CN111072410A

CN111072410A - 一种含小肽的液体肥料及其应用

Info

Publication number: CN111072410A
Application number: CN202010000642.7A
Authority: CN
Inventors: 邓加结; 魏鸿刚
Original assignee: Hangzhou Zhengpeptide Biotechnology Co Ltd
Current assignee: Hangzhou Zhengpeptide Biotechnology Co Ltd
Priority date: 2020-01-02
Filing date: 2020-01-02
Publication date: 2020-04-28

Abstract

本发明提供一种含小肽的液体肥料及其应用，属于生物技术加工领域。该含小肽的液体肥料，采用如下方法制备：在鱼下脚料、死鱼或低值鱼制成的培养基中依次接种米曲霉、枯草芽孢杆菌和荧光假单胞杆菌，进行三级发酵；将得到的发酵液过滤、浓缩和灭活，得到液体肥料。本发明还提供所述含小肽的液体肥料在农作物种植中的应用。本发明液体肥料除了含有高浓度的小肽，还保留了鱼体中丰富的矿物质、微量元素、生物活性物质等，能够提高种子的萌发速率，缩短种子的休眠期，促进植物细胞分裂，迅速补充作物养分、提高作物光合效率、改善作物品质，可增强作物抗旱、抗寒、抗病虫等多种抗逆性，促进作物生长，且有保花、保果等功能，增产增收效果明显。

Description

一种含小肽的液体肥料及其应用

技术领域

本发明属于生物技术加工领域，具体涉及一种含小肽的液体肥料及其应用。

背景技术

一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基形成的酰胺基在蛋白质化学中称为肽键。两个或两个以上的氨基酸脱水缩合形成若干个肽键从而组成一个肽链，多个肽链进行多级折叠就组成一个蛋白质分子。蛋白质有时也被称为“多肽”。二肽就是由二个氨基酸组成的蛋白质片断。分子量段在5000～10000D(道尔顿)之间的称为大肽。分子量段在50～2000D(道尔顿)之间的称为小肽、寡肽、低聚肽，也称为小分子活性多肽。生物学家将小分子活性多肽统称为“生物活性肽”。肽是一类具有营养和调节生理功能的小分子化合物。生物活性肽广泛应用于生物制药、食品、生物试剂、植物生长激素、生物肥料、动物饲料等领域中。

近年来，由于捕捞业和水产加工业的发展，产生大量低值鱼类、死鱼或鱼下脚料。像沙丁鱼之类多脂低价红身鱼，由于本身鱼腥大、鱼体小、鱼骨细而常被人忽视，大部分作为饲料，更有的鱼类直接被抛弃，不仅会污染环境，而且会浪费大量的资源。

发明内容

本发明的主要目的是提供一种含小肽的液体肥料，是利用鱼下脚料、死鱼或低值鱼作为原料制备而成，不仅解决了低值鱼类、死鱼或鱼下脚料污染环境、浪费资源的问题，而且该液体肥料小肽含量高，是非常高效的农作物肥料。

本发明的另一目的是提供所述液体肥料在农作物种植中的应用。

本发明的目的采用如下技术方案实现：

一种含小肽的液体肥料，采用如下方法制备：在鱼下脚料、死鱼或低值鱼制成的培养基中依次接种米曲霉、枯草芽孢杆菌和荧光假单胞杆菌，进行三级发酵；将得到的发酵液过滤、浓缩和灭活，得到液体肥料。

采用如下方法将鱼下脚料、死鱼或低值鱼制成的培养基：将鱼下脚料、死鱼或低值鱼粉碎，加入其重量1-5倍的水，调节pH为6.8-7.5，灭菌。

所述低值鱼包括形体小于5cm的鱼和极易腐烂的鱼。

采用米曲霉发酵的方法如下：按照1-5％的接种量将米曲霉接种至所述鱼下脚料、死鱼或低值鱼制成的培养基中，在25-30℃、通气比为0.5-1.2:1、转速为100-300rpm、罐压为0.02-0.05MPa的条件下，培养24-36h，得到米曲霉发酵液。

在本发明中，接种量是指种子液质量占培养基质量的百分比。

采用枯草芽孢杆菌发酵的方法如下：按照0.75-2％的接种量将枯草芽孢杆菌接种至米曲霉发酵液中，在26-32℃、通气比为0.5-1.2:1、转速为100-300rpm、罐压为0.02-0.05MPa的条件下，培养24-36h，得到枯草芽孢杆菌发酵液。

采用荧光假单胞杆菌发酵的方法如下：按照0.5-3％的接种量将荧光假单胞杆菌接种至所述枯草芽孢杆菌发酵液中，在28-32℃、通气比为0.5-1.2:1、转速为100-300rpm、罐压为0.02-0.05MPa的条件下培养15-36h。

所述液体肥料中小分子肽含量为100-160g/L。

采用四效薄膜蒸发器进行浓缩和灭活。

本发明还提供所述含小肽的液体肥料在农作物种植中的应用。

本发明中小肽的分子量为50～2000D。

本发明液体肥料通过灌根(0.5-1.5L液体肥料/亩)、滴灌(0.5-1.5L液体肥料/亩)或喷雾(稀释500-1000倍)施用在农作物上。

本发明以低值鱼类、死鱼或鱼下脚料为原料制备鱼源培养基，然后依次采用米曲霉、枯草芽孢杆菌和荧光假单胞菌进行三步发酵，得到的发酵液处理后得到液体肥料。本发明液体肥料除了含有高浓度的小肽，还保留了鱼体中丰富的矿物质、微量元素、生物活性物质等，能够提高种子的萌发速率，缩短种子的休眠期，促进植物细胞分裂，迅速补充作物养分、提高作物光合效率、改善作物品质，可增强作物抗旱、抗寒、抗病虫等多种抗逆性，促进作物生长，且有保花、保果等功能，增产增收效果明显。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1液体肥料的制备

本实施例描述了液体肥料的制备方法。

(1)原料的制备

低值鱼：形体小于5cm的鱼和鯷鱼。形体小于5cm的鱼，由于此类鱼体形态较小，头及内脏占比较大，经济价值较低。鯷鱼因为极易腐烂，所以价值也较低。

死鱼：死的海水鱼或淡水鱼。

鱼下脚料：是鱼在加工过程中作为残余分离的下脚或废料，包括鱼头、鱼鳞、鱼皮、内脏和鱼鳍等。

将上述低值鱼、死鱼和鱼下脚料，采用破碎机或大型绞肉处理，得到粉碎后的鱼体。其中，破碎机破碎时，将原料粉碎为直径不超过1cm的碎块。

(2)粉碎后的鱼体的灭菌

将步骤(1)中所得粉碎后的鱼体通过密封的渣浆泵输送至发酵罐，加入粉碎后鱼体重量3倍的水，打开搅拌，调节pH至7.0，得到鱼源发酵培养基。将该培养基在121℃下维持30min进行灭菌，灭菌过程中搅拌转速为100rpm。灭菌结束后，降温至28-30℃备用。

(3)米曲霉、枯草芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌种子液的制备

1)米曲霉种子液的制备：

米曲霉一级摇瓶培养基配方：豆汁1000mL(100g黄豆加水1000mL浸泡24h，煮沸2h，用纱布过滤后，取滤液定容至1000mL即得豆汁)，蔗糖30克，pH自然。500mL三角烧瓶中装液量为150mL，在115℃灭菌30min后，冷却至室温后备用。

将米曲霉(购自中国农业微生物菌种保藏管理中心，编号为ACCC 31492)斜面种子接种至一级摇瓶培养基中，在28℃、100rpm的恒温摇床上培养36h，得到一级摇瓶米曲霉种子液。

配制米曲霉发酵培养基：葡萄糖20g/L，玉米淀粉10g/L，蛋白胨10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏1.5g/L，硫酸镁1g/L，磷酸氢二钾2g/L，pH6.5-7.0，溶剂为水。灭菌后冷却至室温。按照接种量为5％将一级摇瓶米曲霉种子液接种至米曲霉发酵培养基中，在通气比为1：1、培养温度为28℃、罐压为0.01MPa、转速为100-150rpm的条件下培养36h，得到菌丝干重为10g/L的米曲霉种子液。其中接种量5％是指一级摇瓶米曲霉种子液质量占米曲霉发酵培养基质量的百分比为5％。

发酵培养结束时，在保证米曲霉种子液中米曲霉菌丝干重不低于8g/L的前提下，可以对发酵培养基和发酵培养条件进行调整和优化。

2)枯草芽孢杆菌种子液的制备：

枯草芽孢杆菌一级摇瓶种子培养基配方：称取葡萄糖20g、蛋白胨15g、氯化钠5g和牛肉膏0.5g混合，加入蒸馏水定容至1L，调节pH至6.8-7.2。500mL三角烧瓶中一级摇瓶种子培养基的装液量为150mL，在115℃灭菌30min后冷却至室温备用。

将枯草芽孢杆菌(购自中国农业微生物菌种保藏管理中心，ACCC 60364)斜面种子接种至一级摇瓶种子培养基后，在30℃、180rpm的恒温摇床上培养24h，得到一级摇瓶种子。

配制枯草芽孢杆菌发酵培养基：花生饼粉15g/L，玉米淀粉15g/L，葡萄糖10g/L，CaCO₃2g/L，(NH₄)₂SO₄ 0.5g/L，MgSO₄·7H₂O 0.2g/L，pH 7.0-7.5。灭菌后冷却至室温。按照接种量为1％将枯草芽孢杆菌一级摇瓶种子接种至发酵培养基中，在通气比为1：1、培养温度30℃、罐压为0.01MPa、转速220rpm的条件下培养24h，得到活菌含量为2×10⁹cfu/mL的枯草芽孢杆菌种子液。其中接种量1％是指枯草芽孢杆菌一级摇瓶种子质量占枯草芽孢杆菌发酵培养基质量的百分比为1％。

发酵罐培养结束时，在保证发酵液中活菌含量不低于1×10⁸cfu/mL的前提下，可以对发酵培养基和发酵培养条件进行调整和优化。

3)荧光假单胞杆菌种子液的制备：

荧光假单胞杆菌(购自中国农业微生物菌种保藏管理中心，ACCC 10646)斜面种子接种到一级摇瓶种子培养基中进行培养。

荧光假单胞杆菌一级摇瓶种子培养基配方：称取葡萄糖10g、淀粉5g、蛋白胨10g、氯化钠2g和牛肉膏0.5g混合，加入蒸馏水并定容至1L，调节pH至7.0。500mL三角烧瓶中一级摇瓶种子培养基的装液量为150mL，在115℃灭菌30min后冷却至室温备用。将荧光假单胞杆菌斜面种子接种一级摇瓶种子培养基后，在30℃、150rpm的恒温摇床上培养18h，得到一级摇瓶种子。

配制发酵培养基：花生饼粉20g/L，玉米淀粉20g/L，葡萄糖10g/L，酵母粉10g/L，CaCO₃2g/L，KH₂PO₄ 1g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5g/L，pH 7.0-7.2。发酵培养基灭菌后冷却至室温。按照接种量为1％将荧光假单胞杆菌一级摇瓶种子接种至发酵培养基中，在通气比为1：1、培养温度为30℃、罐压为0.01MPa、转速为200rpm的条件下培养24h，得到活菌含量为5×10⁹cfu/mL的荧光假单胞杆菌种子液。其中接种量1％是指荧光假单胞杆菌一级摇瓶种子质量占发酵培养基质量的百分比为1％。

发酵罐培养结束时，在保证发酵液中荧光假单胞杆菌活菌含量不低于1×10⁸cfu/mL的前提下，可以对发酵培养基和发酵培养条件进行调整和优化。

(4)鱼源发酵培养基中米曲霉、枯草芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌的三步发酵培养

第一步发酵：

按照米曲霉种子液与鱼源发酵培养基质量比为5:100，将米曲霉种子液接入鱼源发酵培养基中，在28℃、通气比为0.8:1、转速为150rpm、罐压为0.03MPa的条件下，培养36h，得到米曲霉发酵液。

第二步发酵：

按照枯草芽孢杆菌种子液与米曲霉发酵液质量比为1.5：100，在米曲霉发酵液中接入枯草芽孢杆菌种子液，在30℃、通气比为1:1、转速为200rpm、罐压为0.05MPa的条件下，培养24h，得到枯草芽孢杆菌发酵液。

第三步发酵：

按照荧光假单胞杆菌种子液与枯草芽孢杆菌发酵液质量比为2：100，在枯草芽孢杆菌发酵液中接入荧光假单胞杆菌种子液，在30℃、通气比为1:1、转速为250rpm、罐压为0.05MPa的条件下，培养18h，得到富含小肽的发酵液。

该富含小肽的发酵液中还含有不饱和脂肪酸、维生素、矿物质、氨基酸、微量元素、促生长因子等。

(5)富含小肽的发酵液的后处理

富含小肽的发酵液中米曲霉和枯草芽孢杆菌的活菌含量很低，主要是荧光假单胞杆菌。

将富含小肽的发酵液先通过蝶式离心过滤除去滤渣(未完全分解的鱼骨、鱼鳞等)，然后通过四效薄膜蒸发器进行四效薄膜浓缩。四效薄膜蒸发器通过4个相对独立的单元串联而成。每一个单元由蒸发器、热压泵、预热器、汽液分离器等组成。

四效薄膜浓缩包括四个阶段，具体如下：

第一阶段：温度为90-95℃，停留时间28min；

第二阶段：温度为80-85℃，停留时间25min；

第三阶段：温度为70-75℃，停留时间18min；

第四阶段：温度为50-55℃，停留时间20min。

经过四效薄膜浓缩后，可以得到小肽含量为151g/L的液体肥料。

上述四效薄膜浓缩，不仅能达到浓缩的目的，而且可以灭活发酵液中残留的活菌。第一阶段90-95℃下的薄膜蒸发浓缩，可以杀死发酵液中90％以上的活菌，第二阶段80-85℃下的薄膜浓缩，基本上可以杀死发酵液中剩余的活菌，再通过第三阶段和第四阶段的处理，达到彻底灭活的目的。

液体肥料中小肽的含量按照DB35/T 1089-2011(发酵鱼粉中寡肽含量的测定)中的方法测定。

另外，检测液体肥料中的重金属含量，其中汞含量0.02mg/kg、砷含量0.4mg/kg、镉含量0.1mg/kg、铅未检出、铬含量2.6mg/kg，总含量为3.12mg/kg，即3.12ppm，远低于国家肥料标准中对重金属的限量要求。

实施例2液体肥料在农业中的应用

在本实施例中，考察了利用实施例1的方法制备的液体肥料(记为样品YT)在田间的效果。

分别设置如下几个对照样品：

采用实施例1中鱼源发酵培养基、三步发酵培养方法和后处理方法，仅减少接种菌株，制备对照品：样品YT、样品A、样品B、样品C、样品D、样品E和样品F。各对照品中使用的菌株如下：

样品A：只采用米曲霉(ACCC 31492)进行一步发酵，发酵条件同实施例1中米曲霉发酵条件。

样品B：只采用枯草芽孢杆菌(ACCC 60364)进行一步发酵，发酵条件同实施例1中枯草芽孢杆菌发酵条件。

样品C：只采用荧光假单胞杆菌(ACCC 10646)一步发酵，发酵条件同实施例1中荧光假单胞杆菌发酵条件。

样品D：依次用米曲霉和枯草芽孢杆菌进行二步发酵，发酵条件同实施例1中米曲霉和枯草芽孢杆菌发酵条件。

样品E：依次用米曲霉发酵和荧光假单胞杆菌进行二步发酵，发酵条件同实施例1中米曲霉和荧光假单胞杆菌发酵条件。

样品F：依次用枯草芽孢杆菌和荧光假单胞杆菌进行二步发酵，发酵条件同实施例1中枯草芽孢杆菌和荧光假单胞杆菌发酵条件。

另外，现在很多植物源小分子肽是将饼粕进行微生物发酵或酶解来制备的。饼粕是油制品的副产物。因此本实施例也研究了利用饼粕进行三步发酵培养法制备植物源的小肽发酵液：将菜籽炼油后的副产物饼粕，粉碎后加入其重量5倍的水，再灭菌，采用实施例1中相同发酵方法和后处理方法，按照DB35/T 1089-2011中的方法测定其中的小肽含量，将其配制成小肽含量为151g/L的浓度，记为“样品G”。

采购市售的一般氨基酸水溶肥(游离氨基酸含量≥150g/L)作为对照，记为样品H。

设空白清水对照CK。

试验一：催芽试验

品种：玉女番茄F1。

催芽试验方法及实验步骤：

(1)选用直径为12cm的培养皿，用蒸馏水冲洗干净后在85℃烘干2h，冷却至室温备用。

(2)在培养皿的底层放入一张滤纸，选取饱满无残的种子，每个培养皿放入50粒种子，上面再覆盖一层无妨纱布。

(3)分别在各培养皿中加入上述样品浸种8h，以CK(空白对照)用蒸馏水处理，在25℃下放置，让种子充分吸收溶液后。每个样品三次重复。

(4)浸种结束后，将培养皿立起垂直30min，倾倒出多余的溶液。

(5)将各培养皿放入28℃恒温箱内催芽，12h后开始观察出芽情况(有根且芽长不小于种子的1/2长度视为发芽)，以后每隔12h观察一次发芽率，直到催芽结束。共调查7d。

计算发芽势(GF)、发芽率(GP)、相对发芽率(RGP)。结果详见表1。

发芽势(GF)＝前3d发芽种子数/种子总数×100％。

发芽率(GP)＝7d内发芽种子数/种子总数×100％。

相对发芽率(RGP)＝各样品处理种子的发芽率/CK发芽率×100％。

表1不同样品处理对发芽的影响

处理	GF/％	GP/％	RGP/％
				YT	88.35	98.54	152.66
A	58.89	76.37	118.31
				B	54.48	73.36	113.65
C	57.72	71.44	110.67
				D	61.34	81.13	125.69
E	63.44	82.24	127.41
				F	59.88	75.66	117.21
G	70.23	82.25	127.42
				H	49.45	67.38	104.38
CK	45.54	64.55	—

由表1实验结果可知，三步发酵培养法制备的液体肥料(样品YT)处理后种子的发芽势、发芽率不仅比一步发酵培养法和二步发酵培养法制备的样品(A、B、C、D、E、F)高，而且比植物源小分子肽的发酵液(样品G)高，也明显高于市售的氨基酸液体肥料(样品H)。其相对发芽率为对照CK的152.66％。

这是因为三步发酵法处理鱼源发酵培养基，其小分子肽较其他处理方法含量更高，产品中的营养元素，如不饱和脂肪酸、微量元素、促生长因子、氨基酸、维生素等种类更为丰富。

相对于三步发酵法处理饼粕后所得样品G，以鱼源培养基制备的样品YT所含物质种类更丰富、营养更全面，所以样品YT促进种子发芽的效果非常显著。

对种子的催芽试验结果也验证了在田间施用液体肥料YT后，作物的发芽早、幼苗的根系发达、主根和主干更为粗壮，叶片更为碧绿。

试验二：哈密瓜田间使用效果

试验作物：西州蜜25号哈密瓜。

试验肥料分别为：样品YT、样品A、样品E、样品G、样品H，空白对照中以清水替代肥料。

各肥料的用法及用量均一致，具体如下：

第一次使用：肥料稀释300倍浸种；

第二次使用：移栽时，每亩肥料用量为500mL，肥料稀释600倍后浇定根水，每棵苗用水150-200mL；

第三次使用：苗期追肥时，按照0.5L肥料/亩的用量，将肥料稀释1000倍后浇灌；

第四次使用：初花期，肥料稀释700倍叶喷；

第五次使用：小果期，施肥量为1升肥料/亩，稀释600倍后冲施或滴灌，同时将肥料稀释600倍后叶喷。

试验小区设置：单个小区面积在20-30平方米左右，设置18个小区，每种肥料3个小区，在田块面积大的地方可以设隔离带。

仅施肥的种类不一样，其它管理、用肥用药、育苗等方法完全一样。分别统计甜度、产量等，每个处理3次重复，取平均值后，比较各肥料处理后的使用效果。

中心甜度为每小区随机采摘成熟的果子，每个小区3个，分别测糖度，最后取平均值。

小区平均产量：每小区分批测产量汇总，最后取平均值。

具体结果见下表2。

表2不同肥料处理对哈密瓜的影响

处理	中心甜度/度	小区平均产量/kg	增产率/％
				YT	18.23	126.78	28.78
A	16.95	109.84	11.57
				E	17.24	112.25	14.02
G	16.44	113.52	15.31
				H	15.88	105.44	7.10
CK	15.12	98.45	—

表2结果表明，施用了样品YT的小区，哈密瓜的中心甜度和产量明显高于其它样品，中心甜度为CK的1.21倍，与CK相比的增产率达到28.78％。

与CK相比，鱼源培养基单一菌株发酵或植物源小分子肽发酵液的效果也比较明显，但比不上鱼源培养基三步发酵培养法制备得到的样品TY。因此，样品TY对产品的品质(甜度)和产量促进作用明显。

试验三：小番茄田间试验使用效果

品种：玉女番茄F1

各肥料的用法及用量均一致，具体如下：

第一次使用：将肥料稀释300倍后浸种；

第二次使用：移栽时，每亩肥料用量为1500mL，将肥料稀释600倍后浇定根水，每棵苗用水150-200mL；

第四次使用：初花期，肥料稀释700倍叶喷；

第五次使用：小果期，按照1L肥料/亩的用量，将肥料稀释600倍后冲施或滴灌，同时将肥料稀释600倍后叶喷。

试验小区设置：单个小区面积在20-30平方米左右，设置18个小区，每种肥料设置3个小区，在田块面积大的地方可以设隔离带。双行种植，株行距为0.8m×0.45m。

仅施肥种类不一样，其他管理、其他用肥用药、育苗等方法完全一样。分别统计生长情况、甜度等，每个处理3次重复取平均值后，比较各肥料施肥的效果。

甜度为每小区随机采摘成熟的果子，每个小区10个，分别测糖度，最后取平均值。

小区平均产量：每小区分批测产量，最后取平均值。

结果见表3。

表3不同肥料处理对小番茄的影响

处理	甜度/度	小区平均产量/kg	增产率/％
				YT	9.85	203.45	41.84
A	9.18	159.48	11.18
				E	9.22	163.22	13.79
G	9.27	178.32	24.32
				H	8.93	157.42	9.75
CK	8.39	143.44	—

表3表明，施用了样品YT的小区，小番茄的甜度、产量明显高于其它样品处理的小番茄，甜度为CK的1.174倍，与CK相比增产率达到41.84％。与CK相比，鱼源培养基的单一菌株发酵或植物源小分子肽发酵产物对小番茄促进效果也比较明显，但仍然显著低于鱼源培养基三步发酵培养法制备得到的样品YT。即经过三步发酵培养法制备得到的液体肥料，其对产品的品质(甜度)和产量促进作用明显。

由于实施例1制备的液体肥料富含小肽、不饱和脂肪酸、维生素、微量元素、植物生长促进因子等，因此可以为植物提供丰富的有机态营养成分，对提高作物产量、改善作物品质、增强作物抗逆能力、改善土壤结构具有显著作用。

本发明制备的液体肥料可应用于叶面喷施和冲施、灌溉，可作为生物肥料、生物农药、有机物料腐熟剂等生物制剂的强化剂，可以促进微生物的增殖和发酵，提高其应用效果，增产、增收、松软土地、改善土壤、降低农作物的发病、真正做到绿色、有机、安全。

Claims

1.一种含小肽的液体肥料，其特征在于采用如下方法制备：在鱼下脚料、死鱼或低值鱼制成的培养基中依次接种米曲霉、枯草芽孢杆菌和荧光假单胞杆菌，进行三级发酵；将得到的发酵液过滤、浓缩和灭活，得到液体肥料。

2.根据权利要求1所述含小肽的液体肥料，其特征在于采用如下方法将鱼下脚料、死鱼或低值鱼制成的培养基：将鱼下脚料、死鱼或低值鱼粉碎，加入其重量1-5倍的水，调节pH为6.8-7.5，灭菌。

3.根据权利要求2所述含小肽的液体肥料，其特征在于所述低值鱼包括形体小于5cm的鱼和极易腐烂的鱼。

4.根据权利要求3所述含小肽的液体肥料，其特征在于采用米曲霉发酵的方法如下：按照1-5%的接种量将米曲霉接种至所述鱼下脚料、死鱼或低值鱼制成的培养基中，在25-30℃、通气比为0.5-1.2:1、转速为100-300rpm、罐压为0.02-0.05MPa的条件下，培养24-36h，得到米曲霉发酵液。

5.根据权利要求4所述含小肽的液体肥料，其特征在于采用枯草芽孢杆菌发酵的方法如下：按照0.75-2%的接种量将枯草芽孢杆菌接种至米曲霉发酵液中，在26-32℃、通气比为0.5-1.2:1、转速为100-300rpm、罐压为0.02-0.05MPa的条件下，培养24-36h，得到枯草芽孢杆菌发酵液。

6.根据权利要求5所述含小肽的液体肥料，其特征在于采用荧光假单胞杆菌发酵的方法如下：按照0.5-3%的接种量将荧光假单胞杆菌接种至所述枯草芽孢杆菌发酵液中，在28-32℃、通气比为0.5-1.2:1、转速为100-300rpm、罐压为0.02-0.05MPa的条件下培养15-36h。

7.根据权利要求6所述含小肽的液体肥料，其特征在于所述液体肥料中小分子肽含量为100-160g/L。

8.权利要求7所述液体含小肽的肥料，其特征在于采用四效薄膜蒸发器进行浓缩和灭活。

9.权利要求1所述含小肽的液体肥料在农作物种植中的应用。