CN111088212A - 一种紫色人参组织细胞的培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种紫色人参组织细胞的培养方法，包括如下步骤：1)在无菌条件下，将生长旺盛的人参细胞转接到培养基上，在23±2℃的暗环境下培养；2)将放置人参细胞的人参细胞容器进行分别存放，50％体积量的人参细胞让其自然生长；50％体积量的人参细胞每隔2～3天放置于紫外灯下照射2～6h，30天后得到紫色人参组织细胞；3)将步骤2)得到的紫色人参组织细胞加入浸出溶剂后放置，得到浸出液，测定370nm吸收光度值。本发明紫色人参组织细胞的培养方法，通过将人参细胞通过紫外灭灯照射，改变人参细胞的生长培育的环境，得到紫色的人参细胞，通过人参细胞的生物转化，得到天然的花青素，过程简单，容易操作。
Description
技术领域
本发明涉及细胞培养技术领域，具体涉及的是一种紫色人参组织细胞的培养方法。
背景技术
人参是名贵的滋补药材，被大量应用于食品、饮料、化妆品许多行业，需求量增加。从原料供给的观点，人参栽培比较困难，受自然条件的影响大，收获周期长，且占用大量耕地。植物组织培养和细胞培养可以克服以上的问题，还可以通过人工调节生产环境或条件获得一些其他物质。人参组织培养的研究，在上60年代初就开始了。经过多年的发展，已经取得巨大的成就。通过改变培养的条件达到组织细胞培养和生物转化的目的。
人参组织的培养在光照和黑暗条件下均可发生，但继代培养时的光照对人参组织培养有明显的抑制作用。目前大部分的人参组织细胞培养均采用黑暗条件下培养。
也有研究通过辐射来获得高产的细胞株。运用500-3000R(伦琴)的Co60γ射线处理人参细胞，结果表明1000-2000R能促进组织生产，而500-2000R的剂量同时还具有提高培养物中皂苷的含量，辐射处理的影响可以持续到多次继代培养。但该方法缺点是Co60需要专业机构去照射，实际应用不方便。
发明内容
针对上述不足之处，本发明的目的在于提供一种紫色人参组织细胞的培养方法，其具有制备过程简单，操作方便的优点。
本发明的技术方案概述如下：
一种紫色人参组织细胞的培养方法，其中，包括如下步骤：
1)在无菌条件下，将生长旺盛的人参细胞转接到MS培养基上，在23±2℃的暗环境下培养1～2天；
2)将放置人参细胞的人参细胞容器进行分别存放，50％体积量的人参细胞让其自然生长；50％体积量的人参细胞每隔2～3天，放置于紫外灯下照射2～6h，然后放回暗环境让其自然生长；30天后得到紫色人参组织细胞；
3)将步骤2)得到的人参组织细胞加入样品瓶中，加入浸出溶剂后放置1-3h，得到浸出液，将浸出液置于紫外分光光度计测量容器中，测定370nm吸收光度值，根据吸光光度值判断紫色人参组织细胞中花青素的含量，得到紫色人参组织细胞培养情况。
优选的是，所述的紫色人参组织细胞的培养方法，其中，所述紫外灯的功率为20～40W。
优选的是，所述的紫色人参组织细胞的培养方法，其中，所述浸出溶剂包括甲醇和盐酸，其体积比为10:1。
优选的是，所述的紫色人参组织细胞的培养方法，其中，所述盐酸的浓度为0.2～0.6mol/L。
优选的是，所述的紫色人参组织细胞的培养方法，其中，所述步骤3)放置时间为1.5-2h。
本发明的有益效果是：
本发明紫色人参组织细胞的培养方法，通过将人参细胞通过紫外灭灯照射，改变人参细胞的生长培育的环境，得到紫色的人参细胞，通过人参细胞的生物转化，得到天然的花青素，过程简单，容易操作。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
本发明提供一种紫色人参组织细胞的培养方法，其中，包括如下步骤：
1)在无菌条件下，将生长旺盛的人参细胞转接到MS培养基上，在23±2℃的暗环境下培养1～2天；
2)将放置人参细胞的人参细胞容器进行分别存放，50％体积量的人参细胞让其自然生长；50％体积量的人参细胞每隔2～3天放置于紫外灯下照射2～6h，然后放回暗环境让其自然生长；30天后得到紫色人参组织细胞；
3)将步骤2)得到的紫色人参组织细胞加入样品瓶中，加入浸出溶剂后放置1-3h，得到浸出液，将浸出液置于紫外分光光度计测量容器中，测定370nm吸收光度值，根据吸光光度值判断紫色人参组织细胞中花青素的含量，得到紫色人参组织细胞培养情况。
作为本案又一实施例，其中，紫外灯的功率为20～40W。
作为本案又一实施例，其中，浸出溶剂包括甲醇和盐酸，其体积比为10:1。
作为本案又一实施例，其中，盐酸的浓度为0.2～0.6mol/L。
作为本案又一实施例，其中，步骤3)放置时间为1.5-2h。
下面列出具体的实施例：
实施例1：
一种紫色人参组织细胞的培养方法，包括如下步骤：
1)在无菌条件下，将生长旺盛的人参细胞转接到培养基上，在23±2℃的暗环境下培养1天；
2)将放置人参细胞的人参细胞容器进行分别存放，50％体积量的人参细胞让其自然生长；50％体积量的人参细胞每隔2天，放置于紫外灯下照射6h，紫外灯的功率为40W，然后放回暗环境让其自然生长；30天后得到紫色人参组织细胞；
3)将步骤2)得到的紫色人参组织细胞取1g加入样品瓶中，加入浸出溶剂后放置1h，浸出溶剂包括10ml甲醇和1ml盐酸，盐酸的浓度为0.2mol/L得到浸出液，将浸出液置于紫外分光光度计测量容器中，测定370nm吸收光度值，根据吸光光度值判断紫色人参组织细胞中花青素的含量，得到紫色人参组织细胞培养情况。
实施例2：
一种紫色人参组织细胞的培养方法，包括如下步骤：
1)在无菌条件下，将生长旺盛的人参细胞转接到培养基上，在23±2℃的暗环境下培养1.5天；
2)将放置人参细胞的人参细胞容器进行分别存放，50％体积量的人参细胞让其自然生长；50％体积量的人参细胞每隔2.5天放置于紫外灯下照射2h，紫外灯的功率为30W，然后放回暗环境让其自然生长；30天后得到紫色人参组织细胞；
3)将步骤2)得到的紫色人参组织细胞加入样品瓶中，加入浸出溶剂后放置2h，浸出溶剂包括10ml甲醇和1ml盐酸，盐酸浓度为0.4mol/L，其体积比为10:1，得到浸出液，将浸出液置于紫外分光光度计测量容器中，测定370nm吸收光度值，根据吸光光度值判断紫色人参组织细胞中花青素的含量，得到紫色人参组织细胞培养情况。
实施例3：
一种紫色人参组织细胞的培养方法，包括如下步骤：
1)在无菌条件下，将生长旺盛的人参细胞转接到培养基上，在23±2℃的暗环境下培养2天；
2)将放置人参细胞的人参细胞容器进行分别存放，50％体积量的人参细胞让其自然生长；50％体积量的人参细胞每隔3天，放置于紫外灯下照射6h，紫外灯的功率为20W，然后放回暗环境让其自然生长；30天后得到紫色人参组织细胞；
3)将步骤2)得到的紫色人参组织细胞加入样品瓶中，加入浸出溶剂后放置3h，浸出溶剂包括10ml甲醇和1ml盐酸，盐酸的浓度为0.6mol/L，得到浸出液，将浸出液置于紫外分光光度计测量容器中，测定370nm吸收光度值，根据吸光光度值判断紫色人参组织细胞中花青素的含量，得到紫色人参组织细胞培养情况。
下面列出实施例1～3人参细胞紫外吸光光度值测试结果：
表1
从实施例1～3的测试结果表1可以看出，人参细胞通过紫外灭灯照射，改变人参细胞的生长培育的环境，得到紫色的人参细胞，通过人参细胞的生物转化，得到天然的花青素，过程简单，容易操作。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节。
Claims (5)
1.一种紫色人参组织细胞的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)在无菌条件下，将生长旺盛的人参细胞转接到培养基上，在23±2℃的暗环境下培养1～2天；
2)将放置人参细胞的人参细胞容器进行分别存放，50％体积量的人参细胞让其自然生长；50％体积量的人参细胞每隔2～3天放置于紫外灯下照射2～6h，然后放回暗环境让其自然生长；30天后得到紫色人参组织细胞；
3)将步骤2)得到的紫色人参组织细胞加入样品瓶中，加入浸出溶剂后放置1-3h，得到浸出液，将浸出液置于紫外分光光度计测量容器中，测定370nm吸收光度值，根据吸光光度值判断紫色人参组织细胞中花青素的含量，得到紫色人参组织细胞培养情况。
2.根据权利要求1所述的紫色人参组织细胞的培养方法，其特征在于，所述紫外灯的功率为20～40W。
3.根据权利要求1所述的紫色人参组织细胞的培养方法，其特征在于，所述浸出溶剂包括甲醇和盐酸，其体积比为10:1。
4.根据权利要求3所述的紫色人参组织细胞的培养方法，其特征在于，所述盐酸的浓度为0.2～0.6mol/L。
5.根据权利要求1所述的紫色人参组织细胞的培养方法，其特征在于，所述步骤3)放置时间为1.5-2h。
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| CN201911384726.9A CN111088212A (zh) | 2019-12-28 | 2019-12-28 | 一种紫色人参组织细胞的培养方法 |
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|---|---|---|---|---|
| CN101632785A (zh) * | 2008-07-25 | 2010-01-27 | 王跃进 | 凉性黑人参的制备方法 |
| CN102949425A (zh) * | 2012-12-04 | 2013-03-06 | 王跃进 | 变性黑人参及其营养多样性的制备工艺 |
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2019
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Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| CN101632785A (zh) * | 2008-07-25 | 2010-01-27 | 王跃进 | 凉性黑人参的制备方法 |
| CN102949425A (zh) * | 2012-12-04 | 2013-03-06 | 王跃进 | 变性黑人参及其营养多样性的制备工艺 |
Non-Patent Citations (1)
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|---|
| 李树敏: "人参色素细胞培养的研究" * |
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