CN111109069A - 一种利用人工有性繁育生产长茎葡萄蕨藻种苗的方法 - Google Patents

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Abstract

本申请属于海藻养殖技术领域，公开了一种利用人工有性繁育生产长茎葡萄蕨藻种苗的方法，选取生长2个月以上、长势良好的长茎葡萄蕨藻，清理藻体表面杂藻，预培养后作为种藻；种藻先低温(15‑20℃)诱导，再置于常规条件下培养，定期换水，直至观察到性成熟；将种藻移入消毒的铺有附着基的育苗池中，给予一定光照刺激，培养释放雌雄配子后将种藻移出育苗池，受精卵定植后养殖1‑2个月即可获得人工种苗。本发明所述方法可利用有性繁育生产长茎葡萄蕨藻种苗，适合大规模繁育长茎葡萄蕨藻种苗，繁殖效率高，且种苗生产不受季节限制。

Description

一种利用人工有性繁育生产长茎葡萄蕨藻种苗的方法
技术领域
本发明属于海藻养殖技术领域，具体涉及一种利用人工有性繁育生产长茎葡萄蕨藻种苗的方法。
背景技术
长茎葡萄蕨藻(Caulerpa lentillifera J.Agardh)，又称海葡萄，属于绿藻门(Chlorophyta)蕨藻科(Caulerpaceae)蕨藻属(Caulerpa)。长茎葡萄蕨藻主要生长于太平洋的热带和亚热带潮间带海区水流较缓的沙地或礁石，是一种暖温性大型经济绿藻。长茎葡萄蕨藻不仅含有大量氨基酸、不饱和脂肪酸、矿物质以及磷、钙、镁等微量元素，而且不含胆固醇，其营养价值远高于其他海藻和蔬菜。此外，长茎葡萄蕨藻还具有独特的食用口感，被誉为“绿色鱼子酱”，是潜在的高营养价值保健品，在食品、医药、保健、生态修复等各方面都极具开发潜力。
近年来，海葡萄人工养殖逐渐发展起来，我国慢慢开始重视对海葡萄的养殖。而种苗繁育是海葡萄人工养殖的关键。目前，国内外海葡萄种苗繁育的方法主要是无性繁殖，即依靠海葡萄茎状部分进行营养繁殖。但营养繁殖存在种质退化、抗逆性减弱等风险。此外营养繁殖需要大量藻体，不可避免地限制了育苗数量，难以有效的扩大海葡萄的生产规模且增加了海葡萄的养殖成本。
有性繁殖在解决大规模苗种生产方面较无性繁殖(营养繁殖)有着无可比拟的优势，其是进行种质改良、良种繁育和降低成本的有效途径。海葡萄在特定自然条件下可以进行有性繁殖，但海葡萄人工有性繁殖尚未见报道。因此，在人工条件下如何诱导海葡萄进行有性繁殖是海葡萄有性种苗规模生产的关键。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的是在于提供一种利用人工有性繁育来大量培育海葡萄种苗的方法，该方法其不受季节、自然生态条件等限制，需要的种藻少、繁殖量大，可用于海葡萄人工栽培。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
一种利用人工有性繁育生产长茎葡萄蕨藻种苗的方法，选取生长2个月以上、长势良好的长茎葡萄蕨藻，清理藻体表面杂藻，预培养后作为种藻；种藻先低温诱导，再置于常规条件下培养，定期换水，直至观察到性成熟；将种藻移入消毒的铺有附着基的育苗池中，给予一定光照刺激，培养释放雌雄配子后将种藻移出育苗池，受精卵定植后养殖1-2个月即可人工种苗。
在本发明中，所述种藻的清洗是用灭菌过滤海水反复冲洗藻体4-6遍；所述预培养为将藻体置于25-32℃、光照强度2000-4000Lx、光周期12D:12L条件下暂养。
在本发明中，所述低温诱导为15-20℃，培养1-6天。
在本发明中，所述常规条件下培养为将藻体放入灭菌海水中，置于25-32℃，光照强度2000-4000Lx，光周期12D:12L条件下培养。
在本发明中，所述定期换水为每隔7-10天换一次海水。
在本发明中，所述性成熟为镜检海葡萄种藻体表出现网状结构，并球状小枝基部长出芽管，表明海葡萄性成熟。
在本发明中，所述附着基为碎石、碎珊瑚石、棕绳或布帘。所述附着基铺在育苗池池底。
在本发明中，所述育苗池消毒为育苗池注入海水，水位10-20厘米，按漂白粉0.5-1克/平方米投放量对池底进行消毒，浸池3天后排干消毒水体。
在本发明中，所述性成熟的海葡萄种藻移入育苗池内育苗池水位为30-60厘米，种藻密度为1-1.5克/平方米。
在本发明中，所述光照刺激培养的光照强度为2000-8000Lx，培养3-4天。
在本发明中，海葡萄受精卵定植后，将附着受精卵的附着基移入新的育苗池，根据其生长状况适当施加尿素或磷酸二铵，及时清除其他杂藻。
进一步的，在本发明中，水位按1米计，尿素施用量为20-60克/平方米，磷酸二铵施用量为50-150克/平方米。
由上述技术方案可知，本发明提供了一种利用人工有性繁育生产长茎葡萄蕨藻种苗的方法，选取生长2个月以上、长势良好的长茎葡萄蕨藻，清理藻体表面杂藻，预培养后作为种藻；种藻先低温诱导，再置于常规条件下培养，定期换水，直至观察到性成熟；将种藻移入消毒的铺有附着基的育苗池中，给予一定光照刺激，培养释放雌雄配子后将种藻移出育苗池，受精卵定植后养殖1-2个月即可获得人工种苗。与现有技术相比，本发明所述方法具有如下优点：
(1)本发明可利用有性繁育生产长茎葡萄蕨藻种苗；
(2)本发明可大规模繁育长茎葡萄蕨藻种苗，长茎葡萄蕨藻繁殖效率高，且种苗生产不受季节限制；
(3)本发明可利用长茎葡萄蕨藻有性繁殖过程中产生的自然突变株筛选耐低温、耐低盐等长茎葡萄蕨藻新株系。
具体实施方式
本发明公开了一种利用人工有性繁育生产长茎葡萄蕨藻种苗的方法。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及产品已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
一种利用人工有性繁育生产长茎葡萄蕨藻种苗的方法，包括如下步骤：
(1)种藻选择：选取生长2个月以上、长势良好海葡萄藻体，去除藻体表面的杂藻和附着物，再用灭菌过滤海水反复冲洗4-6遍，将藻体置于25-32℃、光照强度2000-4000Lx、光周期12D:12L条件下暂养；
(2)诱导：将海葡萄种藻置于低温下，培养1-6天，随后将藻体放入灭菌海水中，置于25-32℃，光照强度2000-4000Lx，光周期12D:12L条件下培养，定期换水；
(3)有性生殖特征观察：定期镜检海葡萄种藻体表变化，直至海葡萄体表出现网状结构并球状小枝基部长出芽管，表明海葡萄性成熟；
(4)附着基选择：选择碎石、碎珊瑚石、棕绳或布帘铺在池底作为长茎葡萄蕨藻种苗的附着基；
(5)育苗池消毒：注入海水，水位10-20厘米，按漂白粉0.5-1克/平方米投放量对池底进行消毒，浸池3天后排干消毒水体；
(6)配子释放：将性成熟的海葡萄种藻置于育苗池内，给予一定光照刺激，培养3-4天，之后将种藻移出育苗池；
(7)种苗管理：海葡萄受精卵定植后，将附着受精卵的附着基移入新的育苗池，适当施加尿素或磷酸二铵，及时清除其他杂藻；
(8)人工种苗养成：养殖1-2个月后即可获得海葡萄种苗。
为了进一步理解本发明，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
如无特殊说明，本发明实施例中所涉及的试剂均为市售产品，均可以通过商业渠道购买获得。
实施例1、
种藻选择：选取生长时间超过2个月、长势良好海葡萄藻体，用细毛刷去除藻体表面的杂藻和附着物，再用灭菌过滤海水反复冲洗4-6遍。将藻体置于28℃，光照强度3000Lx，光周期12D:12L条件下暂养。
诱导：将海葡萄种藻置于18℃下，培养3天，随后将藻体放入灭菌海水中，置于28℃，光照强度4000Lx，光周期12D:12L条件下培养，每隔7天换一次海水。
有性生殖特征观察：每隔7天，取海葡萄种藻，用体式显微镜观察藻全体表的变化，直至藻体体表出现网状结构并球状小枝基部长出芽管，表明海葡萄已性成熟。
附着基选择：选择3毫米左右的碎石铺在池底作为长茎葡萄蕨藻种苗的附着基。
育苗池消毒：注入海水，水位10厘米，按漂白粉0.5克/平方米投放量对池底进行消毒，浸池3天后排干消毒水体。
配子释放：育苗池内注入海水，水位为30厘米，将已性成熟的海葡萄种藻按1克/平方米密度置于育苗池内，光照强度8000Lx下培养3天，之后将种藻移出育苗池。
种苗管理：海葡萄受精卵定植后，将附着受精卵的附着基移入新的育苗池，每隔7天施加20克/平方米尿素，及时清除其他杂藻。
人工种苗养成：每隔7天施加40克/平方米尿素，养殖1个月海葡萄种苗达到4cm后即可收获种苗，统计人工种苗数量为3.6万能株/水泥池(8平方米)。
实施例2、
种藻选择：选取生长时间超过3个月、长势良好海葡萄藻体，用细毛刷去除藻体表面的杂藻和附着物，再用灭菌过滤海水反复冲洗4-6遍。将藻体置于28℃，光照强度3000Lx，光周期12D:12L条件下暂养。
诱导：将海葡萄种藻置于15℃下，培养1天，随后将藻体放入灭菌海水中，置于28℃，光照强度4000Lx，光周期12D:12L条件下培养，每隔7天换一次海水。
有性生殖特征观察：每隔7天，取海葡萄种藻，用体式显微镜观察藻全体表的变化，直至藻体体表出现网状结构并球状小枝基部长出芽管，表明海葡萄已性成熟。
附着基选择：选择布帘(16条，120×2厘米布条)铺在池底作为长茎葡萄蕨藻种苗的附着基。
育苗池消毒：注入海水，水位10厘米，按漂白粉0.5克/平方米投放量对池底进行消毒，浸池3天后排干消毒水体。
配子释放：育苗池内注入海水，水位为45厘米，将已性成熟的海葡萄种藻按1.5克/平方米密度置于育苗池内，光照强度4000Lx下培养3天，之后将种藻移出育苗池。
种苗管理：海葡萄受精卵定植后，将附着受精卵的附着基移入新的育苗池，每隔7天施加20克/平方米尿素，及时清除其他杂藻。
人工种苗养成：每隔7天施加80克/平方米磷酸二铵，养殖2个月后海葡萄种苗达到5cm后，统计人工种苗数量为4.5万株/水泥池(8平方米)。
实施例3、
种藻选择：选取生长时间超过3个月、长势良好海葡萄藻体，用细毛刷去除藻体表面的杂藻和附着物，再用灭菌过滤海水反复冲洗4-6遍。将藻体置于28℃，光照强度3000Lx，光周期12D:12L条件下暂养。
诱导：将海葡萄种藻置于20℃下，培养6天，随后将藻体放入灭菌海水中，置于28℃，光照强度4000Lx，光周期12D:12L条件下培养，每隔7天换一次海水。
有性生殖特征观察：每隔7天，取海葡萄种藻，用体式显微镜观察藻全体表的变化，直至藻体体表出现网状结构并球状小枝基部长出芽管，表明海葡萄已性成熟。
附着基选择：选择2毫米左右的碎珊瑚石铺在池底作为长茎葡萄蕨藻种苗的附着基。
育苗池消毒：注入海水，水位10厘米，按漂白粉0.5克/平方米投放量对池底进行消毒，浸池3天后排干消毒水体。
配子释放：育苗池内注入海水，水位为55厘米，将已性成熟的海葡萄种藻按1.0克/平方米密度置于育苗池内，光照强度8000Lx下培养3天，之后将种藻移出育苗池。
种苗管理：海葡萄受精卵定植后，将附着受精卵的附着基移入新的育苗池，每隔7天施加20克/平方米尿素，及时清除其他杂藻。
人工种苗养成：每隔7天施加70克/平方米磷酸二铵，养殖2个月后海葡萄种苗达到6cm后，统计人工种苗数量2.5万株/水泥池(8平方米)。
本发明不限于上述实施例，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。

Claims (9)

1.一种利用人工有性繁育生产长茎葡萄蕨藻种苗的方法，选取生长2个月以上、长势良好的长茎葡萄蕨藻，清理藻体表面杂藻，预培养后作为种藻；种藻先低温诱导，再置于常规条件下培养，定期换水，直至观察到性成熟；将种藻移入消毒的铺有附着基的育苗池中，给予一定光照刺激，培养释放雌雄配子后将种藻移出育苗池，受精卵定植后养殖1-2个月即可获得人工种苗。
2.根据权利要求1所述的方法，所述种藻的清洗是用灭菌过滤海水反复冲洗藻体4-6遍；所述预培养为将藻体置于25-32℃、光照强度2000-4000Lx、光周期12D:12L条件下暂养。
3.根据权利要求1所述的方法，所述低温诱导为15-20℃，培养1-6天；所述常规条件下培养为将藻体放入灭菌海水中，置于25-32℃，光照强度2000-4000Lx，光周期12D:12L条件下培养；所述定期换水为每隔7-10天换一次海水。
4.根据权利要求1所述的方法，所述性成熟为镜检海葡萄种藻体表出现网状结构，并球状小枝基部长出芽管，表明海葡萄性成熟。
5.根据权利要求1所述的方法，所述附着基为碎石、碎珊瑚石、棕绳或布帘。
6.根据权利要求1所述的方法，所述育苗池消毒为育苗池注入海水，水位10-20厘米，按漂白粉0.5-1克/平方米投放量对池底进行消毒，浸池3天后排干消毒水体。
7.根据权利要求1所述的方法，所述性成熟的海葡萄种藻移入育苗池内育苗池水位为30-60厘米，种藻密度为1-1.5克/平方米；所述光照刺激的光照强度为2000-8000Lx，培养3-4天。
8.根据权利要求1所述的方法，海葡萄受精卵定植后将附着受精卵的附着基移入新的育苗池，根据种苗生长状况适当施加尿素或磷酸二铵，及时清除其他杂藻。
9.根据权利要求8所述的方法，水位按1米计，尿素施用量为20-60克/平方米，磷酸二铵施用量为50-150克/平方米。
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