CN111072422A - 一种普薯32的专用培养基及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种普薯32的专用培养基及其制备方法，所述培养基包括大量元素、微量元素、有机不含肌醇、肌醇、铁盐、乙二胺四乙酸二钠、蔗糖、NAA、琼脂，所述大量元素包括硝酸铵、硝酸钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、磷酸二氢钾，所述微量元素包括碘化钾、硼酸、四水硫酸锰、七水硫酸锌、二水钼酸钠、五水硫酸铜、六水氯化钴，所述有机不含肌醇包括烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫铵素、甘氨酸；该培养基各组分的配比合理，其制备方法设计简单、衔接合理，整体上普薯32号种苗质量显著提高，植株粗壮，根系发达，10天的植株高度普遍比不使用本配方的植株高1.5~2㎝；病害减少；培养周期可缩短8~15天。

Description

一种普薯32的专用培养基及其制备方法
技术领域
本发明属于农业无土栽培技术领域，涉及一种甘薯种苗的培养基，特别是一种普薯32的专用培养基及其制备方法。
背景技术
普薯32号是普宁市农科所选育出的品种，具有优质、高产、稳产、商品率高、适应性广等优良形状。普薯32号为匍匐型甘薯品种，丰产性好，长蔓，分枝多，结薯分散，单株结薯较多，薯身光滑，薯皮深红色，薯肉桔红色，胡萝卜素含量高，食用品质优，耐贮性较好。适合甘薯产区的非薯瘟病片区种植。由于该品种丰产性好、品质优、薯形美观、商品价值高，深受消费者和种植大户的欢迎，从而成为各大超市、酒店、出口商的抢手货。经过近年的推广种植，该品种在阳江地区的年种植面积占的比例达到20% 左右，已成为当地搞活农村经济，带领农民致富奔小康，提高城乡居民健康水平的新途径，具有广阔的市场前景。
植物组织培养是根据植物细胞具有全能性这个理论，发展起来的一项无性繁殖的新技术，指从植物体分离出符合需要的组织，器官或细胞等。在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养。
普薯32的种苗生长主要依赖于培养基中的大量元素、微量元素、有机不含肌醇、肌醇、铁盐、以及蔗糖、激素，其对各种元素的需求不同，因此，配制的培养基中各类元素、糖和激素的含量也应不同。培养基的元素含量不同会影响甘薯小植株的生长，因此，需要设计一种专用于普薯32的种苗生长的培养基。
发明内容
本发明的目的在于提供一种普薯32的专用培养基及其制备方法，该培养基可保证普薯32的种苗在培养过程中所需的各种元素得到充分满足，实现甘薯种苗快速生长和发育，其制备方法设计简单、衔接合理，具有极高的使用价值。
本发明的目的是这样实现的：一种普薯32的专用培养基及其制备方法，所述培养基包括大量元素、微量元素、有机不含肌醇、肌醇、铁盐、乙二胺四乙酸二钠、蔗糖、NAA、琼脂，所述大量元素包括硝酸铵、硝酸钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、磷酸二氢钾，所述微量元素包括碘化钾、硼酸、四水硫酸锰、七水硫酸锌、二水钼酸钠、五水硫酸铜、六水氯化钴，所述有机不含肌醇包括烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫铵素、甘氨酸；
每升培养基中含各组分的质量，如下：
硝酸铵15~18g，硝酸钾17~20g，七水硫酸镁3.6~4.2g，二水氯化钙4.9~5.2g，磷酸二氢钾1.9~2.2g，碘化钾0.166g，硼酸1.24g，四水硫酸锰4.46g，七水硫酸锌1.72g，二水钼酸钠0.05g，五水硫酸铜0.005g，六水氯化钴0.005g，烟酸0.1g，盐酸吡哆醇0.1g，盐酸硫铵素0.02g，甘氨酸0.4g，肌醇10g，七水硫酸亚铁2.78g，乙二胺四乙酸二钠3.73g，蔗糖30g，NAA0.02g，琼脂3~6g；
所述培养基的制备方法，包括如下步骤：
a.选取一个定量的培养基配制器皿；
b.根据配制器皿的容积，按配方比例分别称取硝酸铵，硝酸钾，七水硫酸镁，二水氯化钙，磷酸二氢钾，碘化钾，硼酸，四水硫酸锰，七水硫酸锌，二水钼酸钠，五水硫酸铜，六水氯化钴，烟酸，盐酸吡哆醇，盐酸硫铵素，甘氨酸，肌醇，七水硫酸亚铁，乙二胺四乙酸二钠，NAA，并将这些原料依上述顺序依次放好；
c.根据配制器皿的容积，称取相应质量的琼脂和蔗糖，加蒸馏水至器皿容积的1/2~3/4之间，加热使琼脂溶解；
d.按顺序依次将硝酸铵，硝酸钾，七水硫酸镁，二水氯化钙，磷酸二氢钾，碘化钾，硼酸，四水硫酸锰，七水硫酸锌，二水钼酸钠，五水硫酸铜，六水氯化钴，烟酸，盐酸吡哆醇，盐酸硫铵素，甘氨酸，肌醇，七水硫酸亚铁，乙二胺四乙酸二钠，NAA加入步骤c的溶液中，并搅拌，之后冷却至室温；
e.向配制器皿中加蒸馏水定容至培养基的最终容积；
f.将定容后的培养基分装到350ml的培养瓶中，盖上瓶盖或封好封口膜；
g.将培养瓶放置到灭菌锅中，进行灭菌。
所述所述配制器皿为100L电加热搅拌罐。
所述步骤d中的搅拌时间设置9~12分钟。
所述所述步骤g中的灭菌温度121℃，灭菌时间20分钟。
所述所述步骤e中定容之后调节pH值，pH值在5.5~5.9之间。
调节pH值采用质量分数为4%~6%的稀硝酸。
甘薯种苗培育的培养基配方理论上是基于基于甘薯种苗自然生长环境土壤养分分析以及甘薯种苗生长机理而配制，但理论上的营养配方只能满足植物生长的基本要求，很难达到满足人类商品化生产的要求。要达到长势好、高产高效等产业化目的，必须通过长期的生产实践和试验，在无数次的试验比较中总结出最合适的配方。
本发明的培养基培养基配方是经过了近四年来的生产试验，在近百种方案的比较实验中筛选中出的最优方案，是最适宜于普薯32号的种苗生长和发育的。
与常用技术相比，本发明产生的有益效果是：该培养基专用于普薯32号，经过大量的实验栽培发现，本发明的培养基可保证普薯32号的种苗在培养过程中所需的各种元素得到充分满足，实现普薯32号种苗的快速生长和发育。并能充分满足甘薯植株光合作用的需求，促进甘薯植株的生长和发育。整体上普薯32号种苗质量显著提高，植株粗壮，根系发达，10天的植株高度普遍比不使用本配方的植株高1.5~2㎝；病害减少；培养周期可缩短8~15天。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明。
实施例1
一种普薯32的专用培养基及其制备方法，所述培养基包括大量元素、微量元素、有机不含肌醇、肌醇、铁盐、乙二胺四乙酸二钠、蔗糖、NAA、琼脂，所述大量元素包括硝酸铵、硝酸钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、磷酸二氢钾，所述微量元素包括碘化钾、硼酸、四水硫酸锰、七水硫酸锌、二水钼酸钠、五水硫酸铜、六水氯化钴，所述有机不含肌醇包括烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫铵素、甘氨酸；
每升培养基中含各组分的质量，如下：
硝酸铵15g，硝酸钾17g，七水硫酸镁3.6g，二水氯化钙4.9g，磷酸二氢钾1.9g，碘化钾0.166g，硼酸1.24g，四水硫酸锰4.46g，七水硫酸锌1.72g，二水钼酸钠0.05g，五水硫酸铜0.005g，六水氯化钴0.005g，烟酸0.1g，盐酸吡哆醇0.1g，盐酸硫铵素0.02g，甘氨酸0.4g，肌醇10g，七水硫酸亚铁2.78g，乙二胺四乙酸二钠3.73g，蔗糖30g，NAA0.02g，琼脂5g；
所述培养基的制备方法，包括如下步骤：
a.选取一个100L电加热搅拌罐做为培养基的配制器皿；
b.根据配制器皿的容积，按配方比例分别称取1500g硝酸铵，1700g硝酸钾，360g七水硫酸镁，490g二水氯化钙，190g磷酸二氢钾，16.6g碘化钾，124g硼酸，446g四水硫酸锰，172g七水硫酸锌，5g二水钼酸钠，0.5g五水硫酸铜，0.5g六水氯化钴，10g烟酸，10g盐酸吡哆醇，2g盐酸硫铵素，40g甘氨酸，1000g肌醇，278g七水硫酸亚铁，373g乙二胺四乙酸二钠，2gNAA，并将这些原料依上述顺序依次放好；
c.根据配制器皿的容积，称取相应质量的500g琼脂和30㎏蔗糖，加蒸馏水至器皿容积的1/2之间，加热至95℃使琼脂溶解；
d.按顺序依次将硝酸铵，硝酸钾，七水硫酸镁，二水氯化钙，磷酸二氢钾，碘化钾，硼酸，四水硫酸锰，七水硫酸锌，二水钼酸钠，五水硫酸铜，六水氯化钴，烟酸，盐酸吡哆醇，盐酸硫铵素，甘氨酸，肌醇，七水硫酸亚铁，乙二胺四乙酸二钠，NAA加入步骤c的溶液中，并搅拌10分钟，之后冷却至室温；
e.向配制器皿中加蒸馏水定容至培养基的最终容积，并用质量分数为5%的稀硝酸，调节pH值在5.5~5.9之间；
f.将定容后的培养基分装到350ml的培养瓶中，盖上瓶盖或封好封口膜；
g.将培养瓶放置到灭菌锅中，进行灭菌，灭菌温度121℃，灭菌时间20分钟。
实施例2
一种普薯32的专用培养基及其制备方法，所述培养基包括大量元素、微量元素、有机不含肌醇、肌醇、铁盐、乙二胺四乙酸二钠、蔗糖、NAA、琼脂，所述大量元素包括硝酸铵、硝酸钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、磷酸二氢钾，所述微量元素包括碘化钾、硼酸、四水硫酸锰、七水硫酸锌、二水钼酸钠、五水硫酸铜、六水氯化钴，所述有机不含肌醇包括烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫铵素、甘氨酸；
每升培养基中含各组分的质量，如下：
硝酸铵16g，硝酸钾19g，七水硫酸镁4.0g，二水氯化钙5.1g，磷酸二氢钾2.0g，碘化钾0.166g，硼酸1.24g，四水硫酸锰4.46g，七水硫酸锌1.72g，二水钼酸钠0.05g，五水硫酸铜0.005g，六水氯化钴0.005g，烟酸0.1g，盐酸吡哆醇0.1g，盐酸硫铵素0.02g，甘氨酸0.4g，肌醇10g，七水硫酸亚铁2.78g，乙二胺四乙酸二钠3.73g，蔗糖30g，NAA0.02g，琼脂6g。
所述培养基的制备方法，步骤同实施例1。
实施例3
一种普薯32的专用培养基及其制备方法，所述培养基包括大量元素、微量元素、有机不含肌醇、肌醇、铁盐、乙二胺四乙酸二钠、蔗糖、NAA、琼脂，所述大量元素包括硝酸铵、硝酸钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、磷酸二氢钾，所述微量元素包括碘化钾、硼酸、四水硫酸锰、七水硫酸锌、二水钼酸钠、五水硫酸铜、六水氯化钴，所述有机不含肌醇包括烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫铵素、甘氨酸；
每升培养基中含各组分的质量，如下：
硝酸铵18g，硝酸钾20g，七水硫酸镁4.2g，二水氯化钙5.2g，磷酸二氢钾2.2g，碘化钾0.166g，硼酸1.24g，四水硫酸锰4.46g，七水硫酸锌1.72g，二水钼酸钠0.05g，五水硫酸铜0.005g，六水氯化钴0.005g，烟酸0.1g，盐酸吡哆醇0.1g，盐酸硫铵素0.02g，甘氨酸0.4g，肌醇10g，七水硫酸亚铁2.78g，乙二胺四乙酸二钠3.73g，蔗糖30g，NAA0.02g，琼脂5g。
所述培养基的制备方法，步骤同实施例1。

Claims (6)

1.一种普薯32的专用培养基及其制备方法，其特征在于：所述培养基包括大量元素、微量元素、有机不含肌醇、肌醇、铁盐、乙二胺四乙酸二钠、蔗糖、NAA、琼脂，所述大量元素包括硝酸铵、硝酸钾、七水硫酸镁、二水氯化钙、磷酸二氢钾，所述微量元素包括碘化钾、硼酸、四水硫酸锰、七水硫酸锌、二水钼酸钠、五水硫酸铜、六水氯化钴，所述有机不含肌醇包括烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫铵素、甘氨酸；
每升培养基中含各组分的质量，如下：
硝酸铵15~18g，硝酸钾17~20g，七水硫酸镁3.6~4.2g，二水氯化钙4.9~5.2g，磷酸二氢钾1.9~2.2g，碘化钾0.166g，硼酸1.24g，四水硫酸锰4.46g，七水硫酸锌1.72g，二水钼酸钠0.05g，五水硫酸铜0.005g，六水氯化钴0.005g，烟酸0.1g，盐酸吡哆醇0.1g，盐酸硫铵素0.02g，甘氨酸0.4g，肌醇10g，七水硫酸亚铁2.78g，乙二胺四乙酸二钠3.73g，蔗糖30g，NAA0.02g，琼脂3~6g；
所述培养基的制备方法，包括如下步骤：
a.一个定量的培养基配制器皿；
b.根据配制器皿的容积，按配方比例分别称取硝酸铵，硝酸钾，七水硫酸镁，二水氯化钙，磷酸二氢钾，碘化钾，硼酸，四水硫酸锰，七水硫酸锌，二水钼酸钠，五水硫酸铜，六水氯化钴，烟酸，盐酸吡哆醇，盐酸硫铵素，甘氨酸，肌醇，七水硫酸亚铁，乙二胺四乙酸二钠，NAA，并将这些原料依上述顺序依次放好；
c.根据配制器皿的容积，称取相应质量的琼脂和蔗糖，加蒸馏水至器皿容积的1/2~3/4之间，加热使琼脂溶解；
d.按顺序依次将硝酸铵，硝酸钾，七水硫酸镁，二水氯化钙，磷酸二氢钾，碘化钾，硼酸，四水硫酸锰，七水硫酸锌，二水钼酸钠，五水硫酸铜，六水氯化钴，烟酸，盐酸吡哆醇，盐酸硫铵素，甘氨酸，肌醇，七水硫酸亚铁，乙二胺四乙酸二钠，NAA加入步骤c的溶液中，并搅拌，之后冷却至室温；
e.向配制器皿中加蒸馏水定容至培养基的最终容积；
f.将定容后的培养基分装到350ml的培养瓶中，盖上瓶盖或封好封口膜；
g.将培养瓶放置到灭菌锅中，进行灭菌。
2.根据权利要求1所述的一种普薯32的专用培养基及其制备方法，其特征在于：所述所述配制器皿为100L电加热搅拌罐。
3.根据权利要求1所述的一种普薯32的专用培养基及其制备方法，其特征在于：所述步骤d中的搅拌时间设置9~12分钟。
4.根据权利要求1所述的一种普薯32的专用培养基及其制备方法，其特征在于：所述所述步骤g中的灭菌温度121℃，灭菌时间20分钟。
5.根据权利要求1所述的一种普薯32的专用培养基及其制备方法，其特征在于：所述所述步骤e中定容之后调节pH值，pH值在5.5~5.9之间。
6.根据权利要求1或5所述的一种普薯32的专用培养基及其制备方法，其特征在于：调节pH值采用质量分数为4%~6%的稀硝酸。
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