Technology Co ltd
Current assignee: Zhejiang Chunhe Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority date: 2018-06-26
Filing date: 2018-06-26
Publication date: 2023-05-23
Anticipated expiration: 2038-06-26
Also published as: US20210292334A1; CA3103068A1; JP2021535897A; EP3814355A1; US11858942B2; JP7175034B2; WO2020002968A1; EP3814355A4; CA3103068C; KR102633145B1; KR20210025609A; CN111164084A

Abstract

本发明揭示了可作为A2A受体拮抗剂的如式(1)所示的三唑并三嗪衍生物。式(1)所示的化合物及其药物组合物可用于治疗与A2A受体功能亢进有关的疾病，例如某些类型的癌症。本发明也揭示了式(1)所示的化合物及其制备方法。

Description

可用作A2A受体拮抗剂的三唑并三嗪衍生物

技术领域

本发明涉及可用作A2A受体拮抗剂的三唑并三嗪衍生物。本发明还涉及这些化合物及其药物组合物的制备方法。所述化合物及其药物组合物可用于治疗或预防与A2A受体的异常高活性有关的疾病，例如由A2A受体介导的免疫耐受型癌症和相关的细胞异常增殖。

背景技术

腺苷是一种天然存在的嘌呤核苷，能够调节各种生理功能。腺苷能与G蛋白偶联受体(GPCR)家族成员的嘌呤受体结合，其中包括腺苷A1、A2A、A2B和A3受体(A1R、A2AR、A2BR和A3R)。其中腺苷A2A受体(A2AR)能够以一种刺激的方式与腺苷酸环化酶偶联，从而诱导经典第二信使的信号途径，包括生成环磷酸腺苷(cAMP)(Current Medicinal Chemistry.2014，21，3918-3935)。A2AR能够在中枢神经系统和周围组织中介导腺苷发挥多种生理作用。A2AR与多巴胺D2受体在基底神经节的功能性相互作用促使人们数十年来进行A2AR拮抗剂作为治疗帕金森疾病药物的研究。A2AR拮抗剂的其它医疗应用还包括认知增强、神经保护以及止痛。最近的研究表明，对A2AR的抑制还可以是癌症治疗的有效方法(Computational andStructural Biotechnology Journal.2015，15，265–272)。

研究表明，A2AR可以保护肿瘤不受到抗肿瘤T细胞和其它免疫细胞的攻击(PNAS.2006，103，No.35，13132-7)。免疫系统有一系列的调节机制来避免组织受到自身免疫或对病原体的免疫反应的损害，包括内在性机制(例如胸腺中的负选择)和外围性机制(例如免疫删除、无免疫反应和调节性T细胞的有效运用等)，这些机制都有助于建立自身免疫耐受。这些保护性机制包括受到活化的免疫反应中的淋巴细胞上调的各种抑制性受体。这些抑制性受体及其相关的信号网络被称为“免疫检查点通路”，这种负反馈机制对保护组织免受免疫伤害起着至关重要的作用。不过，尽管免疫检查点通路所产生的负反馈回路在调节过度免疫反应方面非常重要，但癌症却会使这个负反馈回路的运行失去应有的调节，并为肿瘤的免疫逃避提供了有效的途径。在众多的负反馈信号通路中，腺苷信号通路就是其中之一。通过抑制免疫反应，它能够有效地保护自身组织免受免疫损伤。

胞外腺苷可以通过结合腺苷受体(包括A1R、A2AR、A2BR和A3R)进行信号传导(DrugDev.Res.1996,39,243–52)。由于A2AR和A2BR在多种免疫细胞和内皮细胞上都有表达,胞外腺苷通过A2AR(高亲和力)和A2BR(低亲和力)所传递的腺苷信号在免疫应答过程中对组织的自身保护十分有效(Autoimmunity.2007,40,425–32；Handb.Exp.Pharmacol.2009,193,399–441；Cancer Discov.2014,4,879–88)。特别是,由于腺苷对A2AR具有更高的亲和力,以及A2AR在众多的免疫细胞中都高表达,对免疫反应的这种自身保护大多通过A2A腺苷受体完成(Nature.2001,414,916–20)。

在正常生理条件下,细胞可以通过快速的细胞摄取来平衡胞外腺苷的含量,从而防止胞外腺苷的水平过高(Clin.Invest.2012,122,693–710；Gastroenterology.2009,136,607–18)。然而,在肿瘤微环境中,细胞更新、组织破裂和局部缺氧都会将大量的ATP和腺苷释放到细胞周围环境中(Am.J.Physiol.1993,265,C577–606；Cancer Res.1997,57,2602–5)。此外,虽然部分胞外腺苷是在细胞应激时由胞内的ATP代谢转化产生和直接释放出的,胞外腺苷还能够通过外核苷酸酶CD39和CD73对胞外的ATP和ADP进行串联分解代谢产生。在肿瘤微环境中,CD39和CD73在许多类型的细胞上都有高表达,例如内皮细胞、基质细胞、肿瘤细胞,以及尤其是一些免疫细胞亚群,包括Tregs细胞、CD8+T细胞、B细胞、NK细胞、树突状细胞(DC)、髓源抑制细胞(MDSCs)和肿瘤相关巨噬细胞(TAMS)(CancerImmunol.Res.2014,2,598–605；Cancer Discov.2014,4,879–88；Clin.Cancer Res.2013,19,5626–35；J.Biomed.Biotechnol.2012,2012,485156)。其结果是,大量产生的胞外腺苷很难被正常吸收,从而导致胞外的腺苷水平过高(Am.J.Physiol.1993,265,C577–606；Cancer Res.1997,57,2602–5；Am.J.Physiol.1987,252,H886–93)。使用微透析探针进行的研究表明,实体瘤中的胞外腺苷水平比邻近组织高10-20倍,这么高的腺苷水平足以破坏免疫细胞的免疫功能(Cancer Res.1997,57,2602–5)。

研究也确实证明，胞外腺苷水平的升高和A2AR的激活具有广泛的免疫抑制作用(Cancer Res.2007，67，5949–56)，包括免疫抑制细胞因子(TGF-beta and IL-10等)的大量产生(Blood.2008，111，251–9；Eur.J.Immunol.2010，40，682–7)，其它免疫检查点通路受体(例如PD-1and LAG-3)的上调(Blood.2008，111，251–9；J.Immunol.2007，178，4240–9)，Foxp3在CD4+T细胞上的表达上升，并因而增加其转变为调节性T细胞(Tregs)的程度，以及诱导效应性T细胞的免疫无能(Blood.2008，111，251–9)。由于Tregs具有更高的CD39和CD73表达量，当A2AR诱导的Foxp3表达上升将CD4+T细胞变为Tregs后，形成一个产生大量胞外腺苷的免疫抑制扩增信号回路，从而能够迅速地抑制免疫反应(J.Exp.Med.2007，204，1257–65)。最后，在A2AR信号传导的诱导下，CD8+效应细胞的细胞毒性变小，并更多地导致免疫无能(Blood 2008，111，251–9)。另外，除了抑制细胞毒性T细胞的功能外，增加的胞外腺苷还能下调肿瘤微环境中一系列免疫功能的活性，包括巨噬细胞、NK细胞、中性粒细胞和树突细胞的活性(Blood.2008，112，1822–31；Immunol Res.2006，36，91–9；Blood.2004，103，1391–7；Biochem.Pharmacol.2000，60，993–9；Am.J.Respir.Cell Mol.Biol.2009 40，251–9)。

鉴于腺苷信号传导在介导免疫反应的负反馈回路中的重要性，在肿瘤微环境中，对效应T细胞、Tregs、NK细胞、树突状细胞(DC)、骨髓源抑制细胞(MDSCs)和肿瘤相关巨噬细胞(TAMS)上的A2A受体的药物封阻可能能够抵消由腺苷所介导的免疫抑制作用，并在各个方面增强免疫反应，包括增强T细胞的激活、扩增和效应性功能。用小鼠进行的乙型肝炎和败血症模型的体内研究表明，在用基因或药物方式阻断A2AR通路以后，动物的炎症反应和组织伤害甚至能够达到失去控制的程度。这些研究中效应性T细胞增殖及其对肿瘤的杀伤能力均明显增强，证明了A2AR阻断剂的有效性。事实上，即使短时间的药物性A2AR封阻也能够增强免疫记忆能力，也能在初始抗原刺激几周后，还能够增强免疫功能。特别值得强调的是，其它的炎症控制机制并不能有效地补偿由于A2AR信号传导阻断而导致的组织损伤，因此，A2AR信号传导是一种十分关键的非冗余的免疫反应负反馈信号控制机制(Computational and Structural Biotechnology Journal.2015，13，265–272；CancerImmunol.Immunother.2012，61，917–26)。因此，对A2AR的药物阻断可望成为一种治疗癌症和其它类型异常细胞增殖的有效疗法。

本发明的目标是提供一种具有所希望的药学特性的新型A2AR拮抗剂。通过恢复或增强免疫反应，用本发明的A2AR拮抗剂能够有效地治疗和预防癌症以及其它类型的细胞异常增殖。

发明内容

本发明是关于式(1)所示的三唑并三嗪化合物，包括其水合物、溶剂化物、药学上可接受的盐、前药和其复合物等：

其中

R为氢或任选地带有取代基的C_1-5烷基；任意的任选地带取代基的烷基被卤素、氰基、羟基、硝基、氨基、烷基氨基、环烷基氨基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基或三氟乙氧基取代；

Ar₁为5-6元芳环，所述5-6元芳环任选地被卤素、氧代基、氰基、甲基、甲氧基、三氟甲基或三氟甲氧基取代；

Ar₂为单环或双环芳环，所述单环或双环芳环任选地被卤素、羟基、氰基、甲基、甲氧基、三氟甲基或三氟甲氧基取代；

Q为任选地被X取代的单环或双环芳环，在氮原子上任选地被Y和Z取代的氨基羰基、在氮原子上任选地被Y和Z取代的氨基磺酰基、硝基，或氰基取代。X为卤素、氰基、羟基、硝基、氨基、烷基氨基、甲氧基、乙氧基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、任选地被取代的C_1-9烷基，任选地带有取代基的C_1-9环烷基，任选地带有取代基的C_1-9烯基，任选地带有取代基的C_1-9环烯基，任选地带有取代基的芳基，任选地带有取代基的杂芳基，任选地带有取代基的芳烷基，任选地带有取代基的杂芳烷基，任选地带有取代基的杂环烷基，或任选地带有取代基的杂环烯基；前述任选地带取代基的基团被卤素、氰基、羟基、硝基、氨基、烷基氨基、环烷基氨基、氨基羰基、磺酰基、氨基磺酰基、羰基氨基、磺酰基氨基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基，三氟乙氧基、杂环烷基、芳基、杂芳基、聚氧乙烯、聚氧丙烯、C_1-3烷基聚氧乙烯，或C_1-3烷基聚氧丙烯取代。Y和Z各自独立地为氢、任选地带有取代基的C_1-9烷基、任选地可带有取代基的单环或双环C_1-9环烷基、任选地带有取代基的C_1-9烯基、任选地带有取代基的单环或双环C_1-9环烯基、任选地带有取代基的芳基、任选地带有取代基的杂芳基、任选地带有取代基的芳烷基、任选地带有取代基的杂芳烷基、任选地带有取代基的杂环烷基，或任选地带有取代基的杂环烯基；任意所述任选地带取代基的基团被卤素、氰基、羟基、硝基、氨基、烷基氨基、环烷基氨基、氨基羰基、磺酰基、氨基磺酰基、羰基氨基、磺酰基氨基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、聚氧乙烯、聚氧丙烯、C_1-3烷基聚氧乙烯、或C_1-3烷基聚氧丙烯取代；或Y和Z连接以形成任选地带有取代基的具有3至10个环原子的环；所述任选地带取代基的基团被卤素、氰基、羟基、氧代基、硝基、氨基、烷基氨基、环烷基氨基、氨基羰基、磺酰基、氨基磺酰基、羰基氨基、磺酰基氨基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、聚氧乙烯、聚氧丙烯、C_1-3烷基聚氧乙烯、或C_1-3烷基聚氧丙烯取代。

在本发明的一个实施方案中，式(1)所示的化合物中的R为氢、甲基或三氟甲基。

在本发明的一个优选实施方案中，式(1)所示的化合物中的R为氢或甲基。

在本发明的一个最优实施方案中，式(1)所示的化合物中的R为氢。

在本发明的另一个实施方案中，式(1)所示的三唑并三嗪化合物中的Ar₁为可带有取代基的咪唑基，三唑基，四唑基，呋喃基，噻吩基，恶唑基，异恶唑基，噻唑基，异噻唑基，恶二唑基，噻二唑基，苯基，吡啶基，哒嗪基，嘧啶基，或三嗪基；任意所述带取代基基团中的取代基为卤素，氧代基，氰基，甲基，甲氧基，三氟甲基或三氟甲氧基。

在本发明的一个优选实施方案中，式(1)所示的化合物中的Ar₁选自表(1)中的芳香基团。

在本发明的一个最优实施方案中，式(1)所示的化合物中的Ar₁为2-呋喃基。

表1:式(1)中Ar₁的优选结构

在本发明的另一个实施方案中，式(1)所示的化合物中的Ar₂为任选地带有取代基的咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、噻吩基、恶唑基、异恶唑基、噻唑基、异噻唑基、恶二唑基、噻二唑基、苯基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、氮杂吲哚基、氮杂吲唑基、嘌呤基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并异恶唑基、苯并异噻唑、苯并恶唑基、苯并噻二唑、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、酞嗪、喹唑啉基、噌啉基、萘啶基、吡啶并嘧啶基、吡啶并吡嗪，或蝶啶基；所述任选地带取代基的芳香环被卤素、羟基、氰基、硝基、甲基、甲氧基、三氟甲基或三氟甲氧基取代。

在本发明的一个优选实施方案中，式(1)所示的化合物中的Ar₂为任选地带有取代基的苯基、吡啶基、哒嗪基或嘧啶基；任意所述任选地带取代基的芳香环被卤素、羟基、氰基、甲基、甲氧基、三氟甲基或三氟甲氧基取代。

在本发明的一个最优实施方案中，式(1)所示的化合物中的Ar₂为任选地被卤素或羟基取代的苯基或吡啶基。

在本发明的另一个实施方案中，式(1)所示的化合物中的Q为任选地被X取代的单环或双环芳环；X为卤素、氰基、羟基、硝基、氨基、烷基氨基、甲氧基、乙氧基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、任选地带有取代基的C_1-9烷基、任选地带有取代基的C_1-9环烷基、任选地带有取代基的C_1-9烯基、任选地带有取代基的C_1-9环烯基、任选地带有取代基的芳基、任选地带有取代基的杂芳基、任选地带有取代基的芳烷基、任选地带有取代基的杂芳烷基、任选地带有取代基的杂环烷基、或任选地带有取代基的杂环烯基；所述任选地带取代基的基团被卤素、氰基、羟基、硝基、氨基、烷基氨基、环烷基氨基、氨基羰基、磺酰基、氨基磺酰基、羰基氨基、磺酰基氨基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、杂环烷基、芳基、杂芳基、聚氧乙烯、聚氧丙烯、C_1-3烷基聚氧乙烯、或C_1-3烷基聚氧丙烯取代。

在本发明的一个优选实施方案中，式(1)所示的化合物中的Q为任选地带有取代基X的5-6元芳环。X为卤素、氰基、羟基、硝基、氨基、烷基氨基、甲氧基、乙氧基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、可带有取代基的C_1-5烷基、可带有取代基的C_1-5环烷基、可带有取代基的C_1-5烯基、可带有取代基的C_1-5环烯基、可带有取代基的芳基、可带有取代基的杂芳基、可带有取代基的芳烷基、可带有取代基的杂芳烷基、可带有取代基的杂环烷基、或可带有取代基的杂环烯基；所述带取代基的基团被卤素、氰基、羟基、硝基、氨基、烷基氨基、环烷基氨基、氨基羰基、磺酰基、氨基磺酰基、羰基氨基、磺酰基氨基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、杂环烷基、芳基、杂芳基、聚氧乙烯、聚氧丙烯、C_1-3烷基聚氧乙烯或C_1-3烷基聚氧丙烯取代。

在本发明的一个最优实施方案中，式(1)所示的化合物中的Q为任选地被X取代的四唑环。X为任选地带有取代基的C_1-3烷基或任选地带有取代基的杂环烷基；任意的所述任选地带取代基地基团被卤素、氰基、羟基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、杂环烷基、芳基、或杂芳基取代。

术语“烷基”包括含有一定碳原子数的直链和支链饱和脂肪族烃基。例如，C₄烷基包括正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。术语“环烷基”包括含有一定碳原子数的单环和双环饱和脂肪族烃基。

术语“烯基”包括含有至少一个碳-碳双键的直链和支链脂肪族烃基。优选地，存在一个碳-碳双键。

除非另有说明，术语“芳基”包括含有5至14个环原子的单环和双环芳环，优选地含有6至10个环原子。所述芳基可以任选地被一个或多个取代基取代。除非另有说明，术语“芳基”还包括含有5至14个环原子的单环和双环杂芳基环，优选地含有6至10个环原子。术语“杂环烷基”包括含有3至14个环原子的饱和单环和双环系统，优选地含有4至10个环原子，其中，所述原子中的一个或一个以上是非碳元素，例如氮、氧或硫，这些杂元素既可单独存在，也可与其它杂元素一起存在。杂环烷基的例子包括，例如氮杂环丁烷基、六氢氮杂吡啶基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、四氢呋喃基、硫代吗啉基和四氢噻吩基，以及其N-氧化物。

术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘。术语“三氟甲基”是指“-CF₃”基团，术语“羟基(“hydroxyl”或“hydroxy”)”是指“-OH”基团。

本发明中式(1)所示的化合物可以以一种或多种几何异构体、对映异构体、非对映异构体或互变异构体的形式存在。本发明中式(1)所示的化合物包括所有这些形式的异构体，包括外消旋体和其它形式的混合物。

另一方面，本发明中式(1)所示的化合物可以以溶剂化物或非溶剂化物的形式存在。术语“溶剂化物的”在本文中用于描述包含本发明的化合物和药学上可接受的溶剂分子例如水和乙醇分子的化合物复合体。本发明中式(1)所示的化合物包括其所有的溶剂化物或非溶剂化物形式。

另一方面，本发明中的式(1)所示的化合物可以以药学上可接受的盐的形式存在。术语“药学上可接受的盐”是指生理上或毒理学上能够容许的盐，且在适当的时候，包括其药学上可接受的碱加成盐和酸加成盐。本发明中式(1)所示的化合物包括其所有药学上可接受的盐。

另一方面，本发明中式(1)所示的化合物可以以药学上可接受的纳米颗粒的形式存在。包含式(1)所示化合物的纳米颗粒可以被设计以改善药物的药代动力学和生物分布性能。例如，可以把式(1)所示的化合物包裹在脂质体中，这可能能够延长药物在体内分布过程中的寿命。由于纳米颗粒将优先在肿瘤细胞周围的多孔状血管中泄漏出，适当尺寸的纳米颗粒还可具有更好的安全性。这么做还有助于降低药物的有效剂量。

另一方面，本发明中式(1)所示的化合物可以以前药的形式存在。术语“前药”是指能够通过体内代谢过程(例如，通过水解、还原或氧化)转化为本发明的化合物的化合物。式(1)所示的本发明的化合物包括其所有形式的前药。

另一方面，本发明中式(1)所示的化合物还包括药学上可接受的同位素变体，即其中有一个或多个原子被具有相同原子序数但不同原子质量的原子取代。适合进行这种同位素置换的原子包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘和氯。有的式(1)所示化合物的同位素变体，例如氘取代的化合物，有可能因为具有更好的代谢稳定性而在有的情况下具有更好的治疗效果。在这种情况下，这样的同位素变体可以是更优选的化合物。本领域的技术人员可以用本领域已知的常规技术来制备式(1)所示化合物的同位素变体。

三唑并三嗪化合物的制备

本发明的另一个方面是可作为A2A受体拮抗剂的三唑并三嗪化合物的制备。本发明的三唑并三嗪化合物可以通过各种合成方法来制备。作为说明性的例子，合成路线(1)中列出了两种制备目标化合物的合成路线。在第一种方法中，在通过合适的制备方法得到中间体(1A)以后，用烷基氨基取代中间体(1A)上的甲磺酰基即得到三唑并三嗪化合物(1C)。在第二种方法中，在通过适当的方式得到中间体(1B)后，用烷基氨基取代中间体(1B)上的苯氧基也可得到三唑并三嗪化合物(1C)。

合成路线(1)中所需的中间体(1A)和(1B)也可以通过各种合成方法制备。作为说明性的例子，合成路线(2)中显示了中间体化合物(1A)的一种合成路线。在第一步，用适当的芳基酰肼(2A)与S-甲基异硫脲(2B)在氢氧化钠水溶液中反应后得到中间体(2C)。在后面的步骤中，先在水性介质中充分加热(2C)得到中间体(2D)，中间体(2D)与N-氰基二硫代亚氨基碳酸酯(2E)反应后得到硫化物中间体(2F)。之后，用间氯过氧苯甲酸氧化中间体(2F)即得到所需的中间体砜(1A)。如合成路线(1)所示，用合适的烷基胺亲核取代甲基磺酰基就可得到目标化合物(1C)(J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1 1995，801-808；StructuralChemistry.2013，24，1241–1251)。

合成路线(2)中的中间体(2D)也可以通过各种合成方法制备。作为说明性的例子，合成路线(3)显示了中间体(2D)的三种合成路线。值得强调的是，在这三种方法中，从甲酯或乙酯(3F)开始的合成路线通常可以提高效率，且取得更高的反应产率。

合成路线(1)中的中间体(1B)可以用合成路线(4)所示的合成路线制备。制备首先从氰尿酰氯(4A)开始，在苯酚中回流得到2，4，6-三苯氧基-1，3，5-三嗪(4B)。下一步与水合肼反应后得到2-肼-4，6-二苯氧基-1，3，5-三嗪(4C)，其与合适的酰氯反应后得到酰基酰肼(4D)。然后，酰肼(4D)在脱水条件下进行环化反应后得到2-取代的5，7-二苯氧基三唑并三嗪(4E)，在最后一步，(4E)在甲醇氨中回流处理后就可得到关键的中间体(1B)(J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1 1995，801-808)。如路线(1)所示，用合适的烷基胺与(1B)反应后即制成目标化合物(1C)。

癌症治疗

本发明的三唑并三嗪衍生物是腺苷A2AR拮抗剂，可用于治疗或预防与高活性腺苷A2A受体相关的疾病。例如，本发明的三唑并三嗪衍生物可以用于治疗帕金森氏病、认知或记忆障碍疾病和阿尔茨海默氏病等疾病。

除此之外，本发明的A2AR拮抗剂还可用于治疗或预防宿主的癌症及宿主中相关的细胞异常增殖，该宿主可以是任何多细胞脊椎动物，包括人类及非人类哺乳动物。所述宿主尤其是人类。

近年来，人们已深刻认识到淋巴细胞在肿瘤免疫中的重要性。机体对肿瘤的免疫反应包括免疫监测，在识别到肿瘤相关抗原后，这种与细胞介导的免疫有关的机制可以有效地清除新生成的肿瘤细胞。有细胞毒性免疫细胞，主要是T细胞，存在于神经母细胞瘤、恶性黑色素瘤、肉瘤，和结肠癌、乳腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌、睾丸癌、鼻咽癌和肾癌中。虽然抗体介导的抗癌作用也通常存在，但一般都比细胞免疫介导的抗癌作用小得多。

本发明的A2AR拮抗剂可用于提高宿主免疫细胞的抗肿瘤活性。所述A2AR拮抗剂能降低T细胞的免疫无能或T细胞对癌症的耐受，能使癌细胞更容易受到免疫清除，能抑制调节性T细胞的增殖，以及能够有助于记忆性T细胞的形成。本发明的A2AR拮抗剂既可以提高宿主自身具有的免疫反应，也可以提高其对各种适应性免疫疗法的功效。

在本发明的一个典型的实施方案中,治疗或预防细胞异常增殖的方法包括给患者施用有效剂量的式(1)所示的A2AR拮抗剂或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

为了使之更加有效，本发明的A2AR拮抗剂还可以与其它癌症治疗方法(例如化学疗法、肿瘤疫苗及各种免疫检查点抑制剂)联合使用，从而实现协同效应。术语“联合治疗”指活性试剂的同时给药，也可以按不同顺序先后给药。

作为联合疗法的一个实例，治疗或预防宿主中细胞异常增殖的方法包括给患者联合施用或交替施用式(1)所示的A2AR拮抗剂和一种免疫检查点抑制剂。这里的免疫检查点抑制剂可以是PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、PD-L2抑制剂、CTLA-4抑制剂、BTLA抑制剂、LAG3抑制剂、TIM-3抑制剂、B7-H3抑制剂、B7-H4抑制剂、KIR抑制剂、TIGIT抑制剂或VISTA抑制剂等。

作为另一个实例，治疗或预防宿主中细胞异常增殖的方法包括给患者联合使用或交替施用式(1)所示的A2AR拮抗剂和一种细胞疫苗。所述细胞疫苗基于与要预防的肿瘤相匹配的细胞。例如，如果一个宿主患有前列腺癌，或者有患前列腺癌的风险，所述细胞疫苗将基于前列腺癌细胞。在这种情况下，通常是给所述细胞进行一定的放射性照射，或以其它方式使其失去复制功能。也可以通过对细胞进行基因改造使其能够分泌集落刺激因子。

作为另一个实例，治疗或预防细胞异常增殖的方法包括给患者联合施用或交替施用式(1)所示的A2AR拮抗剂和嵌合抗原受体CAR-T细胞疗法。

作为另一个实例，治疗或预防细胞异常增殖的方法包括给患者联合施用或交替施用式(1)所示的A2AR拮抗剂和一种其它抗癌药物以治疗细胞异常增殖。这种抗癌药物可以是烷基化试剂、抗代谢药物、蒽环类衍生物、植物生物碱、拓扑异构酶抑制剂、抗肿瘤抗生素、激酶抑制剂或抗肿瘤抗原的单克隆抗体等。

作为另一个实例，还可以将本发明的A2AR拮抗剂与两种或更多的其它抗癌方法(例如化疗、肿瘤疫苗和免疫检查点抑制剂)联合起来应用，来实现协同作用。术语“联合疗法”包括活性试剂的同时给药和顺序给药。

药物组合物

在给宿主用药时，本发明的三唑并三嗪衍生物可以配制成适当的药物组合物。药物组合物的具体组成由所选定的给药途径决定，给药途径包括口服、肠外道、静脉、肌肉内、鼻、口腔、局部、经皮或皮下。无论是用来治疗癌症，还是治疗其它以细胞异常增殖为特征的疾病，药物组合物中所含的三唑并三嗪衍生物的剂量应足以起到有效的治疗作用，同时不会给宿主带来严重的毒副作用。每天用药或每隔几天用药都可以，用药的时间可以持续数天、数周、数月、甚至数年。

口服是施用本发明的三唑并三嗪衍生物的很方便的方式。口服药物的成分通常包括惰性稀释剂或可食用载体。药物可封装于明胶胶囊中或压缩成片剂。药片、药丸、胶囊、锭剂以及其他剂型可含有以下成分：粘合剂如微晶纤维素、黄芪胶或明胶；辅料如淀粉或乳糖；崩解剂如海藻酸或玉米淀粉；润滑剂如硬脂酸镁；助流剂如胶质二氧化硅；甜味剂如蔗糖或糖精；调味剂如薄荷、水杨酸甲酯或橙子调味剂；润湿剂或乳化剂；防腐剂；以及pH缓冲剂等，如乙酸钠或山梨醇酐单月桂酸酯。当把药物组合物放在胶囊内时，其中还可以放入液体载体如脂肪油。此外，所述药物成分还可以包含各种其它材料，例如糖涂层、虫胶或其它的肠溶剂。

本发明的三唑并三嗪衍生物也可以以酏剂、悬浮液、糖浆、饼块、或口香糖等的组分施用。除了含有三唑并三嗪衍生物外，糖浆中还可以含有甜味剂如蔗糖、防腐剂、着色剂和调味剂等。用于肠道外的、皮肤内的、皮下的或局部的药物溶液或悬浮液可包括无菌稀释剂，如水、盐溶液、林格溶液、固定油、聚乙二醇、甘油、丙二醇、脂肪酸如油酸及其衍生物，或其它合成溶剂；抗菌剂如苄基醇或甲基对苯，抗氧化剂如抗坏血酸或亚硫酸钠，螯合剂如乙烯二胺四乙酸；缓冲剂如醋酸、柠檬酸或磷酸盐，以及张性或浸透压调节剂如氯化钠或葡萄糖等。药物原液可以装入安瓿，一次性的注射器，或由玻璃或塑料制成的多剂量的小瓶。

为了防止药物从体内快速清除，本发明的三唑并三嗪衍生物也可以放置在能够起到这种保护作用的载体中。也可应用其它各种能够控制药物释放速度的方法，例如使用植入物和微胶囊输送系统的方法。

本发明的三唑并三嗪衍生物也可以使用喷雾器、干粉吸入器、或定量喷雾吸入器等给药方式来实施给药。用这种方式给药的药物可以用盐水配制成溶液，并在其中加入苯甲醇或其它合适的防腐剂、吸收促进剂、碳氟化合物和其它常用的增溶或分散剂。

一般地说，对于一个患者而言，所要采用的治疗方案和给药剂量将取决于多种因素，包括所用的特定化合物的性能、患者的年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药时间、排泄率、病人的病理状况、治疗的目标和医生的判断。如果是联合治疗，活性成分的用量也会取决于使用哪种药物进行联合治疗。

具体实施方式

以下实施例仅仅是为了更详细地讲明本发明，这些实施例并不是为了限制本发明的范围。

实施例1

2-(呋喃-2-甲酰氨基)胍

将2-呋喃甲酰肼(37.80g,300mmol)和S-甲基异硫脲硫酸盐(41.70g,150mmol)加入NaOH水溶液(2％，1.2L)中，室温搅拌72h。反应完毕后抽滤，冰水洗涤滤饼两次，然后烘干直接用于下一步纯化(25.25g,51.00％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:10.95(s,1H),7.56(s,1H),6.91(d,J＝91.9Hz,4H),6.64(s,1H),6.45(s,1H).

实施例2

3-(呋喃-2-基)-1H-1,2,4-三唑-5-胺

将2-(呋喃-2-甲酰氨基)胍(23.20g,138mmol)加入DMF(464mL)中，125℃搅拌过夜。冷却至室温后减压浓缩除去溶剂。残留物中加入DCM(200mL)，室温打浆30min。抽滤，DCM(20mL×2)洗涤滤饼，烘干得目标产物为黄色固体(17.37g,84.00％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:12.13(s,1H),7.69(s,1H),6.69(d,J＝1.8Hz,1H),6.54(dd,J＝3.0,1.7Hz,1H),6.03(s,2H).

实施例2A

3-(呋喃-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺

在冰浴下将甲醇钠(171.4g,3172mol)和盐酸氨基胍(175.3g,1586mmol)加入到甲醇(1200mL)中搅拌。将糠酸甲酯(100g,793mmol)溶解于甲醇(300mL)中，并滴加至上述反应液中。将反应液加热至75℃搅拌过夜。将反应液过滤，滤液浓缩干后再溶解于水(50mL)中。用3N的盐酸溶液调节pH至4，并将析出固体过滤，烘干后得到69.2g黄色固体，收率58.1％。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:12.44(s,1H),7.69(d,1H),6.70(d,1H),6.54(dd,1H),6.03(s,2H).

实施例3

2-(呋喃-2-基)-5-(甲硫基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-7-胺

将3-(呋喃-2-基)-1H-1,2,4-三唑-5-胺(13.58g,90.46mmol)和N-氰亚胺基-S,S-二硫代碳酸二甲酯(13.23g,90.46mmol)混合，加热至180℃反应1.5小时。冷却至室温后用固体硅胶柱层析(PE：EA＝1：1)纯化得到7.00g白色固体，收率31.20％。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.96(s,1H),8.76(s,1H),7.93(d,J＝0.9Hz,1H),7.16(d,J＝3.3Hz,1H),6.72(dd,J＝3.4,1.7Hz,1H),2.51(s,3H).

实施例4

2-(呋喃-2-基)-5-(甲基磺酰基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-7-胺

在冰浴下将2-(呋喃-2-基)-5-(甲硫基)-[1,2,4]三唑并[1,5-α][1,3,5]三嗪-7-胺(8.0g,32.2mmol)加入到二氯甲烷(480mL)中搅拌。将3-间氯过氧苯甲酸m-CPBA(26.20g,85％,128.90mmol)溶解于二氯甲烷中，并滴加至上述反应液中。室温下搅拌22小时，将溶剂浓缩干。将粗产物溶于乙醇(135mL)，室温下搅拌0.5小时，过滤，干燥得到7.82g棕色固体，收率86.90％。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.81(s,1H),9.48(s,1H),7.99(d,J＝1.0Hz,1H),7.27(d,J＝3.4Hz,1H),6.76(dd,J＝3.4,1.8Hz,1H),3.36(s,3H).

实施例5

2-(呋喃-2-基)-N5-(2-(吡啶-4-基)乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

将2-(吡啶-4-基)乙胺(100mg,0.86mmol)和2-(呋喃-2-基)-5-(甲基磺酰基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-7-胺(230mg,0.82mmol)和三乙胺(250mg,2.46mmol)的乙腈(5mL)溶液室温搅拌过夜。然后加入水(30mL)淬灭反应，用二氯甲烷萃取(15mL×3)。有机层用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，真空浓缩。粗品经过硅胶柱层析纯化后得到41.50mg白色固体，收率15.72％。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.47(d,J＝4.5Hz,2H),8.22(s,2H),7.89(d,J＝14.3Hz,1H),7.57(d,J＝46.0Hz,1H),7.28(s,2H),7.06(s,1H),6.68(s,1H),3.54(d,J＝5.6Hz,2H),2.90(s,2H).

实施例6

4-(2-氨基乙基)苯甲酸甲酯

将4-(氰基甲基)苯甲酸甲酯(2g,11.42mmol)，NH₃/MeOH(7N,4mL)和雷尼镍(0.1g)稀释在甲醇(20mL)中，将反应液置于氢气的氛围中升温至55℃搅拌过夜。隔夜后将反应液通过硅藻土过滤，收集母液，浓缩，柱层析得目标化合物为棕色油状物(1.35g,66.0％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:7.97–7.76(m,2H),7.35(d,J＝8.2Hz,2H),3.84(s,3H),2.84–2.74(m,2H),2.71(t,J＝6.9Hz,2H).

实施例7

4-(2-(叔丁氧基羰基)氨基乙基)苯甲酸甲酯

将4-(2-氨基乙基)苯甲酸甲酯(4.5g,25mmol)溶于四氢呋喃(15mL)中，加入TEA(7.6g,75mmol)和二碳酸二叔丁酯(6.0g,27mmol)，将反应液于室温下搅拌过夜。隔夜后薄层层析显示反应完全，真空浓缩反应液，将粗产物用柱层析纯化得目标化合物为黄色固体(5.6g,收率80％)。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ:7.97(d,2H),7.26(d,2H),4.54(dr,1H),3.90(s,3H),3.38-3.40(m,2H),2.86(t,2H),1.43(s,9H).

实施例8

4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)苯甲酸

将4-(2-(叔丁氧基羰基)氨基乙基)苯甲酸甲酯(5.6g,0.20mmol)溶于四氢呋喃(50mL)和水(50mL)中，加入氢氧化钠(8.0g,2.0mmol)，将反应液升温至50℃搅拌过夜。隔夜后薄层层析显示反应完全，用2N的盐酸中和反应液后乙酸乙酯萃取，合并有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，真空干燥得目标化合物为白色固体(5.1g,收率96％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:7.84(d,2H),7.26(d,2H),6.88(t,1H),3.14-3.17(m,2H),2.74(t,2H),1.36(s,9H).

实施例9

4-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基甲酰基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯

将4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)苯甲酸(0.265g,1mmol)，2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)(0.494g,1.3mmol)和三乙胺(TEA)(0.202g,2mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，于室温下搅拌30分钟后，加入2-(吡咯烷-1-基)乙胺(0.126g,1.1mmol)并继续于室温下搅拌2小时，向反应液中补加二氯甲烷(80mL)，用水(2×20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩除去溶剂后过柱得目标化合物为白色固体(0.337g,收率93.2％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.47(s,1H),7.78(d,J＝8.2Hz,2H),7.29(d,J＝8.1Hz,2H),6.88(t,J＝5.3Hz,1H),3.51–3.42(m,2H),3.18–3.13(m,2H),2.94(br,5H),2.74(t,J＝7.4Hz,2H),2.69(s,1H),1.81(s,4H),1.36(s,9H).

实施例10

4-(2-氨基乙基)-N-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯甲酰胺

将4-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基甲酰基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(0.3g,0.83mmol)溶解在甲醇(5mL)中，加入盐酸(2mL，20％)并于30℃下搅拌17小时，浓缩掉过量的溶剂，真空干燥得粗产物，直接用于下一步反应。

实施例11

4-(2-((7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)-N-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)苯甲酰胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为淡黄色固体(收率13.1％)。LC-MS m/z[M+H]⁺:462；¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.37(s,1H),8.15(s,2H),7.87(s,1H),7.78(d,J＝7.7Hz,2H),7.53(d,J＝40.6Hz,1H),7.33(d,J＝7.4Hz,2H),7.06(d,J＝2.9Hz,1H),6.67(s,1H),3.51(d,J＝5.1Hz,2H),3.38(d,J＝6.0Hz,2H),2.91(d,J＝6.7Hz,2H),2.61(s,2H),2.54(s,4H),1.69(s,4H).

实施例12

4-(2-((7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。LC-MS m/z[M+H]⁺:478；¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.33(t,J＝5.5Hz,1H),8.18(s,2H),7.87(s,1H),7.77(d,J＝7.9Hz,2H),7.54(d,J＝42.0Hz,1H),7.34(d,J＝7.8Hz,2H),7.06(d,J＝3.2Hz,1H),6.67(s,1H),3.59–3.48(m,6H),3.37(dd,J＝13.0,6.5Hz,2H),2.91(t,J＝7.1Hz,2H),2.44(dd,J＝18.0,11.1Hz,6H).

实施例13

4-(2-((7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)-N-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)苯甲酰胺

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。LC-MS m/z[M+H]⁺:491；¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.42(s,1H),8.18(s,2H),7.87(s,1H),7.79(d,J＝8.1Hz,2H),7.60–7.47(m,1H),7.34(d,J＝7.9Hz,2H),7.06(d,J＝3.3Hz,1H),6.68(d,J＝1.6Hz,1H),4.11(s,1H),3.52(d,J＝5.6Hz,2H),3.39(s,2H),3.17(s,3H),2.92(dd,J＝8.3,6.3Hz,5H),2.57(s,4H).

实施例14

(4-(2-((7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)苯基)-(4-(2,2,2-三氟乙基)哌嗪-1-基)甲酮

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。LC-MS m/z[M+H]⁺:516；¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.15(br,2H),7.96–7.85(m,1H),7.64–7.47(m,1H),7.30(d,J＝8.9Hz,4H),7.06(d,J＝3.1Hz,1H),6.67(s,1H),3.52(d,J＝6.1Hz,4H),3.44–3.31(m,2H),3.20(q,J＝10.1Hz,2H),2.90(t,J＝7.0Hz,2H),2.61(br,4H).

实施例15

4-(2-((7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)-N-(3-(二甲基氨基)丙基)苯甲酰胺

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.44(t,J＝5.3Hz,1H),8.15(br,2H),7.87(s,1H),7.77(d,J＝8.0Hz,2H),7.51(dd,J＝25.9,20.8Hz,1H),7.34(d,J＝7.7Hz,2H),7.06(d,J＝3.2Hz,1H),6.67(s,1H),3.52(d,J＝6.0Hz,2H),3.27(dd,J＝12.8,6.7Hz,2H),2.92(t,J＝7.1Hz,2H),2.29(t,J＝7.0Hz,2H),2.16(s,6H),1.74–1.59(m,2H).

实施例16

(4-(2-((7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)苯基)-(4,4-二氟哌啶-1-基)甲酮

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.31(br,2H),7.87(s,1H),7.56(dt,J＝41.0,5.5Hz,1H),7.40–7.29(m,4H),7.05(d,J＝3.3Hz,1H),6.68(dd,J＝3.1,1.6Hz,1H),3.82–3.38(m,6H),2.90(t,J＝7.3Hz,2H),2.03(m,4H).

实施例17

(4-(2-((7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)苯基)-(4-氟哌啶-1-基)甲酮

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。LC-MS m/z[M+H]⁺:451；¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.32(br,J＝115.2Hz,2H),7.87(s,1H),7.66–7.47(m,1H),7.40–7.26(m,4H),7.06(d,J＝3.3Hz,1H),6.77–6.59(m,1H),4.89(dd,J＝48.3,3.0Hz,1H),3.79–3.34(m,6H),2.89(dd,J＝15.3,8.0Hz,2H),1.95–1.58(m,4H).

实施例18

(4-(2-((7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)苯基)-(吗啉代)甲酮

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.32(br,2H),7.92–7.85(m,1H),7.54(dd,J＝26.6,20.9Hz,1H),7.33(s,4H),7.06(d,J＝3.1Hz,1H),6.68(s,1H),3.74–3.38(m,10H),2.90(t,J＝7.2Hz,2H).

实施例19

(4-(2-((7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)苯基)-(吡咯烷-1-基)甲酮

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.31(br,2H),7.87(s,1H),7.52(dd,J＝26.3,20.9Hz,1H),7.44(d,J＝7.9Hz,2H),7.30(d,J＝7.7Hz,2H),7.06(d,J＝3.2Hz,1H),6.68(s,1H),3.52(d,J＝6.3Hz,2H),3.44(t,J＝6.7Hz,2H),3.35(d,J＝6.6Hz,2H),2.90(t,J＝7.0Hz,2H),1.89–1.72(m,4H).

实施例20

(4-(2-((7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)苯基)-(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.26(d,J＝125.8Hz,2H),7.86(s,1H),7.52(s,1H),7.30(br,4H),7.05(s,1H),6.67(s,1H),3.53(br,4H),3.31(br,2H),2.89(br,2H),2.27(br,4H),2.16(s,3H).

实施例21

(S)-(4-(2-((7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)-苯基)(3-氟吡咯烷-1-基)甲酮

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.28(br,2H),7.86(s,1H),7.63–7.43(m,3H),7.32(d,J＝7.7Hz,2H),7.06(d,J＝3.3Hz,1H),6.67(s,1H),5.31(t,J＝52.7Hz,1H),3.82–3.63(m,2H),3.58–3.41(m,4H),2.91(t,J＝7.0Hz,2H),2.19–1.99(m,2H).

实施例22

4-(2-((7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)-N-(2-(氮杂环丁烷-1-基)乙基)苯甲酰胺

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.30–8.13(m,3H),7.87(s,1H),7.77(d,J＝8.0Hz,2H),7.50(dd,J＝26.4,21.0Hz,1H),7.33(d,J＝7.7Hz,2H),7.06(d,J＝3.3Hz,1H),6.67(s,1H),3.52(d,J＝6.1Hz,2H),3.19(dd,J＝12.5,6.4Hz,2H),3.13(t,J＝6.9Hz,4H),2.92(t,J＝7.2Hz,2H),2.48(d,J＝6.7Hz,2H),1.95(p,J＝6.9Hz,2H).

实施例23

4-(2-((7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)-N-(叔丁基)苯甲酰胺

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.34(br,2H),7.87(s,1H),7.73(d,J＝8.1Hz,2H),7.67(s,1H),7.54(dt,J＝40.3,5.6Hz,1H),7.31(t,J＝7.8Hz,2H),7.06(d,J＝3.3Hz,1H),6.68(dd,J＝3.3,1.7Hz,1H),3.50(dd,J＝13.5,6.5Hz,2H),2.90(t,J＝7.3Hz,2H),1.37(s,9H).

实施例24

N5-(2-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(0.0231g,收率为12.8％)。LC-MS m/z[M+H]⁺:362；¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.86(d,J＝15.7Hz,1H),8.32(br,2H),7.87(s,1H),7.65(t,J＝7.6Hz,1H),7.58(s,1H),7.51(t,J＝5.4Hz,1H),7.31(d,J＝8.2Hz,1H),7.06(d,J＝3.2Hz,1H),6.68(s,1H),3.59–3.50(m,2H),3.01(t,J＝7.1Hz,2H).

实施例25

(2-(异喹啉-6-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯

将6-溴异喹啉(0.5g,2.4mmol)，N-[2-(三氟硼烷基)乙基]氨基甲酸叔丁酯钾(0.723g,2.88mmol)，碳酸铯(2.346g,7.2mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(Pd(dppf)Cl₂)(0.088g,0.12mmol)加入甲苯(12mL)和水(4mL)的混合溶剂中，氮气保护下升温至80℃搅拌过夜。隔夜后将反应液经过硅藻土过滤，收集母液并加水(30mL)，用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合并有机相，依次用水(20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，过柱得目标化合物为淡黄色固体(0.43g,收率65.8％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.24(s,1H),8.45(d,J＝5.7Hz,1H),7.90(d,J＝8.1Hz,2H),7.78(d,J＝5.7Hz,1H),7.65(dd,J＝8.5,1.4Hz,1H),6.95(t,J＝5.4Hz,1H),3.27(dd,J＝13.5,6.6Hz,2H),2.91(t,J＝7.2Hz,2H),1.34(s,9H).

实施例26

2-(异喹啉-6-基)乙胺

将(2-(异喹啉-6-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.25g,0.918mmol)溶解在甲醇(2mL)中，加入氯化氢(4mL，4N溶解在1,4-二氧六环中)后于室温下搅拌1.5小时，浓缩掉过量的溶剂，真空干燥得粗产物，直接用于下一步反应。

实施例27

2-(呋喃-2-基)-N5-(2-(异喹啉-6-基)乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(0.0212g,收率为8.8％)。¹HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.27(s,1H),8.37(br,3H),7.92(dd,J＝27.4,19.5Hz,3H),7.76(dd,J＝35.7,6.4Hz,2H),7.61(d,J＝44.7Hz,1H),7.06(s,1H),6.68(s,1H),3.63(s,2H),3.10(s,2H).

实施例28

2-(呋喃-2-基)-N5-(2-(喹啉-6-基)乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

标题化合物的制备与实施例27的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.85(dd,J＝4.1,1.6Hz,1H),8.51–8.06(m,3H),7.97(d,J＝8.6Hz,1H),7.85(d,J＝26.5Hz,2H),7.70(t,J＝9.8Hz,1H),7.67–7.54(m,1H),7.50(dd,J＝8.3,4.2Hz,1H),7.07(d,J＝3.3Hz,1H),6.68(d,J＝1.6Hz,1H),3.62(dd,J＝13.2,6.6Hz,2H),3.08(t,J＝7.3Hz,2H).

实施例29

4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯

将3-(4-溴苯基)-1-甲基-1H-1,2,4-三唑(0.5g,2.1mmol)，N-[2-(三氟硼烷基)乙基]氨基甲酸叔丁酯钾(0.58g,2.3mmol)，碳酸铯(2.05g,6.3mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(Pd(dppf)Cl₂)(0.077g,0.105mmol)加入在甲苯(12mL)和水(4mL)的混合溶剂中，氮气保护下升温至80℃搅拌过夜。隔夜后将反应液经过硅藻土过滤，收集母液并加水(30mL)，用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合并有机相，依次用水(20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，过柱得目标化合物为淡黄色固体(0.416g,收率65.5％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.49(s,1H),7.90(d,J＝8.1Hz,2H),7.27(d,J＝8.2Hz,2H),6.90(t,J＝5.4Hz,1H),3.91(s,3H),3.17(dt,J＝10.4,5.5Hz,2H),2.73(t,J＝7.4Hz,2H),1.37(s,9H).

实施例30

2-(4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)乙胺

将4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(0.31g,1.02mmol)溶解在甲醇(2mL)中，加入氯化氢(4mL，4N溶解在1,4-二氧六环中)后于室温下搅拌1小时，浓缩掉过量的溶剂，真空干燥得粗产物，直接用于下一步反应。

实施例31

2-(呋喃-2-基)-N5-(4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-α][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(0.1076g,收率为37.4％)。¹HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.49(s,1H),8.19(s,2H),7.98–7.84(m,3H),7.54(dd,J＝25.9,20.4Hz,1H),7.35(t,J＝7.4Hz,2H),7.13–7.01(m,1H),6.68(d,J＝1.6Hz,1H),3.91(s,3H),3.53(dd,J＝13.4,6.7Hz,2H),2.91(t,J＝7.3Hz,2H).

实施例32

4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-α][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基甲基酯)-苯甲酸

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(41.1mg,收率为10％)。¹HNMR(500MHz,DMSO-d6):8.09-8.21(m,2H),7.89(d,2H),7.86(s,1H),7.49-7.59(m,1H),7.40-7.43(m,2H),7.05(d,1H),6.67(dr,1H),3.83(s,3H),3.50-3.54(m,2H),2.93-2.96(m,2H).

实施例33

4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)苯甲酸

4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-α][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基甲基)苯甲酸(200mg,0.52mmol)和NaOH(210mg,5.2mmol)溶于四氢呋喃(10mL)与水(2mL)的混合溶剂中，40℃搅拌过夜，TLC检测反应完毕，反应液用10％HCl中和，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：甲醇＝50:1]得到的目标化合物为白色固体(32mg,16.7％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):12.75(dr,1H),8.09-8.21(m,2H),7.89(dr,3H),7.86(s,1H),7.49-7.59(m,1H),7.38(dr,2H),7.05(d,1H),6.67(s,1H),3.52(dr,2H),2.93(dr,2H).

实施例34

4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)-N，N-二甲基苯甲酰胺

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。LCMS[M+1]⁺:393.23；¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.03-8.24(m,2H),7.86(s,1H),7.49-7.58(m,1H),7.32(s,4H),7.05(s,1H),6.67(dr,1H),3.52(dr,2H),2.89-2.95(m,8H).

实施例35

4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)-N-甲基苯甲酰胺

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.35(d,1H),8.03-8.24(m,2H),7.86(s,1H),7.76(d,2H),7.49-7.58(m,1H),7.32-7.33(m,2H),7.05(d,1H),6.67(dr,1H),3.51(d,2H),2.89-2.91(m,2H),2.77(d,3H).

实施例36

4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)苯甲酰胺

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.03-8.14(m,2H),7.83(d,4H),7.45-7.55(m,1H),7.33(dr,1H),7.23(dr,1H),7.05(dr,1H),6.67(dr,1H),3.52(dr,2H),2.91(dr,2H).

实施例37

(4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)-苯基)(哌啶-1-基)甲酮

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.09-8.21(m,2H),7.87(s,1H),7.51-7.61(m,1H),7.27-7.31(m,4H),7.06(d,1H),6.67-6.68(m,1H),3.49-3.53(m,4H),3.24(dr,2H),2.86-2.90(m,2H),1.40-1.59(m,6H).

实施例38

(4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)-苯基)(3,3-二氟吡咯烷-1-基)甲酮

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.09-8.41(m,2H),7.87(s,1H),7.51-7.61(m,1H),7.48(d,2H),7.34(t,1H),7.05(d,1H),6.67-6.68(m,1H),3.88(m,2H),3.63-3.70(m,2H),3.49-3.53(m,2H),2.88-2.92(m,2H),2.39-2.43(m,2H).

实施例39

(4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)-苯基)(3-氟哌啶-1-基)甲酮

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.09-8.21(m,2H),7.87(s,1H),7.50-7.61(m,1H),7.28-7.34(m,4H),7.05(d,1H),6.67-6.68(m,1H),4.74(t,1H),4.02-4.15(m,1H),3.38-3.65(m,4H),2.86-3.07(m,3H),1.45-1.87(m,4H).

实施例40

(4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)-苯基)-((R)-3-氟吡咯烷-1-基)甲酮

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.09-8.21(m,2H),7.87(s,1H),7.45-7.58(m,3H),7.32(d,2H),7.05(d,1H),6.67(d,1H),5.31(t,1H),3.64-3.79(m,2H),3.38-3.65(m,4H),3.46-3.60(m,4H),2.89-2.92(m,2H),1.99-2.16(m,2H).

实施例41

(4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)-苯基)(3,3-二氟哌啶-1-基)甲酮

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.09-8.21(m,2H),7.87(s,1H),7.50-7.59(m,1H),7.30-7.35(m,4H),7.05(d,1H),6.67(dr,1H),3.37-3.90(m,6H),2.89-2.92(m,2H),2.04-2.11(m,2H),1.67(dr,2H).

实施例42

4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)-N-异丙基-N-甲基苯甲酰胺

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.09-8.21(m,2H),7.86(s,1H),7.48-7.56(m,1H),7.27-7.31(m,4H),7.05(d,1H),6.67(d,1H),4.68(dr,0.4H),3.79(dr,0.6H),3.51-3.52(m,2H),2.87-2.90(m,2H),2.77dr,3H),1.07(m,6H).

实施例43

4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)-N-(1-羟基-2-甲基丙-2-基)苯甲酰胺

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。LCMS[M+1]⁺:437.2；¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.09-8.21(m,2H),7.87(s,1H),7.73(d,2H),7.49-7.53(m,1H),7.47(s,1H),7.32(t,1H),7.05(d,2H),6.67(d,1H),4.91(t,1H),3.48-3.52(m,4H),2.89-2.92(m,2H),1.30(s,6H).

实施例44

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.09-8.21(m,2H),7.96(d,2H),7.87(s,1H),7.52-7.61(m,1H),742(d,2H),7.06(s,1H),6.68(s,1H),4.09(t,2H),3.48-3.52(m,2H),2.89-2.94(m,2H),1.10(s,6H).

实施例45

(4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基基)苯基)-(7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

标题化合物的制备与实施例11的合成方法类似。LCMS[M+1]⁺:482.2；¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.38(s,1H),8.09-8.21(m,2H),7.86(s,1H),7.51-7.69(m,3H),7.34-7.40(m,4H),7.23(dr,1H),7.05(d,1H),6.67(s,1H),4.61-4.77(m,2H),3.64-3.92(m,2H),3.53-3.54(m,2H),2.90-2.94(m,4H).

实施例46

苄基4-溴苯乙基氨基甲酸酯

将2-(4-溴苯基)乙胺盐酸盐(10.0g，49.9mmol)溶于四氢呋喃(40mL)与水(15mL)的混合溶剂中，冰浴至零度后依次加入Na₂CO₃(15.9g,150mmol)与CbzCl(10.2g,59.9mmol)，室温搅拌2h，TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：己烷＝1:2]得到的目标化合物为白色固体(16.7g,100％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):7.45(d,2H),7.29-7.36(m,6H),7.15(d,2H),4.99(s,2H),3.20-3.24(m,2H),2.69(t,2H).

实施例47

苄基4-氰基苯乙基氨基甲酸酯

将苄基4-溴苯乙基氨基甲酸酯(13.7g,41.1mmol)溶于DMF(40mL)溶剂中，依次加入Zn(CN)₂(4.93g,41.2mmol)与Pd(PPh₃)₄(4.75g,4.11mmol)。将反应混合液升温至升温至100℃，在氮气保护下搅拌过夜，TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，过滤，滤饼用乙酸乙酯和正己烷混合溶剂[100mL,乙酸乙酯:正己烷＝1:6]打浆半个小时，过滤，固体干燥得到的目标化合物为白色固体(8.9g,77.6％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):7.74(d,2H),7.28-7.41(m,8H),4.99(s,2H),3.25-3.29(m,2H),2.81(t,2H).

实施例48

4-(2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯

在氮气保护下，将TMSN₃(9.35g,81.2mmol)与TBAF(一水合物形式,2.65g,10.1mmol)加入苄基4-氰基苯乙基氨基甲酸酯(5.0g,20.3mmol)。反应液升温至90℃在氮气保护下搅拌过夜，TLC检测反应完毕。将反应液减压浓缩，粗品柱层析分离得到的目标化合物为白色固体(5.0g,76％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):7.95(d,2H),7.29-7.44(m,8H),5.00(s,2H),3.27-3.29(m,2H),2.81(t,2H).

实施例49

4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯A4)和4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯

将4-(2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(1.97g，6.09mmol)溶于无水THF(40mL)溶剂中，冰浴至零度，缓慢滴加2.5N(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷的正己烷溶液(10mL)，然后在0℃反应一小时，TLC检测反应完毕。反应液加入水淬灭，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：己烷＝1:2]得到4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(1.37g,67％)与4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(400mg,19％)。

4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯：¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):7.96(d,2H),7.30-7.39(m,8H),5.00(s,2H),4.42(s,3H),3.27-3.29(m,2H),2.80(t,2H).

4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯：¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):7.70(d,2H),7.45(d,2H),7.29-7.39(m,6H),5.00(s,2H),4.15(s,3H),3.27-3.29(m,2H),2.84(t,2H).

实施例50

2-(4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯基)乙胺

将4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(1.37g,0.27mmol)溶于甲醇(20mL)溶剂中，加入Pd/C(10％)，真空置换氢气后在40℃反应2小时，TLC检测反应完毕，用硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到白色固体的粗品，直接用于下一步合成反应。

实施例51

N5-(4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(109.4mg,38％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.18-8.47(m,2H),7.98(d,2H),7.87(s,1H),7.53-7.61(m,1H),7.45(t,2H),7.05(d,1H),6.67(dr,1H),4.41(s,3H),3.52-3.56(m,2H),2.89-2.96(m,2H).

实施例52

2-(4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯基)乙胺

将4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(400mg，1.18mmol)溶于甲醇(10mL)溶剂中，加入Pd/C(10％)，真空置换氢气三次，然后在40℃反应2小时，TLC检测反应完毕，用硅藻土过滤除去Pd/C，滤液减压浓缩得到白色固体的粗品，直接用于下一步合成反应。

实施例53

N5-(4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(82.7mg,24％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.12-8.21(m,2H),7.86(s,1H),7.79(d,2H),7.50-7.62(m,3H),7.05(d,1H),6.67(dr,1H),4.15(s,3H),3.55-3.56(m,2H),2.96-2.99(m,2H).

实施例54

5-(4-溴苯基)-2-甲基-2H-四唑

将5-(4-溴苯基)-2H-四唑(10g，44.43mmol)溶于无水THF(150mL)溶剂中，冰浴至零度，缓慢滴加2.5N(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷的正己烷溶液(50mL)，在0℃反应一小时，TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝1:5]得到的目标化合物为白色固体(6.24g,59％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):7.84(d,2H),7.62(d,2H),4.28(s,3H).

实施例55

4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯

将5-(4-溴苯基)-2-甲基-2H-四唑(6.24g,26.1mmol)溶于甲苯(40mL)与水(10mL)的混合溶剂中，依次加入碳酸铯(17g,52.2mmol),Pd(dppf)Cl₂(1.9g,2.61mmol)与N-[2-(三氟硼烷基)乙基]氨基甲酸叔丁酯钾(7.21g,28.7mmol)。然后在氮气保护下在80℃反应过夜，TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝2:5]得到的目标化合物为白色固体(6.3g,79.7％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):7.96(d,2H),7.38(d,2H),6.92(t,1H),4.42(s,3H),3.17-3.21(m,2H),2.77(t,2H),1.36(s,9H).

实施例56

2-(4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯基)乙胺

将4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(6.22g,20.5mmol)溶于1,4-二氧六环(4mL)溶剂中，加入4N HCl/1,4-二氧六环(4mL)溶液。室温搅拌反应过夜，TLC检测反应完毕，减压浓缩出去过量的HCl和1，4-二氧六环，得到粗品，直接用于下一步反应(5.1g,90％),(参见实施例51)。

实施例57

4-(2-乙基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯

将4-(2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(300mg，0.93mmol)溶于乙腈(15mL)溶剂中，依次加入碳酸铯(630mg，1.93mmol)与碘乙烷(800mg，5.12mmol)。在70℃搅拌2小时。TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝1:3]得到的目标化合物为白色固体(230mg,70.5％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):7.97(d,2H),7.29-7.39(m,8H),5.00(s,2H),4.73-4.77(m,2H),3.26-3.33(m,2H),2.80(t,2H),1.57(t,3H).

实施例58

2-(4-(2-乙基-2H-四唑-5-基)苯基)乙胺

将4-(2-乙基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(230mg,0.65mmol)溶于甲醇(20mL)溶剂中，加入Pd/C(10％)，真空置换氢气后在40℃反应2小时，TLC检测反应完毕，用硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到粗品为白色固体(120mg,86％)，直接用于下一步合成反应。

实施例59

N5-(4-(2-乙基-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(104mg,50％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.18-8.47(m,2H),7.98(d,2H),7.87(s,1H),7.53-7.62(m,1H),7.45(t,2H),7.05(d,1H),6.67(dr,1H),4.42-4.47(m,2H),3.52-3.56(m,2H),2.93-2.96(m,2H),1.57(t,3H).

实施例60

4-(2-异丙基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯

将4-(2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(300mg，0.93mmol)溶于乙腈(15mL)溶剂中，依次加入碳酸铯(630mg，1.93mmol)与2-碘丙烷(473mg,2.98mmol)。在70℃搅拌2小时。TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝1:3]得到的目标化合物为白色固体(253mg,74.6％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):7.97(d,2H),7.30-7.39(m,8H),5.16-5.19(m,1H),5.00(s,2H),3.27-3.33(m,2H),2.80(t,2H),1.63(dd,6H).

实施例61

2-(4-(2-异丙基-2H-四唑-5-基)苯基)乙胺

将4-(2-异丙基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(253mg,0.69mmol)溶于甲醇(20mL)溶剂中，加入Pd/C(10％)，真空置换氢气，在40℃反应2小时，TLC检测反应完毕，用硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到粗品为白色固体(143mg,90％)，直接用于下一步合成反应。

实施例62

N5-(4-(2-异丙基-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(132.7mg,56％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.18-8.47(m,2H),7.98(d,2H),7.87(s,1H),7.53-7.61(m,1H),7.45(t,2H),7.05(d,1H),6.67(dr,1H),5.15-5.18(m,1H),3.53-3.56(m,2H),2.89-2.96(m,2H),1.61(d,6H).

实施例63

4-(2-(2-甲氧基乙基)-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯

将4-(2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(300mg,1.03mmol)溶于乙腈(15mL)溶剂中，依次加入碳酸铯(674mg,2.07mmol)与1-溴-2-甲氧基乙烷(288mg,2.07mmol)。在70℃搅拌2小时。TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝1:2]得到黄色油状的目标化合物(248mg,63％)。

实施例64

2-(4-(2-(2-甲氧基乙基)-2H-四唑-5-基)苯基)乙胺

将4-(2-(2-甲氧基乙基)-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(248mg,0.65mmol)溶于甲醇(10mL)溶剂中，加入Pd/C(10％)，真空置换氢气，在50℃反应2小时，TLC检测反应完毕，用硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到粗品为黄色油状物(150mg,94％)，直接用于下一步反应。

实施例65

N5-(4-(2-(2-甲氧基乙基)-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(91.7mg,36％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.18-8.47(m,2H),8.05(d,2H),7.92(s,1H),7.57-7.66(m,1H),7.45(t,2H),7.11(d,1H),6.73(dr,1H),4.95(t,2H),3.96(t,2H),3.59-3.61(m,2H),3.29(s,3H),2.99-3.02(m,2H).

实施例66

4-(2-丙基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯

将4-(2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(232mg,0.72mmol)溶于乙腈(15mL)溶剂中，依次加入碳酸铯(700mg,3.58mmol)与1-溴丙烷(441mg,3.58mmol)。在70℃搅拌2小时。TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝1:4]得到的目标化合物为白色固体(200mg,76.6％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):7.97(d,2H),7.29-7.39(m,8H),5.00(s,2H),4.69(t,2H),3.27-3.33(m,2H),2.80(t,2H),1.96-2.00(m,2H),0.89(t,3H).

实施例67

2-(4-(2-丙基-2H-四唑-5-基)苯基)乙胺

将4-(2-丙基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(200mg,0.54mmol)溶于甲醇(20mL)溶剂中，加入Pd/C(10％)，真空置换氢气，在40℃反应2小时，TLC检测反应完毕，用硅藻土过滤，滤液减压浓缩得到粗品为白色固体(100mg,80％)，直接用于下一步合成反应。

实施例68

N5-(4-(2-丙基-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(95.4mg,66.7％收率)。¹HNMR(500MHz,DMSO-d6):8.18-8.47(m,2H),7.98(d,2H),7.87(s,1H),7.53-7.61(m,1H),7.45(t,2H),7.05(d,1H),6.67(dr,1H),4.69(t,2H),3.53-3.56(m,2H),2.93-2.96(m,2H),1.96-2.00(m,2H),0.899(t,3H).

实施例69

4-(2-(2,2,2-三氟乙基)-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯

将4-(2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(285mg,0.98mmol)溶于DMF(15mL)溶剂中，依次加入碳酸铯(645mg,1.98mmol)与2,2,2-三氟乙基4-甲基苯磺酸盐(321mg,1.97mmol)，然后在100℃搅拌2小时。TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝1:4]得到黄色液状的目标化合物(81mg,22.3％)。¹HNMR(500MHz,DMSO-d6):7.99(d,2H),7.41(d,2H),6.91(t,1H),6.01-6.06(m,2H),3.17-3.20(m,2H),2.78(t,2H),1.35(s,9H).

实施例70

2-(4-(2-(2,2,2-三氟乙基)-2H-四唑-5-基)苯基)乙胺

将4-(2-(2,2,2-三氟乙基)-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(81mg,0.22mmol)溶于1,4-二氧六环(4mL)溶剂，加入4N HCl/二氧六环(4mL)溶液，室温搅拌反应过夜，TLC检测反应完毕，减压浓缩出去HCl和二氧六环得到粗品，直接用于下一步合成反应。

实施例71

N5-(4-(2-(2,2,2-三氟乙基)-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-α][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(24.9mg,25％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.18-8.47(m,2H),8.03(dr,2H),7.87(s,1H),7.49-7.63(m,3H),7.06(s,1H),6.68(s,1H),6.04(dr,2H),3.55-3.56(m,2H),2.95-2.96(m,2H).

实施例72

4-(6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-羰基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯

将4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)苯甲酸(265mg，1mmol)，HATU(418mg，1.1mmol)和DIPEA(387mg，3mmol)溶解在DCM(10mL)中，室温下搅拌0.5小时。然后加入6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶(193mg，1mmol)，室温下搅拌过夜。TLC显示反应完成。浓缩反应混合物并通过柱色谱法纯化得到目标化合物，为黄色固体(250mg,68.1％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.47(dd,J＝14.7,4.5Hz,1H),7.78(dd,J＝69.0,7.6Hz,1H),7.56(dd,J＝11.7,8.0Hz,2H),7.36–7.28(m,3H),6.94(d,J＝5.6Hz,1H),4.83(t,J＝29.2Hz,4H),3.68–3.57(m,1H),3.24–3.08(m,3H),1.37(s,9H).

实施例73

(4-(2-氨基乙基)苯基)(5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6(7H)-基)甲酮

将4-(6,7-二氢-5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6-羰基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(250mg，0.68mmol)溶解在二氧六环(8mL)中，加入4N HCl的二氧六环溶液(3mL)。室温下搅拌2小时。TLC显示反应完成。将反应混合物真空浓缩得到粗产物，然后直接用于下一步反应。

实施例74

(4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)-苯基)(5H-吡咯并[3,4-b]吡啶-6(7H)-基)甲酮

该反应操作同示例5，得到的产物为白色固体(88.7mg,28.0％收率).¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.53–8.01(m,3H),7.90–7.49(m,5H),7.41–7.26(m,3H),7.06(d,J＝3.0Hz,1H),6.68(s,1H),4.93–4.73(m,4H),3.54(dd,J＝13.1,6.6Hz,2H),2.93(d,J＝5.6Hz,2H)；LC-MS(m/z):468.2[M+H]⁺

实施例75

2-(呋喃-2-基)-N-(4-(甲基磺酰基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-胺

该反应操作同示例5，得到的产物为白色固体(150mg,39.1％收率).¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.22(s,2H),7.91–7.80(m,3H),7.56(dd,J＝27.8,18.4Hz,3H),7.06(d,J＝3.3Hz,1H),6.68(d,J＝1.6Hz,1H),3.54(dd,J＝12.8,6.5Hz,2H),3.19(s,3H),2.99(t,J＝7.1Hz,2H).

实施例76

4-(2-((2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基)氨基)乙基)苯磺酰胺

该反应操作同示例5，得到的产物为白色固体(27.3mg,7.1％收率).¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.34(d,J＝120.0Hz,2H),7.88(s,1H),7.76(d,J＝8.0Hz,2H),7.62–7.42(m,3H),7.29(s,2H),7.06(d,J＝3.2Hz,1H),6.68(d,J＝1.5Hz,1H),3.56–3.46(m,2H),2.95(t,J＝7.2Hz,2H).

实施例77

5-溴-2-(2-甲基-2H-四唑-5-基)吡啶

在0℃下向搅拌中的5-溴-2-(2H-四唑-5-基)吡啶(452mg，2mmol)的THF(5mL)溶液中加入(重氮甲基)三甲基硅烷的己烷溶液(2M，5mL，10mmol)，然后将反应混合物在室温下搅拌3小时。TLC显示反应完成。将反应混合物用水(30mL)淬灭并用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓缩后，粗产物通过柱色谱法纯化得到目标化合物，为白色固体(180mg,28.5％收率).¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.00–8.89(m,1H),8.32(dd,J＝8.5,2.4Hz,1H),8.14(d,J＝8.4Hz,1H),4.34(s,3H).

实施例78

2-(6-(2-甲基-2H-四唑-5-基)吡啶-3-基)乙基氨基甲酸叔丁酯

将5-溴-2-(2-甲基-2H-四唑-5-基)吡啶(180mg，0.75mmol)，N-[2-(三氟硼烷基)乙基]氨基甲酸叔丁酯钾(207mg，0.83mmol)，碳酸铯(733mg，2.25mmol)和Pd(dppf)Cl₂(15mg)加入甲醇(6mL)和水(2mL)的混合溶剂中，在80℃下搅拌过夜。TLC显示反应完成。过滤反应混合物，将滤液浓缩并通过柱色谱纯化得到目标化合物，为白色固体(150mg,65.8％收率).¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.65(d,J＝1.8Hz,1H),8.17(d,J＝8.0Hz,1H),7.92(dd,J＝8.1,2.1Hz,1H),6.97(t,J＝5.4Hz,1H),4.41(s,3H),3.25(dd,J＝12.8,6.7Hz,2H),2.84(t,J＝6.9Hz,2H),1.34(s,9H).

实施例79

2-(6-(2-甲基-2H-四唑-5-基)吡啶-3-基)乙胺

将4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.49mmol)溶解在二氯甲烷(5mL)中，加入4N HCl的二恶烷溶液(3mL)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。TLC显示反应完成。将反应混合物真空浓缩得到粗产物，然后直接用于下一步反应。

实施例80

2-(呋喃-2-基)-N5-(2-(6-(2-甲基-2H-四唑-5-基)吡啶-3-基)乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-α]

[1,3,5]三嗪-5,7-二胺

该反应操作同示例5，得到的产物为白色固体(39.0mg,19.7％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.72(d,J＝6.9Hz,1H),8.27(t,J＝77.9Hz,3H),7.99(t,J＝11.4Hz,1H),7.87(s,1H),7.60(t,J＝23.5Hz,1H),7.05(d,J＝2.9Hz,1H),6.68(s,1H),4.40(s,3H),3.59(dd,J＝12.5,6.3Hz,2H),3.02(t,J＝6.6Hz,2H).

实施例81

3-(4-溴苯基)-4-甲基-4H-1,2,4-三唑

在0℃下向搅拌中的3-(4-溴苯基)-4H-1,2,4-三唑(448mg，2mmol)的THF(5mL)溶液中加入(重氮甲基)三甲基硅烷(5mL，10mmol)。室温下搅拌过夜。TLC显示反应完成。将反应混合物真空浓缩。粗产物通过柱色谱纯化得到目标化合物，为黄色油状物(100mg,21.2％收率).

实施例82

4-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯

将3-(4-溴苯基)-4-甲基-4H-1,2,4-三唑(100mg，0.42mmol)，N-[2-(三氟硼烷基)乙基]氨基甲酸叔丁酯钾(116mg，0.40mmol)，碳酸铯(410mg，1.26mmol)和Pd(dppf)Cl₂(15mg)加入在甲苯(3mL)和水(1mL)中，在80℃搅拌过夜。TLC显示反应完成。过滤反应混合物。将滤液浓缩并通过柱色谱纯化得到目标化合物，为白色固体(61mg,47.3％收率).

实施例83

2-(4-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)乙胺

向搅拌中的4-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(61mg，0.2mmol)的二氧六环(4mL)溶液中加入4N HCl的二氧六环溶液(2mL)。室温下搅拌过夜。TLC显示反应完成。将反应混合物真空浓缩得到粗产物，然后直接用于下一步反应。

实施例84

2-(呋喃-2-基)-N5-(4-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

该反应操作同示例5，得到的产物为白色固体(23.3mg,29.0％收率).¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.31(d,J＝135.6Hz,2H),7.98(s,1H),7.87(s,1H),7.72(d,J＝7.9Hz,2H),7.55(dd,J＝26.5,21.1Hz,1H),7.45(d,J＝7.8Hz,2H),7.06(d,J＝3.3Hz,1H),6.68(s,1H),3.96(s,3H),3.56(d,J＝6.0Hz,2H),2.96(t,J＝7.2Hz,2H).

实施例85

5-(吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺

在0℃下缓慢向CH₃ONa(31.49g，583mmol)和肼甲酰亚胺酰胺(64.5g，583mmol)的MeOH(450mL)溶液中加入甲基吡啶甲酸甲酯(40g，292mmol)的MeOH(120mL)溶液，在75℃下搅拌过夜。TLC显示反应完成。过滤反应混合物。浓缩滤液得到粗产物。然后加入150mL H₂O并用36％盐酸将pH调节至pH＝5。有大量固体析出，过滤得到目标化合物，为白色固体(21g,55.3％收率).¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.70–8.48(m,1H),8.06–7.82(m,2H),7.41(ddd,J＝7.2,4.8,1.4Hz,1H).

实施例86

5-(甲硫基)-2-(吡啶-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-7-胺

将5-(吡啶-2-基)-1H-1,2,4-三唑-3-胺(5.0g，31mmol)和氰基碳亚氨二硫代酸二甲酯(4.5g，31mmol)的混合物在180℃搅拌1h。TLC显示反应完成。通过柱色谱法纯化得到标题化合物，为白色固体(4.0g,50.0％收率).¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.95(d,J＝57.3Hz,2H),8.74(d,J＝4.3Hz,1H),8.22(d,J＝7.8Hz,1H),8.01(td,J＝7.7,1.7Hz,1H),7.55(dd,J＝6.6,4.8Hz,1H),2.54(s,3H).

实施例87

5-甲磺酰基-2-(1-氧化吡啶-1-鎓-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-7-胺

在0℃下向搅拌中的5-(甲硫基)-2-(吡啶-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-α][1,3,5]三嗪-7-胺(4.0g，15.4mmol)的DCM(240mL)溶液中加入m-CPBA(12.5g，61.6mmol)的DCM(120mL)溶液。室温下搅拌过夜。TLC显示反应完成，然后将反应混合物真空浓缩得到粗产物。然后加入EtOH(80mL)并将混合物在室温下搅拌1小时。过滤得到目标化合物，为白色固体(4.36g,92.2％收率).¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.95(d,J＝57.3Hz,2H),8.74(d,J＝4.3Hz,1H),8.22(d,J＝7.8Hz,1H),8.01(td,J＝7.7,1.7Hz,1H),7.55(dd,J＝6.6,4.8Hz,1H),2.54(s,3H)；LC-MS(m/z):308.1[M+H]⁺

实施例88

N5-[2-[4-(2-甲基四唑-5-基)苯基]乙基]-2-(1-氧化吡啶-1-鎓-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-α][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(120mg,27.9％收率).¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.59–8.12(m,3H),7.99(d,J＝8.2Hz,2H),7.90–7.81(m,1H),7.62(dd,J＝28.5,22.9Hz,1H),7.56–7.51(m,1H),7.45(q,J＝9.3Hz,3H),4.42(s,3H),3.60–3.53(m,2H),2.96(t,J＝7.3Hz,2H)；LC-MS(m/z):431.2[M+H]⁺

实施例89

4-(嘧啶-2-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯

将2-(4-溴苯基)嘧啶(470mg,2.00mol)、叔丁基正-[2-(三氟硼烷基)乙基]氨基甲酸叔丁酯钾盐(552mg,2.20mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(Pd(dppf)Cl₂)(146mg,0.20mmol)和碳酸铯(1300mg,4.00mmol)加入甲苯(7.5mL)和水(2.5ml)中。在80℃加热搅拌15小时，加乙酸乙酯稀释(100mL)，并用水和饱和食盐水洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥，浓缩后经过硅胶柱层析纯化得到产物，为白色固体(0.55g，收率92.0％)。¹HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.88(d,2H),8.31(d,2H),7.41(t,1H),7.35(d,2H),6.91(t,1H),3.19(q,2H),2.77(t,2H),1.37(s,9H).

实施例90

2-(4-(嘧啶-2-基)苯基)乙胺

将4-(嘧啶-2-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(550mg,1.84mol)溶解于1,4-二氧六环(3ml)，加入4M HCl的1，4-二氧六环溶液(2mL)，35℃下搅拌3小时，反应液浓缩干后得到白色固体，然后直接进行下一步反应。

实施例91

2-(呋喃-2-基)-N5-(4-(嘧啶-2-基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

将2-(4-(嘧啶-2-基)苯基)乙胺(366mg,1.84mmol)和2-(呋喃-2-基)-5-(甲基磺酰基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-7-胺(412mg,0.1.47mmol)溶解于乙腈(5mL)，加入三乙胺调节至PH＝8。反应液室温搅拌15小时后，将固体过滤，干燥得到的产物为黄色固体(390mg，收率66.5％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.88(d,2H),8.05-8.49(d,2H),8.33(d,2H),7.87(s,1H),7.53(d,1H),7.42(q,3H),7.06(d,1H),6.67(d,1H),3.06(t,2H),2.95(t,2H)；LCMS m/z[M+H]⁺:400.2

实施例92

5-(甲基磺酰基)-2-苯基-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-7-胺

目标化合物的制备与实施例4的标题化合物合成方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.83(s,1H),9.39(s,1H),8.32–8.16(m,2H),7.66–7.54(m,3H),3.38(s,3H).

实施例93

N5-(4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-苯基-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(0.132g,收率为43.7％)。LC-MS m/z[M+H]⁺:414；¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.42–8.12(d,J＝6.4Hz,3H),8.00(d,J＝8.1Hz,3H),7.59–7.42(m,6H),4.42(s,3H),3.57(d,J＝6.4Hz,2H),2.96(t,J＝7.2Hz,2H).

实施例94

4-(吡啶-2-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯

将2-(4-溴苯基)吡啶(0.6g,2.56mmol)，N-[2-(三氟硼烷基)乙基]氨基甲酸叔丁酯钾(0.708g,2.82mmol)，碳酸铯(2.5g,7.68mmo)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.095g,0.13mmol)加入在甲苯(12mL)和水(4mL)的混合溶剂中，氮气保护下升温至80℃搅拌过夜。隔夜后将反应液经过硅藻土过滤，收集母液并加水(30mL)稀释，用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合并有机相，依次用水(20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩除去溶剂，过柱得目标化合物，为白色固体(0.65g,收率85.1％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.71–8.59(m,1H),8.01(d,J＝8.2Hz,2H),7.95–7.82(m,2H),7.32(ddd,J＝8.3,4.8,2.4Hz,3H),6.91(t,J＝5.4Hz,1H),3.25–3.12(m,2H),2.76(t,J＝7.4Hz,2H),1.38(s,9H).

实施例95

2-(4-(吡啶-2-基)苯基)乙胺

将4-(吡啶-2-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(0.31g,1.04mmol)溶解在甲醇(1mL)中，加入HCl(4mL，4N HCl/1,4-二氧六环溶液)，于室温下搅拌2小时后浓缩掉过量的溶剂，真空干燥得粗产物，不经过纯化直接用于下一步反应。

实施例96

2-(呋喃-2-基)-N5-(4-(吡啶-2-基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(0.1471g,收率为44.4％)。¹HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.65(dd,J＝4.7,0.7Hz,1H),8.33(br,2H),8.03(d,J＝8.1Hz,2H),7.94(d,J＝8.0Hz,1H),7.91–7.81(m,2H),7.55(dd,J＝26.4,20.8Hz,1H),7.39(t,J＝6.9Hz,2H),7.33(ddd,J＝7.3,4.8,0.9Hz,1H),7.07(d,J＝3.2Hz,1H),6.74–6.62(m,1H),3.54(dd,J＝13.4,6.8Hz,2H),2.93(t,J＝7.3Hz,2H).

实施例97

4-(吡啶-3-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯

将3-(4-溴苯基)吡啶(0.6g,2.56mmol)，N-[2-(三氟硼烷基)乙基]氨基甲酸叔丁酯钾(0.708g,2.82mmol)，碳酸铯(2.5g,7.68mmo)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.095g,0.13mmol)加入在甲苯(12mL)和水(4mL)的混合溶剂中，氮气保护下升温至80℃搅拌过夜。隔夜后将反应液经过硅藻土过滤，收集母液并加水(30mL)稀释，用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合并有机相，依次用水(20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩除去溶剂，将残留物过柱得目标化合物，为淡黄色油状物(0.201g,收率26.3％)。¹HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.88(d,J＝1.9Hz,1H),8.56(dd,J＝4.7,1.6Hz,1H),8.09–8.01(m,1H),7.66(d,J＝8.2Hz,2H),7.48(ddd,J＝8.0,4.8,0.6Hz,1H),7.33(d,J＝8.1Hz,2H),6.91(t,J＝5.4Hz,1H),3.18(d,J＝5.2Hz,2H),2.75(t,J＝7.4Hz,2H),1.38(s,9H).

实施例98

2-(4-(吡啶-3-基)苯基)乙胺

将4-(吡啶-3-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(0.201g,0.673mmol)溶解在甲醇(2mL)中，加入HCl(4mL，4N HCl/1,4-二氧六环溶液)，于室温下搅拌2小时后浓缩掉过量的溶剂，真空干燥得粗产物，不经纯化直接用于下一步反应。

实施例99

2-(呋喃-2-基)-N5-(4-(吡啶-3-基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(0.0342g,收率为4.2％)。LC-MS m/z[M+H]⁺:399；¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.96–8.83(m,1H),8.55(dd,J＝4.7,1.5Hz,1H),8.34(br,2H),8.08–8.03(m,1H),7.87(s,1H),7.68(d,J＝8.0Hz,2H),7.54(dd,J＝26.5,20.9Hz,1H),7.47(dd,J＝7.9,4.8Hz,1H),7.40(t,J＝7.1Hz,2H),7.07(dd,J＝3.3,0.6Hz,1H),6.68(dd,J＝3.2,1.7Hz,1H),3.54(dd,J＝13.1,6.5Hz,2H),2.93(t,J＝7.3Hz,2H).

实施例100

4-(吡啶-4-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯

将4-(4-溴苯基)吡啶(0.6g,2.56mmol)，N-[2-(三氟硼烷基)乙基]氨基甲酸叔丁酯钾(0.708g,2.82mmol)，碳酸铯(2.5g,7.68mmo)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.095g,0.13mmol)加入在甲苯(12mL)和水(4mL)的混合溶剂中，氮气保护下升温至80℃搅拌过夜。隔夜后将反应液经过硅藻土过滤，收集母液并加水(30mL)，用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，合并有机相，依次用水(20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，过柱得目标化合物，为淡黄色固体(0.19g,收率24.9％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.62(dd,J＝4.5,1.6Hz,2H),7.79–7.62(m,4H),7.35(d,J＝8.1Hz,2H),6.92(t,J＝5.3Hz,1H),3.19(dd,J＝13.6,6.6Hz,2H),2.76(t,J＝7.3Hz,2H),1.37(s,9H).

实施例101

2-(4-(吡啶-4-基)苯基)乙胺

将4-(吡啶-3-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(0.19g,0.637mmol)溶解在甲醇(2mL)中，加入HCl(4mL，4N的1,4-二氧六环溶液)，于室温下搅拌2小时后浓缩掉过量的溶剂，真空干燥得粗产物，不经纯化直接用于下一步反应。

实施例102

2-(呋喃-2-基)-N5-(4-(吡啶-4-基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(0.0727g,收率为30.2％)。¹HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.62(d,J＝5.9Hz,2H),8.32(br,2H),7.87(s,1H),7.75(d,J＝8.0Hz,2H),7.70(dd,J＝4.6,1.6Hz,2H),7.54(dd,J＝26.4,20.8Hz,1H),7.41(d,J＝7.9Hz,2H),7.07(d,J＝3.3Hz,1H),6.72–6.63(m,1H),3.65–3.48(m,2H),2.94(t,J＝7.3Hz,2H).

实施例103

2-苄基-5-(4-溴苯基)-2H-四唑

将5-(4-溴苯基)-2H-四唑(1.0g,4.44mmol)溶于乙腈(30mL)溶剂中，依次加入碳酸铯(2.9g,8.88mmol)与1-(溴甲基)苯(1.14g,6.66mmol)。在70℃搅拌3小时，TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝1:6]得到的目标化合物为白色固体(1.4g,100％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):7.98(d,2H),7.76(d,2H),7.38-7.42(m,5H),6.00(s,2H).

实施例104

4-(2-苄基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯

将2-苄基-5-(4-溴苯基)-2H-四唑(700mg,2.22mmol)溶于甲苯(20mL)与水(7mL)中，依次加入Cs₂CO₃(1.4g,4.44mmol),Pd(dppf)Cl₂(163mg,0.22mmol)与N-[2-(三氟硼烷基)乙基]氨基甲酸叔丁酯钾(613mg,2.44mmol)。在氮气保护下80℃搅拌过夜，TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝1:4]得到的目标化合物为白色固体(515mg,61％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):7.96(d,2H),7.31-7.41(m,7H),7.53-7.62(m,1H),6.90(t,1H),5.99(s,2H),3.16-3.20(m,2H),2.76(t,2H),1.36(s,9H).

实施例105

2-(4-(2-苄基-2H-四唑-5-基)苯基)乙胺

将4-(2-苄基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(381mg,1.00mmol)溶于1,4-二氧六环(5mL)溶剂中，加入4N HCl/1,4-二氧六环溶液(3mL)。室温反应1小时，TLC检测反应完毕，减压浓缩除去过量HCl和二氧六环，得到粗品，直接用于下一步合成反应。

实施例106

N5-(4-(2-苄基-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(102.1mg,24％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.16-8.46(m,2H),7.98(d,2H),7.87(s,1H),7.51-7.60(m,1H),7.37-7.50(m,7H),7.05(d,1H),6.68(dr,1H),5.99(s,2H),3.53-3.55(m,2H),2.94(t,2H).

实施例107

4-((5-(4-溴苯基)-2H-四唑-2-基)甲基)吡啶

将5-(4-溴苯基)-2H-四唑(1.0g,4.44mmol)溶于乙腈(35mL)溶剂中，依次加入碳酸铯(5.9g,18.1mmol)与4-(溴甲基)吡啶盐酸盐(1.0g,6.1mmol)。在70℃搅拌3小时，TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯]得到的目标化合物为白色固体(800mg,57％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.60(dd,2H),8.00(d,2H),7.77(d,2H),7.33(d,2H),6.12(s,2H).

实施例108

4-(2-(吡啶-4-基甲基)-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯

将4-((5-(4-溴苯基)-2H-四唑-2-基)甲基)吡啶(800mg,2.53mmol)溶于甲苯(20mL)与水(7mL)中，依次加入Cs₂CO₃(1.65g,5.07mmol),Pd(dppf)Cl₂(186mg,0.25mmol)与N-[2-(三氟硼烷基)乙基]氨基甲酸叔丁酯钾(700mg,2.79mmol)。在氮气保护下于80℃搅拌过夜，TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝1:4]得到白色固状的目标化合物(637mg,66％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.60(dd,2H),7.98(d,2H),7.38(d,2H),7.32(d,2H),6.91(t,1H),6.10(s,2H),3.16-3.20(m,2H),2.76(t,2H),1.36(s,9H).

实施例109

(4-(2-(吡啶-4-基甲基)-2H-四唑-5-基)苯基)乙胺

将4-(2-(吡啶-4-基甲基)-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.80mmol)溶于1,4-二氧六环(5mL)溶剂中，加入4N HCl/1,4-二氧六环溶液(3mL)。室温反应1.5小时，TLC检测反应完毕，减压浓缩除去HCl和二氧六环得到粗品，直接用于下一步合成反应。

实施例110

N5-(4-(2-(吡啶-4-基甲基)-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(205.6mg,59.7％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.59(d,2H),8.11-8.45(m,2H),8.00(d,2H),7.87(s,1H),7.52-7.60(m,1H),7.44-7.47(m,2H),7.32(d,2H),7.05(d,1H),6.68(dr,1H),6.10(s,2H),3.53-3.55(m,2H),2.94(t,2H).

实施例111

3-((5-(4-溴苯基)-2H-四唑-2-基)甲基)吡啶

将5-(4-溴苯基)-2H-四唑(1.0g,4.44mmol)溶于乙腈(30mL)溶剂中，依次加入碳酸铯(4.3g,13.2mmol)与3-(溴甲基)吡啶盐酸盐(1.46g,5.7mmol)。在70℃搅拌2小时，TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝1:3]得到的目标化合物为白色固体(393mg,24％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.72(d,1H),8.60(dd,1H),7.98(d,2H),7.85-7.86(m,1H),7.76(d,2H),7.44-7.46(m,1H),6.09(s,1H).

实施例112

4-(2-(吡啶-3-基甲基)-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯

将3-((5-(4-溴苯基)-2H-四唑-2-基)甲基)吡啶(393mg,1.24mmol)溶于甲苯(15mL)与水(5mL)中，依次加入Cs₂CO₃(808g,2.48mmol),Pd(dppf)Cl₂(91mg,0.12mmol)与N-[2-(三氟硼烷基)乙基]氨基甲酸叔丁酯钾(345mg,1.37mmol)。在氮气保护下于80℃搅拌过夜，TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝1:4]得到目标化合物，为黄色油状物(280mg,59％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.71(d,1H),8.60(dd,1H),7.96(d,2H),7.84(dt,1H),7.43-7.46(m,1H),7.37(m,2H),6.90(t,1H),6.07(s,2H),3.16-3.20(m,2H),2.76(t,2H),1.36(s,9H).

实施例113

2-(4-(2-(吡啶-3-基甲基)-2H-四唑-5-基)苯基)乙胺

将4-(2-(吡啶-3-基甲基)-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(280mg,0.73mmol)溶于1,4-二氧六环(5mL)溶剂中，加入4N HCl/1,4-二氧六环溶液(3mL)。室温反应1.5小时，TLC检测反应完毕，减压浓缩除去HCl和二氧六环得到粗品，直接用于下一步合成反应。

实施例114

N5-(4-(2-(吡啶-3-基甲基)-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(111.6mg,36％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.71(d,1H),8.59(dd,1H),8.11-8.45(m,2H),7.98(d,2H),7.83-7.87(m,3H),7.52-7.60(m,1H),7.43-7.46(m,3H),7.32(d,2H),7.05(d,1H),6.68(dr,1H),6.07(s,2H),3.53-3.55(m,2H),2.94(t,2H).

实施例115

2-(5-(4-溴苯基)-2H-四唑-2-基)乙腈

将5-(4-溴苯基)-2H-四唑(1.0g,4.44mmol)溶于乙腈(30mL)溶剂中，依次加入碳酸铯(2.9g,8.92mmol)与2-溴乙腈(700mg,5.83mmol)。在60℃搅拌3小时，TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用水和饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝1:5]得到的目标化合物为白色固体(600mg,51.2％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.08(d,2H),7.86(d,2H),6.35(s,2H).

实施例116

4-(2-(氰基甲基)-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯

将2-(5-(4-溴苯基)-2H-四唑-2-基)乙腈(600mg,2.27mmol)溶于甲苯(20mL)与水(6mL)溶剂中，依次加入Cs₂CO₃(1.5g,4.5mmol),Pd(dppf)Cl₂(166mg,0.22mmol)与N-[2-(三氟硼烷基)乙基]氨基甲酸叔丁酯钾(627mg,2.50mmol)。在氮气保护下于80℃搅拌过夜，TLC检测反应完毕，加入水淬灭反应，用乙酸乙酯萃取，合并有机层，用饱和食盐水洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得到粗产品。柱层析分离[乙酸乙酯：正己烷＝1:4]得到目标化合物，为白色固体(220mg,29％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.00(d,2H),7.41(d,2H),6.93(t,1H),6.29(s,2H),3.18-3.20(m,2H),2.78(t,2H),1.36(s,9H).

实施例117

2-(5-(4-(2-氨基乙基)苯基)-2H-四唑-2-基)乙腈

4-(2-(氰基甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸叔丁酯(220mg,0.67mmol)溶于1,4-二氧六环(5mL)溶剂中，加入4N HCl/1,4-二氧六环(3mL)。室温反应1.5小时，TLC检测反应完毕，减压浓缩除去HCl和二氧六环得到粗品，直接用于下一步合成反应。

实施例118

2-(5-(4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)-苯基)-2H-四唑-2-基)乙腈

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(15.5mg,10％)。LCMS[M+1]⁺:429.2 ¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.17-8.24(m,2H),8.01(d,2H),7.87(s,1H),7.47-7.62(m,3H),7.44-7.47(m,3H),7.06(d,1H),6.68(dr,1H),6.29(s,2H),3.54-3.57(m,2H),2.96(t,2H).

实施例119

4-(2-氨基乙基)苄腈

将苄基4-氰基苯乙基氨基甲酸酯(550mg,1.96mmol)溶于甲醇(20mL)溶剂中，加入Pd/C(10％,50mg)，真空置换氢气后在40℃反应过夜。TLC检测反应完毕，用硅藻土过滤,滤液减压浓缩得到粗品为黄色油状物，直接用于下一步合成反应。

实施例120

4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)-苯甲腈

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(54mg,12.2％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6):8.04-8.45(m,2H),7.87(s,1H),7.76(d,2H),7.45-7.59(m,3H),7.06(d,1H),6.68(dr,1H),3.50-3.54(m,2H),2.96(t,2H).

实施例121

2-(3-氟苯基)-5-(甲基磺酰基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-7-胺

标题所示化合物的合成与实施例4的制备方法类似。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.87(s,1H),9.41(s,1H),8.04(d,1H),7.91(d,1H),7.65(q,1H),7.43(dt,1H),3.38(s,3H).

实施例122

2-(3-氟苯基)-N5-(4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

将2-(4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯基)乙胺(203mg,1.00mmol)和2-(3-氟苯基)-5-(甲基磺酰基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-7-胺溶于乙腈中(5mL)，加入三乙胺调节反应液的pH至8后，将反应液于室温下搅拌15小时，将反应液过滤，收集滤饼，用甲醇洗涤，干燥得目标化合物，为白色固体(226mg,收率52.4％).¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.05-8.49(m,2H),7.99(d,2H),7.95(d,1H),7.81(d,1H),7.57(m,2H),7.46(t,2H),7.35(dt,1H),4.41(s,3H),3.57(q,2H),2.96(t,2H).

实施例123

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:8.05-8.51(m,4H),7.87(s,1H),7.72(q,1H),7.54(m,3H),7.05(d,1H),6.68(t,1H),3.56(q,2H),3.02(t,2H).

实施例124

2-(4-(2H-四唑-5-基)苯基)乙胺

将4-(2H-四唑-5-基)苯乙基氨基甲酸苄酯(100mg,0.30mmol)溶于甲醇(20mL)溶剂中，加入Pd/C(10％,20mg)，真空置换氢气后在50℃反应3小时。TLC检测反应完毕，用硅藻土过滤,滤液减压浓缩得到的目标化合物为白色固体(60mg,100％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:7.92(d,2H),7.74(dr,2H),7.26(d,2H),3.07(t,2H),2.86(t,2H).

实施例125

N5-(4-(2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-α][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(18.7mg,12％)。LCMS[M+1]⁺:390.2 ¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆):7.95(d,2H),7.68(s,1H),7.35(d,2H),7.11(d,1H),6.60(dr,1H),3.64-3.67(m,2H),2.94-2.99(m,2H).

实施例126

2-(呋喃-2-基)-N5-(2-(吡啶-3-基)乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(64.8mg,收率为20.12％)。¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ:8.47(d,J＝9.3Hz,1H),8.41(dd,J＝4.7,1.3Hz,1H),8.19(s,2H),7.86(s,1H),7.67(t,J＝8.7Hz,1H),7.53(dd,J＝29.5,24.0Hz,1H),7.31(dd,J＝7.7,4.8Hz,1H),7.05(d,J＝3.3Hz,1H),6.67(d,J＝1.5Hz,1H),3.51(dd,J＝13.3,6.7Hz,2H),2.88(t,J＝7.1Hz,2H).

实施例127

2-(呋喃-2-基)-N5-(2-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-α][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例5进行反应，得到的标题化合物为白色固体(135mg,38.4％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.50-8.05(d,2H),8.02(d,1H),7.87(s,1H),7.63-7.46(m,2H),7.06(d,1H),6.75(d,1H),6.67(d,1H),3.81(s,3H),3.46(q,2H),2.81(t,2H).

实施例128

2-(呋喃-2-基)-N5-(2-(嘧啶-4-基)乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

按实施例42进行反应，过滤沉淀的固体，用乙腈和水洗涤，干燥得到目标化合物，为黄色固体(135mg,41.8％收率)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:9.09(s,1H),8.68(d,1H),8.50-8.05(d,2H),7.87(s,1H),7.50-7.43(m,2H),7.06(d,1H),6.67(s,1H),3.66(m,2H),3.03(t,2H).

实施例129

2-(呋喃-2-基)-N5-(2-(吡啶-2-基)乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺

该反应操作同示例5，得到的产物为白色固体(361mg，收率74.4％)。¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:8.51(s,1H),δ:8.04-8.40(d,2H),7.87(s,1H),7.72(q,1H),7.47-7.54(d,1H),7.29(d,1H),7.21(t,1H),7.06(s,1H),6.67(s,1H),3.63(t,2H),3.02(t,2H).

以上示例是为了更好地讲明本发明，这些示例并不是为了限制本发明的范围。实际上，本发明还包括这些示例的所有替代、修改和等同形式。不能理解为本发明仅限于这些示例的范围。

A2A受体拮抗剂的生物活性

本发明的三唑并三嗪衍生物的拮抗活性用测量cAMP产生量的功能性试验测定。该方法包括，在表达有A2AR的HEK293细胞(hADORA2A-HEK293)中，NECA刺激的cAMP的产生和A2A受体拮抗剂对其的抑制作用。所有细胞均采用完全培养基，培养在5％CO₂和37℃条件下进行。用胰酶消化细胞后，在200g离心5分钟收集细胞。再用新鲜完全培养基重悬细胞后采用台盼蓝排除法对细胞活力进行计数，仅当细胞活率大于95％时方可进行后续的cAMP产生测量实验。用含HEPES(5mM)，BSA稳定剂(0.1％)和20Rolipram(10μM)的Hank's缓冲溶液稀释细胞后，将细胞加入384孔白色非透明板(～500细胞/孔，10μl/孔)，并在室温下与合适浓度(11个浓度)的测试化合物孵育20分钟。然后将A2A受体激动剂NECA(最终浓度＝EC₈₀，该数值在稍早进行的同一实验中测定)添加到样品中，并在37℃下再次孵育30分钟。最后加入Eu-cAMP示踪剂和Ulight-anti-cAMP，通过测量665nm处的TR-FRET与615nm处的荧光发射的比值来确定cAMP的产生量。根据下式计算抑制率(％)，根据从log转换后的浓度-抑制(％)曲线计算IC₅₀值。

表(2)所示为代表性的本发明的三唑并三嗪衍生物的拮抗活性。

表2:A2AR拮抗剂的活性

化合物	A2AR活性IC₅₀(nM)
		实施例11	43.42
实施例12	27.10
		实施例13	33.02
实施例16	23.99
		实施例17	7.54
实施例27	9.08
		实施例34	8.71
实施例35	13.78
		实施例36	13.32
实施例37	6.00
		实施例42	19.35
实施例43	17.14
		实施例45	27.38
实施例51	9.66
		实施例59	7.87
实施例62	9.08
		实施例65	13.88
实施例125	14.48
		实施例128	63.81
实施例129	12.67
		ZM241385	9.00

Claims

1.式(1)的化合物或其药学上可接受的盐：

其中：

R为氢；

Ar₁为2-呋喃基；

Ar₂为苯基或吡啶基；且

Q为任选地被X取代的5-6元芳基或5-6元杂芳基；X为任选地被取代的C_1-3烷基；所述取代基选自卤素、氰基、甲氧基、5-14元芳基或5-14元杂芳基。

2.据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：

R为氢；

Ar₁为2-呋喃基；

Ar₂为苯基；且

Q为任选地被X取代的四唑环；X为任选地被取代的C_1-3烷基；所述取代基选自卤素、氰基或甲氧基。

3.选自下组的化合物：

N5-(4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

N5-(4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

N5-(4-(2-乙基-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

N5-(4-(2-异丙基-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

N5-(4-(2-丙基-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

2-(5-(4-(2-(7-氨基-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5-基氨基)乙基)-苯基)-2H-四唑-2-基)乙腈；

N5-(4-(2-(2,2,2-三氟乙基)-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

N5-(4-(2-(2-甲氧基乙基)-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

2-(呋喃-2-基)-N5-(4-(吡啶-2-基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

2-(呋喃-2-基)-N5-(4-(吡啶-3-基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

2-(呋喃-2-基)-N5-(4-(吡啶-4-基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

2-(呋喃-2-基)-N5-(4-(嘧啶-2-基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

2-(呋喃-2-基)-N5-(4-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

N5-(4-(2H-替硝唑-5-基)苯乙基)-2-(呋喃-2-基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

2-(3-氟苯基)-N5-(4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；

N5-(4-(2-甲基-2H-四唑-5-基)苯乙基)-2-苯基-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺；和

2-(呋喃-2-基)-N5-(2-(6-(2-甲基-2H-四唑-5-基)吡啶-3-基)乙基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a][1,3,5]三嗪-5,7-二胺，

或其药学上可接受的盐。

4.药物组合物，其包含权利要求1-3中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的溶剂化物或盐，以及药学上可接受的载体。

5.权利要求1-3中任一项所述的化合物和/或权利要求4中所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或预防与腺苷A2A受体相关的疾病。

6.根据权利要求5所述的用途，所述与腺苷A2A受体相关的疾病包括帕金森氏病、认知或记忆障碍疾病和/或阿尔茨海默氏病。

7.根据权利要求5所述的用途，所述与腺苷A2A受体相关的疾病包括癌症。

8.权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐与免疫检查点抑制剂在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或预防细胞异常增殖。

9.权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐与肿瘤疫苗在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或预防细胞异常增殖。

10.权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐与CAR-T细胞在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或预防细胞异常增殖。

11.权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐与其他抗癌药物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或预防细胞异常增殖。