CN111116575B - 一种5-氟-2,4-嘧啶二胺类化合物及其制备与应用 - Google Patents

一种5-氟-2,4-嘧啶二胺类化合物及其制备与应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一类具有式(I)结构的5‑氟‑2,4‑嘧啶二胺类化合物、其制备方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用，所述的抗肿瘤药物为治疗肝癌、肺癌或白血病的药物。本发明提供的式(I)化合物具有良好抗肿瘤活性，为新药筛选提供了基础；对HepG‑2细胞株、A549细胞株、HL‑60细胞株具有显著的抑制作用；并且，本发明提供了式(I)的制备方法，制备方法简单，有利于工业生产。

Description

一种5-氟-2,4-嘧啶二胺类化合物及其制备与应用
技术领域
本发明涉及药物领域，具体涉及一种5-氟-2,4-嘧啶二胺类化合物及其制备方法和其在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术
癌症是目前危害人类生命健康的常见疾病。根据2018年报道的最新统计数据预测，我国2015年约有429.2万新增癌症患者，并有281.4万人因癌症死亡。据此推算，全国每天约有12，000人被诊断为癌症，750人死于癌症。癌症总体发病率为201.1/10万，而男性与女性的发病率分别为234.9/10万和168.7/10万。我国城市和乡村癌症的发病率分别为191.5/10万和213.6/10万。男女癌症总死亡率为126.9/10万，男性癌症死亡率为165.9/10万，女性为88.8/10万，死亡率高于全球平均水平。
在肿瘤的治疗方法中药物治疗占有相当重要的地位，发展速度也最快。由于抗肿瘤药物的副作用和低特异性，使其发展受到阻碍。目前人们的研究重点已经从普通的细胞毒性化疗药物转为靶向药物。蛋白酪氨酸激酶抑制剂(TKI，简称替尼类药物)，通过与癌细胞上的靶点特异性结合从而抑制癌细胞生长的细胞通路。该类药物作为新的靶向抗肿瘤药物，具有疗效显著、靶向性高、不良反应小等优点，在靶向抗肿瘤药物中独占鳌头。
近十年来，酪氨酸激酶抑制剂作为新型靶向性抗肿瘤药物已经用于临床并取得了令人满意的治疗效果。以伊马替尼和达沙替尼为代表的嘧啶类酪氨酸激酶抑制剂是目前抗肿瘤药物研究热点领域之一。例如，文献Potent 2-[(pyrimidin-4-yl)amine]-1,3-thiazole-5-carbonitrile-based inhibitors of VEGFR-2(KDR)kinase.Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters,2006,16(5):1146-1150报道了化合物3d可作为酪氨酸激酶抑制剂。公开号为WO2018231910A的发明公开了蛋白酪氨酸激酶抑制剂化合物9，通过与癌细胞上的靶点特异性结合从而抑制癌细胞生长的细胞通路。
Figure BDA0002324317520000011
由于肿瘤的多样性和复杂性，亟需提供更多的酪氨酸激酶抑制剂，以提供具有良好抗肿瘤活性的化合物并进行构效关系研究。
发明内容
本发明提供了一类新的具有5-氟嘧啶二胺类结构的式(I)化合物，具有良好的抗肿瘤活性。
本发明解决上述技术问题所提供的技术方案为：
一种式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure BDA0002324317520000021
其中：
R1为H或C1-6烷基，所述C1-6烷基任选被1、2或3个Ra取代；
R2为H或C1-6烷基，所述C1-6烷基任选被1、2或3个Ra取代；
或者，R1、R2与其相连的N一起形成4-6元杂环烷基，所述4-6元杂环烷基任选被1、2或3个Rb取代；
R3为C1-6烷基或苯基，所述C1-6烷基或苯基任选被1、2或3个Rc取代；
Ra为F、Cl、Br、I、OH、NH2、CN或
Figure BDA0002324317520000022
Rb为F、Cl、Br、I、OH、NH2、CN、
Figure BDA0002324317520000023
Rc为H、F、Cl、Br、I、OH、NH2、CN、NO2、-OCH3、C1-C4烷基或
Figure BDA0002324317520000024
所述4-6元杂环烷基包含1、2或3个独立选自N、NH、O和S的杂原子或原子团。
氟原子具有独特的物理化学性质，氟原子的引入将改变母体化合物的极性、酸碱性、药代动力学性质等，此外氟原子也可通过氢键、卤键作用增加化合物与受体间的亲合作用，进而影响其生物活性。因此，制备一系列结构新颖的含氟嘧啶类酪氨酸激酶抑制剂，并进行抗肿瘤活性筛选和构效关系研究具有重要的现实意义。
氟原子在5位可与邻位的-NH-形成分子内氢键，且影响邻、对位胺基的碱性，进而影响化合物的生物活性。
所述的结构单元
Figure BDA0002324317520000025
为
Figure BDA0002324317520000026
Figure BDA0002324317520000027
所述的结构单元
Figure BDA0002324317520000028
为
Figure BDA0002324317520000029
Figure BDA0002324317520000031
进一步的，所述的R3为
Figure BDA0002324317520000032
进一步的，所述的R3为
Figure BDA0002324317520000033
Figure BDA0002324317520000034
苯环上的取代基的位置不同，可影响化合物与受体的相互作用，因此导致化合物具有不同的生物活性。在本发明中，氯在苯环的邻位
Figure BDA0002324317520000035
或间位
Figure BDA0002324317520000036
其化合物的生物活性明显优于对位取代的化合物。对于同一取代基，我们尽可能的合成各种异构体，以考察它们的构效关系，为后面的结构优化提供基础。
进一步的，本发明所述的式(I)所示的化合物及其药学上可接受的盐为：
Figure BDA0002324317520000037
其中，Rc如本发明所定义。
进一步的，本发明所述的式(I)所示的化合物及其药学上可接受的盐为下列之一：
Figure BDA0002324317520000041
本发明还提供上述化合物或其药学上可接受的盐在制备酪氨酸激酶抑制剂中的应用。
本发明还提供上述化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。
进一步的，所述肿瘤为肝癌、肺癌或白血病。
本发明还提供了一种制备式(I)化合物或其药学上可接受的盐的中间体式(II)化合物：
Figure BDA0002324317520000051
其中，X为F、Cl、Br或I；R3如本发明所定义。
本发明还提供了一种制备式(I)化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，
Figure BDA0002324317520000052
其中，
X为F、Cl、Br或I；
R1、R2、R3如本发明所定义；
在有机溶剂1中，在碱1存在下，以式(II)化合物与式(III)化合物于60-120℃下反应，冷却，萃取，有机层浓缩纯化得式(Ⅰ)化合物；
所述的碱1为K2CO3、KHCO3、KOAc、KF、Et3N、EtN(i-Pr)2或吡啶；优选为Et3N，此时反应收率最高；
所述的有机溶剂1为DMSO、DMF、DMA、1,4-二氧六环、甲苯、乙腈、氯仿、四氢呋喃或乙醇；优选为乙醇，此时反应收率高，且溶剂毒性低；
所述式(II)化合物、式(III)化合物、碱1的投料摩尔比为1：1～6：1～5；优选为1：2～3：2～3，此时反应收率最高。
本发明还提供了一种制备式(II)化合物的制备方法：
Figure BDA0002324317520000053
X为F、Cl、Br或I；
R3如本发明所定义；
在有机溶剂2中，在碱2存在下，以式(IV)化合物与式(V)化合物于30～150℃下反应，冷却，萃取，有机层浓缩纯化得式(II)化合物；
所述碱2为K2CO3、KHCO3、KOAc、KF、Et3N、EtN(i-Pr)2或吡啶；优选为K2CO3，此时反应收率最高，后处理简单；
所述的有机溶剂2为DMSO、DMF、DMA、1,4-二氧六环、甲苯、乙腈、氯仿或四氢呋喃；优选为DMF，此时反应收率最高；
所述式(IV)化合物、式(V)化合物、碱2的投料摩尔比为1：0.9～1.5：1～3；优选为1：1：1.5，此时反应收率最高。
所述的萃取方法为加入乙酸乙酯萃取，有机层用水洗1～3次，无水硫酸钠干燥。
所述的纯化方法为经硅胶柱层析分离。
本发明还提供了一种式(IV-1)化合物制备方法：
Figure BDA0002324317520000061
在反应瓶中加入式(VI)化合物以及三氯氧磷，升温至60-100℃搅拌，滴加碱3，约0.5-2h滴完，90-100℃反应6-15h。冷却，滴加适量水，控制体系温度不超过30℃，搅拌0.5-2h后，萃取，浓缩，经冷藏放置后，逐渐形成晶体式(IV-1)化合物；
碱3为N,N-二甲基苯胺、N,N-二乙基苯胺或三乙胺。
本发明的有益效果主要体现在：
(1)本发明提供了一种新的具有良好抗肿瘤活性的式(I)化合物，为新药筛选提供了基础。
(2)本发明提供了式(I)化合物在制备治疗肝癌的药物中的应用，经实验证实，化合物Ⅰ-9和Ⅰ-10对HepG-2细胞株有较好的抑制作用，化合物Ⅰ-2、Ⅰ-5和Ⅰ-13对其有一定的抑制作用。
本发明提供了式(I)化合物在制备治疗肺癌的药物中的应用，经实验证实，化合物Ⅰ-9和Ⅰ-10对A549细胞株有显著的抑制作用，化合物Ⅰ-2和Ⅰ-6对其有较好的抑制作用。
本发明提供了式(I)化合物在制备治疗白血病药物中的应用，经实验证实，化合物Ⅰ-9和Ⅰ-10对HL-60细胞株具有较好的抑制作用，化合物Ⅰ-4、Ⅰ-13和Ⅰ-14对其有一定的抑制作用；化合物Ⅰ-9和Ⅰ-10对K-562细胞株导致的人白血病具有显著的抑制作用，化合物Ⅰ-2、Ⅰ-3、Ⅰ-5、Ⅰ-6、Ⅰ-7、Ⅰ-8、I-11、Ⅰ-12、Ⅰ-13和Ⅰ-14对其有较好的抑制作用。
(3)本发明还提供了一种噻唑基修饰的5-氟-2,4-嘧啶二胺类化合物的制备方法；所述的制备方法简单，有利于工业生产。
定义和说明
除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。这里所采用的术语"药学上可接受的"，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言。它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。
术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物的中性形式接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括钠、钾、钙、铵、有机胺或镁盐或类似的盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物的中性形式接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括无机酸盐，所述无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硝酸、碳酸，碳酸氢根，磷酸、磷酸一氢根、磷酸二氢根、硫酸、硫酸氢根、氢碘酸、亚磷酸等；以及有机酸盐，所述有机酸包括如乙酸、丙酸、异丁酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、邻苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯横酸、柠檬酸、酒石酸和甲磺酸等类似的酸；还包括氨基酸(如精氨酸等)的盐，以及如葡糖醛酸等有机酸的盐。本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。
本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。
除了盐的形式，本发明所提供的化合物还存在前药形式。本文所描述的化合物的前药容易地在生理条件下发生化学变化从而转化成本发明的化合物。此外，前体药物可以在体内环境中通过化学或生化方法被转换到本发明的化合物。
本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式或者溶剂化形式存在，包括水合物形式。一般而言，溶剂化形式与非溶剂化的形式相当，都包含在本发明的范围之内。
本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。
术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，可以包括重氢和氢的变体，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为氧(即＝O)时，意味着两个氢原子被取代。氧取代不会发生在芳香基上。
术语“任选被取代”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。
当任何变量(例如R)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被0-2个R所取代，则所述基团可化任选地至多被两个R所取代，并且每种情况下的R都有独立的选项。此外，取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。
除非另有规定，术语“C1-6烷基”用于表示包含1至6个碳原子的直链或支链的饱和的碳氨基团。所述C1-6烷基包括C1-6、C1-5、C1-4、C1-3、C1-2、C2-6、C2-5、C2-4、C2-3、C3-6、C3-5、C3-4、C4-6、C4-5、C5-6、C1、C2、C3、C4、C5、C6烷基等。其可以是一价(如甲基)、二价(如亚甲基)或者多价(如次甲基)。C1-6烷基的实例包括但不限于甲基(Me)，乙基(Et)，丙基(包括n-丙基和异丙基)，丁基(包括n-丁基，异丁基，s-丁基和t-丁基)，戊基(包括n-戊基，异戊基和新戊基)、己基等。
除非另有规定，术语“4-6元杂环烷基”本身或者与其他术语联合分别表示由4至6个环原子组成的饱和环状基团，其1、2、3个环原子为独立选自O、S、N、NH的杂原子或原子团，其余为碳原子，其包括单环和双环体系，其中双环包括螺环、并环和桥环。此外，就该“4-6元杂环烷基”而言，杂原子可以占据杂环烷基与分子其余部分的连接位置。所述4-6元杂环烷基包括4-6元、4-5元、5-6元、4元、5元和6元杂环烷基等。4-8元杂环烷基的实例包括但不限于氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑烷基、四氢噻吩基(包括四氢噻吩-2-基和四氢噻吩-3-基等)、四氢呋喃基(包括四氢呋喃-2-基)、四氢吡咯基、哌嗪基(包括1-哌嗪基、2-哌嗪基等)、哌啶基(1-哌啶基、2-哌啶基和3-哌啶基等)、吗啉基(包括3-吗啉基和4-吗啉基等)、二恶烷基、二噻烷基、异恶唑烷基、异噻唑烷基、1,2-恶嗪基、1,2-噻嗪基、六氢哒嗪基。
本发明所使用的溶剂可经市售获得。
本发明化合物依据本领域常规命名原则或者使用
Figure BDA0002324317520000082
软件命名，市售化合物采用供应商目录。
具体实施方式
通过下面实施例对本发明做进一步的阐述，下述说明仅为解释本发明，并不对其内容进行限定。
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此。
实施例1：制备4-叔丁基-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-1)
Figure BDA0002324317520000081
在100ml三口瓶中加入5-氟脲嘧啶(3.9g，0.03mol)，三氯氧磷(27g，0.18mol)，搅拌，升温至90℃后，开始滴加N,N-二甲基苯胺(7.27g，0.06mol)，约0.5h滴完,再继续升温到95℃，保温反应15h。反应完毕后，在冰浴条件下，缓慢滴加30ml冰水，控制体系温度不超过30℃，搅拌1h，再用二氯甲烷萃取，有机层用水洗，无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，得黄色液体，经冷藏放置后，逐渐形成晶体式(IV-1)化合物(2.79g，收率56.0％)，m.p.38-39℃。
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶(0.166g，1mmol)，4-叔丁基-2-氨基噻唑(0.156g，1mmol)，K2CO3(0.207g，1.5mmol)和DMF(2ml)，置于100℃的油浴中保温反应8h。反应结束后，向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(II-1)化合物(0.173g，收率60.5％)。
m.p.210-212℃；1H-NMR(600MHz,d6-DMSO)δ:13.23(br,1H),8.33(m,1H),6.73(s,1H),1.29(s,9H)。
实施例2：制备4-苯基-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-2)
Figure BDA0002324317520000091
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶(0.166g，1mmol)，4-苯基-2-氨基噻唑(0.176g，1mmol)，K2CO3(0.207g，1.5mmol)和DMF(2ml)，置于100℃的油浴中保温反应8h。向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(II-2)化合物(0.164克，收率53.7％)。
m.p.182-185℃；1H NMR(600MHz,d6-DMSO)δ:12.70(br,1H),8.47(d,J＝2.0Hz,1H),7.94(d,J＝7.5Hz,2H),7.72(s,1H),7.46(t,J＝7.5Hz,2H),7.36(t,J＝7.5Hz,1H)。
实施例3：4-(2-甲氧基苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-3)
Figure BDA0002324317520000092
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶(0.166g，1mmol)，4-(3-甲氧基苯基)-2-氨基噻唑(0.206g，1mmol)，K2CO3(0.207g，1.5mmol)和DMF(2ml)，置于100℃的油浴中保温反应8h。向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅱ-3)化合物(0.155克，收率46.2％)。
m.p.185-189℃；1H NMR(600MHz,d6-DMSO)δ12.63(br,1H),8.45(d,J＝2.2Hz,1H),8.06(s,1H),7.69(s,1H),7.56–7.26(m,1H),7.15(d,J＝7.5Hz,1H),7.06(t,J＝7.5Hz,1H),3.93(s,3H)。
实施例4：4-(3-甲氧基苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-4)
Figure BDA0002324317520000101
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶(0.166g，1mmol)，4-(3-甲氧基苯基)-2-氨基噻唑(0.206g，1mmol)，K2CO3(0.207g，1.5mmol)和DMF(2ml)，置于100℃的油浴中保温反应8h。向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅱ-4)化合物(0.178克，收率53.1％)。
m.p.193-196℃；1H NMR(600MHz,d6-DMSO)δ12.64(br,1H),8.46(d,J＝1.7Hz,1H),7.74(s,1H),7.51(d,J＝7.2Hz,2H),7.36(t,J＝7.2Hz,1H),6.98–6.86(m,1H),3.82(s,3H)。
实例5：4-(4-甲氧基苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-5)
Figure BDA0002324317520000102
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶(0.166g，1mmol)，4-(4-甲氧基苯基)-2-氨基噻唑(0.206g，1mmol)，K2CO3(0.207g，1.5mmol)和DMF(2ml)，置于100℃的油浴中保温反应8h。向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅱ-5)化合物(0.164克，收率48.9％)。
m.p.266-268℃；1H NMR(600MHz,d6-DMSO)δ12.66(br,1H),8.45(s,1H),7.82(d,J＝7.8Hz,2H),7.62(s,1H),7.26(d,J＝7.8Hz,2H),2.34(s,3H)。
实施例6：制备4-(2-甲基苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-6)
Figure BDA0002324317520000103
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶(0.166g，1mmol)，4-(2-甲基苯基)-2-氨基噻唑(0.190g，1mmol)，K2CO3(0.207g，1.5mmol)和DMF(2ml)，置于100℃的油浴中保温反应8h。向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅱ-6)化合物(0.211克，收率66.0％)。
m.p.191-193℃；1H NMR(500MHz,d6-DMSO)δ12.85(br,1H),8.43(d,J＝2.9Hz,1H),7.57(d,J＝7.0Hz,1H),7.29(m,4H),2.43(s,3H)。
实施例7：制备4-(3-甲基苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-7)
Figure BDA0002324317520000111
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶(0.166g，1mmol)，4-(3-甲基苯基)-2-氨基噻唑(0.190g，1mmol)，K2CO3(0.207g，1.5mmol)和DMF(2mL)，置于100℃的油浴中保温反应8h。向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅱ-7)化合物(0.0928克，收率29.0％)。
m.p.232-234℃；1H NMR(500MHz,d6-DMSO)δ12.72(br,1H),8.45(d,J＝2.7Hz,1H),7.76(s,1H),7.71(d,J＝7.6Hz,1H),7.67(s,1H),7.32(t,J＝7.6Hz,1H),7.16(d,J＝7.6Hz,1H),2.36(s,3H)。
实施例8：制备4-(4-甲基苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-8)
Figure BDA0002324317520000112
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶0.166g(1mmol)，4-(4-甲基苯基)-2-氨基噻唑0.190g(1mmol)，K2CO3 0.207g(1.5mmol)和DMF(2mL)，置于100℃的油浴中保温反应8h。向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅱ-8)化合物(0.150克，收率.47.0％)。
m.p.233-235℃；1H NMR(600MHz,d6-DMSO)δ12.66(br,1H),8.45(s,1H),7.82(d,J＝7.4Hz,2H),7.62(s,1H),7.26(d,J＝7.4Hz,2H),2.34(s,3H)。
实施例9：制备4-(2-氯苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-9)
Figure BDA0002324317520000121
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶(0.166g，1mmol)，4-(2-氯苯基)-2-氨基噻唑(0.210g，1mmol)，K2CO3(0.207g，1.5mmol)和DMF(2mL)，置于100℃的油浴中保温反应8h。向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅱ-9)化合物(0.150克，收率44.1％)。
m.p.252-254℃；1H NMR(600MHz,d6-DMSO)δ12.70(br,1H),8.48(s,1H),7.87(d,J＝7.5Hz,1H),7.70(s,1H),7.57(d,J＝7.5Hz,1H),7.45(t,J＝7.5Hz,1H),7.41(t,J＝7.5Hz,1H)。
实施例10：制备4-(3-氯苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-10)
Figure BDA0002324317520000122
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶(0.166g，1mmol)，4-(3-氯苯基)-2-氨基噻唑(0.210g，1mmol)，K2CO3(0.207g，1.5mmol)和DMF(2mL)，置于100℃的油浴中保温反应8h。向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅱ-10)化合物(0.155克，收率45.6％)。
m.p.188-190℃；1H NMR(600MHz,d6-DMSO)δ12.65(br,1H),9.05(d,J＝2.5Hz,1H),8.32(s,1H),7.87(s,1H),7.78(d,J＝7.6Hz,1H),7.43(m,2H)。
实施例11：制备4-(4-氯苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-11)
Figure BDA0002324317520000123
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶(0.166g，1mmol)，4-(4-氯苯基)-2-氨基噻唑(0.210g，1mmol)，K2CO3(0.207g，1.5mmol)和DMF(2mL)，置于100℃的油浴中保温反应8h。向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅱ-11)化合物(0.0955克，收率28.1％)。
m.p.250-252℃；1H NMR(600MHz,d6-DMSO)δ12.67(br,1H),8.49(d,J＝2.3Hz,1H),7.96(d,J＝8.5Hz,2H),7.80(s,1H),7.52(d,J＝8.5Hz,2H)。
实施例12：制备4-(4-溴苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-12)
Figure BDA0002324317520000131
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶(0.166g，1mmol)，4-(4-溴苯基)-2-氨基噻唑(0.254g，1mmol)，K2CO3(0.207g，1.5mmol)和DMF(2mL)，置于100℃的油浴中保温反应8h。向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅱ-11)化合物(0.0829克，收率21.6％)。
m.p.215-217℃；1H NMR(600MHz,d6-DMSO)δ12.66(br,1H),8.48(d,J＝2.6Hz,1H),7.89(d,J＝8.5Hz,2H),7.80(s,1H),7.65(d,J＝8.5Hz,2H)。
实施例13：制备4-(2-氟苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-13)
Figure BDA0002324317520000132
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶(0.166g，1mmol)，4-(2-氟苯基)-2-氨基噻唑(0.194g，1mmol)，K2CO3(0.207g，1.5mmol)和DMF(2mL)，置于100℃的油浴中保温反应8h。向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅱ-13)化合物(0.203克，收率62.7％)。
m.p.213-215℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.50(br,1H),8.10(m,1H),8.03(m,1H),7.44(m,1H),7.28(m,2H),7.16(s,1H),3.92(m,4H),3.71(m,2H),2.65(m,6H)。
实施例14：制备4-(4-氟苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-14)
Figure BDA0002324317520000141
在试管反应器中加入5-氟-2,4-二氯嘧啶(0.166g，1mmol)，4-(4-氟苯基)-2-氨基噻唑(0.194g，1mmol)，K2CO3(0.207g，1.5mmol)和DMF(2mL)，置于100℃的油浴中保温反应8h。向反应液中加入30ml乙酸乙酯，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以石油醚/乙酸乙酯(V/V＝10/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅱ-14)化合物(0.126克，收率39.0％)。
m.p.220-222℃；1H NMR(500MHz,d6-DMSO)δ12.68(br,1H),8.47(d,J＝2.5Hz,1H),7.97(dd,J＝8.8,5.5Hz,2H),7.71(s,1H),7.29(t,J＝8.8Hz,2H)。
实施例15：制备N-(4-叔丁基噻唑-2-基)-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)-5-氟嘧啶-4-胺(Ⅰ-1)
Figure BDA0002324317520000142
在试管反应器中加入4-叔丁基-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-1)(0.286g，1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g,2mmol)，Et3N(0.202g,2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-1)化合物(0.306克,收率80.5％)。
m.p.100-102℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ:8.57(br,1H),7.96(d,J＝2.6Hz,1H),7.28(s,1H),6.52(s,1H),3.87(t,J＝5.3Hz,4H),3.71(t,J＝5.3Hz,2H),2.74-2.47(m,6H),1.32(s,9H)。
实施例16：制备N-(4-苯基噻唑-2-基)-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)-5-氟嘧啶-4-胺(Ⅰ-2)
Figure BDA0002324317520000143
在试管反应器中加入4-苯基-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-2)(0.306g,1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g，2mmol)，Et3N(0.202g，2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-2)化合物(0.318克，收率79.4％)。
m.p.215-218℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.46(br,1H),8.02(d,J＝2.4Hz,1H),7.87(d,J＝7.4Hz,2H),7.44(t,J＝7.4Hz,2H),7.35(t,J＝7.4Hz,1H),7.15(s,1H),3.92(t,J＝5.2Hz,4H),3.71(t,J＝5.2Hz,2H),2.65(m,6H)。
实施例17：制备N-(4-(2-甲氧基苯基)噻唑-2-基)-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)-5-氟嘧啶-4-胺(Ⅰ-3)
Figure BDA0002324317520000151
在试管反应器中加入4-(2-甲氧基苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-3)(0.336g,1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g,2mmol)，Et3N(0.202g,2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-3)化合物(0.200克，收率46.5％)。
m.p.180-182℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.79(br,1H),7.99(d,J＝2.5Hz,1H),7.43(m,2H),7.33(t,J＝8.1Hz,1H),7.13(s,1H),6.89(dd,J＝8.1,1.6Hz,1H),3.89(t,J＝5.3Hz,4H),3.87(s,3H),3.72(t,J＝5.3Hz,2H),2.69-2.57(m,6H)。
实施例18：制备N-(4-(3-甲氧基苯基)噻唑-2-基)-5-氟-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-胺(Ⅰ-4)
Figure BDA0002324317520000152
在试管反应器中加入4-(3-甲氧基苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-4)(0.336g，1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g，2mmol)，Et3N(0.202g，2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-4)化合物(0.201克，收率46.7％)。
m.p.180-182℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.68(br,1H),8.00(d,J＝2.0Hz,1H),7.43(m,2H),7.34(t,J＝8.3Hz,1H),7.14(s,1H),6.89(d,J＝8.3Hz,1H),3.94-3.87(m,4H),3.71(t,J＝5.0Hz,2H),2.64(m,6H)。
实施例19：制备N-(4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基)-5-氟-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-胺(Ⅰ-5)
Figure BDA0002324317520000161
在试管反应器中加入4-(4-甲氧基苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-5)(0.336g，1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g,2mmol)，Et3N(0.202g,2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-5)化合物(0.236克，收率54.9％)。
m.p.178-180℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.59(br,1H),8.00(d,J＝2.3Hz,1H),7.75(d,J＝8.0Hz,2H),7.24(d,J＝8.0Hz,2H),7.09(s,1H),3.90(t,J＝5.2,4H),3.71(t,J＝5.2Hz,2H),2.68-2.61(m,6H),2.40(s,3H)。
实施例20：制备N-(4-(2-甲基苯基)噻唑-2-基)-5-氟-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-氨基(Ⅰ-6)
Figure BDA0002324317520000162
在试管反应器中加入4-(2-甲基苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-6)(0.320g，1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g,2mmol)，Et3N(0.202g,2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-6)化合物(0.214克，收率51.6％)。
m.p.153-155℃；1H NMR(500MHz,d6-DMSO)δ11.74(s,1H),8.14(d,J＝2.8Hz,1H),7.75–7.47(m,1H),7.26(m,4H),3.78(m,4H),3.56(t,J＝5.6Hz,2H),2.51(m,4H),2.44(m,5H)。
实施例21：制备N-(4-(3-甲基苯基)-噻唑-2-基)-5-氟-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-胺(Ⅰ-7)
Figure BDA0002324317520000171
在试管反应器中加入4-(3-甲基苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-7)(0.320g，1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g,2mmol)，Et3N(0.202g,2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-7)化合物(0.209克，收率50.5％)。
m.p.187-189℃；1H NMR(500MHz,d6-DMSO)δ11.74(br,1H),8.13(m,1H),7.78(s,1H),7.73(d,J＝7.4Hz,1H),7.59(s,1H),7.32(t,J＝7.4Hz,1H),7.14(d,J＝7.4Hz,1H),3.78(m,4H),3.56(t,J＝5.4Hz,2H),2.52(m,4H),2.45(t,J＝5.4Hz,2H),2.36(s,3H)。
实施例22：制备N-(4-(4-甲基苯基)噻唑-2-基)-5-氟-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-胺(Ⅰ-8)
Figure BDA0002324317520000172
在试管反应器中加入4-(4-甲基苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-8)(0.320g，1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g,2mmol)，Et3N(0.202g,2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-8)化合物(0.226克，收率54.5％)。
m.p.113-215℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.62(br,1H),8.00(m,1H),7.75(d,J＝7.7Hz,2H),7.24(d,J＝7.7Hz,2H),7.09(s,1H),3.91(m,4H),3.71(t,J＝4.7Hz,2H),2.64(m,6H),2.40(s,3H)。
实施例23：制备N-(4-(2-氯苯基)噻唑-2-基)-5-氟-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-胺(Ⅰ-9)
Figure BDA0002324317520000181
在试管反应器中加入4-(2-氯苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-9)0.340g(1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g,2mmol)，Et3N(0.202g,2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-9)化合物(0.328克，收率75.6％)。
m.p.185-187℃；1H NMR(500MHz,d6-DMSO)δ11.80(br,1H),8.14(d,J＝2.8Hz,1H),7.90(dd,J＝7.8,1.7Hz,1H),7.63(s,1H),7.55(d,J＝7.8Hz,1H),7.43(t,J＝7.8Hz,1H),7.37(t,J＝7.8Hz,1H),3.77(m,4H),3.56(t,J＝6.2Hz,2H),2.51(m,4H),2.44(t,J＝6.2Hz,2H)。
实施例24：制备N-(4-(3-氯苯基)噻唑-2-基)-5-氟-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-胺(Ⅰ-10)
Figure BDA0002324317520000182
在试管反应器中加入4-(3-氯苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-10)(0.340g，1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g,2mmol)，Et3N(0.202g,2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-10)化合物(0.304克，收率70.0％)。
m.p.207-209℃；1H NMR(500MHz,d6-DMSO)δ11.76(br,1H),8.14(d,J＝2.9Hz,1H),8.00(m,1H),7.90(dd,J＝7.8,0.8Hz,1H),7.77(d,J＝2.8Hz,1H),7.38(dd,J＝7.8,0.8Hz,1H),3.77(m,4H),3.56(t,J＝6.2Hz,2H),2.51(m,4H),2.44(t,J＝6.2Hz,2H)。
实施例25：制备N-(4-(4-氯苯基)噻唑-2-基)-5-氟-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-胺(Ⅰ-11)
Figure BDA0002324317520000191
在试管反应器中加入4-(4-氯苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-11)(0.340g，1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g,2mmol)，Et3N(0.202g,2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-11)化合物(0.299克，收率68.8％)。
m.p.247-249℃；1H NMR(500MHz,d6-DMSO)δ11.80(s,1H),8.14(d,J＝2.7Hz,1H),7.95(d,J＝8.5Hz,2H),7.69(s,1H),7.49(d,J＝8.5Hz,2H),3.76(m,4H),3.55(m,2H),2.51(m,4H)2.44(t,J＝6.1Hz,2H)。
实施例26：制备N-(4-(4-溴苯基)噻唑-2-基)-5-氟-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-胺(Ⅰ-12)
Figure BDA0002324317520000192
在试管反应器中加入4-(4-溴苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-12)(0.384g，1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g,2mmol)，Et3N(0.202g,2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-12)化合物(0.406克，收率85.0％)。
m.p.103-105℃；1H NMR(500MHz,d6-DMSO)δ11.78(br,1H),8.14(d,J＝2.1Hz,1H),7.88(dd,J＝8.3,2.6Hz,2H),7.69(s,1H),7.63(dd,J＝8.3,2.6Hz,2H),3.77(m,4H),3.56(t,J＝6.2Hz,2H),2.55-2.47(m,4H),2.44(t,J＝6.2Hz,2H)。
实施例27：制备N-(4-(2-氟苯基)噻唑-2-基)-5-氟-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-胺(Ⅰ-13)
Figure BDA0002324317520000201
在试管反应器中加入4-(2-氟苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-13)(0.324g，1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g,2mmol)，Et3N(0.202g,2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-13)化合物(0.262克，收率62.7％)。
m.p.213-215℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.50(br,1H),8.10(m,1H),8.03(m,1H),7.44(m,1H),7.28(m,2H),7.16(s,1H),3.92(m,4H),3.71(m,2H),2.65(m,6H)。
实施例28：制备N-(4-(4-氟苯基)噻唑-2-基)-5-氟-2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-胺(Ⅰ-14)
Figure BDA0002324317520000202
在试管反应器中加入4-(4-氟苯基)-N-(5-氟-2-氯嘧啶-4-基)噻唑-2-胺(Ⅱ-14)(0.324g，1mmol)，羟乙基哌嗪(0.260g,2mmol)，Et3N(0.202g,2mmol)和乙醇(2ml)，置于80℃的油浴中回流反应8h。向反应液中加入30ml二氯甲烷，用30ml水洗3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏除去溶剂，以二氯甲烷/甲醇(V/V＝20/1)为洗脱剂经硅胶柱层析得到式(Ⅰ-14)化合物(0.236克，收率56.5％)。
m.p.230-232℃；1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.61(br,1H),8.01(d,J＝2.3Hz,1H),7.83(dd,J＝8.6,5.4Hz,2H),7.11(t,J＝8.6Hz,2H),7.07(s,1H),3.91(d,J＝5.2Hz,4H),3.71(t,J＝5.2Hz,2H),2.64(m,6H)。
测试例：化合物(I-1)～(I-14)体外抗肿瘤活性测试
A.原理：CCK-8试剂被细胞通过线粒体内的脱氢还原酶生成橙黄色的甲臜(formazan)用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，间接反映对细胞抑制作用。
B.细胞：HepG-2(肝癌细胞株)，A549(肺癌细胞株)，HL-60(人原髓细胞白血病细胞)，K-562(人慢性髓原白血病细胞)(以上细胞全部购自中国科学院上海生命科学院细胞库)。
C.实验步骤
(1)样品的准备：使用DMSO稀释样品至5μM，进行初步筛选。对于K-562细胞，初步筛选结束后，使用一系列浓度梯度的样品进行再次检测，浓度依次为0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4μM。
(2)细胞的培养
培养基的配制:完全培养基含10％血清，1％双抗(青霉素、链霉素)。
细胞的培养：将肿瘤细胞接种于培养基中，置37℃，5％CO2培养箱中培养，3～5d传代。
(3)测定样品对肿瘤细胞生长的抑制作用
将细胞用EDTA-胰酶消化液消化，并用培养基稀释成1×106/mL，加到96孔细胞培养板中，每孔100uL，置37℃，5％CO2培养箱中培养。接种8h-10h后，加入DMSO稀释的样品，每个浓度加3孔，置37℃，5％CO2培养箱中培养，72h后在细胞培养孔中加入10ul CCK-8试剂，置37℃孵育1h-2h，放入酶标仪检测OD值。含同样浓度DMSO的培养基培养的细胞作为对照，计算样品对肿瘤细胞的抑制率。
将制备的化合物(I-1)～(I-14)按照上述方法分别进行体外抗肿瘤活性的测试。
对于以上4种肿瘤细胞的活性测试结果如表1～4所示：
表1：化合物对HepG-2细胞的抑制率(％)
化合物 抑制率(％)
Ⅰ-2 10
Ⅰ-5 10
Ⅰ-9 29
Ⅰ-10 20
Ⅰ-13 14
表2：化合物对A549细胞的抑制率(％)
化合物 抑制率(％)
Ⅰ-2 28
Ⅰ-5 13
Ⅰ-6 32
Ⅰ-7 15
Ⅰ-9 48
Ⅰ-10 50
Ⅰ-11 15
表3：化合物对HL-60细胞的抑制率(％)
化合物 抑制率(％)
Ⅰ-4 15
Ⅰ-9 20
Ⅰ-10 22
Ⅰ-13 10
Ⅰ-14 14
表4：化合物对K-562细胞的抑制率(％)
化合物 抑制率(％)
Ⅰ-1 19
Ⅰ-2 25
Ⅰ-3 22
Ⅰ-4 10
Ⅰ-5 41
Ⅰ-6 23
Ⅰ-7 37
Ⅰ-8 20
Ⅰ-9 69
Ⅰ-10 63
Ⅰ-11 35
Ⅰ-12 27
Ⅰ-13 21
Ⅰ-14 32
由表4可以看出，取代基一样但位置不同的I-9、I-10、I-11三个化合物对于K-562细胞的抑制作用显著，于是使用一系列浓度梯度的样品进行再次检测做，测得IC50值如下：
表5：化合物对K-562细胞的IC50值(μmol/ml)
化合物 IC<sub>50</sub>(μmol/ml)
Ⅰ-9 2.512
Ⅰ-10 6.214
Ⅰ-11 9.553
结论：从表1～4可知，本发明化合物对HepG-2细胞株、A549细胞株、HL-60细胞株、K-562细胞株有抑制作用，其中化合物(Ⅰ-9)和(Ⅰ-10)对HepG-2细胞株有较好的抑制作用；(Ⅰ-9)和(Ⅰ-10)对A549细胞株有显著的抑制作用，化合物Ⅰ-2和Ⅰ-6对A549细胞株有较好的抑制作用；化合物Ⅰ-9和Ⅰ-10对HL-60细胞株具有较好的抑制作用；化合物Ⅰ-9和Ⅰ-10对K-562细胞株具有显著的抑制作用，化合物Ⅰ-2、Ⅰ-3、Ⅰ-5、Ⅰ-6、Ⅰ-7、Ⅰ-8、Ⅰ-11、Ⅰ-12、Ⅰ-13和Ⅰ-14对K-562细胞株有较好的抑制作用。
通过以上结果发现化合物I-9和I-10对于以上四种肿瘤细胞都有较好的抑制作用，但对K562细胞抑制作用最好，于是进一步细胞实验得出I-9、I-10和I-11三个化合物对于K-562细胞的的IC50值分别为2.512μmol、6.214μmol和9.553μmol。具有很大的潜力，可作为先导化合物进行后续的抗肿瘤新药研究。

Claims (7)

1.一种式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐，
Figure FDA0002980335720000011
其中：
所述的结构单元
Figure FDA0002980335720000012
为
Figure FDA0002980335720000013
R3为
Figure FDA0002980335720000014
Rb为
Figure FDA0002980335720000015
Rc为H、F、Cl、Br、I、OH、NH2、CN、NO2、-OCH3、C1-C4烷基或
Figure FDA0002980335720000016
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的R3为
Figure FDA0002980335720000017
3.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述的式(I)化合物为：
Figure FDA0002980335720000018
Figure FDA0002980335720000021
4.根据权利要求1～3任意一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。
5.一种制备根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐的中间体，其特征在于，所述的中间体为式(II)化合物：
Figure FDA0002980335720000022
其中，
X为F或Cl；
R3如权利要求1所定义。
6.一种根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
Figure FDA0002980335720000031
其中，
X为F或Cl；
R1、R2、R3如权利要求1所定义；
在有机溶剂1中，在碱1存在下，以式(II)化合物与式(III)化合物为原料，60～120℃下反应，冷却，萃取，有机层浓缩纯化得式(I)化合物；
所述的碱1为K2CO3、KHCO3、KOAc、KF、Et3N、EtN(i-Pr)2或吡啶；
所述的有机溶剂1为DMSO、DMF、DMA、1,4-二氧六环、甲苯、乙腈、氯仿、四氢呋喃或乙醇；
所述式(II)化合物、式(III)化合物、碱1的投料摩尔比为1:1～6:1～5。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的式(II)化合物由以下步骤制备：
Figure FDA0002980335720000032
X为F或Cl；
R3如权利要求6所定义；
在有机溶剂2中，在碱2存在下，以式(IV)化合物与式(V)化合物于30～150℃下反应，冷却，萃取，有机层浓缩纯化得式(II)化合物；
所述碱2为K2CO3、KHCO3、KOAc、KF、Et3N、EtN(i-Pr)2或吡啶；
所述的有机溶剂2为DMSO、DMF、DMA、1,4-二氧六环、甲苯、乙腈、氯仿或四氢呋喃；
所述式(IV)化合物、式(V)化合物、碱2的投料摩尔比为1:0.9～1.5:1～3。
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