CN111141851A - 含有阿司匹林的复方制剂有关物质的液相检测分离方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种含有阿司匹林的复方制剂有关物质的液相检测分离方法，该分离方法包括以下步骤：取阿司匹林、对乙酰氨基酚和咖啡因复方制剂，制备供试品溶液，将所述供试品溶液注入高效液相色谱仪，并于以下色谱条件下检测及记录色谱图：以辛基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇‑水‑磷酸体积比(40～60):(960～940):0.5为流动相A；以甲醇‑水‑磷酸体积比(400～600):(600～400):0.5为流动相B；洗脱方式为梯度洗脱；流速为0.45～0.55ml/min；检测波长为235～239nm；柱温为28～32℃。本发明通过采用上述色谱条件，能够将阿司匹林、对乙酰氨基酚和咖啡因复方制剂中各种杂质有效分离。

Description

含有阿司匹林的复方制剂有关物质的液相检测分离方法
技术领域
本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种含有阿司匹林的复方制剂有关物质的液相检测分离方法。
背景技术
阿司匹林复方制剂，譬如阿咖酚散(曾用名：解热止痛散)，是一种解热镇痛类非处方药药品，临床用于感冒、发烧、头痛、神经痛及关节疼痛。阿咖酚散制剂中含有阿司匹林、对乙酰氨基酚和咖啡因3中原料药，共计26种已知杂质，其中有水杨酸、对乙酰氨基酚杂质J和杂质K为各国药典中提及要控制的杂质。26中已知杂质结构式如下：
Figure BDA0002357045950000011
Figure BDA0002357045950000021
Figure BDA0002357045950000031
Figure BDA0002357045950000041
王燕桓等(《HPLC法测定阿咖酚散中3种有效成分及相关杂质含量的研究》，[药物分析杂志]，2006年)采用反相高效液相色谱方法测定阿咖酚散中对乙酰氨基酚、咖啡因、阿司匹林3种有效成分及相关杂质水杨酸的含量，其采用的色谱体系为：Shim-pack CLC-ODS(150mm x6.0 mm，5um)色谱柱，流动相为甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾(磷酸调pH＝3.3)(43:57)，检测波长为215nm，以非那西丁为内标物定量测定。
陈祝康等(《解热止痛散中三组分含量及有关物质的HPLC测定》，[中国医药工业杂志]，2003年)采用HPLC方法，同时测定解热止痛散中对乙酰氨基酚、咖啡因和阿司匹林的含量及相关杂质水杨酸和对氨基酚的含量，其采用的色谱体系为：用C18柱，以甲醇-水-冰醋酸(28:69:3)为流动相，检测波长275nm。
目前，公开的检测阿司匹林、对乙酰氨基酚和咖啡因复方制剂有关物质的分离方法中，检测和控制杂质相对单一，不能利用一种色谱条件将所有杂质有效分离，检测效率低。
发明内容
本发明的主要目的是提出一种含有阿司匹林的复方制剂有关物质的液相检测分离方法，旨在解决现有技术中该复方制剂有关物质的检测和控制杂质相对单一，不能利用一种色谱条件将所有杂质有效分离，检测效率低的问题。
为实现上述目的，本发明提出一种含有阿司匹林的复方制剂有关物质的液相检测分离方法，该分离方法包括以下步骤：
取阿司匹林、对乙酰氨基酚和咖啡因复方制剂，制备供试品溶液，将所述供试品溶液注入高效液相色谱仪，并于以下色谱条件下检测及记录色谱图：
以辛基硅烷键合硅胶为填充剂；
以甲醇-水-磷酸体积比(40～60):(960～940):0.5为流动相A；
以甲醇-水-磷酸体积比(400～600):(600～400):0.5为流动相B；
洗脱方式为梯度洗脱；
流速为0.45～0.55ml/min；
检测波长为235～239nm；
柱温为28～32℃。
优选地，所述流动相A甲醇-水-磷酸体积比为50:950:0.5，所述流动相B甲醇-水-磷酸体积比为500:500:0.5，所述流速为0.5ml/min，所述检测波长为237nm，所述柱温为30℃。
优选地，所述梯度洗脱具体为：
Figure BDA0002357045950000051
优选地，所述供试品溶液按以下方法制备：
取所述复方制剂研磨均匀，称取研磨得到的细粉将其配制成每1ml含对乙酰氨基酚12.6mg的溶液，摇匀，作为供试品溶液。
优选地，在进行所述供试品溶液的检测之前，还包括以下步骤：
配制每1ml含有咖啡因3.0mg、对乙酰氨基酚杂质A 0.0126mg和对乙酰氨基杂质B0.0126mg的混合溶液，作为系统适用性溶液；
取所述系统适用性溶液，注入高效液相色谱仪，并于所述色谱条件下检测及记录色谱图。
本发明技术方案通过以辛基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水-磷酸体积比(40～60):(960～940):0.5为流动相A，以甲醇-水-磷酸体积比(400～600):(600～400):0.5为流动相B，进行梯度洗脱，能够将阿司匹林、对乙酰氨基酚和咖啡因复方制剂中各种杂质有效分离。
附图说明
图1为实施例1中含有阿司匹林的复方制剂的液相检测色谱图；
图2为实施例2中含有阿司匹林的复方制剂的液相检测色谱图；
图3为实施例3中含有阿司匹林的复方制剂的液相检测色谱图。
具体实施方式
以下通过实施例形式再对本发明的内容作进一步详细说明，但不应就此理解为本发明上述主题范围内仅限于以下实施例。在不脱离本发明上述技术前提下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的相应替换和变更的修改，均包括在本发明的范围内。
本发明提出一种含有阿司匹林的复方制剂有关物质的液相检测分离方法，该方法包括以下步骤：
以甲醇:磷酸:水(500:0.2:500)溶液作为稀释剂，配制每1ml含有咖啡因3.0mg、对乙酰氨基酚杂质A0.0126mg和对乙酰氨基酚杂质B0.0126mg的混合溶液作为系统适用性溶液。精密量取10ul注入液相色谱仪，记录色谱图，系统适用性溶液中对乙酰氨基酚杂质B、对乙酰氨基酚杂质A和咖啡因依次出峰，系统适用性要求：对乙酰氨基酚杂质A色谱峰与对乙酰氨基酚杂质B色谱峰分离度大于1.5；对乙酰氨基酚杂质A色谱峰与咖啡因色谱峰分离度大于2.0。
取阿司匹林、对乙酰氨基酚和咖啡因复方制剂，该复方制剂可以是阿咖酚散、阿咖酚片以及阿咖酚胶囊等。本发明实施例中将采用阿咖酚散作为示例进行有关物质的分离试验。取前述阿咖酚散若干，研磨均匀，精密称取适量细粉配置成每1ml约含对乙酰氨基酚12.6mg的混合溶液。该混合溶液作为供试品溶液，注入高效液相色谱仪中。其中，流动相包括流动相A和流动相B，流动相A为甲醇：水：磷酸＝(40～60):(960～940):0.5，流动相B为甲醇：水：磷酸＝(400～600):(600～400):0.5，采用紫外检测器，检测波长可以是235～239nm，流速为0.45～0.55ml/min，柱温为28～32℃，并按表1所示洗脱梯度进行洗脱：
表1梯度表
Figure BDA0002357045950000061
实施例1
高效液相色谱仪：Thermo U3000(赛默飞)；
色谱柱：Phenomenex Gemini C8柱(150mm×4.6mm，5um)
流动相A：甲醇-水-磷酸体积比50:950:0.5
流动相B：甲醇-水-磷酸体积比500:500:0.5
梯度洗脱程序参照上述表1梯度表进行：
流速为0.5ml/min；检测波长为237nm；柱温为30℃。
实施步骤：取10袋阿咖酚散，研磨均匀，精密称取适量细粉配制成每1ml约含对乙酰氨基酚12.6mg的溶液，摇匀，作为供试品溶液。
精密量取10μl供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图，结果见下表2(其对应的液相色谱图参见附图1)
表2实施例1液相色谱检测结果
Figure BDA0002357045950000071
Figure BDA0002357045950000081
由此可见，阿司匹林峰、对乙酰氨基酚峰、咖啡因峰与相邻杂质峰、各杂质峰之间均能有效分离，分离度均大于1.5。
实施例2
高效液相色谱仪：Thermo U3000(赛默飞)；
色谱柱：Phenomenex Gemini C8柱(150mm×4.6mm，5um)；
流动相A：甲醇-水-磷酸体积比40:960:0.5；
流动相B：甲醇-水-磷酸体积比400:600:0.5；
梯度洗脱程序参照上述表1梯度表进行；
流速为0.45ml/min；检测波长为235nm；柱温为28℃。
实施步骤：取10袋阿咖酚散，研磨均匀，精密称取适量细粉配制成每1ml约含对乙酰氨基酚12.6mg的溶液，摇匀，作为供试品溶液。
精密量取10μl供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图，结果见下表3(其对应的液相色谱图参见附图2)
表3实施例2液相色谱检测结果
Figure BDA0002357045950000082
Figure BDA0002357045950000091
由此可见，阿司匹林峰、对乙酰氨基酚峰、咖啡因峰与相邻杂质峰、各杂质峰之间均能有效分离，分离度均大于1.5。
实施例3
高效液相色谱仪：Thermo U3000(赛默飞)；
色谱柱：Phenomenex Gemini C8柱(150mm×4.6mm，5um)；
流动相A：甲醇-水-磷酸体积比60:940:0.5；
流动相B：甲醇-水-磷酸体积比600:400:0.5；
梯度洗脱程序参照上述表1梯度表进行；
流速为0.55ml/min；检测波长为239nm；柱温为32℃。
实施步骤：取10袋阿咖酚散，研磨均匀，精密称取适量细粉配制成每1ml约含对乙酰氨基酚12.6mg的溶液，摇匀，作为供试品溶液。
精密量取10μl供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图，结果见下表4(其对应的液相色谱图参见附图3)
表4实施例3液相检测色谱图
Figure BDA0002357045950000092
Figure BDA0002357045950000101
由此可见，阿司匹林峰、对乙酰氨基酚峰、咖啡因峰与相邻杂质峰、各杂质峰之间均能有效分离，分离度均大于1.5。
以上所述的仅为本发明的部分或优选实施例，无论是文字还是附图都不能因此限制本发明保护的范围，凡是在与本发明一个整体的构思下，利用本发明说明书及附图内容所作的等效结构变换，或直接/间接运用在其他相关的技术领域均包括在本发明保护的范围内。

Claims (5)

1.一种含有阿司匹林的复方制剂有关物质的液相检测分离方法，其特征在于，包括以下步骤：
取阿司匹林、对乙酰氨基酚和咖啡因复方制剂，制备供试品溶液，将所述供试品溶液注入高效液相色谱仪，并于以下色谱条件下检测及记录色谱图：
以辛基硅烷键合硅胶为填充剂；
以甲醇-水-磷酸体积比(40～60):(960～940):0.5为流动相A；
以甲醇-水-磷酸体积比(400～600):(600～400):0.5为流动相B；
洗脱方式为梯度洗脱；
流速为0.45～0.55ml/min；
检测波长为235～239nm；
柱温为28～32℃。
2.根据权利要求1所述的含有阿司匹林的复方制剂有关物质的液相检测分离方法，其特征在于，所述流动相A甲醇-水-磷酸体积比为50:950:0.5，所述流动相B甲醇-水-磷酸体积比为500:500:0.5，所述流速为0.5ml/min，所述检测波长为237nm，所述柱温为30℃。
3.根据权利要求1所述的含有阿司匹林的复方制剂有关物质的液相检测分离方法，其特征在于，所述梯度洗脱具体为：
Figure FDA0002357045940000011
4.根据权利要求1所述的含有阿司匹林的复方制剂有关物质的液相检测分离方法，其特征在于，所述供试品溶液按以下方法制备：
取所述复方制剂研磨均匀，称取研磨得到的细粉将其配制成每1ml含对乙酰氨基酚12.6mg的溶液，摇匀，作为供试品溶液。
5.根据权利要求1所述的含有阿司匹林的复方制剂有关物质的液相检测分离方法，其特征在于，在进行所述供试品溶液的检测之前，还包括以下步骤：
配制每1ml含有咖啡因3.0mg、对乙酰氨基酚杂质A 0.0126mg和对乙酰氨基杂质B0.0126mg的混合溶液，作为系统适用性溶液；
取所述系统适用性溶液，注入高效液相色谱仪，并于所述色谱条件下检测及记录色谱图。
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