CN108611305B - 一种培养地木耳的营养缓释培养基及其制作方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种培养地木耳的缓释培养基，包括以下重量份的原料：土壤80‑100份、蚯蚓粪20‑50份、草木灰30‑50份、苜蓿水提液30‑40份、土壤水提液20‑60份、琼脂粉10‑20份、石英砂10‑20份、水1000‑2000份。本发明的一种培养地木耳的缓释培养基，添加的都是天然的有机肥料，严格控制土壤的污染，因此培养基为无公害的，不仅促进藻体生长，而且不带进有害物质。利用营养控释层有效地避免地木耳与土壤直接接触，且待释层中营养通过控释层间接供应，从而解决了在食用野生地木耳时出现的清洗难的问题。

Description

一种培养地木耳的营养缓释培养基及其制作方法

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种培养地木耳的缓释培养基及其制作方法。

背景技术

念珠藻属中的地木耳目前没有实现人工规模化培养，主要是采集野生地木耳为主。但野生地木耳生长在土壤或砂石上面，表面容易滋生细菌，粘附土壤及钙质等，食用时，清洗非常困难。目前有关地木耳的报道中，最常用的培养基为BG11培养基，其营养都是添加化学试剂制备而得，其成本比较高，加之藻类富集重金属的能力很强，所使用的化学试剂中隐藏重金属污染的风险。

发明内容

本发明的目的在于提供一种培养地木耳的缓释培养基及其制作方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种培养地木耳的缓释培养基，包括以下重量份的原料：

土壤80-100份、蚯蚓粪20-50份、草木灰30-50份、苜蓿水提液30-40份、土壤水提液20-60份、琼脂粉10-20份、石英砂10-20份、水1000-2000份。

作为本发明的进一步方案是：所述一种培养地木耳的缓释培养基包括以下重量份的原料：

土壤90份、蚯蚓粪35份、草木灰40份、苜蓿水提液35份、土壤水提液40份、琼脂粉15份、石英砂15份、水1500份。

作为本发明的进一步方案是：所述石英砂的粒径为1-2厘米。

本发明还提供一种培养地木耳的缓释培养基的制作方法，包括以下步骤：

步骤一，选土：选取肥沃的无污染的土壤，碾碎后在80℃温度下烘干；烘干后，用孔径为3mm的分样筛筛分土壤，收集筛下部分的土壤，备用；

步骤二，制备土壤水提液：按照1升水加入200克土壤的比例，称取步骤一中的土壤装入容器中，加水；然后通过100℃水浴煮沸3-4h后冷却，重复3次；然后沉降，收集上清液并进行抽滤，抽滤液装入血清瓶并密封后，放入温度为121℃的高压蒸汽灭菌锅中灭菌，时间为40min，冷却备用；

步骤三，制备营养待释层：将步骤一中的土壤，以及蚯蚓粪、石英砂、草木灰按照重量份数比例转入容器中，混合均匀，均匀铺满整个容器底，加入水润湿，然后盖上容器盖于高压蒸汽灭菌锅中灭菌，温度为121℃，时间为30min，即可；

步骤四，制作营养控释液：在容器中加入纯化水，按照重量分数比例加入琼脂粉和苜蓿水提液、土壤水提液后，于高压蒸汽灭菌锅中灭菌，温度为121℃、时间30min；

步骤五，将营养控释液冷凝覆盖于营养待释层上：在无菌室内的无菌操作台上将步骤四中灭菌好的营养控释液，趁热倒入步骤三中装有营养待释层的容器中，以淹没营养待释层为准，冷却凝固后形成一胶体层，即得所制；

步骤六，培养地木耳：将无菌的1-2mm的地木耳藻种接种于步骤五中制备的培养基表面，于25℃、5000-8000lux的条件下培养。

与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：

本发明的一种培养地木耳的缓释培养基，在培养基制备过程中，热的营养控释液冷凝覆盖于营养待释层表面，形成一胶体态的营养控释层。在培养过程中，随着培养周期的延长，营养控释层中的营养被藻体吸收后，储备在营养待释层中的营养会补充到营养控释层中，供给藻体所需。如此极大地延长培养周期及培养基的更换周期，有利于成本控制。在培养基中添加的都是天然的有机肥料，并严格控制土壤的污染，因此本发明培养基为无公害的，不仅促进藻体生长，而且不带进有害物质。利用本发明的培养基培养地木耳时，为静置培养，省去目前的藻类规模化培养中使用的搅拌设备，有利于降低能耗成本。利用营养控释层有效地避免地木耳与土壤直接接触，且待释层中营养通过控释层间接供应，从而解决了在食用野生地木耳时出现的清洗难的问题。

具体实施方式

下面结合具体实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1：

一种培养地木耳的缓释培养基及其制作方法，包括以下重量份的原料：

土壤80份、蚯蚓粪20份、草木灰30份、苜蓿水提液30份、土壤水提液20份、琼脂粉10份、石英砂10份、水1000份。

步骤一，选土：选取肥沃的无污染的土壤，碾碎后在80℃温度下烘干；烘干后，用孔径为3mm的分样筛筛分土壤，收集筛下部分的土壤，备用；

步骤二，制备土壤水提液：按照1升水加入200克土壤的比例，称取步骤一中的土壤装入容器中，加水；然后通过100℃水浴煮沸3-4h后冷却，重复3次；然后沉降，收集上清液并进行抽滤，抽滤液装入血清瓶并密封后，放入温度为121℃的高压蒸汽灭菌锅中灭菌，时间为40min，冷却备用；

步骤三，制备营养待释层：将步骤一中的土壤，以及蚯蚓粪、石英砂、草木灰按照重量份数比例转入容器中，混合均匀，均匀铺满整个容器底，加入水润湿，然后盖上容器盖于高压蒸汽灭菌锅中灭菌，温度为121℃，时间为30min，即可；

步骤四，制作营养控释液：在容器中加入纯化水，按照重量分数比例加入琼脂粉和苜蓿水提液、土壤水提液后，于高压蒸汽灭菌锅中灭菌，温度为121℃、时间30min；

步骤五，将营养控释液冷凝覆盖于营养待释层上：在无菌室内的无菌操作台上将步骤四中灭菌好的营养控释液，趁热倒入步骤三中装有营养待释层的容器中，以淹没营养待释层为准，冷却凝固后形成一透明胶体层，即得所制；

步骤六，培养地木耳：将无菌的1-2mm的地木耳藻种接种于步骤五中制备的培养基表面，于25℃、5000-8000lux的条件下培养。

实施例2：

一种培养地木耳的缓释培养基及其制作方法，包括以下重量份的原料：

土壤100份、蚯蚓粪50份、草木灰50份、苜蓿水提液40份、土壤水提液60份、琼脂粉20份、石英砂20份、水2000份。

制备方法与实施例1相同。

实施例3：

一种培养地木耳的缓释培养基及其制作方法，包括以下重量份的原料：

土壤90份、蚯蚓粪35份、草木灰40份、苜蓿水提液35份、土壤水提液40份、琼脂粉15份、石英砂15份、水1500份。

制备方法与实施例1相同。

一、按照以上实施例，获得的实验结果如表1：

表1：各实施例中出现的现象

二、各实施例中的地木耳的日平均生长速度结果如表2：

表2：每100g地木耳每天的生物量增长率

培养周期	5天	15天	30天	45天	60天
						实施例1	5％	10％	10.80％	10.90％	9.80％
实施例2	2％	10.70％	5％	4.70％	2.40％
						实施例3	8％	12％	8.70％	6.80％	3.60％

将实施例2和实施例3的结果与实施例1的结果进行对比分析，实施例1的藻体球径增长最快，营养控释层未见有实施例2和实施例3中的出现的问题。接种后，经过几天的应后，生物量增长率在培养第15天达最大值，而后继续培养，在15-60天的培养周期内，实施2和实施例3的生物量增长率随培养周期延长而下降，而实施例1能将藻体的生物量增长率维持在10％左右，由此可见本发明的营养组分范围是最佳的，有效控制营养的缓慢释放，为地木耳提供均衡的营养，有效地延长了培养周期。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (4)

1.一种培养地木耳的缓释培养基，其特征在于，包括以下重量份的原料：

土壤80-100份、蚯蚓粪20-50份、草木灰30-50份、苜蓿水提液30-40份、土壤水提液20-60份、琼脂粉10-20份、石英砂10-20份、水1000-2000份。

2.根据权利要求1所述的一种培养地木耳的缓释培养基，其特征在于，包括以下重量份的原料：

土壤90份、蚯蚓粪35份、草木灰40份、苜蓿水提液35份、土壤水提液40份、琼脂粉15份、石英砂15份、水1500份。

3.根据权利要求1或2所述的一种培养地木耳的缓释培养基，其特征在于，所述石英砂的粒径为1-2厘米。

4.一种制备如权利要求1-3任一项所述的培养地木耳的缓释培养基的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一，选土：选取肥沃的无污染的土壤，碾碎后在80℃温度下烘干；烘干后，用孔径为3mm的分样筛筛分土壤，收集筛下部分的土壤，备用；

步骤二，制备土壤水提液：按照1升水加入200克土壤的比例，称取步骤一中的土壤装入容器中，加水；然后通过100℃水浴煮沸3-4h后冷却，重复3次；然后沉降，收集上清液并进行抽滤，抽滤液装入血清瓶并密封后，放入温度为121℃的高压蒸汽灭菌锅中灭菌，时间为40min，冷却备用；

步骤三，制备营养待释层：将步骤一中的土壤，以及蚯蚓粪、石英砂、草木灰按照重量份数比例转入容器中，混合均匀，均匀铺满整个容器底，加入水润湿，然后盖上容器盖于高压蒸汽灭菌锅中灭菌，温度为121℃，时间为30min，即可；

步骤四，制作营养控释液：在容器中加入纯化水，按照重量分数比例加入琼脂粉和苜蓿水提液、土壤水提液后，于高压蒸汽灭菌锅中灭菌，温度为121℃、时间30min；

步骤五，将营养控释液冷凝覆盖于营养待释层上：在无菌室内的无菌操作台上将步骤四中灭菌好的营养控释液，趁热倒入步骤三中装有营养待释层的容器中，以淹没营养待释层为准，冷却凝固后形成一透明胶体层，即得所制；

步骤六，培养地木耳：将无菌的1-2mm的地木耳藻种接种于步骤五中制备的培养基表面，于25℃、5000-8000lux的条件下培养。